人(Human)甲型肝炎病毒抗原(HAVAg)ELISA试剂盒说明书

上海笃玛生物科技有限公司

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

人（Human）甲型肝炎病毒抗原（HAV-Ag）

ELISA 检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被甲型肝炎病毒抗体（HAV-Ab）的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB 显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲型肝炎病毒抗原（HAV-Ag）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.

血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细

胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.

血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.

组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟

取上清。5.

保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存

于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱操作注意事项1.

试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的

浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保

存。3.

浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。4.

严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

上海笃玛生物科技有限公司

5.所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管

0.3mL*6管

无样本稀释液6mL 3mL 无检测抗体-HRP 10mL 5mL 无

20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释

底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液6mL 3mL 无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋

1个

1个

无

注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、0.5、1、2、4、8μg/mL

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1.

手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min 后甩尽

孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。2.

自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

操作步骤1.

从室温平衡20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自

封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μ

L；3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。4.

除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.

弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去

洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6.每孔加入底物A、B 各50μL，37℃避光孵育15min。

7.

每孔加入终止液50μL，15min 内，在450nm 波长处测定各孔的

OD 值。结果判断

绘制标准曲线：在Excel 工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD 值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样

上海笃玛生物科技有限公司

本浓度值。试剂盒性能1.

准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R 值，大于等于

0.9900。2.灵敏度：最低检测浓度小于0.1μg/mL。3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。5.

贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

6.有效期：6个月

免责声明1.

试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所

产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。2.

严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者

承担。

上海笃玛生物科技有限公司

FOR RESEARCH USE ONLY.

NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.

Human hepatitis A virus antigen (HA V-Ag)ELISA Kit

instruction

Intended use

This HAV-Ag ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450nm using a spectrophotometer.In order to measure the concentration of HAV-Ag in the sample,this HAV-Ag ELISA Kit includes a set of calibration standards.The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus HAV-Ag concentration.The concentration of HAV-Ag in the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.

Sample collection and storages Serum -Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30minutes

before centrifugation for 10minutes at approximately 3000×g.Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃.Avoid repeated

freeze-thaw cycles

Plasma -Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant.Centrifuge

samples for 30minutes at 3000×g at 2-8℃within 30minutes of collection.Store samples at -20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.

Cell culture supernates and other biological fluids -Remove particulates

by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.

Note:

The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or

granule was allowed.

Materials required but not supplied

1.Standard microplate reader(450nm)

2.Precision pipettes and Disposable pipette tips.

3.

37℃incubator

Precautions

上海笃玛生物科技有限公司

1.Do not substitute reagents from one kit to another.Standard,conjugate and

microplates are matched for optimal https://www.sodocs.net/doc/8218736345.html,e only the reagents supplied by manufacturer.2.

Do not remove microplate from the storage bag until needed.Unused strips

should be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3.

Mix all reagents before using.

Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature (20-25°C)

Materials supplied

Name 96determinations

48determinations

Microelisa stripplate

12*8strips 12*4strips Standard 0.3ml*6tubes

0.3ml*6tubes

Sample Diluent 6.0ml 3.0ml HRP-Conjugate reagent 10.0ml 5.0ml 20X Wash solution 25ml 15ml Chromogen Solution A 6.0ml 3.0ml Chromogen Solution B

6.0ml 3.0ml Stop Solution 6.0ml 3.0ml Closure plate membrane

22User manual

1

1

Sealed bags 11

Note:Standard (S0→S5)concentration was followed by:0,0.5,1,2,4,8μg/mL

Reagent preparation

20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water 1:20.

Assay procedure

1.

Prepare all re a g e n t s before starting assay procedure.It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2.

Add standard:Set Standard wells,testing sample wells.Add standard 50μl to

standard well.3.

Add Sample:Add testing sample 10μl then add Sample Diluent 40μl to testing

sample well;Blank well doesn’t add anyting.4.

Add 100μl of HRP-conjugate reagent to each well,c over with an adhesive strip

and incubate for 60minutes at 37°C.5.

Aspirate each well and wash,repeating the process four times for a total of five

washes.Wash by filling each well with Wash Solution (400μl )using a squirt bottle,manifold dispenser or https://www.sodocs.net/doc/8218736345.html,plete removal of liquid at each step is essential to good performance.After the last wash,remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting.Invert the plate and blot it against clean paper

上海笃玛生物科技有限公司

towels.6.

Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well.

Gently mix and incubate for 15minutes at 37°C.Protect from light.7.

Add 50μl Stop Solution to each well.The color in the wells should change

from blue to yellow.If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.8.

Read the Optical Density (O.D.)at 450nm using a microtiter plate reader

within 15minutes.

Calculation of results

1.

This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample.The standard curve is generated by plotting the average O.D.(450nm)obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y)axis versus the corresponding concentration on the horizontal (X)axis.2.

First,calculate the mean O.D.value for each standard and sample.All O.D.values,are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation.Construct the standard curve using graph paper or statistical software.3.

To determine the amount in each sample,first locate the O.D.value on the

Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve.At the point of intersection,draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration.4.

Any variation in operator,pipetting and washing technique,incubation time or temperature,and kit age can cause variation in result.Each user should obtain their own standard curve.5.The sensitivity by this assay is 0.1μg/mL 6.

Standard curve

上海笃玛生物科技有限公司

Storage ：2-8℃.validity ：six months.

FOR RESEARCH USE ONLY;NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGH

ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!

甲肝病毒

甲肝病毒英文名为Hapatitis A virus,HAV，是一种寄生于肝脏上的病毒，首先在急性期患者的粪便中发现。 编辑摘要 甲肝病毒- 甲肝病毒概述 1973年Feinslone 首先用免疫电镜技术在急性期患者的粪便中发现甲型肝炎病毒(Hapatitis A virus,HAV ) 。属微小RNA病毒科，新型肠道病毒72型。人类感染HAV后，大多表现为亚临床或隐性感染，仅少数人表现为急性甲型肝炎。一般可完全恢复，不转为慢性肝炎，亦无慢性携带者 甲肝病毒 甲肝病毒- 生物学性状 （一）形态与结构 病毒呈球形，直径约为27nm。无囊膜。衣壳由60个壳微粒组成，呈20面体立体对称，有HAV的特异性抗原(HAVAg)，每一壳微粒由4种不同的多肽即VP1、VP2、VP3和VP4所组成。 在病毒的核心部位，为单股正链RNA。

除决定病毒的遗传特性外，兼具信使RNA的功能，并有传染性。 HAV的单股RNA，其长度相当于7400个核苷酸。在RNA的3′末端有多聚的腺苷序列，在5′末端以共价形式连接一由病毒基因编码的细小蛋白质，称病毒基因组蛋白（Viral protein ,genomic,VPG）。 它在病毒复制过程中，能使病毒核酸附着于宿主细胞的核蛋白体上进行病毒蛋白质的生物合成。 （二）病毒感染模型与培养 黑猩猩和狨猴对HAV易感，且能传代，经口或静脉注射可使动物发生肝炎，并能在肝细胞冻中检出HAV。在潜伏期和急性期的早期，HAV可随粪便排出。恢复期血清中能检出HAV的相应抗体。 1979年Provost 等首次成功地将已适应在狨猴传代的毒株培养于原狨猴肝细胞或恒河猴胚肾细胞FPhK6株中。我国学者也先后成功地使HAV在肝癌细胞株中增殖。病毒在组织培养细胞中虽可增殖。但不引起细胞病变，且增殖与细胞释放均甚缓慢。应用免

甲型病毒性肝炎诊断标准

甲型病毒性肝炎诊断标准甲型病毒性肝炎（简称甲肝）是由甲型肝炎病毒（HAV）引起的常见消化道传染病。本病主要经粪口传染，不但终年散发，同时还常出现季节性或食物源性的暴发性流行，从而危害人民健康。是我国乙类法定传染病之一。 1、诊断依据 1.1.流行病学史 发病前2周~7周内有吃不洁食物史或饮不洁生水或与甲肝急性病人有密切接触史；或当地出现甲型肝炎爆发或流行，或有甲型肝炎流行区旅行史。 1.2.临床表现 1.2.1.发热、乏力和纳差、恶心、呕吐或者腹胀、便秘等消化道症状；肝脏肿大，伴有触痛或叩痛。 1.2.2.有巩膜、皮肤黄染并排除其他疾病所致黄疸者。 1.3.实验室检查 1.3.1.血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）明显升高。 1.3. 2.血清总胆红素（TBIL）大于正常上限数值一倍以上和（或）尿胆红素阳性。 1.3.3.血清学检测：抗-HAV IgM阳性或抗-HAV IgG双份血清呈4倍升高。 2、诊断原则 根据流行病学、临床症状、体征、实验室检查等进行综合分析和

诊断。因为甲型肝炎的临床表现与其他急性病毒性肝炎极其相似，确诊依赖于特异性的血清学检查。 3.诊断标准 甲型肝炎分为急性无黄疸型和急性黄疸型。 3．1.急性无黄疸型肝炎 3．1．1流行病学：发病前2周~7周内有吃不洁食物史或饮不洁生水或与甲肝急性病人有密切接触史；或当地出现甲型肝炎爆发或流行，或有甲型肝炎流行区旅行史。 3．1．2.症状：近1周左右出现的无其他原因可解释的发热、乏力和纳差、恶心、呕吐或者腹胀、便秘等消化道症状。 3.1.3.体征：肝脏肿大，伴有触痛或叩痛。 3．1.4肝功能检查：谷丙转氨酶（ALT）明显异常，血清总胆红素（TBIL）大于正常上限数值一倍以上和（或）尿胆红素阳性。 3．1．5HAV标志检测：血清抗HAV－IgM阳性或抗HAV－IgG 双份血清呈4倍升高者 疑似病例：3．1．2＋3．1．4。 确诊病例：疑似病例加3．1．5。 3．1．2急性黄疸型肝炎 凡符合急性无黄疸型肝炎诊断条件，且血清胆红素大于17μmO1／L，尿胆红素阳性，或临床上有巩膜、皮肤黄疸并排除其他疾病所致黄疸者可确诊。 3．2淤胆型肝炎

大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒说明书

大鼠皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒 使用说明书 厦门慧嘉生物科技有限公司 本试剂盒仅供体外研究使用! 预期应用 ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中皮质醇(Cortisol)含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗皮质醇(Cortisol)抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗皮质醇(Cortisol)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。ELISA法 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板：一块（96孔） 2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上， 然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为180 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成180 ng/ml，90 ng/ml，45 ng/ml，22.5 ng/ml，11.25 ng/ml， 5.63 ng/ml，2.82 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。 如配制90 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 180 ng/ml的上述标准品加入含有 0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3. 样品稀释液：1×20ml。 4. 检测稀释液A：1×10ml。 5. 检测稀释液B：1×10ml。 6. 检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算 好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 7. 检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶 液A。 8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 11. 覆膜：5张 12. 使用说明书：1份 自备物品 1. 酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热） 2. 微量加液器及吸头，EP管 3. 蒸馏水或去离子水，全新滤纸

人(Human)瘦素(LEP)ELISA试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）瘦素（LEP）ELISA检测试剂盒 使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被瘦素（LEP）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素（LEP）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品 1.酶标仪（450nm） 2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 操作注意事项 1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。 3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。 4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5.所有液体组分使用前充分摇匀。

病毒性甲型肝炎(甲肝)

脊髓灰质炎 1 致病病原体：脊髓灰质炎病毒引起的急性消化道传染病。 2 传染源：隐性感染者、脊髓灰质炎病人。 3 潜伏期：3-35天，一般5-14天。 4 传播途径：粪-口途径，水源、食物污染、手、用具。 5 主要症状：可先有发热、乏力、食欲不振、恶心、呕吐等消化道症状，也可有头痛、咽痛、流涕、咳嗽等上呼吸道症状，一般发热1-4天；之后出现中枢系统症状，肌肉疼痛、多汗、尿潴留、麻痹、瘫痪。 6脊髓灰质炎的危害：可遗留肌肉麻痹瘫痪，不及时治疗病死率极高。 7易感人群：14岁以下儿童及未免疫接种40岁以下成人。感染后产生持久免疫力。 8隔离治疗：发病第一周呼吸道隔离，第二周期至40天消化道隔离；无特异治疗方法，主要为对症及康复治疗。 9 预防：1）管理传染源：早发现、早诊断、早报告、早隔离、早治疗，病人住院隔离治疗；2）切断传播途径：加强水源、饮食、粪便管理，人群养成良好的公共卫生和个人卫生习惯。2）免疫接种：常规免疫（婴儿于生后2、3、4月龄各口服1剂三价脊髓灰质炎减毒活疫苗，1.5岁复服1剂，4岁加强免疫1剂）。强化免疫（5-7岁以下人群春季两轮脊灰疫苗接种，高危人群查漏补种）。 病毒性甲型肝炎（甲肝） 1 致病病原体：由甲型肝炎病毒引起的急性消化道传染病。 2 传染源：隐性感染者、潜伏期末期和急性期病人。 3 潜伏期：15-45天，平均30天。 4 传播途径：粪-口途径，水源、食物污染

5 主要症状：发热、乏力、食欲不振、恶心、呕吐、肝区胀痛、皮肤巩膜黄染、茶色尿。 6甲肝的危害：肝功能严重受损的急性和亚急性肝炎、肝性脑病、肝肾综合征、脑水肿、脑疝，不及时治疗病死率极高。 7易感人群：6个月以上的人群未接种疫苗及未感染甲肝病毒者普遍易感。感染后产生持久免疫力。 8隔离治疗：自发病起4周；治疗应用干扰素等抗病毒药物，加强营养支持治疗促进肝细胞修复和再生。 9 预防：1）管理传染源：早发现、早诊断、早报告、早隔离、早治疗，病人住院隔离治疗；2）切断传播途径：加强水源、饮食、粪便管理，人群养成良好的公共卫生和个人卫生习惯。2）免疫接种：对重点人群接种甲型肝炎灭活疫苗，8周左右产生有效抗体，维持3年以上，随后抗体滴度逐年下降，5-10年或在流行期间应加强注射。年龄大于1岁儿童和集体生活的大学生均应接种。甲肝疫苗可与乙肝疫苗联合应用，但接种部位不同。 感染性腹泻 1 致病病原体：感染性腹泻是指除霍乱、痢疾、伤寒、副伤寒以外的由多种病原体（包括病毒、细菌、寄生虫）引起的腹泻为主要表现的一类肠道传染病。 2 传染源：病人、带菌者、病畜及带菌动物。 3 潜伏期：短，副溶血弧菌6-20小时，大肠杆菌2-20小时，沙门菌属4-24小时，大肠杆菌3-4天，最长8天。 4 传播途径：粪-口途径，水源、食物污染、手、苍蝇等。 5 主要症状：腹泻，大便大于3次/日，可有发热、恶心、呕吐、腹痛及全身不适。

甲型肝炎病毒--IgM检测ELISA法作业指导书

甲型肝炎病毒--IgM检测ELISA法作业指导书 1.原理 本法是用抗人μ链捕获待测血清中特异性IgM，然后用HAV与特异性—IgM抗体反应，再加酶标记抗M 抗体，最后加底物显色。 2.标本采集 2.1采集前病人准备：受检者应空腹。 2.2标本种类：血清或血浆。 2.3标本要求：采集病人静脉血2ml（可用EDTA抗凝），室温放置不超过4小时，分离血清备用。 3.标本储存：2-8°C保存不应超过1周，-20°C不应超过3个月，-70°C长期保存，应避免反复冻融。 4.标本运输：密封，室温运输。 5.标本拒收标准：污染、标本量不足、严重溶血或脂血标本不宜作此项检测。 6.试剂

6.1 试剂名称：甲型肝炎病毒IgM抗体诊断试剂盒6.2 试剂生产厂家：厦门新创生物药业股份有限公司6.3 包装规格：96Test/Kit 6.4 试剂盒组成： HAV-IgM酶联板1块96孔，，酶标试剂1瓶，阳性对照血清1管，阴性对照血清1管，20*浓缩洗涤液，底物A 1瓶，底物B 1瓶，终止液1瓶，封口膜1张，密封袋1套。 6.5 试剂储存条件及有效期：2-8°C避光保存，有效期6个月。 7.仪器设备 7.1仪器名称：酶标仪 7.2仪器厂家：上海三科 7.3仪器型号：MC—318 8操作步骤 8.1平衡：将试剂盒各组分取出，平衡至室温（18-25°C），微孔板开封后，余者及时以自封袋封存。

8.2配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。 8.3编号：将微孔条固定于支架，按序编号每板应 设阴性对照3孔，阳性对照2孔，空白1孔。 8.4加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴，阳性对照50微升。 8.5温育（一）：充分混匀，加上封板膜，置37℃温 育20分钟。 8.6洗涤（一）：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。 8.7加酶：除空白孔外，分别在每孔中加入酶标记 抗体100 l，轻拍混匀。 8.10 温育（二）：充分混匀，加上封板膜，置37℃温育40分钟。 8.11 洗涤（二）：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。

甲型流行性感冒病毒抗原检测试剂盒

甲型流行性感冒病毒抗原检测试剂盒(胶体金法) 使用说明书 通用名:甲型流行性感冒病毒抗原检测试剂盒(胶体金法) 英文名:Influenza type A Colloid gold Rapid Diagnostic Kit 汉语拼音:JIAXING LIUXINGXING GANMAOBINGDU KANGYUAN JIANCE SHIJIHE (JIAOTIJIN FA) 【生产企业】广州健仑生物科技有限公司 【产品规格】22份/盒 【使用目的】用于鼻腔抽吸液、鼻腔擦拭液和咽喉擦拭液标本中甲型流感病毒抗原的定性测定。 【试验原理】 流行性感冒是指由流感病毒引起的具有传染力的疾病，可引发肺炎或更严重的并发症。流感病毒的结构主要包括内部的核心和外部的病毒囊膜。流感病毒核心是由核蛋白卷曲包绕螺旋形核糖核酸(RNA)组成，核蛋白的抗原稳定，很少发生变异，具有型特异性。根据核蛋白抗原性的不同，可把感染人的流感病毒分为甲、乙、丙三型。本产品是利用能够特异性识别甲型流感病毒核蛋白的单克隆抗体，以免疫色谱法检测流感病毒核蛋白的试剂盒，本试剂盒仅对样品中的甲型流感病毒有反应，对乙型及丙型流感病毒均不反应，而且不能用于区分病毒感染的亚型。 本品是由样品滴下部、试剂部和展开部三部分组成的检测板，内藏长方块状的载体。其中，试剂部包含胶体金标记抗甲型流感病毒单克隆抗体(鼠)(以下将简称为胶体金标记抗体A)；展开部包含固定化的抗甲型流感病毒单克隆抗体(鼠)(以下简称为抗流感A抗体)及抗鼠免疫球蛋白多克隆抗体(兔)(以下简称为抗鼠免疫球蛋白抗体)。 检测板各部分的名称 样品从检测板的样品滴下部滴下后，胶体金标记抗体A被溶解，与样品中的甲型流感病毒抗原形成免疫复合体。免疫复合体因展开部的毛细管现象而移动，被判定部〔T〕中固定化的抗流感A抗体捕捉，于是在判定部[T]因胶体金的作用形成紫红色的条带。本试剂盒的这个紫红色条带可以肉眼确定，以判断样品中是否存在甲型流感病毒。 另一方面，无论样品中是否有甲型流感病毒存在，剩余的胶体金标志抗体A继续在展开部移动，在判定部[C]被固定化的抗鼠免疫球蛋白抗体捕捉，因胶体金而形成紫红色条带。这显示了胶体金标志抗体的正常移动。【主要组成成份】 1.检测板:20个，每个检测板在试剂部包被有胶体金标记抗甲型流感病毒单克隆抗体(鼠)，在展开部包被有抗甲型流感病毒单克隆抗体(鼠)及抗鼠免疫球蛋白多克隆抗体(兔)。 2.样本抽提液:2瓶，11ml/瓶，为含有表面活性剂的TRIS缓冲液并添加有防腐剂，可直接使用，贮存在2～30℃可稳定至有效期。 3.灭菌棉棒20支。 4.抽提用管子20支。 5.滴头21个。 6.立架1个。 【适用仪器】 无需其他仪器，产品开封后直接使用。 【样本要求】 1)鼻腔抽吸液的采集方法 抽吸器一侧的管子连接在抽吸泵上，另一侧的管子从外鼻孔完全插入鼻腔，启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。 2)鼻腔擦拭液的采集方法 将灭菌棉棒完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲数次，采集粘膜表皮。 3)咽喉擦拭液的采集方法 将灭菌棉棒从口腔完全插入咽喉中，以咽后壁、上颚扁桃的发红部位为中心，摩擦数次，采集粘膜表皮。采

医学检验-微生物-肝炎病毒测试题

第29章 肝炎病毒测试题 一.概念 1.HBsAg：乙肝表面抗原。存在于Dane颗粒表面和小球形颗粒及管型颗粒中。可大量存在于感染血清中，是HBV感染的主要标志。 2.HBcAg：乙肝病毒核心抗原。为乙肝病毒衣壳成分，不易在血循环中检出，但抗原性强，可刺激机体产生抗HBc抗体，抗体在血清中维持时间较长，低滴度抗体是过去感染的标志，高滴度时提示病毒有活动性复制。 3.HBeAg：e抗原。游离于血清中，与病毒体及DNA多聚酶的消长一致，故可作为病毒有复制及血清具有感染性的一个指标。 二. 填空题

1．肝炎病毒有 、 、 、 和 五种类型。 2．肝炎病毒中，由粪—口途径传播的有 、 ；由血液 和垂直途径传播的有 、 、 ；属于DNA病毒的 有 ；属于缺损病毒的是 ；已有疫苗可主动免疫的是 和 ；可进行细胞培养的是 。 3．HBV的外衣壳由 、 和 蛋白组成，构成HBV的 ；内衣壳由 组成；核心由 和 组成。 4.甲型肝炎的传染源主要为 和 ,猩猩和猿猴作为传 染源的意义不大. 5.甲型肝炎的血清抗体中,表示现症感染的抗体是 ,而表示既往感 染的抗体是 . 6.乙型肝炎表面抗原(HbsAg)阳性者血清标本, 在电子显微镜下可观察 到3种不同 形态结构的颗粒,其传染性也不同, 即小球形颗粒和 以及 。 7.乙型肝炎基因组为双股环壮DNA,内含4个开放读框(ORF),分别称为S 区,C区, 和 . 1．HAV,HBV,HCV,HDV,HEV。 2．HAV、HEV, HBV,HCV,HDV, HBV, HDV, HAV,HBV, HAV。 3．S、pre-S1、pre-S2，HBsAg；HBcAg；双股非闭合环状DNA，DNA多聚 酶。 4.甲型肝炎的患者和隐性（亚临床）感染者。 5.潜伏期未期,急性期早期。

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)-ELISA试剂盒说明书

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 产品编号：E-EL-M0314 （本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!） 声明：尊敬的客户，感谢您选用本公司的产品。本产品选用世界著名生产厂家的原料，采用专业ELISA kit生产技术制造。适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组Col I浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分！如有疑问，请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。 *: [96T/48T]（打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整）

检测原理: 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠Col I抗体包被于酶标板上，实验时标本或标准品中的Col I会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠Col I抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠Col I抗体与结合在包被抗体上的小鼠Col I结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色，加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值，Col I浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线求出标本中Col I的浓度。 标本收集: 1.血清：全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集 血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。 2.血浆：抗凝剂推荐使用EDTA.Na2，标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可 检测。避免使用溶血，高血脂标本。 3.组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞 会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟，取上清检测。 4.细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。 5.其它生物标本：1000×g离心20分钟，取上清即可检测 （具体处理方法可参考：https://www.sodocs.net/doc/8218736345.html,/news2.asp?tid=477 ） 6.标本应清澈透明，悬浮物应离心去除。 7.标本收集后若不及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃/-80℃冰箱内，避免反复冻融， 1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。 8.如果您的样本中检测物浓度高于标准品最高值，请根据实际情况，做适当倍数稀释(建议先做 预实验，以确定稀释倍数)。 试验所需自备物品: 1.酶标仪(450nm波长滤光片) 2.高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL 3.37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水 4.吸水纸

甲型肝炎病毒微生物学研究及其检验

甲型肝炎病毒微生物学研究及其检验 发表时间：2017-02-15T10:55:44.967Z 来源：《系统医学》2016年17期作者：毛艳虹 [导读] 让甲型肝炎病毒患者及早康复，让其他健康人群免受甲型肝炎病毒的威胁。提高全国人民的身体健康水平。 云南昆钢医院 650302 【摘要】甲型肝炎作为一种人类常见疾病，时时困扰着我们的生活，其传播途径广，影响范围大，因此必须做好甲型肝炎病毒微生物学的研究工作，从本质上减少甲型肝炎的发病率。本文从甲型肝炎病毒的概念出发，分别讲述了关于甲型肝炎病原学的研究工作进展及其对治疗甲型肝炎的意义和目前在检测方面出现的疑惑和问题。最后提出了甲型肝炎病毒的防治方法和原则，希望可以为进行甲型肝炎病毒研究的同行提供一些依据和参考。 【关键词】甲型肝炎；概念；检测；问题；原则 【中图分类号】R512.61 【文献标识码】A 【文章编号】2096-0867（2016）17-227-01 引言 在一个人进入职场之前，每个人都必须进行甲型肝炎病毒检测，因为其携带者数量多，其自身传播途径多，范围广，会给他人带来一定的生活困扰。因此必须做好甲型肝炎病毒的检测和防治工作，只有这样才能够减少发病率，提高治疗水平，让甲型肝炎病毒患者及早康复，让其他健康人群免受甲型肝炎病毒的威胁。提高全国人民的身体健康水平。 1甲型肝炎病毒概念 甲型肝炎病毒属于可以引发肝炎的病原体。它是由1973年Feinslone 首先用免疫电镜技术在急性期患者的粪便中发现甲型肝炎病毒。属微小RNA病毒科，新型肠道病毒72型。人类感染HAV后，大多表现为亚临床或隐性感染，仅少数人表现为急性甲型肝炎。甲型肝炎病毒的形状是一个球形，体质均匀，病毒颗粒对称布置，有的病毒颗粒是实心的，有的病毒颗粒是空心的。经过研究发现，病毒颗粒是否是实心与其发展状况相关，实心的病毒颗粒是发展成熟的病毒，空心的病毒是发展不完善，没有携带RNA的病毒，是没有传染性的。其为单螺旋结构，具有七千多个核苷酸组成。其存活率很高，基本不受外部环境的干扰。在室温情况下可以存活一个星期的样子，在干粪中大约可以存活1个月的样子，它的传播途径主要是通过粪便和口。 2病原学检测及临床意义 急性甲型肝炎是很难查出来的，无论是从已经得此病的患者还是做肝功能检查途径都很难将它与其他的肝炎相区别，因此我们必须花费更多的精力去检测急性甲型肝炎病毒的病原体，这是迫在敏捷的任务和职责。 在病原体检测项目方面主要两个内容，一个是抗HAV IgM，另一个则是抗HAV IgG。HAV IgM此项检测在携带者身上出现的较早，也是刚发病不久的标志，在早期的检测中属于操作最简单但是可靠性最高的检测项目。在发病的几天后就会发生变化，会呈现出阳性，一般的持续时间为两个月到四个半月之间，有的持续时间较长，有可能持续六个月的时间。在检测时多用的是酶联免疫吸附试验。HAV IgG检测项目出现的迟一些，但是其发展速度很快，在两到三个月的时间就可以达到它的最大值，如果出现了此项目，说明该患者已经得病有一段时间了，并且可能一生都摆脱不了它的困扰。 3存在问题 在检测过程中采用酶联免疫检测法检测抗-C-100有一定的缺陷，最明显的是抗-C-100在四个月到六个月的时间里才会明显，这对于急性甲型肝炎病毒的检测来说是不利的。并且它不是简单的抗体，而是lgG 抗体。此方法受到了广大的质疑，认为其检测结果不精确。此检测方法只是针对抗体呈现阳性，而有的时候抗体会出现假阳性，因此，此方法检测受到质疑。由于HCV它的核心抗体出现的较早，因此现在用此种检测方法检测HCV，经过大量的临床试验发现其准确度相对较高，值得推广。 4防治原则 其预防工作主要是平时要养成好的生活习惯，注意在饮食方面的安全卫生，不要认为不干不净吃了没病。注意饮用清洁的水源，要注意个人卫生，饭前便后要洗手，政府应该出台相应的政策做好粪便的管理工作。注射丙种球蛋白及胎盘球蛋白是一种一劳永逸的预防措施，只要注射一次，就可以避免甲型肝炎病毒的感染。甲型肝炎病毒主要是通过粪便和口传播的，平时吃的海鲜是主要的传播途径，还有一些集体机构传染性较大，比如说学校和部队等。多数出现甲型肝炎病毒的患者早期会出现恶心、头痛、胃寒、发热、全身乏力、食欲不振、厌油腻和尿色逐渐加深渐呈浓茶色等。在治疗过程中，加药物辅助，不可以喝酒和吸烟，尽早睡觉，多在床上休息，直到病情有所缓和。血清总胆红素在17.1umol/L以下，ALT在正常值2倍以下时可以出院，但出院后仍应休息1-3月，恢复工作后应定期复查半年-1年。结语 甲型肝炎病毒是一种常见的人类疾病，会给患者的生活、工作和学习带来影响，因此必须做好甲型肝炎病毒的研究和检测工作。针对甲型肝炎病毒的特殊性，研究者花费了大量的精力和时间，取得了一定的成绩，但是在研究过程中也出现了些疑惑和问题，而解决了问题之后，其治疗措施和检测项目变得更加精确。我们个人在生活中也应该注意防止被传染，平时多注意饮食安全，发现发病早期症状尽早去医院检查和治疗。相信在大家的共同努力下，一定可以攻破甲型肝炎病毒这个难关。 参考文献 [1]单学伦.甲型肝炎的研究进展[J];现代医学;1980年03期 [2]郭元吉;甲型流感病毒在我国动物中分布的初步调查[J];中国医学科学院学报;1981年04期. [3]刘庚起,龚新昌,朱既明,任贵方,范瑞莲,阮薇琴;甲型流感病毒H1和H2之间的抗原关系(摘要)[J];中国医学科学院学报;1980年02期. [4]王宗战.胃灌洗治疗上消化道出血[J];山东医学高等专科学校学报;1980年01期.

甲型流感病毒抗原检测试剂使用说明(胶体金)-Alere BinaxNOW

甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）使用说明书 【产品名称】 通用名称：甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法） 英文名称：Alere BinaxNOW? Influenza A＆B Card 【包装规格】 22人份/盒。 【预期用途】 甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）是一种体外免疫层析试验，用于定性检测鼻咽拭子样本中的甲、乙型流感病毒核蛋白抗原，可快速地对甲、乙型流感病毒感染做出辅助鉴别诊断。 试验简介 流感是发生在呼吸道的具有高度传染性的急性病毒感染，它属于传染病范畴，可通过咳嗽或打喷嚏时排出的带有活病毒的气溶胶而在人与人之间传播。每年的秋季和冬季都可爆发流感1.甲型流感病毒的流行性比乙型流感病毒流行性要强，造成的病情也更严重，并且大多数严重的流感也都是由它引起的，而乙型流感则相对比较缓和。 针对甲、乙型流感的快速诊断试验对获取有效的抗病毒治疗是很有意义的。对流感做出快速诊断不但可减少病人住院的天数，减少抗菌素的使用，而且可减少病人的住院费用1。 甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）提供了一种用鼻咽拭子标本对甲型和乙型流感进行简便快速诊断的方法，使用方便，结果快速，在急诊检验中提供的信息可帮助医生选择治疗方案并做出是否需要收住院的决定。 甲型流感病毒有许多亚型，有些亚型可在鸟类中发现3。1997年首次报道人类甲型禽流感（H5N1，主要发生于鸟类的一种流感病毒亚型），此后，在人群中出现了H5N1病例，使人们对H5N1关注起来，H5N1的变异使得它更易在人群间传播4，由于备案的禽流感感染病人比例很低，快速试验在该类病人治疗中利用度尚不得知。 【检验原理】 甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）使用的是薄膜免疫层析技术，它利用具有高度敏感性的单克隆抗体来检测鼻咽拭子标本中的甲型和乙型流感病毒的核蛋白抗原这些单克隆抗体连同一种对照抗体分别被固定到膜支持物上，形成三条独特的线。膜支持物跟其他试剂/垫结合在一起构成检测条。检测条位于一个称作检测卡的书型铰链状的纸板中。 拭子标本需要进行预处理：用洗脱液、盐水或转移介质等将标本从拭子中洗脱出来，将标本加到检测条顶端，闭合检测卡，15分钟时根据是否出现紫红色样品线来报告结果。在有效试验中，蓝色对照线变为粉红色。 【主要组成成分】 提供的材料

人elisa试剂盒,人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒使用说明书

人elisa试剂盒,人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）ELISA 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆 樊克生物专业供应： 使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本8羟基脱氧鸟苷 （8-OHdG）含量。 试验原理： 8-OHdG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知8-OHdG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板 内进行检测。先将8-OHdG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合 的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中8-OHdG的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制 96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型 塑料膜板盖1块半块即用型 标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀 稀 空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型 标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型 生物素标记的抗8-OHdG抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型 洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀 释 底物A 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型 底物B 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型 终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型 标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型 自备材料 1．蒸馏水。 2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 3．振荡器及磁力搅拌器等。 安全性

甲型肝炎病毒IgM检测ELISA法作业指导书

甲型肝炎病毒IgM检测ELISA法作业指导书 原理 本法是用抗人μ链捕获待测血清中特异性IgM，然后用HA V 与特异性—IgM抗体反应，再加酶标记抗M抗体，最后加底物显色。 标本采集 采集前病人准备：受检者应空腹。 标本种类：血清或血浆。 标本要求：采集病人静脉血2ml（可用EDTA抗凝），室温放置不超过4小时，分离血清备用。 标本储存：2-8°C保存不应超过1周，-20°C不应超过3个月，-70°C长期保存，应避免反复冻融。 标本运输：密封，室温运输。 标本拒收标准：污染、标本量不足、严重溶血或脂血标本不宜作此项检测。 试剂 6.1 试剂名称：抗HA V—IgM检测ELISA试剂盒 6.2 试剂生产厂家：郑州博赛生物技术研究所 6.3 包装规格：48Test/Kit 6.4 试剂盒组成： 包被反应板，样品稀释液，酶标记抗体，阳性对照血清，阴

性对照血清，浓缩洗涤液，底物A，底物B，终止液，封口膜，密封袋。6.5 试剂储存条件及有效期：2-8°C避光保存，有效期6个月。 仪器设备 仪器名称：自动酶标仪 仪器厂家：KHB 仪器型号：ST360 操作步骤 平衡：将试剂盒各组分取出，平衡至室温（18-25°C），微孔板开封后，余者及时以自封袋封存。 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。 加样品稀释液：用加样器在微孔反应条板孔中加入样品稀释液，每孔100(l，空下四孔准备加对照。 加标本和留空白：将每份待检标本各5(l分别加入已有样品稀释液的各孔中，留下一孔不加标本作空白对照，标好位置。加对照：在预先空下的四孔中用加样器分别加入阴性对照一孔，阳性对照三孔，每孔100(l，标好位置。对照应在所有标本加完以后再加，以保证阈值准确性。 温育（一）：充分混匀，加上封板膜，置37℃温育20分钟。洗涤（一）：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完扣干（每次应

人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书,5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒

人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书，5羟基吲哚乙酸ELISA检测试 剂盒 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书，5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒 产品规格：96T/48T。 供应商：上海乔羽生物有限公司 上海乔羽有限公司，有elisa试剂盒，抗体，培养基 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书，5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒其主要特点如下 专一性强：抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原（或抗体），使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。 灵敏度高：由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书，5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 1.标准品复溶：试剂盒提供6管标准品，每管已标定浓度，并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL 样本稀释液，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动助其溶解，使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。 2.20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。 人(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书，5羟基吲哚乙酸ELISA检测试剂盒试剂的准备： 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 ELISA试剂盒的优势： 全面——混合8 种不同的常见抗原，对自身免疫性疾病进行全面筛查。

2016年最新流行性感冒诊断及治疗标准流程

流行性感冒（2016年版） 一、流行性感冒标准住院流程 （一）适用对象。 第一诊断为流行性感冒患者（ICD－10：J11-101）。 （二）诊断依据。 根据《流行性感冒诊疗方案》（卫生部，2000.10.13）及根据卫生部“十二五”规划教材、全国高等学校教材《传染病学》（人民卫生出版社，2013，第8版，李兰娟、任红主编）。 1.发病前7天内与传染期流感确诊病例有密切接触，并出现流感样临床表现。或发病前7天内曾到过流感流行的地区，出现流感样临床表现。 2.出现高热、头痛、周身酸痛等临床表现，同时有以下一种或几种实验室检测结果： （1）流感病毒核酸检测阳性（可采用real-time RT-PCR 和RT-PCR方法）； （2）分离到流感病毒； （3）双份血清流感病毒的特异性抗体水平呈4倍或4倍以上升高。

（三）治疗方案的选择。 根据《流行性感冒诊疗方案》（卫生部，2000.10.13）及根据卫生部“十二五”规划教材、全国高等学校教材《传染病学》（人民卫生出版社，2013）。 1.呼吸道传染病隔离。 2.一般治疗：适当休息，清淡饮食，多饮水。 3.对高热、头痛者给予解热止痛等对症治疗。 4.抗病毒治疗：奥司他韦。 （四）标准住院日为7-10天。 （五）进入路径标准。 1.第一诊断必须符合流行性感冒ICD－10：J11-101诊断编码。 2.当患者同时具有其他疾病诊断时，但在住院期间不需要特殊处理也不影响第一诊断的临床路径流程实施时，可以进入路径。 （六）住院期间的检查项目。 1.必需的检查项目： （1）血常规、尿常规、大便常规； （2）血生化：包括电解质，肝肾功能、心肌酶谱； （3）流感病毒抗原检查、流感病毒核酸检测； （4）胸片、心电图。

肝炎病毒测考试试题

冷市镇2014年肝炎病毒培训测试题村名姓名计分 一、选择题 A型题 1. 甲型肝炎病毒属于 A. 肠道病毒70型 B. 肠道病毒72型 C. 腺病毒8型 D. 疱疹病毒6型 E. ECHO病毒 2. 甲型肝炎病毒的主要传播途径是 A.呼吸道传播 B.消化道传播 C.血液接触 D. 蚊虫叮咬 E.性接触 3.HA V区别于其他肠道病毒的生物学特性是 A. 形态 B. 大小 C. 结构 D. 对热的抵抗力 E. 目前无法细胞培养 4.HA V随粪便排出体外最主要的时间是 A. 感染后1周内 B. 发病2周后 C. 发病前后2周内 D. 恢复期 E. 发病后1个月 5.Dane颗粒是指 A.HA V颗粒 B.完整的HBV颗粒 C.HBV球形颗粒 D. HBV管形颗粒 E.狂犬病病毒包涵体 6. HBV的核酸类型为 A. 单正链RNA B. 单负链RNA C. 双链分节段DNA D. 双链环状DNA E. 双链RNA 7. 乙型肝炎病毒的主要传播途径是 A.消化道传播 B.血液、血制品传播 C.蚊虫叮咬 D. 呼吸道传播 E.直接接触 8. 下列病毒中抵抗力最强的是 A.脊髓灰质炎病毒 B. 乙型肝炎病毒 C.乙脑病毒 D. 单纯疱疹病毒 E. 流感病毒 9. HBsAg在血清中的最主要存在形式是 A.小球形颗粒 B.管形颗粒 C.Dane颗粒 D.免疫球蛋白 E. 免疫复合物 10. HBV感染的主要标志是 A. 血中测出HBsAg B. 血中测出抗-HBs C. 血中测出HBcAg D. 血中测出HBeAg和抗-HBs E. 血中测出抗-HBe 11. HBV的免疫病理机制中包括 A.Ⅰ、Ⅱ型超敏反应 B. Ⅱ、Ⅲ型超敏反应 C.Ⅰ、Ⅳ型超敏反应 D. Ⅲ、Ⅳ型超敏反应 E. 以上都不是 12. 与原发性肝癌相关的病毒是 A.HAV B.HBV C.HIV D.EBV E.HSV-2 13. 关于HBV的叙述下列哪项是正确的 A.核酸为双股线状DNA B.其DNA多聚酶无逆转录酶功能 C. 血中测出HBeAg是体内HBV复制的指标之一

呼吸道病原体抗原七项的检测及临床意义

“呼吸道病原体抗原七项”检测的临床意义 一、呼吸道病毒简介 呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为侵入门户，主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒。据统计，90%以上急性呼吸道感染由病毒引起。常见的呼吸道病毒包括：A型流感病毒（甲型流感病毒）、B型流感病毒（乙型流感病毒）、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型,各种病毒在电镜下的形态见图1。 流感病毒呼吸道合胞病毒腺病毒副流感病毒 图1 各种病毒在电子显微镜下的形态 二、呼吸道病毒临床诊断 现有的主要方法：1、抗原检测；2、抗体检测；3、病毒分离培养；4、分子生物学方法等。现将上述检测方法的优劣小结于表1。目前临床上使用较多的是抗原检测和抗体检测。 表1 四种呼吸道病毒检测方法的比较 检测方法优点缺点 病毒分离培养特异性高，金标准培养条件要求高、灵敏度低，标本中病原体量少时，易致假阴性。 抗原检测 酶联免疫吸附法较快速有非特异性反应 间接免疫荧光法简便、快速 有非特异性反应需要使用荧光显微镜 直接免疫荧光法简便、快速、灵敏度和特异性均较高 且可用于疾病的早期诊断 需要使用荧光显微镜 抗体检测灵敏度、特异性较高对疾病早期诊断没有太大帮助 分子生物学方法灵敏度和特异性均很高操作繁琐，价格昂贵 三、呼吸道病原体抗原的优越性 1、从理论上讲，只要有病毒感染，通过抗原检测都能鉴定出，而抗体检测却要在人体产

生免疫应答以后才能进行鉴定。 2、机体产生IgM一般需要一周左右的时间，而有免疫缺陷或免疫系统不健全的个体如儿童，特别是3岁以下的小孩，其产生抗体往往需要更久，且抗体产生的水平也较低。若检测的是IgG，则不能很好地区分既往感染和急性感染。 因此，抗原检测的方法对婴幼儿和儿童的呼吸道感染的病因诊断、鉴别诊断和临床用药指导比抗体法更有优势（详见表2）。 表2 呼吸道病毒抗体检测和抗原检测的比较 病原体抗体IgM检测病原体抗原检测 检测最佳时间一般在感染一周左右病毒感染出现症状后即可检测出 临床意义 回顾性诊断，适用于疾病后期的诊断， 多用于循证医学可用于疾病早期诊断 对患者的治疗有重要指导意义 检测灵敏度不能很好地检测变异的病毒 将多种抗体进行组合，能更好地应对变异 的病毒 检测方法 一般使用酶联免疫（ELISA）或者间接免疫 荧光法，有非特异性荧光一般使用直接免疫荧光法，几乎没有非特异性反应 四、为什么要早期全面检测？ 1、病毒治疗针对性强 2、病毒治疗有时效性 3、避免抗生素的滥用 五、项目开展的价值和社会效益分析 本项目可用于呼吸道病原学的研究；提高医院对呼吸道病毒的诊疗水平；还可用于呼吸道传染病流行的监控等。 六、呼吸道病原体检测 我们检验中心/遗传所于3月20日正式开展了“呼吸道病原体抗原7项”。该检验组合包含了甲型流感、乙型流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型7种抗原的检测。收费标准：326.0元/次，不接受单项申请。 临床意义：主要用于呼吸道感染病原体的早期诊断和鉴定诊断。 标本采集和报告时间：鼻咽拭子或下呼吸道分泌物。暂定于每周五4:30pm发出检验报告。 欢迎各临床保健科室踊跃开单，我们将竭诚地为临床服务。咨询电话：临床免疫学检验室，2313065（外线）；3065（内线）。 撰稿：罗桂香，编辑：周玉球

甲型肝炎抗体

甲型肝炎抗体 文章目录*一、甲型肝炎抗体的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、甲型肝炎抗体的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、甲型肝炎抗体的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、甲型肝炎抗体的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、甲型肝炎抗体的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应 甲型肝炎抗体的基本信息 1、定义甲型肝炎抗体是针对甲肝的一种特异性抗体。甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)为一直径为27-32nm的二十面体立体对称圆球形颗粒,无包膜,核心为单链正股RNA。HAV属小RNA病毒科嗜肝病毒属(hepatovirus)或嗜肝RNA病毒属(heparnavirus)。HAV主要通过手-口途径传播,潜伏期15-50天,平均28天。病毒常在患者血清ALT升高前的5-6天就存在于患者的血液和粪便中。发病2-3周后,随血清中特异抗体的产生,血清和粪便的传染性就逐渐消失。HAV的实验室诊断可进行抗体检测。临床上用的最多的是用ELISA方法查抗-HAV抗体。 2、专科分类传染病检查 3、检查分类肝功能检查

4、适用性别男女均适用 5、是否空腹空腹 甲型肝炎抗体的正常值和临床意义 1、正常值抗-HAIgM阴性。 2、临床意义抗-HAIgM阳性可诊断为甲型肝炎,若检得低滴度时,应隔2周复测,但应注意风湿因子所致假阳性。抗-HAIgG 阳性提示曾受过HAV感染,但双份抗-HAIgG滴度4倍以上增长,也有诊断意义。 甲型肝炎抗体的检查过程及注意事项 1、检查过程抗-HAVIgM:甲型肝炎特异性抗体-(抗-HAVIgM)出现早,一般在发病数日即可检出,黄疸期达到高峰,1-2月抗体滴度下降,3-4月大部分消失。是甲型肝炎早期诊断的重要指标。常用方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)和固相放射免疫试验(SPRIA),其灵敏度高,特异性强。为急性肝炎患者检测的常规项目。类风湿因子阳性标本可出现抗-HAVIgM假阳性,应引起注意。抗-HAVIgG:当急性甲型肝炎患者出现症状时,血清中即可检出抗-HAVIgG,初期滴度低,以后逐渐升高,病后3月达高峰,1年内维