亚非草蛉质量控制技术规程
广东省农药协会
发布
亚非草蛉质量控制技术规程
Technical specifications of quality control for Chrysopa boninensis
(征求意见稿）
广东省农药协会团体标准
T/GDP
T/GDP XXX-2020
ICS 65.020.01B 16
2020年xx 月xx 日发布2020年xx 月xx 日实施
前言
本标准按照GB/T1.1—2020的规定编制。
本标准由广东省农药协会提出。
本标准起草单位：广州禾立田生物科技有限公司、华南农业大学农学院、韶关禾立田农场有限公司、韶关市曲江区田园农业科技发展有限公司、生物防治教育部工程研究中心、广州市会兴农业科技有限公司、从化海关综合服务技术中心。
本标准的主要起草人为：邵振芳、王泽清、王兴民、颜素娟、陈晓胜、邱宝利、吴建辉、姚松林、梁远成、陈伟。
本标准为首次发布。
亚非草蛉质量控制技术规程
1范围
本标准规定了亚非草蛉（Chrysopa boninensis）的质量控制要求、试验方法、检验规则。
本标准适用于以新菠萝灰粉蚧（Dysmicoccu neobrevipes）幼虫为中间寄主繁殖的亚非草蛉幼虫和以5%蜂蜜水饲养的亚非草蛉成虫所产的卵生产中的检测和质量控制。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T1605—2001商品农药采样方法
GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法
GB/T8170—2008数值修约规则与极限数值的表示和判定
3术语和定义
3.1桃蚜Myzus persicae(Sulzer)
桃蚜，属半翅目，蚜科。桃蚜是广食性害虫，寄主植物约有74科285种。桃蚜营转主寄生生活周期，其中冬寄主(原生寄主)植物主要有梨、桃、李、梅、樱桃等蔷薇科果树等；夏寄主(次生寄主)作物主要有白菜、甘蓝、萝卜、芥菜、芸苔、芜菁、甜椒、辣椒、菠菜等多种作物。桃蚜是甜椒栽培的主要害虫，又是多种植物病毒的主要传播媒介。形态特征：成虫分有翅和无翅两种。有翅蚜体长1.6-2.1毫米，卵圆形，体色差异很大，有绿、淡黄绿、紫褐、橘红等色，头胸部黑色，额瘤显著。体表粗糙有粒状结构，但背中域平滑，尾片圆锥形，近端部2\3处收缩，上生曲毛树根。无翅蚜虫体长1.4-2毫米，绿色或红褐色，触角鞭状，足基部淡褐色，其余部分黑色，尾片粗大，绿色。腹部背面有黑斑及翠绿色
中带和侧横带，腹管圆筒形。卵体较小，长约1毫米，椭圆形，初为绿色后变黑色。若虫近似无翅胎生雌蚜，淡绿或淡红色。
3.2亚非草蛉Chrysopa boninensis
亚非草蛉属脉翅目，草蛉科。成虫多以花粉、蜜露为食；幼虫取食各种蚜虫、红蜘蛛、介壳虫、蓟马、粉虱、木虱、潜叶蛾的卵，蛹和成虫，凤蝶的卵及低龄幼虫等。
3.3柑橘红蜘蛛Panonychus citri McGregor
柑橘红蜘蛛，属蜱螨目，叶螨科。分布在中国各柑橘产区，除为害柑橘外，还可为害黄皮、无花果、苦楝、桂花、蔷薇、苎麻、沙梨、蒲桃、椰子、番木瓜、木菠萝、油梨、杨桃、人心果、桃、柿、苹果、葡萄、核桃、樱桃、枣等。以成螨、幼螨、若螨群集叶片、嫩梢、果皮上吸汁危害，引致落叶、落果，尤以叶片受害为重，被害叶面密生灰白色针头大小点，甚者全叶灰白，失去光泽，终致脱落，严重影响树势和产量。形态特征：雌成螨约长0.39毫米，宽约0.26毫米，近椭圆形，紫红色，背面有13对瘤状小突起，每一突起上长有1根白色长毛，足4对。雄成螨鲜红色，与雌成螨相比，体略小(长约0.34毫米，宽约0.16毫米)，腹部末端部分较尖，足较长。扁球形，直径约为0.13毫米，鲜红色，有光泽，后渐褪色。顶部有一垂直的长柄，柄端有10-12根向四周辐射的细丝，可附着于叶片上。体长0.2毫米，色较淡，有足3对。若螨与成螨极相似，但身体较小，一龄若螨体长0.2-0.25毫米，二龄若螨体长0.25-0.3毫米，均有4对足。
4要求
4.1外观
应与亚非草蛉的形态学特征一致。
4.2质量控制指标
表1亚非草蛉质量控制指标
项目指标
a含量≧标签上描述的亚非草蛉（活幼虫/卵）数量
b杂质除必要的食物外，无其他可观察到的节肢动物
2天内1龄幼虫发育成2龄幼虫的比例>75%
c发育能力
2天内2龄幼虫发育成3龄幼虫的比例≧75%
d捕食能力
二龄幼虫4天内捕食柑橘红蜘蛛的数量≧150
e卵孵化率（3天）≧70%
5试验方法
5.1抽样
按照GB/T1605-2001中规定的产品采样方法确定取样的包装件，记录批次、羽化日期、抽样日期，将样品放置温度（25±1℃）、RH（70±5℃）%、光周期（L:D=16：8）的条件下。
5.2鉴别试验
常规检测主要根据亚非草蛉的形态学特征进行生物鉴别。当对鉴别结果有争议或者需要进行法律仲裁检验时，应到具有生物鉴定资质的单位，将待检生物与模式种进行对比，出具鉴定报告，作为仲裁依据。
5.3含量、杂质
5.3.1方法提要
用计数法测定每个取样的包装件内的亚非草蛉（活幼虫/卵）的数量。
5.3.2仪器
解剖镜/放大镜（×10）
刷子
漏斗
养虫瓶
分析天平5.3.3试验步骤
幼虫预处理：计数前将样本置于10℃下1小时，减少虫体活动量。
数量、杂质测定：取部分亚非草蛉，放置于8×11cm 白色、光滑、平整薄纸片上，立即计数。计数完毕后，用漏斗将其活虫转移到养虫瓶内。持续上述操作，直到所有的抽样样品完成计数，记录活虫数和死虫数。取活虫数作为数量的评价指标。如果数量超过500，可考虑测量重量或体积，估算虫体数量。计数的同时，去除所有包装载体，观察并计量其他节肢动物。实验条件：温度（25±1℃）、RH （70±5℃）%、光周期（L:D=16：8）。
卵数量：将包装物打开，使卵完全暴露于视野中，取颜色正常，形状完整的卵计数。
5.3.3计算方法
含量，按式(a)计算：
n
x ∑
=
.............................................(a)
式中：X 为最小单元包装的亚非草蛉（活幼虫/卵）的平均值，单位为头；Σ为所抽取的亚非草蛉（活幼虫/卵）计数总和，单位为头；n 为所抽取的样本单元数，单位为个。5.4捕食能力测定5.4.1方法提要
将亚非草蛉二龄幼虫和柑橘红蜘蛛置于培养皿内，记录柑橘红蜘蛛数量，计算捕食量。5.4.2材料
柑橘叶片
亚非草蛉二龄幼虫柑橘红蜘蛛5.4.3仪器
人工气候箱
培养皿（d=13.5cm ，h=2cm ）毛笔
5.4.4试验步骤
使用能密封的培养皿，盖上开一孔，用纱网粘住以利于通气，培养皿底部浇注5mm厚度的1.5%琼脂，在琼脂缓慢冷凝前，取一新鲜叶片平展于琼脂表面，然后用毛笔转移100头柑橘红蜘蛛。检测时，随机取一头刚蜕皮发育到2龄的草龄幼虫，置于培养皿中，检测的样本数不得少于30头，24小时后观察并记录培养皿内剩余的柑橘红蜘蛛数量。每天更换新鲜食料，持续计算4天内的单头亚非草蛉捕食量。实验条件：温度（25±1℃）、RH（70±5℃）%、光周期（L:D=16：8）。
5.5卵孵化率的测定
5.5.1方法提要
将卵放置于适宜环境中，自然孵化。
5.5.2材料
亚非草蛉卵
5.5.3仪器
人工气候箱
培养皿（d=9cm，h=1.5cm），底部带有湿润滤纸。
瓦楞纸
5.5.4试验步骤
将收集到的卵置于温度（25±1℃）、RH（70±5℃）%、光周期（L:D=16：8）中，卵分开放置，每日观察，记录孵化出的幼虫数。3天后计算卵孵化率。
5.5.5孵化率计算方法
孵化率按照式（2）计算
式中：ER为孵化率，单位为百分率（%）；
N1为孵化数，单位为个；
N2为卵粒数，单位为个。
5.6发育能力的测定
5.6.1材料
小白菜
亚非草蛉初孵幼虫桃蚜5.6.2仪器
人工气候箱
培养皿（d=9cm ，h=1.5cm ），底部带有湿润滤纸。毛笔5.6.3试验步骤
将亚非草蛉初孵幼虫置于培养皿中，每天在培养皿内放入带有桃蚜的新鲜叶片，补充足量的食料，2天后统计1龄幼虫的数量。样本的检测数量不得小于200头。实验条件：温度（25±1℃）、RH （70±5℃）%、光周期（L:D=16：8）。
将亚非草蛉二龄幼虫置于培养皿中，每天在培养皿内放入带有桃蚜的新鲜叶片，补充足量的食料，2天后统计2龄幼虫的数量。样本的检测数量不得小于200头。实验条件：温度（25±1℃）、RH （70±5℃）%、光周期（L:D=16：8）。5.6.4发育能力的计算方法
发育能力按照式(4)计算
1006
5
6?-=
N N N FR ..............................................（4）式中：FR 为2天内1龄幼虫发育成2龄幼虫的比例/2天内2龄幼虫发育成3龄幼虫的比例，单位为百分率（%）；
N 6为亚非草蛉初孵幼虫数/二龄幼虫数，单位为头；
N 5为2天内未发育的1龄幼虫数/2天内未发育的2龄幼虫数，单位为头。6产品的检验与验收
6.1每个批次的产品在规模化繁殖的过程中，均应该按照控制指标进行检测。
6.2繁育过程中质量控制指标合格，出厂产品系本品系，健康状况良好，无畸形，繁育质量控制记录齐全即为合格，签发产品合格证。6.3以羽化日期相同的产品为一批。
附录A
（资料性附录）
亚非草蛉的生物学特性
A.1发育历期
亚非草蛉在27℃，相对湿度70%条件下，卵期3-4天，幼虫期8-9天，蛹期7-8天.在温度26.40.9℃的条件下，卵期3.1天，幼虫期为8.9天，其中一龄幼虫3.2天，二龄2.4天，三龄3.3天，蛹期9.2天。
A.2成虫
在20-22时羽化，傍晚后19-21时活动频繁，常数头至数十头在作物间飞舞。趋光性弱，羽化率为90.5%。羽化后需补充营养方能性成熟，交配在夜间进行。交配历时约15分钟，雌虫一次交配终生产受精卵。产卵以午间至凌晨为多。
A.3卵
卵均单粒散产，对产卵场所有一定的选择性，多分布在叶背，树冠中部及东方。卵以遮阴、隐蔽处最多，这对幼虫孵化后，长时间停留在卵壳上，抵御外界侵害和暴晒，免致因突然恶劣天气的侵袭，而造成天折是一个很好的适应，从而保证了幼虫安全成长。野外卵的孵化率为86.3%，室内各代的孵化率在92-95%之间。
A.4幼虫
幼虫全天都有孵化，0-6时占38.9%，6-12时占32.1%，12-18时占12.8%，18-24时占16.2%.刚孵化的幼虫，一般经2小时后沿卵柄爬下开始觅食。但孵化时如遇低温，在卵壳停留时间则延长。风吹，振动等干扰会提早爬下卵柄。幼虫白天活动，行动活泼，扩散能力很强，饥饿时尤甚。据观察，三龄幼虫平均每小时爬行10.2米，最多可达35.8米。幼虫有互相残食的现象，多见于1龄期，食料不足时尤甚。
A.5蛹
老熟幼虫停食后即行作茧，进入预蛹期，3-8天后化蛹。结茧时刻多集中在18-19时。在橙园，茧多分布在叶背和树冠的中部及东方。
附录B
（资料性附录）
亚非草蛉的形态特征
成虫：小型种类，体长10毫米以下，前翅长15毫米以下，触角比前翅长，头顶两侧的颊斑和唇基斑粗大而上下相连，胸和腹背有黄白色纵带；翅脉全部绿色.幼虫老熟幼虫体长3.5-6毫米，头部无黑色斑纹。后胸及腹部各节具有浓黄黑色的较大毛瘤。