熊果酸的含量测定
微波-超声辅助协同萃取-高效液相色谱法测定
新疆野蔷薇根中总皂苷的含量
其买古丽·阿沙木，努尔皮达·阿卜拉江，迪丽努尔·马里克*（新疆师范大学化学化工学院,新疆乌鲁木齐840054）
摘要：建立了用微波-超声辅助提取，高效液相色谱测定野蔷薇根中总皂苷的方法，以野蔷薇根总皂苷含量为考察标准，研究了提取时间、乙醇浓度、微波-超声功率、料液比这四个因素对总皂苷含量的影响。该方法线性范围宽，检测限为0.3μg/L，平均相对标准偏差2.2%，加标回收率在99~104%之间。结果表明，该方法的灵敏度高并且具有较好的重复性、准确性及稳定性。
关键词：野蔷薇根；总皂苷；超声；微波；HPLC法。
Determination of total saponins in Rosa multiflora Thunb by Microwave-ultrasonic assisted extraction -high performance liquid chromatography (HPLC)
QIMANGUL·Hasan，NURPIDA·Ablajan，DILNUR·Malik
(School of chemistry and chemical engineering xin jiang normol university，Urumqi 830054）Abstract： A microwave-ultrasonic assisted extraction-high performance liquid chromatography(HPLC) method for the determination of total saponins in Rosa multiflora Thunb was established ，Regarding the content of total saponins in Rosa multiflora Thunb as the index of investigation, the factors such as the extraction time, ethanol concentration, power of microwave, ratio of solid to liqud as affecting the content of total saponins were studied.Under the optimum extraction conditions,the method yields a good linearity and the low limits of detection are 0.3 μg/L.The recovery was between 99%～104% with relative standard deviation was2.2% . The results shown that the method has Good Repeatability, sensitivity ,stability and accuracy. Keywords: Rosa multiflora Thub; Total saponins; Ultrasonic; Microwave; HPLC 野蔷薇（Rosa multiflora Thub）属于蔷薇科蔷薇属植物，野蔷薇富含多种人体所需的营养物质[1-2]，有较大开发利用价值，现代研究证明，野蔷薇中含有熊果酸、齐墩果酸等三萜类化合物[3]。三萜类化合物是自然界中一类重要化合物，*基金项目：国家自然科学基金（21165018）项目资助
作者简介：其买古丽，女，（维吾尔族）硕士研究生，主要从事天然产物的研究。
联系作者：迪丽努尔.马里克（1964-），女，教授，主要从事天然产物研究。（pkudilnur@https://www.sodocs.net/doc/1c12961980.html,）
具有广泛的生理活性，有溶血、抗癌、解热、抗炎、镇痛、抗菌和抗病毒作用[4]。
总皂苷（Total saponins）是存在于植物界的一类比较复杂的苷类化合物，按其苷元结构可分为甾体皂苷和三萜皂苷。它的分子式C30H48O3分子质量456，它具有溶血，止血，提高血小板内C AMP含量，降低血小板凝剂，降低血脂，清除血自由基，扩张冠脉，扩张血管，降低心肌耗氧量抗心律失常，抗炎，抗氧化，镇痛作用，抗纤维化，抗衰老，抗肿瘤，目前主要应用之中在心脑血管系统疾病何种去神经系统疾病[5]。
由于其广泛的生物学活性,近年来国内外对其提取、含量测定等方面进行了大量的研究工作[6-10]。由于超声微波协同萃取与传统提取方法相比具有快速、高效、安全可靠、环保等优点，本实验采用超声微波协同萃取新疆野蔷薇根中总皂苷并且尝试利用HPLC方法对新疆野蔷薇根中总皂苷进行测定，HPLC方法简单、分离度好、精密度高、分析时间短，可用于实际样品的测定，对开发新疆野蔷薇有一定的参考价值。
1.试验材料，试剂与仪器
1.1材料
蔷薇根：采自阿勒泰县，粉碎，过筛，备用。
1.2 试剂
齐墩果酸标准品（中国药品生物制品检定所），无水乙醇，甲醇（色谱纯），超纯水，乙腈（色谱纯）。
1.3 仪器
高效液相色谱仪（安捷伦1200LC，美国）；色谱柱（安捷伦公司HC-C184.6×150mm,粒径为5μm）；XH300B型微波超声波组合合成∕萃取仪（北京样祥鹄科技发展有限公司生产）；SHZ_D(Ⅲ)型循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂生产)；RE_52AA型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂生产）；AL204型电子天平（梅特勒—托利多仪器有限公司生产）。
2．试验方法
2.1.色谱条件
AgilentHC-C18(4.6mm×150mm，粒径为5um）色谱柱，分别选取流动相乙腈-水，甲醇-水，乙腈和酸度不同的去离子水，同时对不同流速，不同控制温度进
行实验。
2.2标准溶液的配制、线性范围及最低见出线
精密称取干燥至恒重的齐墩果酸对照品2.4mg置于10ml容量瓶中,，加甲醇定容至刻度，摇匀得浓度为0.24mg/ml的对照品储备液，置于冰箱中密封保存。准确量取储备液用甲醇定容，配成不同浓度的溶液，即0.024mg/ml，0.048mg/ml，0.096mg/ml，0.144mg/ml，0.192mg/ml，0.24mg/ml超声处理30min，并用0.45μm 微孔滤膜过滤，待仪器进行使用。并测定出最低检出限。
2.3野蔷薇根样品前处理
准确称取粉碎后的野蔷薇根5g于100mL圆底烧瓶中，在一定料液比、溶剂浓度、温度、功率、提取时间等条件下微波超声波组合合成∕萃取仪提取一定时间，取出过滤，将滤渣重复提取2次后过滤，合并3次所得滤液进行减压浓缩。将浓缩溶液分别放入25mL容量瓶用甲醇定容至刻度，取上清液用0.45μm微孔虑膜过滤，待仪器进行使用。
2.4 样品回收率实验
选用在空白样品中添加齐墩果酸标准溶液的浓度0.17mg/ml，每个加标水平重复5次，测定总皂苷的回收率。
2.5正交试验因素水平设计
根据已有的资料和实际情况，试验选用提取时间、乙醇浓度、微波-超声功率、料液比作为考察因素，采用L9(34)正交表进行优选。正交试验各因素水平如表1 所示。
表1 因素水平表
Table1 factors level table
水平A提取时间/min B料液比(g/mL) C功率/w D乙醇浓度/％
1 10 1:10 400 85
2 20 1:15 500 90
3 30 1:20 600 95
3, 结果与分析
3．1 色普条件的优化
最佳波长的选择：在206～380nm 下，对48ug/ml的齐墩果酸进行扫描，结果
选择254nm 为实验最佳吸收波长，该色谱条件下可以降低最小检测量。
HPLC 分离条件的确定：流动相由乙腈和水（0.01%磷酸水溶液）组，因为使用乙腈能更快的获得极限的稳定，改善峰形，缩短出峰时间。如用乙腈-水作流动相不能获得很好的峰形而且峰托尾，改用0.01%磷酸水溶液-乙腈作流动相可以峰形较大改善。随着酸性的加大峰形更好，但酸度过高对色谱柱造成损伤。因此以乙腈–去离子水（0.01%磷酸水溶液）选为流动相，即乙腈：水=12：88 。根据已有的资料和实际情况（柱子温度对分离度影响较小），结果柱温选为30℃，流速0.8mL/min。
综上所述，高效液相色谱操作条件确定为：流动相乙腈：水=12：88，流速0.8mL/min，紫外检测波长254nm，柱温30℃，进样量为20μl。在该色谱条件下齐墩果酸标准品的色谱图（如图1），保留时间为3.39min。
图1 对照品色谱图
Figure 1 reference substance chromatogram
图2 样品色谱图
Figure 2 sample chromat
3．2 回归方程、相关系数与检出限
取6种不同浓度的标准溶液，即0.024、0.048、0.096、0.144、0.192、0.24mg/ml，依次进样20μL ，在选定色谱条件下对每个质量浓度进行3次测定，以峰面积为纵标，对照品浓度为横坐标做标准曲线(见图3)，得回归方程：y=36617.8008x-194.58907 ，相关系数R2=0.998。线性范围0.024～0.24mg/ml 。按照仪器振动峰3倍的峰可以计算出齐墩果酸的浓度，该浓度成为检出限，检出限为0.3ug/l 。
图3 齐墩
果酸标准品工作曲线
Figure 3 oleanolic acid standard product work curve
3. 3加样回收率
选用在空白样品中添加齐墩果酸标准溶液的浓度0.17mg/ml，每个加标水平重复5次，测定野蔷薇跟中总皂苷的回收率和标准偏差，结果如表2所示，样品加标色谱图见图2
表2回收率与精密度
Table 2 recovery rate and prec
样品测定量加入量测出总量回收率/％ RSD/％(n=5) 1.91 1.02 2.94 100.1
1.92 1.02
2.96 101.9
1.91 1.02
2.92 99.0 2.2
1.90 1.02
2.94 101.9
1.94 1.02 3.01 104
3．4 正交试验结果
以齐墩果酸提取率为指标，对表1 所选定的考察因素做L9(34)正交试验，其结果见表3。由试验结果并通过极差R的大小可知,各试验因素对总皂苷提取率影响的大小次序为：C>A>D>B，即对野蔷薇根中总皂苷提取影响最大的因素是微波-超声提取功率,其后依次为微波-超声提取时间、乙醇浓度和料液比。最佳
提取条件是：C
3A
3
B
1
D
2
，微波-超声提取时间30min，乙醇浓度90%，功率600w，
料液比1:10表2L9(34)正交试验设计及结果。
表3正交试验
Table 3 orthogonal test
1 1 1 1 1 15.9
2 1 2 2 2 19.9
3 1 3 3 3 21.4
4 2 1 2 3 19.3
5 2 2 3 1 23.0
6 2 3 1 2 21.1
7 3 1 3 2 24.3
8 3 2 1 3 16.0
9 3 3 2 1 15.3
K1 57.2 59.5 54.2 64.2
K2 63.4 58.9 65.3 57.7
K3 55.6 57.8 56.7 65.3
R 7.8 1.7 11.1 7.6
4 . 结论
用超声微波协同组合仪提取野蔷薇根中总皂苷，对提取效果影响因素依次为微
波-超声提取功率、提取时间、乙醇浓度、料液比。最佳提取工艺条件是：C
3A
3
B
1
D
2
，
微波-超声提取时间30min，乙醇浓度90%，功率600w，料液比1:10。高效液相色谱法测定了野蔷薇根总皂苷含量测定。高效液相色谱法的条件为柱温30℃，流动相为乙腈：去离子水= 88:12 (v/v)，流速为0.8 mL /min，检测波长为254nm 。该色谱条件下总皂苷含量为24.3g/kg，精密度为2.2% ，回收率101.4%
实验结果表明，超声微波协同萃取与传统提取方法相比它具有提取率高，提取时间短，高校等特点。HPLC法测定的精密度比用紫外-可见分光光度法高, 简便准确地测定野蔷薇根中总皂苷的含量，准确度和稳定性好
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齐墩果酸和熊果酸保护神经的药理作用综述
齐墩果酸和熊果酸保护神经的药理作用综述 齐墩果酸（oleanolic acid）和熊果酸（ursolicacid）同属五环三萜酸类化合物，它们又是同分异构体，因此药理作用几乎相同。现已证实齐墩果酸和熊果酸都具有抗炎、降糖、调脂、抗肥胖、抗动脉粥样硬化药理作用[1-4],有望成为抗代谢综合征新药。代谢综合征可诱发神经系统方面的并发症，如脑中风、疼痛、糖尿病脑病、痴呆等。我国正在步入老龄社会，尤其是很多大城市已经进入老龄社会，老年性神经精神疾病如老年痴呆、帕金森病等发病率快速增长，而目前又缺乏安全有效、毒副作用低的防治老年性神经精神疾病药物。齐墩果酸和熊果酸除了通过抗代谢综合征阻滞神经系统并发症外，已有大量实验研究发现齐墩果酸和熊果酸具有神经保护作用。本文综述齐墩果酸和熊果酸保护神经细胞、镇痛、抗精神失常、改善学习记忆等神经精神药理方面的研究进展，为齐墩果酸和熊果酸防治老年痴呆、帕金森病和抑郁症的研发提供依据。 1 对离体神经细胞的保护 β 淀粉样肽、过氧化氢、谷氨酸、6-羟基多巴胺等都具有神经毒性作用，能直接损伤神经细胞引起的神经元凋亡和神经功能障碍。齐墩果酸和熊果酸对这些神经毒素引起的离体神经细胞损伤都有保护作用。 1.1 对抗β 淀粉样肽的神经毒性 PC12 细胞源自大鼠髓质嗜铬细胞瘤，为神经源性细胞，具有多巴胺能神经特性，被广泛用作神经细胞体外模型，常被用来筛选神经保护药物。齐墩果酸（20、40、80 mg/L）预处理PC12 细胞，可浓度相关地对抗β 淀粉样肽诱导乳酸脱氢酶渗漏，提高PC12 细胞存活率，降低细胞凋亡率。这种神经保护作用可能与齐墩果酸促进抗凋亡基因bcl-2 表达，抑制促凋亡基因bax 表达有关[5].Hong 等[6]报道熊果酸0.5~125 μmol/L浓度相关的抑制β淀粉样肽诱导PC12 细胞产生活性氧，从而减少DNA 断裂和细胞凋亡。也可通过抑制上游激酶ERK1/2、p38和JNK 磷酸化，阻滞核因子-κB（NF-κB）的p65亚单位核易位，抑制β 淀粉样肽诱导PC12 细胞表达诱生型一氧化氮合酶和环氧化酶-2,阻止神经炎症反应发生[7].Wilkinson 等[8]报道熊果酸阻滞β 淀粉样肽与小神经胶质细胞结合并抑制活性氧生成。用表达人CD36 的中国仓鼠卵巢细胞实验，发现熊果酸浓度相关地阻滞β淀粉样肽与其受体CD36结合，浓度增至20 μmol/L 时作用达到峰值，最大抑制率为64%,认为熊果酸通过阻滞β 淀粉样肽与CD36结合，抑制前炎性细胞因子和神经毒活性氧产生，从而阻断神经变性发生。 1.2 对抗过氧化氢的神经毒性 Yu 等[9]报道熊果酸0.05~2 mg/L通过诱生抗氧化酶过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和抑制脂质过氧化反应，对抗过氧化氢损伤HEI-OC1 听觉细胞。Rong 等[10]报道齐墩果酸1、10 μmol/L 可对抗过氧化氢损伤PC12 细胞，表现为显着降低乳酸脱氢酶活性和丙二醛水平，逆转低下的线粒体膜电位、琥珀酸脱氢酶和超氧化物歧化酶活性、还原型谷胱甘肽水平，从而提高PC12 细胞存活率。Cho 等[11]报道齐墩果酸通过对抗过氧化氢升高细胞内钙离子浓度和活性氧生成，抑制过氧化氢诱导大鼠皮质神经元凋亡。 1.3 对抗谷氨酸、6-羟基多巴胺的神经毒性 当熊果酸在低浓度（5~15 μmol/L）时对抗谷氨酸受体激动剂红藻氨酸诱导大鼠海马神经元自由基形成、线粒体膜电位下降[12].熊果酸在0.5、1mmol/L 高浓度时还显着对抗去极化试剂KCl 升高大鼠大脑皮质神经细胞内钙离子浓度，抑制谷氨酸大量释放，保护神经细胞免受兴奋性神经毒物的伤害[13-14].宋小丹等[15]报道齐墩果酸1、10、100 μmol/L都能对抗谷氨酸诱导大鼠海马神经元钙离子超载性损伤。Ndlovu 等[16]报道低浓度6-羟基多巴胺
熊果酸含量测定方法研究进展
熊果酸含量测定方法研究进展 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 【关键词】熊果酸；含量测定方法 熊果酸（ursolie acid，UA）又名乌索酸、乌苏酸，属于三萜类化合物，广泛存在于熊果、白花蛇舌草、女贞子、乌梅等天然植物和草药中，具有抗炎、护肝、降血脂等多种生物学活性［1～4］。目前许多中药材及其制剂常选用熊果酸的含量作为其质量控制指标。本文对熊果酸含量测定方法的研究进展综述如下。 1 分光光度法 李国章等［5］建立了湘产3种苦丁茶中熊果酸含量测定的分光光度法，具体操作是取苦丁茶经索氏提取器提取后，加入5%香草醛－冰醋酸、高氯酸显色，在波长548 nm处测定吸光度，结果熊果酸在4～20 μg·ml-1浓度范围内线性关系良好，加样回收率为98.96%。罗启剑等［6］采用同样方法测定了连钱草中熊果酸含量，结果熊果酸在0～18 μg·ml-1浓度范围内线性关系良好，加样回收率为100.64%。 2 薄层扫描法
白洁等［7］采用双波长薄层扫描法测定了夏枯草中熊果酸的含量，具体操作为取夏枯草药材粗粉经95％乙醇超声提取两次，滤液用70℃水浴蒸干，残渣用石油醚浸泡两次，挥干溶剂，用95％乙醇溶解后测定。采用硅胶G板，以环己烷－氯仿－醋酸乙酯（20∶5∶8）为展开剂，用10％硫酸乙醇溶液显色，选用λS=540 nm，λR=700 nm进行双波长反射式锯齿扫描，结果熊果酸在0.314～1.570 μg范围内线性关系良好，加样回收率为99.3％。张军等［8］建立了狼疮静颗粒中熊果酸的薄层扫描法测定方法，具体操作为取狼疮静颗粒用乙醚萃取3次，合并乙醚萃取液水浴蒸干乙醚，残留物加无水乙醇－氯仿（3∶2）混合液溶解后测定，以环己烷－氯仿－醋酸乙酯－甲酸（20∶5∶8）为展开剂，用10％的硫酸乙醇液显色，以λS=520 nm，λR=700 nm进行双波长薄层扫描，结果熊果酸在0.498～3.084 μg范围内线性关系良好，加样回收率为97.91％。 3 高效液相色谱法 3.1 HPLC－UV法戚志华等［9］采用HPLC法测定了陕西女贞子中熊果酸的含量，其方法为取女贞子粉末经超声提取后采用HPLC法，选用Lichrospher C18（ 4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，流动相为乙腈－甲醇－水－磷酸－三乙胺（50∶30∶20∶0.02∶0．04），流速1 ml·min-1，测定波长为205 nm，结果熊果酸在20.48～102.4 μg范围内线性关系良好，加样回收率为100.6％。梁洁等［10］采用HPLC法测定了广西产美味猕猴桃根中熊果酸的含量，具体操作为取
富含粗纤维的食物有哪些
富含粗纤维的食物有哪些 富含粗纤维的食物有哪些 1、富含粗纤维的食物有哪些 谷物：粗纤维含量为4～10%,从多到少排列为小麦粒、大麦、玉米、荞麦面、薏米面、高粱米、黑米。薯类：粗纤维含量约为3%,分别有马铃薯、白薯、竹薯、木薯等。豆类：粗纤维含量为6～15%,从多到少排列为黄豆、青豆、蚕豆、芸豆、豌豆、黑豆、红小豆、绿豆。麦片食物,在燕麦中所含有的粗纤维含量高达8-9%,而在燕麦片中所含有的粗纤维含量有5-6%。 蔬菜：粗纤维含量为30～40%,分别有蕨菜、菜花、菠菜、南瓜、白菜、牛皮菜、芹菜、韭菜、黄豆菜、黄花菜、香椿、香菜、茄子、油菜、茭白、笋干、芦笋、洋葱、青椒、辣椒。菌类(干)：松蘑、发菜、香菇、银耳、木耳、金针菇。藻类：粗纤维含量在20%左右,主要紫菜、海带。坚果：黑芝麻、松子、杏仁、白芝麻、核桃、榛子、胡桃、葵瓜子、西瓜子、花生仁。 2、粗纤维食物的好处 常吃粗纤维食物能治疗习惯性便秘。较大量的膳食纤维混在食物中,可以使食物的容量增加,形成较大的粪团,这使肠道蠕动时,易于将食物残渣推送。预防结肠炎、结肠癌。根据流行病学调查结果,在膳食中含有大量纤维素的人群,出现结肠炎及结肠癌的机会较少。膳食纤维还可对机体内胆固醇代谢发生影响。膳食纤维可抑制胆固醇的吸收,由于纤维素可与胆固醇结合,故可降低脂类的吸收水平,包括对胆固醇的吸收。因而可预防动脉粥样硬化。粗纤维能够对如肥胖、高血脂、糖尿病等这些病起到一定的预防和治疗作用。
3、粗纤维食物的分类 3.1、可溶性膳食纤维,如果胶、树胶和黏胶,它们可溶于水,主要存在于水果、燕麦、大麦和部分豆类中。 3.2、不溶性膳食纤维,大多数膳食纤维都属不溶性,如纤维素和半纤维素等。市场上大部分粗纤维食品中都添加了含有这类不溶性膳食纤维的粗粮和杂粮,如玉米、麦麸、米糠等。 富含粗纤维的水果 1、奇异果含有较多的膳食纤维和寡糖、蛋白质分解酵素,能帮助人体肠胃消化,吸附和带走肠道内很多有害物质及油腻脂肪,快速清除体内堆积的有害代谢产物。 2、梨富含膳食纤维,能促进胃肠蠕动,使积存在体内的有害物质大量排出,避免便秘。 3、木瓜除了含有丰富膳食纤维外,还含有蛋白分解酵素、番瓜素,可帮助分解肉肉,减轻胃肠的工作量。 4、香蕉里丰富的食物纤维和果胶可使香蕉在大肠中吸收大量的水分,使粪便松软,有助于排泄。 5、苹果除了含有丰富的膳食纤维外,它所含的半乳糖醛酸对排毒也很有帮助,而其果胶则能避免食物在肠内腐化。 6、草莓含有果胶和丰富的膳食纤维,可以帮助消化、通畅大便。 粗纤维食物食用注意 1、不宜过多食用,营养学上对于粗纤维的推荐摄入量是每人每天20-35克,
乌梅药材中齐墩果酸和熊果酸的高效液相色谱含量测定(一)讲解
乌梅药材中齐墩果酸和熊果酸的高效液相色谱含量 测定(一) 作者：范成杰，刘友平，陈鸿平，石宇华 【摘要】目的应用高效液相色谱（HPLC）法测定乌梅药材中齐墩果酸和熊果酸的含量，并以齐墩果酸和熊果酸为指标成分建立乌梅肉的质量标准。方法采用Hypersil ODS C18(150 mm×4.6 mm, 5 μm)；甲醇－0.2%乙酸铵水溶液（83∶17）为流动相；检测波长210 nm，流速0.8 ml/min，柱温25℃。结果 齐墩果酸的线性范围为0.168～1.512 μg，r＝0.999 6，回收率为98.00%（RSD=0.53%）；熊果酸的线性范围为0.452～4.068 μg，r=0.999 9，回收率为97.13%（RSD=1.17%）。结论该方法简便、可靠、准确，可用于乌梅药材中 齐墩果酸和熊果酸的含量比较和乌梅肉的质量控制。 【关键词】高效液相色谱法乌梅肉齐墩果酸熊果酸 Abstract：ObjectiveTo determine the ursolic acid and oleanolic acid in the pulp of Fructus Mume by HPLC. MethodsThe ursolic acid and oleanolic acid were separated on C18 column.Methanol-0.2% Ammonium acetate solution (83∶17) was used as mobile phase and the detection wavelength was 254nm.ResultsThe linearity of ursolic acid and oleanolic acid was in the range of 0.168～1.512μg, 0.452～4.068μg, respectively; the average recoveries of ursolic acid and oleanolic acid were 98.00%(RSD=0.53%,n=5) and 97.13%(RSD=1.17%,n=5). ConclusionThe method is simple, quick and reproducible，and it can be used for the quality control of the pulp of Fructus Mume. Key words：HPLC; Pulp of Fructus Mume; Ursolic acid; Oleanolic acid 乌梅，别名酸梅、黑梅，由蔷薇科植物梅Prunus mume (Sieb.) Sieb. et Zucc.（Armeniaca mume Sieb.）的干燥近成熟果实加工而成。关于乌梅的入药方式，历代本草记载有去核和连核使用两种，现代研究证明乌梅中有效成分有机酸及水浸出物大多集中在果肉中，核含量甚少〔1〕，且核仁含大量脂肪油成分，具滑泄作用，与乌梅的固涩作用相驳；同时也有报道认为乌梅核特征明显，有利于乌梅的鉴定，而且乌梅核还含有约5％的有机酸，且去核繁琐费时 费工〔2〕，所以乌梅是否应分部位药用仍存在争议。《中国药典》Ⅰ部（2005年版）中，净乌梅和乌梅肉都有收载〔3〕。因此明确乌梅的入药方式，是建立乌梅规范的质量标准的前提。本课题组前期对乌梅各部位的化学成分进行了初步比较研究，结果表明乌梅各部位的药理作用不同，代表乌梅涩肠止泻作用的主要药用部位为乌梅果肉。本实验以齐墩果酸和熊果酸为对照品，建立了乌梅
熊果酸的含量测定
微波-超声辅助协同萃取-高效液相色谱法测定 新疆野蔷薇根中总皂苷的含量 其买古丽·阿沙木，努尔皮达·阿卜拉江，迪丽努尔·马里克*（新疆师范大学化学化工学院,新疆乌鲁木齐840054） 摘要：建立了用微波-超声辅助提取，高效液相色谱测定野蔷薇根中总皂苷的方法，以野蔷薇根总皂苷含量为考察标准，研究了提取时间、乙醇浓度、微波-超声功率、料液比这四个因素对总皂苷含量的影响。该方法线性范围宽，检测限为0.3μg/L，平均相对标准偏差2.2%，加标回收率在99~104%之间。结果表明，该方法的灵敏度高并且具有较好的重复性、准确性及稳定性。 关键词：野蔷薇根；总皂苷；超声；微波；HPLC法。 Determination of total saponins in Rosa multiflora Thunb by Microwave-ultrasonic assisted extraction -high performance liquid chromatography (HPLC) QIMANGUL·Hasan，NURPIDA·Ablajan，DILNUR·Malik (School of chemistry and chemical engineering xin jiang normol university，Urumqi 830054）Abstract： A microwave-ultrasonic assisted extraction-high performance liquid chromatography(HPLC) method for the determination of total saponins in Rosa multiflora Thunb was established ，Regarding the content of total saponins in Rosa multiflora Thunb as the index of investigation, the factors such as the extraction time, ethanol concentration, power of microwave, ratio of solid to liqud as affecting the content of total saponins were studied.Under the optimum extraction conditions,the method yields a good linearity and the low limits of detection are 0.3 μg/L.The recovery was between 99%～104% with relative standard deviation was2.2% . The results shown that the method has Good Repeatability, sensitivity ,stability and accuracy. Keywords: Rosa multiflora Thub; Total saponins; Ultrasonic; Microwave; HPLC 野蔷薇（Rosa multiflora Thub）属于蔷薇科蔷薇属植物，野蔷薇富含多种人体所需的营养物质[1-2]，有较大开发利用价值，现代研究证明，野蔷薇中含有熊果酸、齐墩果酸等三萜类化合物[3]。三萜类化合物是自然界中一类重要化合物，*基金项目：国家自然科学基金（21165018）项目资助 作者简介：其买古丽，女，（维吾尔族）硕士研究生，主要从事天然产物的研究。 联系作者：迪丽努尔.马里克（1964-），女，教授，主要从事天然产物研究。（pkudilnur@https://www.sodocs.net/doc/1c12961980.html,）
熊果酸抗肿瘤作用机制的研究进展
Studies in Synthetic Chemistry 合成化学研究, 2016, 4(3), 19-27 Published Online September 2016 in Hans. https://www.sodocs.net/doc/1c12961980.html,/journal/ssc https://www.sodocs.net/doc/1c12961980.html,/10.12677/ssc.2016.43003 文章引用: 孟艳秋, 杨丽娜, 潘洪双, 于婷婷, 张伟晨, 宁梓廷. 熊果酸抗肿瘤作用机制的研究进展[J]. 合成化学研究, Research Progress on Antitumor Action Mechanism of Ursolic Acid Yanqiu Meng, Lina Yang, Hongshuang Pan, Tingting Yu, Weichen Zhang, Ziting Ning Shenyang University of Chemical Technology, Shenyang Liaoning Received: Oct. 1st , 2016; accepted: Oct. 16th , 2016; published: Oct. 21st , 2016 Copyright ? 2016 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). https://www.sodocs.net/doc/1c12961980.html,/licenses/by/4.0/ Abstract Ursolic Acid is a type of pentacyclic triterpene compounds with many kinds of pharmacological ac-tivities, especially its antitumor activity. The antitumor mechanism of ursolic acid is multifaceted. In this paper, the research progress of anti-tumor mechanism of ursolic acid has been reviewed and forecasted. Keywords Ursolic Acid, Antitumor, Action Mechanism 熊果酸抗肿瘤作用机制的研究进展 孟艳秋，杨丽娜，潘洪双，于婷婷，张伟晨，宁梓廷 沈阳化工大学，辽宁 沈阳 收稿日期：2016年10月1日；录用日期：2016年10月16日；发布日期：2016年10月21日 摘 要 熊果酸是一种具有多种药理活性的五环三萜类化合物，其抗肿瘤活性尤为显著。熊果酸的抗肿瘤机制是多方面的。本文对熊果酸的抗肿瘤作用机制的研究进展进行综述并进行展望。 Open Access
熊果酸药理作用研究进展
熊果酸药理作用研究进展 ，相对分子量456 科植物毛子草的地上部分熊果酸具有广泛的 之 对致癌、促癌物有抵抗作用 多研究认为，熊果酸能通过化学预防、抗突变、细胞生长抑制和细胞毒等作用来抑制 到预防恶性肿瘤的目的。癌的发生、发展一般要经历始发突变、促癌和演变三阶段，干扰三个阶段即可达到延缓或阻止
显增加，部分细胞在
熊果酸在自然界中分布广泛，资源丰富，具有化学预防，保肝、抗肝炎，抗肿瘤、抗菌、抗病毒等多种药理活性，熊果酸药用开发景已被众多研究机构所重视，有望成为一种高效低毒的多用途新药。 【参考文献】 1 李开泉，陈武，熊筱娟，等.乌索酸的化学、药理及临床应用进展.中成药，2002， 2 4（9）:709-711. 2 Muto Y，Ninomiya M，Fujiki H.Present status of research on cancer chemopre vention in Japan.Jpn J Clin Oncol，1990，20（3）:219-221. 3 黄镜，孙燕.熊果酸的抗肿瘤活性.中国新药杂志，1997，6（2）:101-104. 4 Niikawa M，Hayashi H，Sato T，et al.Isolation of substances from glossy prive t（Ligustrum lucidum Ait）inhibiting the mutagenicity of benzo（α）preene in bacteri a.Mutat Res，1993，319（1）:1-4. 5 Young HS，Chung HY，Lee CK，et al.Ursolic acid inhibits aflatoxin B1-induced mutagenicity in a Salmonella assay system.Biol Pharm Bull，1994，17（7）:990-99 3. 6 Huang MT，Ho CT，Wang ZY，et al.Inhibition of skin tumorigenesis by rosema ry and its constituents carnosol and ursolic acid.Cancer Res，1994，54（3）:701-70 5. 7 Ohigashi H，Takamura H，Koshimizu K，et al.Search for possible an-titumor p romoters by inhibition of12-O-tetrade-canoylphorbol-13-acetate-induced Epstein-Barr v irus activation;ursolic acid and oleannolic acid from an anti-inflammatory Chinese m edicnal plant，Glechoma hederaceae L.Cancer Lett，1986，30（2）:143-148. 8 Ames BN.Dietary carcinogens and anticarcinogens.Science，1983，221:1256-12 58. 9 Balanehru S，Nagarajan B.Protective effect of oleanolic acid and urso-lic acid against lipid peroxidation.Biochem Int，1991，24（5）:981-984.
不同产地及外观形态夏枯草中齐墩果酸和熊果酸的含量比较
不同产地及外观形态夏枯草中齐墩果酸 和熊果酸的含量比较 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 【摘要】目的比较不同产地、长度、色泽的夏枯草中齐墩果酸和熊果酸的含量，为更全面地控制夏枯草的质量提供依据。方法采用高效液相色谱法，以Shim Pack C18为色谱柱，乙腈甲醇水乙酸铵(体积比68∶16∶16∶0.5)为流动相，检测波长为215 nm，流速为0.8 mL/min。结果与结论不同产地夏枯草中齐墩果酸和熊果酸的含量差异较大，果穗短者两者含量高于果穗长者，紫红色果穗者两者含量高于棕色果穗。 【关键词】夏枯草产地果穗齐墩果酸熊果酸 Abstract:Objective To compare the contents of oleanolic acid and ursolic acid in Prunella vulgaris with different appearances and from different provenances,in order to control the quality of Prunella vulgaris.Methods Samples were analyzed on a Shim Pack C18 column. The mobile phase consisted of acetonitrile methol water ammonium acetate (68∶16∶16∶0.5)
under a flow rate of 0.8 mL·min-1. The detection wavelength was set at 215 nm.Results and Conclusions There were large differences in contents of oleanolic acid and ursolic acid among Prunella vulgaris with different provenances and appearances, higher in Prunella vulgaris with short and mauve ears. This method was suitable for the quality control of Prunella vulgaris. Key words:Prunella vulgaris;oleanolic acid;ursolic acid 夏枯草Prunella vulgaris为常用中药，以干燥果穗或全草入药，主要用于治疗目赤肿痛、头痛眩晕、瘰疬瘿瘤、乳痈肿痛、高血压等[1]。夏枯草中含有三萜及苷类、苯丙素类、黄酮类等多种化学成分，其中齐墩果酸和熊果酸是主要活性成分[2,3]。目前文献报道有采用衍生化气相色谱法、毛细管胶束电动色谱法、高效液相色谱法等方法评价夏枯草的质量[4-6]，但对于不同产地、长度、色泽的夏枯草中这两种三萜酸的含量比较还未见报道。本文以高效液相色谱法测定并比较不同产地、长度、色泽夏枯草样品中齐墩果酸及熊果酸的含量，旨在为更全面控制夏枯草的内在质量提供依据。 1 仪器与试药 Agilent 1100高效液相色谱仪：包括G1313A自动进样器，Agilent ChemStations数据处理软件，美国安捷伦科技有限公司;齐墩果酸对照品、熊果酸对照品：中国药品生物制品检定所，批号分别为110709200304、110742200516;乙腈：色谱纯，美国TEDIA公司;甲醇：分析纯及色谱纯，江苏汉邦科技有限公司;石油醚、乙酸铵：
熊果酸的功效与作用
熊果酸是由天然植物中的一种三萜类化合物而来，具特殊的气味，是存在于天然植物中的一种五环三萜类化合物。那么熊果酸具体有哪些的作用与功效呢？下边不妨一起来简单了解一下吧。 一、熊果酸的作用及功效 据临床医学表示，熊果酸中有的有益分子，非常显著而迅速的可以降低谷丙转氨酶、血清转氨酶等，对于消退小儿黄疽以及增进食欲等方面都有很好的促进，而对于抗纤维化和恢复肝功能症状，效果也非常的明显，而且还特别的稳定。熊果酸还具备有非常明显的抗氧化功效，这也使得它成为医药及化妆品方面的常备原料，例如医药方面对于肝部的治疗非常有益，能够保护并稳定稳定肝细胞膜、细胞器，从而使输出、运输等功能相继慢慢的恢复，在化妆品方面，由于熊果酸有很好的抗氧化作用，能使肌肤具有抵抗力，与此同时还有效淡化皱纹、修肌肤等皮肤难题。且熊果酸其实还是一味天然的保湿剂，大病可以调理，小病可以医治，又给人们带来不少的惊喜。
二、含量测定标准 1、色谱条件： 硅胶G薄层板;环己烷-氯仿-乙酸乙酯(20:5:8)为展开剂，上行展开;展距12～18cm;5%硫酸乙醇溶液，110℃加热5min显色。 2、样品溶液的制备： 精密称取栀子粉碎样品20g (炒栀子按得率折合后称取)，置索氏提取器内，加乙醚300ml回流提取至无色，回收溶剂至干，残留物加石油醚浸泡2次，每次15ml，约浸泡2min，倾去石油醚，用无水乙醇-乙醚(2：3)混合液微热使溶解并定容于5ml量瓶中，作为样品溶液。 3、对照品溶液的配制： 精密称取熊果酸对照品适量，加无水乙醇：乙醇(3：2)的混合溶液制成每毫升含1mg的溶液，作为对照品溶液。 4、测定： 准确吸取样品溶液及对照品溶液2μl，点于同一薄层板上。按上述色谱条件展开，显色。照薄层扫描法扫描，λS=520nm，λR=700nm;双波长反射法锯齿
齐墩果酸与熊果酸结构修饰物的药理活性和构效关系研究进展_刘丹
齐墩果酸与熊果酸结构修饰物的药理活性和构效关系研究进展 刘丹1,2 孟艳秋23 赵娟2 (1天津大学药物科学与技术学院 天津 300072; 2沈阳化工学院制药工程教研室 沈阳 110142) 刘丹 女,35岁,副教授,主要从事天然活性成分的结构修饰和医药中间体的合成工作。 3联系人,E 2mail :myq6581@https://www.sodocs.net/doc/1c12961980.html, 辽宁省自然科学基金资助项目(20042009) 2005-12-12收稿,2006-08-15收稿 摘 要 齐墩果酸(OA )和熊果酸(UA )均属于五环三萜类化合物,广泛存在于自然界中,具有多种显著的 生物活性。本文综述了近年来齐墩果酸及熊果酸结构修饰物的药理活性和构效关系的研究进展。 关键词 齐墩果酸 熊果酸 结构修饰 药理活性 R ecent Advance in the Study on Derivatives of Oleanolic Acid and U rsolic Acid Liu Dan 1,2,Meng Y anqiu 23,Zhao Juan 2(1C ollege of Pharmaceuticals &Biotechnology ,T ianjin University ,T ianjin 300072;2Faculty of Pharmaceutical Engineering ,Shenyang Institute of Chemical T echnology ,Shenyang 110142) Abstract Oleanolic acid and urs olic acid belong to triterpene acids which having numerous pharmacological activities and widely presenting in food ,medicinal herbs and other plants.Here a brief introduction of the recent progresses on pharmacological activities and the structure-activity relationship of derivatives of olean olic acid and urs olic acid are given out. K ey w ords Oleanolic acid ,Urs olic acid ,M odification ,Pharmacological activities 齐墩果酸(oleanolic acid ,OA ,1)和熊果酸(urs olic acid ,UA ,2)为结构类似物,均属于五环三萜类化合物,在自然界分布十分广泛,且具有多种生物活性。为了寻找高效低毒的衍生物,需对齐墩果酸和熊果酸的作用机制进行深入的研究;通过对32位羟基,C 122C 13位双键和282位羧基等官能团的结构修饰合成了一系列衍生物,进行了相关的药理活性测试,并与母体进行比较,获得了相应的构效关系。本文将就齐墩果酸及熊果酸结构修饰物的药理活性和构效关系研究进展进行综述。 1 齐墩果酸及熊果酸化学及药理活性简介 齐墩果酸(C 30H 48O 3)属于β-香树脂醇型五环三萜类化合物,据不完全统计,它以游离形式或与糖结合的形式存在于大约60个科190种植物中[1],具有保肝[2,3]、消炎[4]、降糖[5]、抗HI V [6,7]和抗肿瘤[8～10]等药理作用。 熊果酸(C 30H 48O 3)为α-香树脂醇型五环三萜类化合物,以游离形式或与糖结合的形式存在于大约
熊果酸
打开的谱图文件：D:\10\熊果酸标准品3(00001).hw ───────────────────────────序号 保留时间 名称 峰面积% 峰面积 ─────────────────────────── 1 0.20 2 0.00464 3 118 2 0.23 3 0.001742 44 3 0.278 0.002292 58 4 0.444 0.009194 233 5 0.652 0.006404 163 6 0.922 0.006128 156 7 1.150 0.005266 134 8 1.199 0.002263 57 9 1.236 0.002975 76 10 1.453 0.009436 240 11 1.652 0.0075 190 12 1.803 0.001693 43 13 2.070 1.414 35901 14 2.659 0.09665 2454 15 2.777 0.1092 2773 16 3.084 1.454 36908 17 3.726 1.346 34185 18 4.277 0.2177 5529 19 4.675 0.4557 11571 20 4.886 0.322 8176 21 5.498 93.84 2382895 22 7.284 0.02985 758 23 7.588 0.006965 177 24 7.853 0.003855 98 25 8.058 0.01011 257 26 8.294 0.0007985 20 27 8.404 0.002138 54 28 8.594 0.00232 59 29 8.920 0.006411 163 30 9.097 0.003013 77 31 9.357 0.005584 142
山楂含片中熊果酸的含量测定
山楂含片中熊果酸的含量测定 目的建立山楂片中熊果酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定熊果酸。色谱柱：phenomenex Kinete x2.6u XB-C18 100A柱（100 mm×4.6 mm ，5μm），流动相：以乙腈-0.1%磷酸水洗脱，流速1.0ml/min，检测波长：210nm，柱温40℃。结果阴性对照无干扰，熊果酸在13.5～53.9ng范围内线性关系良好（r=0.9999），平均回收率为98.3%，RSD=0.9（n=9），该法操作简便，方法稳定，专属性强，可作为三箭草和堂山楂含片的质量控制方法。 标签：山楂含片；HPLC；熊果酸；含量测定 三箭草和堂山楂含片由山楂、白砂糖制成。山楂中富含熊果酸等成分，具有疏肝理气，活血化瘀，助消化等功效，主要用于治疗脂肪肝和肝纤维化等症状。本研究采用HPLC法对三箭草和堂山楂含片中指标成分熊果酸进行含量测定。经查阅文献，尚未有对其成分熊果酸做含量测定的报道。 1 仪器与试药 1.1 仪器Aglient 1260生物惰性四元高效液相色谱仪，德国梅特勒-托利多XA205DU电子分析天平。 1.2样品山楂含片：广西梧州三箭制药有限公司保健品厂出品（批号20120816，20121217，20120320）；阴性样品：按处方缺山楂按工艺制备。熊果酸对照品购于中国药品生物制品检定所（批号：110742-200517，供含量测定用）；其他化学试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件色谱柱phenomenex Kinete x2.6u XB-C18 100A柱（100 mm×4.6 mm ，5μm）；乙腈-0.1%磷酸水溶液（68：32）为流动相；流速为 1.0ml.min-1；检测波长为210nm。 2.2 对照品溶液的制备精密称取熊果酸对照品1.078mg置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成每1ml含107.8μg的溶液。 2.3 供试品溶液的制备精密量取本品粉末3g，置于50ml锥形瓶中，精密加入20ml甲醇，称定重量，超声20min，放置室温后用甲醇补足重量，摇匀，用微孔滤膜（0.22μm）滤过，取续滤液，即得。 2.4 测定法分别精密吸取对照品和供试品溶液各4μl，注入高效液相色谱仪，测定峰面积积分值。按外标法以峰面积计算，即得。 2.5 专属性考察取阴性样品，按2.3制备阴性供试品溶液，按2.1 色谱条
粗纤维含量高的食物有哪些
粗纤维含量高的食物有哪些 我们每天都会吃大量的食物，每一种食物都有它自己的作用，而且每一种食物都对人体的健康有一定好处。生活中让我们尤为注意的是纤维含量高的食物，因为这类食物的营养价值比一般熟的营养价值要高很多，所以我们要多加注意才行。那么纤维含量高的食物有哪些呢？我们在生活中又该怎么利用纤维含量高的 食物呢？ 粗纤维食物有哪些 现在城市生活节奏加强，除了运动、听音乐等方式来
放松意外，还可以通过吃来放松。这你可能没想到吧，可以帮助大家放松的功臣就是粗纤维食物。 粗纤维食物可以解压，放松心情。吃的愉快又健康。 粗纤维中营养含量较少，而且不易消化，很长时间以来，人们都认为它对健康没什么作用。但随着生活水平越来越高，人们的膳食结构日趋"西化",肉越吃越多，粮食和蔬菜却越吃越少，膳食纤维的摄入也就越来越少，出现了很多与生活方式有关的病，如肥胖、高血脂、糖尿病等。这时候，人们才发现，粗纤维能够对这些病起到一定的预防和治疗作用。
现代营养学的研究表明，多吃粗纤维食物有4大好处：一是能够促进肠蠕动，帮助身体加速新陈代谢，改善胃肠道功能，能够防治便秘、预防肠癌；二是改善血糖生成反应，降低餐后血糖含量，帮助治疗糖尿病；三是降低血浆中的胆固醇含量，防治高脂血症和心血管疾病；四是控制体重，减少肥胖病的发生。 每天20克就够了 ,此类食物对人类健康食物有利。 粗纤维食物是指每百克食物含粗纤维2克以上的食物。
豆类 有杂粮玉米、玉米小米、高梁、荞麦、燕麦、木薯、番薯、竹薯、黄豆、青豆、绿豆、赤豆、黑豆、豌豆、豇豆、蚕豆、红枣、粟子、核桃、花生。 菜类 黄豆芽、芹菜、韭菜、大蒜苗、黄花菜、香椿、青椒、毛豆、茭白、竹笋、鞭笋、芦笋、洋葱、芥菜、牛皮菜、