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植物组织培养 复习题

植物组织培养 复习题
植物组织培养 复习题

名词解释:

植物组织培养:不仅包括在无菌条件下利用人工培养基对植物组织的培养,而且包括对原生质体悬浮细胞核植物器官的培养

工厂化育苗:以先进的育苗设施和设备装备种苗生产车间,将现代生物技术,环境调控技术,施肥灌溉技术,信息管理技术贯穿种苗生产过程,以现代化,企业化的模式组

织种苗生产和经营以实现种苗的规模化生产

愈伤组织:在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞

脱分化:以分化的细胞在一定因素作用下重新恢复分裂机能并改变原来的发展方向而沿着一条新的途径发育的过程

再分化:脱分化的细胞团或组织经重新分化而产生出新的具有特点,结构和功能的组织或器官的一种现象

外植体:由活植体上切取下来进行培养的那部分组织或器官

植物细胞全能性:任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息

继代培养:由最初的外植体上切下新增的组织,转入新的培养基上继续培养

灭菌:采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施

消毒:采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的病原菌,对被消毒的物体基本无害的措施

大量元素:植物所需浓度大于0.5mmol/L的元素称大量元素或主要元素

微量元素:植物所需浓度小于0.5mmol/L的元素称微量元素或次要元素

无性系:由一个个体通过无性繁殖产生的一个群体

快速繁殖技术:利用组织培养技术,将优良植株的器官,组织成细胞进行离体培养,在短时间内获得大量遗传性较为一致的个体的方法或技术

植物种质保存:利用天然或人工创造的适宜环境,使个体中所含的遗传物质保持其遗传完整性,有高的活力,能通过繁殖将其遗传特性传递下去

穴盘育苗:以草炭,蛭石,珍珠岩等轻型材料为基质,以不同规格的穴盘为容器,采用机械自助精量播种生产线完成装填,压穴,播种,覆土,镇压和浇水等系列作业,

在催芽室和温室等设施内进行有效管理,一次培养成苗的现代化育苗技术

水培育苗:利用成型的膨化聚苯乙烯格盘成泡沫为载体,在营养液内培育秧苗

扦插育苗:取植物体的部分营养器官插入基质中,在适宜的环境条件下促使其生根,培养成幼苗的育苗方式

解答题:

1.植物组织培养包括哪些类型?

包括愈伤组织培养、悬浮细胞培养、器官培养(胚,花药,子房,根和茎的培养等)、茎尖分生组织培养和原生质体培养。

2.工厂化育苗的特点有哪些?

优点:节省能源和资源;提高种苗生产效率;提高种苗素质;种苗适于长距离运输;适合机械化移栽

缺点:初期投入较大(需育苗温室,相关设施等)对种子质量要求高;生产者需要掌握相关育苗技术

3.植物组织培养技术的发展过程大致可分为几个阶段?列举每个阶段有代表性的人物和相应研究内容。

①探索阶段(20世纪初至20世纪30年代中)

代表人物:Haberlandt (德)

研究内容:植物细胞全能性的设想,高等植物的器官和组织可以不断分割,直至成单个细胞,在适宜条件下具有再生完整植株的潜力

②奠基阶段(20世纪30年代中至60年代末)

代表人物White和Gautheret 、Nobecourt

研究内容:认识了B族维生素对植物生长的意义;发现了生长素是一种天然的生长调节物质……

③迅速发展阶段(20世纪70年代至今)

代表人物:Cocking 、Takebe 、Cadson 、Guha和Maaheshwarz 、Morel

研究内容:原生质体培养、细胞融合、花药培养、离体快繁和脱毒技术、与分子生物学联姻

4.说明植物组培中器官分化的激素控制理论

由根和茎的分化可知:由生长素和细胞分裂素之间的比例关系决定,当生长素相对浓度较高时,有利于细胞增殖和根的分化,当细胞分裂素的相对浓度相对较高,则促进茎芽的分化。若细胞分裂素的相对浓度较高,则促进茎芽的分化。

由此可得:通过改变培养基中生长素和细胞分裂素这两类生长调节物质的相对浓度,可以控制细胞的分化。

1.培养基污染有哪些污染来源?

培养容器、培养基本身、外植体、接种室的环境、在接种和继代培养是用以操作的器械,培养室的环境等。

2.组培中常用的灭菌方法有哪些,请分别说明其原理。

灭菌方法:①干热灭菌②湿热灭菌③过滤灭菌④熏蒸灭菌⑤灼烧灭菌⑥辐射灭菌

原理①利用烘箱加热到160~180℃的温度来杀死微生物

②在密闭的蒸锅中,其中的蒸气不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而

锅内的温度也随之增加,在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃,在此蒸气温度下可很快杀死各种细菌

③0.45μm一下,当溶液通过滤膜后,细菌的细膜和真菌的孢子等因大于滤膜直径而被

④用加热焚烧、氧化等方法,使化学药剂变为气体状态扩散到空气中,以杀死空气和物

体表面的微生物

⑤利用在火焰上灼烧时的高温来灭菌

⑥利用电磁辐射产生的电磁波杀死大多数物质上的微生物

3.常用的植物材料消毒剂有哪些?

次氯酸钙、次氯酸钠、过氧化氢、溴水、硝酸银、氯化汞、抗生素

4.无菌操作室有何要求,主要任务是什么?

要求:①无菌室应完全封闭,人员出入应有两道门,其间应隔有缓冲间

②用前应以紫外线消毒30min,定期用乳酸或甲醛熏蒸,彻底消毒

③在无菌室中一般仅限于分装无菌的培养基及传染性强的细菌接种,不进行有菌标本

的分离及其他的操作

④无菌室内应仅限操作人员进入,而且进入无菌室应着隔离衣和专用鞋,操作时戴口

罩,随时保证室内的无菌状态

⑤应配备空调设备,保证不因室温而影响工作

主要任务:①防止实验操作中人为污染样品

②保证工作人员安全,防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染

5.接种的一般步骤。

①超净工作台用酒精擦拭,各种操作对象顺序摆放

②房间喷雾降尘

③紫外光照射30min灭菌,灭菌结束后在进入前至少需换气20min

④对植物材料进行清洗处理,表面消毒

⑤操作人员洗手,换鞋,将浸在消毒液例的植物材料带进接种室

⑥开启超净工作台,进行无菌操作

⑦消毒结束后,用无菌水清洗植物材料,将材料取出,放在无菌的托盘中

⑧对外植体进行切割整理

⑨打开培养容器,将外植体接种到培养基上,将瓶口在火焰上灼烧后迅速封严瓶口

1.基本培养基主要有哪几种,植物组织培养基包括哪些成分?

MS培养基B5培养基N6培养基

主要成分:无机营养成分、有机营养成分(含氮物质,碳源)、植物生长物质(生长素,细胞分裂素,赤霉素)、琼脂及其他固化剂、其他成分(活性炭AC,硝酸银,抗

生素)

2.在植物组织培养中经常添加的生长素和细胞分裂素有哪些种类,添加生长素和细胞分裂素的目的分别是什么?

常用的生长素种类:IAA(吲哚乙酸)IBA(吲哚-3-丁酸)

NAA(萘乙酸)2,4-D(二氯苯氧乙酸)

2,4,5-TC

目的:诱导离体细胞分裂成愈伤组织和根的分化

常用的细胞分裂素种类:BAP(苄氨基嘌呤)6-BAC(苄基腺嘌呤)

2-ip(异戊烯氨基嘌呤)玉米素和激动素(呋喃氨基嘌呤)

目的:促进细胞分裂,由愈伤组织或器官上分化不定芽

3.大多数植物对培养基的pH值有何要求,如何进行调节?

培养的植物材料大多要求弱酸性的环境常用pH :5.7~5.8

调节:用1mol/L NaOH 和1mol/L HCl 调节其pH

4.用MS培养基的浓缩贮备液来配制1L固体培养基,其操作步骤是怎样的?

①称出7g琼脂和20g蔗糖,加水直到750ml,在恒温水浴中加热使之溶解

②分别加入50ml大量元素,5ml微量元素,5ml有机成分,5ml铁盐,1ml2,4-D

③加蒸馏水至1000ml

④充分混合后,用1mol/L NaOH 和1mol/L HCl 调节其pH⑦⑦

⑤把培养基分装到所选用的培养容器中

⑥尽快用封口材料封严瓶口,以免其水分蒸发

⑦把已装入了培养基的培养容器在121℃(1.1kg/cm2)下灭菌15~20min

⑧使培养基在室温下冷却,预培2~3天后无污染才能使用

1.愈伤组织的形成过程可分为哪几个时期?各有何特点?

①诱导期:外植体大小没有明显变化

特点:1细胞形态大小不变

2细胞内出现活跃的原生质流动,贮藏物质如淀粉等消失

3随着组织的活化,细胞内核糖体增加并形成大量的多聚核糖体

4RNA迅速增加

5细胞核体积明显增大

②诱导期:外植体的外层细胞开始迅速分裂,但中间部分的细胞不分裂

特点:1细胞数增加

2体积变小

3核和核仁变大

4RNA含量持续上升

③形成期:形成愈伤组织

特点:1细胞形态大小保持相对稳定,体积不再减小

2细胞分裂由平周分裂转为组织内部局部区域的分裂,形成分生组织节

2.优良的愈伤组织评价指标有哪些?

①高度的胚性或再分化能力,以便从这些愈伤组织得到再生植株

②分散性好,以便用这些愈伤组织建立优良的悬浮条

③旺盛的自我增值能力

④经过长期继代保存而不丧失胚性

3.愈伤组织可分为哪些类型?

类型Ⅰ(保守分裂型):结构致密,生长较慢,容易分化成苗

类型Ⅱ(亢进分裂型):结构松脆,生长旺盛,色泽鲜艳,增殖很快

类型Ⅲ(衰败型):结构疏松,生长缓慢,色泽暗淡

4.愈伤组织通过器官发生途径再生植株的方式有哪些?

①通过茎芽的分化(器官分化)

②先分化芽,再分化根

③先分化根,再分化芽

5.影响茎芽分化的因素有哪些?

①外源激素:器官形成是由参与生长和发育的物质之间在数量上的相

互作用决定的,而不是由这些物质的绝对浓度决定的

(1)培养基成分

②培养基硬度:培养基中琼脂浓度的变化,对培养物形态发生的方式

存在影响

①光照:包括光强,光质和光周期

(2)环境条件②温度:25℃左右的培养温度适于器官发生,但接近于植物原产地的

生长温度对培养物更有利

③湿度:适宜湿度为70%~80%

①基因型差异:苹果花的花药培养中,以元帅品种诱导频率较高(3)植物材料②材料的生理状况:苹果茎尖培养中,幼苗比成年树反应好

③不同器官:枸杞外植体培养中,芽原基的分化较难而根分化比较容

6.为什么培养物在长期培养保存中,会出现形态发生能力下降或丧失的现象?

新分离形成的组织往往具有较强的再生能力,易于形成各种器官或胚状体,但在继代过程中,器官形成的能力逐渐下降至消失。

(1)遗传说:在长期离体培养中,细胞的染色体组发生变化,包括多倍性,非整倍性和染色体突变等,这种由遗传因素造成的形态发生潜力的丧失是不可逆的。

(2)生理说:由于细胞或组织内激素平衡关系的改变造成的,或是由于细胞对外源生长物质敏感性的改变造成的;“驯化”—延长培养期,可能使愈伤组织对生长素的需求发生变化,导致生长素的自给现象。

(3)竞争说:在复杂的多细胞培养物中,只有少数细胞能够产生胚性细胞团,其余细胞是非胚性的。如果非胚性的细胞类型在所用的培养基中具有生长上的选择优势,在反复的继代培养中,非胚性细胞的群体将会逐步增加,而胚性成分则逐渐减少,到一定时期之后,培养物中不在具有成胚潜力。

1.什么是体细胞胚,有何特点?

体细胞胚:又称胚状体,是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。

特点:有固定的极性、与合子胚相似,多数体细胞胚不具有一个明显的胚柄

2.体细胞胚的发生途径。

①直接途径:从培养中的器官,组织,细胞或原生质体由预先决定的胚性细胞直接分化成胚,

不经过愈伤组织阶段

②间接途径:外植体先愈伤化,后由愈伤组织内分生性细胞分化成胚

3.控制体细胞同步化发育的措施有哪些?

①抑制剂法:细胞培养初期加入DNA合成抑制剂,使细胞DNA合成暂时停止,一旦除去DNA抑制剂,细胞开始进入同步分裂

②分离过筛法:用不同孔径的尼龙网过滤,来选择处于某一阶段的体细胞胚,或采用密度梯度离心法来选择不同发育阶段的胚,后转入适宜其发育的培养基上继续发育

③低温法:培养早期采用适当低温处理一段时间后,再把温度提高到正常培养温度,可以达到同步分裂的目的

④渗透压法:利用不同发育阶段的胚状体对不同渗透压的要求,可用含高浓度蔗糖的培养基来控制胚的发育,使胚停留在某一阶段,后降低蔗糖浓度使胚状体进入同步发育

⑤通气调控法:在烟草的组织培养中,乙烯的产生与细胞生长有密切关系,在细胞生长达到高峰前有一个乙烯合成的高峰

4.什么是人工种子,由哪些结构构成?

人工种子:含有植物胚状体或芽,营养成分,激素以及其他成分的人工胶囊

结构:体细胞胚(胚状体)人工胚乳人工种皮

1.幼胚培养对培养条件有哪些要求?

基本培养基、碳水化合物和培养基的渗透压、氨基酸和维生素、天然的植物浸提液、生长调节物质、光照和温度

2.幼胚培养时胚的发育方式有哪几种,各有何特点?

①胚性发育:幼胚接种到培养基上以后,仍按照在活体内的发育方式发育,最后形成成熟胚;一般一个幼胚将来就是一个植株

②早熟萌发:幼胚接种后,离体胚不继续胚性生长,而是在培养基上迅速萌发成幼苗,通常称为早熟萌发;多数情况下,一个幼胚萌发成一个植株,但有时会产生丛生配现象

③产生愈伤组织:幼胚在离体培养中细胞增殖,形成愈伤组织;一般而言,由胚形成的愈伤组织对位胚性愈伤组织,极易分化形成植株

3.胚胎培养有哪些应用?

①克服远缘杂交的不育性,获得稀有杂种植物

②打破种子休眠,提早结实,缩短育种年限

③使生活力低下或无生活力的种子萌发

④测定种子生活力

⑤获单倍体植株

⑥快速繁殖特殊植物

4.什么是早熟萌发?

幼胚接种后,离体胚不继续胚性生长,而是在培养基上迅速萌发成幼苗,称之为早熟萌发。

5.胚乳培养有什么应用价值?

①用于研究某些物质的生物合成,如淀粉,蛋白质等

②用于培养无籽果实,如苹果,西瓜等

③获得植物的营养体,如三倍体颤杨的木材,三倍体的桑树

④通过三倍体获得三体,用于基因定位研究

1.通过热处理消毒的基本原理是什么,该法消除植物病毒有何局限性?

基本原理:在高于正常的温度下,植物组织中很多病毒可被部分地或完全地钝化,但很少伤害甚至不伤害寄主组织

局限性:不能去除所有病毒,只对圆形病毒(苹果花叶病毒),或对线状病毒(马铃薯卷叶病毒)有效;而对杆状病毒(干日红病毒)无效

2.简述茎尖培养消除病毒的基本原理,并说明基本操作程序

基本原理:病毒在植物体内的分布是不均匀的;在受侵染的植株中,成熟的组织和器官病毒含量较高,而幼嫩的和未成熟的组织和器官病毒含量较低,生长点则几乎不含或含量很少

操作程序:取材—消毒处理—剥离和接种—培养—生根诱导

3.详述脱毒效果的检验方法有哪些?

①直接检测法:根据植株茎叶是否表现某种病毒特有可见症状来确定脱毒效果,如带毒植株长势弱,叶片表现褪绿条斑,花叶扭曲,植株矮化等病毒症状

②指示植物检测法:灵敏可靠,便于在苗圃推广

汁液感染法:由受检植株上取下叶片,在缓冲液中研碎。在指示植物的叶片上撒少许金刚砂,后用受检植物的叶汁涂于其上并适当用力摩擦,停留约5min,然后用清水冲洗叶面,将指示植物放在防蚜温室中培养

③血清学检测法:抗原和抗体间能发生高度专一性的免疫反应,可用已知病毒的抗血清来鉴定未知病毒的种类

④嫁接检测法:一些通过蚜虫传播的植物病毒,应采用嫁接接种方法鉴定,已被鉴定植株为接穗嫁接到指示植物上,根据指示植物的症状表现,判断是否脱除了病毒

⑤电镜观察法:可以直接观察有无病毒颗粒的存在和鉴定病毒的种类

1.快繁的过程可分为哪几个阶段?

阶段零:选择供体植株,并为其创造有利于离体培养的环境条件

一:无菌培养物的建立

二:茎芽的增殖

三:离体形成的枝条的生根

四:植株的移栽

2.快繁中惊讶增殖的途径有哪几种,各有什么优点?

①原球茎发育:兰科植物特有的增殖方式

②通过愈伤组织(增殖最快的一种途径):利用植物细胞在培养中无限增殖的可能性以及它们的全能性,可对若干种植物进行快速繁殖

③不定芽形成特点:可显著提高不定芽的频率;诱导极小的外植体产生不定芽;对于在正常的情况下不能进行营养繁殖的植物,透过激素诱导产生不定芽

④腋芽增殖:在腋芽上施用的细胞分裂素可克服顶端优势,并在顶芽存在的情况下刺激侧芽生长,其最大的优点是使无性系后代保持原品种特性,可以长时间大量提供遗传上同质的试管苗

3.为什么要进行试管苗的炼苗,如何进行?

炼苗的原因:试管苗生长在恒温,高湿,弱光,无菌和有完全营养供应的特殊条件下,虽有叶绿素但营异养生活,因此在形态解剖和生理特性上都有很大的脆弱性,这样的试管苗若未经充分锻炼,一旦被移出试管,投入到一个变温,低湿,强光,有菌和缺少完全营养供应的条件下,则很快失水萎蔫,最后死亡。

炼苗的方法:将生根试管苗的培养容器带封口材料一起转移到温室,首先使温度条件一致,初期适度遮光,以后逐渐撤除保护,使光照条件接近生长环境,然后松开并去除封口材料,使组织苗生长的空气环境与栽培环境相通。

4.怎样进行试管苗的移栽?

①轻轻的但彻底的洗掉根上的培养基,选用排水性和透气性良好的移栽介质并消毒

②栽培深度适宜,不要埋没叶片,移栽后要浇一次透水,但不能造成基质积水

③移栽初期要保持较高的空气湿度,同时注意通风,光照强度一般只有露地的十分之一

④移栽苗成活的必要条件:空气湿度高,土壤通气好,太阳勿直照

5.造成污染的原因有哪些,防止污染的措施有哪些?

原因:培养基及各种使用器具灭菌不彻底,外植体灭菌时不彻底,操作时人为因素带入,环境不清洁,超净工作区域污染

措施:培养基灭菌(121~126℃灭菌20~30min)

接种用的器具(高温灭菌外还需要蘸酒精,在火焰上灭菌)

外植体(及时进行外植体检查和淘汰)

环境条件(定期熏蒸,紫外灯照射,高压蒸汽灭菌锅灭菌)

超净工作台(定期清洗过滤器,测定操作区风速)

6.什么是褐变,如何防止褐变?

外植体在诱导脱分化或再分化过程中,自身组织从表面向培养基释放褐色物质,以致培养基逐渐变为褐色,外植体也随之变褐而死亡的现象

控制措施:①外植体和材料进行20~40天的遮光处理或暗培养,可以减轻一些种类的褐化程度

②在接种之前用无菌水反复清洗外植体并对外植体进行冷藏处理,洗净切口处渗

出的酚类物质,可以起到减轻褐化的作用

③用氧化剂溶液对外植体进行预处理,或在抗氧化剂溶液中切割剥离外植体,可

防止褐变的发生

7.玻璃化苗与正常苗的区别。

玻璃化苗细胞含水量高,叶绿素蛋白质、纤维素和木质素等含量低

CoA连接酶及与木质化进程有关的苯丙氨酸解酶的活性比正常苗低得多;玻璃化组织的乙烯产量高于正常组织

8.如何预防玻璃化苗的产生?

①培养基硬度:培养基太硬会影响养分的吸收,使苗的生长速度减慢,进行摇床培养时,需通过摇床来振荡通气,否则材料很快会玻璃化或窒息死亡

②温度:主要影响苗的生长速度,温度升高,苗的生长速度明显加快,高温达一定限度后,会对正常的生长和代谢产生不良影响,促进玻璃化生产

③湿度:包括瓶内的空气湿度和培养基的含水量,瓶内湿度与通气条件密切相关,使用有透气孔的膜或通气较好的滤纸,牛皮纸封口时,玻璃化发生率减少

④激素浓度:包括生长素和细胞分裂素的影响,高浓度的细胞分裂素促进芽的分化,亦会使玻璃化的发生比例提高,两者比例失调,细胞分裂素的含量显著高于两者之间的适宜比例,使组培苗正常生长所需的激素水平失衡,导致玻璃化的产生

⑤光照时间:增加光照强度可以促进光合作用,提高碳水化合物的含量,使玻璃化的发生比例降低,高温及光照不足,极易引起过度生长,加速玻璃化的发生

⑥培养基成分:培养基中的各种矿质营养,对促进培养物的生长和发育有积极作用,但是各营养物之间存在平衡,一般认为提高培养基的碳氮比,可减少玻璃化的比例

1.对植物种质进行超低温保存的主要步骤

冷冻—保存—解冻—重新培养

2.超低温保存时,对种质冷冻有哪些方法?各有何特点

①慢冷法:先把材料以0.5~4℃/min的冷却速度由0℃冷却到-100℃,后转入液氮,适用于含有大液泡的成熟细胞,对于悬浮培养的细胞特别有效。使细胞内的水分减少到最低降度;又能防止因溶质含量增加引起的“溶液效应”

②快冷法:将植物材料从0℃或其他预处理温度直接投入液氮罐内,降温速度为300~1000℃/min,适用于细胞体积小,胞质浓,含水量低,液泡化程度低的材料。使胞内水分迅速通过冰晶生成的危险温度区(-140℃~-10℃)

③分步冷冻法:先把材料较慢冷却(1~5℃/min)到一个适宜的中间温度(-30~-50℃),在这个温度下停留约30~50min,使材料充分脱水,后投入到液氮中快速冷却,停留是诱导细胞外溶液结冰,使细胞内外产生蒸气压差,进行保护性脱水,经证明该法对于茎尖和芽的冷冻保存最为有效

④干炼法:将培养材料的含水量降到一定温度,再浸入液氮罐中,可使植物免遭冻死。该方法程序简单,主要应用于植物的合子胚或胚轴的冻存

⑤玻璃化法:指液体转变为非晶体的固化过程,采用高浓度保护剂与快速降温相结合的完全玻璃化冻存方法,显示了比其他方法程序简化,冻存效果好的优点,玻璃化法不需要昂贵的程序降温仪,适用于茎尖,合子胚等器官

⑥包埋—脱水冷冻法:先将植物材料包埋在藻酸钙的颗粒中,再将这些颗粒置于高浓度蔗糖溶液种培养一段时间。再无菌风干,最后直接在液氮中冷冻保存;包埋后植物材料所处环境比较稳定,对脱水和降温过程的要求很严格,适用于对冷冻防护剂敏感的植物材料

3.低温保存与超低温保存的区别?

低温保存:将种质保存在非冻结温度下(1~9℃),通过降低温度来减缓植物组织,细胞的生长,以达到延长保存时间的目的

超低温保存:把植物材料在液氮温度(约-196℃)下进行冷冻和保存,致使细胞的物质代谢和生长活动停滞在完全不活动的状态,在适宜的条件下可迅速繁殖,再生出新的植株,并保持其原来的遗传特性

1.简述植物组培工厂化生产技术

(1)品种选育和母株培养:根据需要选择有市场发展潜力或生产需要的品种,建立材料和原料培养育圃

(2)离体快繁组培苗:在组培快繁车间完成,经无菌苗建立,增殖培养,生根等工序(3)组培苗的移栽驯化:

①准备工作:a 选择育苗容器,一般选用穴盘,经济实惠

b基质选配,组培苗移栽一般用无土栽培方式,对基质的要求较高,基

质的作用是固定化幼苗,吸附营养液,改善根基透气性,基质需要具

有良好的物理特性,吸水力强,透气性好,不易分解,具有良好的化

学特性,不含对植物和人体有毒的成分,不与营养液中的成分发生化

学反应,有良好的缓冲能力,物美价廉,便于就地取材

c场地工具及基质灭菌,装盘:移栽场地及所有工具必须用灭菌药水清

洗(800倍高锰酸钾液泡10~15min)

d营养液配制:按配方根据实际需要量计算具体用量,称取配制,配置

过程中要防止沉淀发生,配制好后测定pH值,并矫正。pH以5.5~6.5

最适

②组培苗移栽:移栽前需先进行炼苗,一般从培养室转移到温室并先放置2周左右,

再打开瓶盖适应,炼好苗后起苗。并将基部培养基全部洗净,分为有

根苗和无根苗两部分

③组培苗扦插:为加快繁殖速度,可将试管苗切断扦插

④驯化管理:移栽后1~2周为关键管理阶段,主要是光照,水分,通风,透气等

⑤驯化:不同基质对组培苗移栽成活率有显著影响,苗的生根状况、温度、湿度影响

试管苗移栽成活率

⑥绿化炼苗:组培苗移栽成活4~6周后,可逐渐移到遮阳大棚下进行绿化炼苗,结合

浇水灌营养液;逐渐延长光照时间,增加光照强度,控制病虫害

⑦成苗管理:及时供水,保持育苗基质湿润,苗床温度适宜于植物的生长,利用保温,

通风措施加以调节,可一定时间根外追肥

⑧苗木传送和运输:异地育苗须考虑经济是否合算,苗木须有较高的技术含量,品种

优良,具有稳定而畅通的销售渠道

⑨苗木质量检测:苗木质量是保证苗木质量和保护种植者利益的重要环节,亦是确定

苗木价格按质论价的重要依据,商品性状,健康状况,遗传稳定,

是否具备品种的典型性状;是否整齐一致,采用RAPD或ACFP

法对快繁材料进行“指纹”鉴定,以确定遗传稳定性

2.组培育苗工厂的机构应如何设置?

①生产部:负责人,勤杂,清洁工,培养基制作工,接种工,培养间管理工,炼苗管理工,

大田苗圃管理工

②质量检验部:主持制定各种苗木出厂的质量标准,监督检查,签发质量合格证或苗木质量

等级证,保存检验档案并注意技术保密

③技术开发部:负责生产技术改进,新品种及技术改进消化和研制开发新产品

④市场营销部:做好广告策划,运用各种方式完成销售指标,及时反馈市场信息并作出市

场预测;做好产品的售后服务,实现长久市场占有

3.组培苗的生产成本和经济效益应怎么估算?

(1)成本核算:每株苗的效益量=(总收入-所有消耗)/产量

培养基成本,接种与培养成本,移栽成本,电耗成本,基建投资

(2)效益分析:成本核算:有效地降低人工费,药品费

产销对路:以销定产,出产新、特、名品种,批量生产

规模生产:提高利润

4.可通过哪些措施降低成本和提高经济效益?

①掌握熟练的技术技能,特定有效的工艺流程,提高生产效率,要求操作工接种熟练,按照工艺流程操作,每天转接苗1000~1200株

②减少设备投资,延长使用寿命,除应购置一些基本设备外,能代用的就代用;对现有设备经常检修,及时保养,避免损坏,延长寿命

③降低器皿消耗,使用廉价的代用品

④节约水电开支:利用当地的自然资源,试管苗增殖生长需一定温度和光照,利用自然的光照和温度;减少水的消耗,可用自来水,井水,泉水等代替

⑤降低污染,提高成品率,除在转接苗操作中应注意技术规范,防止污染外,组培苗在培养过程中,培养环境要定期消毒,减少空间菌量;夏季温度高,培养室内要及时通风换气,减少螨虫及真菌污染培养皿

⑥提高繁殖系数和移栽成活率,在快繁过程中,利用植物品种的特性,诱导最有效的中间繁殖体,不能产生品种变异现象,在炼苗环节下进行技术更新,简化手续,达到炼苗成活率85%以上

⑦发展多种经营,开展横向联合。结合当地的种植结构,安排好每种植物的定制茬口,发展多种植物组培繁殖,如发展花卉,果树,经济林木和药材等多种植物相结合

1.穴盘育苗有哪些优点?

·采用高精度播种生产线实行机械播种,作业质量高,节约劳动力,送入温室规范化管理,成苗率高

·起苗方便,移栽简单,定植成活率高,移栽后缓苗期短,生长整齐,生长期缩短

·穴与穴之间相对独立,即可减少一些土传病害的发生和蔓延,又可避免幼苗直接的营养竞争

·便于存放,适于远距离运输

2.简述穴盘育苗的技术要点

①种子选择:种子发芽率大于90%,籽粒饱满

②穴盘的选择

③育苗基质的选择:基质应具有优良的理化特性,疏松透气,保水保肥,化学性质稳定,不带对秧苗有害的物质

④营养液:营养配方一般以大量元素为主,微量元素多由基质本身提供

⑤环境控制与幼苗管理:环境控制包括适宜的温度,充足的水分和氧气;穴盘位置调整;肥水管理;病虫害防治;补苗;定植前炼苗

3.容器育苗有哪些主要方式

①育苗钵育苗:塑料钵,纸钵,营养钵

②育苗盘育苗

③育苗筒育苗:塑料桶,纸筒

4.简述扦插育苗的技术要点

①扦插时间:一般在早春或夏末

②插穗的选择:选择易生根且遗传变异小的部位

③扦插方法:叶插:剪取植物的叶片或叶柄做抽穗

枝插:硬枝扦插—主要用于花卉和果树,选1~2年生健壮条做插穗,选取枝条段,芽饱满部位

软枝扦插—主要用于温室花卉和常绿花木,选取当年生的健壮,充实,

带叶枝条作插穗,过嫩易腐烂,过老不易生根

根插:主要用于根上能生不定芽的花卉种类和枝插不易成活的某些果树,用这种方法繁殖的苗木生理年龄小,达到开花需要的培养时间长

④扦插基质:要求通气,保水,排水性良好,无痛原苗

⑤影响扦插生根的环境因素:光照:保持一定的光照条件,但刚插后2~3天内应适当遮阳

温度:不同作物要求的扦插生根温度不同,保持一定的昼夜温

差利于生根(白天21~26℃,夜间15~21℃为宜)

湿度:扦插后要浇足水,最好采用喷雾法,一周内应保持较高

的空气湿度(以60%~90%为宜)

氧气:要求基质具有良好的通气条件

植物组织培养试题与答案(集合版)

植物组织培养练习题 1.植物组织培养:指要人工控制的条件下,将植物体的任何部分,或器官、或组织、或细胞, 进行离体培养,使之发育形成完整植物体。所谓人工控制的条件,即营养条件和环境条件; 植物体的任何一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。 2.愈伤组织培养:将外植体接种在人工培养基上,由于植物生长调节剂的存在,而使其细胞 脱分化形成愈伤组织,然后通过再分化形成再生植株。 3.外植体:植物组织培养中的各种接种材料,包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质 体等。 4.脱分化:一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象。 5、接种:把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞,转放到无菌培养基上的 全部操作过程。 6、褐变:外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类 物质,这种致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色,而且还会抑制其他酶的活性,严重影响外植体的脱分化和器官分化,最后变褐而死亡的现象。 二填空 植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。 2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。 3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、单倍体育种、种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。 4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快速繁殖和脱毒培养两种类型。 5、一般组织培养的几道工序如下:培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和高压灭菌;无菌操作——材料的表面灭菌和接种,培养;试管苗的驯化、移栽与初期管理。 6、在进行植物组织培养室设计时,其设计应包括洗涤室、准备室、灭菌室、无菌操作室、培养室、细胞学实验室、摄影室等分室,另加驯化室、温室和大棚。 7、培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、PH。 8、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。 9、细胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,并具有发育成完整植株的潜在能力。 10、玻璃化现象是指试管苗的一种生长失调症状,当植物材料进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状,这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。

《植物组织培养》综合复习题

植物组织培养综合测试题 一、填空题(每空0.5分) 1. 植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、__________、__________等几种类型. 2. 在分离原生质体的酶溶液内,需要加入一定量的_______其作用是保持原生质体膜的稳定,避免破裂. 3. 1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物_______的理论概念;1943年White提出植物细胞“_________”学说,并出版了《植物组织培养手册》,从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。 4. 用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_________℃的温度范围内,而若用它高温干燥灭菌则需在_________℃的温度下1-3小时;烘干植物材料的温度是_________℃. 5. 细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__________和__________的能力。

6. 1962年,Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__________培养基,其特点是__________浓度较高,且为较稳定的__________。 7. 7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进__________的生长,这时__________占主导地位;比值高促进__________的生长,这时__________占主导地位. 8. 植物组织培养按培养的方式分为_______培养和_______培养. 9. 组织培养的特点是:_______、_______、_______. 10. 1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得_________,这促进了花药和花粉培养的研究。 11. 在组织培养中,不耐热的物质用__________法灭菌,而培养基常用__________法灭菌. 12. 6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值__________促进根的生长,这时__________占主导地位;比值__________促进芽的生长,这时__________占主导地位。 13. 在组织培养中,非洲菊是靠__________的方式进行繁殖的,而蝴蝶兰是以 __________的方式进行快繁的。

最新植物组织培养试题库

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植物组织培养试题库 一、名词 外植体:在植物组织培养过程中,由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子 等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。 热处理脱毒:利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同,选择适当的高温处理染病 植株,使植株体内的病毒部分或全部失活,而植株本身仍然存活。 平板培养法:是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合,平铺一薄层在培 养基底上的培养方法。 消毒:指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用。 玻璃化现象:在长期的离体培养繁殖时,有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水
渍状,这种现象称为玻璃化。 脱毒苗:是指不含该种植物的主要危害病毒,即经检测主要病毒在植物内的存在 表现阴性反应的苗木。 灭菌:是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,
即把所有生命的物质全部杀死。 褐变:是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚类物质氧化
成棕褐色的醌类物质,有时使整个培养基变褐,从而抑制其他酶的活性,影响 材料的培养。 微尖嫁接:指在人工培养基上培养实生砧木,嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗的技 术。主要程序:无菌砧木培养—茎尖准备—嫁接—嫁接苗培养—移栽。 植物细胞全能性:一个生活的植物细胞,只要有完整的膜系统和细胞核,它就会 有一整套发育成一个完整植株的遗传基础,在适当的条件下可以通过分裂、分化 再生成一个完整的植株。 人工种子:将组织培养产生的体细胞胚或不定牙包裹在能提供养分的胶囊里,再 在胶囊的外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜,形成一种类似自然 种子的结构。 试管苗驯化:植物组织培养中获得的小植株,长期生长在试管或三角瓶内,体表 几乎没有保护组织,生长势弱,适应性差,要露地移栽成活,完成由“异养”到 “自养”的转变,需要一个逐渐适应的驯化过程。 器官培养:植物的根、茎、叶、花器(包括花药、子房)和幼小果实的无菌培 养。 微体嫁接:指将 0.1-0.2mm 的茎尖作为接穗,嫁接到由试管中培养出来的无菌 实生砧木上,继续进行试管培养,愈合成为完整的的植株。 快速繁殖(微繁殖): 用组织培养的方法,使植物的部分器官,组织迅速扩大培养, 并移植到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法. 脱分化:将已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体的抑制性影响下解脱出来, 恢复细胞的分裂活性.一个成熟的细胞转变为分生状态的过程叫脱分化. 原生质体融合(体细胞杂交):就是使分离下来的不同亲本的原生质体,在离体条 件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合,像性细胞受精作用那样互相融合 成一体的现象. 愈伤组织培养:是指将母体植株上的外植体,接种到无菌的培养基上,进行愈伤组 织诱导,生长和发育的一门技术
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植物组培自测题与参考复习资料(简)

第1章复习测试题 二、填空题 1.根据外植体的不同,一般可以将植物组织培养分为:植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养和原生质体培养。 2.在植物组织培养中,外植体脱分化后,再分化形成完整植株的途径有两条:一是器官发生途径,二是胚状体途径。 3.通过器官发生再生植株的方式有三种:第一种最普遍的方式是先分化芽,再分化根;第二种是先分化根,再分化芽,这种方式中芽的分化难度比较大;第三种是在愈伤组织块的不同部位上分化出根或芽,再通过维管组织的联系形成完整植株。 4.体细胞胚发生的途径可分为间接途径和直接途径。 5.植物组织培养的整个历史可以追溯到19世纪末和20世纪初。一个多世纪来,植物组织培养的发展大致可以分为探索、奠基和迅速发展三个阶段。 6.在Schleiden和Schwann所发展起来的细胞学说推动下,1902年德国植物生理学家G.Haberlandt提出了细胞全能性的设想,并成为用人工培养基对分离的植物细胞进行培养的第一人。 7.White、Gautheret和Nobecourt在1939年确立的植物组织培养的基本方法,成为以后各种植物组织培养的技术基础,他们三人被誉为植物组织培养的奠基人。 8.1958年英国人Steward等将胡萝卜髓细胞培养成为一个完整植株,首次通过实验证明了植物细胞的全能性,成为植物组织培养研究历史中的一个里程碑。 9.1960年Cocking等人用酶分离原生质体获得成功,开创了植物原生质体培养和体细胞杂交工作。同年Morel培养兰花的茎尖,获得了快速繁殖的脱毒兰花。其后,国际上相继把组织培养技术应用到兰花的快速繁殖上,建立了“兰花工业”。 10.花药培养在20世纪70年代得到了迅速发展,获得成功的物种数目不断增加,其中包括很多种重要的栽培物种。烟草、水稻和小麦等的花培育种在我国取得了一系列举世瞩目的成就。 三、是非题 (×)1.从理论上说,所有的植物细胞与组织材料都能培养成功,其培养的难易程度基本相同。 (√)2.愈伤组织是一种最常见的培养类型,因为除了茎尖分生组织培养和少数器官培养外,其它培养类型都要经历愈伤组织阶段才能产生再生植株。 (√)3.在组织培养中可采用愈伤组织诱变、花粉培养诱变等方法来进行植物育种等。 (×)4.单倍体育种已成为改良植物抗病、抗虫、抗草、抗逆性、品质等特性的新的重要手段。 (√)5.利用植物组织或细胞大规模培养,可以从中提取所需的天然有机物,如蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱、天然色素以及其它活性物质。 四、选择题 1.在A中培养物生长过程中排出的有害物质容易积累,由此造成自我毒害,所以必须及时转移。

植物组织培养试题

农业生物技术第二章植物组织培养试卷 班级___________ 姓名___________ 得分______________ 一、单项选择题(60) 1.植物组织培养是() A.离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织B.愈伤组织培育成植株 C.离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体 D.愈伤组织形成高度液泡化组织 2.由于培养物脱离母株在试管内培养,故将植物组织培养又叫() C.器官培养 D.离体培养 A.初代培养 B.继代培养 3.细胞形态和功能发生永久性变化过程称为() A.分生 B.分化 C.脱分化 D.再分化 4.对外植体进行的第一次培养称为() A.初次培养 B.器官培养 C.初代培养 D.继代培养 5.在人工培养基上通过诱导外植体而形成的一团无序的薄壁细胞团叫() A.分生组织 B.保护组织 C.同化组织 D.愈伤组织 6.大量生产实践证明,通过()可以有效地去除植物体内的病毒,获得无毒种苗. A.茎段培养技术 B.茎尖脱毒技术 C.组织快繁技术 D.转基因技术 7.植物体因受伤或生理上分离而失掉组织或器官后,恢复或复制失去的部分,形成新的完整植株的能力,称为() A.植物细胞全能性 B.植物的极性现象 C.植物的再生功能 D.细胞的分化 8.下列关于细胞全能性叙述正确的是() A.每个生物体内的所有细胞具有相同的功能 B.生物体内任何一个细胞可完成该生物体全部功能 C.生物体每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 D.生物体每个细胞都经过产生、分裂、生长、衰老、死亡的全过程 9.构成胚的所有细胞几乎都保持着未分化的状态和旺盛的分裂能力,称为() A.脱分化细胞 B.成熟细胞 C.胚性细胞 D.再分化细胞 10.愈伤组织表面和内部形成很多胚状体,称为() B.胚泡C.体细胞胚D.合子胚 A.胚囊 11.植物再生功能的产生是由于植物受伤组织产生了() A.细胞分裂素 B.赤霉素 C.创伤激素 D.生长素 12.草莓茎尖在4℃黑暗条件下,可以保持生活力达()年之久 A.4 B.5 C.6 D.8 13.脱毒培养指的是() A.种苗消毒后的培养 B.种苗及土壤消毒后的培养 D.无毒茎尖的培养技术 C.外植体消毒后的培养

植物组织培养技术所有填空题

植物组织培养技术所有填空题 填空题(每空1分,共20分) 1、去除植物病毒的主要方法是_组培法___和_理化法___两种方法,当把二者结合起来脱毒效果最好。 2、原生质体的融合可实现__ 体细胞___的杂交,其融合的方式分为_自然融合__和_人工诱导融合_两类。 3、在组织培养中,非洲菊是靠__丛生芽 ____的方式进行繁殖的,而蝴蝶兰是以__原球茎增殖_的方式进行快繁的。 4、单细胞培养的方法主要有 --看护培养--、 ---微室培养--- 及 ---平板培养----。 5、在通过微茎尖培养脱毒时,外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定,一般以 __0.3—0.5___mm、带__1—2__个叶原基为好。 6、植物组织培养按培养过程中是否需要光,可分为__ _光___培养和__ _暗__培养。 7、细胞的再分化有 ----器官发生--- 和 ---体胚发生---- 两种形式。 8、连续培养有 ----浊度恒定法---- 和----化学恒定法---- 两种方法。 9、通过茎尖培养脱毒苗的过程中,切取茎尖的大小与其成活率成__正比 __,而与脱毒效果成_反比 __。 10、一个已停止分裂的成熟细胞转变为_____未分化_____状态,并形成__未分化的愈伤组织___的现象称为"脱分化"。 11、植物的胚胎培养,包括____胚__培养、__ _胚乳____培养、____胚珠___培养、子房培养以及离体授粉的。

12、在组织培养中,IAA、ZT 和GA 必须用____过滤灭菌__法灭菌,而接种室空间采用_ __紫外线照射_或__甲醛熏蒸__法灭菌。 13、幼胚培养时,其发育过程有__ __早熟萌发__、_ _呸性发育____、_ __形成愈伤___三种方式。 14、原生质体的分离有__ _机械法___和__ 酶降解法____两种方法。 15、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为_普通茎尖培养__培养和__茎尖分生组织__培养两种类型。 16、花药培养是__ _器官__培养,花粉培养属于__ 细胞___培养,但二者的培养目的一样,都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞,最后发育成_单倍体植株_。 17、不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样,次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 ___ClO-_______来杀菌的;升汞是靠__重金属________来达到灭菌目的。 18、一个已停止分裂的成熟细胞转变为__ 分生__状态,并形成_ 未分化的愈伤组织__的现象称为"脱分化"。 19、White 培养基__ _无机盐____浓度低,适合生根培养。 20、在无毒苗的组织培养中,外植体的大小与其成活率成__ ___正比_____,而与脱毒效果成___ _反比_____。 21、由胚乳培养可以获得__ _单___倍体植株,经秋水仙素处理可以获得___二_倍体植株。 22、使单倍体植株染色体加倍的途径主要有 ---自然加倍--、 ----人工加倍---- 和 ---通过愈伤组织再生加倍。。 23、细胞悬浮培养有 ----成批培养--- 和 ----连续培养------ 两种类型。

植物组织培养技术考试复习题

植物组织培养技术 考试复习题 一、填空题 1、组织培养的理论依据是:植物细胞的全能性。 2、根据培养的外植体材料不同,可将植物组织培养分为以下几种类型:愈伤组织培养、器官培养、胚培养、 细胞培养、原生质体培养、遗传转化。 3、植物组织培养实验室一般划分为洗涤室、培养基配置室、缓冲室、无菌接种室、培养室、观察室、驯化室等分室,其中植物组织培养实验室对无菌条件要求最严格的区域是无菌接种室。 4、培养基成分主要包水分、无机盐类、有机营养成、植物生长调节物质、天然物质、 pH 、凝固剂。 5、目前应用最广泛的组培基本培养基是 MS培养基。 6、培养基最常用的碳源是糖类物质,使用浓度在1%-5% 常用 3%。 7、培养基中加入活性炭的目的:减少外植体的褐变。 8、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向,其比值高则有利于根的形成;其比值低则有利于芽的形成。 9、一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象称为"__脱分化__" 10、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定,对其灭菌时不能进行(高压蒸汽 )灭菌,而要进行过滤方法灭菌。 11、确定花粉发育时期最简捷有效的方法是压片镜检法。

12、液体培养基和固体培养基最主要的区别是:固体培养基中添加了琼脂粉,而液体培养基一般不添加。 13、细胞悬浮培养的方法有分批培养和连续培养。 14、外植体灭菌常用的消毒剂是酒精,使用浓度一般为 70—75%。 15、具有防止褐变作用的维生素是抗坏血酸(维生素c)。 16、常用防止褐变的试剂有有机酸、硫代硫酸钠。 17、组培中按照污染的对象分,常见的污染类型有细菌性污染、真菌性污染。 18、在使用超净工作台进行无菌操作前,应先将借种器械放进超净工作台,并打开紫外线灯和风机组工作进行消毒20分钟左右。 19、配制培养基调节pH值时常用氢氧化钠溶液和稀盐酸溶液。 20、某溶液在使用前已配制成100倍的母液,在使用时,若需要配制1/2 L的培养基,则需要吸取母液的量是 5ml 。 21、原球茎是兰科植物特有的一种快繁方式。 22、组织培养植株的再生途径有两条,分别是:器官发生途径和胚胎发生途径。 23、一般进行外植体培养时,须诱导形成新的分生组织,即形成愈伤组织。 24、在使用完移液枪后,应注意调回至该移液枪最大量程。 25、植物组织培养快速繁殖技术的基本过程包括材料的初代培养、继代培养、生根培养、驯化培养。

《植物组织培养》试题及答案教学教材

试卷编号NO: 高等函授教育《植物组织培养》试题 学号:姓名: 一名词解释:(10*2分=20分) 1、植物细胞组织培养 2、细胞全能性 3、脱分化 4、外植体 5、试管苗驯化 6、间接不定芽发生 7、双极性 8、微体嫁接 9、人工种子 10、体细胞无性系变异 二填空:(30*1分=30分) 1、目前植物组织培养应用最广泛的方面是 和。 2、由脱分化的细胞再分化出完整植株有两种途径,一种叫做,另一种叫做。 3、培养用具的常用灭菌方法有、、 。 4、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定,对其灭菌时不能进行,而要进行。 5、一般来说,黑暗条件下有利于的增殖,而往往需要一定的光照。 6、植物离体授粉技术通常包括、、 三个方面。 7、一般液体培养的继代时间较短,继代一次;而固体培

养继代时间可以长些,继代一次。 8、外植体器官发生的三种途径包括、、。 9、从再生植株倍性来看,小孢子培养通常产生植株,胚 培养通常产生植株,通常产生三倍体植株。 10、脱毒苗鉴定与检测的主要方法有、、 、。 11、在生长素中,对于许多作物花粉的启动、分裂、形成愈伤组织和胚状体起着决定性作用,但是对却有抑制作用。 12、用平板培养法培养单细胞或原生质体时,常用 来衡量细胞培养效果。 13、用药剂处理是诱导染色体加倍的传统方法。 三计算题(1*10分=10分) 某培养基的配方是MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L+2.5%蔗糖+0.7%琼脂粉。MS母液的浓度分别是:大量元素20倍,微量元素500倍,铁盐100倍,有机物50倍;BA母液浓度1.0 mg/ml ,NAA母液浓度0.1mg/ml。要配制400ml 该培养基,需要吸取各种母液各多少ml?分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克?(要求写出计算步骤)四简答题(5*5分=25分) 1、造成组织培养过程中发生污染的原因有哪些?如何有效控制污染? 2、简述外植体消毒的一般步骤。

植物组织培养习题及答案

0.填空 1.根据培养的材料,植物组织培养分:愈伤组织培养、(器官培养、细胞格养、原生质体培养(悬浮培养 2.植物组织培养的发展分为三个阶段:萌芽阶段、奠基阶段,快速发展和快速发展和应用阶段 3,1902年,Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说,1934年, White出版了《植物组织培养手册》培养等类型从而使植物组织培养为一门新兴学科。 一.填空、 1,组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、调机、_天平、显微镜、_蒸馏水,发生器,酸度计 养基成分主要包括①无机营养成分、②有机营养成分)、_③植物生长调节物质、_④碳水化合物、⑤其它物质 3、培养基最常用的碳源是_蔗糖,使用浓度在1%-5%常用3% 4、糖在植物组织培养中是不可缺少的,它不但作为离体组织棱以生长的碳源而且还能维持培养基渗透压 5、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物般用量6-10g/L之间 6.驯化的目的:在于于提高试管苗对外界环境条件的适应性,提高其光合作用的能力,促使试健壮,提高苗的移裁成活 7、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向,其比值高:有利于根的形成和愈伤组织的形成:低:有利于芽的形成 8、培养基灭菌一般在108kPa的压力下,锅内温度达_121℃C,维持_20-30min、 9.选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取适宜的大小。 10、诱导胚状体比诱导芽的优点:(1)数量多、(2)速度快、_(3)结构完整 11、试管苗的生态环境:高温且恒温、高湿、弱光、无菌 12、培养基中加入活性炭的目的:利用其吸附能力,减少一些有害物质的影响大 13、筛选培养基的方法:单因子试验法、多因子试验法、广谱实验法 14、植物培养技术:灭菌、接种种、培养、驯化四个环节 15、试管苗的驯化注意:基质、温、光、水、肥、气的综合管理 二.填空 1.绝大多数培养植物再生植株时都先经过愈伤组织阶段 2.愈伤伤组织形成大致经历诱导期、分裂期一和分化期三个时期 3、愈用植物生长调节物质时要注意:种类和浓度生长素和细胞分裂素的比值4.愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状体方式 5.组织培养细胞再分化包括四个水平:细胞水平的再分化、组织水平的再分化、器官水平的再分化(器宣发生)和植株水平的分化 三.填空: 1.植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。 2、茎尖培养根据培养目的和取材大小分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养两种类型。前者主要是对茎尖长度不超过,最小只有几十微米的茎尖进行培养,目的是获得无病毒植株:后者是对几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养,目的是离体快繁 3.不定芽产生的途径一是从外植体上直接产生二是从由外植体诱导产生的愈伤组织上产生 4.离体叶培养是指包括叶原基、叶栖、叶鞘、叶片、子吐等叶组织的无菌培养 5.在离体叶培养中,6-BA和KT利于芽的形成;24D利于愈伤组织的形成 四.填空 1、胚胎培养包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养 2、离体胚的培养分为二种类型:。成熟胚培养和_幼胚培养六

植物组织培养试卷

植物组织培养试卷 一、名词解释:(每小题3分,共15分) 1.初代培养基:是指用来第一次接种外植体的培养基。 2.脱分化:一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象。一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象。 3.液体培养:指在进行培养时,培养基中不加琼脂等凝固剂,一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。 4.细胞全能性:一个细胞能产生一个完整植株的固有能力,或植物细胞具有全部的遗传信息,不论是性细胞还是体细胞,在特定环境下,能进行表达而产生一个独立完整的个体。 5.再分化:愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。 二、填空(每空1分,共40分) 1.植物组织培养过程中,最常用的培养基是,培养基的pH因外植体的来源不同而异,常用和调节pH,大多数植物的pH要求调节在范围内。 2.可以通过、、、、等措施预防褐变的发生。3.植物组织培养时,外植体可以是、、、。 4.应用微尖嫁接技术进行脱毒培养无病毒苗,主要程序为 → → → → 。

5.组织培养植株的再生途径有两条:一是发生,另一是发生。6.在配制培养基时,可以在培养基中添加,利用其吸附能力,可以降低褐变的发生,但它对物质的吸附。 7.培养基的灭菌要求压力为、温度为、维持时间为。 8.组织培养中常用的生长素有吲哆乙酸(IAA),2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),吲哆丁酸(IBA),萘乙酸(NAA),它们的作用强弱顺序为 > > > 。 9. 茎尖微繁殖过程一般包括五个阶段,即、、、、。10.茎尖分生组织培养的目的主要是,其茎尖一般取毫米。为了使脱毒效果更好,可以将茎尖分生组织培养与结合起来。脱毒处理的试管苗,在用于生产之前,必须进行。 11.污染的原因从病源菌上分析主要有两大类、。 三、判断正误,并改错。(每小题2分,共20分) 1.一般将微量元素母液均配制成10倍,在配制培养基时,使用量为10ml/L。细胞分裂素/生长素的比值较高时,有利于愈伤组织的诱导。 2.对于金边虎尾兰等遗传学上的嵌合体植物,要是组织培养繁殖的植株保持原有的园艺价值,只能通过叶培养。 3.植物生长调节物质使用不当时,材料也容易褐变,生长素有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。 4.利用茎尖分生组织进行脱毒培养时,茎尖外植体大小与脱毒效果成正比。5.某些植物通过愈伤组织培养可以获得无病毒苗。 6.无病毒植株不具有抗病毒的能力,而且在清除病毒之后,体内营养和生理状

植物组织培养试题及答案总结

《绪论》复习题及参考答案 一、填空: ★1、根据培养的材料,植物组织培养分:愈伤组织培养、器官培养、细胞培养、原生质体培养、悬浮培养等类型。 2、植物组织培养的发展分为三个阶段:萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。 3、1902年,Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说,1934年,White出版了《植物组织培养手册》从而使植物组织 培养为一门新兴学科。 二、名词解释: ★1、植物组织培养(plant tissue culture):是指通过无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。由于培养材料已脱离了母体,又称为植物离体培养(Plant culture in vitro)。 2、脱分化(dedifferentiation):由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化。 3、再分化(redifferentiation):脱分化产生的愈伤组织继续进行培养又可以重新分化成根或芽等器官,这一过程称为植物细胞的再分化。 ★4、外植体(explant):由活体(in vivo)植物体上切取下来的,用于组织培养的各种接种材料。包括各种器官、组织、细胞或原生质体等 ★5、愈伤组织(callus):原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞,在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则的薄壁细胞,多在植物体切面上产生。 三、问答题: 1、简述植物组织培养的理论依据? 植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说,即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组,并具有发育成为完整植株的潜在能力。 ★2、植物组织培养有哪些特点? (1)培养条件可以人为控制 (2)生长周期短,繁殖率高: (3)管理方便,利于工厂化生产和自动化控制: ★3、植物组织培养的分类? (1)根据培养对象不同:组织培养、器官培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养等; (2)根据培养物培养过程:初代培养、继代培养; (3)根据培养基的物理状态:固体培养、液体培养。 ★4、植物组织培养主要应用于哪些方面? (1)快速繁殖运用组织培养的途径,一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株; (2)种苗脱毒针对病毒对农作物造成的严重危害,通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗; (3)培育和创制新品种利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功,从而育成一些罕见的新物种; (4)大量生产次生代谢物质通过植物细胞培养获得的生物碱、维生素、色素、抗生素以及抗肿瘤药物不下50多个大类,其中已有30多种次生物质的含量在人工培养时已达到或超过亲本植物的水平。植物细胞次生物质的研制与生产硕果累累,后来居上。 (5)植物种质资源的离体保存植物组织培养结合超低温保存技术,可以给植物种质保存带来一次大的飞跃。因为保存一个细胞就相当于保存一粒种子,但所占的空间仅为原来的几万分之一,而且在-193度的液氮中可以长时间保存,不像种子那样需要年年更新或经常更新。 (6)人工种子人工种子便于贮藏和运输,适合机械化播种;繁殖速度快,不受季节和环境限制,利于工厂化生产;体细胞胚由无性繁殖体系产生,可以固定杂种优势。 第1章《实验室及基本操作》复习题及参考答案 一、填空: 1、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、天平、显微镜、蒸馏水发生器、酸度计等。 ★2、培养基成分主要包括①无机营养成分、②有机营养成分)、③植物生长调节物质、④碳水化合物、⑤其它物质。

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植物组织培养试题库 一、名词 外植体:在植物组织培养过程中,由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子 等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。 热处理脱毒:利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同,选择适当的高温处理染病 植株,使植株体内的病毒部分或全部失活,而植株本身仍然存活。 平板培养法:是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合,平铺一薄层在培 养基底上的培养方法。 消毒:指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用。 玻璃化现象:在长期的离体培养繁殖时,有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水
渍状,这种现象称为玻璃化。 脱毒苗:是指不含该种植物的主要危害病毒,即经检测主要病毒在植物内的存在 表现阴性反应的苗木。 灭菌:是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,
即把所有生命的物质全部杀死。 褐变:是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚类物质氧化
成棕褐色的醌类物质,有时使整个培养基变褐,从而抑制其他酶的活性,影响 材料的培养。 微尖嫁接:指在人工培养基上培养实生砧木,嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗的技 术。主要程序:无菌砧木培养—茎尖准备—嫁接—嫁接苗培养—移栽。 植物细胞全能性:一个生活的植物细胞,只要有完整的膜系统和细胞核,它就会 有一整套发育成一个完整植株的遗传基础,在适当的条件下可以通过分裂、分化 再生成一个完整的植株。 人工种子:将组织培养产生的体细胞胚或不定牙包裹在能提供养分的胶囊里,再 在胶囊的外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜,形成一种类似自然 种子的结构。 试管苗驯化:植物组织培养中获得的小植株,长期生长在试管或三角瓶内,体表 几乎没有保护组织,生长势弱,适应性差,要露地移栽成活,完成由“异养”到 “自养”的转变,需要一个逐渐适应的驯化过程。 器官培养:植物的根、茎、叶、花器(包括花药、子房)和幼小果实的无菌培 养。 微体嫁接:指将 0.1-0.2mm 的茎尖作为接穗,嫁接到由试管中培养出来的无菌 实生砧木上,继续进行试管培养,愈合成为完整的的植株。 快速繁殖(微繁殖): 用组织培养的方法,使植物的部分器官,组织迅速扩大培养, 并移植到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法. 脱分化:将已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体的抑制性影响下解脱出来, 恢复细胞的分裂活性.一个成熟的细胞转变为分生状态的过程叫脱分化. 原生质体融合(体细胞杂交):就是使分离下来的不同亲本的原生质体,在离体条 件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合,像性细胞受精作用那样互相融合 成一体的现象. 愈伤组织培养:是指将母体植株上的外植体,接种到无菌的培养基上,进行愈伤组 织诱导,生长和发育的一门技术
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一、填空题 1、植物组织培养成功与否,一方面取决于培养材料本身的性质;另一方面取决于培养基的种类和成分。 2.一个已停止分裂的成熟细胞转变为____分生______状态,并形成___细胞团_______的现象称为"脱分化" 3植物组织培养技术的三大难题分别为褐变,污染、和玻璃化。 4具有防止褐变作用的维生素是_____维生素C_________。 5病毒在植物体内的运转方式有短距离运转和长距离运转两种, 前者经过胞间连丝向邻近细胞中扩散,速度很慢。后者通过寄主植物韧皮部的疏导组织随着营养输送进行转移,速度很快。 6.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进_____根_____的生长,这时___分化_____占主导地位;比值高促进___苗____的生长,这时_____分裂___占主导地位悬浮培养的材料必须达到悬浮培养物质分散性多、细胞核较小均一性好和生长迅速等三个要求。 7、连续培养是指在培养过程中,以不断抽取用过的培养基并注入新鲜的培养基,使培养不断得到养分补充,保持其稳定状态的培养 8.培养基的母液一般是配成_大量元素,微量元素,维生素_________和__氨基酸__4类存放备用。3.MS培养基中组成大量元素的盐类分别是__硝酸钾___和___硝酸铵____。 9.一般情况下,细胞分裂/生长素的比值高,有利于愈伤组织长__芽__,比值低有利于长_根___。 10.在植物的材料灭菌中,酒精的浓度用__75%___,处理时间一般在_____范围,是靠_________杀菌的;升汞的浓度一般用__1%~2%___,处理的时间在__5~10min ___范围,升汞是靠____hg2+_____杀菌的;杀菌剂中的次氯酸钠是靠_____Cl-____杀菌的。 11.培养植物适宜的温度大多在____25度+-2__,光照强度在______,光照时间在___。 12、进行热处理植物脱毒的温度在_______85度___左右。13、配制螯合态铁盐需要的成分是__7水硫酸铁_______和_____edta2钠_____。14、培养基中有机态N素营养主要是-______硝态氮_____和____铵态氮_______。 13原生质体的融合可实现_______体细胞___的杂交,其融合的方式分为_______自发融合_______和_______诱导融合_______两类。 14从再生植株倍性来看,小孢子培养通常产生单倍体植株,胚培养通常产生二倍体植株,胚乳培养通常产生三倍体植株。 15.具有防止褐变作用的维生素是______vc________。 18.进行植物组织培养最基本的前提条件是配置培养基_______。。 16离体叶片在诱导愈伤组织的培养基上培养,一般从叶缘或叶脉处容易发生愈伤组织。 17.某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定,对其灭菌时不能进行 高压蒸汽灭菌,而要进行过滤方法灭菌。 18配制培养基时,一般先配制母液,其目的在于__使用方便_________和_______用量准确____。 19分生区域内无维管束,病毒只能通过________胞间连丝____传递。 20在无毒苗的组织培养中,外植体的大小与其成活率成_________正比___,而与脱毒效果成_反比____________。 二、单项选择题 1、( c )可作为植物外植体的表面消毒剂是。 A. 漂白粉和水 B. 次氯酸钠溶液和聚乙二醇 C. 氯化汞和新洁尔灭 D.酒精和氯化钠 2、( b )大多数植物组织培养最适温度一般为℃。 A.37±1℃ B.26±2℃ C.16±2℃ D.4±2℃ 3、( a )在适宜的培养条件下,还可使愈伤组织长期传代生存下去,这种培养称为 。A. 继代培养 B. 再分化培养 C.胚状体培养 D. 驯化 4、( b )大多数植物组织培养培养基最适pH为。 A.5.0-7.0 B. 5.0-6.0 C. 3.0-4.0 D. 7.0-8.0 5、( a )外植体褐变的原因是。 A.外植体中的多酚氧化酶被激活,使细胞的代谢发生变化。 B. 外植体中的琥珀酸脱氢酶被激活,使细胞的代谢发生变化。 C. 外植体中的磷酸化酶被激活,使细胞的代谢发生变化。 D. 外植体中的三磷酸腺苷酶被激活,使细胞的代谢发生变化。 6.植物组培初代接种易污染的可能原因____ A材料过嫩B材料过老C接种材料过大D每瓶接种数量太少 7.影响培养基凝固程度因素有_________。 A琼脂的质量好坏;B 高压灭菌的时间;C 高压灭菌的温度; D 培养基的PH

植物组织培养试题与答案(集合版)

植物组织培养试题与答案(集合版)

植物组织培养练习题 1.植物组织培养:指要人工控制的条件下,将植物体的任何部分,或器官、或组织、或细胞, 进行离体培养,使之发育形成完整植物体。所谓人工控制的条件,即营养条件和环境条件; 植物体的任何一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。 2.愈伤组织培养:将外植体接种在人工培养基上,由于植物生长调节剂的存在,而使其细胞 脱分化形成愈伤组织,然后通过再分化形成再生植株。 3.外植体:植物组织培养中的各种接种材料,包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质 体等。 4.脱分化:一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象。 5、接种:把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞,转放到无菌培 养基上的全部操作过程。 6、褐变:外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类 物质,这种致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色,而且还会抑制其他酶的活性,严重影响外植体的脱分化和器官分化,最后变褐而死亡的现象。 二填空 植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。 2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。 3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、单倍体育种、种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。 4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快速繁殖和脱毒培养两种类型。 5、一般组织培养的几道工序如下:培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和高压灭菌;无菌操作——材料的表面灭菌和接种,培养;试管苗的驯化、移栽与初期管理。 6、在进行植物组织培养室设计时,其设计应包括洗涤室、准备室、灭菌室、无菌操作室、培养室、细胞学实验室、摄影室等分室,另加驯化室、温室和大棚。 7、培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、PH。 8、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。 9、细胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,并具有发育成完整植株的潜在能力。 10、玻璃化现象是指试管苗的一种生长失调症状,当植物材料进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状,这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。

植物组织培养复习题 (标准)

植物组织培养复习题 一、填空题: 1.植物脱病毒一般采用茎尖培养脱毒和热处理两种方法。 2.最典型的培养基是1962年发表的的一种适合于烟草愈伤组织快速生长的改良培养基,该培养基后来被称为MS培养基,现已广泛用于植物组织培养。 3.胚状体发育顺次经过原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷形胚期和子叶期。 4.具有防止褐变作用的维生素是Vc。 5.植物组织培养按培养对象分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培 养等几种类型。 6.在通过微茎尖培养脱毒时,外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定,一般以0.3~0.5mm、带1~3个叶原基为好。 7.对植物组织培养的培养基灭菌时,一般情况采用的条件是121温度,保持时间是15~ 20分钟。 8.在幼胚培养基中,蔗糖的主要作用是维持渗透压、提供碳源和能源和防止幼胚早熟萌 发。 9.植物组织培养中,微量元素铁的用量较大,由于在较高pH下,易形成Fe(OH)3沉淀,难以被吸收,所以多用硫酸亚铁(FeSO4·7H20)和乙二胺四乙酸(Na2-EDTA)形成的螯合物,并且单独配制。 10.种质保存大致分为原地保存和异地保寸两种方式。 11.外植体选择的原则是:选择优良的种质、选择健壮的植株、选择最适时期、选取适宜 的大小。 12.细胞悬浮培养的方法有成批培养和连续培养等。 13.植物原生质体分离的方法有酶解法和机械法。 14.植板率是指已形成细胞团的单细胞与接种总细胞数的百分数。 15.花粉分离的方法有挤压法、磁搅拌法、漂浮释放法。 16.植物组织培养发展可分为三个时期:萌芽阶段、奠基阶段、快速发展和应用阶段。 17.一个年产4-20万株苗的商业性组织培养实验室,其总面积不应少于60平方米,可划 分为准备室、缓冲室、无菌操作室和培养室。 18.盐酸硫胺素VB1是脱羧酶辅酶,吡哆醛VB6是转氨酶辅酶。 19.愈伤组织形成大致经历三个时期,即:诱导期、分裂期、分化期。

植物组织培养技术试题二答案

《植物组织培养技术》试题二答案 一、名词解释(每题3分,共15分) 1、脱毒苗:是指不含该种植物的主要危害病毒,即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。 2、灭菌:是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,即把所有生命的物质全部杀死。 3、褐变:是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质,有时使整个培养基变褐,从而抑制其他酶的活性,影响材料的培养。 4、纸桥培养:将培养基中放入滤纸,再将材料置于滤纸上进行培养称为纸桥培养。 5、微尖嫁接:指在人工培养基上培养实生砧木,嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗的技术。主要程序:无菌砧木培养—茎尖准备—嫁接—嫁接苗培养—移栽。 二、填空题(每空1分,共20分) 1、植物组织培养的发展分为三个阶段:萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。 2、培养基最常用的碳源是蔗糖,使用浓度在1%-5% 常用3 %。 3、培养基的种类按其态相不同分为固体培养基与液体培养基,其灭菌方法一般采用湿热消毒灭菌方法。 4、pH的大小会影响琼脂的凝固能力,一般当pH大于6.0时,培养基将会变硬,低于5.0时,琼脂不能很好地凝固。 5、一般情况下,生长素/细胞分裂素的比值高,有利于根的形成和愈伤组织的形成;比值低,有利于芽的形成。 6、选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取适宜的大小。 7、花药和发粉培养的共同特点是利用花粉(小孢子)染色体数目的单倍性,培育出单倍体植 株。 8、原生质体的分离方法有机械分离法和酶法分离法。 三、选择题(每题1分,共10分) 1、细胞工程、( B )、酶工程、发酵工程是生物技术的主要范畴。 A、蛋白质工程 B、基因工程 C、微生物工程 D、生化工程 2、配制( B )溶液时应先用10%的HCl溶解,再加蒸馏水定容。 A、2,4-D B、BA C、GA3 D、IAA 3、炼苗的环境开始时和( A )相似,后期类似于田间栽培条件。 A、培养室条件 B、无菌界室条件 C、缓冲间条件 D、准备室条件 4、离体培养常用的诱导生根的生长调节物质主要是( A )。 A、生长素 B、细胞分裂素 C、脱落酸 D、乙烯 5、植物组织培养实验室需要定期用( A )进行熏蒸。 A、高锰酸钾和甲醛 B、酒精和洗液 C、高锰酸钾和酒精 D、高锰酸钾和洗液 6、进行无菌操作前,工作人员可以不必( A )。 A、洗脸 B、换拖鞋 C、穿工作服 D、洗手 7、电子天平的感量一般在( C )范围。

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