trizol 使用说明书中文版

Trizol使用说明书

一、分离纯化的基本原理

研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA。RNA质量的高低常常影响cDNA库，RT-PCR和Northern Blot等分子生物学实验的成败。Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。

二、用户需自备的试剂和材料

无水乙醇、氯仿、Glycogen（可能需要）、 1.5ml Eppendorf管（RNase-free）、 Tips （RNase-free）

三、准备工作

RNase酶非常稳定，是导致RNA降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活，但限制因素去除后有迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能是RNase完全失活。它广泛存在于人的皮肤上，因此，在与RNA制备有关的分子生物学实验时，必须戴手套。RNase的又一污染源是取液器，根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。一般情况下采用用DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的内部和外部，基本达到要求。取RNase-free的物品时必须戴手套。

1、 料制品的处理

尽可能使用无菌，一次性塑料制品，已标明RNase-Free 的塑料制品，如没有开封使用过通常没有必要再次处理。对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。处理步骤如下：

1）在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使DEPC的终浓度为0.1%。注意：DEPC为剧毒物，活性很强，小心在通风柜中使用。

2）处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入DEPC水溶液，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。

3）在通风柜中室温处理过夜。

4）将DEPC水溶液小心倒到废液瓶中，用铝箔封住含已DEPC水处理过的塑料制品的烧杯，高温高压蒸气灭菌至少30分钟。

5）烘箱用合适的温度烘拷至干燥。置于干净处备用。

2、 璃玻和金属物品

250°C烘烤3小时以上。

四、从组织中提取总RNA

1)液氮研磨，组织块直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次，按50-100mg组织/ml Trizol加入Trizol，转入离心管进行第2步操作。

2) 匀浆：组织样品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol。另外，组织体积不能超过Trizol体积的10%，否则匀浆效果会不好，用电动匀浆器充分匀浆约需1-2分钟。

五、从细胞中提取总RNA

1) 培养贴壁细胞：不须消化，可直接用Trizol进行消化、裂解，Trizol体积按10cm2/ml比例加入。

2) 悬浮细胞可直接收集、裂解，每1ml Trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞，或107细菌细胞。

六、操作步骤

1、细胞或组织加Trizol后，室温放置5min，使其充分裂解。注：此时可放入-70℃长期保持。

2、12,000rpm 离心5min，弃沉淀。

3、按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿，振荡混匀后室温放置15min。注：禁用漩涡振荡器，以免基因组DNA断裂。

4、4℃ 12,000g离心15min。

5、吸取上层水相，至另一离心管中。注：千万不要吸取中间界面；若同时提取DNA和蛋白质，则保留下层酚相存于4℃冰箱,若只提RNA，则弃下层酚相。

6、按0.5ml异丙醇/ml Trizol 加入异丙醇混匀，室温放置5-10min。

7、4℃ 12,000g离心10min，弃上清，RNA沉于管底。

8、按1ml 75%乙醇/ml Trizol加入75%乙醇，温和振荡离心管，悬浮沉淀。

9、 4℃ 8,000g离心5min，尽量弃上清。

10、室温晾干或真空干燥5-10min。 注：RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。

11、可用50ul H2O，TE buffer或0.5%SDS溶解RNA样品，55-60℃,5-10min。注：H2O、TE或0.5%SDS 均须用DEPC处理并高压。

12、测O.D值定量RNA浓度。注：此方法提取RNA A260/A280值在1.6-1.8之间；产率估计：组织标本：（ug RNA/mg组织）1-10ug，培养细胞（ug RNA/106Cell）：5-15ug。注：组织或细胞量过少，可酌情减少Trizol用量；组织或细胞用量过多，会引起DNA对RNA的污染；高蛋白、脂肪或多糖类组织，肌肉组织或块状植物组织等，组织匀浆或液氮研磨后须4℃ 12,000g离心10min去掉不溶物，再进行下面操作，若顶层有脂肪物，则也须去掉；热天提RNA，带手套是必须的，手是RNase的主

要来源；组织块用液氮研磨，效果最好，若没有液氮或电动匀浆器，可用手动匀浆器代替，此时组织块不宜过大，且需先用眼科剪刀将组织碱碱剪碎，然后再充分研磨。

上海闪晶分子生物科技有限公司

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设备名称 使 用 说 明 书 襄阳国铁机电有限责任公司

设备名称 一、概述： 二、主要结构及工作原理： 1.主要结构 2.工作原理 三、主要性能参数： 四、操作指南：

五、设备保养： 示例如下： 电茶炉试验台 使 用 说 明

书 襄阳国铁机电有限责任公司 电茶炉试验台 一、概述： 电茶炉试验台主要用于CRH2/3（兼容CRH5型）动车组用的电热开水器的电流、电压、功率、电热开水器的产开水温度、产开水量、缺水保护、满水保护以及绝缘电阻、泄漏电流等安全性能性能检测和校检。 二、主要结构及工作原理： 1.主要结构 电茶炉试验台主要由机体、不锈钢试验水箱、管路系统、连接装置等组成。

2.工作原理 该设备用于CRH2/3（兼容CRH5型）动车组用的电热开水器的试验。通过不锈钢试验水箱、管路系统、连接装置模拟出动车组上的电热开水器的工作环境，使电热开水器能够安装合理、简单、方便，通过温度、液位等感器将电热开水器的数据传送到工控机中进行分析，试验台能够自动控制，试验参数自动测试、实时显示、自动保存。 三、主要性能参数： 1、输入电源电压：三相AC 380V±10%,50 Hz； 2、输入电源容量： 6 kW （AC）； 3、电压测量范围：AC:0～380 V;DC:0～600 V,精度0.5级； 4、电流测量范围：AC:0～20 A;DC:0～20 A,精度0.5级； 5、功率测量范围：0～6 kW 精度0.5级； 6、绝缘电阻测量范围：0～1000 MΩ精度5%； 7、温度测量范围：0℃～+150℃精度0.5%。 四、操作指南：

1. 操作前，请仔细检测各管路系统有无泄露、各管路接口有无松动现象；电气元件有无短路现象。如果一切正常，方可进行试验。 2.设备通电，打开试验界面，如下所示： 3.确认电茶炉与设备连接好后，点击“试验/停止”按钮，出现如下对话框： 点击“试验”按钮，设备开始试验。

TRIZOL说明书

trizol 中文说明书 trizol 试剂是一种从组织及细胞中提取总rna的专用试剂。这种试剂是一种酚和硫氰酸 胍的单相溶液，是将chomczynski 和sacchi发明的一步rna提取法的改进。在样品匀浆或 分析过程中，trizol 试剂可在分裂细胞及溶解胞膜的同时保持rna的完整。在匀浆后加入氯 仿，可将溶液分为水相和有机相。rna均在水相中。吸取水相加入异丙醇，得到rna沉淀。 去除水相后，样品中的dna及蛋白质可通过进一步连续的沉淀而得到。中间相加入乙醇可沉 淀dna而有机相加入异丙醇则能沉淀出蛋白质。dna的再纯化可能对标化样品的rna产量有 作用。 2．这一技术可以用于人，动物，植物或细菌株的微量组织（50—100mg）及细胞（5 ×106），也可以用于大量检材（≥1g）及细胞(﹥107).该方法简便易行,可用于同时检测大量 样品,全部过程1小时内可以完成.用trizol 试剂分离的rna 没有dna及蛋白质成分.这种 rna可用于northern印迹分析,斑点杂交,多聚(a)+检出及vitro转移, rna酶蛋白分析及分 子克隆.用于pcr反应时,当两个引物位于同一外显子时应用扩增特异dna酶i处理提取出的 rna. 3． trizol 试剂可用于分子量从大到小的各种rna的提取.例如,大鼠肝脏提取出的rna, 经琼脂糖凝胶电泳,eb染色后可显现出7kb和15kb的大分子量的rna谱带(包括mrna和 hnrna), 位于～5kb(28s)和～2kb (18s)的两条主要的核糖体rna谱带及大小在0.1kb-0.3kb 之间的低分子量rna(trna,5s).分离出的rna当溶于双蒸水中时a260/280为1.6-1.8之间. 每毫克组织所能提取的rna量约为:肝和脾,6-10μg;肾,3-4μg;骨骼肌和脑,1-5μg;胎 盘,1-4μg.从1×106培养细胞中提取的rna量约为:上皮细胞,8-15μg;成纤维细胞,5-7μg. 需要但未提供的试剂: 1. 氯仿 2. 异丙醇 3. 75%乙醇(depc处理水配制) 4. 无rna酶水或0.5%sds溶液(制备无rna酶水:将水倒进无rna酶的玻璃容器中,加入 depc至0.01%(v/v)放置过夜后高压灭菌). sds溶液必须用depc处理后高压灭菌的水配制. rna分离提取步骤: 1．匀浆 a. 组织每50-100mg组织加入1ml的trizol 试剂后用匀浆机或玻璃棒匀浆。样品的 体积不要超过匀浆使用的trizol 试剂体积的1/10。 b. 单层培养细胞在一个直径3.5cm的培养皿中加入1mltrizol 试剂来溶解细胞，用 移液器反复吸打细胞溶液。加入的trizol 试剂的量取决于培养皿的表面积（每10cm2加入 1ml）而不是取决于细胞的数目。如果trizol 试剂的量不足，提取的rna中会混有dna。 c. 悬液中培养细胞离心沉淀细胞，吸取细胞，反复吹打使溶解于trizol 试剂中。每 5～10×106个动物，植物或酵母细胞，每1×107个细菌细胞加入1ml trizol 试剂。应该避 免在加入trizol 试剂前洗细胞，因为会增加mrna的变性。破坏某些酵母或细菌细胞需要使 用匀浆机。 2．选择采用的步骤：对于含有大量蛋白质，脂肪，多糖或其他细胞外物质的样品如 肌肉，脂肪，植物的块茎等可能需要再加上一个步骤。匀浆后，2℃～8℃条件下12，000×g 离心10分钟去除不溶物质。沉淀中包含有细胞外膜，多糖，大分子量dna，rna在上清中。 来源于脂肪组织的样品，最上层是脂肪层应该弃去。在每一种情况下，将纯净后的匀浆溶液 放在一新管里，加入氯仿即可以有如后面所描述的分层。 3．有机相与无机相的分开将匀浆后的样品在15℃～30℃孵育5分钟使核酸蛋白质混 合物分裂彻底。每1mltrizol 试剂加入0.2ml氯仿。小心盖上离心管盖，用手剧烈振摇15

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立式收口机 使 用 说 明 书 镇江市恒源汽车零部件有限公司

非常感谢您选择使用镇江市恒源汽车零部件有限公司生产的立式收口机,请详细阅读本品的使用说明书，以便于您的安全使用。 目录 1.安全说明 (3) 2.设备用途和适用范围 (7) 3.设备参数 (7) 4.设备动力系统 (8) 5.设备操纵系统 (10) 6.设备电气系统 (14) 7.设备冷却系统 (27) 8.设备运输、安装及试车 (33) 9.设备维护与保养 (35) 10.设备的结构及调整 (37) 11.设备易损零件及加工图 (38) 12.设备功能简介 (38)

1.安全说明 1.1安全规则概要 操作者使用设备前必须认真阅读安全说明，安全人员要确告操作者设备的要求。 1）设备的操作、维护和修理人员必须经过专业培训，有能力预见风险、有安全意识并能预测风险的人才能操作设备。 2）操作和维护人员必须认真阅读和掌握操作说明。 3）设备停止操作后，主油缸由于液压惯性还有短暂动作时间，应注意在工件停止前身体部位不得进入加工区域和触摸工件。 4）各种安全防护罩不得随意拆卸或改装，维护和修理时，应切断主电源。 5）设备上的各种安全警示标志不得随意拆卸，并要经常保持其干净、清晰。 警告：设备通电后，千万不要用手触摸模具和运动部件 6）设备的操作、维修和调整必须由专业人员进行，其他人员不得随意起动设备。 7）应按工艺规程操作设备，应由专业维修人员修理设备。 8）调整和维修设备时所用的扳手和钳子等工具必须是标准工具。 9）设备出现异常现象时应立即停机，并由专业维修人员及时检查和维修。 10）在拆卸和装配设备时，应使用有足够承载能力的起吊装置。 11）严格遵守设备上的安全说明和安全警告，并且确保其完整、清晰。 12）操作设备前要进行安全检查，确定各行程及限位开关、撞块、急停按钮、光栅安全可靠。 13）维修或调整设备前一定要在开关关闭、电源切断、工件完全停止的状态下进行。 14）操作人员不要穿宽松的衣服、袖口必须扎紧，不要戴领带、珠宝（戒指、手表等），必须戴护目镜和穿劳保鞋。 15）操作设备时，不论男女，长发必须戴工作帽并将其包裹在内。 16）整机噪音不大于75dB。建议穿戴适当的劳保用品，例如，戴听力保护器以减少听力的损失。 17）设备周围工作区要保持干净、明亮整洁、光线适宜，附近不能放置杂物，以免给操作者带来不便。 18）设备运行、加工时，不许移动各处防护罩。 19）离开设备时，必须关闭设备主电源开关。 20）设备重新起动时，必须对设备进行重新复位。

invitrogen trizol试剂盒的说明书

从组织中提取总RNA 1)液氮研磨，组织块直接放入研体中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮， 再研磨，如此三次，按50-100mg组织/mlTrizol加入Trizol，转移入离心管进行第2步操作。 2) 匀浆：组织样品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol，另外，组织体积不能超过Trizol 体积 的10%，否则匀浆效果会不好，用电动匀浆器充分匀浆约需1-2分钟。 从细胞中提取总RNA 1) 培养贴壁细胞：不须消化，可直接用Trizol进行消化、裂解，Trizol体积按10cm2/ml 比例加入。 2) 悬浮细胞可直接收集、裂解，每1ml Trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞，或107细菌细胞。 2．细胞或组织加Trizol后，室温放置5min，使其充分裂解。注：此时可放入-70℃长期保持。 3．12000rpm 离心5min，弃沉淀。 4．按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿，振荡混匀15分钟，室温放置15min。注：禁用漩涡振荡器， 以免基因组DNA断裂。 5．4℃12000g离心15min。 6．吸取上层水相，至另一离心管中。 注：1）千万不要吸取中间界面。 2)若同时提取DNA和蛋白质，则保留下层酚相存于4℃冰箱,若只提RNA，则弃下层酚相。7．按0.5ml异丙醇/ml Trizol 加入异丙醇混匀，室温放置5-10min。 8．4℃ 12000g离心10min，弃上清，RNA沉于管底。 9．按1ml 75%乙醇/ml Trizol加入75%乙醇，温和振荡离心管，悬浮沉淀。 10．4℃ 8000g离心5min，尽量弃上清。 11．室温晾干或真空干燥5-10min。注：RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。 12．可用50ul H2O，TE buffer或0.5%SDS溶解RNA样品，55-60℃5-10min。 注：H2O、TE或0.5%SDS均须用DEPC处理并高压。 12、测O.D值定量DNA浓度。 注：1）此方法提取RNA A260/A280值在1.6-1.8之间。 2) 产率估计：组织标本：（ug RNA/mg组织）1-10ug，培养细胞（ug RNA/106 Cell）：5-15ug。注：1、组织或细胞量过少，可酌情减少Trizol用量。 2、组织或细胞用量过多，会引起DNA对RNA的污染。 3、高蛋白，脂肪或多糖类组织，肌肉组织或块状植物组织等，组织匀浆或液氮研磨 后须4℃ 1200离心10min去掉不溶物，再进行下面操作，若顶层有脂肪物，则 也须去掉。 4、热天提RNA，带手套是必须的，手是RNase的主要来源。 5、组织块用液氮研磨，效果最好，若没有液氮或电动匀浆器，可用手动匀浆器代替， 此时组织块不宜过大，且需先用眼科剪将组织绞碎，然后再充分研磨。

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镇江恒源汽车零部件有限公司立式收口机使用说明书 立式收口机 使 用 说 明 书 镇江市恒源汽车零部件有限公司

非常感谢您选择使用镇江市恒源汽车零部件有限公司生产的立式收口机,请详细阅读本品的使用说明书，以便于您的安全使用。 目录 1.安全说明 (3) 2.设备用途和适用范围 (7) 3.设备参数 (7) 4.设备动力系统 (8) 5.设备操纵系统 (12) 6.设备电气系统 (16) 7.设备冷却系统 (26) 8.设备运输、安装及试车 (27) 9.设备维护与保养 (29) 10.设备的结构及调整 (37) 11.设备易损零件及加工图 (38) 12.设备功能简介 (39)

1.安全说明 1.1安全规则概要 操作者使用设备前必须认真阅读安全说明，安全人员要确告操作者设备的要求。 1）设备的操作、维护和修理人员必须经过专业培训，有能力预见风险、有安全意识并能预测风险的人才能操作设备。 2）操作和维护人员必须认真阅读和掌握操作说明。 3）设备停止操作后，主油缸由于液压惯性还有短暂动作时间，应注意在工件停止前身体部位不得进入加工区域和触摸工件。 4）各种安全防护罩不得随意拆卸或改装，维护和修理时，应切断主电源。 5）设备上的各种安全警示标志不得随意拆卸，并要经常保持其干净、清晰。 警告：设备通电后，千万不要用手触摸模具和运动部件 6）设备的操作、维修和调整必须由专业人员进行，其他人员不得随意起动设备。 7）应按工艺规程操作设备，应由专业维修人员修理设备。 8）调整和维修设备时所用的扳手和钳子等工具必须是标准工具。 9）设备出现异常现象时应立即停机，并由专业维修人员及时检查和维修。 10）在拆卸和装配设备时，应使用有足够承载能力的起吊装置。 11）严格遵守设备上的安全说明和安全警告，并且确保其完整、清晰。 12）操作设备前要进行安全检查，确定各行程及限位开关、撞块、急停按钮、光栅安全可靠。 13）维修或调整设备前一定要在开关关闭、电源切断、工件完全停止的状态下进行。 14）操作人员不要穿宽松的衣服、袖口必须扎紧，不要戴领带、珠宝（戒指、手表等），必须戴护目镜和穿劳保鞋。 15）操作设备时，不论男女，长发必须戴工作帽并将其包裹在内。 16）整机噪音不大于75dB。建议穿戴适当的劳保用品，例如，戴听力保护器以减少听力的损失。 17）设备周围工作区要保持干净、明亮整洁、光线适宜，附近不能放置杂物，以免给操作者带来不便。 18）设备运行、加工时，不许移动各处防护罩。 19）离开设备时，必须关闭设备主电源开关。 20）设备重新起动时，必须对设备进行重新复位。 21）设备上，特别是设备的运动部件周围不能放置工件、工具等物件。 22）主油缸动作前一定要将工件（工装）固定牢靠，人员离开工作区域后才可起动设备。

Trizol法提取RNA实验步骤与原理(新手详细注释版)

Trizol法使用步骤 一、分离纯化的基本原理 研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA。RNA质量的高低常常影响cDNA库，RT-PCR和Northern Blot等分子生物学实验的成败。Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。 二、用户需自备的试剂和材料 无水乙醇、氯仿、Glycogen（可能需要）、 1.5ml Eppendorf管（RNase-free）、Tips（RNase-free） 三、准备工作 RNase酶非常稳定，是导致RNA降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活，但限制因素去除后有迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能是RNase完全失活。它广泛存在于人的皮肤上，因此，在与RNA制备有关的分子生物学实验时，必须戴手套。 RNase的又一污染源是取液器，根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。一般情况下采用用DEPC(焦炭酸二磷脂，一种RNase抑制剂)配制的70%乙醇擦洗取液器的内部和外部，基本达到要求。取RNase-free的物品时必须戴手套。 1、料制品的处理 尽可能使用无菌，一次性塑料制品，已标明RNase-Free 的塑料制品，如没有开封使用过通常没有必要再次处理。对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。处理步骤如下： 1）在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使DEPC的终浓度为0.1%。注意：DEPC为剧毒物，活性很强，小心在通风柜中使用。 2）处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入DEPC水溶液，使塑料制品

的所有部分都浸泡到溶液中。 3）在通风柜中室温处理过夜。 4）将DEPC水溶液小心倒到废液瓶中，用铝箔封住含已DEPC水处理过的塑料制品的烧杯，高温高压蒸气灭菌至少30分钟。 5）烘箱用合适的温度烘拷至干燥。置于干净处备用。 2、璃玻和金属物品 250°C烘烤3小时以上。 四、从组织中提取总RNA 1)液氮研磨：组织块直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次，按50-100mg组织/ml Trizol加入Trizol，转入离心管进行第2步操作。 （液氮既能使各种组织成分不易被破坏或降解,又能使组织变硬,脆性增加易于磨碎。终止细胞内外一切生物反应，防止RNA酶的降解反应） 2) 匀浆：组织样品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol。另外，组织体积不能超过Trizol体积的10%，否则匀浆效果会不好，用电动匀浆器充分匀浆约需1-2分钟。 五、从细胞中提取总RNA 1) 培养贴壁细胞：不须消化，可直接用Trizol进行消化、裂解，Trizol体积按10cm2/ml比例加入。 2) 悬浮细胞可直接收集、裂解，每1ml Trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞，或107细菌细胞。 六、操作步骤 1、细胞或组织加Trizol后，室温放置5min，使其充分裂解。注：此时可放入-70℃长期保持。

trizol-LS-试剂使用中文说明书

TRIzol LS 试剂(ambion)（中文说明书） 货号规格室温贮存 10296-010 100ml 10296-028 200ml 产品描述 TRIzol LS试剂适用于液体样品，如人、动植物、酵母、细菌或者病毒来源的液体样品，提取高质量的总RNA（DNA和蛋白质也可以）全过程只需1小时。TRIzol LS试剂里含有酚、异硫氰酸胍和其它成分，由于在摇匀样品过程中能很有效地抑制RNase活性，所以TRIzol LS试剂能维持RNA完整性。TRIzol LS试剂允许同时处理大量的样品。 TRIzol LS试剂能从一个样品里有序分离提取RNA、DNA和蛋白质。TRIzol LS试剂均质化样品后，加入氯仿，能看见分层现象，上层是透明的含RNA的水相，中间层，下层是红色的有机相（含有DNA和蛋白质）。水相RNA用异丙醇能沉淀分离；中间层或者下层中的DNA用乙醇沉淀分离；异丙醇沉淀能使蛋白质从酚-醇相的上清液中沉淀出来。沉淀出的RNA、DNA 和蛋白质洗脱杂质，重悬后用于下游。 分离的RNA可以用于RT-PCR, Northern Blot analysis, Dot Blot hybridization, poly(A)+ selection, in vitro translation, RNase protection assay, and molecular cloning 分离的DNA可以用于PCR, and Restriction Enzyme digestion, and Southern Blots. 分离的蛋白质可以用于Western Blots, recovery of some enzymatic activity, and some immunoprecipitation. 注意：TRIzol LS试剂适用于液体样品（如，血液和病毒制品）。TRIzol LS试剂与TRIzol试剂仅在它们成分的含量上不同，TRIzol LS试剂的浓度更高，因此相对于同个样品时，TRIzol LS试剂需要量更少。不要将未稀释的TRIzol LS试剂用于固体样品。处理固体样品时，TRIzol LS 试剂没有TRIzol试剂效果好，收率要低些。 警告 TRIzol LS试剂含有的成分具有毒、腐蚀性和刺激性，如果处理不慎会有危害健康。请在通风橱里操作，并穿好实验服、戴好手套和安全眼镜。避免直接接触TRIzol LS试剂，会导致皮肤、眼睛或者呼吸道等暴露部位的化学灼伤。如果万一接触了皮肤或者眼睛，请立即用大量水冲洗15min，必要时去医院护理。如果吸入了气体，立刻到通风地方呼吸新鲜空气，必要时去医院护理。 内容和贮存 TRIzol LS试剂有100ml和200ml两种规格的，室温运输和贮存。妥善保管，1年内性质都很稳定。 使用目的 仅用于研究，不能用于人或动物的诊断或治疗。 需要材料 分离RNA、DNA和蛋白质还需要下列材料，但是我们未提供 分离RNA时，需要：氯仿；异丙醇；75%乙醇（DEPC水处理过）；无RNase水或者0.5%SDS；能达到12,000*g的高速离心机；聚丙烯微量离心管；水浴槽（55-60℃）。 分离DNA时，需要：氯仿；100%乙醇；75%乙醇；0.1M柠檬酸钠（10%乙醇）；8mM NaOH；能达到12,000*g的高速离心机；聚丙烯微量离心管。 分离蛋白质时，需要：氯仿；异丙醇；100%乙醇；0.3M盐酸胍（95%乙醇）；1%SDS；能达到12,000*g的高速离心机；聚丙烯微量离心管。 样品准备 样品均质化

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. 立式收口机 使 用 说 明 书 镇江市恒源汽车零部件有限公司

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非常感谢您选择使用镇江市恒源汽车零部件有限公司生产的立式收口机,请详细阅读本品的使用说明书，以便于您的安全使用。 目录 1.安全说明 (3) 2.设备用途和适用范围 (7) 3.设备参数 (7) 4.设备动力系统 (8) 5.设备操纵系统 (12) 6.设备电气系统 (16) 7.设备冷却系统 (26) 8.设备运输、安装及试车 (27) 9.设备维护与保养 (29) 10.设备的结构及调整 (37) 11.设备易损零件及加工图 (38) 12.设备功能简介 (39)

1.安全说明 1.1安全规则概要 操作者使用设备前必须认真阅读安全说明，安全人员要确告操作者设备的要求。 1）设备的操作、维护和修理人员必须经过专业培训，有能力预见风险、有安全意识并能预测风险的人才能操作设备。 2）操作和维护人员必须认真阅读和掌握操作说明。 3）设备停止操作后，主油缸由于液压惯性还有短暂动作时间，应注意在工件停止前身体部位不得进入加工区域和触摸工件。 4）各种安全防护罩不得随意拆卸或改装，维护和修理时，应切断主电源。 5）设备上的各种安全警示标志不得随意拆卸，并要经常保持其干净、清晰。 警告：设备通电后，千万不要用手触摸模具和运动部件 6）设备的操作、维修和调整必须由专业人员进行，其他人员不得随意起动设备。 7）应按工艺规程操作设备，应由专业维修人员修理设备。 8）调整和维修设备时所用的扳手和钳子等工具必须是标准工具。 9）设备出现异常现象时应立即停机，并由专业维修人员及时检查和维修。 10）在拆卸和装配设备时，应使用有足够承载能力的起吊装置。 11）严格遵守设备上的安全说明和安全警告，并且确保其完整、清晰。 12）操作设备前要进行安全检查，确定各行程及限位开关、撞块、急停按钮、光栅安全可靠。 13）维修或调整设备前一定要在开关关闭、电源切断、工件完全停止的状态下进行。 14）操作人员不要穿宽松的衣服、袖口必须扎紧，不要戴领带、珠宝（戒指、手表等），必须戴护目镜和穿劳保鞋。 15）操作设备时，不论男女，长发必须戴工作帽并将其包裹在内。 16）整机噪音不大于75dB。建议穿戴适当的劳保用品，例如，戴听力保护器以减少听力的损失。 17）设备周围工作区要保持干净、明亮整洁、光线适宜，附近不能放置杂物，以免给操作者带来不便。 18）设备运行、加工时，不许移动各处防护罩。 19）离开设备时，必须关闭设备主电源开关。 20）设备重新起动时，必须对设备进行重新复位。 21）设备上，特别是设备的运动部件周围不能放置工件、工具等物件。 22）主油缸动作前一定要将工件（工装）固定牢靠，人员离开工作区域后才可起动设备。

(完整版)Trizol法提取RNA实验步骤.doc

Trizol 法使用步骤 一、分离纯化的基本原理 研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA。 RNA 质量的高低常常影响 cDNA 库， RT-PCR和 Northern Blot等分子生物学实验的成败。Trizol 是一种新型总RNA 抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。 二、用户需自备的试剂和材料 无水乙醇、氯仿、Glycogen（可能需要）、 1.5ml Eppendorf 管（ RNase-free）、 Tips（ RNase-free） 三、准备工作 RNase酶非常稳定，是导致 RNA 降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活， 但限制因素去除后有迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能是 RNase 完全失活。它广泛存在于人的皮肤上，因此，在与RNA 制备有关的分子生物学实验 时，必须戴手套。 RNase 的又一污染源是取液器，根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。用用 DEPC配制的 70%乙醇擦洗取液器的内部和外部，基本达到要求。取 时必须戴手套。 一般情况下采RNase-free 的物品 1、料制品的处理 尽可能使用无菌，一次性塑料制品，已标明 RNase-Free 的塑料制品，如没有开封使用过通常 没有必要再次处理。对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。处理步骤如下： 1）在玻璃烧杯中注入去离子水，加入 DEPC使 DEPC的终浓度为 0.1%。注意： DEPC为剧毒物，活性很强，小心在通风柜中使用。 2）处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入DEPC 水溶液，使塑料制品的所 有部分都浸泡到溶液中。 3）在通风柜中室温处理过夜。 4）将 DEPC水溶液小心倒到废液瓶中，用铝箔封住含已 DEPC水处理过的塑料制品的烧杯，高温高压蒸气灭菌至少 30 分钟。 5）烘箱用合适的温度烘拷至干燥。置于干净处备用。 2、璃玻和金属物品 250°C 烘烤 3 小时以上。 四、从组织中提取总RNA 1)液氮研磨：组织块直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液 氮，再研磨，如此三次，按 50-100mg 组织 /ml Trizol 加入 Trizol，转入离心管进行第 2 步操作。 2) 匀浆：组织样品按50-100mg/mlTrizol加入Trizol。另外，组织体积不能超过 10%，否则匀浆效果会不好，用电动匀浆器充分匀浆约需1-2 分钟。 Trizol 体积的 五、从细胞中提取总RNA 1) 培养贴壁细胞：不须消化，可直接用Trizol 进行消化、裂解，Trizol 体积按 10cm2/ml 比例

自制设备使用说明书

自组织网络通信实验平台的使用说明 昆明理工大学通信系

目录 目录 (2) 一．验收环境 (3) 1.硬件 (3) 2.软件 (3) 3.运行环境配置 (3) 二．用户界面 (4) 三．网卡配置模块 (4) 四．协议分析模块 (6) 五．拓扑展示模块 (13) 六．流量统计模块 (16) 七．协议实施模块 (18) 八．网络安全模块 (25) 九．服务编程模块 (33)

一．验收环境 1.硬件 硬件配置 数量： CPU：1G 内存：512M 硬盘：20G 其他：鼠标、键盘 2.软件 操作系统：Windows XP 其它软件：winpcap2.0以上、IE浏览器等3.运行环境配置 安装winpcap完成后即可运行此软件

二．用户界面 启动系统以后出现如图2.1所示界面： 图2.1 用户启动界面 用户界面采用控制面板风格，用户点击相应的按钮进入相应的功能模块。主界面共展示了八个功能模块：网卡配置、流量统计、协议分析、协议实施、拓扑展示、服务编程、网络安全和网络协议。（网络协议模块尚未开发，服务编程模块基本功能实现还有待完善） 三．网卡配置模块 声明：本实验平台中，网卡配置模块为最基础的模块，在进行所有的模块实验前必须进行网卡进行配置。 进入用户界面后，单击网卡配置图标，弹出如图3.1所示对话

框： 图3.1 网卡配置对话框 网卡配置步骤： 1.网络类型配置 网络类型分为有线网络和无线网络两种。用户根据主机的网络环境自行进行选择。 2.工作模式配置 工作模式分正常模式和混杂模式两种。 在以太网中，信息会发送到网络中所有的节点，有些节点会接收这些信息，同时有些节点会简单的丢弃这些信息。接收或丢弃信息由网卡来控制的。 在正常模式下，网卡只能捕获接收目的Mac地址为本机Mac的数据。 在混杂模式下，网卡能够接收到所有流经本机网卡的数据，而不管它是不是这些包指定的目的地址。 而对于无线网络，为防止相互干扰，只能工作在正常模式下。 3.网卡选择 对于一般主机，网卡列表中至少有两块网卡。一是普通以太网卡，二是拨

Trizol法提取RNA实验步骤及原理(新手详细注释版)

Trizoｌ法使用步骤 一、分离纯化得基本原理 研究基因得表达与调控时常常要从组织与细胞中分离与纯化ＲＮA。ＲNA质量得高低常常影响cＤNA库,ＲT-PCＲ与Ｎorthern Ｂloｔ等分子生物学实验得成败。Ｔrizol就是一种新型总ＲNＡ抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出得核酸酶。 二、用户需自备得试剂与材料 无水乙醇、氯仿、Ｇlycｏgen(可能需要)、 1、５ｍｌ Eppeｎｄｏrf管(ＲNase-frｅe)、 Tips(ＲNase－free) 三、准备工作 RNａse酶非常稳定,就是导致ＲNＡ降解最主要得物质。它在一些极端得条件可以暂时失活,但限制因素去除后有迅速复性。用常规得高温高压蒸气灭菌方法与蛋白抑制剂都不能就是ＲＮase完全失活。它广泛存在于人得皮肤上,因此,在与RＮA制备有关得分子生物学实验时,必须戴手套。 RNase得又一污染源就是取液器,根据取液器制造商得要求对取液器进行处理。一般情况下采用用ＤEPC（焦炭酸二磷脂,一种ＲＮａse抑制剂)配制得7０％乙醇擦洗取液器得内部与外部,基本达到要求。取ＲＮａｓｅ－free得物品时必须戴手套。 1、料制品得处理 尽可能使用无菌,一次性塑料制品，已标明RNasｅ-Fｒee 得塑料制品，如没有开封使用过通常没有必要再次处理。对于国产塑料制品,原则上都必须处理方可使用。处理步骤如下: 1)在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEＰＣ使DEＰC得终浓度为０、1%。注意:DEP Ｃ为剧毒物,活性很强，小心在通风柜中使用。 2)处理得塑料制品放入一个可以高温灭菌得容器中,注入ＤEPC水溶液,使塑料制品得所有部分都浸泡到溶液中。 3)在通风柜中室温处理过夜。 4)将DEPC水溶液小心倒到废液瓶中,用铝箔封住含已ＤEＰＣ水处理过得塑料制品得

产品设备使用说明书

远红外线理疗发热床垫使用说明书 重庆港沃生物科技有限公司

目录 一、产品功能概述 (1) 二、基本工作原理 (2) 三、产品结构 (3) 四、适用人群 (4) 五、使用方法 (4) 六、注意事项 (5)

产品功能概述: 经中外医学界研究证明，远红外线理疗发热玉石床垫在通过碳素纤维发热元件给玉石加热至少33 ℃以上时会出现3.6-16微米波长红外线。同时远红外线激发玉石里所含微量原子如钙，硒，铁，锌，镁等离子和结晶水等以水纹波的形式释放出来，与人体接触进入人体，直接侵入到人体皮肤的40毫米深处，有利于改善人体的血液循环，调节内分泌系统的平衡，增加内循环动力，促进新陈代谢，活化细胞，强化交感神经，对内循环不平衡引起的神经衰弱、睡眠不良等疾病有一定的辅助疗效。同时该产品对动脉硬化、肥胖、高血脂等有明显的抑制作用，尤其对风湿、肩周炎、关节痛、腰间盘突出、腰痛、手足麻木、肩痛、颈椎痛、脑血栓后遗症、痛经等有显著的辅助疗效，对其它疾病引志的并发症同样起到辅助疗效作用。

基本工作原理： 远红外线理疗发热玉石床垫是通过电能转化为热能的原理，通电后电能以98%的效率转化为热能，在10分钟内就可以达到所需温度。 科学研究结果证明，睡眠的质量会影响人类的健康和生活质量，睡眠障碍往往引起人体免疫力低下，精神烦躁，同时血液循环不流畅的情况下还容易引起神经衰弱，心脑血管疾病和心理疾病等，甚至造成瘁死。提倡好的睡眠，保护人体健康刻不容缓，人有1/3的时间来睡眠，质地优良的寝具就是颐养健康的良好场所，即可带来舒适的睡眠，又有强化身体机能的作用。 远红外线理疗发热玉石床垫是采用现代科技开发出的新一代高档寝具。产品以被赋予中华国玉盛名的辽宁天然岫玉为主要原料，辅以特制纤维等十多层健康材料精制成。产品利用天然玉石加热产生的温炙效应以及生物电、超长电磁波、远红外线、负离子的科学原理，并采用先进的温控和发热系统激活天然岫玉，从而将中国五千年的玉石养生文化和韩国温炙炕文化的精髓，逼真复制到现代都市人的寝居生活中来。远红外线理疗发热玉石床垫以严谨的质量管理，精益精的产品选材，精湛的工艺技术，严格遵循国际质量认证体系，按照国家Gb470610标准生产。在安全性、功能性、实用性等方面将产品提升了一个台阶。使人们在香甜的睡梦中得到健康的呵护，在工作、休闲时得到保健身体的各个局部，轻松享受生活乐趣的同时得以保健和理疗。

化学自制教具使用说明书

自制教具使用说明书 化学教研组

目录 一、细颈试管 (3) 二、分子运动演示实验………………………………………………５ 三、收缩式枕木 (6) 四、钟式氢气发生器…………………………………………………７ 五、钟式乙炔发生器…………………………………………………９ 六、蔗糖与浓硫酸反应封闭式实验装置 (11) 七、氯气的漂白性探究实验装置……………………………………１3 八、钠与水反应所得产物气体的检验装置…………………………１6 九、铜和浓硫酸反应装置改进 (18) 十、收缩式酒精灯 (20)

一 细颈试管 一、教具名称:细颈试管 二、制 作 人：王玉选 三、制作时间:2014年9月１6日 三、用 途:做分子之间有间隙的实验 四、优 点:制作简单、操作方便。实验现象直观明显。 五、制作方法： 用常见的试管(2５*200）放在酒精喷灯火焰上 均匀受热,待快熔化时,用两手握住两头(即试管 口,试管底）均匀用力拉,待中间变为如图1所示 即可。注意：中间段要均匀,要比试管口径小。口 颈与颈颈比为3:1(如图1）. 六、使用方法:先在试管里加适量水(加适量品红）使水呈红色,其量为下部容积的一半,再在上部加酒精到细颈口上端，塞上橡皮塞,反复颠倒数次,观察。

二 分子运动演示实验 一、名 称:分子运动演示实验 二、制 作 人:王玉选 三、制作时间：2０1４年9月21日 三、用 途:做分子运动实验 四、制作方法: 在铜丝上系上小棉花团，再把系上棉花 团的铜丝插入木方中即可(如图2)。 五、使用方法： 把装置放到实验桌上，并在棉花上滴上酚酞试液，移近浓氨水旁边的烧杯中，再在上面罩一个大烧杯,过一会观察 六、优 点：操作简单,现象直观，明显。

音响设备常用连接插头制作方法

音响设备常用连接插头制作方法 无论是专业音响系统还是民用音响系统，除了设备本身外还需要各种连接线材将设备进行连接才能够使用。通常，民用设备从简单的DVD机到一套组合音响的线材都是附带的，也就是不用另加购买或制作。但一套专业的扩声或VOD工程中由于安装环境不同，其使用的某些线材需要施工人员制作。一根完整的线材是由接插头和线组成的。下面对常用插头、线材及连接线的制作进行一下简单的介绍。 1 常用音视频设备的连接插头 在一个音视频工程中设备的输出、输入信号种类可分为音频信号和视频信号（本次只作简单介绍）；音频信号根据阻抗的不同大致可分为平衡信号和非平衡信号（音源设备如DVD 播放机 / 卡座/ CD播放机及的输出多为非平衡信号）。因此，连接插头也有平衡和非平衡之分，平衡插头为三芯结构，非平衡插头为二芯结构。音频插头中还有一种功放与音箱连接用的专用插头，这种插头常见的为四芯结构（也有二芯、八芯）又因为是瑞士NEUTRIK（纽垂克）公司发明，因此又称“NEUTRIK（纽垂克）插头”或“四芯（二芯、八芯）音箱插头”。 1.1、常用的平衡信号插头： A、卡侬插头（XLR）：卡侬头分为卡侬公头（XLR Male）和卡侬母头（XLR Female）。卡侬头公、母的辨别很简单，带“针”的为“公头”，带“孔”的为“母头”。很多音响设备的输入、输出端口为卡侬接口，同样带“针”的接口为“公座”，带“孔”的接口为“母座”。 B、大三芯插头或6.3mm三芯插头（PhoneJack Balance） 1.2、常用的非平衡信号插头： A、大二芯插头（PhoneJack Unbalance ）。

B、莲花插头（RCA） C、小三芯插头或3.5mm三芯插头 小三芯插头外观与大三芯插头类似只是体积要比大三芯小。小三芯插头为三芯，前面说过三芯为平衡信号插头，但在通常的音响工程中小三芯插头多用于电脑及便携式音源（便携CD / MP3等）的音频信号输出用，因此将小三芯插头归入非平衡信号插头之列。

Trizol使用说明

TRIzol（Invitrogen）试剂的性能描述及注意事项 警告： TRIzol试剂与皮肤接触及吞咽有毒。可导致烧伤。与皮肤接触后，应立即用洗涤剂和大量清水冲洗。如感到身体不适，应就医（如需要，请出示本产品标签）。本产品含有苯酚和其他成分。已经证明TRIzol在室温下可稳定保存12个月。但我们建议在储存于2-8°C，以保证最佳性能。 性能描述： TRIzol试剂（美国专利号，5346994）是即用型细胞或组织总RNA提取试剂。该试剂是利用苯酚和异硫氰酸胍一步完成提取RNA的方法，是对Chomczynski和Sacchi开发的单步RNA提取法的改善。在匀质化或裂解样品中，TRIzol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞并溶解细胞成分。加入氯仿离心后，溶液分离成水相和有机相。仅RNA存在于水相中。将水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后，样品中DNA和蛋白质可通过相继沉淀回收。用乙醇沉淀可从中间相得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。 此技术既可良好的应用于少量组织（50-100mg）和细胞（5×106），也可用于大量的组织（≥1g）和细胞（>107）的处理，组织和细胞不限于人、动物、植物或细菌。TRIzol试剂使用简单方便，可同时处理大量样本。整个过程可在一小时内完成。用TRIZOL提取总RNA可避免蛋白质和DNA污染。提取的RNA可用于Northern blot分析、斑点杂交、poly（A）+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。 TRIzol试剂方便提取不同种类、不同分子大小的RNA。例如，从大鼠肝中提取RNA，经琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色，高分子量RNA离散带长度可高达7kb和15kb，(组成mRNA’s和hnRNA’s)，两个主要的核糖体RN A 带在~5kB（28S）和~2Kb（18S）。低分子量RNA介于0.1和0.3kB

Trizol法提取RNA实验步骤

T r i z o l法提取R N A实验 步骤 Prepared on 22 November 2020

Trizol法使用步骤 一、分离纯化的基本原理 研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA。RNA质量的高低常常影响cDNA库，RT-PCR和NorthernBlot等分子生物学实验的成败。Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。 二、用户需自备的试剂和材料 无水乙醇、氯仿、Glycogen（可能需要）、管（RNase-free）、Tips（RNase-free） 三、准备工作 RNase酶非常稳定，是导致RNA降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活，但限制因素去除后有迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能是RNase完全失活。它广泛存在于人的皮肤上，因此，在与RNA制备有关的分子生物学实验时，必须戴手套。 RNase的又一污染源是取液器，根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。一般情况下采用用DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的内部和外部，基本达到要求。取RNase-free的物品时必须戴手套。 1、料制品的处理 尽可能使用无菌，一次性塑料制品，已标明RNase-Free的塑料制品，如没有开封使用过通常没有必要再次处理。对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。处理步骤如下： 1）在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使DEPC的终浓度为%。注意：DEPC为剧毒物，活性很强，小心在通风柜中使用。 2）处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入DEPC水溶液，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。 3）在通风柜中室温处理过夜。 4）将DEPC水溶液小心倒到废液瓶中，用铝箔封住含已DEPC水处理过的塑料制品的烧杯，高温高压蒸气灭菌至少30分钟。 5）烘箱用合适的温度烘拷至干燥。置于干净处备用。

trizol提取RNA说明书

Trizol 使用说明书 一、分离纯化的基本原理 研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化 RNA。RNA 质量的高低常常影响cDNA 库，RT-PCR 和 Northern Blot 等分子生物学实验的成败。Trizol 是一种新型总 RNA 抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。 二、用户需自备的试剂和材料 无水乙醇、氯仿、Glycogen（可能需要）、 1.5ml Eppendorf 管（RNase-free）、 Tips（RNase-free） 三、准备工作 RNase 酶非常稳定，是导致 RNA 降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活，但限制因素去除后有迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能是 RNase 完全失活。它广泛存在于人的皮肤上，因此，在与 RNA 制备有关的分子生物学实验时，必须戴手套。 RNase 的又一污染源是取液器，根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。一般情况下采用用DEPC 配制的 70%乙醇擦洗取液器的内部和外部，基本达到要求。取 RNase-free 的物品时必须戴手套。 1、料制品的处理 尽可能使用无菌，一次性塑料制品，已标明 RNase-Free 的塑料制品，如没有开封使用过通常没有必要再次处理。对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。处理步骤如下： 1）在玻璃烧杯中注入去离子水，加入 DEPC 使 DEPC 的终浓度为 0.1%。注意：DEPC 为剧毒物，活性很强，小心在通风柜中使用。

2）处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入 DEPC 水溶液，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。 3）在通风柜中室温处理过夜。 4）将 DEPC 水溶液小心倒到废液瓶中，用铝箔封住含已 DEPC 水处理过的塑料制品的烧杯，高温高压蒸气灭菌至少 30 分钟。 5）烘箱用合适的温度烘拷至干燥。置于干净处备用。 2、璃玻和金属物品250°C 烘烤 3 小时以上。 四、从组织中提取总 RNA 1)液氮研磨，组织块直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次，按 50-100mg 组织/ml Trizol 加入 Trizol，转入离心管进行第 2 步操作。 2) 匀浆：组织样品按 50-100mg/mlTrizol 加入 Trizol。另外，组织体积不能超过 Trizol 体积的 10%，否则匀浆效果会不好，用电动匀浆器充分匀浆约需 1-2 分钟。 五、从细胞中提取总 RNA 1) 培养贴壁细胞：不须消化，可直接用Trizol进行消化、裂解，Trizol体积按 10cm2/ml比例加入。 2) 悬浮细胞可直接收集、裂解，每 1ml Trizol可裂解 5×106动物、植物或酵母细胞，或 107细菌细胞。 六、操作步骤 1、细胞或组织加 Trizol 后，室温放置 5min，使其充分裂解。注：此时可放入-70℃长期保持。 2、12,000rpm 离心 5min，弃沉淀。 3、按 200ul 氯仿/ml Trizol 加入氯仿，振荡混匀后室温放置 15min。注：禁用漩涡振荡器，以免基因组 DNA 断裂。 4、4℃ 12,000g 离心 15min。 5、吸取上层水相，至另一离心管中。注：千万不要吸取中间界面；若同时提取