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斜面低温保藏法

斜面低温保藏法
斜面低温保藏法

斜面低温保藏法

此法为实验室工作用菌种的最常用的保藏方法.操作简单,使用方便,不得特殊设备,操作时,将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌生长充分以

后,转移至2-8℃冰箱中保藏。保藏时间依微生物的种类而有所不同,霉菌、放线菌及芽

胞的菌保存2--4个月,移种一次;酵母菌两个月移种一次,细菌最好每月移种一次。此法的缺点是菌种容易变异,因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的,传代过多会使微生物的性状和代谢发生变异,在传代过程中,污染杂菌的机会也较多。因此,此法仅能用于工作用菌种的短期保藏,并应随时检查其污染杂菌和变异等情况,传代代数超过5代的菌种应灭菌处理后抛弃。

xxx食品检测中心作业指导书

1.目的

规范实验室菌种的收集、使用、保管程序;确保实验室的安全。

2.范围

本管理细则适用于实验室菌种的使用和管理。

3.职责

3.1菌种保管员:按照本指导书做好菌种的收集、转种、使用、保存和发放以及销毁工作。

3.2科室负责人:负责监督菌种的使用及管理。

4.管理细则

本实验室保存的菌种仅包括一部分致病性较弱的三类细菌、一部分无致病能力的普通细菌和常见真菌。不包括病毒、螺旋体、衣原体、立克次体;保存的菌种主要用于各类培养基、检测试剂的性能测试和质量控制。

4.1在本实验室保管的菌种名

4.1.1保留工作菌种:大肠杆菌ATCC25922、鼠伤寒沙门氏菌50013、福氏志贺氏菌2a ATCC12022、副溶血性弧菌200904-1、金黄色葡萄球菌ATCC25923、表皮葡萄球菌ATCC12228溶血性链球菌23310、铜绿假单胞菌10211、普通变形杆菌,克雷伯氏杆菌,小肠结肠炎耶森氏菌A TCC 23715 、单核增生李斯特菌A TCC19111、枯草芽胞杆菌ATCC6633b 、蜡状芽胞杆菌A TCC11778、白色念珠菌A TCC10231、酿酒酵母ATCC9763、黑曲霉菌、展青霉菌、黄曲霉菌。

4.1.2常规检测,科研分离得到的有保留价值的三类/四类菌种根据需要可继续保留;如果在食品中分离到二类/一类菌种,及时送上级单位进一步鉴定,并按规定立即销毁。本实验室不保存一类、二类菌种。

4.2 菌种的保管

4.2.1实验室菌种保存于专用的菌种室。

4.2.2菌种保管员及科室负责人双人双锁负责保管菌种。

4.2.3使用菌种需提出申请、经科室负责人批准后,向菌种保管员领用。

4.2.4菌种应按规定的时间定期转种,一般每转种3代做一次鉴定,如发现污染或变异应及时处理。

4.2.5保管人员工作变动时应作好交接工作。

4.3 菌种的使用和保存

4.3.1菌种的类别

4.3.1.1实验室内的标准菌种根据用途不同,分为储存菌种、传代用菌种和工作用菌种。

①储存菌种:以冷冻干燥保藏为主,用于菌种的长期保存,一般是从菌种保藏中心或专业实验室购买得到的标准菌株,用符号S表示。一般可保存5年。

②传代用菌种:采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡覆盖保藏法,用于菌种的传代,用符号G 表示。甘油冷冻管保藏法一般可保存2年;

③工作菌种:保存于半固体内或琼脂斜面培养基中,作为工作用菌种,用符号W表示。一般可保存1~2个月。

4.3.1.2实验室从样品中分离得到的菌株用符号Y表示。

4.3.2菌种的接收

菌种购到实验室后,应在菌种接收记录上填写所购菌种的信息,如名称、数量和接收日期等。贴好标签后储存于-30℃以下。

4.3.3冷冻干燥菌种的恢复培养

按菌种保藏中心的要求进行恢复培养。中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)建议的方法如下:

①安瓿管开封:用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰将安瓿管顶端加热,滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂,用锉刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。

②菌株恢复培养:用无菌吸管,吸取0.3-0.4ml适宜的液体培养基(如营养肉汤),滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状,取约0.2ml菌体悬浮液,移植于指定的琼脂斜面/平板培养基上,剩余的菌液,注入指定的液体培养基内(3-4ml),然后在建议的温度下(一般培养温度32.5℃±2.5℃,18~24h)培养。

③注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在5-10℃的环境下;某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需连续两次继代培养才能正常生长。

4.3.4菌种的传代

从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。按转种次数确定菌种的代数:

①冷冻干燥的菌种在液体培养基内恢复培养(第1代)后,转种至平板培养基上得到单

个纯菌落,此为第2代。菌种传代一般不超过5代。

②鉴定菌种后制甘油冷冻管经菌种特性鉴定后,挑取平板上纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管,此作为第2代传代用菌种(G2);同时挑取纯菌落转接斜面,此菌种作为工作用菌种,为第3代(W3)。

③将第2代传代用菌种(G2)管冷冻保存(-30℃以下),将第3代工作用菌种(W3)以适当温度下培养适当时间后可用于实验。

④取一支冷冻保存的第2代传代用菌种(G2)转种于平板和斜面培养基上,平板上的菌种制成甘油冷冻管,为第3代传代用菌种(G3);斜面培养基经适当温度下培养适当时间后可用作第3代工作用菌种(W3)。

⑤当工作用菌种代数小于5时,可直接用上一代工作用菌种转接下一代工作用菌种,如W3可直接转接为W4。

⑥按上述程序操作,直至G4转为W5为止,需重新开启安瓿,再重复上述操作程序保藏和使用菌种。

4.3.5菌种的保存方法

4.3.

5.1甘油冷冻管保存法

甘油冷冻管保存法适用于保存传代用菌种,一般可保存2年。

①将待保存用菌种接种至平板或琼脂斜面,经37℃24~48h培养后,用无菌接种环轻轻刮取菌苔,移至预先装有无菌蒸馏水的试管中,调整菌液浓度,使其等同于1单位麦氏比浊管。

②向已制备好的菌悬液中加入等体积,浓度为20%的无菌甘油,得到10%甘油菌悬液。

③轻轻振摇,使10%甘油菌悬液充分混合,分装于无菌小试管中,在-30℃条件下贮存。

4.3.

5.2液体石蜡覆盖保藏法

液体石蜡覆盖保藏法适用于保存传代用菌种,一般可保存3-6个月。

①取纯化菌种穿刺接种于半固体培养基中,经37℃18~24h培养后,加无菌液体石蜡覆盖半固体表面(高度1厘米为宜)。

②石蜡油封存以后,放入4℃冰箱中保存,也可直接放在低温干燥处保藏。③肠道细菌、葡萄球菌一般可保存3-6个月;保存O1群和非O1群霍乱弧菌时宜放置室温阴暗处;保存副溶血性弧菌时,用含3.5%氯化钠半固体,宜放置室温阴暗处;保存葡萄球菌、链球菌可用10%血半固体。

4.3.

5.3斜面低温保存法斜面低温保存法适用于保存工作用菌种,一般可保存1~2个月

取纯化菌种转接种于适宜的固体斜面培养基上,经37℃18~24℃培养后,用纸将管塞部分包扎好,放入4℃冰箱中保存,也可直接放在低温干燥处保藏。

4.4 菌种的实验室编号

编号原则:菌种名称+类别/传代次数-制备日期或接收日期,例副溶-G3-20081213。对于实验室从样本中分离得到的菌种,类别用Y表示,例副溶-Y3-20081213。

注:菌种名称使用中文简称,如“副溶血性弧菌”用“副溶”表示;“金黄色葡萄球菌”用“金葡”表示;“奇异变形杆菌”用“奇变”表示。

4.5 菌种的销毁

4.5.1 菌种销毁采用高压蒸汽灭菌:121℃,20分钟。

4.5.2 下列菌种需及时销毁处理:①发生污染或变异的菌种;②超过保存期限的菌种;③使用后的菌种。

5.记录表式

菌种接收记录表

菌种使用登记表

菌种销毁审批表

6.参考文献

6.1 戴光强.医学继续教育系列丛书?卫生检验分册[M].合肥:安徽科学技术出版社,2001.4.6.2 管远志,王艾琳,李坚管.医学微生物实验技术[M].北京:化学工业出版社,2005.8.6.3 王宏明.微生物检验技术操作规程与质量控制及检测数据分析处理实用手册[M].北京:卫生科技出版社,200

7.5.

食品低温保藏

食品的低温保藏 摘要:食品是人们赖以生存的东西,但是微生物在常温下容易污染食品,随着现代技术的快速发展,人们对食品保藏保鲜的要求越来越重视,低温的研究也就随之深入,应用也越来越广泛。本文简述了食品低温保藏在国内外的发展现状及展望。 关键词:食品,低温,保藏,食品低温保藏技术的发展现状,低温保藏的展望 Low temperature preservation of foods Shi Zhujun of the Jiangsu University College of food and biological engineering in Jiangsu Zhenjiang Abstract: food is the living things which people, but microbial at room temperature, easy contamination of food, with the rapid development of modern technology, people on the food storage requirements become more and more attention, low temperature research goes deeply, also more and more extensive application. This paper describes the development status and Prospect of food cold storage at home and abroad. Keywords: food, low temperature, preservation, development technology of food freezing, prospect of low temperature preservation 引言:随着人们生活品质的提高,大家对食品的要求不单单局限于生理需求,也更加重视食品的品质及口味,因此,食品低温保藏这项技术也越来越受到重视。 1.食品低温储藏原理 食品低温储藏就是利用低温技术将食品温度降低,并维持在低温状态以阻止食品腐败变质,延长食品保藏期[1]。人们很早就知道在冬天寒冷季节,食品不易变质且能保存较长的时间。目前在食品制造,贮存和运输系统中,则普遍采用人工制冷的方式来保持食品的质量。使食品原料或制品从生产到消费的全过程中,始终保持低温的方式和工具称为冷链,包括制冷系统、冷却冷冻系统、冷库、冷藏车船以及冷冻销售系统等。冷却和冷冻不仅可以保存食品,也可以和其他食品制造过程结合起来,达到改变食品性能和功能的目的。例如,冻结浓缩、冻结干燥、冻结粉碎等方法,已得到普遍应用。而冷饮及冰淇淋制品等则早已成为大众食品。食品在低温下不易变质的原因主要有以下几个方面。 1.1、在低温下水变成冰,水的活度降低,食品的保水能力大大增强。有许多水分食品及原料的保鲜,其水分的保持是质量保证的重要原因之一。

斜面低温保藏法

斜面低温保藏法 此法为实验室工作用菌种的最常用的保藏方法.操作简单,使用方便,不得特殊设备,操作时,将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌生长充分以 后,转移至2-8℃冰箱中保藏。保藏时间依微生物的种类而有所不同,霉菌、放线菌及芽 胞的菌保存2--4个月,移种一次;酵母菌两个月移种一次,细菌最好每月移种一次。此法的缺点是菌种容易变异,因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的,传代过多会使微生物的性状和代谢发生变异,在传代过程中,污染杂菌的机会也较多。因此,此法仅能用于工作用菌种的短期保藏,并应随时检查其污染杂菌和变异等情况,传代代数超过5代的菌种应灭菌处理后抛弃。 xxx食品检测中心作业指导书 1.目的 规范实验室菌种的收集、使用、保管程序;确保实验室的安全。 2.范围 本管理细则适用于实验室菌种的使用和管理。 3.职责 3.1菌种保管员:按照本指导书做好菌种的收集、转种、使用、保存和发放以及销毁工作。 3.2科室负责人:负责监督菌种的使用及管理。 4.管理细则 本实验室保存的菌种仅包括一部分致病性较弱的三类细菌、一部分无致病能力的普通细菌和常见真菌。不包括病毒、螺旋体、衣原体、立克次体;保存的菌种主要用于各类培养基、检测试剂的性能测试和质量控制。 4.1在本实验室保管的菌种名 4.1.1保留工作菌种:大肠杆菌ATCC25922、鼠伤寒沙门氏菌50013、福氏志贺氏菌2a ATCC12022、副溶血性弧菌200904-1、金黄色葡萄球菌ATCC25923、表皮葡萄球菌ATCC12228溶血性链球菌23310、铜绿假单胞菌10211、普通变形杆菌,克雷伯氏杆菌,小肠结肠炎耶森氏菌A TCC 23715 、单核增生李斯特菌A TCC19111、枯草芽胞杆菌ATCC6633b 、蜡状芽胞杆菌A TCC11778、白色念珠菌A TCC10231、酿酒酵母ATCC9763、黑曲霉菌、展青霉菌、黄曲霉菌。 4.1.2常规检测,科研分离得到的有保留价值的三类/四类菌种根据需要可继续保留;如果在食品中分离到二类/一类菌种,及时送上级单位进一步鉴定,并按规定立即销毁。本实验室不保存一类、二类菌种。 4.2 菌种的保管 4.2.1实验室菌种保存于专用的菌种室。 4.2.2菌种保管员及科室负责人双人双锁负责保管菌种。 4.2.3使用菌种需提出申请、经科室负责人批准后,向菌种保管员领用。 4.2.4菌种应按规定的时间定期转种,一般每转种3代做一次鉴定,如发现污染或变异应及时处理。 4.2.5保管人员工作变动时应作好交接工作。 4.3 菌种的使用和保存

不同时限深低温保存对猪心脏瓣膜生物力学比较

不同时限深低温保存对猪心脏瓣膜生物力 学比较 本文采用液氮深低温保存的猪主动脉瓣,随着保存限时延长分析瓣膜生物力学特性及差异性,以期为今后临床应用奠定理论基础。 资料与方法 实验过程:于猪宰杀后30min内清洁条件下取出心脏,经过取瓣、修剪、灭菌培养等处理,制备20只主动脉瓣膜,分别随机分成5组,通过程序性降温,采用液氮冷冻(-196℃)保存,将瓣膜完全浸润在冻存液中。分别经过2周、4周、6周、8周、10周深低温储存后,解冻后测定不同储存时限瓣膜生物力学指标。 检测指标:生物学检测指标主要有组织厚度,组织含水量,热皱缩温度;强度、组织伸长比。 统计分析:所有数据资料均以(χ±s)表示。采用SPSS 13.0、SAS 10.0统计学软件进行统计处理,所有数据正态性检验后,两样本均数采用组间或配对t检验,显著性标准为P<0.05。 结果 深低温保存不同时限5组瓣膜厚度、组织热皱缩温度

及组织含水量随着保存时限延长呈逐渐递增趋势(f=8.238,p=0.074),但无统计学意义;破坏强度及伸长比各组间存在明显差异,经统计学检验有显著性差异,见表1。 讨论 由于目前临床运用的人造心脏瓣膜 存在诸多的缺陷,机械瓣膜耐久性很好,但是术后抗凝的不当会引起出血和血栓的发生,组织工程瓣膜能很好地解决这一问题。最近研究表明其在细胞方面:不易黏附上去,胶原、弹力蛋白和蛋白聚糖等天然固有成分的缺失,力学性能较差。其主要原因为静态环境下培养的瓣膜上的内皮细胞黏附力低下,同时人体心脏瓣膜的结缔组织具有复杂的结构和分布形式,以耐受瓣叶起闭过程中不断变化的应力作用。以上研究提示生物瓣膜的细胞和纤维支架两者都是造成瓣膜衰败的重要因素。 同其他类型瓣膜相比同种瓣膜术后患者无须抗凝治疗,广泛应用于瓣膜替换手术及婴幼儿复杂先心病矫治术中。1962年Ross首次把人同种异体主动脉瓣应用于临床并取得成功,1986年O’Bfien首创了液氮超低温冷冻保存技术,提高瓣膜耐久性,有效地减少了由人工瓣膜引起的心内膜炎的发生率。其机制主要在于深低温环境可中断细胞的代谢,将损伤减到最小。同时,有文献报告冷冻保存技术能抑制移植物内皮细胞黏附因子的表达。因此目前如何提高同种

液氮超低温冻结保藏技术规范

液氮超低温冻结保藏技术规范 1. 目的 规范液氮超低温冻结方法保存各类微生物菌种的操作,保证菌种长期保藏的质量和安全。 2. 范围 本规程适用于各类微生物菌种的液氮超低温冻结保存。 3. 基本原则和要求 针对接收的不同类群的微生物菌种资源,保藏中心应根据工作经验和微生物菌种提供人的建议,选择合适的冻结速度和保护剂系统,进行微生物菌种的液氮超低温冻结保存,以保证这些微生物菌种在长期保藏过程中的活性和稳定性。 4. 规程 4.1 准备冻存管 4.1.1 用蒸馏水浸泡、冲洗干净耐低温(聚丙烯)塑料冻存管,干燥后备用。 4.1.2 保藏中心应为保存菌种的每一支冻存管标注明确的标识,标签内容应至少包括菌种的保藏编号和制备批号(日期),可将保藏编号排在第一行,制备批号用连续的年月日(八位数字)表示,排在第二行,并根据冻存管的容积将标签裁成合适的大小。保藏中心应根据标签的放置位置选择符合要求的标签材质,以确保在长期的保藏过程中,标签不会发生自然或人为的脱落、污损。 4.1.2 将准备好的标签放置于冻存管规定的位置,加入或不加入合适体积的保护剂,拧上冻存管帽,装入塑料冻存盒中,1 公斤压力蒸汽灭菌30 分钟,备用。 4.2 准备保护剂 根据需要保藏的微生物类别选择适宜的保护剂种类,按照配方配制、分装、灭菌备用。用于保存厌氧微生物的保护剂,应除去保护剂中的溶解氧。 4.3 菌种保藏 4.3.1 无菌操作将符合质量要求的、需要保藏的菌种接种在规定的培养基上,并尽量涂满整个斜面,置最适宜的条件下培养,单细胞微生物菌种培养至对数生长期后期(静止期初期),对于放线菌和产孢丝状真菌应培养至形成成熟的孢子。

菌种保藏的主要方法

菌种保藏 (一)、菌种保藏的目的 微生物在使用和传代过程中容易发生污染、变异甚至死亡,因而常常造成菌种的衰退,并有可能使优良菌种丢失。菌种保藏的重要意义就在于尽可能保持其原有性状和活力的稳定,确保菌种不死亡、不变异、不被污染,以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要。 (二)、菌种保藏的原理 无论采用何种保藏方法,首先应该挑选典型菌种的优良纯种来进行保藏,最好保藏它们的休眠体,如分生孢子、芽孢等。其次,应根据微生物生理、生化特点,人为地创造环境条件,使微生物长期处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态。这些人工造成的环境主要是干燥、低温和缺氧,另外,避光、缺乏营养、添加保护剂或酸度中和剂也能有效提高保藏效果。 (三)、菌种保藏的方法 1、斜面低温保藏法 将菌种接种在适宜的斜面培养基上,待菌种生长完全后,置于4℃左右的冰箱中保藏,每隔一定时间(保藏期)再转接至新的斜面培养基上,生长后继续保藏,如此连续不断。此法广泛适用于细菌、放线菌、酵母菌和霉菌等大多数微生物菌种的短期保藏及不宜用冷冻干燥保藏的菌种。放线菌、霉菌和有芽孢的细菌一般可保存6个月左右,无芽孢的细菌可保存1个月左右,酵母菌可保存3个月左右。如以橡皮塞代替棉塞,再用石蜡封口,置于4℃冰箱中保藏,不仅能防止水分挥发、能隔氧,而且能防止棉塞受潮而污染。这一改进可使菌种的保藏期延长。该法的优点是简便易行,容易推广,存活率高,故科研和生产上对经常使用的菌种大多采用这种保藏方法。其缺点是菌株仍有一定程度的代谢活动能力,保藏期短,传代次数多,菌种较容易发生变异和被污染。 2、石蜡油封藏法 此法是在无菌条件下,将灭过菌并已蒸发掉水分的液体石蜡倒入培养成熟的菌种斜面(或半固体穿刺培养物)上,石蜡油层高出斜面顶端lcm,使培养物与空气隔绝,加胶塞并用固体石蜡封口后,垂直放在室温或4℃冰箱内保藏。使用的液体石蜡要求优质无毒,化学纯规格,其灭菌条件是:150~170℃烘箱内灭菌lh;或121℃高压蒸汽灭菌60~80min,再置于80℃的烘箱内烘干除去水分。 由于液体石蜡阻隔了空气,使菌体处于缺氧状态下,而且又防止了水分挥发,使培养物不会干裂,因而能使保藏期达1~2年,或更长。这种方法操作简单,它适于保藏霉菌、酵母菌、放线菌、好氧性细菌等,对霉菌和酵母菌的保藏效果较好,可保存几年,甚至长达10年。但对很多厌氧性细菌的保藏效果较差,尤其不适用于某些能分解烃类的菌种。 3、砂土管保藏法

甘油冷冻保藏法

甘油冷冻保藏法 本方法适合于中、长期菌种保藏,保藏时间一般为2-4年左右。 (1)用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平皿上划线分离单菌落。 (2)平皿倒置于30℃或37℃恒温培养箱,培养24-48小时,至单菌落的大小为3mm左右。 (3)挑取一个单菌落,接种于一个装50mL的300mL三角瓶中30℃或37℃振荡培养10-15小时,至菌密度OD600为1.0-1.5。 (4)用火焰灭菌的接种环取少量种子液,涂片后,作革兰氏染色,在显微镜下观察菌体的形态,及是否有杂菌。 (5)按30%甘油:种子液为1:1(V/V)的量加入无菌甘油,混合后分装至事先灭菌的菌种保存管(1-2mL/管),-70℃或液氮保存。 冷冻干燥保藏法 (1)准备安瓿管用于冷冻干燥菌种保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造,形状可用长颈球形底的,亦称泪滴型安瓿管,大小要求外径6-7.5mm,长105mm,球部直径9-11mm,壁厚0.6-1.2mm。也可用没有球部的管状安瓿管。塞好棉塞,1.05kg/cm2,121.3℃灭菌30分钟,备用。 (2)准备菌种,用冷冻干燥法保藏的菌种,其保藏期可达数年至十数年,为了在许多年后不出差错,故所用菌种要特别注意其纯度,即不能有杂菌污染,然后在最适培养基中用最适温度培养,使培养出良好的培养物。细菌和酵母的菌龄要求超过对数生长期,若用对数生长期的菌种进行保藏,其存活率反而降低。一般,细菌要求24—48小时的培养物;酵母需培养3天;形成孢子的微生物则宜保存孢子;放线菌与丝状真菌则培养7-10天。 (3)制备菌悬液与分装以细菌斜面为例,用脱脂牛乳2ml左右加入斜面试管中,制成浓菌液,每支安瓿管分装0.2ml。 (4)冷冻冷冻干燥器有成套的装置出售,价值昂贵,此处介绍的是简易方法与装置,可达到同样的目的。 将分装好的安瓿管放低温冰箱中冷冻,无低温冰箱可用冷冻剂如干冰(固体CO2)酒精液或干冰丙酮液,温度可达-70℃。将安瓿管插入冷冻剂,只需冷冻4-5分钟,即可使悬液结冰。 (5)真空干燥为在真空干燥时使样品保持冻结状态,需准备冷冻槽,槽内放碎冰块与食盐,混合均匀,可冷至-15℃。装置仪器,安瓿管放入冷冻槽中的干燥瓶内。 抽气一般若在30分钟内能达到93.3Pa(0.7mmHg)真空度时,则干燥物不致熔化,以后再继续抽气,几小时内,肉眼可观察到被干燥物已趋干燥,一般抽到真空度26.7Pa(0.2mmHg),保持压力6-8小时即可。 (6)封口抽真空干燥后,取出安瓿管,接在封口用的玻璃管上,可用L形五通管继续抽气,约10分钟即可达到26.7Pa(0.2mmHg)。于真空状态下,以煤气喷灯的细火焰在安瓿管颈中央进行封口。封口以后,保存于冰箱或室温暗处。 此法为菌种保藏方法中最有效的方法之一,对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用,即使对一些很难保存的致病菌,如脑膜炎球菌与淋病球菌等亦能保存。适用于菌种长期保存,一般可保存数年至十余年,但设备和操作都比较复杂。 滤纸保藏法 (1)将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条,装入0.6×8cm的安瓿管中,每管1-2张,塞以棉塞,1.05kg/cm2,121.3℃灭菌30分钟。 (2)将需要保存的菌种,在适宜的斜面培养基上培养,使充分生长。 (3)取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内,取数环菌苔在牛乳内混匀,制成浓悬液。 (4)用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内,使其吸饱,再放回至安瓿管中,塞上棉塞。 (5)将安瓿管放入内有五氧化二磷作吸水剂的干燥器中,用真空泵抽气至干。

食品的低温保藏技术

第四章食品的低温保藏技术 【重点】:1、了解常见的冷却及冻结设备。 2、熟悉食品冷却、冻结和解冻的过程、方法及其质量控制。 3、掌握食品冷藏与冻藏的关键技术及管理措施。 【难点】:如何确保食品在冷却、冻结和解冻过程中的高质量。 【课时分配】:6学时 第一节食品的冷却保藏技术 一、原料及其处理 (一)植物性原料及其处理 ●剔除损伤、虫伤、腐烂、发黄等有质量问题的原料。 ●进行分级、整理、包装等处理。 ●原料及包装材料要进行消毒处理。 ●应在清洁、低温条件下进行。 (二)动物性原料及其处理 ●畜肉类及禽类主要是静养、空腹及屠宰等处理。 ●水产类主要是清洗、分级、剖腹去内脏、放血等处理。 ●蛋类主要是进行外观检查(剔除变质蛋)、分级、装箱等处理。 ●应在清洁、低温条件下进行。 二、食品的冷却 (一)冷却的目的 ●降低食品的温度以抑制微生物和酶等变质因子的作用。 ●控制植物性食品的呼吸作用,延缓衰老(分解)过程。 ●便于酒类的发酵。 ●有利于进行冻结。

(二)冷却速度和时间 ●冷却速度是指食品不断放出热量而降低温度过程的快慢程度。 ●冷却速度受食品与冷却介质之间的温差、食品的大小和形状、冷却介质的种 类等因素的影响。 ●冷却时间是指食品从初温冷却到预定终温所需要的时间。 (三)冷却方法 1、空气冷却法 ●通过冷却空气的不断循环,带走食品是热量,使食品得到冷却的方法。 ●冷却空气取决于食品种类(动:0℃左右;植:0~15℃之间)。 ●冷却效果取决于空气温度、循环速度、相对湿度等因素。 2、水冷却法 ●将食品直接与低温的水接触而获得冷却的方法。 ●有浸渍和喷淋两种方式。 ●冷却用水(淡水、海水均可)必须是清洁无污染的。 ●适应于水产品、水果、蔬菜等食品的冷却。 3、冰冷却法 ●将食品直接与冰接触而获得冷却的方法。 ●冷却效果取决于冰与食品的接触面积和用冰量。 ●特别适合水产品的冷却。也可用于水果、蔬菜等食品的冷却。 真空冷却法 ●利用水在真空条件下沸点降低的原理来冷却的方法。 ●会造成食品部分水分蒸发(2% ~ 4%),但不影响食品的外观质量。 ●冷却速度快,但成本较高。 ●适应于蔬菜、蘑菇等表面积大的食品冷却。 三、食品的冷藏 (一)空气冷藏法 1、冷藏温度 ●冷藏温度是保证质量的关键,大多数食品的冷藏温度在- 1.5~10℃之间, 依食品种类而定(见表4-1)。

低温保藏在食品中的应用

低温保藏在食品中的应用随着科技的快速发展,人们对低温的研究越来越深入,应用也越来越广泛。低温加工中对肉制品的组织结构和性质破坏作用最小,低温贮藏时间长,效果好,认为是目前肉类贮藏的最优方法之一。不仅如此,低温保藏在乳制品中的应用也非常广泛。 肉制品中含有丰富的营养物质,是微生物繁殖的优良场所,如果肉制品控制不当,外界微生物就会污染肉制品使其腐败变质,失去食用价值,严重的还会对人体产生有害的毒素,引起食物中毒。另外制品自身的酶在贮藏过程中也会产生一系列变化,若控制不当,肉制品就会变质。肉制品贮藏保鲜就是通过抑制或杀灭微生物,钝化酶的活性,延缓肉制品内部的变化,达到长期贮藏保鲜的目的。肉及肉制品贮藏保鲜的方法很多,如加热处理、干燥脱水.低温保藏、微波、辐照,高静压、高压脉冲,超声波等,在众多贮藏方法中低温保藏是应用最广泛,效果最好、最经济的方法之一,它是利用各种装置将食品的热量除去,使温度降到一定数值,以减轻食品受物理,化学变化及微生物繁殖的影响,在长时间内保持食品原有的色、香、味,形等品质的目的。低温贮藏时间长并且在低温加工中对肉制品的组织结构和性质破坏作用最小,低温保藏被认为是目前肉类贮藏的最优方法之一。 1.低温保藏的原理及方法分类 引起肉制品腐败变质的主要原因是微生物的繁殖、酶的作用及氧化作用。从理论上讲,肉制品贮藏保鲜就是杜绝或延缓这些作用的发

生. 食品低温保藏是利用低温技术将食品温度降低并维持食品在低温状态以阻止食品腐败,延长食品保存期。低温保藏不仅可以用于新鲜食品物料的保藏,也适用于食品加工品,半成品的保藏。 食品的腐败变质主要是由于微生物的生命活动和食品中的酶所进行的生物化学反应所造成的。低温导致微生物体内代谢酶的活力下降,使各种生化反应速率下降;低温使细胞内的原生质体浓度增加,黏度增加,影响细胞的新陈代谢,低温使细胞内的水分冻结形成冰结晶,冰结晶会对微生物产生机械损伤,而且由于部分水分的结晶也会导致生物细胞的原生质体浓度的增加,使得微生物细胞丧失活性。 低温对食品物料的作用主要是抑制吸附在食品表面及周围微生物的活动,对其他生物也有类似的作用。 低温可以降低活性食品的呼吸作用,延长贮藏期限;对于非活性食品,低温保藏条件下,食品中的水分生成的冰结晶会使微生物丧失活力而不能繁殖,酶的反应也会受到严重抑制,非活性食品体内的化学变化就会变慢。 其他反应如氧化作用等亦会随着温度的降低而显著减慢。 2.食品冷藏的方法 (1)空气冷藏法 是用空气作为冷却介质来维持冷藏库的低温,在食品冷藏过程中,冷空气以自然对流或强制对流的方式与食品换热,保持食品的低温水平。常用的方法有自然空气冷藏法和机械空气冷藏法。

病毒的超低温保存法

中华试剂网 试剂·原料·仪器 https://www.sodocs.net/doc/148515885.html, TEL: +86-21-34053660 Add: old humin Road, Shanghai 200237, P.R.C 病毒的超低温保存法 大多数微生物可用超低温保存,超低温保存法是适用范围最广的微生物保存法。需要复杂营养的微生物种,如用其他的贮存方法不能保持其活力(如植物的病原性真菌),通常可用超低温的方法保存(ATCC 1983;Halliday,Baker 1985)。此法是将冻存在小管或安瓿里的细胞以较慢的冷冻速率(1℃/分钟)冷冻,直至—150℃,再将这些小管贮存在—150~-196℃的液氮中。 超低温的冷冻保护剂不同于冻干法所用的冷冻剂。ATCC 常用一种由甘油(10%)、二甲基亚砜(5%)和培养液制成的混合剂保存多数的细胞株。这些化学试剂进入细胞内可避免内 膜的冷冻损伤。 贮存在低温容器内的细胞复苏时必须小心操作。当小管被加热时,所形成的冰晶会将细 胞杀死,正确操作就可避免这种事故。只要迅速将样品解冻就能减少活力的丢失,做法是:将封口的小管迅速放入37℃的水中,直至所有的冰融化,然后打开管口,将内容物移入培养基。 超低温保藏的微生物必须始终贮存在温度非常低的环境中,因此需要液氮罐。在长期贮存的过程中必须经常注意补充液氮。这种贮存方式比冻干法需要更多的经费,包括为了维持贮存温度所必要的劳动力和液氮等。 2.2 材料 病毒超低温保存所需材料有:热收缩塑料管(Nunc Cryoflex),液氮罐,防护手套和面罩,永久性记号笔,气体喷灯,装液氮的保温瓶。 2.3 方法 (1)剪一段两端各超出冷冻管长度2cm 的热收缩塑料管。 (2)将含有澄清病毒悬液(组织培养的上清培养基,或组织培养基内的细胞溶解产物均可)冰浴几分钟,用灭菌移液管将0.2ml 冰浴过的上清悬液分装到冷冻管内,并将盖子拧紧。 (3)将有病毒的冷冻管放入热收缩塑料管中部,插入正确的标签。 (4)用喷灯小心加热热收缩塑料管,并使之包住冷冻管。注意不要用太高的温度加热热收缩塑料管。 (5)再小心加热热收缩塑料管的两端,用大号镊子夹紧管的端口至完全密封。 (6)将密封好的冷冻管快速在装有液氮的保温瓶中冷冻(操作时要求戴面罩和手套)。(7)将冷冻过的冷冻管放入液氮罐中的格子内,同时记录样品的详细的存放位置、实验编号和存放日期等。 (8)需要用时,迅速从液氮罐内取出所需样品,并投入37℃水浴箱中解冻后,用解剖刀片在冷冻管的硅化垫圈处切开热收缩塑料管。拧开冷冻管的盖子时不需要除去热收缩塑料管。

超低温保存箱的使用注意点

超低温保存箱的使用注意点 超低温保存箱在出厂之前都是经过12小时以上的调试才发货的,今天超低温保存箱小编就和大家分享下,在使用的时候有些问题也是要注意的哦! 一、运输与存放事项 1.从车上卸下时,要用双叉车进行,并要充分注意安全,体型小的柜子当有人扶着;或用吊车吊下时,要在指定的部位用φ10mm以上的钢索或钢带,安全的吊下; 2.移动柜体时,切勿用力过猛或剧烈振动等,损坏底脚及其它部件; 3.使用前确保揭掉所有外包装保护膜,拆包后,必须安放在平整的地面上,安放水平; 二、超低温保存箱适用环境 柜体周边离墙和其他物距离应不小于30厘米,以保证冷凝器散热良好; 避免将柜体安放在漏雨、漏水或潮湿的场所; 确保使用环境干燥、通风良好,勿靠近热源,避免阳光直射,以免影响制冷效果; 超低温保存箱不可在易燃、易爆气体环境中使用,切勿在箱子附近喷射油漆、涂料等易燃物品,以免发生火灾。 三、超低温保存箱电气注意事项 1.为确保超低温保存箱正常工作,请务必使用220V电源,10A以上的三孔插座(尽量不要使用接线板插座); 2.超低温系列产品属于宽电压带设计,电源187V~242V/50Hz,超低温冷冻箱小编告诉大家,如果电压波动过大应加装1250VA以上的自动稳压器,以免损坏压缩机以及其它电器元件; 3.插拔电源线插头时,应用手持插头,不可拉扯电源线; 4.必须为超低温保存箱安装可靠的单独的接地线,接地线不得与煤气管、暖气管、水管连接,也不得借用单相电源的零线; 5.如需加长电源线,导线截面积≥1.5mm2,导线可以是单股,也可以是多股,严禁采用多用插座驳接。 四、储物注意事项 注:超低温冰箱属于保存设备,区别于速冻设备,切勿一次性放入相对太热的物品,否则可能会造成压缩机长时间工作不停机,温度不下降且容易烧毁压缩机; 1.将食品或物品存入柜子之前,须先将空箱通电并达到设定温度后,放入物品; 2.箱内一次性放入的物品或其它制品不超过箱内容积的三分之一,不可过挤,应保证有适当的间隙,以利于箱内冷气的流通; 3.如存放物品含水量较大,放置物品时适当减少每次放入量。 五、日常维护 1.箱体清洁:断电后,清洗超低温保存箱内外表面应用无腐蚀性的中性清洗剂,清洗后,用干布擦干。 注意:严禁用水直接冲洗箱子的内外表面,以免影响电器绝缘性能。严禁用开水、去污粉、酸、碱、汽油、酒精、苯类、腐蚀性清洁剂,硬毛刷进行清洁。 2.超低温保存箱长期运行时,门封处、柜口部及箱内侧壁容易积霜,霜层过厚会影响密封性能和制冷性能,请用除霜铲定期除霜,并用干布擦拭干净。

关于病毒的液氮罐超低温保存法介绍

关于病毒的液氮罐超低温保存法介绍 大多数微生物都可以用超低温来保存,超低温保存法是适用范围最广泛的微生物保存法。需要复杂营养的微生物种,如用其他的贮存方法不能保持其活力(如植物的病原性真菌),通常可用超低温的方法保存(ATCC1983;Halliday,Baker1985)。此法是将冻存在小管或安瓿里的细胞以较慢的冷冻速率(1℃/分钟)冷冻,直至—150℃,再将这些小管贮存在—150~-196℃的液氮中。 超低温的冷冻保护剂不同于冻干法所用的冷冻剂。ATCC常用一种由甘油(10%)、二甲亚砜(5%)和培养液制成的混合剂保存多数的细胞株。这些化学试剂进入细胞内可避免内膜的冷冻损伤。 贮存在低温容器内的细胞复苏时必须小心操作。当小管被加热时,所形成的冰晶会将细胞杀死,正确操作就可避免这种事故。只要迅速将样品解冻就能减少活力的丢失,做法是:将封口的小管迅速放入37℃的水中,直至所有的冰融化,然后打开管口,将内容物移入培养基。 超低温保藏的微生物必须始终贮存在温度非常低的环境中,因此需要液氮罐。在长期贮存的过程中必须经常注意补充液氮。这种贮存方式比冻干法需要更多的经费,包括为了维持贮存温度所必要的劳动力和液氮等。 1材料 病毒超低温保存所需材料有:热收缩塑料管(NuncCryoflex),液氮罐,防护手套和面罩,永久性记号笔,气体喷灯,装液氮的保温瓶。 2方法 (1)剪一段两端各超出冷冻管长度2cm的热收缩塑料管。 (2)将含有澄清病毒悬液(组织培养的上清培养基,或组织培养基内的细胞溶解产物均可)冰浴几分钟,用灭菌移液管将0.2ml冰浴过的上清悬液分装到冷冻管内,并将盖子拧紧。 (3)将有病毒的冷冻管放入热收缩塑料管中部,插入正确的标签。 (4)用喷灯小心加热热收缩塑料管,并使之包住冷冻管。注意不要用太高的温度加热热收缩塑料管。 (5)再小心加热热收缩塑料管的两端,用大号镊子夹紧管的端口至完全密封。 (6)将密封好的冷冻管快速在装有液氮的保温瓶中冷冻(操作时要求戴面罩和手套)。

第四章 食品低温处理和保藏

第四章食品低温处理和保藏 一、冷藏和冻藏的温度范围及常用温度: 冷藏是在高于食品物料的冻结点的温度下进行保藏,其温度范围:-2—15℃,常用温度是4—8℃。冻藏是指食品物料在冻结的状态下进行的贮藏,其温度范围:-2—-30℃,常用温度是-18℃。 二、食品的冷却方法及其特点。 常用的冷却方法有:1)强制空气冷却法:采用空气作为冷却介质来冷却食品物料。 一般采用鼓风机使冷却室内空气形成循环并使温度保持均匀。空气流速一般控制在 1.5—5.0米每秒,其特点是冷空气的温度、相对湿度和流速根据食品的种类确定,一般 不使食品冻结。2)真空冷却法:使被冷却的食品物料处于真空状态,并保持冷却环境的压力低于食品物料的水蒸汽压,造成食品物料中的水分蒸发,利用水的蒸发潜热降低食品的温度。真空冷却法适用于表面积大,通过水分蒸发就能迅速降温的食品物料。 3)水冷却法:将干净水或盐水经过机械制冷或机械制冷与冰制冷结合制程冷却水,然后用此冷却水通过浸泡或喷淋的方式冷却食物。因水的热容量比空气大得多,传热效率高,速度快,温度均匀,且可延长保藏期。 4)冰块冷却法:采用冰来冷却食物,利用冰融化时吸热作用来降低食品物料的温度。常用于鱼虾的冷却,由于冰融化时吸热大因此冷却用冰量不多。冰块愈小冷却速度愈快。其缺点是温度不均匀,且冰融成的水到处流动不易管理,现在主要作为其他冷却方法的补充。 三、如何确定冷藏的条件? 冷藏温度、空气的相对湿度和空气的流速是冷藏的重要条件因素。在实际应用中,这三者的具体条件是随着食品种类的不同、贮藏期的长短以及食品是否包装而确定的①贮藏温度,不仅指冷库内空气的温度,更重要的是指食品物料本身的温度。对于水果、蔬菜、带壳蛋一般以接近冰点为佳。但热带和亚热带果蔬有各自的最低贮藏温度。温度过低易出现低温伤害。②空气湿度过高,易使低温食品的表面产生冷凝水,可能因此引起果蔬霉烂或肉禽发粘长霉;相对湿度过低则水分蒸发快,造成食品表面干缩,带壳蛋气室增大,重量减轻。③在冷库中,应强制通风,使循环中的空气带走果蔬的呼吸热,并保持冷库各部的温度均匀一致。空气流速过低达不到上述目的,过高又加快食品的水分蒸发,尤其是相对湿度较低时影响更大。 四、冷藏食品回热应注意什么问题? 冷藏食品在冷藏结束后,一般应回到正常温度进行加工或食用。温度回升的过程称为冷藏食品的回热。冷藏食品回热应注意:(1)应注意控制使空气的露点低于食品物料的温度,防止回热时食品物料表面出现冷凝水(冒汗现象),造成微生物污染与繁殖。(2)保持热空气较高的相对湿度,防止回热时食品物料出现干缩,不仅影响食品物料的外观,而且会加剧氧化作用。 五、冻结方法、冻结速度和食品质量。 冷冻食品的质量与冻结速率、冻藏的温度与冻藏的时间有关。一般认为,速冻食品的质量高于缓冻食品。速冻的优势:(1)冻结时间短,形成的冰结晶细小而且均匀;(2)降温迅速,减少微生物的活动给食品物料带来的不良影响;(3)食品物料迅速从未冻结状态转化成冻结状态,减少浓缩损害。冻结速度与方法的选择应根据食品物料的种类、大小、包装情况等许多因素进行选择。一般认为冻结时食品物料从常温冻至中心温度低于-18℃,果蔬类不超过30min,肉食类不超过6h为速冻。 六、食品在冷却冷藏、冻结冻藏过程发生的变化。 答:1食品在冷却冷藏过程发生的变化:1)水分蒸发:对于果蔬,抑制果蔬的呼吸作用、影响新陈代谢;造成果蔬的调萎、新鲜度下降,果肉软化收缩、氧化反应加剧;

病毒的超低温保存

病毒的超低温保存法 大多数微生物可用超低温保存,超低温保存法是适用范围最广的微生物保存法。需要复杂营养的微生物种,如用其他的贮存方法不能保持其活力(如植物的病原性真菌),通常可用超低温的方法保存(ATCC 1983;Halliday,Baker 1985)。此法是将冻存在小管或安瓿里的细胞以较慢的冷冻速率(1℃/分钟)冷冻,直至—150℃,再将这些小管贮存在—150~-196℃的液氮中。 超低温的冷冻保护剂不同于冻干法所用的冷冻剂。ATCC 常用一种由甘油(10%)、二甲 亚砜(5%)和培养液制成的混合剂保存多数的细胞株。这些化学试剂进入细胞内可避免内膜的冷冻损伤。 贮存在低温容器内的细胞复苏时必须小心操作。当小管被加热时,所形成的冰晶会将细 胞杀死,正确操作就可避免这种事故。只要迅速将样品解冻就能减少活力的丢失,做法是:将封口的小管迅速放入37℃的水中,直至所有的冰融化,然后打开管口,将内容物移入培养基。 超低温保藏的微生物必须始终贮存在温度非常低的环境中,因此需要液氮罐。在长期贮存的过程中必须经常注意补充液氮。这种贮存方式比冻干法需要更多的经费,包括为了维持贮存温度所必要的劳动力和液氮等。 2.2 材料 病毒超低温保存所需材料有:热收缩塑料管(Nunc Cryoflex),液氮罐,防护手套和面罩,永久性记号笔,气体喷灯,装液氮的保温瓶。 2.3 方法 (1)剪一段两端各超出冷冻管长度2cm 的热收缩塑料管。 (2)将含有澄清病毒悬液(组织培养的上清培养基,或组织培养基内的细胞溶解产物均可)冰浴几分钟,用灭菌移液管将0.2ml 冰浴过的上清悬液分装到冷冻管内,并将盖子拧紧。(3)将有病毒的冷冻管放入热收缩塑料管中部,插入正确的标签。 (4)用喷灯小心加热热收缩塑料管,并使之包住冷冻管。注意不要用太高的温度加热热收缩塑料管。 (5)再小心加热热收缩塑料管的两端,用大号镊子夹紧管的端口至完全密封。 (6)将密封好的冷冻管快速在装有液氮的保温瓶中冷冻(操作时要求戴面罩和手套)。(7)将冷冻过的冷冻管放入液氮罐中的格子内,同时记录样品的详细的存放位置、实验编号和存放日期等。 (8)需要用时,迅速从液氮罐内取出所需样品,并投入37℃水浴箱中解冻后,用解剖刀片在冷冻管的硅化垫圈处切开热收缩塑料管。拧开冷冻管的盖子时不需要除去热收缩塑料管。

微生物保存——冷冻真空干燥保存法03

冷冻真空干燥保藏法 1、原理 冷冻干燥保藏菌种法可克服简单保藏方法的不足。利用有利于菌种保藏的—切因素,使微生物始终处于低温、干燥、缺氧的条件下,因而它是迄今为止最有效的菌种保藏法之一。保藏菌种范围广、时间长、存活率高。 主要步骤为:①将待保藏菌种的细胞或孢子悬液悬浮于保护剂(如脱脂牛奶)中;②在低温(-45℃左右)下使微生物细胞快速冷冻;③在真空条件下使冰升华,以除去大部分的水。 2、材料 菌株 待保藏的各种菌种。 试剂 2% HCl;脱脂牛奶(20%乳液)、50%甘油。 器具 培养皿、5mlEP管、接种环、大三角瓶、高压蒸汽灭菌锅、牛皮纸、酒精灯、恒温培养箱、振荡培养箱、离心机、酒精棉球、安瓿管、标签、移液枪、普通棉、、冻干机。 培养基:LB液体培养基、LB固体平板培养基。 3、主要流程 备安瓿管→备脱脂乳→制菌悬液→分装→预冻→真空干燥→封管保藏 4、操作方法 4.1准备安瓿管 安瓿管先用2%HCl浸泡过夜,再用水洗多次,用蒸馏水冲洗三次,烘干。管口塞上棉花,用牛皮纸包扎,灭菌备用。(121℃灭菌30min) 4.2制备脱脂乳 使用脱脂奶粉配兑脱脂牛奶,配成20%乳液,灭菌(112℃灭菌5min),并做无菌试验后备用。 4.3制菌悬液 ①平板划线:将活化后的菌株用接种环进行平板划线,对菌种进行纯化。倒置37℃恒温培养过夜。 ②增菌培养:挑取单个菌落接种于液体培养基(3ml左右)中,振荡培养。 ③甘油保存:菌液:甘油=0.75:0.75ml的比例,对菌株进行甘油保存(2管)。 ④离心:将EP管放入离心机中进行离心,去掉培养基。

⑤配菌悬液:将1ml无菌脱脂牛奶直接加到离心后的EP管内,轻轻搅乱使其均匀地悬浮在牛奶内成悬浮液。一般要求制成的菌液浓度达108~1010个为宜。 4.4分装 用移液枪将悬浮液分装入安瓿管底部,每支安瓿管的装量约为0.2毫升(需4管) 塞上棉花,并贴上标签。 4.5预冻 将分装好的安瓿管在冰箱冷冻室进行预冻。 4.6真空干燥 预冻以后,将安瓿管放入真空器中,开动真空泵进行干燥。(冻干机的使用方法) 4.7封管 封管前将安瓿管装入歧管;真空度抽至1.33Pa(0.01毫米汞拄)后,再用火焰熔封,封好后,要用高频火花器检查各安瓿管的真空情况。如果管内呈现灰蓝色光,证明保持着真空。检查时高频电火花器应射向安瓿管的上半部。 采用酒精喷灯,封管。 4.8保藏 做好的安瓿管应放置在低温避光处保藏。(4℃冰箱保藏) 5 注意事项 (1)安瓿瓶不易进水,清洗时拿少量安瓿瓶慢慢倾斜,使其管内浸入盐酸;用蒸馏水洗时亦如此;塞棉花时注意松紧适宜。 (2)脱脂乳最好在使用头一天配制好灭菌;灭菌需注意温度不能过高,在112℃灭菌10分钟即可;当压力降为0后,应尽快将其拿出,防止高温破坏其营养成分(灭菌后颜色发生变化的不可用)。 (3)对菌液进行离心前,因质量不等,需对管进行称重,用水进行配平。(4)离心后倒培养基需十分注意,防止将沉淀的细菌倒掉。 (5)倒入脱脂牛奶后,需要枪头将菌悬液混匀。 (6)分装时,需至少三个人配合,一个吸菌液,另一个塞棉花,还有一个贴标签。 (7)采用酒精喷灯进行封管时,烧的温度要适宜。 1株细菌:2管甘油保存(1.5ml50%甘油),4管安瓿瓶保存(1ml脱脂牛奶) 即需要:1/4平板,1个5mlEP管,3mlLB培养基,2个1.5mlEP管,4个安瓿瓶,1.5ml50%甘油,1ml脱脂牛奶,4个标签

第三章食品低温处理和保藏

第三章食品的低温处理和保藏 第一节概述 食品的低温保藏,即降低食品温度,并维持低温水平或冻结状态,以延缓或阻止食品的腐败变质,达到食品的远途运输和短期或长期贮藏的目的的保藏方法。 利用低温来保藏食品是人类在实践中所获得的成就,公元前一千多年,我国就有利用天然冰雪来贮藏食品的记载。人们很早就会利用天然冰来降低食品的温度,以延长食品的贮藏期。但用天然冰雪来保藏食品的方法受到地区和季节的限制,人们曾经千方百计地贮藏冰雪,来延长对天然冰雪的利用时间。利用天然冰雪保藏食品是一种原始的冷藏方法,天然冰的相对温度为0℃,对大多数食品来说,在此温度下无法达到长期贮藏的目的。 冻结食品的产生起源于19世纪上半叶冷冻机的发明。19世纪,美国人David,Boyle和德国人Carl von Linde 分别发明了以氨为制冷剂的压缩式冷冻机。从此人工冷源开始逐渐代替了天然冷源,使食品的冷冻,冷藏的技术手段发生了根本性的变革。 1877年,Charles Tellier(法)将氨-水吸收式冷冻机用于冷冻阿根廷的牛肉和新西兰的羊肉并运输到法国,这是食品冷冻的首次商业应用,也是冷冻食品的首度问世。用冷冻机来直接冻结和冷藏食品有许多优越性,它不受冰融化的限制,可以长期保藏食品;能够根据食品的冻结和冷藏是的需要对温度进行调节和控制;省去了放冰的位置,因而大大增加了保藏食品的数量。因此将冷冻机直接用于食品冷冻的方法迅速得到推广。 尽管人工制冷技术的出现是19世纪的事情,食品冷冻技术进入商业化应用却是20世纪的事情。2 0世纪初,美国建立了冻结食品厂。20世纪30年代,出现带包装的冷冻食品。二战的军需,极大地促进了美国冻结食品业的发展。战后,冷冻技术和配套设备不断改进,预制冷冻食品(Prepared frozen food)和欲调理食品(Precooked frozen food)的出现,高效率的解冻加热设备如微波炉的日益普及,使冷冻食品在国外已成为方便食品和快餐的重要支柱。 20世纪60年代,发达国家构成完整的冷藏链。许多冷藏库、冷藏车、冷藏船等相继出现,成为贮藏和运输易腐水平的重要手段。速冻技术和设备是不断改进,使大部分冷冻食品已能保持新鲜食品原有的风味和营养价值,受到消费者的欢迎。商场中的冷冻食品陈列柜和民用电冰箱的普及,使得冷冻食品在流通领域的质量得到充分的保证。冷冻食品进入超市。冷冻食品的品种迅猛增加。 我国在20世纪70年代,因外贸需要冷冻蔬菜,冷冻食品开始起步。80年代,家用冰箱和微波炉的普及,销售用冰柜和冷藏柜的使用,推动了冷冻冷藏食品的发展;90年代,由于人民生活水平的提高和受到外来食品的影响,速冻食品工业得到迅速发展。冷链初步形成;品种增加,产量大幅度增加。1995年速冻的产量达到240万吨左右,年增长速度为25%。我国速冻食品中的中式传统点心如肉包、豆沙包、小笼包、水饺、虾饺、汤圆、春卷、烧卖、八宝粥等占相当大的份额。 一、食品冷冻的目的 新鲜的食品在常温下(20℃左右)存放,由于附着在食品表面的微生物和食品内所含的酶的作用,使食品的色、香、味变差,营养价值降低。如果食品在常温下久放,就会腐败变质,以至完全不能食用。除了微生物和酶引起的变质外,还有非酶引起的变质,如油脂的氧化酸败等。低温能够抑制微生物的生长繁殖和食品中酶的活性,降低非酶因素引起的化学反应的速率,因而能够延长食品的保

低温保藏在食品中地应用

低温保藏在食品中的应用 随着科技的快速发展,人们对低温的研究越来越深入,应用也越来越广泛。低温加工中对肉制品的组织结构和性质破坏作用最小,低温贮藏时间长,效果好,认为是目前肉类贮藏的最优方法之一。不仅如此,低温保藏在乳制品中的应用也非常广泛。 肉制品中含有丰富的营养物质,是微生物繁殖的优良场所,如果肉制品控制不当,外界微生物就会污染肉制品使其腐败变质,失去食用价值,严重的还会对人体产生有害的毒素,引起食物中毒。另外制品自身的酶在贮藏过程中也会产生一系列变化,若控制不当,肉制品就会变质。肉制品贮藏保鲜就是通过抑制或杀灭微生物,钝化酶的活性,延缓肉制品部的变化,达到长期贮藏保鲜的目的。肉及肉制品贮藏保鲜的方法很多,如加热处理、干燥脱水.低温保藏、微波、辐照,高静压、高压脉冲,超声波等,在众多贮藏方法中低温保藏是应用最广泛,效果最好、最经济的方法之一,它是利用各种装置将食品的热量除去,使温度降到一定数值,以减轻食品受物理,化学变化及微生物繁殖的影响,在长时间保持食品原有的色、香、味,形等品质的目的。低温贮藏时间长并且在低温加工中对肉制品的组织结构和性质破坏作用最小,低温保藏被认为是目前肉类贮藏的最优方法之一。1.低温保藏的原理及方法分类 引起肉制品腐败变质的主要原因是微生物的繁殖、酶的作用及氧化作用。从理论上讲,肉制品贮藏保鲜就是杜绝或延缓这些作用的发生.

食品低温保藏是利用低温技术将食品温度降低并维持食品在低温状态以阻止食品腐败,延长食品保存期。低温保藏不仅可以用于新鲜食品物料的保藏,也适用于食品加工品,半成品的保藏。 食品的腐败变质主要是由于微生物的生命活动和食品中的酶所进行的生物化学反应所造成的。低温导致微生物体代酶的活力下降,使各种生化反应速率下降;低温使细胞的原生质体浓度增加,黏度增加,影响细胞的新代,低温使细胞的水分冻结形成冰结晶,冰结晶会对微生物产生机械损伤,而且由于部分水分的结晶也会导致生物细胞的原生质体浓度的增加,使得微生物细胞丧失活性。 低温对食品物料的作用主要是抑制吸附在食品表面及周围微生物的活动,对其他生物也有类似的作用。 低温可以降低活性食品的呼吸作用,延长贮藏期限;对于非活性食品,低温保藏条件下,食品中的水分生成的冰结晶会使微生物丧失活力而不能繁殖,酶的反应也会受到严重抑制,非活性食品体的化学变化就会变慢。 其他反应如氧化作用等亦会随着温度的降低而显著减慢。 2.食品冷藏的方法 (1)空气冷藏法 是用空气作为冷却介质来维持冷藏库的低温,在食品冷藏过程中,冷空气以自然对流或强制对流的方式与食品换热,保持食品的低温水平。常用的方法有自然空气冷藏法和机械空气冷藏法。 (2)气调冷藏法

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