链替代扩增反应研究进展

PCR实验室的基本设备与要求

P C R实验室的基本设备 与要求 Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】

PCR实验室的基本设备与要求 临床基因扩增检验实验室管理暂行办法 第一章总则第一条为规范临床基因扩增检验实验室管理，保证临床基因扩增检验质量，使临床诊断和治疗更为科学、合理，特制定本办法。第二条临床基因扩增检验技术指以临床诊断治疗为目的，以扩增检测DNA或RNA为方法的检测技术，如聚合酶链反应（PCR）、连接酶链反应（LCR）、转录依赖的放大系统（TAS）自主序列复制系统（3SR）和链替代扩增（SDA）等。第三条本办法适用于开展临床基因扩增检验的实验室。临床基因扩增检验实验室设立在二级以上医院。第四条临床基因扩增检验实验室必须使用经国家药品监督管理局批准的临床检验试剂开展临床基因扩增检验项目。第五条卫生部临床检验中心（以下简称卫生部临检中心）和省、自治区、直辖市临床检验中心（以下简称省临检中心）负责对所辖行政区域内临床基因扩增检验实验室的质量监督管理工作。第二章实验室设置和验收第六条拟设置临床基因扩增检验实验室的医疗机构按照《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》（见附件）筹建实验室；筹建完成后，由法定代表人向卫生部临检中心提出技术验收申请。申请时需提交以下材料：（一）《医疗机构执业许可证》复印件；（二）可行性研究报告；1、拟设临床基因扩增检验实验室机构的所在地医疗卫生资源状况、本机构的基本情况、对临床基因扩增检验的需求以及临床基因扩增实验室运行的预测分析；2、拟设临床基因扩增检验实验室的设置平面图；3、拟设临床基因扩增检验实验室将开展的检验项目、实验设备条件和有关技术人员资料第七条卫生部临检中心和省临检中心共同组织相关专业的专家组（以下简称专家组），按照《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》对提出申请的临床基因扩增检验实验室进行技术验收。验收完成后，在20日内将验收报告寄送至申请机构。第八条经专家组技术验收合格的医疗机构将本办法第六条规定的材料及专家组验收报告送至

辣椒素作为饲用抗生素替代品的研究进展.

中国饲料 2011年第 23期基金项目 :国家高技术研究发展 (863 计划 (2006AA10Z412; 科技部科技型中小企业创新基金 (06C26222120113; 大连市外国专家局引智项目(2010-Z51 *通讯作者 近年来 , 植物活性物质因具有天然、高效的特点受到广泛关注。辣椒中的辣椒素是一种极度辛辣的香草酰氨类生物碱 , 是辣椒辛辣味和药物功能的主要来源。近年来 , 越来越多的学者开始探讨辣椒素作为抗生素替代品的可行性 , 并做了许多尝试 , 发现辣椒素具有抗菌、抗炎、增强食欲、促进消化、提高免疫力等特点 (Kym 等 , 2009; Hwang 等 , 2008; Harada 和 Okajima , 2007。本文就辣椒素作为一种饲用抗生素的替代品的研究进展进行综述。 1辣椒素的来源及性质 红辣椒于 6~7月果红 , 成熟的红辣椒含有 丰富的辣椒素 , 约占辣椒干重的 0.2%~1.0%, 辣椒素包括辣椒碱、二氢辣椒碱、降二氢辣椒碱、高二氢辣椒碱、高辣椒素等 14种同系物 , 各物质辣度 (以史高维尔指数 Scoville Scale 表示不尽相同 (见表 1。辣椒素不溶于水 , 易溶于甲醇、乙 醇、苯、丙酮、氯仿等有机溶剂中 , 在高温下产生刺激性气体 (王剑平等 , 1996。 2辣椒素的吸收和利用 动物自身不能合成红辣椒中含有的辣椒素 ,

必须通过注射或从饲料中摄入。不同的给药途径吸收速度不同。大鼠静脉注射辣椒素 2mg/kg, 3 min 后进入脊髓和肝脏 , 并通过血脑屏障进入脑 组织。脊髓和肝脏中辣椒素的浓度是血液中的 3~ 7倍。皮下注射辣椒素 50mg/kg, 10min 后就分布 到各组织中 , 30min 后肾脏达到高峰浓度 1000 ng/g。其他组织也在 5h 后达到高峰浓度 , 如血液、脑组织、脊髓中的辣椒素含量为 500ng/g, 但是肝脏中辣椒素的含量较低 , 大约是 50ng/g, 这可能 与肝脏中辣椒素在不断的代谢有关 (Saria 等 , 辣椒素成分含量 /% 史高维尔指数 辣椒碱 6916000000二氢辣椒碱 2216000000降二氢辣椒碱 79100000高二氢辣椒碱 18600000高辣椒碱 1 8600000 表 1 辣椒素的组成及史高维尔指数 [摘要 ]辣椒素作为天然植物来源的抗菌活性成分 , 具有安全、营养、高效广谱抗菌性和不产生抗药性的特征 , 在 饲料领域作为饲用抗生素替代品有极高的研究和应用价值。本文主要就辣椒素作为饲用抗生素天然替代品的研究进展作一综述。

常见的代替抗生素的中成药

抗生素替代中成药 一、呼吸系统炎症常用药 1、蒲地蓝消炎片：清热解毒，抗炎消肿。用于疖肿，腮腺炎，咽炎，淋巴腺炎，扁桃腺炎 等的治疗。 2、牛黄解毒片：清热解毒，通便，消炎，一般应用于流感、咽炎及肺部感染。 3、双黄连口服液：清热解毒。用于风热感冒发热，咳嗽，咽痛。 4、银黄胶囊/颗粒：清热解毒。用于急慢性扁桃体炎，急慢性咽喉炎，上呼吸道感染。 5、复方穿心莲片：清热解毒，利湿。用于风热感冒，咽喉疼痛，湿热泄泻。（咽喉炎、急 性肠炎等） 6、黄连上清片：清热通便，散风止痛。用于头晕目眩，暴发火眼，牙齿疼痛，口舌生疮， 咽喉肿痛，耳痛耳鸣，大便秘结，小便短赤。 7、穿心莲胶囊：具有清热解毒、凉血、消肿之功效，适用于感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、泄泻痢疾、热淋涩痛、肿痛疮疡等。对急性扁桃体炎、慢性鼻炎、鼻窦炎、咽炎、喉炎、腮腺炎、支气管炎等上呼吸道感染以及肠道感染、尿路感染等均有一定的消炎作用。 8、清火片：清热泻火，通便。用于咽喉肿痛，牙痛，头目眩晕，口鼻生疮，风火目赤，大便不通。 9、三黄片：清热解毒，泻火通便。用于三焦热盛所致的目赤肿痛、口鼻生疮、咽喉肿痛、牙龈肿痛 10、众生片／丸／胶囊：清热解毒，活血凉血，消炎止痛。用于上呼吸道感染，急、慢性咽喉炎，急性扁桃腺炎，化脓性扁桃腺炎，疮毒等症。 11、清热散结片：消炎解毒，散结止痛。用于急性结膜炎，急性咽喉炎，急性扁桃腺炎，急性肠炎，急性菌痢，上呼吸道炎，急性支气管炎，淋巴结炎，疮疖疼痛，中耳炎，皮炎湿疹 12、喉痛灵片：清热解毒，消炎，清咽喉。用于咽喉炎，急性化脓性扁桃体炎，感冒发热，上呼吸道炎，疖疮等。 13、复方公英片：清热解毒。用于上呼吸道感染。 14、清咽片：清凉解热，生津止渴，用于咽喉肿痛，声嘶音哑，口干舌燥，咽下不利。（急慢性咽炎） 15芩黄喉症胶囊：清热解毒，消肿止痛，用于热毒内盛所致的咽喉肿痛。（急性咽喉炎、扁桃腺炎） 16、复方气管炎片：呼吸道炎症（急慢性支气管炎） 17、板蓝根颗粒：清热解毒，凉血利咽。用于肺胃热盛所致的咽喉肿痛、口咽干燥；急性扁桃体炎、腮腺炎见上述证候者。 18、复方鱼腥草片：清热解毒。用于外感风热引起的咽喉疼痛；急性咽炎、扁桃腺炎有风热证候者。 19、黄芩片：消炎解毒。用于上呼吸道感染，细菌性痢疾等。 20、复方黄芩片：清热解毒，凉血消肿。用于咽喉肿痛，口舌生疮，感冒发热，痈肿疮疡。 二、消化系统炎症 1、消炎利胆片：具有消炎利胆，清热解毒的功效。适用于急、慢性胆囊炎及肝胆结石并发 感染者。 2、青叶胆片：清肝利胆，清热利湿。用于黄疸尿赤，热淋涩痛。（肝胆囊炎、尿道炎等） 3、复方黄连素片：用于大肠湿热，赤白下痢，里急后重或暴注下泻，肛门灼热；肠炎、痢 疾见上述证候者。

主要饲用抗生素替代品及其作用机制-呙于明

呙于明：主要饲用抗生素替代品及其作用机制 时间：2018-06-11 点击：93次来源：阳光畜牧网作者：呙于明- 小 + 大 1、谈禁抗，就是怎么对付好微生物 抗生素的应用效果主要有两点：1.抗菌、保健，提高存活率；2.促生长、增产量、提高饲料转换效率。这些都是与我们经济效益密切相关的指标，作为饲料添加剂有非常重要的意义。试验研究表明，在无菌的饲养条件下，抗生素是无效的。如果没有病原菌，我们就不需要抗生素。那么我总结了一句话：我们谈抗生素，就离不开病原菌或微生物，我们谈禁抗，就是怎么对付好微生物。 2、对蛋白结构的解析，让对付超级细菌成为可能 抗生素的使用最令人担忧的就是耐药性的问题，2010年就报道了耐药基因的存在。去年，美国报道我们的王牌抗菌素——粘菌素的耐药基因：mcr-1，引起了我们的恐慌。在医疗上，粘菌素是在其他抗生素都无效的情况下，才使用的抗生素。如果细菌对王牌抗菌素都产生耐药性的话，我们很多病都没法治疗了。为什么这个耐药基因这么厉害？因为它编码一种蛋白叫磷酸乙醇胺转移酶，这种蛋白降低了粘菌素和脂多糖（存在与革兰氏隐形细菌细胞壁中）亲和性从而导致细菌对粘菌素不敏感。澳大利亚的专家对耐药基因编码的蛋白进行了结构解析，今年二月份就有一篇杂志上有报道。如果可以改变蛋白结构，这个酶（即耐药基因编码的蛋白）就会失活，所以结构的解析对未来开发有效的对抗这种耐药性基因的药物意义重大，这就是新一代的超级抗菌素产生的科学基础。 3、替抗产品作用机制 我们努力寻找的抗生素的潜在替代物，可大致分为三大类，一类就是益生菌及其营养物质，二类就是针对病原菌粘附的阻断剂或者抑杀物质，第三类就是增强宿主免疫功能的物质。都跟微生物有关，下面主要介绍作用机制。 首先介绍益生菌竞争性排斥病原菌的机制，主要有三种模式，第一种就是抢地盘，竞争宿主肠黏膜结构位点，在空间产生竞争优势；第二点是竞争微生物所需的养分；第三点是微生物产生代谢产物，如有机酸、细菌素、抗菌肽，这些代谢产物会对其他的菌产生抑制作用。从益生菌的使用情况来看，通过这三种模式都可以构建益生菌优势菌群。我们都知道狮子是吃牛和羊的，但是在非洲广袤的土地上，有不少狮子被牛踩死了，就是力量的对比，看谁多。比如说发酵乳杆菌，在家禽中最常见的病是坏死性肠炎，如果饲料中添加发酵乳杆菌，即使它存在坏死性肠炎的罪魁祸首——产气荚膜梭菌，它的肠道也是相对健康的。从微观上看肠道结构，在坏死性肠炎组饲喂乳酸菌，肠细胞之间的紧密连接蛋白的表达量是正常，所以发酵乳杆菌保证肠道最基本的物理结构。紧密连接蛋白反映了肠道上皮的通透性，通透性太大，一些毒素、有害物质会穿过肠黏膜进入血液，继而产生败血症等，导致较高的死亡率。用了益生菌后，电阻值增大，通透性减小，屏障功能增强，对外源有害物质的阻断能力增强了。有研究报道，肠道微生物对于温度是有感知能力的，高温条件下肠道微生物的变化趋势是，有害菌增加，有益菌减少。这种情况我们有必要使用益生菌，减少对抗生素的依赖，矫正肠道微生物的紊乱。 第二种机制就是粘附阻断排除病原体机制。在细菌或者病原菌的纤毛上都存在一个化学物质，叫凝集素，它由一些糖组成的，是病原菌能够跟动物产生互作的物质基础。我们研究营养或者其他的什么也好，物质基础就最重要的。通过研究，病原菌没有粘附就不会产生互作，也不会致病，如果不让它粘附，有害微生物即使在肠道中存在那也是安全的。如果存在一个物质，跟凝集素上的糖的结构相同，那么病原微生物就可能跟这个物质结合，从而剥

抗生素替代品_中草药饲料添加剂的应用研究解读

近年来 , 随着我国集约化畜牧业和饲料工业的不断发展 , 饲料添加剂的应用日益广泛 , 同时针对抗生素在畜禽产品中的残留及其所产生的抗药性等问题的出现 , 研制抗生素替代品的呼声也日益高涨。人们逐渐将目光转向一些天然的饲料添加剂 , 中草药以它独特的作用方式、良好效果 , 无残留、无抗药性以及无污染而受到了青睐。中草药饲料添加剂依据我国中医中药理论 , 科学组方配伍 , 不仅具有扶正祛邪、健脾开胃、抗菌促生长、增强动物免疫机能、改善动物产品品质等效果 , 而且来源广泛、价格低廉、安全方便、无毒副作用、无残留、无抗药性 , 引起了国内外学者的广泛兴趣 , 祖国这一宝贵遗产因而得以不断发掘 [1] 。 近年来 , 中草药饲料添加剂已成为动物营养研究的一大热点 , 大力开发中草药饲料添加剂对解决抗生素残留问题 , 提高生产率 , 发展绿色畜牧业 , 满足人们的食品安全需求 , 缩小我国畜牧业与发达国家差距 , 增强我国畜产品在国际市场的竞争力 , 具有重要的经济意义和社会效益。加强中草药饲料添加剂的基础理论研究 , 解决目前在使用中存在的一些问题 , 将有助于更好利用我国中草药的资源优 势 , 使之在畜牧生产中发挥更重要的作用。 1有效成分、作用原理及主要 功效的研究 1.1有效成分 一般认为中草药饲料添加剂的有 效成分主要有生物碱、甙类、挥发油、鞣质、糖类、氨基酸、蛋白质、酶、油脂、无机成分及色素 , 对于中草药不能孤立地去认识和研究 , 其有效成分的不同决定了其作用的不同。 1.1.1生物碱 :生物碱是一类存在于

生物体中含 N 的碱性天然有机物 , 具有多种多样的生理活性 , 在应用于中草药饲料添加剂中也发挥着很大的作用。生物碱具有 M 受体的作用 , 如食槟榔可使胃肠平滑肌张力升高 , 增加肠蠕动 , 使消化液分泌旺盛 , 食欲增加 , 其发挥的作用与其所含的生物碱密切相关 [2,3] 。 1.1.2 糖类 :多糖是自然界中分子机 构复杂庞大的糖类物质 , 具有多方面的生物活性。近年来发现某些中草药的多糖成分具有特殊的药理功能 , 如黄芪多糖可显著增强免疫功能 , 而目前对多糖的研究已成为热点 , 特别是在提高和改善动物免疫功能方面 [4] 。因 此 , 可以说多糖类是一类免疫增强剂 , 能增强机体的免疫能力 , 提高动物的抗病能力。 1.1.3甙类 :凡水解后能生成糖和非 糖化合物的物质都称为甙 , 因此甙类又称配糖体 , 它是中草药中分布非常 广泛的一大类结构复杂的有机化合物 , 其生物学活性仅次于生物碱。皂甙是甙类物质中最典型的一种 , 是由皂甙元和糖、糖醛酸组成的一类复杂的甙类化合物 , 皂甙的药理学研究比较多 , 如人参皂甙有明显的促进血清、肝脏、骨髓等的 RNA 、 DNA 、蛋白质及糖的生物合成 , 增强机体免疫功能的作用 ; 黄芪中的三菇皂甙 , 能促进 DNA 合成 , 加速肝脏分化增殖 , 对免疫功能有明显的促进作用等。因此 , 含皂甙类的一些药物可以作为添加剂中的免疫增强剂 [5]。

恒温扩增技术综述

摘要：恒温扩增技术是继PCR技术后发展起来的一门新型的体外核酸扩增技术。目前主要的恒温扩增技术有：滚环核酸扩增、环介导等温扩增、链替代扩增、依赖核酸序列扩增和解链酶扩增。它们都具有共同的特点：恒温、高效、特异、不需要特殊的仪器设备。本文就现阶段恒温扩增技术的特点及其在动物疫病检测中的应用情况和前景做一综述。 关键词：恒温扩增；PCR 引言： 近年来，随着分子生物学技术的迅速发展，基于核酸检测的诊断方法已大量建立并广泛应用于动物疾病的实验室检测中，恒温扩增技术就是在此背景下出现的。与其它的核酸扩增技术相比，恒温扩增有快速、高效、特异的优点且无需专用设备。所以它一经出现就被许多学者认为是一种有可能与PCR 媲美的检测方法，目前主要的恒温扩增技术有：滚环核酸扩增（rolling circle amolification，RCA）、环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）、链替代扩增（strand displacement amplification，SDA）、依赖核酸序列扩增（nucleicacid sequence based amplification，NASBA）和解链酶扩增（helix dependent amplification，HAD），这些技术各有特点，这也决定了它们在动物疾病检测中的应用情况，下面就它们的原理、特点及其在动物疫病检测中的应用情况进行综述。 1滚环核酸扩增 1. 1 滚环核酸扩增的原理 滚环核酸扩增（rolling circleamolification, RCA）是通过借鉴病原生物体滚环复制DNA 的方式而提出的[1]，可分为线性扩增与指数扩增两种形式。线性RCA 是引物结合到环状DNA 上后，在DNA 聚合酶作用下被延伸，产物是具有大量重复序列（与环状DNA 完全互补）的线状单链。线性RCA 用于靶核酸扩增仅限于一些具有环状核酸的病毒、质粒和环状染色体，线性扩增倍数为105。指数RCA 原理与线性RCA 相同，采用与环状DNA 序列完全一致的第二种引物，该引物与第一次线性RCA 产物结合并酶促延伸，其产物又作为第一种探针 的模板，这样一来在很短的时间内（1h），产物呈指数递增。指数RCA 可用于非

抗生素替代品

抗生素替代品研究进展 郭影成延吉，吉林省延边朝鲜族自治州畜牧开发总公司，133000 摘要：鉴于抗生素的诸多缺点，人们研制开发了无毒副作用的抗生素替代品。包括益生菌、化学益生素、酸化剂、微生物培养物、鸡卵黄免疫球蛋、中草药添加剂、糖萜素以及牛至油等。在畜禽生产中长期应用有不易产生毒副作用,无抗药性,无停药期,安全、高效等优点。 关键字：抗生素；替代品；益生菌；化学益生素；酸化剂；微生物培养物； 绿色抗生素替代品作为畜禽饲料添加剂,较抗生素安全范围大,在畜禽生产中长期应用不易产生毒副作用,无抗药性,无停药期,安全、高效。与其他药物饲料添加剂合用,不发生或很少发生配伍禁忌,细菌对其不易产生抗药性,对动物生长不构成危害。在动物产品中无药物和危害人类健康的有毒有害物质残留。而且,在畜禽的排泄物中不存在对人类生存环境构成潜在危害的污染物。同时,大多抗生素替代品理化性质或生物活性物质稳定,能有效地进入畜禽胃肠道发挥作用,不影响畜禽采食饲料的适口性。更重要的是,绿色抗生素替代品尤其是植物提取类(中草药等)含有许多有效成分,除了具有抗病促生长作用外,还具有改进畜产品品质及提高畜禽繁殖性能的能力。如有些中草药含有甾醇类物质,对内分泌与生殖机能作用较强,能刺激畜禽的繁殖,提高畜禽的繁殖性能。包括益生菌、化学益生素、酸化剂、微生物培养物、鸡卵黄免疫球蛋白以及中草药添加剂等。下面就每种抗生素替代品概况做以简要陈述。 一、微生态制剂 微生态制剂也称为益生素或活菌制剂，包括乳酸杆菌、双歧杆菌、芽孢杆菌、活性酵母等。其主要作用是补充动物消化道中的双歧杆菌、乳酸菌等优势菌群，维持正常的微生态区系平衡；刺激动物产生干扰素，提高免疫球蛋白浓度和巨噬细胞活性，从而调节动物机体的免疫功能，增强抗病能力；刺激动物分泌有机酸、过氧化氢、类抗生素等杀菌物质，杀死病原微生物；可产生挥发性脂肪酸和乳酸，降低肠道ph值，从而抑制病原微生物的生长繁殖；益生菌能占据靶细胞，形成保护屏障，阻止病原菌的繁殖；防止动物肠道内产生的肠毒素、毒性肽、吲哚等有毒物质的积累，有利于动物身体健康；合成D族维生素、赖氨酸、蛋氨酸等营养物质，直接被动物吸收；在动物体内可产生蛋白酶、淀粉酶、植酸酶等多种消化酶及多种未知的促生长因子，有利于饲料中营养物质的消化吸收，加速动物生长。 1. 微生态制剂临床应用进展 1.1 微生态制剂首选药主要治疗的疾病 1.1.1 感染性腹泻 1.1.1.1 预防和治疗腹泻 腹泻患者多存在肠道菌群失调,微生态制剂通过增加腹泻患者肠道内有益菌的数量和活力,抑制致病菌的生长,以恢复正常的菌群平衡,达到缓解腹泻症状的作用,对成人和小儿的急性腹泻、慢性腹泻等均有良好的预防和治疗作用。Guandalini[1]等研究显示,嗜酸性乳杆菌治疗可使儿童轮状病毒感染性腹泻迅速恢复,患者的平均病程及平均治疗天数均明显缩

益生菌及益生元与抗生素组合应用研究进展

益生菌及益生元与抗生素组合应用研究进展 蒋正宇周岩民 （南京农业大学动物科技学院，南京210095） 摘要：本文综述了畜禽生产中的微生态调节剂种类、作用机理及与抗生素联用的效果，为微生态调节剂的合理配伍使用提供参考依据。 关键词：益生菌、益生元，抗生素，微生态调节剂 几十年来，饲料中添加抗生素在预防动物疾病、抗应激、提高动物生产性能等方面所取得的显著效果有目共睹，但抗生素的长期和广泛应用，导致了肠道菌群失衡、药物残留、耐药性及其传递和传播等负效应。近年来，随着生物技术和微生物工业的发展，一些微生态调节剂作为饲料中抗生素的替代品应运而生，如活菌制剂（益生菌）和低聚糖（益生元）等，它们通过维持动物肠道内微生态平衡而促进动物生长，提高动物机体免疫力和生产性能。目前，益生菌和益生元已广泛在饲料中研究和应用，已就不同种类的益生菌或益生元的作用机理、应用效果及在不同动物种类、年龄、饲养环境下的最佳用量进行了大量的研究，但不同的益生菌或益生元之间以及益生元与抗生素、益生菌以及其他营养性或非营养性添加剂之间存在着协同或拮抗作用，寻找这些新型饲料添加剂最佳同效应的添加组合，已成为饲料研究的热点之一。因此，本文对近年来所进行的相关研究进行了综合比较分析。 1 饲用微生态调节剂和抗生素的种类 微生态调节剂是指在微生态理论指导下，可调整微生态失调，保持微生态平衡，提高宿主健康水平或增进益生菌及其代谢产物和（或）生长促进物质的制剂，主要包括益生菌（prebiotics）、益生元（probiotics）、合生素（sybiotics，eubiotics）。 益生菌是有利于宿主肠道微生物平衡的活菌食品或饲料添加剂。目前，用作微生态饲料添加剂的微生物主要有：乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌、放线菌、光合细菌等几大类。1989年，美国FDA批准使用的微生物有40余种，其中30种是乳酸菌。2003年，我国农业部批准使用的饲料级微生物添加剂品种有：地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、乳酸肠球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、产朊假丝酵母、酿酒酵母、沼泽红假单胞菌。 益生元是能够有选择性地刺激宿主动物消化道内有益菌的生长，从而对动物产生有利作用的食品或饲料中的不可消化成分，包括低聚糖、微藻（如螺旋藻、节旋藻）及天然植物（如中草药、野生植物）等。目前，饲料中研究较多的益生元主要是低聚糖、酸化剂、中草药和糖萜素等几大类。低聚糖是由2～10个单糖分子通过糖苷键形成直链和支链的糖类，它们很难为动物体内的消化酶所降解，可直接进入肠道，作为有益微生物的营养底物，促进肠道有益微生物的增殖，抑制有害微生物的生长，从而改善肠道微生态环境；饲料中研究和应用的低聚糖有甘露聚糖（MOS）、低聚果糖（FOS）、低聚木糖（XOS）、低聚半乳糖（GOS）、低聚异麦芽糖（IOS）、大豆低聚糖（SBOS）等。饲料酸化剂的应用已有30多年的历史，包括无机酸和有机酸，无机酸主要有硫酸、盐酸和磷酸，但无机酸存在使用效果不甚理想和腐蚀加工机械等问题；有机酸更为人们所认可、山梨酸、甲酸、乙酸等，生产中使用较为普遍且效果较好的有机酸是柠檬酸、延胡索酸、乳酸。 自1974年欧共体首先禁止了青霉素和四环素的使用开始，抗生素的应用已广受禁用和限用。2002年，我国农业部批准规定的可在饲料中长期添加使用以预防动物疾病、促进生长的饲用药物添加剂品种仅有33种。 2 益生菌及益生元与抗生素的作用机理 饲料中添加抗生素、益生菌、益生元对生产性能方面的有益作用是防病功能的延伸，可从两个方面发挥作用，即微生物途径和肠组织代谢途径。有关微生物途径，抗生素通过非选择性阻止或破

饲用抗生素的替代品(精)

饲用抗生素的替代品 自抗生素被批准用作饲料添加剂后，为畜牧业发展起了巨大推动作用，但随着饲用抗生素的普及应用，其副作用也逐渐突出，(1)破坏畜禽的胃肠道微生态平衡，干扰畜禽免疫系统，特别是消化系统、呼吸系统和生殖系统的局部非特异性免疫系统，降低畜禽对疾病的抵抗力，影响畜禽健康，严重威胁畜牧业的可持续发展;(2)在肉、蛋、奶等畜产品中残留，直接威胁人的健康;(3)通过抗生素耐药性的交互遗传和交叉传播，干扰手术后病人和传染病感染人群的治疗，提高治疗用药的剂量，间接威胁人的健康。 由于饲用抗生素的上述问题，早在1992年瑞士就禁止使用饲用抗生素，欧盟1999年1月起通过立法禁止抗生素作促生长剂使用，今后的发展趋势是尽量不使用抗生素。20世纪80年代以来，全世界都在不遗余力地研究开发其替代产品。近年来，饲用抗生素替代品的研究主要有益生素(微生物制剂)、寡糖(化学益生素)、抗菌肽、中草药、糖萜素、酶制剂和酸化剂等。 1.益生素 又称活菌制剂或微生态制剂(主要是肠球菌、乳酸杆菌、双岐杆菌、芽孢杆菌、酵母菌等)，是一种无毒、无副作用、无残留的绿色饲料添加剂。益生素可在消化道内增殖，产生乳酸和乙酸使消化道内pH值下降，并产生溶菌酶、过氧化氢等代谢产物抑制有害细菌在肠黏膜的附着与繁殖，平衡动物消化道内的微生物群。益生素与消化道菌群之间存在生存和繁殖的竞争，限制致病菌群的生存、繁殖以及在消化道内的定居和附着，协助机体消除毒素及代谢产物。益生素可刺激机体免疫系统，提高干扰素和巨噬细胞的活性，促进抗体的产生，提高免疫力和抗病能力。另外，许多益生素具有抑制消化道内氨及其他腐败物质生成的作用。益生素可产生各种消化酶，促进动物对营养物质的消化吸收。

核酸体外扩增技术综述

核酸体外扩增技术研究进展 摘要体外核酸快速扩增技术是一种可使微量核酸在体外高效快速扩增的技术，自问世以来，被广泛应用于分子生物学、医学和法理鉴定等领域，并被不断改进，以使其功能和适应性更为广泛。核酸体外扩增是分子生物学研究的基础。随着生物技术的发展,出现了越来越多的核酸体外扩增技术。就现有的核酸扩增技术的原理、特点及应用进行介绍。 关键词核酸体外扩增聚合酶链式反应（PCR）等温扩增 核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，为生命的最基本物质之一。核酸广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内。核酸大分子可分为两类：脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），在蛋白质的复制和合成中起着储存和传递遗传信息的作用。核酸不仅是基本的遗传物质，而且在蛋白质的生物合成上也占重要位置，蛋白质是生命活动的表达物质，基因则是编码蛋白质的特异的核苷酸序列，因而核酸在生长、遗传、变异等一系列重大生命现象中起决定性的作用。而在1983年人类第一次能够在体外扩增DNA之后，对核酸的操作和利用进入了一个全新的革命性的阶段，直到现在，体外核酸扩增技术仍然在不断地改进和完善，新的核酸扩增模式也不断涌现[1]。 一、聚合酶链式反应(PCR) PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放大技术，能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。可用于基因分离克隆，序列分析，基因表达调控，基因多态性研究等许多方面[2]。 聚合酶链式反应技术（PCR）自1985年问世以来，以其灵敏性、特异性和快速性在医学和分子生物等领域得到广泛的应用，由此可见核酸扩增技术的重要性。近年来随着分子生物学的飞速发展以及生物物理技术的大量应用，新的核酸扩增模式也不断涌现。已经建立起来的方法大体可分为两大类，靶核酸的直接扩增与信号放大扩增。前者包括聚合酶链式反应（PCR）、链替代扩增（SDA）、连接酶链式反应（LCR）和依赖核酸序列的扩增（NASBA）等，这些方法都具有很高的灵敏度。信号放大扩增包括技术核酸（bDNA）、杂交捕获、侵染(Invader)

抗生素研究进展(DOC)

文献综述 抗生素发酵研究进展 专业年级13生物工程学院环资学院学生姓名王先府学号2013125142 指导教师常海军日期2016.4.30

抗生素发酵研究进展 王先府 （重庆工商大学环资学院2013级生物班2013125142） 摘要：抗生素是由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或 其它活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质，由于其在自然条件下不易获得，现可 利用发酵来生产抗生素，本文对抗生素发酵研究过程多方面进行综述。 关键词：抗生素；菌渣；过程优化 Advances in antibiotic fermentation Jeff （College of environment and resources, Industrial and Commercial University Of Chongqing,2013125142）Abstract：Antibiotics are by microorganisms,(including bacteria, fungi, actinomycetes spp.) or higher plants and animals produced in the process of life with resistance to pathogens or other activity of a class of secondary metabolites, can interfere with other living cells development function of chemical substances, due to its under natural conditions is not easy to get, is now available by fermentation to produce antibiotic, against the students ferment process research are reviewed. Key words：antibiotics; mushroom residue; process optimization 采用发酵工程技术生产医药产品是制药工程的重要部分,其中抗生素是我国医药生产的大宗产品,随着基因工程技术的进展,基因工程药的比例逐渐增大,但抗生素在国计民生中所起的作用是不能完全替代的,特别是西方国家出于能源和环保的考虑,转产生产高附加值的药物,留出了抗生素的市场空间,为我国的抗生素生产发展提供了机遇,作为一个发展中的国家,可以说在相当长时间内, 我国抗生素生产在整个医药产品中仍占很大的比例。 1全发酵研发情况 中国最早生产的全发酵抗生素品种为饲用土霉素钙。世纪年代内蒙古金河生物科技公司等4家抗生素发酵企业开始生产全发酵金霉素产品，并以内蒙古金河生物科技公司的国内国际的市场占有量最大。目前国内有25家抗生素发酵生产企业生产全发酵抗生素产品，产品主要有黄霉素预混剂、饲用金霉素、那西肽预混剂、硫酸黏菌素预混剂、恩拉霉素预混剂、杆菌肽锌预混剂、亚甲基双水杨酸杆菌肽预混剂等由于含量规格不同，目前在我国共获得70多个产品批准文号。这些产品对我国的动物养殖发挥了重要作用主要体现在：①治疗某些动物疾病；②预防某些动物疾病尤其是对那些传染性疾病的预防，保证畜禽的健康生长；③促生长作用使畜禽生长速度加快，可使某些饲养动物缩短喂养周期；④提高饲料转化率也即饲料利用率，使之利用较少的饲料达到相同饲喂效果从而节省饲料提高生产效益⑤提高动物产品质量这其中主要是可提高肉蛋奶的产品质量⑥提高动物机能的抵抗力从而增强动物应付外界不良环境的能力。 近多年来，我国养殖业迅猛发展养殖模式从散养逐步转变集约化养殖，同时我国全发酵抗生素企业的生产技术和研发水平也逐步与国际接轨。因此，我国企业生产的全发酵抗生素产品在国内和国际占有相当的市场。例如，浙江海正药业股份有限公司生产的恩拉霉素预混剂一个品种一年的销

恒温扩增技术综述

恒温扩增技术综述 标准化文件发布号：（9312-EUATWW-MWUB-WUNN-INNUL-DQQTY-

摘要：恒温扩增技术是继PCR技术后发展起来的一门新型的体外核酸扩增技术。目前主要的恒温扩增技术有：滚环核酸扩增、环介导等温扩增、链替代扩增、依赖核酸序列扩增和解链酶扩增。它们都具有共同的特点：恒温、高效、特异、不需要特殊的仪器设备。本文就现阶段恒温扩增技术的特点及其在动物疫病检测中的应用情况和前景做一综述。 关键词：恒温扩增；PCR 引言： 近年来，随着分子生物学技术的迅速发展，基于核酸检测的诊断方法已大量建立并广泛应用于动物疾病的实验室检测中，恒温扩增技术就是在此背景下出现的。与其它的核酸扩增技术相比，恒温扩增有快速、高效、特异的优点且无需专用设备。所以它一经出现就被许多学者认为是一种有可能与PCR 媲美的检测方法，目前主要的恒温扩增技术有：滚环核酸扩增（rolling circle amolification，RCA）、环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）、链替代扩增（strand displacement amplification，SDA）、依赖核酸序列扩增（nucleicacid sequence based amplification，NASBA）和解链酶扩增（helix dependent amplification，HAD），这些技术各有特点，这也决定了它们在动物疾病检测中的应用情况，下面就它们的原理、特点及其在动物疫病检测中的应用情况进行综述。 1滚环核酸扩增 1. 1 滚环核酸扩增的原理 滚环核酸扩增（rolling circleamolification, RCA）是通过借鉴病原生物体滚环复制DNA 的方式而提出的[1]，可分为线性扩增与指数扩增两种形式。线性RCA 是引物结合到环状DNA 上后，在DNA 聚合酶作用下被延伸，产物是具有大量重复序列（与环状DNA 完全互补）的线状单链。线性RCA 用于靶核酸扩增仅限于一些具有环状核酸的病毒、质粒和环状染色体，线性扩增倍数为105。指数RCA 原理与线性RCA 相同，采用与环状DNA 序列完全一致的第二种引物，该引物与第一次线性RCA 产物结合并酶促延伸，其产物又作为第一种探针

介绍几种替代抗生素的饲料添加剂

介绍几种替代抗生素的饲料添加剂 来源：互联网时间：2003-1-22 17:12:00 页面功能【收藏】【字体：大中小】【打印】【关闭】随着我国加入世界贸易组织，以及我国人民生活水平的提高和保健意识的增强，要求畜禽产品无抗生素残留已成为国内外消费者的广泛共识。随着科学技术的进步，在目前技术条件下，即使是畜禽养殖专业户，也完全可以采用无残留、无污染的绿色食品添加剂替代抗生素，从而生产出无抗生素残留的具有绿色食品特点的畜禽产品。目前国内用于替代抗生素生产绿色食品的饲料添加剂主要有益生素、低聚糖、糖萜素、中草药几类添加剂。益生素是一类活的对动物有益的细菌，把这种有益菌添加到饲料中，就可以使这些有益菌定植于畜禽肠道，从而排斥动物肠道内有害的大肠杆菌、沙门氏杆菌等，使有害菌在肠道内不宜生存，从而达到防病效果。低聚糖是一种糖类。这种产品添加到饲料中，动物不易消化吸收，但肠道的有益细菌可吸收，并使有益细菌大量增殖，从而控制有害菌的繁殖，减少有害细菌数量，达到防病效果。糖萜素是一种能提高畜禽免疫力的添加剂。在畜禽饲料中添加这种产品后，可提高畜禽的免疫反应，刺激动物的免疫系统消灭有害菌类，保障畜禽处于健康状态。中草药添加剂是通过在畜禽饲料中添加一些具有抗菌、促进新陈代谢、增强免疫力的中草药，达到防病效果。以上这几类产品，除主要功能为预防疾病外，还具有改善畜禽环境（粪便不臭），提高饲料效率等多种优点。这几类产品的使用量：中草药添加剂一般0．5—1‰，糖萜素每吨200—500克，益生素0．25‰，低聚糖0．2—0．25％（具体使用时均应按产品说明书添加）。在不添加抗生素饲料添加剂情况下使用此类产品，通常每公斤料增加0．02—0．03元成本，经济上也比较合算。

丁酸钠替代抗生素在水产上的应用

丁酸钠替代抗生素在水产动物上的应用 丁酸钠在陆生动物上的研究进展已经广为普及，也因为全球抗生素滥用所造成的抗药性，欧盟决定于 2006 年禁止用抗生素作为所谓的“生长促进剂”添加到饲料中。在寻找抗生素替代品的过程中丁酸钠由于具有广泛的生物调节作用而逐渐引起人们的关注。许多科学研究报告已证实丁酸钠在陆生动物具有以下的作用, 例如抑制人类结肠粘膜发炎及癌症生成；改善禽类的蛋壳品质及减少肉鸡下痢；增长增生猪肠道绒毛、使肠壁变丰厚；及刺激犊牛瘤胃肌层及突触的生长。至于丁酸钠在鱼类上的应用，可从以下的试验得到验证。（1）丁酸钠对罗非鱼生长、血液参数及免疫反应的影响（Ahmed H.A., 2015） 1）试验设计选择健康状况良好的罗非鱼 200 条，随机分成两个处理组，每个处理组各 100 条。对照组饲喂基础日粮，丁酸钠组饲喂基础日粮添加 0.03%丁酸钠，基础日粮含有蛋白质 24.7%，总能 3896 千卡/公斤。罗非鱼的喂食量以每日 3%鱼体重量喂食；每日分两餐。2）试验结果 表 1 丁酸钠对罗非鱼的生长表现 表 2 丁酸钠对罗非鱼肉品质的影响 表 3 丁酸钠对罗非鱼血清蛋白、血葡萄糖及肝指数的影响 注：肩字母不同表示差异显著（P〈0.05） （2）丁酸钠对美洲鳗鲡采食、生长性能及抗氧化能力的影响（ZhangS,2011） 1）试验设计选择健康状况良好的美洲鳗鲡 600 条，随机分成三个处理组，每个处理组设2 个重复，每个重复各 100 条。对照组饲喂基础日粮，丁酸钠 1 组饲喂基础日粮添加0.05%丁酸钠，丁酸钠 2 组饲喂基础日粮添加 0.1%丁酸钠。试验预饲期 20 天，正式期 6 周。 2）试验结果 表 4 丁酸钠对美洲鳗鲡生长情况的影响 表 5 丁酸钠对美洲鳗鲡肝脏健康情况的影响 （3）丁酸钠对淡水鱼生长表现及肠道粘膜结构的影响（Wang et.Al., 2008） 1）试验设计选择健康状况良好的鲤鱼 360 条，随机分成四个处理组，每个处理组设 3 个重复，每个重复各 30 条。对照组饲喂基础日粮，另外三个试验组分别在基础日粮中添加0.05%、0.1%、0.15%的丁酸钠。饲料期 60 天，每日投饵 2 次，喂食量为鱼体重的 3-4%。2）试验结果 表 6 丁酸钠对鲤鱼生长情况的影响 图 1 丁酸钠增长鲤鱼肠绒毛长度 Nuez-Ortin 2011 也指出包被丁酸钠对鲶鱼(P. hypohthalmus)生长有非常优异的表现，如下表。 注：肩字母不同表示差异显著（P〈0.05） 在维护肠道健康方面, 丁酸盐能抑制陆生动物肠道发炎。当细菌入侵时，单核球/巨噬细胞产生大量促进发炎的细胞激素(cytokine)如 IL-12 (白细胞介素； interleukin12)及少量 IL-10。IL-12 刺激 T 细胞生成γ干扰素(interferon-γ)，肿瘤坏死因子(TNF，tumornecrosisfactor)及 IL-2(白细胞介素 IL-2)。全都会促使肠道发炎反应。见图 2。 图 2 而丁酸会刺激单核球/巨噬细胞产生 IL-10，IL-10 反抑制 IL-12 生成，因此肠道发炎反应被抑制。见图 3。 图 3 水产饲料配方中普遍使用鱼粉及鱼油来促进鱼虾生长，但因这几十年来全球，鱼粉鱼油

临床基因扩增检验实验室管理方案计划暂行办法

临床基因扩增检验实验室管理暂行办法 第一章总则 第一条为规范临床基因扩增检验实验室管理，保证临床基因扩增检验质量，使临床诊断和治疗更为科学、合理，特制定本办法。 第二条临床基因扩增检验技术指以临床诊断治疗为目的，以扩增检测DNA或RNA为方法的检测技术，如聚合酶链反应（PCR）、连接酶链反应（LCR）、转录依赖的放大系统（TAS）自主序列复制系统（3SR）和链替代扩增（SDA）等。 第三条本办法适用于开展临床基因扩增检验的实验室。临床基因扩增检验实验室设立在二级以上医院。 第四条临床基因扩增检验实验室必须使用经国家药品监督管理局批准的临床检验试剂开展临床基因扩增检验项目。 第五条卫生部临床检验中心（以下简称卫生部临检中心）和省、自治区、直辖市临床检验中心（以下简称省临检中心）负责对所辖行政区域内临床基因扩增检验实验室的质量监督管理工作。 第二章实验室设置和验收 第六条拟设置临床基因扩增检验实验室的医疗机构按照《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》（见附件）筹建实验室；筹建完成后，由法定代表人向卫生部临检中心提出技术验收申请。申请时需提交以下材料： （一）《医疗机构执业许可证》复印件； （二）可行性研究报告； 1、拟设临床基因扩增检验实验室机构的所在地医疗卫生资源状况、本机构的基本情况、对临床基因扩增检验的需求以及临床基因扩增实验室运行的预测分析；

2、拟设临床基因扩增检验实验室的设置平面图； 3、拟设临床基因扩增检验实验室将开展的检验项目、实验设备条件和有关技术人员资料 第七条卫生部临检中心和省临检中心共同组织相关专业的专家组（以下简称专家组），按照《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》对提出申请的临床基因扩增检验实验室进行技术验收。验收完成后，在20日内将验收报告寄送至申请机构。 第八条经专家组技术验收合格的医疗机构将本办法第六条规定的材料及专家组验收报告送至省级行政部备案。在将符合规定的全部材料送达省级卫生行政部门后15日内未收到省级卫生行政部门不同意的意见，方可开展专家组技术验收合格的临床基因扩增检验项目。 第九条未经专家组验收合格并报省级卫生行政部门备案的医疗机构不得擅自开展临床基因扩增检验项目。 第三章实验室监督管理 第十条临床基因检验实验室必须按照《临床基因扩增检验实验室工作规范》（另发）开展临床基因扩增检验工作。 第十一条临床基因扩增检验实验室技术人员必须进行上岗培训。经培训合格者，由培训单位发给合格证书，并将培训合格人员名单报卫生部临检中心备案。获得培训合格证书者方可从事临床基因扩增检验工作。 培训单位为卫生部临检中心，或由省级卫生行政部门指定并经卫生部临检中心认定的机构。培训时使用规定的统一教材。 第十二条以科研为目的的基因扩增检验项目。不得向临床出具检验报告，不得向病人收取任何费用。 第十三条临床基因扩增检验实验室必须按照《临床基因扩增实验室工作规范》开展室内质量控制，并参加卫生部临检中心组织的室内质量评价。

抗生素替代品

龙源期刊网 https://www.sodocs.net/doc/5d13645000.html, 抗生素替代品 作者：张江 来源：《国外畜牧学·猪与禽》2018年第04期 从微小的病毒、真菌、细菌、原生动物、寄生虫到各种各样的植物和动物，这个星球上的所有生物都在为生存和繁殖而努力。在生存竞争中，许多微生物进化出可分泌某些抗菌物质的系统，科学家鉴定分离出這些抗菌物质并用作抗生素。抗生素滥用可能会导致易感微生物改变其原有系统并进化出新系统，避开抗菌物质的有害作用，这称为微生物耐药性。大多数情况下耐药性可以在同一物种内垂直传播，也可以在不同物种间水平传播，最终引发一些非常严重的问题，比如产生对所有抗生素具有耐药性的超级细菌，对人类文明形成威胁。 中图分类号：S831.5 文献标志码：C 文章编号：1001-0769（2018）04-0082-02 为了解决抗生素耐药性问题并寻找抗生素替代方法，人们在全球开展了多种研究。这些研究可以分为如下几类：1）改变现有抗菌剂和/或添加某些新成分，恢复抗菌剂的功效；2）寻找其他微生物或其产物，消灭有害菌；3）使用微生物工具提高人类或动物体的免疫力；4） 应用某些新化合物和抗菌工艺；5）使用植物抗菌剂、免疫刺激剂及相关成分。 1 改变现有抗菌剂和/或添加某些新成分，恢复抗菌剂的功效 青霉素是最先发现、也是最早注意到其耐药性的抗生素。产生耐药性的青霉素会生成β-内酰胺酶。为了解决这个问题，在青霉素中加入了某些化学物质（克拉维酸、舒巴坦、他唑巴坦，等等），这些化学物质无任何抗菌作用，但可帮助克服微生物耐药性。后来又发现了其他一些方法（使用细菌外排抑制剂、抗生素类似物等）解决微生物耐药性问题。不过几年后因微生物改变了抗性机制，效果呈现逐渐下降的趋势。因此，即使不断研究和开发此类化学物，延长现有抗菌剂的使用寿命，其实际功效也会日益下降。 2 寻找其他微生物或其产物，消灭有害菌 2.1 抗菌肽 不同的植物、动物和真菌具有完全不同的免疫系统，但都可产生破坏细菌的肽（小型蛋白质）。许多两栖动物和爬行类可生成能杀死多种致病菌的肽。目前正在研究这些肽作为抗菌剂的治疗作用。 宿主防御肽（天然小肽）和天然防御调节肽（合成小肽）具有间接抗菌效果，主要通过增加抗炎趋化因子和细胞因子表达以及减少促炎细胞因子表达发挥作用。研究表明，抗生物膜肽可特异性抑制细菌生物膜的形成，目前已进入临床前开发阶段。 2.2 噬菌体