8.关于电泳槽液固体份的检测方法的比较
关于电泳槽液固体份的检测方法的比较
武汉科利尔新材料有限公司
固体份solid content就是指不挥发物的含量（百分含量）。电泳漆工作液的固体份含量直接反应槽液中有效工作物质的浓度，而电泳漆的浓度高低直接影响漆膜成膜性能和电泳槽的稳定性，因此对电泳工作液固体份含量的控制是电泳生产线重要的管控指标。
一．电泳漆固体份检测方法的相关标准：
1.国家标准GB6751-86《色漆和清漆，挥发物和不挥发物的测定》
2.国家标准GB1725-2007《色漆、清漆和塑料不挥发物含量的测定》二．实验主要测量仪器
手持式糖量仪（0—32%），恒温烘箱（0—250℃），电子天平（精度0.001）三．实验材料
丙烯酸型树脂
三．实验检测方法
方法一：根据GB6751-86《色漆和清漆，挥发物和不挥发物的测定》进行测定，在105±2℃的烘箱内，保持3h，通过称量计算槽液的固体份含量。
方法二：在120±2℃的烘箱内，保持1h, 通过称量计算槽液的固体份含量.
方法三：在150±2℃的烘箱内，保持1h, 通过称量计算槽液的固体份含量.
方法四：采用糖量仪进行检测
注明：方法一、方法二、方法三具体称量方法和计算公式参见GB6751-86《色漆和清漆，挥发物和不挥发物的测定》和GB1725-2007《色漆、清漆和塑料不挥发物含量的测定》，每次称量精确到0.001g,两次平行试验误差不超过1% 四．实验结果：
表一：（单位 %）
1.电泳漆工作液各测量方式检测结果对比图（图一）
2.手持式糖量仪与GB6751-86《色漆和清漆，挥发物和不挥发物的测定》方法下固体份检测结果上的对比
图一：
由上表可以看出手持式糖量仪检测结果与GB检测结果之间有一定的误差，并且随着槽液浓度的增大这种误差变得更大，在实际生产中，我们使用手持糖量仪对槽液进行检测时，我们应该对检测值进行修正。具体修正结果可结合图二进行参考。
为了更为清晰的了解手持式糖量仪与GB之间检测结果的差异，我们从表一中分别选取手持式糖量仪检测结果为5%、10%、15%、20%的样品（对应编号1号、3号、5号、7号）（表二），进行对比作图（图二）。
）
图二：
电泳生产过程中可结合上图，对手持式糖量仪检测槽液的结果进行修正，根据正确的的槽液检测结果再进行槽液指标的调整，保证生产的正常进行。3.各不同温度下检测结果对比
图三
由上图可以看出105℃烘烤180min;120℃烘烤60min;150℃烘烤30min各数值之间偏差较小，对电泳涂装生产企业进行日常槽液指标的监控来说，以上数据均为有效数据，可以有效的为槽液调整做指导。
六．实验说明：
由于手持式糖量仪检测速度快、成本低、易学、易操作，因此大量电泳厂家使用手持式糖量仪作为电泳漆浓度的监测工具。但是不同型号的电泳漆使用糖量仪检测后，检测结果和实际值都有一定的误差，为了正确的指导生产，我们应对检测结果进行相应的修正。
不同型号的的检测设备和实验材料所产生的实验数据可能略有差别，电泳生产企业可自行检测，或向电泳漆商家索要相关数据。
饮料中三氯蔗糖等5种人工合成甜味剂检测
UNIMICRO NO. 20140425 反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定 饮料中三氯蔗糖等5种人工合成甜味剂 通微公司建立一种同时测定饮料中主要限用人工合成甜味剂：安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、三氯蔗糖和阿斯巴甜的反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法。采用核壳型HALO 色谱柱，甲醇/甲酸--三乙胺缓冲溶液（pH=4.5）为流动相，进行梯度洗脱，以ELSD 进行检测，结果表明三氯蔗糖等5种甜味剂在9分钟内能够实现完全分离。该方法方便、快速、适用性强并可快速推广，可实现饮料中多种人工合成甜味剂的同时分离检测。 色谱条件 色谱柱：HALO-C18，4.6mm×150mm ，2.7μm 流动相： A ：甲酸-三乙胺缓冲液（pH=4.5）, B ：甲醇，梯度洗脱 流 速：0.5 mL/min 蒸发温度：UM 5000 40 oC 载气类型：空气 载气流速：3.5 L/min 载气压力：4.33 bar 进样量：20 μL 仪器与设备 EasySep 1020型梯度液相色谱（通微） HALO C18色谱柱（通微） ELSD UM 5000蒸发光散射检测器（通微） 运用本文所建立的分析方法，分别对市售的两种常见碳酸型饮料进行分离检测。其中样品1产品标注添加：安赛蜜，三氯蔗糖和阿斯巴甜；样品2产品标注添加：安赛蜜和三氯蔗糖。 实际样品分析： 图2 样品1的HPLC-ELSD 色谱图 1.安赛蜜；2.甜蜜素；3.三氯蔗糖；4.阿斯巴甜； 图1. 人工合成5种甜味剂标准品的HPLC-ELSD 色谱图 （1）安赛蜜Acesulfame-K ；（2）糖精钠Saccharin Sodium ；（3）甜蜜素Cyclamate ； （4）三氯蔗糖Sucralose ；（5）阿斯巴甜Aspartame 图3 样品2的HPLC-ELSD 色谱图 1.安赛蜜； 2.三氯蔗糖
四种常用探伤方法特点及区别
四种常规无损检测方法的比较 无损检测就是利用声、光、磁和电等特性，在不损害或不影响被检对象使用性能的前提下，检测被检对象中是否存在缺陷或不均匀性，给出缺陷的大小、位置、性质和数量等信息，进而判定被检对象所处技术状态(如合格与否、剩余寿命等)的所有技术手段的总称。常用的无损检测方法： 超声检测(UT)、磁粉检测(MT)、液体渗透检测(PT)及X射线检测(RT)。 超声波检测(UT) 1、超声波检测的定义： 通过超声波与试件相互作用，就反射、透射和散射的波进行研究，对试件进行宏观缺陷检测、几何特性测量、组织结构和力学性能变化的检测和表征，并进而对其特定应用性进行评价的技术。 2、超声波工作的原理： 主要是基于超声波在试件中的传播特性。声源产生超声波，采用一定的方式使超声波进入试件；超声波在试件中传播并与试件材料以及其中的缺陷相互作用，使其传播方向或特征被改变；改变后的超声波通过检测设备被接收，并可对其进行处理和分析；根据接收的超声波的特征，评估试件本身及其内部是否存在缺陷及缺陷的特性。 3、超声波检测的优点： a.适用于所有金属、非金属和复合材料等多种制件的无损检测； b.穿透能力强，可对较大厚度范围内的试件内部缺陷进行检测。如对金属材料，可检测厚度为1～2mm的薄壁管材和板材，也可检测几米长的钢锻件； c.缺陷定位较准确； d.对面积型缺陷的检出率较高； e.灵敏度高，可检测试件内部尺寸很小的缺陷；
f.检测成本低、速度快，设备轻便，对人体及环境无害，使用较方便。 4、超声波检测的局限性 a.对试件中的缺陷进行精确的定性、定量仍须作深入研究； b.对具有复杂形状或不规则外形的试件进行超声检测有困难； c.缺陷的位置、取向和形状对检测结果有一定影响； d.材质、晶粒度等对检测有较大影响； e.以常用的手工A型脉冲反射法检测时结果显示不直观，且检测结果无直接见证记录。 5、超声检测的适用范围 a.从检测对象的材料来说，可用于金属、非金属和复合材料； b.从检测对象的制造工艺来说，可用于锻件、铸件、焊接件、胶结件等； c.从检测对象的形状来说，可用于板材、棒材、管材等； d.从检测对象的尺寸来说，厚度可小至1mm，也可大至几米； e.从缺陷部位来说，既可以是表面缺陷，也可以是内部缺陷。锻件是金属被施加压力，通过塑性变形塑造要求的形状或合适的压缩力的物件。这种力量典型的通过使用铁锤或压力来实现。铸件过程建造了精致的颗粒结构，并改进了金属的物理属性。在零部件的现实使用中，一个正确的设计能使颗粒流在主压力的方向。 磁粉检测(MT) 1.磁粉检测的原理： 铁磁性材料和工件被磁化后，由于不连续性的存在，使工件表面和近表面的磁力线发生局部畸变而产生漏磁场，吸附施加在工件表面的磁粉，形成在合适光照下目视可见的磁痕，从而显示出不连续性的位置、形状和大小
解脲支原体检查方法
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 解脲支原体检查方法 导语：解脲支原体很有可能会出现感染的现象，而这个是男性体内的一种激素，如果通过检查发现这个解脲支原体有什么异常现象的话，在报告结果中是会 解脲支原体很有可能会出现感染的现象，而这个是男性体内的一种激素，如果通过检查发现这个解脲支原体有什么异常现象的话，在报告结果中是会表现出来的，而解脲支原体的检查方法有是有很多的，一般在做这个检查的时候都是很多男性出现了尿多尿急尿频繁的现象，所以才到医院做检查，那么解脲支原体检查方法有哪些？ 解脲支原体的检查方法主要有三种，第一种检查方法就是血液检查，主要是通过抽血化验。第二种检查方法就是通过口腔的涂片的培养来进行检查。第三种检查方式就是PCR的技术检测，这种检查方式可以检查出igm的抗体情况，然后再判断感染的情况。这种疾病的治疗可以使用四环素，比如米诺环素、多西环素等等，但是建议最好两种到三种的抗生素结合一起使用，治疗效果更好。 支原体是细胞外生存的最小微生物，是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3～0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状，分枝状等多种态。它不同于细胞，也不同于病毒，种类繁多、分布广泛、造成的危害相当大，给人类健康和科研工作带来不利影响。从人体分离的16种支原体中，5种对人有致病性，即肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体，生殖支原体及发酵支脲解支原体属含脲解支原体等体、脲解支原体及人型支原体等对人有致病性。 男性支原体检查方法有哪些？男性支原体检查方法如下： 1、血常规：周围血白细胞计数一般正常嗜酸性粒细胞增多。 2、血清学检全：采用补体结合试验着恢复期血清抗体效价比急性预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏
1医学检验毕业论文 (三种肺炎支原体检测法的临床应用分析)
毕业论文 题目：三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 地市: 学校: 准考证号: 考生姓名: 王莹 指导老师: 二〇一八年八月十四日
三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 摘要 目的探讨肺炎支原体（MP）咽拭子快速液体培养法、咽拭子聚合酶链反应（PCR）法和血清MP被动凝集法（MP-Ab）等方法在儿童MP感染诊断治疗过程中的敏感性方法采用3MP检测法对362例临床拟诊呼吸道（非细菌性）感染的患儿的咽拭子和血清标本进行配对研究，每患儿取咽拭子做快速培养和PCR，同时取血清做MP-Ab检测，对3种方法的检测结果与临床诊断治疗病例进行回顾性分析。结果回顾临床病例诊断MP感染患儿152例。MP快速培养法检出阳性78例，阳性率为51.3%，病程为（4.5±2.6）天；PCR法检测出阳性103例，阳性率为67.8%，病程为（6.2±3.5）天；MP-Ab法检测出阳性127例，阳性率83.5%，病程（8.1±4.5）天。结论 3种MP检测法的敏感性与病程有相关性，临床医生应根据患儿病程选取检测方法，以提高阳性检出率和敏感性。 关键词肺炎支原体，快速培养法，咽拭子聚合酶链反应，血清抗体，配对研究
目录 前言 (4) 第一章文献综述 (5) §1.1 肺炎支原体的定义 (5) §1.2 肺炎支原体的发病机制 (5) §1.3 肺炎支原体的分类 (5) §1.4 肺炎支原体的临床表现 (5) §1.5 肺炎支原体的临床诊断 (5) §1.6 肺炎支原体的实验室检查 (6) 第二章材料和方法 (7) §2.1 样本 (7) §2.2方法概述 (7) §2.3临床诊断MP感染的诊断标准 (7) §2.4实验方法 (7) §2.5统计学方法 .................................................................... .. (8) 第三章结果 (9) 第四章讨论 (10) 结论 (11) 参考文献 (11) 附录 (12) 错误！未定义书签。
水质氨氮检测方法及操作步骤
水质氨氮检测方法及操作步骤 氨氮 氨氮(NH3-N)以游离氨(NH3)或铵盐(NH4+)形式存在于水中，两者的组成比取决于水的pH值。当pH值偏高时，游离氨的比例较高。反之，则铵盐的比例为高。 水中氨氮的来源主要为生活污水中含氮有机物受微生物作用的分解产物，某些工业废水，如焦化废水和合成氨化肥厂废水等，以及农田排水。此外，在无氧环境中，水中存在的亚硝酸盐亦可受微生物作用，还原为氨。在有氧环境中，水中氨亦可转变为亚硝酸盐、甚至继续转变为硝酸盐。 测定水中各种形态的氮化合物，有助于评价水体被污染和“自净”状况。 氨氮含量较高时，对鱼类则可呈现毒害作用。 1.方法的选择 氨氮检测方法，通常有纳氏比色法、苯酚-次氯酸盐(或水酸-次氯酸盐)比色法和电极法等。纳氏试剂比色法具操作简便、灵敏等特点，水中钙、镁和铁等金属离子、硫化物、醛和酮类、颜色，以及浑浊等干扰测定，需做相应的预处理，苯酚-次氯酸盐比色法具灵敏、稳定等优点，干扰情况和消除方法同纳氏试剂比色法。电极法通常不需要对水样进行预处理和具测量围宽等优点。氨氮含量较高时，尚可采用蒸馏﹣酸滴定法。 2.水样的保存 水样采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶，并应尽快分析，必要时可加硫酸将水样酸化至pH<2，于2—5℃下存放。酸化样品应注意防止吸收空气中的氮而遭致污染。 预处理 水样带色或浑浊以及含其它一些干扰物质，影响氨氮的测定。为此，在分析时需做适当的预处理。对较清洁的水，可采用絮凝沉淀法，对污染严重的水或工业废水，则以蒸馏法使之消除干扰。 (一)絮凝沉淀法 概述 加适量的硫酸锌于水样中，并加氢氧化钠使呈碱性，生成氢氧化锌沉淀，再经过滤去除颜色和浑浊等。 仪器 100ml具塞量筒或比色管。 试剂
31 480-482 j468 食品安全与检测 3-6 配制酒中三氯蔗糖检测方法的改进
配制酒中三氯蔗糖检测方法的改进 龙飞1，丁怡1，龙焰君2 （1.广州市酒类检测中心，广东广州 510160）（2.广州市药品检验所，广东广州 510160）摘要：本文应用HPLC-DAD和HPLC-RID两种方法对配制酒中的三氯蔗糖进行检测研究，分别从重复性、准确性和检出限方面与国标HPLC-ELSD方法进行比较，发现两种方法均可替代国标方法，检出限分别为6.0 mg/L和1.7 mg/L，从而为以后的检测工作提供不同的方法。 关键词：三氯蔗糖；二极管阵列检测器；示差折光检测器 文章篇号：1673-9078(2012)4-480-482 Study of methods for Sucralose Determination in Wine LONG Fei1, DING Yi1, LONG Y an-jun2 (1.Guangzhou Wine Analytical Centre, Guangzhou 510160, China) (2.Guangzhou Institute for Drug Control, Guangzhou 510160, China) Abstract: In this paper,two methods based on HPLC-DAD and HPLC-RID was tested for detection of sucralose in wine. The repeatability, accuracy and detection limits of the two method were compared with HPLC-ELSD in national standard. It was found that the two methods can be used as alternative to national standard. The detection limits of the two methods were 6.0 mg/L and 1.7 mg/L, respectively. Key word: sucralose; DAD; RID 三氯蔗糖（sucralose）是一种安全的，无热量的甜味剂，其甜度约为蔗糖的600倍[1-3]。它是一种新型非营养性甜味剂[4,5]，它不参与人体新陈代谢，不会引起肥胖及血糖波动[6]。在高温条件下（121 ℃），其甜度可保持不变；在水溶液中，常温下，可以贮藏一年以上而不发生任何变化[7]。 由于具有多种优势，三氯蔗糖作为一种甜味剂已经被广泛应用在食品范围内，各类配制酒也开始采用三氯蔗糖作为甜味添加剂。但三氯蔗糖毕竟不是天然成分，就目前的安全性评价来看，在规定的剂量范围内使用可能对人无害，但若超量使用，仍可能引起各种形式的毒性表现。因此为了避免非法添加和超量添加，必须加强对三氯蔗糖的含量控制。 对于三氯蔗糖的检测，国标GB/T 22255-2008采用HPLC-ELSD的方法，在取样5 g，定容体积为5 mL，进样20 μL时，其检出限为4 mg/kg，定量限为14 mg/kg，而线性范围为0.100~0.8 mg/mL[8]；赵海凉等用HPLC-DAD法测定食品中的三氯蔗糖，取样5 g，定容体积为 5 mL，进样20 μL时，其检出限为15 mg/kg[9]；周维义等、张莉与马思娜等分别用不同品牌的HLPC-RID对食品中的三氯蔗糖进行测定，其检出限均低于HPLC-DAD和HPLC-ELSD[10-13]；而美国药典（USP）也采用HPLC-RID的方法[14]。鉴于不同的收稿日期：2011-12-19 实验室所配备的检测仪器不同，故考虑用HPLC-DAD 和HPLC-RID两种方法与国标方法比较，希望使用不同检测器也可以达到同样的检测效果。 1 材料与方法 1.1 材料、试剂 市售配制酒模拟样品，市售酒+少量三氯蔗糖。 乙腈，色谱纯，美国Honeywell公司；三氯蔗糖标准品（≥98%），Aladdin公司；蒸馏水，经Millipore 纯水器过滤。 1.2 仪器与设备 Waters液相色谱仪，美国Waters公司；DAD检测器，美国Waters公司；RID检测器，美国Waters 公司；Luna C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），美国Phenomenex公司；Elix，Milli-Q纯水机，美国Millipore公司；天平；水浴锅。 1.3 色谱条件 1.3.1 HPLC-DAD Luna C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）色谱柱；流动相：乙腈+水＝12+88（V/V）；流速：1.0 mL/min；柱温：35 ℃；进样体积：20 μL；Waters2998 DAD检测器。 1.3.2 HPLC-RID Luna C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）色谱柱；流 480
二恶英检测分析方法比较
二恶英检测方法比较 二恶英化合物（简称二恶英）是剧毒有机污染物。人体长期低剂量接触，会导致癌症、雌性化、胎儿畸形、糖尿病等疾病。自比利时发生二恶英食品污染事件和《POPs公约》在瑞典斯德哥尔摩签署以来，二恶英检测与污染防治在国际上受到越来越广泛的关注[1]。二恶英检测属超痕量、多组分检测，对特异性、选择性和灵敏度要求极高，被认为是当代化学分析领域的一大难点。 美国较早开展二恶英检测研究，现已制定出一系列的检测标准。欧洲和日本也相继研究和制定了二恶英检测标准方法。我国目前正处于二恶英基础研究的起步阶段，尚未提出相关检测标准和方法，因此亟待建立符合我国国情的二恶英检测方法和体系。 2 二恶英检测方法 2.1化学仪器分析方法 在200余种异构体中分离出17种有明显毒性的二恶英，分别测定其浓度或含量。将浓度或含量乘以每种二恶英的毒性因子（TEF）就可以得到总毒性当量（TEQ）。该方法的一般程序包括采样、提取、净化、定性定量。 2.1.1 采样 样品的取样量由样品类型、污染水平和方法的检测限而定。各国对采样程序都单独编制了标准方法。 2.1.2 提取 为了测定提取净化效率和校正分析丢失，首先加入17种13C－PCDD/Fs采样内标和37Cl－2,3,7,8－TCDD净化内标。溶剂选择和提取步骤取决于样品类型和净化方法，如在处理废弃物焚烧飞灰时溶剂选取石油醚/甲苯/二氯甲苯，在处理脂肪样品时溶剂选取二氯甲烷/己烷。提取步骤一般包括溶解、振荡、混匀和萃取。索氏萃取是传统的提取方法，广泛应用于检测飞灰、鱼、牛乳和脂肪组织样品中的二恶英。目前，超临界流体萃取装置（SFE）、加压加热型的高速溶剂萃取装置（ASE）和微波萃取方法也用于提取样品中的二恶英，并有大量对比实验证明了这些方法的有效性[3,4]。 2.1.3 净化 为了除去大量干扰物质，目前大多采用色谱法进行净化。色谱法通常将分配处理柱和色谱柱串联使用，包括酸或碱处理、硅胶柱、氧化铝柱、佛罗里柱和活性炭柱的二次净化，具体操作因样品类型和基质性质而异。目前，一些实验室正在开发一次性多层柱（如微型氧化铝柱）和HPLC净化方法来简化净化过程。净化后要加入15种13C－PCDD/Fs定量内标和2个13C 标记的用于确定色谱保留时间的内标[5]。 2.1.4 定性定量 通常定性检测采用2类不同极性的色谱柱。首先用非极性或弱极性固定相将氯原子取代数相同的二恶英化合物分为1组，然后用极性固定相分离其中的异构体，最后通过对17 种标记的和未标记的标准样品实施比较，获取保留时间。定量检测主要采用选择离子监测技术（SIM），以13C稳定同位素为内标，根据测量目的用质量校正程序校正质谱模式、分辨率
支原体检查
附录XIIB支原体检查法 主细胞库、工作细胞库、病毒种子批、对照细胞以及临床治疗用细胞进行支原体检查时，应同时进行培养法和指示细胞法（DNA染色法）。病毒类疫苗的病毒收获液、原液采用培养法检查支原体，必要时，亦可采用指示细胞法筛选培养基。也可采用经国家药品检定机构认可的其他方法 第一法培养法 推荐培养基及其处方 （1）支原体肉汤培养基 猪胃消化液 500ml 氯化钠2.5g 牛肉浸液（1:2）500ml 葡萄糖 5.0g 酵母浸粉5.0g 酚红0.02g pH值7.6±0.2。于121℃灭菌15分钟。 （2）精氨酸支原体肉汤培养基 猪胃消化液 500ml 牛肉浸液（1:2）500ml 葡萄糖 1.0g 酵母浸粉5.0g L-精氨酸2.0g 酚红0.02g 氯化钠2.5g pH值7.1±0.2。于121℃灭菌15分钟。 （3）支原体半流体培养基按（1）项处方配制，培养基中不加酚红，加入琼脂2.5～3.0g。 （4）支原体琼脂培养基按（1）项处方配制，培养基中不加酚红，加入琼脂13.0～15.0g。 培养基灵敏度检查（变色单位试验法）（1）菌种肺炎支原体（ATCC 15531）、口腔支原体（ATCC 23714），由国家药品检定机构分发。 （2）操作将菌种接种于适宜的支原体培养基中，经36℃±1℃培养至培养基变色，盲传2代后，将培养物接种到待检培养基中，做10倍系列稀释，肺炎支原体稀释至10-7～10-9，接种在支原体肉汤培养基内；口腔支原体稀释至10-3～10-5，接种在精氨酸支原体肉汤培养基
内。每个稀释度接种3支试管，置36℃ 士1℃ 培养7～14天，观察培养基变色结果。 ( 3 )结果判定以接种后培养基管数的2 / 3以上呈现变色的最高稀释度为该培养基的灵敏度。 液体培养基的灵敏度：肺炎支原体（ATCC 15531 )应达到10-8，口腔支原体（ATCC 23714）应达到10-4。 检查法（1）供试品如在分装后24小时以内进行支原体检查者可贮存于2～8℃ ；超过24小时应置一20℃ 以下贮存。 ( 2 )检查支原体采用支原体半流体培养基和支原体肉汤培养基（或支原体琼脂培养基）。支原体半流体培养基（或琼脂培养基）在使用前应煮沸10～15分钟，冷却至56℃ 左右，然后加人灭能新生牛血清（培养基与血清体积比为8:2 )，并可酌情加入适量青霉素，充分摇匀。液体培养基除无需煮沸外，使用前亦应同样补加上述成分。 取每支装量为10ml的支原体半流体培养墓（已冷至36℃ 士1℃ ）和支原体肉汤培养基各4支，每支培养基接种供试品0.5～1.0ml，置36℃ 士1℃ 培养21天。于接种后的第7天从4支中取2支进行次代培养，每1支培养基转种支原体半流体培养基及支原体肉汤培养基各2支，置36℃ 士l℃ 培养21天，每隔3天观察1次． ( 3 )结果判定培养结束时，如接种供试品的培养基均无支原体生长，则供试品判为合格；如疑有支原体生长，可取加倍量供试品复试，如无支原体生长，供试品判为合格，如仍有支原体生长，则供试品判为不合格。 【附注】质量检定部门应会同培养基制造部门定期抽检支原体培养基灵敏度。 第二法指示细胞培养法（DNA染色法） 将供试品接种于指示细胞（无污染的Vero细胞或经国家药品检定机构认可的其他细胞）中培养后，用特异荧光染料染色。如供试品污染支原体，在荧光显微镜下可见附在细胞表面的支原体DNA着色。 试剂（1）二苯甲酰胺荧光染料浓缩液称取二苯甲酰胺荧光染料5mg，加人100ml不含酚红和碳酸氢钠的Hank 's平衡盐溶液中，室温下用磁力搅拌器搅拌30～40分钟，使完全溶解，-20℃ 避光保存。 （2）二苯甲酰胺荧光染料工作液无酚红和碳酸氢钠的Hank ' s溶液100ml中加人二苯甲酰胺荧光染料浓缩液lml，混匀。 （3）固定液醋酸:甲醉（体积比1:3）混合溶液。 （4）封片液量取0.1mol / L枸橼酸溶液22.2ml、0.2mol / L磷酸氢二钠溶液27.8ml、甘油50.0ml，混匀，调pH值至5.5。 培养墓及指示细胞（1） DMEM完全培养基。 ( 2 ) DMEM无抗生素培养基。
氨氮测定方法
氨氮 氮是有好几个指标：氨氮，总氮，硝酸盐氮，亚硝酸盐氮，凯式氮等 氨氮比较简便准确，精密度尚可的就是纳氏试剂比色法，不过一般根据水样浑浊程度，确定采用哪种预处理方法，一般较浑浊的用蒸馏法预处理，较清洁的用絮凝沉降预处理。预处理过的水样，测定氨氮一般用纳氏试剂法测定，含量高点也 可以用滴定法。都是国标。 氨氮（NH3-N）以游离氨（NH3）或铵盐（NH4+）形式存在于水中，两者的组成比取决于水的pH值。当pH值偏高时，游离氨的比例较高。反之，则铵盐的比例为高。 水中氨氮的来源主要为生活污水中含氮有机物受微生物作用的分解产物，某些工业废水，如焦化废水和合成氨化肥厂废水等，以及农田排水。此外，在无氧环境中，水中存在的亚硝酸盐亦可受微生物作用，还原为氨。在有氧环境中，水中氨亦可转变为亚硝酸盐、甚至继续转变为硝酸盐。 测定水中各种形态的氮化合物，有助于评价水体被污染和“自净”状况。 氨氮含量较高时，对鱼类则可呈现毒害作用。 1．方法的选择 氨氮的测定方法，通常有纳氏比色法、苯酚-次氯酸盐（或水杨酸-次氯酸盐）比色法和电极法等。纳氏试剂比色法具操作简便、灵敏等特点，水中钙、镁和铁等金属离子、硫化物、醛和酮类、颜色，以及浑浊等干扰测定，需做相应的预处理，苯酚-次氯酸盐比色法具灵敏、稳定等优点，干扰情况和消除方法同纳氏试剂比色法。电极法通常不需要对水样进行预处理和具测
量范围宽等优点。氨氮含量较高时，尚可采用蒸馏﹣酸滴定法。 2．水样的保存 水样采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶内，并应尽快分析，必要时可加硫酸将水样酸化至pH<2，于2—5℃下存放。酸化样品应注意防止吸收空气中的氮而遭致污染。 预处理 水样带色或浑浊以及含其它一些干扰物质，影响氨氮的测定。为此，在分析时需做适当的预处理。对较清洁的水，可采用絮凝沉淀法，对污染严重的水或工业废水，则以蒸馏法使之消除干扰。 （一）絮凝沉淀法 概述 加适量的硫酸锌于水样中，并加氢氧化钠使呈碱性，生成氢氧化锌沉淀，再经过滤去除颜色和浑浊等。 仪器 100ml具塞量筒或比色管。 试剂 （1）10%（m/V）硫酸锌溶液：称取10g硫酸锌溶于水，稀释至100ml。（2）25%氢氧化钠溶液：称取25g氢氧化钠溶于水，稀释至100ml,贮于聚乙烯瓶中。 （3）硫酸ρ=。 步骤 取100ml水样于具塞量筒或比色管中，加入1ml 10%硫酸锌溶液和— 25%
电泳涂料常规参数的检测方法
电泳涂料常规参数的检测方法 1．固体分的测量 固体份是指电泳涂料在105℃时加热3小时后，剩余的干燥树脂和颜料份的百分含量。测定方法如下: ①称取约2g的槽液存于干燥洁净的小蒸发皿中，在105℃下，烘干3小时，称量。 ②计算：NV%=（W2/W1)×100% 式中: NV%—固体份值 W2 —烘干后残留物重量 W1 —样品起始称量 ③测定时，可取2—3个平行实验计算平均值。 2．PH值的测定 测定pH值，可采用一般pH计。测定前，先按pH计的说明书校准计。测定温度控制在25℃。其中槽液、极液、超滤液、去离子水可直接取样测定，而乳液和色浆则必须先用去离子水稀释一倍后再测定。 3．电导率的测定 电导率的测定可采用一般的电导仪测定。具体步骤如下: ①先按电导仪的使用说明书预热，调试仪器。 ②再根据说明分别测定待测液体的电导率。注意温度控制在25℃。 4．MEQ值的测定 电泳涂料的MEQ值=中和剂／胺值（酸值），也可用中和100g涂料固体份所需中和剂的毫克量来表示。MEQ值的测定方法如下（仅适用于槽液）： ①取10g电泳涂料槽液（精确到1mg）放入250ml烧杯中，加入50ml四氢呋喃，用电磁搅拌充分搅拌均匀。 ②用0.1N氢氧化钠，3ml以／分的速度（自动或手动滴定均可）进行滴定。 ③将所有测定的数据记作消耗碱的函数。 ④经所测定的各点圆滑连接，用平行尺根据曲线的拐点找出曲线与拐点的两条平行切线的垂线相交二分之一点，此点即为中和点。此点对应值即为消耗的碱量。 ⑤计算: ＭＥＱ＝（Ｖ－Ｖ'）×N×100／WS 式中: Ｖ—等当点时耗碱量（ml） Ｖ'—四氢呋喃耗碱量（ml） Ｎ—氢氧化钠溶液的浓度 Ｓ—试样的固体份（％）
(完整版)三氯蔗糖
中文名：三氯蔗糖 英文名：Sucralose 别名：4,1',6'-三氯-4,1',6'-三脱氧半乳蔗糖 CAS NO. ：56038-13-2 分子式：C12H19Cl3O8 分子量：397.064 三氯蔗糖(Sucralose, TGS)是目前唯一以蔗糖为原料生产的功能性甜味剂，其甜度是 蔗糖的600 倍，且甜味纯正，甜味特性十分类似蔗糖，没有任何苦后味；无热量，不龋齿， 稳定性好，尤其在水溶液中特别稳定。经过长时间的毒理试验证明其安全性极高，是目前最 优秀的功能性甜味剂之一，现已有美国、加拿大、澳大利亚、俄罗斯、中国等三十多个国家 批准使用。三氯蔗糖已广泛应用于饮料、食品、医药、化妆品等行业，由于三氯蔗糖是一种 新型非营养性甜味剂，是肥胖症、心血管病和糖尿病患者理想的食品添加剂，因此，它在保 健食品和医药中的应用不断扩大。 三氯蔗糖最早由英国Tate&Lyle 公司和美国Johnson 公司的子公司McNeil Specialty Products Company 经过大量研究，于1976年开发成功并申请了专利。80 年代中期，国际上 16 位知名专家组成的专门小组对三氯蔗糖的安全性问题进行了权威评价，确认三氯蔗糖对 于广泛用途来说是安全的。1988年三氯蔗糖由McNeil Specialty Products公司以Splenda商 标率先进入北美市场；FAO/WHO 经过140多次安全和环境的研究来确定三氯蔗糖的安全性， 于1990年确定其ADL值为15mg/kg。我国于1997年7月1日起批准使用三氯蔗糖。1998 年3 月21 日，美国FDA 批准了三氯蔗糖食品添加剂的地位；2001 年三氯蔗糖专利保护到期。目前已经有三十几个国家批准使用三氯蔗糖，其已经广泛应用于370 多种食品当中。 三氯蔗糖仅是高度甜味剂的一种。目前，我国高度甜味剂市场主要由糖精钠、甜蜜素、 阿斯巴甜、安赛密、甜菊糖占据，三氯蔗糖、甜菊苷等也占据一定份额。从长远看，三氯蔗 糖的发展前景最大。 随着国家提出可持续发展战略和满足国内健康饮食文化的发展，开发各种高甜度的甜 味剂替代蔗糖具有重要的社会效益和经济意义，目前，我国蔗糖供大于求，价格呈下降趋势。 从蔗糖生产高科技含量、高附加值的三氯蔗糖产品，以满足人民群众的生活和健康需要，具有重要的社会意义和经济价值。三氯蔗糖作为非营养型甜味剂将作为专用甜味剂在食品工业 中占据主要地位，并必将得到大力发展和广泛应用，发展前景广阔。 本报告技术部分对三氯蔗糖的生产工艺及技术进展做了详细的介绍，从反应原理、工艺 流程、工艺过程、反应机理、副反应及预防控制措施、设备、岗位定员、成本估算、环境保 护、技术特点、产品质量标准等许多方面进行了深入探讨，可以供国内三氯蔗糖技术开发参 考；本报告通过参考大量专利文献对三氯蔗糖的工艺技术进展做了系统介绍。 本报告市场部分从三氯蔗糖的用途、下游产品、国内外生产状况、国内潜在生产厂家、 国外生产厂家及规模、国内外产量走势、市场状况及预测、供需状况分析及预测、价格、进 出口状况、国内外市场分布、国内需求厂家及联系方式、国外需求厂家统计及潜在客户等诸 多方面对三氯蔗糖的市场状况及发展方向做了详细论述，可作为三氯蔗糖的市场销售、客户 开发、产品深加工等方面的重要参考信息。 八大产品优势 1、甜度高 三氯蔗糖的甜度是蔗糖的600-650 倍，是阿斯巴甜甜度的 3 倍。 2、口感优越 三氯蔗糖甜味纯正，甜感的呈现速度、最大甜味的感受速度、甜味持续时间及后味等三个方面都
SNPs检测方法比较
一、定义 单核苷酸多态性( single nucleotide olymorphisms ,SNPs)，主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA 序列多态性。 二、SNPs的研究意义 遗传标记 具有已知性、可遗传性、可检测性，用于疾病基因的定位、克隆和鉴定。 基因多态与疾病相关性 研究SNPs 本身对机体的影响，尤其是疾病的易感性、个性化医疗。 三、SNPs检测方法的分类 1、测序方法：常规测序，Pyrosequencing（焦磷酸测序），微测序(SNaPshot) 2、基于杂交的方法：Taqman 探针法，Microarray 芯片法， 3、引物延伸：MALDI-Tof，dHPLC（变性高效液相色谱技术） 4、以构象为基础的方法：RFLP，SSCP，DGGE 5、溶解曲线：HRM(高分辨率溶解曲线分析技术) 四、各方法概述与比较 测序方法 1、测序方法------ 一般测序和焦磷酸测序 步骤： 序列比对-- 引物设计-- DNA 提取-- PCR - 割胶纯化-- 直接测序或装克隆测序。 优点： SNP 分析金标准，能发现已知SNP，也能发现未知SNP。 缺点： 每个样本的每个位点均需要经PCR 扩增，跑胶，然后切胶纯化，再测序。步骤多而分散，成本较高，工作量大，周期长，价格昂贵，不适合大样本多位点检测。 2、测序方法------微测序方法（SNaPshot） 微测序流程： 1）.设计PCR 扩增含SNPs 位点的一段DNA 2）.对PCR 产物进行纯化（去除引物和dNTP) 3）.引物延伸 4）.延伸产物检测（放射性同位素标记法、发光检测法、凝胶为基础的荧光检测法、质谱分析法、变性高压液相色谱法等） 优势： 类似普通测序，但10 个位点PCR 产物同时引物延伸，通量增加。 劣势： 前处理等同普通测序：每个样品的每个位通过点都需要PCR预先扩增，跑胶，割胶，DNA 纯化。不同是10 个位点可以同时测序，提高了测序效率，但对延伸引物要求极高，如每个引物有4-6 个碱基差异，不能有互补区段，还要相同条件延伸，除厂家已经验证的少数位点外，很难自己设计针对新位点的检测。多个分散步骤，费钱费时，易出错。 3、测序方法------费用成本组成： ?基因组DNA提取费用
儿童支原体RNA检测及肺炎支原体抗体的比较
儿童支原体RNA检测及肺炎支原体抗体的比较 发表时间：2016-05-09T11:40:39.230Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2016年1月第2期作者：王玉琪 [导读] 比较2种检测方法的优缺点。结论：MP-RNA、MP-IgM均是诊断MP感染的有效指标，为临床诊断及治疗提供了有力的依据。 王玉琪 浙江大学医学院附属儿童医院浙江杭州 310052 【摘要】目前：通过对肺炎支原体（MP）RNA检测及抗炎支原体抗体（MP-IgM）的研究，探讨两种检测方法在临床中的应用。方法：对208例肺炎住院患儿行呼吸道分泌物MP-RNA及血清MP-IgM测定，比较2种检测方法的优缺点。结论：MP-RNA、MP-IgM均是诊断MP感染的有效指标，为临床诊断及治疗提供了有力的依据。 【关键词】肺炎支原体；抗体检测；RNA检测 肺炎支原体是（MP）是小儿呼吸道感染常见的病原体之一，可引起上呼吸道及下呼吸道感染，尤其是社区获得性肺炎（CAP）的重要病原[1]。MP的实验室检测方法有很多，血清学检测是目前MP感染的常规实验室手段[1]，利用酶联免疫吸附试验，如检测持续高滴度MP-IgM或恢复期抗体滴度较急性期4倍或4倍以上变化可诊断。近年随着分子生物学技术的发展，RNA恒温扩增实时荧光检测（SAT）技术应用于临床，为MP感染的早期诊断提供了新的检测方法。本研究对本院208例疑似肺炎支原体肺炎患儿分别采集呼吸道分泌物及血清同时检测患儿的MP RNA及MP-IgM，现将结果报告如下。 1资料与方法 1.1 一般资料 选择2015年6月1日~2015年12月1日在本院住院的疑似MP呼吸道感染的患儿208例，其中男性106例，女性102例，年龄1个月~13岁。根据年龄分为两组，A组（0~3岁，n=128），B组（3~12岁，n=80）。两组患者的一般资料具有可比性（P<0.05）。 1.2 仪器与试剂 杭州……………… 1.3方法 采集患静脉全血，常规分离血清后检测肺炎支原体抗体（MP-IgM），同时用灭菌棉签采集受试者咽部样本（大于1岁患儿）或痰液（小于1岁）行MP RNA检测。操作方法均严格按照试剂盒说明书进行。 1.4 肺炎支原体肺炎临床诊断标准：持续咳嗽，可伴有发热，白细胞计数正常或稍高，X线提示两肺均匀一致改变的片状阴影或大叶性肺炎改变。 1.5 统计学处理采用SPSS 18.0软件对所得数据进行统计分析，资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果 208例患中，MP-IgM阳性率34.1%（71/208），MP RNA检测结果阳性共率31.2%（65/208），两者比较差异无统计学意义 （P>0.05）。 3 讨论 肺炎支原体（MP）是引起儿童呼吸道感染，尤其是社区获得性肺炎的常见病原体之一，临床表现为干咳、发热，部分患儿可出现胸腔积液、肺纤维化，肺外损害，如皮肤、胃肠道、血液系统损害、骨关节肌肉、中枢神经系统、心血管系统等[2-4]。MP感染症状可持续或迁延数周或数月，常可引起慢性咳嗽和反复呼吸道感染，还可能引起喘息。MP感染患儿临床表现常不典型，常规抗生素治疗效果欠佳，因此，早期诊断对临床治疗有着重要意义。目前，多种检测方法针对MP-IgM，具有灵敏度高，特异性强，操作简便快速的特点，已作为早期诊断MP感染的客观指标而应用于临床。本研究结果显示，208例患儿中，痰液标本或咽拭子SAT法，MP RNA阳性率34.6%，ELASA法测定MP-IgM阳性率29.3%，两者比较有统计学意义（P<0.05），这可能与血清标本留取时间有关，MP感染后约7d可在血清中检测出MP-DNA抗体，疾病早期可呈假阴性[5]。同时，在组内两种检测手段也呈现了不同结果。A组中的MP RNA的阳性率高于MP-IgM的检测 （P<0.01），这可能由于婴儿免疫系统发育不完善，当MP感染后不能产生或产生效价较低的抗体而导致漏诊，提示MP RNA方法更适于年幼儿和免疫损害患儿的MP感染的早期诊断[5]；而核酸检测受年龄影响较小，故阳性率较高。B组中，两种检测方法阳性率分别相比较无统计学意义（P>0.05），说明咽拭子MP RNA检测方法同样具有较高的敏感性，但同时需结合MP-IgM检测结果，以除外假阳性结果。综上所述，MP-IgM检测及MP RNA检测在诊断MP感染均有较高的价值，二者联合应用可提高检测的准确性，为临床诊断提供有力的依据。 参考文献： [1]Vervloet LA，Marguet C，Camargos PA．Infection byMycoplasma pneumoniae and its importance as an etiologicalagent in childhoodcommunity-acquired pneumonias[J]．Braz J Infect Dis，2007，11（5）：507—514． [2]Gaillat J，Elahault A，deBarbeyrac B，et https://www.sodocs.net/doc/809900276.html,munity epidemiology of Chlamydiaand Mycoplasma pneumoniae in LRTI in France over 29 months[J].Eur JEpidemiol，2005，20（7）：643-651. [3]Blasi F．Atypical pathogens and respiratory tract infee—tions[J]．Eur Respir J，2004，24（1）：171—181． [4]Hansbro PM，Beagley KW，Horvat JC，et a1．Role ofatypical bacterial infection of the lung in predisposition／protection ofasthma[J]．Pharnlaeol Ther，2004，101（3）：193-210． [5] Kim NH，Lee JA，Eun BW，et a1．Comparison of poly-merase chain reaction and the indirect particle agglutinationantibody test for
氨氮两种方法的比较
编号： 实验名称： 氨氮的测定 比色法与中和滴定法之间的比较实验人员：实验日期：
实验目的： 通过对A区雨水口、B区雨水口南、B区雨水口北、工业废水等四个点COD的测定,从而确定比色法与中和滴定法之间差异。 实验过程： 一、比色法 1、方法概要 铵氮是由铵离子和部分氨发生反应而组成的。存在一个PH（4~13）的平衡。在强碱性溶液中铵氮几乎完全是氨，与次氯酸离子反应后形成氯化铵，与取代羟基反应形成一种靛酚衍生物。用分光光度法测定仪进行测定。 此方法参照美国环保署350.1，美国标准方法4500-NH3D和国标标准7150/1 2、仪器 DR2800（HACH）、铵氮测试管 3、试剂 铵氮测试包（货号：M00127F5） 铵氮测试包（货号：M00128F5） 4、试样制备 a NH4-N测量范围为（0.4~50mg/L）：在铵氮测试管中加入0.1ml 水样，先加入试剂包M00127F5 ，再加入试剂包M00128F5，放置20min 后再仪器上测量，同时用去离子水做空白。 5、分析步骤 a 打开仪器电源，仪器进行自检，使仪器稳定10min； b 在常用程序中选择铵氮0-50mg/L测试程序； c 将空白放入仪器中，按零进行调零； d 将样品放入仪器按读数即可测出铵氮的含量mg/L。 二、中和滴定法 1、原理 滴定法适用于已进行蒸馏预处理的水样。当蒸馏试样的pH保持在7.4时，氨呈气态蒸出，吸收于硼酸水溶液中，用标准盐酸溶液直接滴定，即可测得氨氮含量。 2、试剂 a混合指示剂：称取0.1克甲基红溶于100毫升95%乙醇，另称取0.2克亚甲基蓝溶于100毫升95%乙醇。以4份甲基红溶液与一份亚甲基蓝溶液混合后使用。
食品中三氯蔗糖蔗糖素的测定征求意见稿
食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的测定 （征求意见稿） 中华人民共和国卫生部发布
前言 本标准代替GB/T 22255-2008《食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定》。本标准与GB/T 22255-2008相比，主要变化如下： ——增加了含20%以上糖或糖醇的试样的制备步骤； ——高效液相色谱分离采用了等度洗脱。
食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的测定 1 范围 本标准规定了食品中三氯蔗糖的液相色谱测定方法。 本标准适用于食品中三氯蔗糖的测定。 2原理 三氯蔗糖是水溶性物质，易溶于水和甲醇。试样经75%（V+V）甲醇水溶液提取并去除蛋白，含脂肪高的样品再以正己烷萃取去除脂肪，水相经水浴蒸干，加水定容（可根据需要采取中性氧化铝固相萃取柱净化或者C18固相萃取柱富集净化），过滤后进高效液相色谱仪，经反相C18色谱柱分离后，由蒸发光散射检测器检测，根据保留时间定性,以峰面积定量。 3 试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 3.1 甲醇（CH3OH）。 3.2 乙腈（CH3CN）：色谱纯。 3.3正己烷（C6H14）。 3.4商品化中性氧化铝固相萃取柱（2 g装）。 3.5 C18固相萃取柱（3 mL,500 mg）使用前依次用4 mL甲醇，4 mL水活化。 3.6 三氯蔗糖标准品（C12H19C l3O8）：纯度≥99%。 3.7 标准溶液的制备 3.7.1 三氯蔗糖贮备液（0.50 mg/mL）：精确称取三氯蔗糖对照品0.0500 g，用水定容至100 mL，混匀，其中三氯蔗糖浓度为0.50 mg/mL。贮备液置于4 ℃冰箱中保存。 3.7.2三氯蔗糖工作液：分别吸取0.0 mL、1.0 mL、3.0 mL、5.0 mL、8.0 mL三氯蔗糖贮备液于10 mL 容量瓶中，用水定容至刻度。其中三氯蔗糖工作液浓度分别为0.00 mg/mL、0.050 mg/mL、0.15 mg/mL、0.25 mg/mL、0.40 mg/mL。 4 仪器和设备 4.1高效液相色谱仪：附蒸发光散射检测器。 4.2天平：感量分别为0.1 mg、1 mg。 4.3涡旋混合器。 4.4离心机：转速≥3000 r/min。
PCR法支原体检测
PCR法支原体测定PROTOCOL 生效日期（年-月-日） 有效期至（年-月-日） 分发部门：质量部
1.目的 规范PCR法支原体检测的操作方法。 2.范围 适用于项目研发过程样品、原液、成品及中间体的分析。 3.责任 质量分析人员熟悉并遵守该标准操作规程。 4.定义 N/A 5.设备、材料和试剂 5.1设备、材料 设备名生产商型号/货号备注PCR仪Thermo ARKTIK5020 N/A VORTEX IKA GENIUS 3 N/A 小型台式冷冻离心 机Thermo HERAEUS Fresco 21 N/A 单道移液器 (10ul,20ul,100ul) Eppendorf Research plus N/A 多功能水平电泳槽Tanon HE-120 N/A 凝胶成像系统BIORAD ChemiDoc? XRS+ System N/A 5.2试剂 试剂名称生产商货号TaKaRa PCR Mycoplasma Detection Set TaKaRa 6601 TaKaRa Ex Taq? TaKaRa RR001A Regular Agarose G-10 Biowest N/A Goldview 国产N/A
10×Loading Buffer TaKaRa 9157 DL5000 DNA Marker TaKaRa 3428A 内毒素检查用水厦门鲎试剂实验厂有限公司 6.溶液配制 6.1 50× TAE Buffer 称取242.0g Tris，37.2g Na2EDTA·2H2O于1L烧杯中，向烧杯中加入约800ml 超纯水，充分混匀，加入57.1ml冰乙酸，充分溶解，加入超纯水定容至1L，室温保存。有效期6个月。 6.2 1× TAE Buffer 量取10ml 50× TAE Buffer，加入490ml超纯水，充分混匀。有效期6个月。 7.操作步骤 用于检测支原体的样品是接种后进行3-6天细胞培养的培养上清液。如果使用常用的细胞培养基时，培养上清可直接加入到PCR反应液中，如果使用细胞悬浊液作为样品，则需要提取DNA，再进行PCR反应。如果样品中含有PCR 反应阻碍物，需要对DNA进行抽提，再添加到PCR反应液中，为了确认样品中是否含有反应阻碍物，在样品中加入Control Template进行正对照反应。 7.1 1st PCR反应 7.1.1按下表顺序配制反应混合液（50ul体系） 试剂用量（ul） 内毒素检查用水37.75~38.75 10× PCR Buffer 5 dNTP Mixture 4 MCGp F1 Primer 0.5 MCGp R1 Primer 0.5