梅毒血清学实验和临床相关问题
梅毒的血清学试验和临床相关问题（1）梅毒是由梅毒螺旋体（Treponema pallidum，TP）引起的一种慢性传染病。对梅毒的诊断除了通过临床症状外，主要是通过实验室血清学试验进行诊断。以下对于梅毒的相关试验进行概述。
梅毒螺旋体的抗原结构:
1. 外膜脂蛋白抗原：具有强免疫原性，是梅毒螺旋体的主要免疫优势抗原。
2. 轴丝抗原：是梅毒螺旋体的运动器官，其免疫原性很强，可以刺激机体产生细胞和体液免疫应答。
3. 4D抗原：为螺旋体特异性表面抗原
机体对梅毒螺旋体感染的免疫应答包括：
1. 非特异性类脂质反应素抗体：即抗心磷脂（cardiolipin）抗体，又称为反应素。是梅毒螺旋体在破坏机体组织的过程中，体内释放一种心磷脂抗原，这种抗原可刺激机体产生相应的抗体。反应素多为IgA和IgM混合型抗体，此类类脂质抗体在体外可增强巨噬细胞对梅毒螺旋体的吞噬作用。未经治疗的梅毒患者血清中反应素可长期存在，经适当治疗后可逐渐减少，直至消失。
2. 抗密螺旋体的特异性抗体：早期患者以产生针对梅毒螺旋体轴丝中37KDa鞘亚单位成分的IgM抗体为主；另外还有针对梅毒螺旋体多肽（分子量分别为45、42、33、30、16.5、15.5KDa）的抗体。二期梅毒时，血循环中可出现抗全部梅毒螺旋体抗原的IgM和IgG抗体，对多肽的抗体除了以上六种外，又增加了另外16种多肽抗体。如经治疗，IgM抗体浓度降低，血清中只能检出IgG抗体。当疾病进入晚期时，则血循环中的某些抗梅毒螺旋体抗原多肽的抗体会逐步消失。
梅毒血清学检查
1．经典的梅毒血清学试验
补体结合试验：1906年由Wasserman建立，是最早使用的梅毒螺旋体感染诊断的血清学试验。
絮状沉淀试验：1920年由Kahn建立.λ
2．使用类脂质抗原的血清学试验
性病研究实验室试验（Venereal diseaseresearch laboratory test,λVDRL）
不加热血清反应素试验(Unheated serumreagin test, USR)λ
快速血浆反应素环状卡片试验(Rapid plasmareagin circle card test，RPR)λ
甲苯胺红不加热血清试验（Toluidine redunheated serum test ，TRUST）λ使用类脂质抗原的血清学试验：优缺点---测定操作简便快速，对一期梅毒的阳性反应出现较早，对二期梅毒也有诊断价值。但该试验特异性较差，生物学假阳性可见于多种疾病，如麻风、结核、红斑狼疮、类风湿性关节炎、猩红热、慢性肝病、HIV感染等。由于感染梅毒螺旋体后，机体血循环中心磷脂抗体的出现要晚于特异性的抗梅毒螺旋体抗体，并且晚期梅毒这类抗体还有可能转阴，因此，上述过筛试验不适于一期梅毒早期和三期梅毒的临床诊断。
3．使用密螺旋体抗原的血清学试验
荧光密螺旋体抗体吸收试验（Fluoresenttreponemal antibody-absorption test,FTA-ABS）梅毒螺旋体血球凝集试验（Treponema pallidumhemagglutination assay, TPHA）
梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（Treponemapallidum particle agglutination assay, TPP A）
酶联免疫吸附试验（ELISA）λ
蛋白印迹技术（Western blotting, WB）λ
荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）
本试验是将梅毒螺旋体Nichols株抗原直接涂在载玻片上，然后将密螺旋体无毒株（Reiter 株）制成吸收剂加至待测血清标本中反应30分钟，以去除同属抗原的交叉反应。再将吸收后的血清加到玻片的抗原膜上，37℃温育30分钟，用PBS缓冲液冲洗晾干，再加荧光素标记的抗人IgG，37℃温育后冲洗，晾干，最后在荧光显微镜下观察结果。本试验由于吸收试剂的使用，提高了测定的特异性，可达92%。由于使用的是梅毒螺旋体Nichols株抗原，密螺旋体各种抗原分子均存在，提高了试验的敏感性。对一期梅毒的敏感性为80%，，二期为99~100%，三期为95~100%。测定假阳性可见于高丙种球蛋白血症、全身免疫性疾病和生殖器疱疹等。FTA-ABS是公认的“经典”密螺旋体抗原的血清学试验。
梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）
本试验是以梅毒螺旋体作为抗原的间接血凝试验，操作简便，通常作为梅毒螺旋体感染的特异性验证试验。所用抗原为将梅毒螺旋体Nichols株经超声破碎后得到的可溶性抗原成分，用其致敏红细胞。同时，同样用Reiter株制成吸收剂稀释血清，可将血清中的非特异性抗体吸收掉，以加强测定的特异性。本方法测定敏感性和特异性均较高，操作较为简便，无需特殊的仪器设备，但其对一期梅毒的检测阳性率不如FTA-ABS。
梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）
TPPA的测定原理基本上与TPHA类同，所不同的是TPPA所用的凝集颗粒为明胶，而非TP HA中的红细胞。
酶联免疫吸附试验（ELISA）
采用基因工程梅毒螺旋体抗原以双抗原夹心法检测梅毒抗体，具有简单、快速和高通量的优点，应是梅毒血清学诊断试验的首选方法。λ
蛋白印迹（WB）
首先将将梅毒螺旋体Nichols株菌体细胞用SDS破碎，再使用聚丙烯酰胺凝胶电泳将将梅毒螺旋体各种抗原成分分开形成不同区带，经电转印可将这些条带转移至硝酸纤维素膜上作为抗原，最后采用酶标技术检测病人血清中的相应特异抗体。梅毒螺旋体特异区带如TpN1 5,TpN17,TpN45λ和TpN47至少两条以上出现阳性时即可判断为阳性。本方法要优于FTA-ABS；其对二期梅毒、早期梅毒、神经梅毒具有100%的阳性诊断率，对使用RPR、FTA-A BS和TPHA等试验出现的假阳性血清标本，用本法均为阴性。本法使用商品试剂，则操作简单，易于掌握且无需特殊设备和试验条件，是一种很好的确认试验。
梅毒的基本病理改变主要是①血管内膜炎，内皮细胞肿胀与增生；②血管周围炎，有大量淋巴细胞与浆细胞浸润。晚期梅毒除上述变化外，尚有上皮样细胞和巨细胞肉芽性浸润，有时有坏死。
一、硬下疳：呈血管周围浸润性病变，主要见淋巴细胞，包括CD8+和CD4+细胞、浆细胞和组织细胞，伴有毛细血管内皮的增生，随后出现小血管闭塞。此外，梅毒螺旋体见于疳中的上皮细胞间隙中、毛细血管以及淋巴管周围和局部淋巴结中。
二、二期梅毒斑丘疹；特征是表皮角化过度，有中性多形核白细胞侵入真皮乳头，真皮深层血管周围有单核细胞、浆细胞和淋巴细胞浸润。
三、扁平湿疣：早期为表皮疣状增生，晚期中央组织坏死，乳头延长，真皮有炎性浸润。血管周围有明显的浆细胞浸润，呈袖口状排列，毛细血管增生，伴表皮细胞内外水肿。用银染色法在扁平湿疣中约有1/3病例找到梅毒螺旋体，主要位于表皮内，少数位于浅血管周围。
四、三期梅毒：主要为肉芽肿性损害，血管变化较二期轻微，为上皮样细胞及巨噬细胞组成的肉芽肿，中间可有干酪样坏死，周围大量的淋巴细胞与浆细胞浸润，并有一些成纤维细胞和组织细胞，血管内皮细胞常有增生肿胀，甚至管腔堵塞。
五、结节性梅毒疹与树胶肿的区别在于病变的广泛程度与位置的深浅。结节性梅毒疹肉芽肿局限于真皮内，干酪样坏死轻微或缺如，大血管不受累；树胶肿的病变广泛，可累及皮下，干酪样坏死明显，大血管亦常受累。
梅毒的血清学试验和临床相关问题（2）
1. 梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验（TP-ELISA）
梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验（TP-ELISA）为密螺旋体抗原的血清学试验的一种,与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）一样检测的都是梅毒特异性抗体.由于其高敏感性和高特异性以及结果易于判断的优势,近年来TP-ELISA法逐渐取代了RPR成为医疗卫生机构和血站献血员的筛选方法。
我科原来用RPR或TRUST(检测的是非特异性抗体,但其对一期梅毒早期和三期梅毒敏感性低，对潜伏期和神经梅毒也不敏感)做为梅毒筛选试验,从2005年后也顺应医学的发展改用TP-ELISA法做为梅毒筛选试验.
TP-ELISA和TPPA(临床上应用较广的梅毒确证试验)检测的都是梅毒特异性抗体,有人会认为那直接检测TP-ELISA就得了,为什么还要做TPPA呢?两者还是有区别的: TP-ELISA所用的抗原是基因重组合成的,存在抗原不纯的缺点,而TPPA采用的是纯化的野生梅毒螺旋体(Nichols株)抗原,所以TP-ELISA较TPPA而言,敏感性高而特异性稍差, TP-ELISA阳性的标本还应做TPPA.
另外,TP-ELISA用的是原倍血清,当病人抗体过高时会产生“前带现象”,造成假阴性,而TPP A按实验要求用的是稀释标本后报的结果,产生“前带现象”的可能性小.所以当TP-ELISA(-)而TPPA(+)时,极有可能是TP-ELISA因“前带现象”产生的假阴性,应将标本稀释后复查.若TP-E LISA(+)而TPPA(-),排除TP-ELISA假阳性,可能是抗体效价太低造成TPPA假阴性,建议2周后再复查TPPA.
2. 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）
原理：用超声裂解的梅毒螺旋体为抗原，致敏明胶颗粒，这种致敏的明胶颗粒一旦与抗梅毒抗体或免疫血清相遇，在适宜的条件下，产生肉眼可见的抗原抗体凝集。这一反应的特征是用间接血凝法测定人血清或血浆中的抗梅毒螺旋体的特异性抗体，只要有微量的抗体就可使致敏的明胶颗粒发生凝集作用。
为密螺旋体抗原的血清学试验的一种,检测的是梅毒特异性抗体,为临床实验室应用较广泛
的梅毒确证试验,假阳性反应发生率较低.化验单上“梅毒确证试验”,“梅毒螺旋体特异抗体”指的都是TPPA.
3.梅毒滴度试验(RPR-DD)
梅毒滴度试验是在快速血浆反应素环状卡片试验(Rapid plasmareagin circle card test，RPR)或甲苯胺红不加热血清试验（Toluidine redunheated serum test ，TRUST）基础上进行的.采用VDRL抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成,在白色卡片上进行试验，以检测血清或血浆中反应素用。
将待检血清用生理盐水作倍比稀释(1:2,1:4,1:8,1:16,1:32,1:64,1:128….)然后按RPR/T RUST方法进行试验，以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为血清的凝集效价。效价越高说明梅毒非特异性抗体浓度越高.早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性，经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。
梅毒治疗后血清观察
【卫生部2000年梅毒治疗推荐方案】
一、早期梅毒（包括一期、二期及早期潜伏梅毒）
１、青霉素
●苄星青霉素Ｇ（长效西林）240万U，分两侧臀部肌注，1次/周，共2～3次；
●普鲁卡因青霉素Ｇ，80万U，1次/日，肌注，连续10～15天，总量800～1200万U。
２、对青霉素过敏者
●盐酸四环素500mg，4次/日（2g/日），口服，连续15天；或
●多四环素100mg，2次/日，口服，连续15天；或
●红霉素，用法同盐酸四环素。
二、晚期梅毒（包括三期皮肤、粘膜、骨骼梅毒，晚期潜伏梅毒或不能确定病期的潜伏梅毒）及二期复发梅毒。
１、青霉素
●苄星青霉素Ｇ，240万U，分两侧臀部肌注，1次/周，连续3周，共3次，总量720万U；或
●普鲁卡因青霉素Ｇ，80万U，1次/日，肌注，连续20天为一疗程。也可根据情况休药，2周后进行第2个疗程。
２、对青霉素过敏者
●盐酸四环素，500mg，4次/日，口服，连续30天；或
●多四环素，100mg，2次/日，口服，连续30天；或
●红霉素，用法同四环素。
三、心血管梅毒
应住院治疗，如有心力衰竭，应予以控制后，再开始抗梅治疗。不用苄星青霉素。为避免吉海反应的发生，青霉素注射前一天口服泼尼松，10mg/次，2次/日，连续3天。水剂青霉素Ｇ应从小剂量开始，逐渐增加剂量。首日10万U，1次/日，肌注；次日10万U，2次/日，肌注；第三日20万U，2次/日，肌注；自第四日用普鲁卡因青霉素Ｇ，80万U，肌注，1次/日，连续15天为一疗程，总量1200万U，共两个疗程，疗程间休药2周。必要时可给予多个疗程。
对青霉素过敏者，选和下列方案治疗，但疗效不如青霉素可靠。
●盐酸四环素，500mg，4次/日，口服，连续30天；或
●多四环素，100mg，口服，每日2次，连服30天；或
●红霉素，用法同四环素。
四、神经梅毒
●水剂青霉素Ｇ，每日1200～2400万U，静脉滴注，即每次200～400万U，每4小时一次，连续10～14天。继以苄星青霉素Ｇ 240万U，1次/周，肌注，连续3次。或
●普鲁卡因青霉素Ｇ，240万U，1次/日，同时口服丙磺舒每次0.5g，4次/日，共10～14天。继以苄星青霉素Ｇ 240万，1次/周，肌注，连续3次。
对青霉素过敏者，可选用下列方案，但疗效不如青霉素。
●盐酸四环素500mg，4次/日，口服，连续30天；或
●多四环素100mg，2次/日，口服，连续30天；或
●红霉素，用法同盐酸四环素。
五、妊娠梅毒
●、根据孕妇梅毒的分期不同，采用相应合适的青霉素方案进行治疗，用法及用量与同期其他梅毒患者相同（禁服四环素、多四环素），必要时可增加疗程。
●、普鲁卡因青霉素Ｇ，80万U/日，肌注，连续10天。妊娠初3个月内，注射一个疗程，妊娠末3个月注射一个疗程。
●、对青霉素过敏者，只选和红霉素治疗，每次500mg，4次/日，早期梅毒连服15天，二期复发及晚期妊娠末3个月各进行一个疗程。但其所生婴儿应用青霉素补治。
六、先天梅毒（胎传梅毒）
１、早期先天梅毒（２岁以内）
脑脊液异常者
●水剂青霉素Ｇ，10～15万U/kg/日，出生后7日以内的新生儿，以5万U/kg/次，静脉注射每12小时1次；出生7天以后的婴儿每8小时1次，直至总疗程10～14日。或
●普鲁卡因青霉素Ｇ，5万U/kg/日，肌注，1次/日，连续10～14日。
脑脊液正常者
●苄星青霉素Ｇ，5万U/kg/日，1次分两臀肌注。
如无条件检查脑脊液者，可按脑脊液异常者进行治疗。
２、晚期先天梅毒（２岁以上）
●水剂青霉素Ｇ，20～30万U/kg/日，每4～6小时1次，静脉注射或肌注，连续10～14日。或
●普鲁卡因青霉素Ｇ，5万U/kg/日，肌注，连续10～14天为一疗程。可考虑给第二个疗程。
对较大儿童青霉素用量，不应该超过成人同期患者的治疗用量。
●对青霉素过敏者，可用红霉素治疗，7.5～12.5mg/kg/日，分4次口服，连服30天。8岁以下儿童禁用四环素。
七、HIV感染者梅毒
苄星青霉素Ｇ 240万U肌注，1次/周，共3次；或苄星青霉素Ｇ240万U肌注一次，同时加用其他有效的抗生素。
梅毒血清学检测策略
1.非梅毒螺旋体抗原血清学试验： ? 原理：梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体细胞表面释放的类脂物质，刺激机体产生抗类脂抗体（反应素）。在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应，形成凝集反应。?方法：VDRL (venereal disease research laboratory test) USR (unheated serum reagin test ) RPR (rapid plasma reagin circle card test) TRUST (tolulized red unheated serum test)特点：非特异性反应， 一、梅毒血清试验 2、梅毒螺旋体抗原血清试验 基于TP特异性抗原，检测TP抗体
TPPA TPPA 物，荧光镜下，TP呈苹果绿色荧光。 阴性 弱阳性 阳性 图18-1 TP抗体酶联免疫法试验 双抗原夹心一步法原理 图18-2 TP抗体酶联免疫法试验 双抗原夹心二步法原理
?电化学发光(ECLIA)免疫检测原理 亲和素 5）TP-RT胶体金法： ?临床：用于梅毒筛查 ?注意： 高敏感性，特异较？
特异性总抗体 特异性IgG 抗体特异性IgM 抗体 5-7周 反应素 抗体变化规律
Comparison of three syphilis serodiagnosis algorithms and clinical 665 RPR-/TPPA+ patients were excluded from positive serodiagnosis due to a missed diagnosis rate of 24.2% (665/2,749). Man-Li Tong, et al. Analysis of three algorithms for syphilis serodiagnosis and implications for clinical management. Clinical Infectious Diseases 2014;58:1115-1124 . The traditional algorithm ?One lab ： ?98%EIA +/PRP+→ ?TP-PA+ ?CDC. Discordant results from reverse sequence syphilis screening--five laboratories ，United States ，2006-2010. MMWR. Morbidity and mortality weekly report ，2011，60(5): 133.
梅毒实验室诊断方法
梅毒实验室诊断 梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。 一、显微镜检查法 （一）暗视野显微镜检查 【基本原理】 梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片，以及淋巴结穿刺液涂片等，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 【仪器材料】 1．暗视野显微镜。 2．钝刀（刮勺）、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。 【标本采集】 1．皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。 2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检。 【操作步骤】 1．加镜油：在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。 2．聚光：将标本玻片臵载物台上，上升聚光器使镜油接触载玻片底面。 3．镜检：在镜下观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。 【结果判读】 梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长5～20μm，直径小于0.2μm，有6～12个螺旋，具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方式。暗视野显微镜下发现有上述特征的螺旋体为阳性结果。 【结果报告】 1．阳性：见到上述特征的梅毒螺旋体。 2．阴性：未见到上述特征的梅毒螺旋体。 【临床意义】 1．暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。 2．螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。 3．如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，应复查和血清学检查。 【注意事项】 1.取材时尽量避免出血，以免影响镜下观察。 2.取材后应立即臵暗视野显微镜下观察。 3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。 （二）镀银染色检查 【基本原理】 梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。 【仪器材料】 1．显微镜。 2．罗吉氏固定液、鞣酸媒染剂、Fontana氏银溶液。 【标本采集】
(推荐)梅毒实验室诊断标准
一、梅毒分类诊断标准 （一）一期梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现：具有符合相应特征的硬下疳、腹股沟淋巴结肿大。 3、实验室检查：硬下疳组织渗出液或淋巴结节穿刺液：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性和TPPA（或TPHA 或TP-ELISA）阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA或TP暗视野检查）或结果为阴性的为疑似病例。 （二）二期梅毒的诊断标准 1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史。 2、临床表现：病期2年内，多为无症状性、暗红色、符合相应特征的多形性皮损，尤其掌趾部位的暗红斑或鳞屑性丘疹，也可出现其它损害（关节、眼、内脏等）。 3、实验室检查：皮损如扁平湿疣、湿丘疹、粘膜斑等：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，
未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）的为疑似病例。
（三）三期梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史或一、二期梅毒史。 2、临床表现：病期2年以上。有如下特征中的任一项表现，包括皮肤黏膜损害如结节梅毒疹、树胶肿，上腭、鼻中隔等穿孔性损害；骨、眼损害，其它内脏损害；神经梅毒；心血管梅毒。 3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性；或脑脊液检查：WBC≥10×106/L，蛋白>500mg/L，并排除其它引起这些异常的原因。或三期梅毒组织病理变化。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）脑脊液检查或组织病理检查的为疑似病例。 （四）隐性梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现：无任何梅毒症状与特征。有明确的2年内梅毒接触史或梅毒发病史为早期，病期超过2年或无法判断病期者均为晚期。 3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性（无梅毒史者阳性，滴度
梅毒血清学试验四种方法的比较
梅毒血清学试验四种方法的比较 发表时间：2012-10-25T14:28:14.670Z 来源：《医药前沿》2012年第19期供稿作者：唐玉秀[导读] 比较4种常用的梅毒血清学试验方法，观察各种方法的优缺点，为实验室和临床提供参考。唐玉秀（广西全州县人民医院检验科广西全州541500） 【摘要】目的比较4种常用的梅毒血清学试验方法，观察各种方法的优缺点，为实验室和临床提供参考。方法梅毒酶联免疫吸咐试验（TP-ELISA）,梅毒血浆反应素环状卡片试验（RPR），胶体金快速检测试验（SYP），梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）。结果RPR 和SYP两种方法对梅毒检出率明显低于TP-ELISA和TPPA法。结论 SYP法，ELISA法是实验室初筛梅毒的最佳方法，如果要确诊梅毒要用TPPA法，疗效观察用RPR法。 【关键词】梅毒TP-ELISA RPR SYP TPPA 梅毒是由梅毒螺旋体（苍白螺旋体）感染引起的一种慢性全身性传播疾病。该病病程长，危害大，临床表现复杂，呈多样性，几乎可以累及全身各个器官，早期主要侵犯皮肤，黏膜；晚期可累及心血管及中枢神经系统等器管[1-3]。近年来，梅毒的发病率呈增加趋势，因此对梅毒的早期诊断和及时治疗成为关键问题，防止梅毒的蔓延是重中之重。实验室如何更好的选用哪种检测方法，避免漏诊，误诊，错诊而产生的医疗隐患等。目前用于梅毒血清学检验的方法较多，通过各种方法的比较，从而选择更合适的试验方法，对梅毒的诊断和治疗方面提供更好的科学依据。 1 选择的对象，试剂和仪器，检测的方法 1.1选择的对象选用2011年1月至2011年12月期间住院和门诊检测梅毒项目的患者。大约12400份标本，其中有125例确诊病人，大多数病例无临床症状。 1.2使用的试剂和仪器 （1）试剂：SYP使用艾康生物技术（杭州）有限公司提供的试剂盒。ELISA和RPR由上海科华生物有限公司提供的试剂盒。TPPA是使用日本富士公司试剂盒。 （2）仪器深圳雷杜RT-3100洗板机，上海新波SYM-810酶标仪，XK96-8型梅毒旋转振荡器。 1.3方法严格按照说明书进行操作，先用SYP，TP-ELISA法初筛，检出阳性和弱阳性标本后再用RPR滴渡法和TPPA检测法。 2 结果 SYP和ELISA法初筛结果表1 由SYP和ELISA法筛检阳性标本中，再进行RPR和TPPA检测。先做RPR原倍，阳性者，再做生理盐水稀释滴度1:2,1:4,1:8,1:16 阳性符合率见表2 从表2可得知TPPA为确诊试验，SYP和ELISA法为初筛试验，RPR为疗效观察试验。 3 讨论 由于梅毒感染后，抗心磷酯抗体出现晚于特异性螺旋体抗体，而且梅毒晚期又可能转阴，故RPR，SYP不适宜一期梅毒早期和三期梅毒诊断，对潜伏期和神经梅毒也不敏感。[4]而且SYP，RPR不易于自动化，结果的判断也存在主观性，已不是很适合梅毒的筛检法，但RPR滴度法可作为临床疗效观察的指标。 梅毒酶联免疫吸咐试验（TP-ELISA）是一种基于基因工程的特异性检测技术，灵敏度和特异性均较高，特异性抗体在梅毒的潜伏期即产生，对梅毒的早期辅助诊断较好。TP-ELISA法，操作简单，成本较低，适合医院大批量检测。但存在的缺点是该方法检测的是梅毒IgG 和IgM的混合抗体，IgG抗体治愈后相当长的时间仍然存较高的阳性率，甚至终身阳性，因此TP-ELISA阳性只说明正在感染或者曾经感染过，不能判断梅毒疾病活度与否，所以不能作为疗效监测手段[5]。当然，ELISA法本身也存在不足，这与检测的标本，操作人员的操作有关（如放置时间过长，显色未避光等）导致假阳性。 TPPA的灵敏度和特异性比前三种方法都高，是临床常用的梅毒确诊试验，也可以进行效价测定。但是成本高，操作复杂，耗时较长，不太适合大批量标本的检测。适合用于前三种方法测定阳性后的确诊试验。由于该法检测同样是梅毒IgM的IgG的混合抗体[6]，存在与TP-ELISA相类似的不足。 综上所述四种梅毒学血清方法比较，TP-ELISA法的特异性和灵敏度明显高于SYP，但不能取代SYP法，但两种方法可以互补，结合两种方法更能更好的检测梅毒。对于TP-ELISA和SYP法阳性者，应用TPPA法作确诊试验，RPR作滴度检测，才能更好的为临床提供诊治意见。 参考文献 [1]郭兑山，宁平，方德强,等，梅毒螺旋体抗体IgG ELISA和RPR试验的比较[J].中国输血杂志，2005，14（2）：88. [2]龚向东，叶顺章，张国成等，2000年全国性病流行病学分析[J].中国性病艾滋病防治，2001,7(3):131. [3]刘鹏，梅毒螺旋体的检测技术与应用现状[J].实用医药杂志，2005，22（10）：939-941 [4]黄永梅，ELISA,TPPA和TRUST,RPR梅毒检测方法的比较[J].国际医药卫生导报，2006，12（8）：88-89. [5]王培华，输血技术学[M].北京；北京人民出版社，1998，102-105. [6]何旭东，李龙，ELISA法检测梅毒特异性抗体[J].中国输血杂志，2001，14（增刊）：33.
梅毒诊断标准：WS 273
WS 273-2007梅毒诊断标准 1 范围 本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 梅毒 Syphilis 梅毒是苍白螺旋体（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可累及人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2 前带现象Prozone phenomenon 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称?为quot;前带现象"。 3缩略语 下列缩略语适用于本标准。 VDRL Venereal Disease Research Laboratory 性病研究实验室（玻片试验） USR Unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST Toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR Rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验） FTA-ABS Fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验）TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 4 诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史。 4.1.2 临床表现： 4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2～4周。一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，呈软骨样的硬度；无明显疼痛或触痛。多见于外生殖器部位。 4.1.2.2 腹股沟或患部近卫淋巴结肿大：可为单侧或双侧，无痛，相互孤立而不粘连，质硬，不化脓破溃，其表面皮肤无红、肿、热。 4.1.3 实验室检查： 4.1.3.1 暗视野显微镜检查：皮肤黏膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体（见附录A）。 4.1.3.2 非梅毒螺旋体抗原血清学试验：阳性。如感染不足2～3周，该试验可为阴性，应
梅毒实验室测试题
梅毒实验室测试题 一、单选题 1、梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法： A 革兰染色 B 美兰染色 C 镀银染色 D 伊红染色 2、非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法： A TPPA B ELISA C RPR D FTA-ABS 3、TPPA只能检测到： A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA等混合抗体 D IgM 4、梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本： A 皮肤溃疡组织液 B 羊水 C 血液 D 脑脊液 5、RPR检测不能采用下列标本：
A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 6、ELISA检测不能采用下列标本： A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 7、梅毒螺旋体病原学检测方法不包括： A 暗视野显微镜检查 B 镀银染色 C 培养基培养 D 核酸检测 8、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的转速是： A （100±2）转/分B（100±10）转/分 C （120±2）转/分 D （120±10）转/分 9、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的旋转直径是： A 25±2mm B 18±2mm C 20±2mm D 30±2mm 10、RPR/TRUST试验在水平旋转仪上旋转反应时间
A 5分钟 B 8分钟 C 10分钟 D 12分钟 11、TRUST试验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 12、前带现象主要出现在下列哪一种方法中： A ELISA B RPR C TPPA D FTA-ABS 13、RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 14、下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体： A RPR B ELISA C VDRL D TRUST 15、TPPA试验结果判读孔的血清稀释倍数是：
我院梅毒血清学检测结果解释
梅毒血清学检测结果解释 第一种结果：TRUST（十）、TP （一）或TPPA（一） 生物学假阳性。假阳性结果常见于部分自身免疫性疾病患者：类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、干燥综合征及风湿性心脏病等，还有麻风、吸毒（海洛因）成瘾者也会阳性、少数孕妇及老人也会出现阳性。有报道急性或慢性疾病如病毒性肝炎、风疹、传染性单核细胞增多症病患者TRUST滴度可出现假阳性反应。非梅毒病人，不报病。第二结果：TRUST（十）、TP （十）或TPPA（十） A,首诊病人，双阳，根据临床表现分别诊断为一期、二期、三期、隐性。必须报病。 B、复诊病人，TRUST低滴度，考虑血清固定，不用治疗，不用报病。 TRUST高滴度（高于原滴度四倍），考虑复发，再次治疗，不用报病。 C、复诊病人，有一期或二期梅毒临床表现，结合近期有不洁性接触史，要考虑重复感染。再次治疗，必须报病。 第三种结果：TRUST（一）、TP （十）或TPPA（十） A、早期梅毒病人。有硬下疳症状，有不洁性接触史，梅毒螺旋体暗视野检查阳性，梅毒可以诊断，必须报病。
B、复诊病人。梅毒病人TP、TPPA终生阳性，不用治疗，不报病。 C、初诊病人。无任何临床症状和体征，既往无梅毒诊疗史，仅TP、TPPA阳性，TRUST阴性者，该病例暂不报病，需要在1～3 个月后随访复查，如果TRUST转阳则要报病（如果随访病例仍然无任何症状和体征，报告为隐性梅毒确诊病例；如果出现临床表现，按临床表现特征对梅毒病例进行分期报告）。如果仍为阴性不报病。建议预防性、规范性治疗。 D、前带现象。首诊病人，非梅毒螺旋体特异性试验（TRUST）中，有时血清中存在高浓度的抗体时出现的弱阳性或阴性反应结果，而临床上又像二期梅毒，此时，将血清稀释后再进行试验，出现了阳性结果，该现象称之为"前带现象"。原因是此血清中抗体的量多于抗原，使抗原抗体量的比例不合适，抑制了阳性反应的出现。 第四种结果：TRUST（一）、TP （一）或TPPA（一） 不是梅毒病人，不报病。
梅毒的诊断标准是什么
梅毒的诊断标准是什么? 梅毒病程长，症状复杂，与很多非梅毒性疾病的表现有相似之处，因此必须结合病史、临床表现及实验室检查结果，进行综合分析，必要时还须进行家属调查，追踪观察和试验治疗，以便作出正确诊断。 （一）病史有无婚外性乱史（包括时间、性伴侣性病情况）。现病史及既往曾否患过硬下疳、二期、三期梅毒，或患过其它性传播疾病。配偶有无梅毒及性传播病史。有无早产、死产史、疑为先天梅毒应询问其父母的性病史及兄弟姊妹的健康状况。是否接受过抗梅毒治疗（药物及剂量）。 （二）体检应作系统全面检查，早期应注意检查皮肤、粘膜，特别是掌跖、阴部、肛门等处。晚期除注意皮肤粘膜外，还应注意心血管和神经系统。 （三）实验室检查 1．梅毒螺旋体检查适用于早期梅毒皮肤粘膜损害，如硬下疳、湿丘疹、扁平湿疣等。其中硬下疳尤为重要，因梅毒血清反应在硬下疳出现2～3周始呈阳性。 （1）暗视野检查：为最常应用的螺旋体检查方法，其原理为在装有暗视野集光器的显微镜下，视野中无直接光线，光只能从四周透入，当接物镜下无物体存在时，视野始终保持黑色，当有物体时，则从四周透人的光线射到物体上，物体将光线折射在目镜方向而发生光亮，从而观察到螺旋体的形态及运动特征。 （2）直接荧光抗体检查法：取患者皮损疮面血清，干燥后加兔抗人梅毒螺旋体荧光抗体，其原理为疮面血清中梅毒螺旋体与兔抗人梅毒螺旋体发生特异性结合，在荧光显微镜下观察，可见梅毒螺旋体呈亮绿色荧光，其它种类螺旋体不发光，此法特异性高，也可用于口腔梅毒损害的检查，但缺点为敏感性差。 （3）涂片染色检查法：可用镀银染色法，螺旋体染成棕黑色，背景为黄色。 2．梅毒血清学试验为诊断梅毒必需的检查方法，对潜伏梅毒，患者血清学的诊断尤为重要。梅毒螺旋体感染人体后，可产生两种抗体。非特异性的抗心脂质抗体，可用牛心脂质检测出，称非梅毒螺旋体抗原血清反应（梅毒螺旋体蛋白+人脂质抗原一抗心脂质抗原一抗心脂质抗体十心脂质抗原一非螺旋体抗原梅毒血清反应）；抗梅毒螺旋体抗体可用梅毒螺旋体（活的或死的梅毒螺旋体或其成分）检测出来，称梅毒螺旋体抗原血清反应（梅毒螺旋体特异抗原-一刺激机体一抗梅毒螺旋体抗体十梅毒螺旋体抗原一螺旋体抗原梅毒血
3种梅毒血清学诊断试验的临床应用价值
3种梅毒血清学诊断试验的临床应用价值 目的比较3种梅毒血清学检测方法在临床中的应用价值。方法采用梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA），梅毒甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST），梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验（TPPA）3种方法检测231例血清标本。结果TPPA、ELISA、TRUST敏感性分别为96.30%、98.52%、82.96%，特异性分别为96.88%、92.71%、82.29%。结论ELISA可作为输血和手术前检测的一种理想筛查方法，TRUST法适用于判定病情及疗效观察，有助于判断梅毒复发及再感染，TPPA法有极高的敏感性和特异性，可作为梅毒血清抗体检测的确证方法。 标签：梅毒；血清学诊断；梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验；甲苯胺红不加热血清反应素试验；梅毒螺旋体颗粒凝集试验 梅毒（syphilis）是苍白螺旋体（Treponema pallidum）（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性性传播疾病，临床表现呈多样性，可累及多组织和器官，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命，可长期处于潜伏状态，严重影响患者的身心健康，因此，早发现，早诊断和早治疗具有非常重要的临床意义[1]。实验室可以通过检测血液中的非特异性抗体和特异性抗体，判断是否感染梅毒螺旋体，血清学检测是实验室诊断梅毒的重要依据之一，所以选择好的检测方法有利于梅毒早期的诊断和及时治疗。本文采用TP-ELISA、TRUST 和TPPA 3种检测方法进行检测，对结果进行了比较，现报告如下。 1资料与方法 1.1一般资料本组资料选择2012年5月～2014年3月本院门诊及住院确诊的梅毒患者135例，男78例，女57例；梅毒潜伏期或既往感染者48例，现症者87例。另选择96例非梅毒患者，均为本院住院患者，其中自身免疫性疾病患者43例，妊娠孕妇27例，健康对照26例。 1.2试剂与主要仪器ELISA试剂由厦门新创科技公司提供，TRUST试剂由上海荣盛生物技术公司提供，TPPA试剂由日本富士株式会社提供，上述试剂均在有效期内使用。主要仪器为酶标仪、洗板机、离心机、微量振荡器、加样器和恒温水浴箱等。 1.3方法采用TP-ELISA、TRUST和T PPA对258例标本进行检测，3种方法均严格按照试剂盒说明书步骤操作。 1.4统计学方法数据采用SPSS16.0软件包进行统计分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。 2结果
四种梅毒抗体血清学检验方法的比较
四种梅毒抗体血清学检验方法的比较 【摘要】目的评价四种梅毒血清学检验方法的敏感度和特异性以及对梅毒诊断的临床应用和价值。方法分别采用ELISA、TRUST及胶体金法3种不同的血清学方法对255例皮肤科门诊患者标本进行检测，结果均以梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)进行确认，比较ELISA、TRUST和胶体金法对梅毒的诊断价值。结果在对87例阳性和168例阴性标本的检测中，TRUST法、胶体金法、ELISA诊断梅毒的敏感度分别为73??56%、95??4%、98??8%，特异度分别为97??0%、98??8%、100%。TRUST法与TPPA法检测结果差异有统计学意义(P<0??01)而ELISA、胶体金与TPPA法差异无统计学意义。结论ELISA法检测梅毒螺旋体具有较高的敏感度和特异性与TPPA法有较高的一致性，可用于临床大批量样本初筛，胶体金可用于急诊快速筛查，阳性标本用TPPA法来进行确认，以TRUST法及其滴度试验作为对疗效及愈合的判断指标。 【关键词】梅毒抗体; TPPA、TP??ELLSA、TRUST;胶体金法 作者单位：457000 河南省濮阳市人民检验科梅毒是一种由梅毒螺旋体(TP)引起的全身各器官病变的性传播疾病，
其传染力强、危害性大。据世界卫生组织(WTO)报告，成年人每年新发梅毒1200万，已成为严重的公共卫生问题［1］。梅毒的诊断需依据病史，临床表现及血清学诊断，由于梅毒早期的临床表现并不典型，有些患者对病史陈述缺乏真实性，故血清学检测是诊断梅毒的主要手段之一。目前，临床实验室常用的血清学诊断TP的有甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)，胶体金法，ELISA法、TPPA法等等不同的检测方法都有其特殊的临床应用价值，选择有效的方法对梅毒早期诊断、预防和控制梅毒的传播，避免因错误的检测结果引起不必要的医疗纠纷有着重要意义。 本文对255例患者的血清就我院检验科常用的TRUST 法胶体金法ELISA法以下方法学评价。 1 资料与方法 1??1 一般资料选择2011年1月至12月皮肤科患者255例，年龄19??70岁。男性125例，女性：89例。 1??2 试剂与仪器TRUST试剂、胶体试剂均为英科新创公司产品，ELISA试剂为上海科华生物工程股份有限公司产品，TPPA试剂由日本富士株式会社产品： 全自动酶免分析系统(RMP200)振漏器、离心机等。 1??3 检测方法所有受试者均空腹抽血5 ml，4000r/min 离心5 min后分离血清，血清标本不能及时检测则置于4℃冰箱，避免反复冻融，均采用TRUST法，ELISA法，胶体
特异性梅毒快速血清学试验
特异性梅毒快速血清学试验（TP）标准操作规程 1、目的 作为血清学确证实验，对梅毒诊断有非常重要的意义，梅毒是国家法定的传染病之一，必须保证该项检测的质量。 2、适用范围 适用于检验科实验室检测梅毒螺旋体IgG、IgM抗体血清学试验（TP）的质量控制。 3、职责 3.1检测人员必须执行本规程。 3.2监督员负责对本规程的执行情况进行检查监督。 3.3科室主任负责对违规情况进行查处，并进行跟踪纠正。 3.4检测人员做好个人防护非常重要，应遵循普遍性防护原则，戴手套谨慎操作。 4、原理 将梅毒的抗原成分固定在结果显示窗上，人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体在移动到该窗口时与固定抗原特异性结合，产生肉眼可见的红色条带，该试验具有较高的敏感性和特异性。方法简便、快捷。 5、仪器 定量架器 6、试剂与材料 6.1试剂盒组成：梅毒TP快速检测试纸条，100人份/包 6.2一次性吸头 7、操作程序 7.1标本的采集： 7.2确保冻融的待检血样充分混匀。 7.3检测程序：撕开试纸条上的盖膜，加质控品和血清或血浆样本50微升分别于试纸条的加样孔内，15分钟后观察结果，最迟不超过2小时。 8、结果的判定 阴性：质控窗口出现条带，样本窗口不出现条带。 阳性：质控窗口出现条带，样本窗口出现条带。 无效：质控窗口不出现条带。 9、注意事项 9.1试剂保存：应保存于2-30℃，在有效期内使用。 9.2判读结果时要保证足够的光线和充足的时间。 9.3确保实验的有效性。试剂在使用前需要进行预评价，检测过程中设置外部对照，观察质控窗条带是否出现，综合判断实验的有效性、确保检测质量。 10、支持性文件 10.1《中华人民共和国传染病防冶法》规定管理的传染病诊断标准
梅毒诊断标准
梅毒诊断标准 1 1 范围 本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。 本标准适用于全国各级各类医疗、疾病预防控制机构及其工作人员对梅毒的诊断和报 告。 2 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 梅毒syphilis 梅毒是苍白螺旋体( Treponema pallidum )（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可引起人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2 前带现象prozone phenomenon 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例 不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称为“前带现象”。 3 3 缩略语 下列缩略语适用于本标准。 VDRL venereal disease research laboratory 性病研究实验室（玻片试验） USR unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验）
FTA-ABS fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验） TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 ELISA enzyme-linked immuno-sorbent assay 酶联免疫吸附试验 4 4 诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为；或性伴有梅毒感染史。 4.1.2 临床表现： 4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2周～4周。一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭 圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，呈软骨样的硬度；无明显疼痛或触痛。多见于外生殖器部位。 4.1.2.2 腹股沟或患部近卫淋巴结肿大：可为单侧或双侧，无痛，相互孤立而不粘连，质硬，不化脓破溃，其表面皮肤无红、肿、热。 4.1.3 实验室检查： 4.1.3.1 暗视野显微镜检查：皮肤黏膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体(见附录A)。 4.1.3.2
梅毒实验室诊断标准
一、梅毒分类诊断标准 (一)一期梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现:具有符合相应特征的硬下疳、腹股沟淋巴结肿大。 3、实验室检查:硬下疳组织渗出液或淋巴结节穿刺液:TP 暗视野检查阳性;或RPR(或TRUST)阳性与TPPA(或TPHA 或TP-ELISA)阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未做TPPA(或TPHA或TP-ELISA或TP暗视野检查)或结果为阴性的为疑似病例。 (二)二期梅毒的诊断标准 1、病史:有性接触史或性伴感染史或输血史。 2、临床表现:病期2年内,多为无症状性、暗红色、符合相应特征的多形性皮损,尤其掌趾部位的暗红斑或鳞屑性丘疹,也可出现其它损害(关节、眼、内脏等)。 3、实验室检查:皮损如扁平湿疣、湿丘疹、粘膜斑等:TP 暗视野检查阳性;或RPR(或TRUST)阳性,同时TPPA(或TPHA或TP-ELISA)阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未
做TPPA(或TPHA或TP-ELISA)的为疑似病例。 (三)三期梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史或输血史或一、二期梅毒史。 2、临床表现:病期2年以上。有如下特征中的任一项表现,包括皮肤黏膜损害如结节梅毒疹、树胶肿,上腭、鼻中隔等穿孔性损害;骨、眼损害,其它内脏损害;神经梅毒;心血管梅毒。 3、实验室检查:RPR(或TRUST)阳性,同时TPPA(或TPHA 或TP-ELISA)阳性;或脑脊液检查:WBC≥10×106/L,蛋白>500mg/L,并排除其它引起这些异常的原因。或三期梅毒组织病理变化。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未做TPPA(或TPHA或TP-ELISA)脑脊液检查或组织病理检查的为疑似病例。 (四)隐性梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现:无任何梅毒症状与特征。有明确的2年内梅毒接触史或梅毒发病史为早期,病期超过2年或无法判断病期者均为晚期。 3、实验室检查:RPR(或TRUST)阳性(无梅毒史者阳性,
WS-273梅毒诊断标准
WS 273-2007 梅毒诊断标准 1 范围 本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 梅毒Syphilis 梅毒是苍白螺旋体（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可累及人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2 前带现象Prozone phenomenon 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称为“前带现象”。 3缩略语 下列缩略语适用于本标准。 VDRL Venereal Disease Research Laboratory 性病研究实验室（玻片试验） USR Unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST Toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR Rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验） FTA-ABS Fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验）TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 4 诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史。 4.1.2 临床表现： 4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2～4周。一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，
梅毒血清学实验分两类
梅毒血清学实验分两类： 1、非梅毒螺旋体抗原血清试验：用心磷脂做抗原，检查血清中的抗心磷脂脂抗体，即反应素，属于这一类的试验的VDRL试验，USR试验及RPR（快血清反应素）试验，可作定量测定，可用于观察疗效，判断是否复发及再感染， 2、梅毒螺旋体特异性抗原血清试验：用活的或死的梅毒螺旋体或其成份来测抗螺旋体抗体，属于这一类的试验有荧光螺旋体吸收试验FTA-ABS;梅毒螺旋体血凝试验TPHA：这类试验的特异性强，可用作证实试验，但不能用作观察疗效，判断复发及再感染。 当感染梅毒后，人体内会产生两类抗体，类是直接针对梅毒螺旋体的抗体，另一类则是针对类脂质的抗体。针对类脂质的抗体因不直接针对梅毒螺旋体，因此无特异性，除感染梅毒外，患另外一些疾病以及生理状况的改变，体内也可能产生低滴度的抗类脂质抗体。诊断梅毒时，所做的梅毒血清学检查即检测这两类抗体。前面提到的RPR试验，即为检测类脂质抗体的实验；而TPHA则为直接检测梅毒螺旋体的实验。因RPR是检测类脂质抗体，而不是直接检测抗梅毒螺旋体抗体的实验，因而无特异性，凡能导致产生类脂质抗体的疾病，均能使RPR阳性。除梅毒外，患上呼吸道感染、肺炎、活动性肺结核、风湿性心脏病、亚急性细菌性心内膜炎、传染性肝炎、肝硬化、慢性肾炎、钩端螺旋体病、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及海洛因成瘾等，都可导致RPR阳性。 梅毒以外其他原因造成的RPR阳性有一个特点，滴度一般较低，小于1：8。RPR实验容易出现假阳性，医生常同时做特异性较强的TPHA实验来证实梅毒诊断。值得一提的是，TPHA等直接针对梅毒螺旋体的特异性实验，在一般人中也有1%的假阳性。国内曾报道某医院内科住院患者中，TPHA阳性者竟有一半是假阳性。已知可造成TPHA阳性的疾病有：类风湿性关节炎、红斑狼疮、糖尿病、结肠癌、淋巴肉瘤、丙型肝炎、肝硬化、AIDS、麻风、生殖器疱疹、海洛因成瘾等。 除疾病外，某些生理状况的改变，如妊娠，也可导致RPR及TPHA阳性。特别值得一提的是，老年人梅毒血清学检查，假阳性率较一般人高，有报道可达2%。许多老年人患常见的内科疾病，也可导致梅毒化验阳性。不久前，国内某医院报道，他们收治的5例63~80岁老年内科疾病患者，分别患冠心病、脑血管疾病、糖尿病及白血病，住院期间，均出现过RPR和TPHA阳性。 梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要依据，但不是唯一依据。诊断梅毒，除依据化验结果外，更重要的依据是详细了解患者的生活史和既往病史，以及详细的体查。综合分析后慎重作出判断，才能避免梅毒化验结果假阳性造成的误诊。
梅毒检测方法的选择与梅毒血清学试验解读
梅毒检测方法的选择 1．国内梅毒血清学试验的传统程序是：先以非梅毒螺旋体抗原血清试验（如RPR、TRUST、VDRL等）进行初筛，再以梅毒螺旋体抗原血清试验（如TPPA、TPHA、FTA-ABS等）进行确认。美国、法国和比利时也采用类似的程序。该程序的优点是排除了大多数感染过梅毒但经过充分治疗的病人，从而使临床更易决定是否需要进行抗梅治疗。但该程序也存在明显的缺陷。一方面非梅毒螺旋体抗原血清试验易出现前带现象，使早期梅毒及合并感染HIV时高滴度的血清样品呈现假阴性反应；另一方面，对于一期梅毒早期、隐性梅毒，尤其是晚期梅毒，非梅毒螺旋体抗原血清试验缺乏足够的敏感性。因此，仅以RPR或TRUST进行初筛，会造成相当比例的漏检，这不符合初筛方法高敏感性的要求。近年来，美国已将梅毒螺旋体抗原血清试验（TPPA）引入到血站系统的初筛检测中，临床上仅以非梅毒螺旋体抗原血清试验作为筛查的状况也在逐渐改变。 2．将梅毒螺旋体抗原血清试验和非梅毒螺旋体抗原血清试验组合在一起（如RPR+TPHA或TPPA）作为初筛试验可以最大限度地检出各期梅毒病例（除一期梅毒的极早期），同时保证了敏感性和特异性，是最为理想的梅毒初筛方案。这是世界卫生组织（WHO）推荐的方案，英国等一些欧洲国家也已采用多年。其缺点是费时费力，实验室的工作量较大。
3．在德国和荷兰等国，则仅以梅毒螺旋体抗原血清试验作为初筛方法，这比仅以非梅毒螺旋体抗原血清试验进行初筛在敏感性上有了明显提高。虽然效果略差于上述的组合方案，但工作量也相应减小。 4．梅毒的确认必须采用梅毒螺旋体抗原血清试验，最常用的是TPPA或TPHA，也可采用ELISA。FTA-ABS仍被认为是梅毒血清学测定的“金标准”，但使用上有很大限制。多数实验室无法常规开展，因此一般只用于对有争议标本的检测。如果仅使用非梅毒螺旋体抗原血清试验进行初筛，则可以用任意一种梅毒螺旋体抗原血清试验做确认；如果在初筛时已使用了梅毒螺旋体抗原血清试验，则可以考虑选用另一方法学的梅毒螺旋体抗原血清试验进行确认（例如在初筛时使用了TPPA或TPHA，则可用ELISA进行确认，反之亦然）。 5．梅毒螺旋体抗原血清试验检测的是IgM和IgG的混合抗体，不能区分梅毒的现症感染和既往感染，也不能用做疗效监测。一般认为，IgM型抗体和反应素在感染梅毒螺旋体后出现，经正规、足量抗梅治疗后其滴度会逐渐下降直至消失。因此，以ELISA检测抗螺旋体
梅毒诊断标准(WS273—2007)修订版
WS 273--2007梅毒诊断标准 1 范围 本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 梅毒Syphilis 梅毒是苍白螺旋体（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可累及人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2 前带现象Prozone phenomenon 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称为“前带现象”。 3缩略语 下列缩略语适用于本标准。 VDRL Venereal Disease Research Laboratory 性病研究实验室（玻片试验） USR Unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST Toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR Rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验） FTA-ABS Fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验） TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 4 诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史。 4.1.2 临床表现： 4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2～4周。一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，呈软骨样的硬度；无明显疼痛或触痛。多见于外生殖器部位。 4.1.2.2 腹股沟或患部近卫淋巴结肿大：可为单侧或双侧，无痛，相互孤立而不粘连，质硬，不化脓破溃，其表面皮肤无红、肿、热。 4.1.3 实验室检查： 4.1.3.1 暗视野显微镜检查：皮肤黏膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体（见附录A）。 4.1.3.2 非梅毒螺旋体抗原血清学试验：阳性。如感染不足2～3周，该试验可为阴性，应于感染4周后复查（见附录A）。 4.1.3.3 梅毒螺旋体抗原血清学试验：阳性（见附录A）。 4.2 二期梅毒 4.2.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史，或有输血史（早期梅毒病人为供血者）。 4.2.2 临床表现： 可有一期梅毒史，病期在2年以内。 4.2.2.1 皮损呈多形性，包括斑疹、斑丘疹、丘疹、鳞屑性皮损、毛囊疹及脓疱疹等，常泛发对称。掌跖部易见暗红斑及脱屑性斑丘疹。外阴及肛周皮损多为湿丘疹及扁平湿疣。皮损
四种梅毒血清学试验检测方法的比较
中国皮肤性病学杂志２００６年４月第２０卷第４期ＣｈｉｎＪＤｅｒｍＶｅｎｅｒｅｏｌ，Ａｐｒ．２００６，Ｖ０１．２０，Ｎｏ．４ 职业分布上，学生、军人与其他人员差异具有非常显著性差异，这可能与学生、军人主要由未婚人员组成有关，显示学生、军人为低危人群。在学历分布上没有明显差异，这与艾滋病的流行情况有所不同，艾滋病阳性率与受教育程度有关，学历高者相对感染率低些∞Ｊ。 鉴于梅毒的流行状况，这就要求献血前应加大宣传力度，认真咨询，对高危人群应劝其放弃献血，并尽量从低危人群中采集血液，同时必须加强检验工作的规范化管理，严把血液质量关，选择特异性、灵敏度较好的检测试剂，输血时尽量输用保存了３天以上的血液。总之，为了确保血液质量，应该在献血前、检验、发血等环节进行全程控制，才能够为临床提供合格的血液，从而保证输血安全。 ［参考文献］ ［１］杨国庆，朱祥明，杨勇，等．无偿献血者梅毒抗体检测情况分析［Ｊ］．职业与健康，２００３，１９（１２）：１４２． ［２］徐明华，吴晓黎，宋哲．烟台市无偿献血梅毒血清学分析［Ｊ］．齐鲁医学检验，２００４，１５（６）：７０． ［３］濮德敏，侯萌，杨丹．同济医院门诊１９８７年～２００１年性传播疾病流行病学分析［Ｊ］．中华流行病学杂志，２００４，２５（３）：１８９． ［４］张雅莉，赵晓华，王瑁．陕西省西安地区血检阳性无偿献血者的结构分析［Ｊ］．中华流行病学杂志，２００２，４（４）：３０５． ［５］汪宁．我国艾滋病预防控制的形势与面临的挑战［Ｊ］．中华预防医学杂志，２００４，３８（５）：２９１． ［收稿日期］２００５—１０—２４［修回日期］２００５－１２－０４ 四种梅毒血清学试验检测方法的比较 ＴｈｅＣｏｍｐａｒａｔｉｖｅＳｔｕｄｙｆｏｒＳｙｐｈｉｌｉｓｗｉｔｈＦｏｕｒＳｅｒｕｍＴｅｓｔｓ 赵华１，李代渝２，雷丽明２ ＺＨＡＯＨｕａ，ＬＩＤａｉ‘ｙｕ，ＬＥＩＬｉ。ｍｉｎｇ ［摘要］目的比较四种梅毒血清学试验的检测效果。方法对２０例梅毒患者血清采用甲苯胺红不加热血清试验（ＴＲＵＳＴ）、梅毒螺旋体血凝试验（ＴＰＨＡ）、酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、胶体金免疫层析法（ＧＩＣＡ）四种不同的血清学方法进行对比检测。结果ＴＰＨＡ与ＧＩＣＡ比较，ＴＰＨＡ与ＥＬＩＳＡ比较差异均无显著性。ＴＰＨＡ，ＥＬＩＳＡ对梅毒检测结果呈正相关，ＥＬＩＳＡ的Ｓ／ＣＯ随ＴＰＨＡ滴度的增高而增高。结论用ＧＩＣＡ对梅毒进行筛选，ＥＬＩＳＡ双抗原夹心法对梅毒进行确诊，并用ＥＬＩＳＡ结合ＴＲＵＳＴ进行疗效判断，是较为理想的血清学实验组合。 ［关键词］梅毒；方法评价；血清学试验 ［中图分类号］Ｒ７５９．１［文献标识码］Ｂ［文章编号］１００１－７０８９（２００６）０４—０２２９—０１ 梅毒是常见性传播疾病之一，它可以引起全身性的损害及病变，同时还传播给下一代。近几年来，我国梅毒的患病率快速上升。因此，对梅毒的早期诊断及正确地评价治疗疗效，为临床提供准确、及时的依据显得尤为重要。血清学试验是目前国内外诊断梅毒的主要方法。笔者采用甲苯胺红不加热血清试验（ＴＲＵＳＴ）、梅毒螺旋体血凝试验（ＴＰＨＡ）、酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、胶体金免疫层析法（ＧＩＣＡ）对治疗前的梅毒患者进行检测，并对各项试验之间的相互关系和应用价值进行分析评价，现报告如下。 １材料和方法 １．１标本２０例血清标本均来自泸州医学院附属医院皮肤科确诊的梅毒患者。 １．２试剂与仪器ＴＲＵＳＴ试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供，ＴＰＨＡ试剂盒为１３本富士公司产品，ＥＬＩＳＡ试剂盒由厦门新创科技有限公司提供，ＧＩＣＡ由艾康生物技术杭州有限公 【作者单位］１泸州医学院附属医院检验科，四川泸州６４６０００；２泸州医学院附属医院输血科，四川泸州６４６０００ 【作者简介］赵华（１９５８一），女，四川省泸州人，副主任技师，主要从事免疫血液学研究。 司生产。酶标仪为郑州安图公司生产，洗板机为奥地利产品。１．３试验方法ＴＲＵＳＴ，ＴＰＨＡ，ＥＬＩＳＡ，ＧＩＣＡ的检测均严格按使用说明书操作。 １．４统计学处理计数资料比较用ｘ２检验，Ｓ／ＣＯ值与ＴＰＨＡ的滴度比较用相关系数检验。 ２结果 检测结果见表１，２。 表１三种方法梅毒检测结果比较 ＴＰＨＡ与ＧＩＣＡ比较ｘ２＝Ｏ，ＴＰＨＡ与ＥＬＩＳＡ比较ｘ２＝１．３３，差异均无显著性。 ３讨论 人体感染梅毒螺旋体后，通过感应、反应、效应三个阶段才会出现抗体，梅毒血清学试验出现阳性。７删ＰＡ检测特异性抗体，常用于筛检阳性标本的确认，具有特异性强、敏感性高，血清、血浆皆可用于检测的特点，但反应时间较长，最少需要１．５ｈ，不适于大批量的筛选试验，而且价格较昂贵。ＧＩＣＡ是新近