紫叶李组织培养及快繁体系的建立

紫叶李组织培养及快繁体系的建立

孙在红;夏阳;梁慧敏;刘荣堂

【摘要】试验以紫叶李春季萌生苗嫩枝为外植体,在腋芽诱导的基础上,建立"以芽尖诱导丛生芽"的组培快繁体系.腋芽诱导培养基为 MS+6-BA 0.5 mg/L+ NAA

0.1 mg/L与 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;丛生芽增殖培养基为MS+BA

1.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L;壮苗培养基为 MS +6-BA 0.4 mg/L +IBA 0.1 mg/L

+GA30.2 mg/L.最佳生根培养基为 1/2 MS+IBA 1.0 mg/L+蔗糖20 g/L.

【期刊名称】《草原与草坪》

【年(卷),期】2005(000)001

【总页数】4页(P58-61)

【关键词】紫叶李;组织培养;丛生芽增殖;植物激素

【作者】孙在红;夏阳;梁慧敏;刘荣堂

【作者单位】甘肃农业大学,草业学院,甘肃,兰州,730070;山东省林业科学研究院,山东,兰州,250014;山东省林业科学研究院,山东,兰州,250014;甘肃农业大学,草业学院,甘肃,兰州,730070

【正文语种】中文

【中图分类】农业科学

58 Grasslandand Turf (Bimonthly) 2005 No.1 (Sum No.108) 紫叶李组织培养及快繁体系的建立孙在红 1 ，夏阳 2 ，梁慧敏 2 ，刘荣堂 1(1.甘肃农业大学草业学院，甘肃兰州｜ 730070; 2.山东省林业科学研究院，山东兰州 250014) 摘要：

植物组织培养的基本步骤

植物组织培养的基本步骤 成熟细胞离体——（脱分化）——分生细胞——（分裂）——愈伤组织——（再分化）——形态建成————完整植株。 培养基的主要成分 【水分】 【无机盐】1.大量元素：N，P，K，Ca，Mg，S（由相关的无机盐提供） 2.微量元素：Fe，B，Cu，Mn，Mn，Zn，Co 【有机营养成分】1.糖类 2.维生素 3.氨基酸 4.肌醇 5.天然有机物【植物生长调节剂】1.生长素 2.细胞分裂素 3.其他生长调节剂 【凝固剂】琼脂 【其他物质】1.活性炭 2.抗生素 3.抗氧化物质 4.硝酸银 培养基和组织培养用具的灭菌方式 【培养基，无菌水】高压蒸汽灭菌，0.105MPa灭菌15~30分钟 【移栽基质】曝晒，甲醛熏蒸或高压蒸汽灭菌0.14MMPa灭菌1~2h 【接种室，缓冲室】紫外线灯照射30min，或气雾消毒剂 【超净工作台】紫外线灯30min，之后打开风机过滤除菌 【外植体】不同的化学消毒剂浸泡消毒 【接种工具】70%乙醇浸泡或擦拭，之后用火焰灼烧灭菌 【培养室】3%来苏尔喷雾，或甲醛，气雾消毒熏蒸 【皮肤】先用肥皂洗手，接种前用70%乙醇擦拭 【瓶口，管口】70%乙醇擦拭，用火焰封口

【培养瓶表面】70%乙醇擦拭 【台面，桌面】70%乙醇擦拭或喷雾消毒 植物外植体的灭菌方式 【茎尖，茎段，叶片】1. 用70%乙醇浸泡30秒，再用无菌水冲洗1次。 2.用2%次氯酸钠浸泡15min或0.1%升汞浸泡5~10min。 3.若材料有绒毛，最好在消毒液中加入几滴吐温。 4.消毒时要不断震荡，使植物材料与消毒剂充分接触。 5.最后用无菌水冲洗3~5次。 【果实】1.用乙醇迅速漂洗一下，再用无菌水冲。 2.用2%次氯酸钠浸泡10min，用无菌水冲洗2~3次。 【种子】用10%次氯酸钠浸泡20~30min，或0.1%升汞消毒5~10min，然后再用无菌水冲洗3~5次。 【花蕾】1.用70%乙醇浸泡10~15秒，无菌水冲洗一次。 2.在漂白粉中浸泡10min，用无菌水冲洗2~3次。 【根及地下部器官】用0.1%升汞浸泡5~10min 或用次氯酸钠浸泡10~15min，再用无菌水冲洗3~5次。 【消毒后的外植体应及时按照无菌操作技术接种在适宜的培养基上】

植物组织培养技术

植物组织培养技术 植物组织培养是指将植物体的一部分接种在合成培养基上，使其按照预定目标生 长发育成新植株。近年来，花卉组织培养及快繁脱毒技术越来越多地应用于花卉种苗 繁殖生产中。 一、组织培养在花卉产业中的应用 1.快速、大量繁殖优良品种组织培养技术已成为种苗生产的主要技术之一。经组织 培养，可增加繁殖系数，加快繁殖速度，可生产出种性纯、品质好、产花量高的生产 性用苗。在花卉育种过程中，不断的杂交、选种极大地扩展了花卉的花形与颜色，使 得花卉在各方面都越来越接近人们的需求。但在同时，也造成了花卉基因类型的高度 异质化———子代不易有均一表现。而组培苗是在母株器官、组织或细胞的基础上发展起来的，可以保持母株的全部特性（花形、花色、株形、开花习性、抗逆性等）， 因而可以根据需要来选择集多种优良性状于一体的植株加以分生，从而得到大量与母 株一模一样的植株。 2.培育脱毒苗木采用组织培养技术，利用植株的分生组织不易感染病毒的原理，可 以对花卉植株的分生组织进行组织培养来繁殖苗木，防止亲代植株的病害传递给子代，从而达到脱毒的目的。 病毒病对长期应用营养繁殖（分株、扦插等）的观赏植物及其生产的危害相当严重。由于观赏植物多采用营养繁殖，如嫁接、分株、压条等方法繁殖时，病毒（及类 病毒）则通过营养体及刀具、土壤传递给后代，大大加速了病毒病的传播与积累，导 致病毒病的危害越来越严重。据统计，观赏植物的病毒已多达100多种，并且逐年有 新增病毒的报道。观赏植物因病毒病大大影响其观赏价值，表现在康乃馨、菊花、百合、风信子等的鳞茎、球茎与宿根类花卉及兰科植物等严重退化，花少且小，花朵畸形、变色，大大影响观赏价值，严重者甚至导致某些品种的灭绝，严重制约观赏植物 生产的发展，这也是我国切花品种跨不出国门的原因之一。组培快繁技术已应用到蝴蝶兰的栽培中非洲菊也可以通过组培快繁技术进行繁殖 植物组织培养脱毒的原理主要是利用茎尖分生组织不带毒或少带毒。感病植株体内的病毒分布不均匀，其数量随植株部位和年龄而异，越靠近茎尖顶端的区域，病毒 的浓度也越低。分生区域无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，赶不上细胞不断分 裂和活跃的生长速度，因此生长点含有病毒的数量极少，几乎检测不出病毒。因此， 茎尖培养时，切取茎尖的大小对脱毒效果有很大影响，茎尖越小效果越佳，但太小时 不易成活，过大则不能保证完全除去病毒。不同种类的植物和不同种类的病毒在茎尖

金盏菊快繁体系的初步探讨

长江大学 毕业论文开题报告 题目名称金盏菊快繁体系的初步研究院（系）园艺园林学院 专业班级园林职30801班 学生姓名明涛 指导教师周明芹 开题报告日期2011-11-5

金盏菊快繁体系的初步研究 学生：明涛，园艺园林学院 指导教师：周明芹，园艺园林学院 1 题目来源 来源于教师指定的科研项目。 2 研究的目的与意义 金盏菊又名金盏花，为菊科金盏菊属植物，是早春园林和城市中最常见的草本花卉，其广泛用于家庭小花园和盆栽观赏，在城市街旁的栽植槽和零星墙角花坛中，金盏菊是早春主角之一[1]。它是地中海地区的本土植物，在欧洲和北美地区作为装饰和医药植物而广泛种植[2]。从12世纪起人们就已经将它作为外敷药来治愈伤口[3]，除了具有观赏价值和药用价值外，还可以用来提取香精，在化汝品制造行业有着不可低估的作用，因此大力推广种植金盏菊，可带来可观的经济效益[4]。随着市场需求的日益增大，传统的繁殖方法和品种选育技术已经不能满足市场日益发展的需要，通过使用现代生物技术手段来进行金盏菊的快速繁殖将是势在必行[5]。 植物快繁技术是利用植物组织培养技术进行的一种营养繁殖方法，是指在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体培养在人工控制的培养基上，给予适当的培养条件，使其快速生长形成完整的植株[6]。植物快繁技术是依据植物细胞“全能性”及植物的“再生能力”发展起来的一项新技术[7]。它的研究始于二十世纪初，尽管历史不长，但八十年来的发展很快，至今在农业、园林方面都已成为占有重要地位的技术[8]。是农业高新技术中最重要、最活跃的领域之一，它不仅是农业持续发展的基础，而且是生物技术中应用最广、最具现实意义的领域，被誉为农业发展史上的第4次绿色革命[9]。传统的无性繁殖方法常因气候、季节和土地等环境限制，费工费时，繁殖系数低，生长周期长，对于一些难以生根、短时无法大量繁殖的名贵品种和母株来源不足的品种，更不能及时满足生产和市场的需要[10]。利用植物快繁技术不仅确保优良性状不丢失，也能解决用分株的无性繁殖方法周期长和市场供应与需求的矛盾[11]。目前，国对金盏菊组织培养的研究并不多，Anna Grzelak和Wirginia Janiszowska利用金盏

最新大水榕快繁体系的构建

大水榕快繁体系的构 建

大水榕快繁体系的构建 二〇一一年六月 目录

前言 (4) 1、材料与方法 (5) 1.1材料、试剂与仪器 (5) 1.1.1材料 (5) 1.1.2试剂 (5) 1.1.3仪器 (6) 1.2实验步骤 (6) 1.2.1器皿的洗涤 (6) 1.2.2培养基配制与灭菌 (6) 1.2.3外植体的采取 (7) 1.2.4外植体的消毒 (7) 1.2.5外植体的接种 (7) 1.2.6不定芽培养、继代培养 (7) 1.2.7观察并记录实验结果 (7) 2、结果与分析 (8) 2.1消毒时间对大水榕外植体的影响 (8) 2.2激素配比对大水榕愈伤组织的诱导作用 (9) 2.3激素配比对大水榕愈伤组织的再分化作用 (10) 2.4激素配比对大水榕不定芽的诱导作用 (10) 2.5激素配比对大水榕不定芽继代培养的影响 (11) 2.6激素配比对大水榕不定芽生根培养的影响 (12) 2.7大水榕试管苗出瓶标准的建立 (13) 3、结论 (13) 4、讨论 (14) 参考文献： (14) 附录1 MS培养基母液配制表 (15) 附录2 大水榕试管苗照片 (16)

大水榕快繁体系的构建 摘要：大水榕是一种中高档观赏水草，其作为中后景水草效果颇佳，但繁殖速度极慢，且不易获得。本实验以大水榕不同部位（腋芽、幼叶和嫩茎）作为外植体，通过组织培养技术构建大水榕的快繁体系。结果表明：⑴***作为外植体效果较好，消毒***min为宜；⑵适宜大水榕不定芽诱导和继代培养的激素配比分别为*** mg/L +***mg/L和***mg/L +*** mg/L；⑶大水榕在培养过程中可自然生根；⑷适合大水榕不定芽增殖和继代培养的蔗糖浓度为 ***g/L；⑸大水榕试管苗出瓶标准为：株重***g以上，株高***cm 以上，根数达***根或者更多，平均根长在***cm以上。 关键词：大水榕,快繁体系, 消毒时间, 激素, 蔗糖浓度, 出瓶标准 Abstract:The Anubias barteri var is a kind of high-grade watch as the grasses, especially as the foreground aquatic breeding, but this plant reproduces extremely slowly and is not easy to obtain. The experiment was to establish rapid propagation system of Anubias barteri var through different explants ,such as axillary, tender leaves and stem.The results indicated that: (1) the *** as explant was better, sterilizing time was13min; (2) The suitable medium to induct bud was ***mg/L +*** mg/L , the subculture medium was***mg/L + *** mg/L; (3)The tissue culture seedling can root naturely during cultivation; (4) The appropriate sucrose concentration to inducting bud and subculture was ***g/L; (5)the standards of the seedling for out of bottle were the weight over *** g, the plant height over *** cm ,the root number more than***, and the average root length over*** cm.

第一节 植物组培快繁工厂的设计

第一节植物组培快繁工厂的设计 第一节植物组培快繁工厂的设计 一、组培苗生产规模的确定 生产规模的确定首先应根据市场需求、生长的植物种类和经济实力来确定，例如，木本植物比草本植物的培养周期长，设计时必须比草本植物多增30%的空间、设备。植物种苗无糖微繁殖工厂化生产程序包括①入选品种外植体的筛选及获取; ②外植体灭菌诱导培养; ③快速 繁殖; ④生根培养; ⑤出瓶过渡炼苗; ⑥包装进入市场等工艺。一般一个熟练的接种工人根据繁殖品种的不同，年生产量可达15―20万苗。即规划一个年生产量达500万株的组培室，需设25―30个无菌操作位置。当无菌操作位置数量确定后，即可计算出接种室的需求面积。按日生产组培苗的数量及培养周期计算需要的培养架数量，以此为基础很容易就可计算出培养室的需求面积，一般为1台无菌工作台或者说一个无菌操作位置，需配备净培养面积（放置培养物的面积）7-10平方米，无菌操作室与培养室的面积比例为1：2，围绕组培工厂建设，其它必备的配套设施设备及操作用具购置的数量，应以每个无菌工作台的需求量计算，解剖刀、镊子、刀片等常用工具还要有充足的备用量。室外应有相应的温室配套，生产品种栽培展示区等，其面积的大小应根据不同的植物种类来确定。因此组培工厂的建设，需要认真规划、仔细计算、合理投资，使之既有系统性又适用，才能充分发挥最大的生产潜力。在市场竞争中，尽量降低生产成本，提高产品质量和确保品种的可靠性。 二、组培种苗工厂的设计 植物组培育苗工厂应选址在安静、清洁、可避开各种环境污染源的地方，以减少污染，降低生产成本确保工作的顺利进行。根据已确定的生产规模，设计组培生产车间时，要全面了解组培工作中所需的最基本的条件，以便因地制宜地利用现有房屋改建或新建组培工厂，尽量做到合理布局。通常按工作程序先后，安排成一条连续的生产线，避免环节错位，增加日后工作的负担或引起混乱。组织培养的生产线主要包括培养器皿清洗；培养基的配制、分装、包扎和高压灭菌；无菌操作材料的表面灭菌和接种；进入培养室培养；试管苗出瓶、移栽等。各个房间的面积要合理安排，做到大小适中，工作方便，减少污染，节省能源，使用安全。图5.1所示的是一种组培生产车间设计的平面布置图： 图5.1组培生产车间的设计

植物组织培养课程论文

植物组织培养技术论文—月季组织培养技术 系别：生命科学学院 专业：生物技术及应用 姓名：曹胜华 学号：200930771015

[摘要]月季为蔷薇科蔷薇属木本植物, 其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小;其花型大，美丽，幽雅，高贵。月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖，但是一些名贵品种扦插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度慢，因而造成优良品种的月季苗供不应求。 [关键词] 月季组培 随着生物技术的迅猛发展，植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用，为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。以月季为试材进行组培试验,综述了月季组织培养、快繁的研究技术及进展，并对月季组培的最优条件进行了总结。本研究探索出的月季组培快速繁殖技术，在试管苗单芽诱导丛生苗、利用代用品培养降低组培成本、试管苗管外扦插生根、试管苗微型化长途运输等方面，较前人有所改进。 一.月季组织培养的研究进展 月季是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一。别名长春花、月月红、斗雪红、瘦客等，蔷薇科蔷薇属植物，其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小。其花型大，美丽，幽雅，高贵。在鲜花应用中，月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一[1]。月季的花色可编制成完美的连续色谱。月季是重要的花卉，世界的销售额多年来稳居各类花)卉的第一或第二。月季的一大优点是分布极广，适应性良好，栽培容易。月季是四季常青花卉，花期长，花色多，芳香馥郁，由于其特殊的情感内涵和商品价值[2]，被广泛应用于园林、庭院装饰，并可制成月季盆景，作切花、花篮、花束等。此外，月季花可提取香料，根、叶、花均可人药，具有活血消肿、消炎解毒等功效。当前，月季育种是花卉育种中最活跃的领域之一。月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖，但是一些名贵品种扦插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度慢，因而造成优良品种的月季苗供不应求[3]。随着生物技术的迅猛发展，植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用，为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。同时，月季组培和遗传转化系统的建立也是体细胞克隆变异育种和基因工程育种的重要前期工作[4]。 月季原产我国，早在汉代就有历史记载。2 0 0年前，月季植入西方和各国的蔷薇结缘，繁育出成千上万新月季品种，现代月季( 分为茶香月季 HT、聚花月季 F、壮花月季 Gr|、攀缘月季 CI、微型月季 Mi n、以及中国月季 Ch等 9大系。 ) 也随之推广到除热带和寒带外的世界各地。目前世界各地广为栽培的月季，是以中国月季为主要亲本，经以长期杂交育种而选育成功的。月季在观赏植物中的地位是很高的，全世界各国人民都普遍喜爱月季，月季的销售额多年来稳居各类花木的前茅。月季的用途很广( 如用藤本月季布置长廊、拱门；树状月季装饰主干道等)。 国外月季花卉工厂化育苗开展较早，在某些国家和地区已成为获得巨额外汇的支柱产业。我们国家的组织培养技术与国外相比差距不大，但是产业化起步较晚。在加快科学技术转化为生产力的今天，植物组培技术广泛应用于月季花卉的繁殖育种．必将取得巨大的经济效益、社会效益和生态效益。月季生长繁殖速度较慢，应用组织培养技术可大大缩短它的增殖周期，快速繁殖优良品种。在短期内繁殖出数以万计的苗木，这些苗木的遗传特性和表型特性与母株完全相同，完全保持了母株的优良特性。月季花组

大水榕快繁体系的构建

大水榕快繁体系的构建 二〇一一年六月

目录 前言 (4) 1、材料与方法 (5) 1.1材料、试剂与仪器 (5) 1.1.1材料 (5) 1.1.2试剂 (5) 1.1.3仪器 (5) 1.2实验步骤 (6) 1.2.1器皿的洗涤 (6) 1.2.2培养基配制与灭菌 (6) 1.2.3外植体的采取 (6) 1.2.4外植体的消毒 (7) 1.2.5外植体的接种 (7) 1.2.6不定芽培养、继代培养 (7) 1.2.7观察并记录实验结果 (7) 2、结果与分析 (8) 2.1消毒时间对大水榕外植体的影响 (8) 2.2激素配比对大水榕愈伤组织的诱导作用 (9) 2.3激素配比对大水榕愈伤组织的再分化作用 (10) 2.4激素配比对大水榕不定芽的诱导作用 (10) 2.5激素配比对大水榕不定芽继代培养的影响 (11) 2.6激素配比对大水榕不定芽生根培养的影响 (12) 2.7大水榕试管苗出瓶标准的建立 (13) 3、结论 (13) 4、讨论 (14) 参考文献： (14) 附录1 MS培养基母液配制表 (15) 附录2 大水榕试管苗照片 (16)

大水榕快繁体系的构建 摘要：大水榕是一种中高档观赏水草，其作为中后景水草效果颇佳，但繁殖速度极慢，且不易获得。本实验以大水榕不同部位（腋芽、幼叶和嫩茎）作为外植体，通过组织培养技术构建大水榕的快繁体系。结果表明：⑴***作为外植体效果较好，消毒***min为宜；⑵适宜大水榕不定芽诱导和继代培养的激素配比分别为***mg/L +***mg/L和***mg/L +***mg/L；⑶大水榕在培养过程中可自然生根； ⑷适合大水榕不定芽增殖和继代培养的蔗糖浓度为***g/L；⑸大水榕试管苗出瓶标准为：株重***g以上，株高***cm以上，根数达***根或者更多，平均根长在***cm以上。 关键词：大水榕,快繁体系, 消毒时间, 激素, 蔗糖浓度, 出瓶标准Abstract:The Anubias barteri var is a kind of high-grade watch as the grasses, especially as the foreground aquatic breeding, but this plant reproduces extremely slowly and is not easy to obtain. The experiment was to establish rapid propagation system of Anubias barteri var through different explants ,such as axillary, tender leaves and stem.The results indicated that: (1) the ***as explant was better, sterilizing time was13min; (2) The suitable medium to induct bud was ***mg/L +*** mg/L , the subculture medium was***mg/L + *** mg/L; (3)The tissue culture seedling can root naturely during cultivation; (4) The appropriate sucrose concentration to inducting bud and subculture was ***g/L; (5)the standards of the seedling for out of bottle were the weight over *** g, the plant height over ***cm ,the root number more than***, and the average root length over*** cm. Key words: Anubias barteri var, Rapid propagation system, Sterilizing time, Plant hormone, Sucrose concentration, the standard of seedling 前言

国内外植物组织培养技术的差距

国内外植物组织培养技术的差距 姓名：*** 学号：********* 指导教师：*** 专业班级：生物工程2009级1班 完成日期：2012-06-05

摘要 植物组织培养技术是农业生物技术中最早实现产业化并取得显著经济效益和社会效益的领域，在理论研究和生产实践中具有广泛的应用价值。通过对国内外植物组培的发展概况以及技术差距的分析，指出了我国植物组织培养技术的发展现状、目前存在的主要问题和应采取的措施，并对植物组织培养技术的发展作了展望。 关键词：组织培养概况差距展望 Abstract The plant tissue culture technology is agricultural biotechnology as the first realized industrialization and get a remarkable economic and social benefits of the field, in the theoretical research and production practice has wide application value. Through the domestic and international plant tissue and the development situation of the technology gap analysis, and pointed out the plant tissue culture technology's development present situation, the existing problems and the measures should be taken, and the development of plant tissue culture technology are discussed. Key words：Tissue culture situation gap looking

植物组织培养技术

楚雄师范学院化学与生命科学系 生物技术专业《植物组织培养技术》课程教学大纲 一、课程基本信息 课程代码：031106014 课程中文名称：植物组织培养技术 课程英文名称：Plant Tissue Culture Technology 课程性质：专业选修课 使用专业：生物技术专业、葡萄与葡萄酒工程专业 开课学期：第7学期 总学时：36+27 总学分：3 预修课程：植物学、植物生理学 课程简介 植物组织培养技术是将植物的离体材料(器官、组织、细胞、原生质体等)无菌培养，使其生长、分化，进而再生完整植株的无性繁殖技术，是实践性较强的专业课之一。本课程在介绍了组织培养的含义、特点及其意义；组织培养的概念、类型、特点；组织培养技术的基本原理及操作规范；组织培养的发展简史、发展趋势及其应用。通过本课程的学习，使学生掌握组培实验室、家庭组培室、组培育苗工厂的组成、设计原则与设计要求；熟练掌握各种培养基的特点与应用；熟练掌握茎尖、茎段、叶及花器官培养消毒灭菌、接种及培养的技术；理解种质资源离体保存的意义，掌握种质资源离体保存常用方法；掌握一些常见植物的组培脱毒与快繁技术的应用。 教材建议 《植物组织培养原理与技术》，李胜、李唯主编，化学工业出版社，2008年。 参考书 《植物细胞组织培养》，刘庆昌编著，北京：中国农业大学出版社，2002年，标准书号：7-81066-529-4。 《植物组织培养(第三版)》，潘瑞炽编著，广州：广东高等教育出版社，2003年，标准书号：7-5361-2501-1。 《植物组织培养教程》，李浚明编著，北京：中国农业大学出版社，1996年，标准书号：7-81066-466-2。

植物组培快繁研究

（一）树型金银花组培快繁技术的研究 实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌 一、目的要求： 1．通过参观，了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。 2．通过实际操作，学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。 二、材料用具： 高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿（试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯），以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪，肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。 三、说明： 在进行各类具体的组培实验前，首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的，总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。 植物组织培养是一项十分细致的工作，为了保证植物外植体不受污染，第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒，使它们保持无菌状态，做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧，因此每个学生必须学好这套基本功。 四、方法和步骤： 首先在老师带领下参观组培室，并听取讲解，然后配制洗液，称取工业用重铬酸钾40克，溶解在500ml在水中，然后徐徐加入450ml粗制浓硫酸（或废硫酸）配好的溶液呈红色，铬酸洗液是一种强氧化剂，去污能力强，但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效，铬酸洗液可反复使用，直到溶液呈青褐色为止。此溶液腐蚀性强，洗涤时需注意。每人清洗部分玻璃器皿，方法：清水洗净→泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷→清水反复冲洗→蒸馏水淋一遍→烘干备用。 然后清洗部分较脏的玻璃器皿，方法：采用先碱后酸，即用洗衣粉洗刷后冲洗干净→晾干→侵入酪酸洗液，浸泡时间视器皿的肮脏程度而定→清水反复冲洗干净→蒸馏水淋洗一遍→烘干备用。 带有石蜡或胶布的器皿：先将其除去，再用常规洗涤，石蜡用水煮沸数次即可去掉，胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时，再用水冲洗，凉干后浸入洗液，以后的步骤同前。 对器皿和用具进行高压灭菌，即用手提式高压灭菌锅，在1.2个大气压下保持15~20分钟。解剖刀、手术剪、解剖针、镊子等用具在接种前还要用百分之七十的酒精棉球擦一下，再用酒精灯的火焰灭菌，冷却后即可应用。 五、作业：试阐述为什么要对器皿和用具进行严格的洗涤和灭菌？ 实验二母液的制备及培养基的配制、灭菌 一、目的要求： 通过掌握培养基对母液制备及常用培养基的配制和灭菌方法，为植物组织培养准备合适的营养条件。 二、材料用具： 高压灭菌锅、冰箱、普通及精密天平、电炉、铝锅、玻璃器皿（烧杯、量微、容量瓶、移液管、试剂瓶、三角瓶、漏斗），化学试剂(CaCl2·2H2O，KNO3，MgSO4·7H2O， NH4NO3，KH2PO4，Na2—EDTA，FeSO4·7H2O，MgSO4·4H2O，Zn SO4·7H2O，H3BO3，

最新植物组织培养知识点归纳

第一章 1、植物组织培养：是指在离体条件下，利用人工培养基对植物的器官、组织、细胞、原 生质体等进行培养，使其长成完整植株 2、外植体：在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物上提取下来的、接种在培养基上的 无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。 3、愈伤组织：指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 4、应用 一、农业上的应用 1. 种苗快速繁殖(rapid propagation) 2.无病毒苗(virus free)的培养 3.在育种上的应用(breeding) （1）倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显； （2）克服远缘杂交的不亲合性和不孕性（胚培养）； （3）保存种质 （4）创造变异 二、在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。用于基因工程技术创造植物新种质。用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。 三、利用组织培养材料作为植物生物反应器 第二章 1、细胞全能性（Totipotency）：指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成一个完整植 株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。 2、细胞分化（cell differentiation）：指导致细胞形成不同结构，引起功能或潜在的发育方式 改变的过程。 3、脱分化（Dedifferentiation）：指离体条件下生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构 和功能而恢复分生状态，形成无组织结构细胞团或愈伤组织 的过程。 4、再分化（Redifferentiation）：指脱分化的细胞重新恢复分化能力，形成具有特定结构和功 能的细胞、组织、器官甚至植株的过程。 5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施 一、污染及防治： 1、真菌污染后，如果已形成孢子，则必须经高压灭菌后扔掉。但若是细菌污染，只 要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可使用。 2、用抗生素等杀菌药剂的处理，会影响植物材料正常生长。 二、褐变及防止 （1）选择合适的外植体

植物非试管高效快繁技术

植物非试管高效快繁技术 植物非试管高效快繁技术的特点总结 植物非试管高效快繁技术(TERNPC)与植物组培快繁(plant tissue culture)和传统育苗技术相比的先进性，及其在技术生产运用中的特点总结如下: 一、用植物0.3-1.0厘米长的微小外植体作为繁殖单位材料，极大的节约了种质材料，所用外植体繁殖单位材料用量比常规育苗用量少3-8倍;接种速度极快，是组织培养的3-5倍。直接接种在大田沙床或营养袋中，一次成苗直至供应生产，不需任何移动，成活率高。完全离开组培大楼和全部试管快繁的条件，育苗设施简易比组织培养快繁投入低几十倍，比常规育苗也低。 二、在独创的简易条件下，无论南方北方、不同纬度、不同土壤、不同气候，一年四季(包括极端温度:低温-35度和高温42度)都可用此法连续快繁，多数品种均可达6--12代。该技术育苗较少受季节影响，一年365天均可接种繁殖。实现每代在原种植物基数上按几何级数高效增殖。一年中任何一天都可用此快繁技术启动生产。极大的拓展了技术应用的时间和空间。 三、普及率高。普通人员每天(8小时)可接种3000-5000个单位材料。一个培养四个月的生产技术工人每月可成功培育单一植物品种30,000-10,0000株纯种苗。对人才素质要求适应性极广，生产技术易于推广;二是个人操作速度比组织培养快繁和常规育苗快得多，当达到一定育苗规模以上时，生产投资效益比可达 1:5-1:10以上。它非常节约植物种质材料，一天就可以接种数十万株至上百万株(这是组织培养在世界范围内难以想象的事)，易于大面积快繁各种苗木。，易于大面积育苗产业化规模快繁各种种苗。 四、操作步骤少，生产技术工艺简单，经特殊培训较容易掌握，可广泛应用于生产。适宜大规模工厂化育苗。普通人员可参加快繁全部生产操作，且速度极快，

植物快繁技术

植物快繁技术/植物克隆技术/植物傻瓜克隆技术/植物非试管高效快 繁技术 减小字体增大字体作者：本站来源：本站整理发布时间： 2008-1-1 18:33:32 植物快繁技术简介 所谓植物非试管高效快繁技术也就是植物克隆技术，也有人称之为植物非试管快繁技术、植物快繁技术、植物全光照喷雾育苗技术、全光雾插技术、微材料或微组织扦插育苗技术，喷雾育苗技术、喷雾扦插育苗技术、傻瓜克隆。无论叫做植物快繁还是植物克隆其原理和方法是一样的。 植物克隆技术（植物快繁技术）的关键是喷雾，十几年前就有权威单位推广全光照喷雾育苗技术，实际上也就是后来有人称之为植物非试管高效快繁技术，而现今更多被称为植物克隆、傻瓜克隆等时髦词汇。过去开发的喷雾全套设备是机械式，成本高达数万元，且容易锈蚀和损坏，一段时间后就没人再使用，而自从引进以色列微喷（头）技术后，微喷雾问题顺利以低成本形式解决，于是植物克隆技术（植物快繁技术）得以在全国迅速推广普及。 植物快繁技术（植物克隆技术）的推广的另一障碍就是自动控制仪的问题，进口的温湿控制设备好用但价格高，所谓的农业智能化计算机系统除了价格更高之外还总是不能成熟，使用起来问题百出，经常造成育苗的失败，笔者使用两年后才不得已开发了国产育苗仪，其低廉

的价格和丰富实用的功能很快被全国同行赏识。 植物克隆技术（植物非试管高效快繁技术）现在的投入只需2000余元，大力推广植物克隆技术、植物快繁技术利国利民。 植物非试管高效快繁技术的起源、应用和进展 植物傻瓜克隆技术是20年前从国外引进，又经过我国众多农业专家花费二十余年时间，逐步完善并成熟运用于规模生产一个系统配套，用于多种经济植物大规模无性快繁产业化生产的实用技术，又称非试管快繁技术、喷雾快繁技术等。此技术是一项崭新经济植物苗木快繁技术体系，它将植物组织培养快繁苗从试管培养基中解放到田间大地，是一场无性繁殖快速育苗的革命！是现代农业生物技术研究的一大创举！ 该技术育苗生产成本低，适用于国内外苗木交易市场和经济植物种苗繁殖工程。绿色快繁产业是一个永久性高效益产业，它可以带动制药产业、林纸产业、林草产业、园林绿化等其它产业，进而促进农业产业化、林业产业化、制药产业化和农业现代化的快速发展。还有利于生态城市、园林城市、森林公园、自然保护区的建设、生态环境改善、城市生态系统的改变、无性系造林、天然林保护工程、城市绿化工程以及与人们生活息息相关的如粮食作物、花卉、蔬菜、无公害蔬菜、野生蔬菜、濒危野生植物、果树、山野菜、药用植物、珍稀植物等高效经济植物以及新经济资源的开发利用。 植物快繁技术是古今中外人们十分关注的问题。从传统的扦插繁

园林植物组织培养技术测试题一

《园林植物组织培养技术》测试题 一、填空题（每空0.5分，共15分） 1. 植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、__________、__________等几种类型。 2. 糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的_________。而且还能___________ 3. 无病毒植物的鉴定常用的方法有__________法、___________法、__________法。 4. 细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__________和__________的能力。 5. 7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进__________的生长，这时__________占主导地位；比值高促进__________的生长，这时__________占主导地位。 6．植物组织培养按培养的方式分为_______培养和_______培养。 7．在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以__________mm、带__________个叶原基为好 8.在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成__________，而与脱毒效果成__________。 9. 去除植物病毒的主要方法是_______和_______两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。 10. 进行植物组织培养最基本的前提条件是_______。 11.植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为_______培养和_______培养。 12. 在组织培养中，不耐热的物质用__________法灭菌，而培养基常用__________法灭菌。13. 大多数植物组织培养的适宜温度范围是_______℃，培养基的PH值范围是 _______。 14.病毒在植物体中的分布规律为___________________________________________ 二、不定项选择题（每题2分，共24分） 1. 培养室里的度一般保持在_________ A 30～40%； B 50～60%； C 70～80%； D 80～90% 2. 下列不属于生长素类的植物激素是_________。 A Kt； B IAA； C NAA； D IBA 3. 影响培养基凝固程度因素有_________。 A 琼脂的质量好坏； B 高压灭菌的时间； C 高压灭菌的温度； D 培养基的PH 4.活性炭在组织培养中的作用有_________。 A吸附有毒物质； B减少褐变，防止玻璃化； C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长； D增加培养基中的养分； 5. 下列具有细胞全能性的细胞是：_________。 A 成熟的老细胞； B 幼嫩的组织细胞； C 愈伤组织细胞 D 番茄的受精合子 6.高温易被破坏分解的植物激素是_________。 A IAA； B GA； C NAA； D Zt 7.脱落酸（ABA）需要用_________法灭菌。 A 灼烧灭菌； B 干热灭菌； C 过滤灭菌D高压湿热灭菌

植物组织培养脱毒快繁技术的综述

植物组织培养脱毒快繁技术的综述 李西雁 (广西职业技术学院农业技术工程系20０２级应用生物技术专业) 摘要：脱除病毒是植物组织培养深入探讨研究中的一个技术难题。本文结合在桂林莱茵生物科技股份有限公司的实践情况,简要介绍植物组织培养的基本原理和方法,综述植物脱除病毒的热处理、茎尖培养和抗病毒药剂三种方法的原理、发展史和技术方法,并介绍了几种常用的病毒检测方法。本文以马铃薯为例,重点介绍了利用热处理加茎尖组织培养法获得马铃薯脱毒苗的具体技术方法，脱毒率可达1０0％。同时还对植物组织培养脱毒快繁技术的应用前景作了分析。 关键词：茎尖培养，组织培养，快繁脱毒技术，病毒检测，应用前景 1植物组织培养研究概况 1．1研究简史 自从1943年怀特(White）提出植物细胞“全能性”(Tｏtipoｔｅncy）学说及诸多后学者(Steward，1958，Guｈａ和Marteshwａｒｉ，196４）相继证实后，引发植物组织和细胞培养快繁技术的勃然兴起。我国的专家学者在20世纪７０年代后也在此领域做了大量的研究和开发工作,创造了很多新方法、新技术，提出不少新成果，开拓了植 物组织培养快繁技术的新局面[１] 。目前采用组织培养脱病毒快繁及离体快繁生产株 苗的技术已发展相当成熟[2] 。脱毒株苗具有无杂菌、适应能力较强、繁育较快、 质量优、抗性好、分蘖性强、繁殖系数高、大批量生产、周年供应、便于运输等优点，已得到有关专家的鉴定及高度评价和种植试验区、种植产区果农的认可。例如脱毒马铃薯、脱毒红薯、脱毒生姜、脱毒大蒜、脱毒草莓、脱毒苗木、脱毒花卉等等, 已成为现代农民致富的新宠[2] 。 １．2植物组织培养和脱毒快繁的定义 植物组织培养（Ｐlant tｉssue culture)是指在无菌的条件下，将离体的植物(根、茎、叶、花、果实、种子等)、组织（形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞)以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株。由于培养物是脱离植物母体,在玻璃瓶中进行培养，所以也叫做离

植物组织培养技术所有名词解释

植物组织培养复习材料 一、名词解释。 1、植物组织培养(plant tissue culture)：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术 2、脱分化（dedifferentiation）：指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞即愈伤组织的现象。 3、再分化（redifferentiation）：愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。 4、外植体(explant)：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等） 5、愈伤组织(callus)：原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。在组培中，则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。 6、器官发生：胚胎时期由胚层器官原基发育成器官的过程。包括细胞分化和器官形成。 7、胚状体发生：在植物细胞、组织或器官体外培养过程中，由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。可进一步发育成植株。 8、细胞全能性（cell totipotency）：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 9、细胞分化：一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。 10、极性：细胞（也可指器官或植株）内的一端与另一端在形态结构和生理生化上的差异。 11、试管苗：通过组织培养产生的植株。 12、看护培养：是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。这块愈伤组织被称为看护组织。 13、固相化培养：将细胞或原生质体固着在琼脂糖、藻（月元）酸盐或多聚赖氨酸中，然后将他们放入液体培养基中震荡培养。这种培养方法既利用了振荡培养室营养物质和气体易于交换的优点，有利用了固相化使细胞免受振荡时剪切力的作用。 14、悬浮细胞培养：将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增值的技术。适用于大规模的培养，使细胞工程的基本平台。 15、植板效率=（每个平板中新形成的细胞团数/每个平板中接种的细胞数）*100 16、实验室的组成及功能：1.基本实验室（1）准备室（2）接种室（3）培养室2.辅助实验室（1）细胞学实验室（2）摄影室及暗室（3）生化分析室（无菌操作室、化学实验室、培养室、细胞学观察室、暗室）。 17、植物种质：物亲代通过生殖细胞或体细胞传递给后代的遗传物质，植物种质资源即为携带各种不同遗传物质的植物总称。 18、玻璃化现象：指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。 19、基本培养基：包括大量元素和微量元素（无机盐类）、维生素和氨基酸，还有糖和水等。 20、完全培养基：在基本培养基基础上，根据各种不同试验要求，添加各种植物生长调节物质以及其他复杂有机附加物，包括有些成分尚不完全清楚的天然提取物。21、外植体褐变：在组织培养过程中，外植体向培养基中释放褐色的物质（醌类）致使培养

【精品】植物组织培养快繁技术

植物组织培养快繁技术 摘要：本文简要介绍植物组织培养的基本原理和方法，综述植物脱除病毒的热处理、茎尖培养和抗病毒药剂3种方法的原理、发展史和技术方法,并介绍了几种常用的病毒检测方法。同时还对植物组织培养脱毒快繁技术的应用前景作了预测分析. 关键词：茎尖培养；组织培养;快繁脱毒技术；病毒检测；应用前景 正文： 1植物组织培养研究概况 1。1研究简史 自从1943年怀特(White）提出植物细胞“全能性”（Totipotency）学说及诸多后学者（Steward，1958，Guha和Marteshwari，1964）相继证实后，引发植物组织和细胞培养快繁技术的快速发展.我国的专家学者在20世纪70年代后也在此领域做了大量的研究和开发工作,创造了很多新方法、新技术,提出不少新成果,开拓了植物组织培养快繁技术的新局面.目前采用组织培养脱病毒快繁及离体快繁生产株苗的技术已发展相当成熟［2]。脱毒株苗具有无杂菌、适应能力较强、繁育较快、质量优、抗性好、分蘖性强、繁殖系数高、大批量生产、周年供应、便于运输等优点，已得到有关专家的鉴定及高度评价和种植试验区、种植

产区果农的认可。例如脱毒马铃薯、脱毒红薯、脱毒生姜、脱毒大蒜、脱毒草莓、脱毒苗木、脱毒花卉等，已成为现代农民致富的新宠. 1。2植物组织培养和脱毒快繁的定义 植物组织培养(Planttissueculture）是指在无菌的条件下,将离体的植物（根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（形成层、花药组织、胚乳、皮层等)、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体,培养在人工配制的培养基上,给予适当的培养条件，使其长成完整的植株。由于培养物是脱离植物母体，在玻璃瓶中进行培养，所以也叫做离体培养。其完整过程是：脱分化再分化生长外植体愈伤组织生长点或根茎叶完整植株发生胚状体在有些情况下,再分化也可不经愈伤组织阶段，而直接发生于脱分化的细胞。植物组织培养脱毒快繁是人工在无菌条件下利用植物体的一部分,在人工控制的营养和环境条件下繁殖植物,脱除病毒得到无毒苗株，继而在大田快速繁殖的技术。脱毒及离体快繁,这是目前植物组织培养应用最多、最广泛和是有效的一个方面。主要是进行茎尖培养脱除病毒。对 于脱毒苗、新育成、新引进、稀缺良种、优良单株、濒危植物和基因工程植株等可通过离体快速繁殖，同时可不受地区和气候的影响，比传统的繁殖方法快数万倍.植物组织培养已发展成为一门富有生命力的学科.追究植物组织培养脱毒快繁技术的发展简史，在11世纪就出现的热处理脱毒法,最早解决一些作物的病毒病害问题。 20世纪50年代发展的植物组织培养技术为脱毒提供了一条有效途径。现在