无菌取样操作规程

取样阀的无菌取样操作

1.目的

进行微生物分析时，需要从取样阀或管道口取样品。

2. 原则

取样时将取样管路中存有的样品充分放出, 以便所取的样品均匀且具有代表性。用酒精及火焰灭菌保证取样口无菌，同时避免取样口及其附近的微生物对样品造成污染。

3. 安全和环境说明

3.1遵守实验室常规安全制度。额外的预防参看化学品MSDS。

3.2遵守工厂例行、规定的安全需要。进入有二氧化碳存在或可能存在的狭窄容器或区域时要特别小心。在可能开始运转的机器里面或周围取样时要遵守工厂安全方针，如：包装灌酒机、压盖机、卷封机、传送带等。在相应区域取样时关注安全。

4.操作

4.1仪器和设备

4.1.1盛装70%酒精的洗瓶。

4.1.2无菌的接收样品装置：带塞（螺旋盖）的瓶、试管。

4.1.3用于包扎带塞瓶口、试管口的牛皮纸及线绳，锡箔纸。

4.1.4火源。

4.1.5 70%酒精棉。

4.1.6洁净的取样筐。

4.1.7收集废液的容器。

4.1.8无菌取样针

4.2 试剂

4.2.1 70%酒精：用1000 ml量筒量取95%酒精750 ml，再用蒸馏水补充至

1000ml，充分混匀。(如酒精浓度大于或小于95%，酒精量需计算后量

取)

用酒精计对酒精进行标定，标定范围70+2%，记录标定结果。室温密闭贮存，有效期3个月。

4.3程序

4.3.1大取样口

4.3.1.1打开取样阀，使样品流出约10-20秒。用废液桶接收流出的液体，防止样品污染环境。注意控制流速, 避免使液体飞溅出来。

4.3.1.2关闭取样阀，用70%酒精喷洒取样阀内外，冲净阀内残留物,并让其接触至少25 秒。点燃、灼烧取样口。注意不要过度灼烧，取样阀上残余的酒精烧完即可。

4.3.1.3如果该取样阀的使用频次较低，如周检或者月检，可以先用70%酒精棉擦拭取样阀内外，

再同4.3.1.2操作。

4.3.1.4打开取样阀，排放掉样品约10秒。使待取样品有足够的流出速度，但不会回流接触取样口下边的外表面。

4.3.1.5 迅速打开接收样品的装置，根据样品量接收适量的样品，迅速塞紧塞封口，关闭取样阀。做样品标识（注明取样时间、样品名称）。接收样品时不要将瓶口、试管口靠在取样阀上。

4.3.1.6 分别用水和70%酒精冲洗取样阀内外，用清水清洁取样区域。

4.3.2 普通小取样口：

4.3.2.1 打开取样阀，样品流出约10-20秒，将取样管路中存有的样品充分放出(根据实际情况，计算出一个最佳放样量的经验值)，以便所取的样品均匀且具有代表性。用废液桶接取流出的样品，防止样品四处流淌，污染周围环境4.3.2.2 关闭取样阀。用70%的酒精对取样阀内、外进行冲洗。酒精与取样阀至少接触25秒，使酒精充分作用。点燃、灼烧取样口。注意不要过度灼烧，将取样阀上残余的酒精烧完即可。

4.3.2.3 如果该取样阀的使用频次较低，如周检或者月检，可以先用70%酒精棉擦拭取样阀内外，再同2操作。

4.3.2.4 打开取样阀，排放样品约5-10秒，冷却取样阀。

4.3.2.5 迅速打开接收样品的装置，根据样品接种量接收适量的样品，迅速塞紧封口，关闭取样阀。做样品标识（注明取样时间、样品名称）。接收样品时，不要将瓶口、试管口或取样袋靠在取样阀上，应在取样阀下方1—2厘米处。分别用水、70%酒精冲洗取样阀内外，用清水清洁取样区域。

4.3.3 卫生取样阀

4.3.3.1 打开卫生取样阀口盖子，取出取样阀内的酒精棉球，用70%酒精喷洒取样阀内外，冲净阀内残留物，并让其接触至少25秒。

4.3.3.2 取出以灭菌的取样针检测两端针头是否将锡箔纸戳穿。

4.3.3.3 拿掉取样瓶上的包装纸，迅速将取样针的一头穿过透气塞插入取样瓶内，另一头迅速插入取样阀内接收适量的样品。接收样品时不要样品或泡沫接触到瓶塞。

4.3.3.4 样品接取完后，先拔出取样阀里的针头，再拔出瓶塞里的针头，瓶口包上包扎纸系上包扎绳，做样品标识（注明取样时间，样品名称）。

4.3.3.5 分别用水和70%酒精冲洗取样阀内外，待至少25秒后在取样阀内放置一个洁净的70%酒精棉球，并将取样阀盖拧紧。