YY-T1182-2010核酸扩增检测用试剂(盒)
YY/T 1182-2010
核酸扩增检测用试剂（盒）
1围
本标准规定了核酸扩增检测试剂（盒）【以下简称“试剂（盒）”】的术语和定义、命名和分类、技术要求、试验方法、标识、标签和说明书、包装、运输和贮存等。
本标准适用于核酸扩增检测试剂（盒）的质量控制。核酸扩增检测试剂（盒）应包括核酸提取、核酸扩增及产物分析试剂组份，如核酸扩增检测试剂（盒）不含有核酸提取组份，应由生产企业说明或指定提取试剂（盒）。
本标准不适用于基因分型、基因芯片和病毒基因分型/突变检测用试剂（盒）及血源筛查的试剂（盒）。
2规性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 21415-2008 体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性
3术语和定义
以下术语和定义适用于本文件。
3.1 聚合酶链反应polymerase chain reaction,PCR
聚合酶链反应或多聚酶链反应是一种对特定的DNA或RNA片段在体外进行快速扩增的方法，由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成。
3.2 PCR杂交（膜上、板上）PCR hybridization
具有一定同源序列的两条核酸单链（DNA或RNA）可以通过氢键的方式，按碱基互补配对原则相结合，探针结合于特定核酸序列或PCR产物的杂交过程可以在液相中进行，也可以将其中一个固定在固相载体上进行。
3.3 PCR 电泳 PCR electrophoresis
根据PCR产物分子质量和所带电荷的不同在电场中进行分离的技术。
3.4实时荧光PCR real-time polymerase chain reaction,PCR
在PCR过程中利用荧光染料释放的荧光定量的变化直接反映出PCR扩增产物量的变化，荧光信号变量与扩增产物变量成正比，并通过对荧光的采集和分析以达到对原始模板量进行分析的PCR。
注：在每个循环中检测扩增产物是否可被检测。
3.5测量系统的线性 linearity of a measuring system
给出的测量结果与样品中被测量的值直接成比例的能力。
注1：对与体外诊断医疗器械，线性相关于测量结果在一给定测量围经校正或线性化以后的测量示值。
注2：线性通过测量包含被测量已知配方或其间相对关系（不必绝对知道）的样本来评估。当测量结果相对被测量绝对或相对数值作图时，所画曲线对直线的符合程度及线性度的量度。
3.6样本线性 linearity of series diluted samples
对高浓度样本进行系列稀释，得到的检测浓度对数值与稀释比例之间相关。
3.7分析特异性 analytical specificity
测量程序只测量被测量的能力。
3.8测量精密度 precision of measurement
在规定条件下，相互独立的测量结果间的一致程度。
注1：测量精密度不能用于被测量有关的数字值表示，在指定目的下只能以“足够”或“不足”进行描述。
注2：精密度的程度通常与精密度相反的测量不精密度统计量表示，如标准差和变异系数。
注3：给定测量程序的“精密度”可以根据特定的精密度条件进行分类。“重复性”与基本不变的条件有关，常称为“序列精密度”或“批精密度”。“重现性”与条件改变有关，如：时间、不同实验室、操作者和测量系统（包括不同校准和试剂批号）。
3.9计量学溯源性 metrological traceability
通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。
注1：通过校准传递方案确定的（参考）测量程序实现每一步比较。
注2：溯源性有几种类型。本标准使用术语“计量学溯源性”。
3.10检测限 detection limit,limit of detection
样品中以一定概率可被申明与零有差异的被测量的最低值。
注1:也被描述为“最低检测限”（minimum detectable concentration）(或剂量或值)。
注2：有时被不正确地指作分析灵敏度。
注3：本标准中的最低检测限为区别于零的不低于95%可信区间的最低浓度。
3.11定量限 limit of quantitation
给定分析程序能定量检测分析物的最小浓度或量。
3.12阈值循环数Ct（Cp）cycle threshold,crossing point
实时监测扩增过程中，反应管的荧光信号到达指数扩增时经历的循环周期数。主要的计算方式是以扩增过程前3到15个循环的荧光值的10倍标准差为阈值，当荧光值超过阈值时的循环数则为阈值循环数（Ct）。
3.13基因型 genotype
一个有机体的遗传组成，即明确界定具体等位基因位点的基因组。
3.14标internal control
在同一反应管中与靶序列共同扩增的一段非靶序列分子，其目的是鉴别仪器故障、试剂因素、聚合酶活性因素或样本中存在抑制物等造成的结果不理想的原因。
4命名和分类
4.1命名
***核酸（DNA或RNA）扩增检测试剂（盒）(方法学)。
4.2分类
可按如下方式分类：
a)根据核酸扩增检测分析采用的方法学原理分为：实时荧光PCR试剂（盒）、
RT-PCR试剂（盒）、PCR杂交检测试剂（盒）、PCR-电泳法检测试剂（盒）等。
b)根据对试验结果的判定可分为：定量和定性。
5技术要求
5.1外观
外观应满足以下条件：
a)试剂（盒）应符合生产企业规定的外观要求；
b)试剂（盒）应组份完全，包装外观清洁、无泄漏、无破损；标志、标签字迹
清楚。
5.2溯源性
生产企业应根据GB/T 21415-2008及有关规定提供所用核酸标准品的来源、溯源的赋值过程和相应要求，以及测量不确定度等容。
5.3 测量系统的线性
5.3.1样本线性
线性相关系数︱r︱≧0.980。
5.3.2试剂（盒）系列标准品线性
试剂（盒）标准品应不少于4个浓度，宜包含线性围上限和下限，线性相关系数︱r︱≧0.980。
5.4准确度
5.4.1定性试剂
对阳性参考品进行测定，检测结果应为阳性。
5.4.2定量试剂
准确度应符合如下要求之一：
a)检测国家标准品（或参考品）/国际标准品（或参考品），绝对偏差不超过±
0.5个对数数量级；
BIOG核酸提取试剂盒操作步骤说明
BIOG 游离DNA 提取试剂盒操作步骤 说明 运输条件：常温运输 货 号：51019:50次反应 51020:100次反应 储存条件：室温（15-25℃），消化液、DNA Carrier 请于-20℃存放 产品特点 试剂盒组成 组分 50次 100次 吸附柱和收集管 各50个 各100个 裂解液 18mL 36 mL 洗涤液A 21mL 42 mL 洗涤液B 9 mL 18 mL 洗脱液 3mL 6 mL 消化液 1.2 mL 2.4 mL DNA Carrier 0.24 mL 0.48 mL 说明书 1份 1份 产品介绍 BIOG cfDNA Easy Kit 是常州百代生物科技股份有限公司研制的专门用于提取血清、血浆等游离DNA 的试剂盒。BIOG cfDNA Easy Kit 采用了最新的优质进口离子膜，裂解液和洗脱液经过多次优化，能高效地分离DNA 。提取得到的DNA 较其它品牌的同类试剂盒产量更大，纯度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染，可以直接应用于PCR 、荧光定量PCR 和各种酶切试验等。 操作步骤 1. 请自行准备：无水乙醇、1.5mL 离心管。 2. 取出洗涤液，按以下操作： a) 洗涤液A ：21mL 加入9mL 无水乙醇；42mL 加入18mL 无水乙醇。 b) 洗涤液B ：9mL 加入21mL 无水乙醇；18mL 加入42mL 无水乙醇。 c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。 3. 取1.5mL 离心管，加入200μL 样本，4μL DNA Carrier 混合均匀，加入300μL 裂解液及20μL 消化液，振荡混匀，56℃水浴10 分钟。 4. 加入1000μL 无水乙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA 的提取与后续实验。 5. 将吸附柱放入收集管内，将760μL 上述溶液转入吸附柱内，静置2 分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液； 6. 将吸附柱放回收集管内，将剩余760μL 溶液转移至吸附柱内，重复步骤5。 7. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A 至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。 8. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B 至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。 9. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，离去残留的洗涤液。 10. 取出吸附柱，放入新的1.5 mL 离心管内，加入30-50 μL 洗脱液，静置3 分钟，12,000 rpm 4℃ 离心2 分钟，收集DNA 溶液。提取的 DNA 即可用于下一步实验或-20℃保存。 注意事项： 裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛， 请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。 储存、运输和有效期 本试剂盒可常温运输，室温（15-25℃）保存，有效期为12个月，消化液、DNA Carrier 请于-20℃存放，避免反复冻融。 质量控制 本产品经严格的质量检验证明，无生物污染 注意 ：本产品仅用于科研 BIOG 游离RNA 提取试剂盒操作步骤说明 运输条件：常温运输 ◎操作简便快速，可在半小时内获得理想的DNA ； ◎提取DNA 纯度高，无抑制剂，A260/A280为1.7-1.9； ◎产量更高，较国内同类产品高出20%； ◎可用于血清、血浆等游离样本中DNA 的提取； ◎不含苯酚和氯仿等有毒溶剂，安全无毒。
UU核酸检测试剂盒产品使用说明书
解脲脲原体（UU）核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法）说明书 【产品名称】通用名称：解脲脲原体（UU）核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 英文名称：Detection Kit for Nucleic Acid of Ureaplasma urealyticum (PCR-fluorescence probing) 【包装规格】 32人份/盒 【预期用途】本试剂盒用于定性检测尿道、生殖道分泌物拭子样本中的解脲脲原体核酸成分，主要用于解脲脲原体感染的临床辅助诊断。根据相关文献研究，解脲支原体有14 株脲原体标准血清型可分为微小脲原体（Ureaplasma parvum，UP）1、3、6、14 和解脲脲原体（Ureaplasma urealyticum，UU）2、4、5、7、8、9、10、11、12、13，其中UP为条件致病菌，致病性与其含量有关，且普通人也有携带少量UP。UU是引起非淋球菌性尿道炎、阴道炎等病症的主要致病菌之一，也是引起输卵管炎、盆腔炎、慢性前列腺炎、流产、产后热等的重要病原菌之一。目前，临床上常用的脲原体检测方法有液体培养和核酸检测，但其并不能鉴别出其病菌是UP还是UU。 【检验原理】本试剂盒选用针对解脲脲原体（UU）特异性基因片段设计特异引物及特异Taqman荧光探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA摸板发生特异性结合，在PCR延伸反应过程中，Taq酶的外切酶活性将5′端荧光基团从探针上切割下来，使之游离于反应体系中，从而脱离了3′端荧光淬灭基团的屏蔽，即能接受光刺激而发出可供仪器检测的荧光，从而实现在全封闭反应体系中对解脲脲原体（UU）核酸的自动检测，发出荧光信号的强度与UU-DNA的量呈正相关。 【主要组成成份】 注：不同批号试剂盒中各组份不能互换。 【储存条件及有效期】试剂应储存在-20℃保存，产品有效期为12个月，未使用完的试剂继续冷冻保存不影响其稳定性，但试剂反复冻融不得超过3次。 生产日期、有效期至：见标签字样。 【适用仪器】具有FAM、JOE荧光检测通道的ABI 7300/7500、ABI 7500 Fast、LightCycler 480等实时荧光定量PCR仪。 【样本要求】 1．使用藻酸钙拭子、普通棉拭子或涤纶拭子采集尿道、生殖道部位带柱状上皮细胞的分泌物样本，应当选用国家批准生产的一次性使用的男性拭子或女性拭子，拭子应当包括套管、棉签杆、塞子，棉签杆与塞子都应连接牢固。 1.1尿道：对男性患者，先用生理盐水清洗尿道口，将男用取材拭子插入尿道内1-2cm，稍用力转动，保留数秒钟再取出，以采集到粘膜上皮细胞。 对女性患者，可低着耻骨联合轻轻按摩尿道后，用同男性相似的方法取材。 1.2宫颈：取材前用温水或生理盐水湿润扩阴器，应避免使用防腐剂和润滑剂。如果宫颈口外面的分泌物较多，先用无菌棉拭清除过多的分泌液， 将女用取材拭子插入宫颈管内2-3cm，稍用力转动，保留数秒，采集阴道分泌物。 1.3阴道：对于子宫切除的妇女和青春期前女孩可采用阴道样本。将取材拭子置于阴道后穹窿10-15s，采集阴道分泌物。如果处女膜完整，则从 阴道口取材。
核酸检测试剂生产及质量控制技术指导原则复习进程
核酸检测试剂生产及质量控制 技术指导原则（征求意见稿） 核酸扩增检测技术泛指以扩增DNA或RNA为手段，从而筛查特定基因的检测技术，如聚合酶链反应（PCR）、连接酶链反应（LCR）、转录依赖的扩增反应（TMA）等。核酸检测试剂是基于核酸扩增检测技术的体外诊断试剂，目前已经用于病原体检测、特定疾病的早期诊断和体内物质的型别鉴定等不同领域。为规范核酸检测试剂的生产及质量控制，特制定本技术指导原则，并将根据核酸检测技术的发展状况适时进行修改。 一、基本要求 1、核酸类检测试剂的生产企业应获得《医疗器械生产许可证》。 2、核酸类检测试剂的生产企业应具有与其技术要求相适应的人员、环境、设施和仪器设备等条件，建立专用实验室，配备满足核酸提取和扩增检测以及操作人员防护所需的设备。实验室应当严格分区，人员和物品应当单向流动，以最大限度地防止实验过程中样品之间的污染和避免扩增产物的污染。 3、核酸类检测试剂的生产企业应按照《体外诊断试剂生产实施细则（试行）》的要求，建立相应的质量管理体系，并应通过《体外诊断试剂生产企业质量管理体系考核评定标准（试行）》的考核。
4、核酸类检测试剂的生产单位应当对试剂的使用范围作出明确规定，并经国家药品管理部门批准。引物设计应当符合核酸检测设计的要求，扩增体系应设定合理的内标和外标，试剂须设置抗污染的特定措施，扩增产物须进行确证研究。 5、核酸类检测试剂的原材料应制订相关质量标准，应符合现行《中国药典》或《中国生物制品主要原辅料质控标准》的要求。使用未列入上述标准的化学试剂，应不低于分析纯。 二、原材料 应提供主要原材料如引物、探针、企业参考品或标准品等的选择与来源、制备过程、质量分析和质量标准等的相关研究资料。如果主要原材料来自市场（从其他单位购买），应提供的资料包括：对物料供应商审核的相关资料、购买合同、供货方提供的质量标准、出厂检定报告，以及该原材料到货后的质量检验资料。 核酸类检测试剂的包装材料和耗材应无DNase和RNase污染。 1、dNTP 脱氧三磷酸核苷，核酸的组成成分，包括：dATP、dUTP、d GTP、dCTP和dTTP。应为HPLC纯、PCR级，无DNase和RNase 污染。-20℃保存。 2、引物 由一定数量的核苷酸构成的特定序列，通常采用DNA合成仪人工合成，合成后经聚丙烯酰胺凝胶电泳或其他适宜方法纯化。
细菌感染性疾病的直接核酸诊断试验
细菌感染性疾病的直接核酸诊断试验 Florence Paillard, PhD, and Craig S. Hill, PhD 准确和快速的诊断是及时采取治疗措施和防止感染性疾病扩散的关键。理想的感染性疾病的诊断试剂应该能够给临床医生提供快速、灵敏度高和特异性强的实验结果。检测试剂如果灵敏度不高则可能导致疾病的漏检，使患者不能得到及时的治疗，还可造成疾病的扩散；同样，试剂如果特异性较差则可能出现假阳性结果，假阳性的出现不仅会导致不必要的治疗，还可能给人们带来心理上的阴影。不论对个人还是公共卫生部门，因检测方法的不可靠所导致的错误诊断都有可能造成严重的后果。令人欣慰的是，近年来分子诊断技术的发展已使得人们可以研制出比传统方法更为灵敏、特异和快速的用于感染性疾病的诊断试剂。 一、细菌感染性疾病诊断方法述评 数十年来，检测细菌的的标准方法是培养（液体和/或固体培养基）和染色，如用于结核分枝杆菌的抗酸染色和淋病奈瑟菌的革兰染色。其它一些方法还包括采用抗体技术检测细菌抗原的酶免疫测定（EIA）和直接荧光抗体技术（DFA）等。 采用分子生物学技术检测微生物核酸成分的核酸检测（NATs）技术的发展为临床诊断方法带来了革命性的变化。目前用于微生物鉴定的NA Ts主要有两种类型：培养确认检测试剂和直接检测试剂。培养确认的NA Ts试剂主要用来对培养基上生长的微生物进行确认；直接NA Ts试剂可以直接检测标本中的微生物，无需培养。与培养确认探针试剂相比，由于直接NATs试剂完全不需要培养这一步骤，所以可以更快地给出检测结果；直接NATs试剂一般来说其准确性也高于直接免疫检测方法。美国FDA批准的第一个非放射性直接NA Ts试剂是Gen-Probe PACE试剂，用来检测衣原体和淋球菌感染。 对直接NATs试剂而言，一个至关重要的改进在于加入了目标扩增步骤，即探针检测前将目标序列进行扩增。第一个用于沙眼衣原体检测的核酸扩增试剂（NAA Ts）于1993年获得了FDA的批准。此后，随着核酸扩增技术的不断改进，出现了可以将样品成分的抑制作用降为最小的第二代NAA Ts，它的操作流程也得到了相应改进。 本文将就已经商品化并得到FDA批准的用于检测五种细菌感染的直接NATs试剂进行述评。这五种感染为：链球菌性咽炎、肺结核（TB）、阴道炎、衣原体（CT）和淋球菌（GC）感染。 二、直接NAT方法学 非扩增直接NATs（表1）：大多数商品化的直接NA Ts试剂都采用特异性针对出现在被测生物体内的一段独有的核酸序列（目标序列）的核酸探针。这种探针通常采用荧光或化学发光标记。所测样品需进行处理以使其能够释放出核酸。检测时，标记的DNA探针可以和靶序列特异性结合，形成一个稳定的探针-目标序列杂交体。该杂交体被从非杂交探针中分离或区别开后，标记物散发出信号。 在直接检测临床标本中的微生物时，NATs可以采用不同的方式来提高试剂的灵敏度。Gen-Probe采用的一项专利技术是将rRNA作为检测目标，rRNA在大多数微生物体内是以数以千计的拷贝量存在的。例如，沙眼衣原体中的rRNA可达2000拷贝，而DNA中有用的靶序列在每个细菌体内的量仅有一个或数个拷贝。因此以rRNA为检测目标可以大大提高试剂的灵敏度。除此之外，Gen-Probe由于在杂交检测中还采用了杂交保护检测（HPA）方法，使其试剂的灵敏度得以进一步提高。检测rRNA和HPA技术的结合使得第一个DNA探针检测试剂被临床实验室广泛用于培养的确定和直接检测。 第二个用于提高DNA探针检测灵敏度的方法是对信号分子进行放大，如杂交捕获试剂（Hybrid Capture assay）。它采用针对RNA:DNA杂交体的抗体来检测杂交形成，每个抗体都带有酶标记物。每个酶分子都会产生多种着色分子用于与之结合的每个杂交分子。这种从
核酸类检测试剂的原材料生产工艺和半成品
附件 3 核酸扩增法检测试剂注册技术审查指导原则 一、前言 本指导原则主要针对核酸扩增类检测试剂的主要原材料、生产工艺及反应体系、产品质量控制等环节提出指导性技术要求。 本指导原则系对核酸扩增法检测试剂的一般要求，申请人应依据产品特性确定其中的具体内容是否适用，若不适用，需详细阐述其理由及相应的科学依据。 本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制订的，随着法规和标准的不断完善、科学技术的不断发展，其相关内容也将进行适时的调整。 二、适用范围 本指导原则适用于核酸扩增法检测试剂的注册技术审查，其他类核酸检测试剂可参照相关内容。 三、基本要求 （一）基本原则 1.核酸扩增类检测试剂的生产企业应获得《医疗器械生产许可证》。研制、生产用的各种原料、辅料等应制定其相应的质量标准，并应符合有关法规的要求。 2．试剂生产企业应具有与其技术要求相适应的人员、厂房、设施和仪器设备以及适宜的生产环境，配备满足核酸提取和扩增检测以及操作人员防护所需的设备。建立专用实验室，实验室应当严格分区，人员和物品应当单向流动，以
最大限度地防止实验过程中样品之间的污染和避免扩增产物的污染。生产用于病原微生物核酸检测的生产企业应建立符合生物安全要求的设施和措施。 3.试剂生产企业应按照《体外诊断试剂生产实施细则（试行）》的要求，建立相应的质量管理体系，并应通过《体外诊断试剂生产企业质量管理体系考核评定标准（试行）》的考核。 4.核酸扩增类检测试剂的引物设计应当符合核酸检测设计的要求，扩增体系应设定合理的内标和外标，试剂需设置抗污染的特定措施，扩增产物须进行确证研究。 5.企业使用新型原材料时，应提供与通行原材料比对研究结果及相关资料。使用未列入上述标准的化学试剂，应不低于分析纯。 （二）原材料应提供主要原材料如引物、探针、企业参考品或标准品等的选择与来源、制备过程、质量分析和质量标准等的相关研究资料。若主要原材料为企业自己生产，其生产工艺必须相对稳定；如主要原材料来自市场（从其他单位购买），应提供的资料包括：对物料供应商审核的相关资料、购买合同、供货方提供的质量标准、出厂检定报告，以及该原材料到货后的质量检验资料。主要原材料（包括生产工艺）或其供应商发生变更，应依据国家相关法规的要求进行变更申请。 核酸类检测试剂的包装材料和耗材应无脱氧核糖核酸酶DNase）和核糖核酸酶RNase）污染。 1.脱氧三磷酸核苷（dNTP） 核酸的组成成分，包括：dATP、dUTP、dGTP、dCTP和dTTP。应为高效液相色谱HPLC）纯、PCR级，无DNase和RNase污染。一20C保存。 2.引物 由一定数量的dNTP 构成的特定序列，通常采用脱氧核糖核酸 （DNA ）合成仪人工合成，合成后经聚丙烯酰胺凝胶电泳或其他适宜方法纯化。 冻干粉，序列正确，合成量应达到试剂生产要求。纯度应达到电泳级
YYT核酸扩增检测用试剂盒
YY/T1182-2010 核酸扩增检测用试剂（盒） 1范围 本标准规定了核酸扩增检测试剂（盒）【以下简称“试剂（盒）”】的术语和定义、命名和分类、技术要求、试验方法、标识、标签和说明书、包装、运输和贮存等。 本标准适用于核酸扩增检测试剂（盒）的质量控制。核酸扩增检测试剂（盒）应包括核酸提取、核酸扩增及产物分析试剂组份，如核酸扩增检测试剂（盒）内不含有核酸提取组份，应由生产企业说明或指定提取试剂（盒）。 本标准不适用于基因分型、基因芯片和病毒基因分型/突变检测用试剂（盒）及血源筛查的试剂（盒）。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T21415-2008体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性 3术语和定义 以下术语和定义适用于本文件。 3.1聚合酶链反应polymerasechainreaction,PCR 聚合酶链反应或多聚酶链反应是一种对特定的DNA或RNA片段在体外进行快速扩增的方法，由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成。 3.2PCR杂交（膜上、板上）PCRhybridization 具有一定同源序列的两条核酸单链（DNA或RNA）可以通过氢键的方式，按碱基互补配对原则相结合，探针结合于特定核酸序列或PCR产物的杂交过程可以在液相中进行，也可以将其中一个固定在固相载体上进行。 3.3PCR电泳PCRelectrophoresis 根据PCR产物分子质量和所带电荷的不同在电场中进行分离的技术。 3.4实时荧光PCRreal-timepolymerasechainreaction,PCR
核酸检测实验室应急预案SICOLAB
核酸检测实验室应急预案SICOLAB SICOLAB主要分7个步骤： 织织体系建设、生物安全事件分类、事件报告、应急处置方案、应急措施、预案管理 一、参考依据 《中华人民共和国传染病防治法》 《中华人民共和国国境卫生检疫法》 《中华人民共和国突发事件应对法》 《突发公共卫生事件应急条例》 《病原微生物实验室生物安全管理条例》 《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》 《人间传染的病原微生物名录》、《医疗机构临床实验室管理办法》 《国家突发公共卫生事件应急预案》 《广州市突发公共卫生事件应急预案》 各地区卫生系统病原微生物实验室生物安全事件应急预案相关标准 二、预案基本内容及建设程序 1、织织体系建设 医务部：对感染者进行医疗救治及生物安全事件的应急处理工作。 预防保健科、医院感染管理科：医学观察及预防用药，并上报卫生行政部门及CDC机构。 感染科：对感染者和可疑接触者进行临床诊治、实施医学观察及预防用药。 临床检验中心及各实验室：成立生物安全应急小分队；检测工作；现场清洁消毒工作。保卫科：对发生泄漏的现场进行封锁，并按有关规定向公安部门报告。 总务科、设备科、药学部：储备、提供相应的防护用品、设备、必备的救助、消毒药品，协助有关科室进行环境的清洁、消毒工作等。 2、生物安全事件分类 重大生物安全事件：实验室人员确诊感染《人间传染的病原微生物名录》规定的第一、
二类病原微生物，或出现有关症状、体征，临床诊断为疑似感染《人间传染的病原微生物名录》规定的第一、二类病原微生物及样本漏失、流失事件。 一般生物安全事件：实验室人员确诊感染《人间传染的病原微生物名录》规定的第三类病原微生物，或出现有关症状、体征，临床诊断为疑似感染《人间传染的病原微生物名录》规定的第三类病原微生物及样本漏失、流失事件。 生物恐怖事件：病原微生物实验室设施被蓄意破坏；感染性样本或其他感染性材料被盗；在实验室内故意播撒高致病性病原微生物菌(毒)种或样本；病原微生物实验室出现不明原因或人为造成的火灾、断电、爆炸事故。 3、事件报告 报告单位：医院各科室 时限：2小时内向同级卫生局 报告内容：医院名称、实验室名称、事件发生地点、发生时间、涉及病原体名称、涉及的地域范围、感染或暴露人数、发病人数、死亡人数、密切接触者人数、发病者主要症状与体征、可能原因、已采取的措施、初步判定的事件级别、事件的发展趋势、下一步应对措施、报告单位、报告人员及通讯方式等。 4、应急处置方案 即关闭事件发生的实验室； 对周围已经污染或可能污染的环境进行封闭、隔离； 组织专业消毒人员消毒现场； 核实在相应潜伏期时间段内进出实验室人员及密切接触感染者人员的名单； 对被感染人员进行医学观察，对在事件发生时间段内、相应潜伏期时间段内进出实验室人员进行医学观察，必要时进行隔离和预防接种；提供微生物实验室布局、设施、设备、实验人员等情况；配合有关部门做好感染者救治及现场调查和处置工作。 如怀疑生物恐怖事件，要立即同时上报天河区卫生局、天河区公安局和国家安全部门。 5、应急措施 实验室生物安全事件发生后，立即组织生物安全应急小分队成员和相关专家穿用防护装进入现场了解事件信息、处理污染、评估危害。离开现场时，必须脱去防护装、严格手消毒，不得将污染、可疑污染物带离控制区域，消除污染扩散可能性。
SICOLAB核酸检测实验室设计建设重点
SICOLAB核酸检测实验室设计建设重点核酸检测实验室在系统运行中必须保证实验室内的负压和压力梯度稳定，为防止任何一个误动作或故障的发生，在极短的时间内诊断故障和应急处理尤为重要。 1、电源保证。为确保安全，实验室在工作期间不得停电，应考虑多线（源头）供电，并充分考虑最大供应量和有足够的负荷余量，设置应急电力供应系统，做到三路以上电源 保障。 ①双路供电：应确保供电来自2个不同的上级变电站。 ②备用发电机组：在双路供电发生故障或断电时提供电力保障。主要保障实验室通风空调系统、负压通风设备、自动控制系统、压缩空气系统、实验室关键工艺仪器设备等用电， 在双路供电断开时可自动切换。 ③UPS：保障在主供电源断电而备用发电机启动和电压稳定前（约10～30s）的不间断供电，与主供电源并联设置。 2、通风系统保障。通风系统是生物安全实验室最核心的设备，维持稳定的负压和压力梯度与通风系统的性能密切相关，通风系统一旦出现故障，稳定的负压和压力梯度很快就会被打破，导致实验室正压或超负压，造成危害生物因子的外逸，甚至围护结构的损坏，导致意外事故的发生。因此，送排风机组均需一用一备，送排风机的容量一定要有余量，当出现防压力故障时，可通过电动风量调节阀以及调节送排风量，维持稳定的负压和压力梯度。 3、（必要时）生命维持系统。为实验人员提供稳定、舒适的呼吸空气；一旦断供，正压服压力将失衡，实验人员将出现头晕、憋气症状；一旦出现负压，实验人员将可能遭受危害生物因子的污染。因此，生命维持系统压缩空气供应装置必须为2套独立的双空气气源，保持可靠的一用一备运行状态和应急供应状态，并有压力报警装置，压缩空气储罐容量要考虑在压缩机故障情况下保证实验人员至少维持15min的用量（正常退出实验室的时间）。
YY-T1182-2010核酸扩增检测用试剂(盒)
YY/T 1182-2010 核酸扩增检测用试剂（盒） 1围 本标准规定了核酸扩增检测试剂（盒）【以下简称“试剂（盒）”】的术语和定义、命名和分类、技术要求、试验方法、标识、标签和说明书、包装、运输和贮存等。 本标准适用于核酸扩增检测试剂（盒）的质量控制。核酸扩增检测试剂（盒）应包括核酸提取、核酸扩增及产物分析试剂组份，如核酸扩增检测试剂（盒）不含有核酸提取组份，应由生产企业说明或指定提取试剂（盒）。 本标准不适用于基因分型、基因芯片和病毒基因分型/突变检测用试剂（盒）及血源筛查的试剂（盒）。 2规性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 21415-2008 体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性 3术语和定义 以下术语和定义适用于本文件。 3.1 聚合酶链反应polymerase chain reaction,PCR 聚合酶链反应或多聚酶链反应是一种对特定的DNA或RNA片段在体外进行快速扩增的方法，由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成。 3.2 PCR杂交（膜上、板上）PCR hybridization 具有一定同源序列的两条核酸单链（DNA或RNA）可以通过氢键的方式，按碱基互补配对原则相结合，探针结合于特定核酸序列或PCR产物的杂交过程可以在液相中进行，也可以将其中一个固定在固相载体上进行。 3.3 PCR 电泳 PCR electrophoresis 根据PCR产物分子质量和所带电荷的不同在电场中进行分离的技术。 3.4实时荧光PCR real-time polymerase chain reaction,PCR
20170915XXXX游离核酸提取试剂盒(货号：LS-R-N-004-05-3-0)测试报告
******外周血游离核酸提取试剂盒 货号：LS-R-N-004-05-3-0 测试报告 测试人员： 测试时间： 一、主要内容： 测试广东南芯医疗外周血游离核酸提取试剂盒游离核酸提取得率和质量。 实验过程中使用的是两个样本。 对实验过程中的cfDNA纯化产物进行质控（浓度及4200目的条带）。 二、实验结论 1、Qubit测定1号样本、2号样本浓度均低于0.5ng/mL。溶解体系为50μL，1号样本、2号样本均无法计算cfDNA的提取量。 2、4200检测：HSD1000， 1号样本在185bp处有主峰，2号样本在182bp处有主峰。 3、实验过程遇到的问题及解决方法 （1）问题：试剂盒说明书上适用于3mL的血浆，本次实验使用1mL血浆进行，并且蛋白酶K、BufferBEO用量根据倍数减少。 疑问： 1mL血浆的蛋白酶K用量为20uL，对裂解效果是否有影响？ 建议联系该试剂盒技术支持进行咨询，关于提取条带中500bp以上条带的来源。 除上述问题外，其余实验步骤完全依照试剂盒要求进行。 三、实验结果 1、测试样本2个，实验步骤完全依照试剂盒要求进行，具体信息见下表：
样本名称样本编号cDNA浓度 李万才1＜0.5ng/mL 陈秀英2＜0.5ng/mL 4200检测图谱如下 1号样本的图谱： 2号样本的图谱： 结果分析：
Qubit测定1号样本、2号样本浓度均低于0.5ng/mL。溶解体系为50μL，1号样本、2号样本均无法计算cfDNA的提取量。 1号样本在185bp处有主峰，2号样本在182bp处有主峰。 四、实验方案 cfDNA的提取： 1、实验前准备：往BufferBEE中加入异丙醇；往BufferBEZ1和Buffer BEZ2中加入无水乙醇；加入体积参照试剂瓶上的标签。 2、准备血浆样品：从-80℃冰箱中取出样品1号李万才和样品2号陈秀英，置于室温水槽中溶解。 3、选择10ml的离心管，依次加入20μLProteinase K、1mL血浆。 4、再加入0.8mL Buffer BEO，涡旋震荡混匀30s。 5、在60℃孵育30min。 6、向裂解物中加入1.8mL Buffer BEE，涡旋震荡混匀15-30s。 7、冰上孵育5min。 8、取出吸附柱，做好标志。分多次将步骤7得到的裂解物加到吸附柱上，10000rpm，1min离心，去除废液。直至裂解物完全过柱。 9、向吸附柱中加入600μL Buffer BEZ1，12000rpm离心1min，倒掉废液，将吸附柱放回收集管上。 10、向吸附柱中加入750μL Buffer BEZ2，12000rpm离心1min，倒掉废液，将吸附柱放回收集管上。 11、向吸附柱中加入750μL无水乙醇，12000rpm离心1min，倒掉废液，将吸附柱放回收集管上。 12、12000rpm离心2miin，以去除吸附柱中残余液体。
核酸提取技术信息和市场分析
核酸提取方法、试剂、仪器 核酸包括DNA、RNA两种分子，在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在，核酸提取的主要步骤为：细胞裂解破碎→核酸提取→核酸纯化。可应用在临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等多种领域。 一、细胞裂解方法总结 1.物理方式：煮沸法、玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法、匀浆法 2.化学方式：表面活性剂（SDS法）、碱裂解法 3.生物方式：酶法（溶菌酶、蛋白酶K等） 二、提取方法总结 1.浓盐法：利用RNA和DNA在盐溶液中溶解度不同，将二者分离 2.有机溶剂抽提法：有机溶剂作为蛋白变性剂，同时抑制核酸酶的降解作用 3.密度梯度离心法：利用不同内容物密度不同的原理分离各种内容物 4.吸附材料结合法： ①硅质材料：高盐低PH值结合核酸，低盐高PH值洗脱 把释放出的核酸特异地吸附在特定的硅载体上，这种载体只对核酸有较强的亲和力和吸附力，对其他生化成分如蛋白质、多糖、脂类则基本不吸附，因而在离心时被甩出柱子。 把吸附在特异载体上的核酸用洗脱液洗脱下来，分离得到纯化的核酸。 ②磁珠：磁珠微粒包裹上不同基团可吸附不同的目的物，从而到达分离的目的 超顺磁性氧化硅纳米磁珠，该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性，在Chaotropic盐（盐酸胍、异硫氰酸胍等）和外加磁场的作用下，能从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中的DNA和RNA分离出来， ③阴离子交换树脂低盐高PH值结合核酸，高盐低PH值洗脱 现较常用的核酸提取采用的方法有： 煮沸法、离心柱纯化法、磁珠法、 （液相热压法查询不到相关资料和产品）
xxx实业发展公司核酸诊断试剂项目立项申请书(总投资14160万元)
核酸诊断试剂项目立项申请书 第一章基本信息 一、项目承办单位基本情况 （一）公司名称 xxx实业发展公司 （二）公司简介 顺应经济新常态，需要公司积极转变发展方式，实现内涵式增长。为此，公司要求各级单位通过创新驱动、结构优化、产业升级、提升产品和 服务质量、提高效率和效益等路径，努力实现“做实、做强、做大、做好、做长”的发展理念。 公司依托集团公司整体优势、发展自身专业化咨询能力，以助力产业 提高运营效率为使命，提供全方面的业务咨询服务。 上一年度，xxx投资公司实现营业收入25671.47万元，同比增长 24.59%（5066.89万元）。其中，主营业业务核酸诊断试剂生产及销售收入为21614.10万元，占营业总收入的84.20%。
根据初步统计测算，公司实现利润总额6749.35万元，较去年同期相比增长827.69万元，增长率13.98%；实现净利润5062.01万元，较去年同期相比增长885.01万元，增长率21.19%。 二、项目概况 （一）项目名称 核酸诊断试剂项目 （二）项目选址 某某新区 （三）项目用地规模 项目总用地面积37425.37平方米（折合约56.11亩）。 （四）项目用地控制指标 该工程规划建筑系数65.60%，建筑容积率1.17，建设区域绿化覆盖率7.31%，固定资产投资强度180.95万元/亩。 （五）土建工程指标 项目净用地面积37425.37平方米，建筑物基底占地面积24551.04平方米，总建筑面积43787.68平方米，其中：规划建设主体工程27226.49平方米，项目规划绿化面积3199.98平方米。 （六）设备选型方案 项目计划购置设备共计138台（套），设备购置费3701.11万元。 （七）节能分析
核酸检测试剂生产及质量控制技术指导原则
附件3： 体外诊断试剂生产及质量控制技术指导原则 ——核酸检测试剂生产及质量控制技术指导原则 核酸扩增检测技术泛指以扩增DNA或RNA为手段，从而筛查特定基因的检测技术，如聚合酶链反应（PCR）、连接酶链反应（LCR）、转录依赖的扩增反应（TMA）等。核酸检测试剂是基于核酸扩增检测技术的体外诊断试剂，目前已经用于病原体检测、特定疾病的早期诊断和体内物质的型别鉴定等不同领域。为规范核酸检测试剂的生产及质量控制，特制定本技术指导原则。国家药品监督管理部门将依据科学技术发展的需要，适时组织修订。 一、基本要求 （一）核酸类检测试剂生产用的各种原料、辅料等应制定其相应的质量标准，并应符合有关法规的要求。 （二）核酸类检测试剂的生产企业应具备相应的专业技术人员、仪器设备以及适宜的生产环境（实验室应当严格分区，人员和物品应当单向流动，以最大限度地防止实验过程中样品之间的污染和避免扩增产物的污染），获得《医疗器械生产许可证》；同时，应按照《体外诊断试剂生产实施细则（试行）》的要求建立相应的质量管理体系，形成文件和记录，加以实施并保持有效运行；还应通过《体外诊断试剂生产企业质量管理体系考核评定标准（试行）》的考核。企业应对试剂的使用范围作出明确规定，并经国家药品管理部门批准。
（三）核酸类检测试剂在研制时，应当遵循科学、规范的原则，引物设计应当符合核酸检测设计的要求，扩增体系应设定合理的内标和外标，试剂须设置抗污染的特定措施，扩增产物须进行确证研究。 （四）核酸类检测试剂生产过程中所用的各种材料及工艺，应充分考虑可能涉及的安全性方面的事宜。 （五）生产和质量控制的总体目标：保证试剂使用安全、质量稳定、工艺可控、检测有效。 二、原材料 应提供主要原材料如引物、探针、企业参考品或标准品等的选择与来源、制备过程、质量分析和质量标准等的相关研究资料。如果主要原材料来自市场（从其他单位购买），应提供的资料包括：对物料供应商审核的相关资料、购买合同、供货方提供的质量标准、出厂检验报告，以及该原材料到货后的质量检验资料。如果主要原材料（包括工艺）或其供应商有变更，应依据国家相关法规的要求进行变更申请。 核酸类检测试剂的包装材料和耗材应无DNase和RNase污染。 1．dNTPs 脱氧三磷酸核苷，核酸的组成成分，包括：dATP、dUTP、dGTP、dCTP和dTTP。应为HPLC纯、PCR级，无DNase和RNase污染。-20℃保存。 2．引物 由一定数量的核苷酸构成的特定序列，通常采用DNA合成仪人
promegaDNA组织提取试剂盒
PromegaDNA提取试剂盒的使用方法 一、使用前的准备工作 Proteinase k solution:用无核酸酶的水把蛋白酶K稀释成20mg/ml，按照自己的每次平均使用量分装，储存在-20℃，融化时要在冰上融化，反复冻融会降低Proteinase K的活性 消化液配制：在tube中混合下面各种反应物，使用前放在冰上。 Wizard SV Wash solution（洗脱液）的配制：按照瓶子标签上要求的量，添加95%的乙醇到Wizard sv solution 中，做上标记，室温保存。 PromegaDNA提取试剂盒的使用方法步骤（离心机法） 0、将Nuclease-Free Water 放在65℃的水浴锅中 1、剪取动物组织20mg，分成相同的2份，放在1.5ml的离心管中， 样品中决不能含有软骨组织，否则会阻塞柱子
2、每份样品中添加275ul先前准备的消化液，确保消化液能够完 全覆盖样品，如果不能覆盖，将样品再剪得小点 3、把样品放到55℃的水浴锅或加热块中孵育16-18小时（过夜）， 蛋白酶K消化过夜后2000g离心，取上清液到1.5ml的离心管 中。 4、向样品中添加250ul的Wizard SV Lysis Buffer,漩涡混匀 5、处理后的产物尽快进行下面的操作，如果不能进行下面的操作， 应该把它放在-70℃下保存，使用时应该冻融或者放在55℃温 和解冻 6、将收集管做上标记，将柱子放在收集管上，把整个1.5ml离心 管内的溶解产物转移到柱子中。13000g离心3分钟，目的是让 基因组吸附在柱子中，如果仍有残留液体，可以重新13000g 离心一分钟 7、倒掉收集管中的液体，把柱子重新放回收集管上 8、检查一下乙醇是否已经添加到Wizard SV Wash Solution中 9、每个样品中添加650ul的Wizard SV Wash Solution（真空抽 滤要加800ul），13000离心1分钟 10、去除溶液，将柱子重新放置在集合管中 11、重复9-10步3次，（一共需要洗4次） 12、洗剂结束后，清空收集管中的水13000g离心2分钟 13、去掉收集管，取相同数量的1.5ml的离心管做上标记，将柱子 将在 1.5ml的离心管上，添加250ul65℃的Nuclease-Free
核酸检测实验室装修关键要点和要求
RT-PCR是检测新型冠状病毒核酸最广泛、最准确的筛选和确认方法。大规模的核酸检测将不可避免地引起相关机构和单位重视建立标准化的临床PCR实验室。 如何避免污染是临床基因扩增实验室装修设计的关键问题，因此实验室的布局、空调通风系统设计、风量控制等都是围绕这一核心问题展开的。 核酸检测实验室装修要求： 核酸检测实验室有设计理念、装修要求、净化空调系统、通风、自控、工艺设备等几个关键点。 材质：隔墙及吊顶——净化彩钢板、地面——同质透芯PVC地板、净化实验室专用门、观察窗要求： 1.墙面：光洁、不产尘积尘、耐腐蚀，易清洁消毒、无缝隙。 2.地面：防静电、耐腐蚀、无缝隙、无渗漏。 3.阴阳角：均用圆弧角密封处理。 4.门：必须设置自动互锁(机械或电子)。 净化空调、通风系统、自控系统要求： 1.避免交叉污染，采用全新风空调系统。 2.样品制备区严格按照BSL-2设计施工。 3.排风系统全部按照要求采用高效过滤器净化。 4.气流组织：采用上送下排形式。 5.压力梯度控制通过微压差计及精密自控系统控制。 6.实验室入口处显示房间内各项指标参数，并设置偏离报警。
工艺设备要求： 1.实验台下部均留空，无死角。 2.全部采用不锈钢304制作。 3.样品制备区设置洗眼装置，必要时应有应急喷淋装置。 4.非接触式操作理念(感应式水龙头、感应式自动门、互锁传递窗等)。 核酸检测实验室装修关键点： 1.平面布局：不论是组合式还是分散式布置的PCR实验室，各功能房间均宜设置独立缓冲间 2.区域空气流向：为避免交叉污染，PCR实验室空气流向必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。 3.通风空调：为避免交叉污染，各功能用房内空气不能掺混。混合式PCR实验室应采用新风直流空调系统，当采用新风系统有困难时，各区域的空气只能在自己的房间内循环。 4.生物安全：按照新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版）的规定，2019-nCoV病原体暂按照第二类病原微生物进行管理，则样本植被区宜为负压或加强型P2实验室，核酸操作应在生物安全柜内进行。 核酸检测关键技术措施包括： 绝对负压（避免室内潜在污染外泄） 气流组织（室内定向流，从低污染风险区流向高污染风险区）
体外诊断试剂的分类
体外诊断试剂（IVD）分类 1 根据产品风险程度的高低，依次分为三类、二类、一类产品。 （一）第三类产品： 1．与致病性病原体、抗体以及核酸等检测相关的试剂； 2．与血型、组织配型相关的试剂； 3．与人类基因检测相关的试剂； 4．与遗传性疾病相关的试剂； 5．与麻醉药品、精神药品、医疗用毒性药品检测相关的试剂； 6．与治疗药物作用靶点检测相关的试剂; 7．与肿瘤标志物检测相关的试剂; 8．与变态反应（过敏原）相关的试剂。 （二）第二类产品：除已明确为第三类、第一类的产品，其他为第二类产品，主要包括： 1．用于蛋白质检测的试剂； 2．用于糖类检测的试剂； 3．用于激素检测的试剂； 4．用于酶类检测的试剂； 5．用于酯类检测的试剂； 6．用于维生素检测的试剂； 7．用于无机离子检测的试剂； 8．用于药物及药物代谢物检测的试剂； 9．用于自身抗体检测的试剂；
10．用于微生物鉴别或药敏试验的试剂； 11．用于其他生理、生化或免疫功能指标检测的试剂。 （三）第一类产品： 1．微生物培养基（不用于微生物鉴别和药敏试验）； 2．样本处理用产品，如溶血剂、稀释液、染色液等。2 按药品进行管理的体外生物诊断试剂 一、按药品进行管理的体外生物诊断试剂包括： 1．血型、组织配型类试剂； 2．微生物抗原、抗体及核酸检测类试剂； 3．肿瘤标志物类试剂； 4．免疫组化与人体组织细胞类试剂； 5．人类基因检测类试剂； 6．生物芯片类； 7．变态反应诊断类试剂。 按医疗器械管理的体外试剂 1．临床基础检验类试剂； 2．临床化学类试剂； 3．血气、电解质测定类试剂； 4．维生素测定类试剂； 5．细胞组织化学染色剂类； 6．自身免疫诊断类试剂； 7．微生物学检验类试剂。
核酸类检测试剂盒
临床核酸类(DNA/RNA)检测试剂盒应用及推广 乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒（HCV）、人类免疫缺陷综合症病毒(HIV)是对构成对人类构成严重威胁的主要病毒，乙肝是由HBV引起的，全球约有3.5亿HBV携带者，占总人口5%，其中亚洲和非洲所占比例较重。我国是病毒性肝炎的高发区，平均年发病率为120-140/10万。中国有1.2亿乙肝携带者，占全球的1/3，其中约1/4将发展为慢性肝病，部分患者可发展为肝硬化，甚至演变为肝癌。 丙型肝炎是由HCV引起的，HCV慢性感染可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌(HCC)，据WHO统计，全球HCV感染率约为3%，估计全球有1.7亿人感染HCV，是HBV携带者人数的50%，HIV感染者的5倍。HCV携带者在我国较HBV（乙肝）携带者为少，在健康人群中抗HCV阳性率为0.7%-3.1%。 艾滋病是由HIV引起的,截止2004年底，全球约有3940万人感染HIV/艾滋病，其中95%生活在发展中国家，到2010年前，世界126个中、低收入国家还将有4500万人感染艾滋病病毒，其中40%在亚洲和太平洋地区。2003年底，我国有48%的县报告了HIV/AIDS，现存HIV/AIDS约84万，全人群感染率为0.07%。由于HIV、HCV、HBV有相似的传播途径，因此，共感染情况比较常见。 相关的临床或实验室诊断方法：目前，临床实验室诊断方法主要是酶联免疫检测（EIA）。随着第三代乃至第四代EIA试剂的出现，显著增加了筛查和检测的灵敏度，在很大程度上减少了血源传播病毒性疾病发生的概率。例如在美国，HCV的感染率已从80年代的每年大约180000例，减少到现在的每年大约30000例。新感染的减少主要是由于在1990年引入了丙型肝炎病毒输血EIA筛查以及此后几年EIA试剂的更新换代。目前在美国，存在被当前的血清学检测方法所遗漏的HCV阳性供体比例大约为1:103000，相应的比例在德国为1:200000，在英国为1:250000。在发展中国家，被当前的血清学检测方法所遗漏的HIV 阳性供体比例约为1-2百万分之一，HBV 阳性供体的感染风险则最高，达十万分之一。我国也于九十年代初在全国血站中开始对献血员进行HCV、HBV、HIV酶联免疫法检验，有力地控制了输血相关病毒的感染。EIA方法具有简便、快速、成本低、适于大量样品同时检测的优点，但究其方法学而言，检测的是间接的免疫指标而非病毒本身，如HCV抗体、HIV抗体的筛查，检测的是机体在病毒入侵后产生的抗体，在时间上具有滞后性，即所谓的窗口期漏检，所以血清学诊断方法存在其固有的缺限。窗口期长短随机体免疫机能不同存在个体差异，有少数感染者感染后机体所产生的抗体滴度有可能低于免疫学检测线以下，甚至不产生抗体。一般认为，HCV的窗口期约为66-82天，HBV和HIV的窗口期分别是大约