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临床生物化学检验复习指导
第一章绪论
第一节重点解析
临床生物化学检验是一门由分析化学、生物化学、电子计算机技术和临床医学等学科相互渗透结合逐渐形成的理论与实践性较强的边缘学科。是高等医学检验专业的-门主干学科。一、临床生物化学检验的性质与任务
临床生物化学检验既是一门研究人体健康和疾病时生理生化过程的医学基础理论学科, 乂是一门应用各种技术和方法分析机体健康和疾病时体液或组织样品中各种化学成分的医学应用技术学科，它在医学理论和医学实践中均具有相当重要的地位。
它的作用主要有两方面,一方面阐明有关疾病的生物化学基础和疾病发生发展过程中的牛物化学变化；在阐明疾病牛化诊断的原理方面，偏重于论述疾病的牛化机制，故乂称为临床生物化学。另一方血开发应用临床生化检验的方法和技术，対检验结果的数据及其临床价值作出评价，用以帮助疾病的诊断以及采取适亢的治疗，偏重于临床牛化实验室的应用，国内称为临床生化检验学。
它的主要任务是研究人体器官、纽.织、体液的化学组成和进行着的生化过程，以及疾病、药物对这些过程的影响，为疾病诊断、病情监测、药物疗效、预后判断和疾病预防等各个方而提供信息和理论依据。
二、临床生物化学检验的研究进展
近20年来，在疾病临床生物化学方而的研究进展主要表现在缺血性冠状动脉疾病、肝胆系统疾病、肾脏疾患、呼吸系统疾病、脂代谢疾病、神经与精神疾病、糖尿病及内分泌疾病以及骨代谢标志物、电解质与酸碱平衡、治疗药物监测、自由皋与N0测定等方回。临床牛化检验方法学的进展，主要表现在牛化分离与分析技术、牛化口动化分析与嗨法分析、临床生化诊断试剂盒、方法学的高新技术含塑、全面质量管理、分子生物学技术等方面。
三、临床牛物化学检验与临床医学的关系
运用现代科学技术的原理和方法，探讨疾病的发生发展规律，并应用于临床诊断和疾病防治，是临床医学和检验医学的共同要求和迫切愿望。
1?与探讨疾病发生机制的关系临床生物化学检验从分子水平研究人体内在疾病状态下的生化变化和代谢异常，有助于从本质上阐明疾病的发病机制，研究阐明了健康和疾病的某些特征，同时，健廉和疾病的多样性的研究又开拓了临床牛化及检验学研究的新领域。反过來, 人类对健康和疾病的认识乂将从孤立地研究生化过程变化的方式改变为全而系统地研究细胞内复杂的网络式牛化变化的模式，这对临床牛物化学检验的研究来说是一种突破性进展。
2.与临床疾病诊断和治疗的关系目前，临床开展的生化检验项目已达300余种，而且，许多检验项口已进入分了水平，对临床疾病诊断和治疗的价值越来越高，主要表现为：①疾病诊断和早期诊断；②判断疾病的严重程度和预后。③治疗效果监测。④治疗药物检测。⑤探讨疾病的机理。
随着临床生化检验技术的发展，用于诊断疾病、判断病情、疗效观察等生化项目和先进方法不断涌现，使得临床牛物化学检验的领域更加多姿多彩。
第二节习题练习
一、A型题
[A1型题】
1.目询，我国大医院多己开展了新的缺血性冠状动脉疾病诊断组合是
A.肌红蛋白、肌钙蛋白T或I、CK-MB质量
B.LDH 和AST 及CK
B.LDII-1 和AST 及CK-MB
D.LDH-1和AST及CK-MB及其亚型
E.LDH-1 和CK 及CK-MB
2.在肝炎辅助诊断中应用故广泛的酶是
A.AST
B.ALT
C.ALP
D.GGT
E.CHE
3.在胆红素临床研究中还观察到
A.胆红素在急性肝炎和严重肝病时都升高
B.胆红素在急性肝炎和严重肝病时都降低
C.胆红素在急性肝炎恢复期升高，严重肝病时降低
D.胆红素在急性肝炎恢复期降低，严重肝病吋升高
E.胆红素在急性肝炎恢复期和严重肝病时都升高
4.在原发性肝癌诊断标志物研究方而肝纤维化的指标己进入临床试验的是
A.AFP及其异质体
B.异常凝血酶原
C.GGT同工酶
D.丙酮酸激酶同工臨、岩藻糖昏酶（AFU）
E.Ill型胶原与II型胶原
5.对肾小球损伤标志物的研究已推广应川的是
A.肌酊，尿酶
B.尿素氮及低分子量蛋白
C.尿酶及尿微量蛋白
D.尿微量蛋白、转铁蛋白
E.尿酶及低分子量蛋白
6.我国研究的TC测定参考方法具有独创性，它是
A.酶法
B.免疫测定
C.HPLC 法
D.电泳法
E.ALBK 法
[A2型题】
7.不再是呼吸系统疾病車要监测指标是
A.血浆HC0-3
B.pH、PC02、P02
C.血清抗胰蛋白酶
I）. IgG、IgM
E. IgA、IgE
8.下列标志物不可以提供骨吸收和骨形成的动态变化指数是
A.骨碱性磷酸酶
B.1型前胶原C端肽和1型胶原交联N端肽
C.尿胶原砒I症交联
D.脱氧砒唳交联
E.钙、磷、镁及甲状旁腺激素
二、B型题
【B1型题】
（旷13共用备选答案）
A.糖基化血红蛋白和糖化血清蛋白
B.B-超基丁酸、乙酰乙酸
C.血糖、胰岛索及C肽
D.胰岛素细胞抗体、谷氨酸脱MM卿抗体和评估胰岛素抵抗
E.乳酸
9.糖尿病诊断
10.糖尿病酮症的监测
11.糖尿病并发症
12.糖尿病分型诊断
13.糖丿求病的治疗检测
【B2型题】
（14~19共用备选答案）
A.光谱技术
B.HPLC技术
C.半口动、全口动电泳技术
D.生化自动化分析
E.代谢物酶法测定
F.离子选择电极
G.干化学分析
H.生物芯片技术、
I.生物传感技术
14.在微量代谢物、药物检测方血
15.特别被急诊室广泛采用是
16.适合临床分离蛋白质、同1】酶的是
17.适合临床大规模常规检测的是
18.温和、快速、无污染的检测方法是
19.将其高科技、复杂的实验构思全部完成在生产阶段
三、C型题
（20~23共用备选答案）
A.酶试剂法测定
B.离子选择电极法测定
C.两者均可应用
D.两者均不可应川
20.血淸钠、钾测定
21.血清氯、钙测定
22.血清总蛋白、清蛋白测定
23.血清ALT、AST测定
四、X型题
24.临床生物化学检验是
A.理论与实践性较强的一门边缘学科
B.研究人体生理的基础学科
C.研究人体健廉和疾病时生理生化过程的一门医学基础理论学科
D.分析机体健康时体液或组织样品中各种化学成分的一门保学技术学科
E.分析疾病时体液或组织样吊中各种化学成分的一门医学技术学科
25 ?临床牛物化学的主要作用是
A?阐明有关疾病的生物化学皐础
B.阐明疾病发牛发展过稈屮的牛物化学变化
C.阐明疾病牛化诊断的原理
D.论述疾病的生化机制
E.促进临床医学的发展
26.临床牛化检验学的主要作用是
A.开发应用临床生化检验的方法和技术
B.对检验结果的数据及其临床价值作出评价
C.用以帮助疾病的诊断以及采取适宜的治疗
I).偏重于临床主化实验室的应用
E.促进临床生物化学诊断试剂的发展
27.临床牛物化学检验对临床疾病诊断和治疗的价值主要表现为
A.疾病诊断和早?期诊断
B.判断疾病的严虫程度和预后
C.治疗药物和治疗效果监测
D.探讨疾病的机理
E. E.促进新药品的开发应用
28.近10年来用分子牛物学技术对神经系统疾病的研究，并取得进展的有
A.如苯丙酮尿症、舞蹈病、老年性痴呆
B.线粒体肌病和脑肌病
C.遗传性共济失调、神经肌肉疾病
I).神经纤维瘤、癫痫
E. X连锁智力低下及肝窦状核变性
第三节参考答案
一、A型题
【A1型题】
1.A
2. B
3.C
4. E
5. D
6.C
[A2型题】
7.A & E
二、B型题
【B1型题】
9.C 10. B 11. E 12. D 13. A
【B2型题】
14. B 15.G 16.C 17. D 1&E 19. H
三、C型题
20. C 21. C 22. D 23. A
四、X型题
24.ACDE 25. ABCDE 26. ABCDE 27. ABCD 28. ABCDE
第二章临床生物化学实验技术第一节重点解析一、光谱检验技术
利用各种化学物质都具有发射、吸收或散射光谱谱系的特征，以此来确定物质性质、结构或含量。在临床生物化学检验中，光谱分析是一类十分重要的技术，应用极为广泛。它既可以研究物质的结构分析，也可以对特定物质进行定性或定量的分析根据物质对光谱响应特征的不同，可把光谱检验技术分为发射光谱分析技术、吸收光谱分析技术和散射光谱分析技术三大类。
可见-紫外光分光光度法利川朗们一比尔定律作为化学反应定量的基础，应重点掌握该定律的应用、使用条件和各个变量间的关系，从而根据已有的结果计算需耍的变量。
吸光系数是表示物质特性的常数，是物质鉴定的基础，根据物质的吸光系数可以进行定量测定，但应注意英使用的条件。在化学反应中尽量选择吸光系数大的物质，可以提高测定的灵敏度。
在分光光度法的建立中，应掌握波长的选择、双波长测定的原理和抗T扰的原理。在可能的悄况下应选择灵敏度高、选择性好的显色剂，同时需耍应用适当的校准方式和计算方程式。
在定量分析中，大鼠使用分光光度计。该类仪器属于比较精密的分析计器，使用要求比较严格。其屮单色光的纯度和波长的准确性直接影响到测定结果的准确性和粘密度。在使川前和使用过程中应进行光源的检查和波长的校正。
原子吸收分光光度法是基于光源辐射出具有待测元素特征谱线的光，通过原子化器，被其中待测元索的基态原子所吸收，根据吸收而导致辐射特征谱线光被减弱的程度来测定待测元素的含量。少其它分析方法比较，它具有灵敏、准确、分析速度快、干扰少、无需化学反应和测量元素含量范围较广等优点。由于其检测灵敏度较高，操作环节比较多，而.1!每种元素需要一种的光源灯，因此在临床实验室一-般较少应用于常规分析。
荧光分析法是利用某些物质吸收了一定波长的光能后，分子从基态跃迁到激发态，此类电子经与同类分子或它种分子相互碰撞，消耗相当，而下降至第一电子激发态的最低振动能阶。最低能阶下降到基态，同时发射出比原來所吸收的频率较低波长较长的光能，称为荧光。利川元素的原子所发射的共振荧光波长的差异，可确定元素的种类或物质分子屮某种结构，从荧光的强弱可以测定物质的含量。荧光分析定暈是基于荧光物质的稀溶液，在一定的温度下，当激发光的波长、强度、荧光测定波长以及液层厚度一定时，所测得的荧光强度F 与该溶液中荧光物质的浓度C成正比，F二kC。采用标准曲线法或直接比较法，对荧光物质进行定量。荧光分析法灵敏度高，可以进行微量分析和定量测定较微量的物质。但该方法影响因素较多，因此，在进行荧光分析时应严格控制各种条件才能获得灵敏、准确的分析结果。
二、电化学分析技术
电化学传感器在临床牛化分析的应用中占据着主导的地位。其原理是将电极浸入待测溶液中组成原电池，其中--支电极的电极电位与待测离子的活度有关，其关系服从Nernst方程，此电极称为指示电极；另一?支电极是电位已知并EL恒定的所谓参比电极，目前最常用的参考电极有廿汞电极和银-氯化银电极。
离子选择电极法根据标本情况又可分为直接法和间接法。直接法是用离子选择电极真接测定牛物体液中的被测物质；间接法则是将标本进行预稀禅，然后再进行测定，使得标本的使用量更少。间接法由于将标木进行了预稀释，可以控制其离子强度，也就是控制其活度系数，但间接法由于标本被稀释，测定结杲比直接法低。
ISE具选择性好、灵敏度高，、线性范围宽、溶血、脂血及黄疸不影响测定，对有色、浑浊溶液都可进行分析、设备简单，分析速度快，易于自动化，标本用量少等优点，在临床上应用广泛。
三、电泳技术
电泳技术应用广泛，在生物化学实验技术中占有重要地位，主要川于蛋白质、核酸等的分离、鉴定和定量。目前已经发展到自动化的电泳系统，整个电泳过程包括点样、电泳、脱色、打描定彊都实现了自动化操作。同时用半干胶技术取代液体缓冲液，使得电泳操作更规范简便，电泳结果重现性更好。
应掌握电泳的原理、影响因索、各种电泳的特点和使用范围。
四、常川免疫分析技术
随着单克隆抗体的开发和使用、各种标记技术的发展使得免疫学迓入了一个新的时期。由于免疫分析技术具有特异性好、快速、灵敏度扁等，使得荧光分析法其应用范围十分广泛, 在临床生物化学中可以对内分泌激素、蛋白质、多肽、核酸、神经递质、受体、肿瘤标志物、血药浓度等血清微量物质进行定量测定。
免疫比浊分析分为散射免疫比浊分析和透射免疫比浊分析，应掌握它们的原理、适用条件、彩响因索和临床应丿IJ。
梅免疫分析是将悔催化的放大作用与抗原、抗体的免疫反应相结合的一种标记免疫分析技术。与放射免疫分析相比其最人优势在于避免了放射性核素对人体的损害、核素标记的抗原或抗体批间差异大，酶标记物具有明显较长的有效期和不需特殊设备等。近年来在EIA 中乂引进了放大系统，派牛出荧光悔免疫分析、增强化学发光卿免疫分析等，使检测的灵敏度大大提高，应用范围不断扩大。应掌握均相EIA和非均相ETA的原理，各种方法的优缺点和应注意的问题。
化学发光免疫分析近十年來得到了很大发展，与微粒子发光免疫分析生物发光免疫分析、增强化学发光分析和电化学发光等以其灵敏度高、检测速度快、操作简便、所用试剂对人体无危害的优点，成为非放射性免疫分析技术中最具有发展前途的方法之一。主要掌握它们的原理和在临床中的应用。
时间分辨荧光免疫分析以辆系元素为标记物，是一种全新的非放射性标记免疫技术和超灵敏度的检测技术。其主要特点是以稀土元素馆（Eu3+）标记抗原或抗体为示踪剂。利用增强液的荧光放人作川和时间分辨荧光测量法排除样品或试剂中非特异性荧光物质的干扰，最大限度地提高了荧光信号测量的特异性和检测方法的灵皱度、操作方法简便、标记物制备容易、稳定性好、不污染坏境和易于口动化等优点。
五、其他检验技术
离心机是利用物质的高速旋转时产生强人的离心力，使置于该旋转体中的悬浮颗粒发生沉降或漂浮，从而使某些颗粒达到浓缩或与其他颗粒分离的目的。离心机的种类繁多，用途各异。在使用中应掌握离心力的换算，沉降系数的意义和表示方法，离心机使用中应注意的问题。
高效液相层析法是用特制微粒（＜10um）充填的层析柱作为固定相，通过高压使液体流动相快速通过层析柱而达到快速有效分离液相中各种物质的层析技术。它具有分离效果好、分析速度快，检测灵敏度高等特点。在医药卫生利生物化学中得到广泛的应用，蛋白质、糖类、核酸、氨基酸、牛物碱、类固醇和类脂等大分子以及高分子聚合物度能用HPLC测定。
放射免疫分析是利用了现代放射性测量技术的高度敏感性和精确性，灵皱度高，是一种超微量的分析技术。同时，山于其分析原理是基于抗原与抗体间高度专一性的结合反应，因而它具有很高的特异也能从组分十分复杂的样品中准确地测出某一特定组分的含量而不受其它组分的干扰。英分析原理是：用放射性核素标记配体或结合剂，在配体与结合剂之间竞争性或非竞争性的可逆性结合反应，形成配体一结合剂复合物，其反应遵循质量作川定律。放射免疫分析根据结合反应原理及方法学设计原理的不同有许多类型。主要用于激索、微量蛋白等的定量测定，在临床中应用较广。
生物传感器是指固定化的生物体内成分（酶、抗原、抗体、激素等）或生物体木身（细胞、细胞器、纽织等）为敏感元件组成的传感器。生物传感器这种新的检测手段与传统的生物化学相比具有以下的主要特点为①生物传感器是用选择性好的生物体材料作为敏感材料，因此i般不需要进行样品的前处理，一般也不需另加其他试剂，使川简便、快速、准确；；②由于它的体积小，可以实现连续在位检测，联机操作；③响应快，样品用量少，且由于敏感材料是固定化的，可以反复多次使用；④传感器连同测定仪器的成本远低于大型的分析仪，便于推广普及。
牛物传感器根据利用的牛物物质的不同可分为两类。一类是利用酶、细胞内小器官、细胞、组织等具有辅酶特性物质的生物催化传感器。酶传感器、微生物传感器和组织传感器属于此类；另一类是利用抗体、结合蛋白质、激素受体、DNA. RNA等具有亲和性物质的传感器。免疫传感器、受体传感器、DNA传感器属于这类。
牛物芯片是指采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量牛物大分子比如核酸片段、多肽分子其至组织切片、细胞等等生物样品有序地固化于支持物（如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝胶、尼龙膜等载体）的表血，组成密集二维分子排列，然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交，通过特定的仪器对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从而判断样品中靶分子的数量、种类等信息。根据芯片上的固定的探针不同，生物芯片包括基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片，另外根据原理还有元件型微阵列芯片、通道型微阵列芯片、生物传感芯片等新型生物芯片。如果芯片上固定的是肽或蛋白，则称为肽芯片或蛋白芯片；如果芯片上固定的分子是寡核昔酸探针或DNA,就是D7A芯片。
生物芯片技术应用于疾病的诊断、新药开发、基因测序、基因表达分析、寻找新基因、突变和多态性研究等诸多方ifii。牛物芯片技术虽然还处在初期发展阶段，它的飞速发展正在逐步改变着人们对生物体的认识，随着这一技术的深入发展，它将对临床疾病诊断、疾病发牛机理的认识和新药开发都将是一个重要的研究手段。但仍然存在着许多难以解决的问题, 例如技术成本昂贵、复杂、检测灵敏度较低，重复性差、分析泛围较狭窄等问题。这些问题主耍表现在样品的制备、探针合成与固定、分子的标记、数据的读取与分析等儿个方而。
第二节习题练习
一、A型题
[A1型题】
1.可见一紫外分光光度法的理论基础为
A.朗伯-比尔定律
B.Nernst方程式
C.Rayleigh 方程式
D.Heidelberger 曲线
E.以上均不是
2.分光光度法中A代表
A.透光率
B.散射光强度
C.吸光度
D.物质的浓度
E.以上均不是
3 .测定微量元素含量常用
A.可见一紫外分光光度法
B.原子吸收分光光度法
C.荧光分析法
D.电化学分析法
E.电泳技术
4.关于原子吸收分光光度法的叙述正确的为
A.干扰少
B.应川范围广，一种光源可检测多种元索
C.为了改善检出限，尽可能使用宽的狭缝
D.仪器通电后可立即检测
E.以上均止确
5.荧光分析的灵敏度通常可达
A.10-6g/l
B.10-10g/l
C.10-16g/l
D.10-13g/l
E.10-4g/l
6.荧光分析中温度升高可引起
A.Rayleigh 散射
B.Mie散射
C.白熄灭现象
D.温度效应
E.荧光强度增人
7.1=1前分辨率最高的电泳支持体为
A.琼脂糖凝胶
B.醋酸纤维素薄膜
C.淀粉胶
D.聚内烯酰胺凝胶
E.以上均不正确
8.口动化特种蛋白分析仪多采用
A.散射比浊分析技术
B.透射比浊分析技术
C.荧光分析技术
D.电化学分析技术
E.卿免疫分析9. EL1SA又称
A.均相E1A
B.化学发光免疫分析
C.荧光分析法
D.时间分辨荧光免疫分析
E.非均相EIA
10.目前最好的血药浓度检测方法为
A.时间分辨荧光免疫分析
B.高效液相层析法
C.酶免疫分析法
D.牛物传感技术
E.免疫比浊分析
[A2型题】
11.关于吸光系数的叔述错误的为
A.吸光系数指吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸光度
B.在给定条件卞，吸光系数是表示物质特性的常数
C.在吸光度与浓度（或厚度）之间的直线关系中，吸光系数可代表检测的灵敏度
D.摩尔吸光系数是物质的浓度为lmol/1，厚度为lcm时的吸光系数
E.以上物质浓度指样品中被测物，而非显色液中被测物浓度。
12.下列说法错误的为
A.紫外光的波长范围为200-400nm
B.双波长法只能消除干扰组分的干扰
C.双波长法中欲测组分在两波长处的吸光度相差愈大，灵敏度愈高
D.吸光峰对应的波长称为最大吸收波长
E.双波长法中干扰组分在两波长处的吸光度最好相等
13.在原子吸收分光光度法中，为提高灵頌度下列做法错误的为
A.选择最灵敏的吸收线
B.使用较宽的狭缝
C.采用较小的电流
D.采用最佳的火焰类型及状态
E.调整光源
14.关于荧光分析错误的为
A.可对物质进行定量分析
B.可确定物质分子中某种结构
C.属于发射光谱分析法
D.不能定性
E.溶剂可影响荧光分析
15.有关电解质分析仪的叙述错误的为
A.为了延长仪器的寿命，不用时应关闭仪器
B.应保持电极很好的水化，增加电极的稳定性
C.仪髀启动后，清洗管路，进行两点校准
D.每天测定后对电极进行必要的保养
E.电极膜上附着的蛋口质应去除
16.关于毛细管电泳叙述错谋的为
A.粒子运动受电场和电渗流的影响
B.正离子向负极移动
C.负离子也町向负极移动
D.电渗作用可通过屮性物质的速度测定
E.使用高压电场带来的产热难以克服17.下列说法错误的为
A.聚丙烯酰胺凝胶分辨率高
B.等电聚焦电泳川两性电解质作为介质屮的缓冲成分
C.聚丙烯酰胺凝胶不具有分子筛的功能
D.琼脂糖凝胶的最适浓度为0?5-1. 0%
E.酯酸纤维索薄膜不吸附染料
18.关于免疫比浊分析下列叔述错误的为
A.散射比浊法中散射光强度与复介物的含量成正比
B.加入的抗原或抗体应过量才能维持复合物的相对不溶解性
C.透射比浊法中测得的光通量与复合物的量成正比
D.颗粒的大小和形状影响比浊结果
E.散射比浊法是免疫比浊分析中最常用的一种方法
19.下列不属于生物传感器的为
A.Na+电极
B.酶电极
C.组织电极
D.微生物电极
E.免疫电极
20.关于离心技术下列说法错误的为
A.离心技术主要用丁?浓缩或分离物质
B.8000rpm以卜称低速离心机
C.分析型离心机有光学系统而制备型离心机无
D.使用离心机最重要的是平衡
E.沉降系数是颗粒在单位离心力下的沉降速度
【A3型题】
（题21-23共用题干）
分光光度法属于精密仪器，使用前耍进行检查校止21?关于光源的说法正确的为
A.不需要检杳光源
B.波长选在580nm进彳『检査
C.检查吋应缩小狭缝
D.换新灯泡时不需重新调整
E.以上均不正确
22?若光源正常，则可见到
A.口色光斑
B.光斑明暗不均
C.光斑边缘模糊
D.明亮均匀光斑
E.蓝色光斑
23.关于波长的说法正确的为
A.可用错饮玻璃校正
B.温度对波长的精度无堀响
C.标准重路酸钾溶液不能用来校正波长
D.波长精度在±6~±7nmnJ不调整
R.不能通过光源检查來筛选波长
二、B型题
[B1型题】
（题24-28共用题干）
A.原子吸收分光光度法
B.散射比浊法
C.荧光分析法
D.电化学分析技术
E.电泳技术
指出检测下列物质常用的技术
24.锌的检测
25.DNA的检测
26.蛋白质的分离与鉴定
27.血清钠的检测
28.微量蛋门的检测
[B2型题】
（题29 —34共用题干）
A.丽春红S
B.考马斯亮蓝R250
C.枳化乙噪
D.伊红
E.结晶紫
F.SDS
G.过硫酸胺
H.四甲基乙二胺
T.冰醋酸一乙醇
J.甲叉双丙稀酰胺
29.制备聚丙烯酰胺凝胶的催化剂
30.制备聚丙烯酰胺凝胶的加速剂
31.醋酸纤维索薄膜常川的染料
32.核酸电泳常用的染料
33.蛋白质电泳中为消除或减少电荷对蛋白质移动的影响常加入
三、C型题
（题34—38共用题干）
A.直接参与发光反应的标志物
B.以催化反应或能量传递参与发光的酶标志物
C两者均是
D.两者均不是
34?辣根过氧化物酶
35.三联毗噪钉标志物
36.口丫曉酯I
37?碱性磷酸酶
38.稀土元素镐
（题39 — 43共用题干）
A.激发光
B.发射光
C.两者均有
D两者均无
下列生化检验技术在检测过程中有哪些光参与
39.荧光分析法
40.化学发光免疫分析
41.紫外一可见分光光度法
42.酶免疫法
43.吋间分辨荧光免疫分析
四、K型题
44.分光光度法中如何消除或减少干扰
⑴用双波长法
⑵川掩蔽剂
⑶釆用联立方程式
⑷用显色剂
45.影响荧光分析的因素有
⑴温度
⑵溶剂
(3)溶液的PH值
⑷浓度
46.ISE法的核心为
⑴电极电位与待测离子的活度的关系服从Nernst方程式
⑵溶液的PH值要适当
⑶要保持标准液与标本Z间具有相同的离子强度
⑷敏感膜对被测离子选择性响应
47.荧光分析定量的基础为
⑴荧光物质为稀溶液
⑵激发光强度与荧光物质浓度成正比
⑶在一定条件下，荧光强度与荧光物质的浓度成正比
⑷根据发出荧光的波长定量
48?免疫比浊分析是
⑴测定方法遵循比尔定律
⑵应按照雷莱方程式
⑶利川散射光强度或对入射光减弱的原理进行定量分析
⑷能直接用比尔定律测定
五、X型题
49.分光光度法中常用双波长法消除干扰，下列叔述正确的为
A.干扰组分在两波长处的吸光度最好相同
B.欲测组分在两波长处的吸光系数有显著区别
C.干扰组分在两波长处的吸光度有显著区别
D.欲测组分在两波长处的吸光系数相同
50 ?下列叙述正确的为
A.荧光分析的灵敏度大于分光光度法
B.物质浓度愈高，荧光强度愈强
C.发射光波长小于激发其发出荧光的激发光波长
0.利用元素的原子所发射的共振荧光的差显可确定元素的种类
51.ISE的特点
A.选择性好
B.灵敏度高
C.线形范围宽
D.溶血不影响测定
52.离子选择性电极法的影响因素有
A.离子强度
溶液的PH值
C.温度
D.干扰离子
53.影响颗粒电泳迁移率的因索?有
A.带净电荷的数量
B.缓冲液
C.电场强度
D.电渗
54.测定葡萄糖町应用
A.电化学分析技术
B.生物传感技术
C.荧光分析法
D.以上均正确
55.分光光度法中定量分析當用的方法有
A.标准曲线法
B.直接比较法
C.标准加入法
D.外标法
56.HPLC经常采川的检测器是
A.紫外或紫外一可见分光检测器
B.荧光检测器
C.示差检测器
D电化学检测器
57.离心技术中彩响颗粒沉降速度的因索有
A.介质的粘滞度
B.颗粒直径
C.离心加速度
D.颗粒偏离球形的程度
58.时间分辨荧光免疫分析采用的标记物为
A.放射性物质
B.稀土元素
C.酶
D.地高辛
笫三节参考答案一、A型题
[A1型题】
I. A 2. C 3.B 4. A 5. D 6.C 7. D & A 9. E 10. B
【A2型题】
II. E 12. B 13. B 14. D 15. A 16. E 17. C 18. C 19. A 20. B [A3型题】21.B 22. D 23. A
二、B型题
[Bl型题】
24.A 25. C 26. E 27. D 28. B 【B2型题】
29. G 30. H 31. A 32. C 33. F
三、C型题
34. B 35. D 36. A 37. B 38. D
39. C 40. B 41. A 42. D 43. C
四、K型题
44. E 45. E 46. D 47. B 48. A
五、X型题
49. AB 50. AD 51. ABCD 52. ABCD 53. ABD
54. AB 55. AB 56. ABCD 57. ABCD 58. B
第三章临床酶学检验技术略
第四章临床生化检验全面质量控制第一节重点解析
临床牛化检验全面质量控制（TQC）是利用现代科学管理的方法和技术检测分析过程中的误差，控制与分析有关的各个环节，确保实验结果的准确可靠。也称为实验室质量保证。
一、全而质量控制的内容
全甸质量控制的内容主要包括标本分析前、分析中和分析后的三个质控。
分析前质量保证的内容上要为：① 人员的素质和稳定性；② 实验室的设置和工作环境；③ 实验仪器的质量保证；④ 检测方法的选择和评价；⑤ 试剂盒的选择与评价；⑥ 病人准备; ⑦标本的采集、处理和储存；⑧实验室川水等。
分析中质量控制的内容主要包括：①标本的止确处理和应用；②项1=1操作规程的建立;
③室内质控和结果分析；④登记和填发报告等。
分析后质量评估的内容主要有：①运送实验报告；② 室内质控的数据管理；③ 参加室间评质；④病人投诉调查；⑤临床信息反馈等。
二、标本采集与处理
1.血标本采集前应注意的事项标本采集前影响血液成分变化的因素主要有牛理、饮食、药物和采血吋间等。采血吋间宜在早晨空腹6?12小吋后进行，这样血浆组成物质的浓度相対比较稳定，其分析的结果才具有代表性。
2..血标木采集吋应注意的事项应尽量避免溶血。防止溶血的办法有：①抽血器和容器必须干燥洁净，因为红细胞遇水即会溶血，应尽量使用一次性抽血器；②不用或短时间使用止血带，忌长时间压迫血管；③抽血后取下针头再将血液沿容器壁徐徐注入容器内，切勿用力过猛；④若需血浆可用抗凝管作容器，应轻轻倒转容器与抗凝剂混匀，切勿用力振摇。
3.血标本采集后应注意的事项采血后应尽快分离血清（浆），一般不应超过2小时，并及吋测定，必要吋可置冰箱保存。
三、分析仪器的质量保证
（一）分析仪器的性能检查
1.波长校正在更换光源灯、重新安装、搬运或检修斤，以及仪器工作不正常时，都要进行波长校止。就是止常工作的仪器，每隔一个月也要检查一次，这样才能保证读数与通过样品的波长符合，保证仪器的最大灵敏度。
2.线性检杏包括仪器线性及测定方法线性两个方而的检杏。线性误差表现为溶液的浓度与吸光度不成线性关系，出现」E偏离或负偏离的现象。这种偏离，一是溶液木身不符合比耳定律，这种现象叫做化学偏离；二是仪器木身各种因索的影响，使吸光度测定值与浓度之间不成线性关系，这种现象叫做仪器偏离。仪器偏离的因素很多，如杂光、有限宽带、检测器噪声、环境条件的变化、波长的变动、比色杯的误差、辐射光的非平行性、检测器本身的非线性等。
3.朵光（杂散光）检杳在吸光度测定中，凡检测器感受到的不需耍的辐射都称为杂光，朵光对吸光度测定法的准确性有严重的影响，杂光的来源有：①室内光线过强而漏入仪器，仪器暗室盖不严；②仪器本身的原因，如单色器的设计、光源的光谱分布、光学原件的老化程度、波带宽度、以及仪器内部的反射及散射等；③样品木身的原因，如样需有无荧光、样品的散射能力强弱等。杂光检测方法：①紫外光区川12g/L的氯化钾溶液，在220nm处测其透光度，即为杂光量；②可见光区插入谱敎滤光片，在585nm处测定，其测定值即为杂光水平。小于1%T为合格。
4.稳定性检查当电源电压在220-230V范围内变化时，仪器读数漂移不应超过透光度标尺上限值的±1. 5%。在电源电压不变的条件下，在3分钟内其读数漂移不应超过标尺上限值的±0. 5%。
5.重复性检查在波长、工作状态、电源电压、比色杯等合格的前提下，可进行重复性检查。用重铅酸钾溶液（30、60、90、190mg路/L）在波长440nm,将各浓度管连续测3?5 次，各浓
度管中最大差值谋差小于1%T为合格。
6.灵敏度检査将重銘酸钾液配制成30和32. 5mg WL及120和122. 5mg銘/L的4种应用液（浓度差两组各为2.5mg珞/L）。波长440nm,以水校零点，将上述应川液连续测3次吸光度，2. 5mg钻/L浓度差的吸光度值差不小于0. Ok
（二）分析仪器H常工作状态监测
1.临测方法在可见光区范围内，常用硫酸银水溶液。该液在440nm-700nmZ间有吸收峰, 峰值在510nmo检查时,在400、460、510、550及570nm处测定硫酸鎳溶液的透光度值, 记录并保存。待一定时间后川该溶液再检测。比较前后两次的数据，即可知仪器的工作状态。每天监测均应任选一?法校止波长。一般应每月监测一次。当400nm及700mn处杂光增强时, 可能的原因包括：①激发光源陈门，变黑或表层模糊不清。透镜有灰尘。③色散元件失效等。如
510mn处透光度减弱，可能原因为光源灯丝故障，比色池出光缝失灵或光栅损坏。硫酸银溶液的制备：将硫酸银溶TO. 1%的硫酸中，川量的多少以在510nm处所测得的透光度达80%T为准（以0. 1%硫酸校零点），配好后密封备用。
2.监测的意义在400、700nm处的测定町以监测杂光，这些波长处的测定值升高说明杂光增加，其屮任一值增加3%就需要进行检修。510nm处的测定值可以监测带宽，这个波长的测定值减小说明带度加大。光源强度减弱或波长不准可以产生这种结杲，如降低2%T,对于带宽为20mn的仪器就需要修理了。460与550nm处的读数主要作为监测波长Z用，称二次波长校正。这两个波长的读数相互关联，-?个升高另一个就降低。如460nm的测定值（透光度）降低，而550nm的测定值升高，说明透过比色杯样品的波长小丁波长度盘指示的波长。反Z, 如460nn）的测定值升高，Hu 550nm的测定值降低，说明透过比色杯样品的波长人于波长度盘指示的波长。
（三）分析仪器的质量管理
分析仪器的质量管理包括①建立仪器的相关记录；②建立仪器的操作程序；③ 建立仪器的检
定与校准程序；④ 仪器的比对确保结果的一致性。
四、临床生化实验室内质塑控制
室内质控（IQC）,旨在检测和控制常规工作的精密度和准确度，提高常规工作屮天内和天间标本检测的一致性。能及时地、准确地报告检验结果。
（一）控制物
控制物又称质控品，质控品应具有的特征是：①人血清基质，分布均匀；②无传染性; ③添加剂和调制物的数量少；④瓶间变异小，酶类项Fl-般瓶间cv%应小于2%,其它分析物CV%应小于1%；⑤冻干品其复溶片稳定，2-8°C时不少于24小时，-20°C时不少于20天；某些不稳定成分（如BIL, ALP等）在复溶后4小时的变异应小丁? 2%；⑥在实验室的有效期应在一年
以上；⑦合理的成本。
质控品的使用和保存应①严格按质控品说明书操作;②冻干质控品的复溶要确保所用溶剂
的质量；③冻干质控品复溶吋所加的量要准确，并尽量保持每次加入量的一致；④冻干质控品复溶时应轻轻摇匀，使内溶物完全溶解，切忌剧烈震摇；⑤质控品应严格按使用说明书规定的方法保存，不使川超过保质期的质控品；⑥质控品要在与患者标木同样测定条件下进行测定。
设定靶值分①暂定靶值的设定：根据20次或更多独立批次获得的至少20次质控测定的
结果，计算出平均值，作为暂定靶值。②常用靶值的设立：以最初20个数据和三至五个月在控数据汇集的所有数据的累积平均数作为质控品有效期内的常用靶值，并以此作为以斤室内质控图的平均数，对个别在有效期内浓度水平不断变化的项目，则须不断调幣靶值。
控制限通常是以多个标准差表示，即以标准差的倍数表示。暂定标准差和常川标准差的设定方法同暂定靶值和常用靶值的设定。
（二）室内质控主耍方法
1.均数一标准差（-S）质控图
方法是用单-?浓度未定值血清，在天内、天间反复测定20次，计算均值（）、标准強（S）和变异系数（CV）,绘制-S质控图，得到均值线（）、警告线（±2S）和失控线（±3S）。与质控图制作相同批号的控制血清，每天随病人标本分析，结果点在图上，直线连接。
止常分布规律，①95%数据落在±2S内；②不能有连续5次结果在同一侧；③不能有5 次结杲渐升或渐降；④不能连续2个点落在±2S以外；⑤不应该有落在±3S以外的点。
异常表现，①漂移，提示存在系统误差；②趋势性变化，说明试剂或仪器的性能己发生变化；
③粘度变化，提示测定的偶然误差较人。
2.We st gar d多规则质控法
方法要求在常规条件下，同时测定2份定值质控血清，并要求质控血清所含测定物浓度最好分别为医学决定水平的上限（高值）或下限（低值），或者是分析方法测定范围的上限和下限。将测定结杲分别绘成2份不同浓度的一S质控图，当有一份质控血清测定值处丁-质控图上2S ?3S界限内，发出〃警报〃信号时，即应采用其余各条规则对质控图进行全面检査，若符合其中一?条，就应把该批分析测定的结果判为〃失控〃。
（三）失控后处理
操作者衣测定质控时，如发现质控数据违背了质控规则，应填写失控报告单，对失控结果要进行冋顾、检查、重复测定，或另取质控阳分析，或检杏仪器、试剂和操作等，以纠正失控。
五、室间质量评价和能力比対分析
室间质量评价（EQA）是通过实验室间的比对，观察各实验室结果的准确性、一致性，并采取一定措施，使各实验室结果渐趋一致。能力比对分析（PT）是室间质量评价技术方案乙一，现已成为全球性室间质量保证系统的主要内容，以保护病人的利益和公众的福利。PT 方案是通过实验室之间的比对判断实验室的检测能力的活动。
（一）室间质评应具备的条件
做好室I'可质评工作：①要有一支素质较高的质控技术队伍；②参加室间质评的实验室要有室内质控的基础；③要有良好质控血清作为调查样木；④调杳样木的定值方法要可靠, 应有参考实验室作后盾；⑤统一测定方法及校准品。
（二）室间质评的方法
组织若干实验室，共同在同一时间内测定同一批样品、收集测定结果，作统计分析并按规定评分。
变异指数得分（VIS）计算公式为：
V = VI =
其中V为变异百分数，X为各室测定值，T为靶值，VI为变异指数，CCV为选定的变异系数。在计算时，VTS只计整数位，并不带正负符号。
WHO对发展中国家在国际质评中的标准为：VISV50为优秀；VISV100为良好；VISV
150为及格。我国的标准为：V1SV80为优良；V1S<150为及格。
（三）变异指数移动总均值
变异指数移动总均值（OMRVIS）是动态反映实验室工作质量的一个指标，表示实验室工作质量提高或下降的总趋势。
（四）研究不及格室间质评结杲的程序
调查应包括：①书写误差的检杳；②质控记录，校准状况及仪器功能检查的市核；③当可能时，重新分析和计算。④评价该分析物实验室的历史性能。
不及格结果可分为如下几种类型：①书写误差；②方法学问题；③技术问题；④室间质评物问题；⑤结杲评价的问题；⑥经调查后无法解释的问题等。
（五）能力比对分析
方法是将未知标本分发给各实验宗，并提供可靠的标准，对回报结果进行分析，判断实验室获得正确测定结果的能力。国际CLLV 88的PT方案规定，临床生物化学项口每年至少进行3次PT调查，每次调查至少包括5个不同的质控样本，TP在一年内，对于任一项至少可得15个测定结果。通过各实验室间持续的比较，作出结果判断。
国际CLTA, 88技术细则规定，结果计算出的SI、S2均应大于80,否则判为不满意，且如果S1或S2连续两次或两次以上不满意，即为失败，对于某一个接受结果，不再进行优劣分级。第二节习题练习
一、A型题
【A1型题】
1.CLTA'88的技术细则规定满意SI、S2均应人于
A 60
B 70
C 80
D 90
E 100
2.在宗间质评中，一燉认为VIS大于多少时表明测定结果超过允许误差
A 150
B 200
C 300
D 400
E 450
3.Westard多规则质控法选用的两份定值血淸的浓度为
A .甲为医学决定水平的上限，乙正常
B.卬正常，乙为医学决定水平的下限
C.甲为医学决定水平的下限，乙正常
D.甲为医学决定水平的上限，乙医学决定水平的下限
E .卬、乙均正常
4.0CV与RCV的关系是
A .0CV二RCV
B .0CV>RCV
C .0CV I） .0CV E.两者无关系 5?在室内质控中，-S质控图发生漂移，提示心在 A偶然误差 B随机误差 C方法误差 D系统误差 E试剂误差 6.在进行分析仪器的线性检查时，常川的方法是在610nm处检测A伊文蓝 B「重侪酸钾 C硫酸银 D碘化钠 E氯化钠 7.采血后应尽快分离血清（浆），一般不超过 A lh B 2h C 6h D 12h E 24h 8.硫酸银水溶液在440nm?700nm Z间有吸收峰，峰值在 A.400 nm B.460 nm C.510 nm D.550 nm E.700nm 9..以硫酸碌水溶液监测仪器带宽，测定波长是 A.400 nm B.460 nm C.510 nm D.550 nm E.700nm 10.在均数一标准差(-S)质控图中失控线是 A. B.-S C.±2S D.±2. 5S E.±3S 【A2型题】 11.分析前的质量保证不包括 A.检测方法的选择和评价 B.实验室用水 C.质控标本的正确测定 D.人员的素质和稳定性 E.试剂盒的选择和评价 12.下列哪一?种方法不可以防止血液标本的溶血 A采血器盒容器必须干燥、洁净 B不用或短吋间使用止血帯 C采血后取下针头再将血液沿容器雄徐徐注入容器内 D川抗凝管做容器时，应川力振荡，使血液与抗凝试剂充分混匀 E尽量使用一次性采血器 13.?分析屮的质量控制不包括 A实验仪器的质量保证 B室内质控和结果分析 C项目操作规程的建立 D质控标本的止确测定 E登记和填发报告 14..分析后的质量评估不包括 A室内质控和结果分析 B室内质控的数据处理 C病人投诉调查 D运送实验报告 E参加室间质评 15.关于室间评价，下列说法错课的是 A室间质量评价不能代替室内质控 B参加室间质评的实验室不需以室内质控为基础 C有良好的质控血清作为调査样木 D目的是通过实验室间的对比，并采取一定措施，使各实验室结果渐趋一致E有一支素质较高的质控技术队伍 16.分析仪器的性能检查不包括 A波长校止 B线性检查 C杂光检查 D稳定性检査 E变异系数检查17.以下哪种血标本的成份变化不属于分析前 A葡萄糖转化为乳酸，使血糖浓度降低 B血液中的CO2在空气中发生损失 C血浆中的无机磷减少 D酸性磷酸酶失活 E有些物质可以通过红细胞膜而迓入血浆 18.PT方案,下列哪种说法是错误的 生化全套检查项目及临床意义 简介 生化全套检查就是指用生物或化学的方法来对人进行身体检查，生化全套检查容包括：肝功能（总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比，总胆红素、直接、间接胆红素，转氨酶）；血脂（总胆固醇，甘油三酯，高、低密度脂蛋白，载脂蛋白）；空腹血糖；肾功能（肌酐、尿素氮）；尿酸；乳酸脱氢酶；肌酸肌酶等。不同的医院，生化全套检查的项目会有差别，但大致的项目不会相差太大。生化全套检查用途 1、用于常规体检普查 2、疾病的筛查和确证试验 生化全套检查是对身体进行一次全面的检查和对身体情况的一 种了解，有时也可以检查出来潜伏的疾病，如乙肝病毒携带者就需要定期的检查，如肝功能检查，防止病情突然发作，及时进行治疗。 生化全套检查项目 1．血清丙氨酸氨基转移酶测定 2．血清天门冬氨酰基转移酶测定 3．血清γ--谷氨酰基转移酶测定 4．血清碱性磷酸酶 5．血清白蛋白测定 6．血清白蛋白测定 7．球蛋白 8．A/G 9．血清总胆红素测定 10．血清直接胆红素测定 11．血清间接胆红素测定 12．血清前白蛋白测定 13．ALT/AST 14．血清总胆固醇测定 15．血清甘油三酯测定 16．血清高密度脂蛋白胆固醇测定17．血清低密度脂蛋白胆固醇测定18．血清载脂蛋白A1测定 19．血清载脂蛋白B测定 20．血清载脂蛋白a测定 21．尿素测定 22．肌酐测定 23．尿素测定 24．血清碳酸氢盐测定 25．乳酸脱氢酶测定 26．血清肌酸激酶 27．血清肌酸激酶－MB同功酶活性测定28．血清ａ羟基丁酸脱氢酶测定 29．钾测定 30．钠测定 31．氯测定 32．钙测定 33．葡萄糖测定 临床意义： 1.血清丙氨酸氨基转移酶（ALT或GPT）测定的临床意义： 升高：常见于急慢性肝炎、药物性肝损害、脂肪肝、肝硬化、心肌梗塞、心肌炎及胆道疾病等。 2.血清天冬氨酸氨基转移酶（AST或GOT）测定的临床意义： 升高：常见于心肌梗塞发病期、急慢性肝炎、中毒性肝炎、心功能不全、皮肌炎等。 3.血清总蛋白测定的临床意义： 增高：常见于高度脱水症（如腹泻，呕吐，休克，高热）及多发性骨髓瘤。 降低：常见于恶性肿瘤，重症结核，营养及吸收障碍，肝硬化、肾病综合征，溃疡性结肠炎，烧伤，失血等。 4.血清白蛋白测定的临床意义： 增高：常见于严重失水导致血浆浓缩，使白蛋白浓度上升。 降低：基本与总蛋白相同，特别是肝脏病，肾脏疾病更为明显。 5.血清碱性磷酸酶（ALP）测定的临床意义： 一、A型选择题 1．在荧光定量分析法中，下列哪种不是影响荧光强度的因素（） A．荧光物质的浓度 B．溶剂的性质C．荧光物质的摩尔吸光系数 D．温度E．溶液的pH值 2．琼脂糖凝胶电泳用pH8.6的巴比妥缓冲液可以把血清蛋白质分成五条区带，由正极向负极数起它们的顺序是（） A．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白 B．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白 C．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β-球蛋白 D．α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白、白蛋白 E．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、α2-球蛋白 3．在区带电泳中，能产生电荷效应和分子筛效应的固体支持介质有（） A．醋酸纤维素薄膜、纤维素、淀粉B．纤维素、淀粉、琼脂糖 C．硅胶、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶D．淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶 E．醋酸纤维素薄膜、硅胶、纤维素 4．利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是（） A．凝胶层析法B．吸附层析法C．分配层析法D．亲和层析法 E．离子交换层析法 5．通过在波片或硅片上制作各种微泵、阀、微电泳以及微流路，将生化分析功能浓缩固化在生物芯片上称（） A．基因芯片B．蛋白质芯片C．细胞芯片D．组织芯片E．芯片实验室 6．离心机砖头的旋转速度为20000γ/min的离心为（） A．低速离心B．平衡离心C．高速离心D．超速离心E．等密度离心 7．标本条码下有10个阿拉伯数字，其中第4～5位表示（） A．标本号B．标本类型C．组合号D．月份E．日期 8．由实验室自己配置或为商品，其中有关物质的量由参考方法定值的标准品为（）A．一级标准品B．二级标准品C．控制物D．参考物E．原级参考物 9．经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法为（）A．决定性方法B．推荐方法C．参考方法D．常规方法E．对比方法10．测定恒定误差的试验是（） A．重复性试验B．回收试验C．线性试验D．干扰试验 E．检测能力试验 二．X型选择题 1．酶免疫分析的基本技术组成为（） A．应有高活性的酶和高质量的酶标抗体B．最佳固相载体和抗体包被技术 C．最佳酶作用的底物D．通过电场来精确控制整个分析过程 E．检测放大系统及再生技术 2．免疫比浊测定应注意的事项为（） A．抗原或抗体量不能大大过剩 B．应维持反应管中抗体蛋白量始终过剩 C．高血脂标本易受干扰D．易受环境温度和pH值的影响 E．加入聚合剂可促进免疫复合物的形成 3．流式细胞仪接受并分析的信号主要有（） A．光散射讯号B．光吸收讯号C．荧光讯号D．电流讯号 E．生物发光讯号 4．鉴定纯酶度的常用方法是（） A．比活力测定B．电泳分析C．免疫学分析D．活性浓度测定 E．Km测定 5．影响血标本成份变化的因素有（） 《临床生物化学检验》考试试题与答案 一、名词解释（每小题2分，共10分） 1、临床化学 2、前带效应 3、色素原底物 4、溯源性 5、酶的比活性 二、填空（每空1分，共15分） 1 、翻译下列英文缩写（英译汉）：IFCC 的中文全称为 _______________________________________ ，其中文简称为 _______________________________ 。NCCLS 的中文全称为 _______________________________。PNPP 为_____________________。AMS 为_____________。AChE 为________________________。CRM 为________________。质量保证中的 VIS 为____________________。 2、将十几个步骤简化为样本采集、样本分析、质量控制、解释报告等四个步骤的过程称为病人身边检验 （床边检验），其英文缩写为_____________ 。（中国）实验室国家认可委员会的英文缩写为_________ 。美国临床化学协会的英文缩写为_____________。 3、最早对临床生物化学检验做出开创性研究的我国科学家是_______________。 4、NCCLS的精密度评价试验中，规定合乎要求的批内不精密度CV范围为_______________，批间不精密 度CV变异范围为_______________，其中的EA来源于_______________的规定标准。 三、单选（每小题1分，共30分） 1、连续监测法测定酶活性的吸光度读数次数应不少于（）次 A、2 B、3 C、4 D、7 2、测定待测酶Ex的酶偶联反应A??E?x→B??E?a→C ??Ei→D 之中，关于零级 反应、一级反应的描述正确的是（） A、三个酶催化的都是零级反应 B、Ex和Ea催化的是零级反应，Ei催化一级反应 C、Ex催化的是零级反应，Ea和Ei催化一级反应 D、三个酶催化的都是一级反应 3、测定代谢物Ax的酶偶联反应A B C D Ea Ea Ei x ???→ ???→ ??→ 1 2 之中，关于零级反应、一级反应的描述正 确的是（） A、三个酶催化的都是零级反应 B、Ea1和Ea2催化的是零级反应，Ei催化一级反应 得分 阅卷人 得分 阅卷人 得分 阅卷人 《临床生物化学与检验》教学大纲 一、课程性质和地位 适用专业：医学检验（五年制本科） 课程类别：主干课程 《临床生物化学与检验》是高等医学检验专业的重点课程之一，通过对临床生物化学检验理论与技术的学习可使学生系统掌握人体正常代谢与异常的生物化学指标与临床检测的意义。本大纲为一个学期的理论与实验教学。 本课程将主要给予学生有关临床生物化学的理论知识，着重于对疾病本质的生化机制、体液中生化组分的变化的病理生理学基础以及生化诊断原理的阐述，包括有关方法学应用的基本原理及其临床意义的判断，阐述临床生物化学实验室的检测项目，检测结果数据与临床的联系。 二、教学环节和教学方法 临床生物化学和生物化学检验的教学环节包括课堂讲授、实验、考试等。其中课堂是通过教师对指定教材部分章节的重点讲解，结合CAI课件对板书及其相关的图示以及启发式教学的方法，使学生对理论知识融会贯通。实验是教师在实验室里指导学生通过实际操作、检测原理以及试剂配制等方面，加强对理论的理解。并通过电化教学、多媒体实验教学、要求学生进行实验讨论，强化记忆，在教学过程中为适应科学技术的发展和21世纪医学检验教育的需要，在教学内容上注重突出基本理论、基本知识、基本技能，并且紧密联系学科新进展，动态修订教学大纲，培养学生的创新思维和实践能力。以培养高质量的毕业生作为最终目的。 三、课程总学时 根据教务处下发的教学计划，检验本科临床生化检验实验总学时140，其中理论68学时，实验72学时。 四、教学内容与学时安排 理论内容 第一章绪论目标要求： 1、了解临床生物化学发展简史。 2、熟悉临床生物化学的领域和性质。 3、了解临床生物化学的现状及其作用。 教学内容： 1、临床生物化学发展简史。 第十章血浆蛋白质与含氮化合物的代谢紊乱 教学目标与要求 掌握：血浆中几种重要蛋白质的性质及其临床应用；血清蛋白质电泳组分的临床分析；高尿酸血症和痛风的发生机制；血清总蛋白、清蛋白、蛋白电泳的检测方法。 熟悉：血浆蛋白质的种类及生理功能；原发性和继发性氨基酸代谢紊乱的概念；含硫氨基酸检测的临床意义。 了解：苯丙酮酸尿症、酪氨酸血症、嘌呤核苷酸代谢紊乱。 第一节血浆蛋白质及其代谢紊乱 蛋白质是人体中含量和种类最多的物质，蛋白质占人体干重的45％，种类约有10万之多。几乎在所有的生理过程中蛋白质都起着关键作用。血浆蛋白质是血浆固体成分中含量最多的一类化合物，目前已有所了解的血浆蛋白质约有500种。 血浆蛋白的IEF/SDS-PAGE电泳图谱 取一滴血浆在电泳板的左下角点样。 先在水平方向进行等电聚焦电泳（IEF），接着在垂直方向进行SDS-PAGE。 一、血浆蛋白质的种类 盐析法:将血浆蛋白质分为清蛋白和球蛋白两大类。 通过醋酸纤维膜电泳或琼脂糖凝胶电泳将血浆蛋白质分成清蛋白和α1、α2、β、γ-球蛋白等五个主要区带。 二、血清蛋白质电泳组分的临床分析 （一）血清蛋白电泳的正常图谱血清蛋白电泳（serum protein electrophoresis，SPE）正常图谱，由正极到负极可依次分为清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白五个区带。 血清蛋白电泳的正常组分 各条区带中多个蛋白质组分可有重叠、覆盖；两区带之间也有少量蛋白质；某些蛋白质组份染色很浅。 用醋酸纤维素薄膜电泳测得血清各区带蛋白质的参考值： 清蛋白（Alb）：57％～68％、35～52 g/L α1球蛋白： 1.0％～5.7％、 1.0～4.0 g/L α2球蛋白： 4.9％～11.2％、4.0～8.0 g/L β球蛋白：7％～13％、 5.0～10.0 g/L r 球蛋白：9.8％～18.2％、6.0～13.0g/L 。 琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖(agarose)：从琼脂(agar)中去掉杂质和能沉淀脂蛋白的琼脂果胶(agaropectin)后所得，是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质。 评价：电渗作用小，对蛋白质的吸附极微，分辩率和重现性均较好，电泳图谱清晰。 常用的浓度：0.5～1.0%。 商品化的琼脂糖凝胶板透明度好，散热均匀而且快，电泳重现性好，适当的条件可以保存半年。加之结合半干胶技术，电泳时可以不需要缓冲液，是目前自动化电泳系统最佳的介质。（二）血清蛋白电泳的异常图谱 血清蛋白电泳异常图谱分型 血清蛋白电泳典型异常图谱 浆细胞病与M蛋白 1.血清蛋白电泳异常图谱分型 《临床生物化学与检验》 实验教学大纲 (供检验医学专业本科教学使用) 蚌埠医学院 生物化学与分子生物学教研室制定 二OO八年八月 蚌埠医学院 《临床生物化学与检验》课程实验教学大纲 课程编号： 课程名称：临床生物化学与检验 英文名称：Clinical Biochemistry and Techniques of Biochemistry 课程性质：专业主干课程 适用专业：医学检验本科 考核方式：日常考核、操作考核、提交实验结果。实验成绩的构成是由实验报告成绩、平时成绩、实验考核成绩三部分组成。实验总成绩40分，其中实验报告成绩15分、平时成绩10分、实验考核成绩15分。 课程简介：本课程是医学检验专业本科生的必修课程，临床生物化学和生物化学检验是由生物化学、分析化学、临床医学等学科交叉融合而形成边缘学科，是临床医学的不可分割的重要组成部分，是医学检验专业学生的主干课程之一。临床生物化学和生物化学检验着重阐述了人体疾病发病机制中的生物化学改变，临床生物化学检验方法的原理、方法学评价、检测结果的临床意义和如何按循证医学要求合理选择相关检验指标。 教学大纲要求总学时162学时，其中理论教学68学时、实验教学68学时，实验教学共15实验类别，共计26个实验。 选用教材：钱士匀.主编.临床生物化学与检验实验指导.人民卫生出版社，第三版.2007. 实验一生化实验要求、电教 一、类别：示教性实验 二、实验目的和要求： 【掌握】 1.正确使用玻璃器材。包括：⑴认识玻璃器材。⑵掌握玻璃器材的分类。⑶掌握玻璃器 材的正确使用方法。⑷掌握玻璃器材的正确清洗方法。⑸了解玻璃器材的校准方法。 2.正确使用各种加样器。 【熟悉】 1.实验室的规则。 2.药品和试剂的分级和使用原则。 【了解】检验科临床生化室的基本操作流程及实验室规则。 三、实验内容： 1．介绍实验室的一般规则，包括实验秩序、药品和试剂使用规则。 2．发实验器材。 3．观看电教，熟悉相关器材与仪器的正确使用。 四、学时：4学时 五、主要仪器设备：电视机、放像机、可调微量加样器等。 汉译英： 低糖血症hypoglycemia 高糖血症hyperglycemia 果糖胺fructosamine 同工酶isoenzyme 胰岛素 insulin 线性范围Linear range 初始速率The initial rate 甘油三酯Triglyceride 胆固醇Cholesterol 阴离子间隙Anion gap 尿酸Uric acid 胆红素Bilirubin 黄疸Jaundice 胆色素Bile pigment 肿瘤标志物Tumor markers 醛固酮Aldosterone TDM (治疗药物检测) Therapeutic drug monitoring 名解： 1.阳性似然比（positive likelihood ratio，+LR）：是指用诊断试验检测患病人群的.阳性率与非患病人群的阳性率之间的比值，即真阳性率与假阳性率之比。 2.系统误差（systematic error，SE）：是指一系列测定值对存在同一倾向的偏差。 3.精密度（precision）：表示同一标本在一定条件下多次重复测定所得到的一系列结果的彼此符合程度，表示测定结果中随机误差（RE）大小程度的指标。 4.灵敏度（sensitivity）：只在患者中用诊断试验检出的阳性百分率，表示诊断试验查出患者的能力，又称真阳性率。 5.内生肌酐清除率（endogenous reatinine clearcmce，Ccr）：是指单位时间内，肾脏将多少毫升血浆中肌酐清除由尿排泄。 6.肾清除率（Cx）：肾脏在单位时间内（每分钟)将多少毫升血浆中某物质全部清除由尿排出。 7.血气分析：指通过血气分析直接测定血液中的三项指标（PH,PO2 ,PCO2），利用公式推算出其他指标，由此对酸碱平衡及呼吸功能进行判断的分析技术。 8.血氧饱和度：是指血液在一定的PO2下，氧合血红蛋白（HbO2）占全部Hb的百分比。 9.工具酶：通常把酶学分析中作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶称为工具酶。 10.胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）：是指单位浓度的胰岛素细胞效应减弱，即机体对正常浓度胰岛素的生物反应性降低的现象。 11.室间质量评价（external quality assessment，EQA）：是指多家实验室分析同一样本，由外部独立机构收集，分析和反馈实验室检测结果，评定实验室常规工作的质量，观察试验的准确性，建立起各实验室分析结果之间的可比性。12.室内质量评价（internal quality control，IQC）：是实验室的工作人员采用一系列统计学的方法，连续的评价本实验室测定工作的可靠程度，判断检验报告是否可发出，以及排除质量环节中导致不满意因素的过程。 13.逆向转运胆固醇：即将肝外组织细胞内的胆固醇，通过血循环转运到肝，在肝内转化为胆汁酸后排出体外。 14.黄疸：胆红素是金黄色的色素，在组织细胞内沉积而造成的黄染现象称为黄疸。 临床生物化学与检验 1、糖酵解：指从葡萄糖至乳糖的无氧分解过程，可生成2分子ATP。 2、糖异生：非糖物质转为葡萄糖。 3、血糖受神经，激素，器官调节。升高血糖激素：胰高血糖素（A细胞分泌），糖皮质激素，生长激素，肾上腺素。降低血糖激素：胰岛素（B细胞分泌） 4、糖尿病分型：1.1型：内生胰岛素或C肽缺，易出酮症酸中毒，高钾血症，多发于青年人。2.2型：多肥胖，具有较大遗传性，病因有生物活性低，基因突变，分泌功能障碍。3.特异型 4.妊娠期糖尿病。 5、LPL（脂蛋白脂肪酶）活性依赖胰岛素/胰高血糖素比值。 6、慢性糖尿病人可有：A－晶体蛋白糖基化而眼白内障，并发血管病变以心脑肾最重。 7、糖尿病急性代谢并发症有：酮症酸中毒（DKA，高血糖，高酮血症，代谢性酸中毒），高渗性糖尿病昏迷（NHHDC肾功能损害，脑血组织供血不足），乳酸酸中毒（LA）。 8、血浆渗透压=2（Na＋K）＋血糖浓度。 9、静脉血糖〈毛细血管血糖〈动脉血糖。 10、血糖检测应立即分离出血浆（血清），尽量早检测，不能立即检查应加含氟化钠的抗凝剂。 11、肾糖阈：8.90～10.0mmol/L。 12、糖耐量试验：禁食10～16h，5分钟内饮完250毫升含有75g无水葡萄糖的糖水，每30分钟取血一次，监测到2h，共测量血糖5次（包括空腹一次）。 13、糖化蛋白与糖尿病血管合并症有正相关。糖化血红蛋白：可分为HbA1a，HbA1b，HbA1c（能与葡萄糖结合，占绝大部分），测定时主要测HbA1组份或HbA1c（4%～6%），反映前6～8周血糖水平，主要用于评定血糖控制程度和判断预后。 14、糖化血清蛋白：类似果糖胺，反映前2～3周血糖水平。 15、C肽的测定可以更好地反映B细胞生成和分泌胰岛素的能力。 1.急性时相反应蛋白：在炎症性疾病如手术、创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等情况下，血浆中一系列浓度发生变化的蛋白质的总称，其中大部分蛋白质如AAT、AAG、Hp、Cp、CRP、C3和C4等浓度升高，PA、Alb和TRF等浓度下降。这些血浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白． 2.苯丙酮酸尿症：苯丙酮酸尿症是由于苯丙氨酸羟化酶先天性缺乏所致，属常染色体隐性遗传，因患儿尿液中排出大量苯丙酮酸等代谢产物而得名。 3.双缩脲反应：血清中蛋白质中相邻的肽键（- CO -NH -）在碱性溶液中能与二价铜离子作用产生稳定的紫色络合物。此反应和双缩脲在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似，因此将蛋白质与碱性铜的反应称为双缩脲反应。 4.痛风：痛风是一组嘌呤代谢紊乱所致的疾病，由于遗传性和（或）获得性的尿酸排泄减少和（或）嘌呤代谢障碍，导致高尿酸血症及尿酸盐结晶形成和沉积，从而引起特征性急性关节炎、痛风石、间质性肾炎，严重者呈关节畸形及功能障碍；常伴尿酸性尿路结石。 5.糖尿病：是一组由胰岛素分泌不足和（或）作用缺陷所引起的以慢性血糖水平增高为特征的代谢性疾病。 6.胰岛素抵抗：是指胰岛素作用的靶器官（主要是肝脏、肌肉和脂肪组织）对正常浓度的胰岛素不能产生正常的生物学反应，即组织对胰岛素敏感性降低。 7.代谢综合征.：是与代谢异常相关的心血管病多种危险因素在个体内聚集的状态。MS的基础是IR,其主要组成成分是肥胖症尤其是中心性肥胖、2型DM或糖调节受损、血脂异常和高血压。 8.空腹血糖：是指8 ~10h内无任何热量摄入时检测的静脉血浆葡萄糖水平。 9.糖化血红蛋白：是葡萄糖或其他糖与血红蛋白的氨基发生非酶催化反应的产物(一种不可逆的糖化蛋白)。 10.低血糖症：是指血糖浓度低于参考值水平下限，临床出现以交感神经兴奋和脑细胞缺糖为主要特点的综合征。一般以血浆葡萄糖浓度低于2. 8mmol/L时作为低血糖症的标准。 11.载脂蛋白:脂蛋白中的蛋白质具有运脂质的作用故被称为载脂蛋白。 12.LDL受体途径：LDL或其他含ApoB100的脂蛋白如VLDL与LDL受体结合后，内吞入细胞，经溶酶体酶作用，胆固醇酯水解成游离，后者进入胞质的代谢库，供细胞膜等膜结构利用的代谢过程。 13.RCT：HDL将外周细胞中过剩的胆固醇移出并转运至肝脏进行转化和清除。 14.高脂血症：指血浆中胆固醇和（或）甘油三酯水平升高。 15.血脂：指血浆中所含的脂类，包括甘油三酯和少量甘油二酯、甘油一酯、磷脂、胆固醇、胆固醇酯、游离脂肪酸。 16.血浆脂蛋白：血浆中的脂类与载脂蛋白组成的一类水溶性的复合物，是血脂的存在及运输形式。 17.水平衡：水平衡是指每天进入机体的水，经机体代谢在体液间转移交换，最后等量地排出体外，使各部分体液保持动态平衡的过程。 18.血气分析( blood gas analysis)：血气分析( blood gas analysis)是通过血气分析仪直接测定血液的酸碱度、二氧化碳分压、氧分压三项指标，利用公式推算出其他标，由此对酸碱平衡及呼吸功能进行判断的分析技术。 19.实际碳酸氢盐（actual. bicarbonate,AB）：实际碳酸氢盐(actual bicarbonate，碱中毒的重要指标，但也受呼吸因素影响而继发改变。4.标准碳酸氢盐（standa:rd bicar:bonate,SB）20.标准碳酸氢盐（standard bicarboSB)指在37℃时用PC02为40mmHg及P02为100mmHg 的混合气体平衡后测定的血浆HC03的含量，是反映代谢性酸碱中毒的重要指标。 21.缓冲碱（buffer base,BB）：缓冲碱（buffer base,BB）指血液中具有缓冲氢离子作用的阴 临床生物化学与检验》实验教学大纲（本科） 实验指导书：《临床物化学与检验实验指导》，钱士匀主编，第三版，人民卫生出版社，2009 编写单位：临床生物化学实验室 临床生物化学及检验》实验教学大纲 课程编码： 课程名称：临床生物化学和生物化学检验实验指导书：临床生物化学与检验实验指导（第三版）参考教材：临床生物化学与检验（第四版）总学时：120 学时 理论学时：60 学时 实验学时：60 学时适应专业：医学检验专业一、实验教学目的与基本要求临床生物化学与检验是化学、生物化学与临床医学相结合的一门边缘应用学科。临床生物化学与检验是将化学的原理和技术应用于生物体液成分的测定，为临床提供客观的诊断依据，并为监测疾病的发展和治疗效果提供可靠的指标。临床生物化学及生物化学检验是医学检验专业的主干课程。 开设实验课的目的： 1、加深学生对临床生化检验领域的理解，使学生将理性知识与感性知识有机的结 合； 2、通过教师启发式的教学，培养学生严谨的工作态度，仔细和正规的操作方法，科学和敏捷的操作思路，为今后的临床生产实习打下扎实的基础。 3、通过实验以及对实验结果地评价和分析培养学生分析问题和解决问题地能力。 4、通过实验课树立学生提高临床诊断水平，为临床服务的意识，加强学生能力的培养及创新思维和能力的训练。 本实验课的基本要求： 1、使学生掌握临床生化检验中常用的技术、检测指标数据的处理和分析方法及与临床的关系。 2、掌握常见的临床生化检验项目测定的原理、操作要求、注意事项、方法学评价及临床意义。包括：蛋白类、糖类、无机离子、酶类、肝功能、非蛋白含氮化合物、血脂、血气及酸碱分析等。 习题： 一、名词解释 1.临床检验生物化学(Clinical Biochemistry) 2.组合试验(profile tests) 二、问答题 1.试述临床检验生物化学的研究领域。 2.试述临床检验生物化学在医学中的地位及应用。 3.简述临床检验生物化学的进展及发展趋势。 第一章绪论答案 一、名词解释 1. 临床检验生物化学(Clinical Biochemistry): 临床检验生物化学是在人 体正常生物化学基础上，研究病理状态下生物化学改变，寻找这些改变的 特征性标志并建立可靠实用检测方法，通过对这些特征性标志物的检测， 为健康评估、疾病预防、诊断、治疗、病情和预后判断等提供生物化学信 息和决策依据的一门学科。 2. 组合试验(profile tests): 在循证检验医学基础上，将某些疾病或器官 系统功能的有关检验项目，进行科学合理的组合，以便获取更全面完整的 病理生物化学信息的方法。如了解肝脏功能的组合试验。 二、问答题 1. 试述临床检验生物化学的研究领域。 临床检验生物化学的学科领域主要包括以下三方面： 1. 揭示有关疾病的病理生物化学改变，从本质上阐明疾病发生、发展、转归的生物化学机制，为疾病的预防、诊断、疗效及预后评估，提供理论基础。 2. 在上述研究基础上，寻找具有疾病特异性的生物化学标志物，并建立特异度、灵敏度高，简便而高性价比的检测方法，从而在临床开展有关项目的检测，提供反映这些标志物改变的客观数据。 3. 将检测项目的数据，转化为预防、诊断和疗效及预后评价信息。 2. 试述临床检验生物化学在医学中的地位及应用。 在医学中，临床生物化学是阐明疾病发生、发展及转归的分子机制，从本质上认识病变准确部位及具体环节，为寻找有效的预防和治疗靶点，疾病的诊断及病情和预后判断，提供理论基础的一门重要病理学学科。 其在医学中的应用主要包括：1. 揭示疾病发生的分子机制。2.通过对有关疾病生物化学改变的特征性生物标志检测方法的建立和实施，为判断有无及何种疾病提供客观依据。而动态观察这些标志物的改变，可对病情发展、转归、预后及治疗方案的制定和效果判断，提供依据。3. 临床检验生物化学技术，涵盖了当前医学研究中常用的主要方法技术。因此，也是医学特别是临床医学各个领域研究的一门共同性工具学科。 3. 简述临床检验生物化学的进展及发展趋势。 ①分子诊断学迅速发展，代表了的发展方向；②深入寻找高诊断特异性和灵敏性的新生物化学标志，提高诊断性能；③检测技术和方法的更新完善，更加及时、准确地提供检验结果；④全程质量管理；⑤以循证检验医学为基础，科学评价有关检测项目的诊断性能，合理有效地开展临床生物化学检验。 一、单项选择题(A型题) 1．转氨酶的辅酶是 A．磷酸吡哆醛 B．NADPH C．NADH D．FAD E．FMN 2．SI制中酶活性单位为 A．U/L B．Katal C．g/L D．ml/L E．pmol 3．酶的活性国际单位(U)是指 A．在25℃及其他最适条件下，每分钟催化lmol底物反应所需的酶量 B．在特定的条件下，每分钟催化1μmol底物发生反应所需的酶量 C．在37℃条件下，每分钟催化lmmol底物发生反应所需的酶量 D．在规定条件下，每秒钟催化lmol底物反应所需的酶量 E．在最适条件下，每小时催化lmol底物发生反应所需的酶量 4．目前我国临床实验室测定酶活性浓度推荐温度为 A．(25±0.1)℃ B．(37±0.5)℃ C．(37±0.3)℃ D．(37±0.1)℃ E．(37±1)℃ 临床生物化学实验原理、分析方法及检测技术 中国中医研究院广安门医院临床检测中心 生物化学实验——是把化学(分析技术)和生物化学(实验反应原理)的方法应用于疾病的诊断、治疗、监控的实验分支。 一个生化实验的最后测定结果应包括四大部分来完成。 一、实验反应原理及分析方法（理论依据） 二、实验检测技术（手段）生化仪的分析技术。 三、质量控制程序（质量保证）室内质控、室间质评、仪器、试剂、人员五要素。 四、临床意义（目的）咨询服务、异常结果的解释。 实验反应原理及分析方法(理论依据) 一个生物化学实验的反应原理设计，首先要找出所检测的化学特性，如测定体液（首先是血液）中酶的含量血液中除少数酶（如凝血溶血酶、铜氧化酶及假性胆碱脂酶等）含量较多外，血液正常生理状况下含量微乎其微。一般每毫升含微微克（Pg）水平，要直接测定如此微量物质是相当困难的。用免疫化学方法可测定全部酶蛋白分子含量（不论其有无活性）而用化学方法测定只能测定酶的催化活性，间接计算出酶的含量。目前利用酶具有催化活性这一特性，在临床上已普遍应用测定酶蛋白，同时还可以测定三大代谢的产物，如糖、脂类、蛋白质、这样也就建立起利用酶促反应的一级反应测定代谢物的方法。一级反应—反应速度与底物浓度成正比，因此只有当酶反应为一级反应时，才能准确测定底物含量，（如测定血糖、总甘油三脂、总胆固醇等）。从此在临床试剂盒的方法中出现了以酶为试剂测定各种代谢产物。 临床化学方法的分类 特别是自动生化仪方法的特点 以往临床化学实验都采用比色法进行各个项目的测定，这是因为比色法具有微量、迅速、准确的优点，特别适合于微量的生物体体液中各项物质测定。 在一般比色法中，手工使用比色计或分光光度计可以测定各种反应溶液的吸光度，但由于很难控制测定时间和反应温度，很难准确记录反应过程中吸光度变化，因此，毫不奇怪在很长一段时间内我们所使用的方法，都是在呈色反应达到完全或者反应达到平衡时，吸光度达到稳定时才进行测定。即所谓平衡法或终点法。 但自从自动生化仪出现后，从根本上改变了上述情况。通过各项先进技术，人们可以精确测定反应的动态过程。并可以准确计算任何一段反应时间内的反应速率，这样大大开阔了临床化学家对方法选择。除经典的终点法外还可以进行动态测定。这样不仅缩短了操作时间，大大提高了工作效率，还可进行一些用常规比色方法不能进行的测定。如测定酶反应的初速 度（V o ）等等。测酶初速度（V o ）只能用分光光度法。 因此，用好自动生化仪一个重要前提必须对自动生化仪可以提供的测试方法类型有所了解。 生化自动分析仪特点： 1 精确测定反应的动态过程； 2 准确计算任何一段反应时间内的反应速率； 3 除经典的终点法外还可以进行动态测定。 分析方法的分类 2020智慧树，知到《临床生物化学检验技术》章节测试完整答案 第一章单元测试 1、单选题： 临床生物化学是 选项： A:化学、生物化学与临床医学的结合，目前已发展成为一门成熟的独立学科 B:一门独立学科 C:研究器官、组织、人体体液的生物化学过程 D:以化学和医学知识为主要基础 答案: 【化学、生物化学与临床医学的结合，目前已发展成为一门成熟的独立学科】 2、判断题： 临床生物化学主要以体液为检测对象。 选项： A:错 B:对 答案: 【对】 3、判断题： 临床生物化学检验技术主要研究与疾病诊断、治疗和预防相关的生物化学标志物及其检测技术和方法。 选项： A:对 B:错 答案: 【对】 4、多选题： 目前临床检测标本包括： 选项： A:骨骼 B:脱落细胞 C:血液 D:尿液 答案: 【骨骼 ;脱落细胞 ;血液 ;尿液 】 5、多选题： 目前临床监测对象包括： 选项： A:妊娠期体内胎儿 B:出生后的病人 答案: 【妊娠期体内胎儿 ;出生后的病人 】 6、多选题： 目前临床生物化学检验包括 : 选项： A:急诊生化检验 B:普通生化检验 C:床旁生化检验 D:特殊生化检验 答案: 【急诊生化检验 ;普通生化检验 ;床旁生化检验 ;特殊生化检验 】 7、判断题： 根据不同的疾病，对检验项目进行合理的组合，有利于疾病的诊断、提高疗效和预后评估 选项： A:错 B:对 答案: 【对】 8、判断题： 急诊生化检验;开展临床紧急需求的、小规模的检验项目，能迅速地汇报检验结果. 选项： A:对 B:错 答案: 【对】 9、判断题： 床旁生化检验:一些小型的生化分析仪放置在病人床旁或医疗现场 ,使得能快捷、方便地得到检验结果 选项： A:错 B:对 答案: 【对】 10、多选题： 临床生物化学检验实验室需要： 选项： A:建立行之有效的临床生物化学实验室质量管理体系 B:增强与临床的沟通及开展临床生物化学检验咨询 C:为疾病的诊断、治疗和疾病的预防提供重要的信息答案: 【建立行之有效的临床生物化学实验室质量管理体系 ;增强与临床的沟通及开展临床生物化学检验咨询 ;为疾病的诊断、治疗和疾病的预防提供重要的信息 1、糖酵解：指从葡萄糖至乳糖的无氧分解过程，可生成2分子ATP。是体内糖代谢最主要途径。最终产物：乳酸。依赖糖酵解获得能量：红细胞。 2、糖氧化——乙酰CoA。有氧氧化是糖氧化供能的主要方式。1分子葡萄糖彻底氧化为CO2和 H2O，可生成36或38个分子的ATP。 3、糖异生：非糖物质转为葡萄糖。是体内单糖生物合成的唯一途径。肝脏是糖异生的主要器官。防止乳酸中毒。 4、血糖受神经，激素，器官调节。 5、升高血糖激素：胰高血糖素（A细胞分泌），糖皮质激素和生长激素（糖异生）,肾上腺素（促进糖原分解）。 降低血糖激素：胰岛素（B细胞分泌）（唯一） 6、糖尿病分型：Ⅰ型：内生胰岛素或C肽缺，易出酮症酸中毒，高钾血症，多发于青年人。 Ⅱ型：多肥胖，具有较大遗传性，病因有胰岛素生物活性低，胰岛素抵抗，胰岛素分泌功能异常。 特殊型及妊娠期糖尿病。 7、糖尿病的诊断标准：有糖尿病症状加随意血糖≥11.1 mmol/L；空腹血糖（FVPG）≥7.0 mmol/L；（OGTT）2h血糖≥11.1 mmol/L。初诊需复查后确证。 8、慢性糖尿病人可有：白内障（晶体混浊变形），并发血管病变以心脑肾最重。 9、糖尿病急性代谢并发症有：酮症酸中毒（DKA，高血糖，尿糖强阳性，尿酮体阳性，高酮血症，代谢性酸中毒，多＜40岁，年轻人），高渗性糖尿病昏迷（NHHDC，血糖极高，＞ 33.6mmol/L，肾功能损害，脑血组织供血不足，多＞40岁，老年人），乳酸酸中毒（LA）。 10、血糖测定：葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法（GOD-POD法）。己糖激酶法（HK）：参考方法（＞7.0mmol/L称为高血糖症。＜2.8mmol/L称为低血糖症。） 11、空腹低血糖反复出现，最常见的原因是胰岛β细胞瘤（胰岛素瘤）。胰岛B细胞瘤临床特点：空腹或餐后4—5h发作，脑缺糖比交感神经兴奋明显，有嗜睡或昏迷，30%自身进食可缓解故多肥胖。 12、血浆渗透压=2（Na+K）+血糖浓度。 13、静脉血糖〈毛细血管血糖〈动脉血糖。 14、血糖检测应立即分离出血浆（血清），尽量早检测，不能立即检查应加含氟化钠的抗凝剂。 15、肾糖阈：8.9—10.0mmol/L。 16、糖耐量试验：禁食10—16h，5分钟内饮完250毫升含有75g无水葡萄糖的糖水，每30分钟取血一次，监测到2h，共测量血糖5次（包括空腹一次）。 常规生化检验项目各项指标参考范围及临床意义(1) 1、谷丙转氨酶——ALT：正常参考值0-40IU/L 增高：常见于急慢性肝炎，药物性肝损伤，脂肪肝，肝硬化，心梗，胆道疾病等。 2、谷草转氨酶——AST：正常参考值0-40I/L 增高：常见于心梗，急慢性肝炎，中毒性肝炎，心功能不全，皮肌炎等。 3、转肽酶——GGT：正常参考值0-40IU/L 增高：常见于原发性或转移性肝癌，急性肝炎，慢性肝炎活动期，肝硬化，急性胰腺炎及心力衰竭等。 4、碱性磷酸酶——ALP：正常参考值30-115IU/L 增高：常见于肝癌，肝硬化，阻塞性黄疸，急慢性黄疸型肝炎，骨细胞瘤，骨折及少年儿童。 5、乳酸脱氢酶——LDH：正常参考值90-245U/L 增高：急性心肌梗塞发作后12-48小时开始升高，2-4天可达高峰，8-9天恢复正常。另外，肝脏疾病恶性肿瘤可引起LDH增高 6、总胆红素——TBIL：正常参考值 4.00-17.39umol/L 增高：原发生胆汁性肝硬化急性黄疸型肝炎，慢性活动期肝炎，病毒性肝炎。肝硬化，溶血性黄疸，新生儿黄疸，胆石症等。TBIL=DBIL+IBIL 7、直接胆红素——DBIL：正常参考值0.00-6.00umol/L 增高：常见于阻塞性黄疸，肝癌，胰头癌，胆石症等。 8、游离胆红素——IBIL：正常参考值0.00-17.39umol/L 增高：见于溶血性黄疸，新生儿黄疸，血型不符的输血反应 9、总蛋白——TP：正常参考值55.00-85.00g/L 增高：常见于高度脱水症（腹泄、沤吐、休克、高热）及多发性骨髓瘤。 降低：常见于恶性肿瘤，重症结核，营养及吸收障碍，肝硬化，肾病综合症，烧伤，失血。TP=ALB+GLB 10、白蛋白——ALB：正常参考值35.00-55.00g/L 增高：常见于严重失水而导致血浆浓缩，使白蛋白浓度上升。降低：基本与总蛋白相同，特别是肝脏，肾脏疾病更为明显，见于慢性肝炎、肝硬化、肝癌、肾炎等。如白蛋白30g/L,则预后较差。 生化检验习题 第一章临床生物化学实验室基本技术与管理 一、A型选择题 1．在荧光定量分析法中，下列哪种不是影响荧光强度的因素（） A．荧光物质的浓度B．溶剂的性质C．荧光物质的摩尔吸光系数 D．温度E．溶液的pH值 2．琼脂糖凝胶电泳用pH8.6的巴比妥缓冲液可以把血清蛋白质分成五条区带，由正极向负极数起它们的顺序是（） A．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白 B．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白 C．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β-球蛋白 D．α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白、白蛋白 E．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、α2-球蛋白 3．在区带电泳中，能产生电荷效应和分子筛效应的固体支持介质有（） A．醋酸纤维素薄膜、纤维素、淀粉B．纤维素、淀粉、琼脂糖 C．硅胶、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶D．淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶 E．醋酸纤维素薄膜、硅胶、纤维素 4．利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是（） A．凝胶层析法B．吸附层析法C．分配层析法D．亲和层析法 E．离子交换层析法 5．通过在波片或硅片上制作各种微泵、阀、微电泳以及微流路，将生化分析功能浓缩固化在生物芯片上称（） A．基因芯片B．蛋白质芯片C．细胞芯片D．组织芯片E．芯片实验室 6．离心机砖头的旋转速度为20000γ/min的离心为（） A．低速离心B．平衡离心C．高速离心D．超速离心E．等密度离心7．标本条码下有10个阿拉伯数字，其中第4～5位表示（） A．标本号B．标本类型C．组合号D．月份E．日期 8．由实验室自己配置或为商品，其中有关物质的量由参考方法定值的标准品为（）A．一级标准品B．二级标准品C．控制物D．参考物E．原级参考物9．经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法为（）A．决定性方法B．推荐方法C．参考方法D．常规方法E．对比方法10．测定恒定误差的试验是（） A．重复性试验B．回收试验C．线性试验D．干扰试验E．检测能力试验二．X型选择题 1．酶免疫分析的基本技术组成为（A B C E ） A．应有高活性的酶和高质量的酶标抗体B．最佳固相载体和抗体包被技术 C．最佳酶作用的底物D．通过电场来精确控制整个分析过程 E．检测放大系统及再生技术 2．免疫比浊测定应注意的事项为（A B C D E ） A．抗原或抗体量不能大大过剩B．应维持反应管中抗体蛋白量始终过剩 C．高血脂标本易受干扰D．易受环境温度和pH值的影响 E．加入聚合剂可促进免疫复合物的形成 （共1 页、第1 页） 课程名称：临床生物化学及生物化学检验课程内容：绪论 教师姓名：刘继英职称：副教授教学日期：2008 年9 月2 日14 时—18时 授课对象：检验系05级1、2 班（本科）教材版本：《临床生化与检验》四版周新授课方式：课堂讲授学时数： 4 听课人数：100人 本单元或章节的教学目的与要求： 1、掌握临床生物化学的性质、任务和领域。 2、了解临床生物化学的发展、现状以及与临床医学的关系。 3、掌握血液标本的采集 4、掌握影响血标本成份变化的因素 5、熟悉其它标本的采集与管理 授课主要内容及学时分配： 1、临床生物化学的研究内容和性质 2、临床生物化学的发展史简要回顾及其作用 3、临床生物化学的主要内容及国内外、刊物 4、血液标本的采集 5、影响血标本成份变化的因素 6、其它标本的采集与管理 重点、难点及对学生要求（包括掌握、熟悉、了解、自学） 1、掌握临床生物化学的性质、任务和领域 2、熟悉临床生物化学的发展史简要回顾及其作用 3、了解临床生物化学的发展、现状以及与临床医学的关系。 4、掌握血液标本的采集 5、掌握影响血标本成份变化的因素 6、熟悉其它标本的采集与管理 外语词汇：clinical biochemistry ：serum plasad 辅助教学情况：多媒体课件 复习思考题： 1、临床生物化学的研究内容是什么？ 2、临床生物化学在医学中有和应用？ 参考资料：《临床生物化学及生物化学检验》第2版 主任签字：08 年9 月 1 日教务处制刘弘毅 （共1 页、第1 页）课程名称：临床生物化学及生物化学检验课程内容：质量控制 教师姓名：刘继英职称：副教授教学日期：2008 年9月9日14 时—18时授课对象：检验系05年级1、2 班（本科）教材版本：《临床生化与检验》四版周新授课方式：课堂讲授学时数：4 听课人数：100人 本单元或章节的教学目的与要求： 1、了解控制物的种类和使用 2、熟悉全面质量控制的内容 3、掌握临床生物化学室内质量控制的方法、步骤和常规质控图的制作 4、掌握临床生物化学室间质量评价的条件、组织方法和统计方法 授课主要内容及学时分配： 1、全面质量控制的内容及意义 2、室内质量控制的方法、步骤和常规质量控制图的绘制及应用 3、室间质量评价的条件、组织形式、统计方法及结果分析 重点、难点及对学生要求（包括掌握、熟悉、了解、自学） 1、了解控制物的种类和使用 2、熟悉全面质量控制的内容 3、掌握临床生物化学室内质量控制的方法、步骤和常规质控图的制作 4、掌握临床生物化学室间质量评价的条件、组织方法和统计方法 外语词汇：IQC EQA 辅助教学情况：多媒体课件 复习思考题：1、全面质量控制的内容是什么？ 2、失控的表现有哪些？ 参考资料：《临床生物化学及生物化学检验》第2版 主任签字：刘弘毅08年9 月 1 日教务处制生化全套检查项目及临床意义
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