血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定(赖氏法)

授课对象：06级检验1-5班

课时：2学时

血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定（赖氏法）

目标：1.掌握赖氏法测血清ALT的原理及注意事项

2.掌握试剂的配制熟练地制作标准曲线

3.规范地进行ALT测定

4.了解血清ALT测定的临床意义

实验用品：配制试剂用的各种器皿（烧杯、容量瓶、电炉、分析天平等）、37℃水浴箱、721型风光光度计、坐标纸等

原理：

丙氨酸和α-酮戊二酸在血ALT的作用下生成丙酮酸及谷氨酸，在酶反应达到规定时间时，加入2.4-二硝基苯肼-盐酸溶液以终止反应。生成的丙酮酸与入2.4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸入2.4二硝基苯腙，苯腙在碱性条件下显红棕色。根据显色之深浅，求得血清中丙氨酸氨基转移酶活力。

试剂：

1. 0.1molPH7.4磷酸盐缓冲液称取磷酸氢二钠（Na2HPO4AR）11.928g,磷酸二氢钾（KH2PO4AR）

2.176g，加少量蒸馏水溶解并稀释至1000mL。

2. ALP基质液称取DL丙氨酸[CHCH（NH）COOH]1.79g，α-酮戊二酸[COOH （COCOOH）29.2mg于烧杯中，加入0.1mol/L PH7.4磷酸盐缓冲液80mL,煮沸溶解后待冷，用摩尔NaOH溶液调节PH至7.4（约加入0.5ml），再用0.1mol/LPH7.4磷酸盐缓冲液稀释至100mL,混匀，加氯仿数滴，置冰箱保存数周。

3．1mmol/L2.4-二硝基苯肼溶液称取 2.4-二硝基苯肼[（NO）CHNHNH AR]19.8mg，用10mol/L HC110mL溶解，然后加蒸馏水至100mL，置棕色瓶内，冰箱保存。

4．0.4mol/L NaOH溶液。

5．2mmol/L丙酮酸标准液精确称取丙酮酸钠[CHCOCOONa AR]22.0mg于

100mL容量瓶中，加0.1mol/L PH7.4磷酸盐缓冲液至刻度。此液应新鲜配制，不得久放。

操作：

血清ALT测定步骤（赖氏法）

加入物（mL）R B

血清0.1 0.1

ALP基质液0.5 —

混匀，置37o C水浴30min

2.4-二硝基苯肼0.5 0.5

ALP基质液—0.5

混匀，置37o C水浴20min

0.4mol/L NaOH 5.0 5.0

将上述两管混匀，10min后，用蒸馏水调零，λ=505nm比色读取各管吸光度值，用测定管A-对照管A，查标准曲线得ALT活力单位。

血清ALT测定步骤（赖氏法）标准曲线制作：

加入物（ml）0 1 2 3 4 5

2mmol/L丙酮酸标准液0 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 ALP基质液0.5 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25 0.1mol pH7.4磷酸盐缓冲液0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1

混匀，置37o C水浴30min

2.4-二硝基苯肼溶液0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5

混匀，置37o C水浴20min

0.4mol/L NaOH 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 相当于ALT单位0 28 57 97 150 200 混匀，10min后，用蒸馏水调零，λ=505nm比色读取各管吸光度值，将各管之系光度减去0号管吸光度值后，以吸光度为纵坐标，各管相应的ALT单位为横坐标，绘制标准曲线。

结果报告：

被检者———————

血清ALT——————U——[＜35U]

报告者————————————年————月————日

临床意义：

1．赖氏法的酶活力单位是用卡门法所测出的酶活力单位相当于用本法所生成的丙酮酸量的相关系数套用卡门单位而来，卡门单位的定义：在规定表件下（血清1ml，反应液总量3ml，在25o C下作用1min，用内径1cm 的比色杯），测定340nm波长处吸光度减少值（A），每减少0.001为一个酶活力单位。

2．血清对照管吸光度基本相同，因此同一批标本只做2～3个血清对照管求其平均即可。亦可以空白管替代对照管。但脂血、溶血和黄疸血清应单独做对照管。

3.测定结果超过200卡门单位时，应将血清稀释后在进行测定，结果乘以稀释倍数。

4. 酶测定中，温度、时间对酶的活力影响很大，故应控制好测定时的温度（要求准确到37±0.5o C），并准确掌握保温时间。

5. 配制底物液时，如改用改L—型丙氨酸，则应按上法减半量用（因ALT只作用与L-型丙氨酸）。

6. 丙酮酸钠的纯度，对曲线有明显影响，纯度低曲线斜率就低，使查得的酶活力单位显著增高。故应选择外观洁白、干燥的丙酮酸钠使用。

7. 丙酮酸的显色受温度影响，故应于季节变化时及底物成份之批号更换时重新制作标准曲线。

8．于α-酮戊二酸也能与2.4-二硝基苯肼作用生成苯腙而显色，为了减少其对丙酮酸测定的干扰作用，底物中α-酮戊二酸的浓度很低，不能保证酶反应的充分进行；且2.4-二硝基苯肼的浓度也比较低，因此标准曲线不呈直线。

课后小结：

谷草转氨酶的正常值

谷草转氨酶的正常值 养生之道网导读：谷草转氨酶的正常值是多少？谷草转氨酶是医学临床上肝功能检查的指标，用来判断肝脏是否受到损害。那么，谷草转氨酶的正常值是多少呢？一起来了解下。 一、谷草转氨酶的正常值： 谷草转氨酶，又名天门冬氨酸氨基转移酶，英文缩写AST 或GOT，是转氨酶中比较重要的一种。一个健康人正常情况下，谷草转氨酶的正常参考值为13～35U/L（单位每升）。正常情况下，谷草转氨酶存在于组织细胞中，其中心肌细胞中含量最高，其次为肝脏，血清中含量极少。谷草转氨酶主要存在于肝细胞线粒体内，当肝脏发生严重坏死或破坏时，才能引起谷草转氨酶在血清中浓度偏高。 谷草转氨酶偏高，肝炎患者转氨酶数值老是居高不下，反映肝细胞炎症始终未停止，肝细胞肿胀、坏死等病变持续存在。测定血清中此酶含量可用以协助诊断疾病和观察愈后。 二、谷草转氨酶的检测结果意义： 1、显着增高：各种急性肝炎，大手术后。 2、中度增高：肝癌、肝硬化、慢性肝炎、胆道阻塞性疾病。 3、轻度增高：进行性肌肉损害，胸膜炎、肾炎、肝炎等。

三、谷草转氨酶高的临床意义： 1、谷草转氨酶高可以提示心肌梗死或心肌炎。 2、谷草转氨酶高可以反映肝细胞损伤严重，甚至患者已经到了肝硬化的程度。 3、谷草转氨酶高更能反映肝细胞受损伤的严重程度。 四、影响谷草转氨酶的因素： 临床上，假如乙肝（乙型病毒性肝炎）病程过长、慢性化程度高、肝细胞实质损害重、预后较差者，通常表现为谷草转氨酶偏高，谷丙转氨酶/谷草转氨酶小于1.0。 早期肝硬化（liver及肝硬化（liver患者也会表现谷草转氨酶偏高，谷丙转氨酶/谷草转氨酶比值均在1.0以下。 健康人的谷草转氨酶水平也有可能暂时超出正常范围。剧烈运动、过于劳累或者近期吃过油腻食品，都可能使谷草转氨酶暂时偏高。 假如在检查肝功能前一晚加班工作，没睡好觉，或是体检前早餐时吃了油炸的东西，检查结果中谷草转氨酶可能就会超出正常范围。一个人刚刚在操场上跑了几圈，就立即检查他的谷草转氨酶水平，结果也可能会高出正常范围。 看了以上的介绍，现在你知道谷草转氨酶的正常值是多少了吧。体检时发现异常，最好再多做一次检查哦。

丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒(丙氨酸底物法)产品技术要求lepu

丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒（丙氨酸底物法） 适用范围：用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。 1.1 规格 试剂1:3×60 mL，试剂2:1×45 mL； 试剂1:1×60 mL，试剂2:1×20 mL； 试剂1:1×60 mL，试剂2:1×12 mL； 试剂1:4×60 mL，试剂2:4×15 mL； 试剂1:2×40 mL，试剂2:2×10 mL； 试剂1:3×28 mL，试剂2:3×7 mL； 试剂1: 1×4L，试剂2: 1×1L； 试剂1: 2×4L，试剂2: 1×2L。 1.2 主要组成成分 试剂1主要组分： 试剂2主要组分：

2.1 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1：无色或淡黄色透明溶液；试剂2：无色或淡黄色透明溶液。外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 2.3.1 试剂空白吸光度 应不小于1.0（波长340nm，光径1cm）。 2.3.2 试剂空白吸光度变化率 试剂空白吸光度变化率（△A/min）应不大于0.004。 2.4 分析灵敏度 测试100U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0025。 2.5 准确度 用参考物质(GBW09177)定值的血清测定，实测值与标示值的偏差不超过±12.0％。 2.6 重复性 批内变异系数（CV）应不大于5%。 2.7 线性 2.7.1在[0.5，800]U/L区间内，线性相关系数r应不低于0.9900； 2.7.2[0.5，96）U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±11.52U/L；[96，800]U/L 区间内，线性相对偏差应不超过±12%。 2.8 批间差

谷草转氨酶究竟是指的什么

谷草转氨酶究竟是指的什么 谷草转氨酶在目前的临床上，是在医学方面化验肝功能指标的，可以判断出肝功能是否有受损，一般正常人的肝脏谷草转氨酶的正常值是在规定范围之内，如果超出了这个正常范围之内，说明人的身体可能会正在受到肝脏疾病的困扰，需要及时的去诊断，只有这样才能保证不会出现问题。 ★分类 肝内的谷草转氨酶有2种同工酶，分别存在于肝细 胞的线粒体(mAST)和胞浆内(sAST)。在肝细胞轻度病变时，仅sAST释放入血;而当病变严重时，mAST也会相继释放入血。故血清AST活性随肝细胞损害的程度增高。 在HBV感染的肝炎和肝病时，AST随ALT较小幅度升高，或虽幅度较大而时间短暂，可能主要是sAST，临床意义与ALT相同;AST增高超过ALT，虽幅度并不太大而持续时间很长，可能主要是mAST，提示病变的慢性化和进展性。

★机理 正常情况下，谷草转氨酶存在于组织细胞中，其中心肌细胞中含量最高，其次为肝脏，血清中含量极少。谷草转氨酶主要存在于肝细胞线粒体内，当肝脏发生严重坏死或破坏时，才能引起谷草转氨酶在血清中浓度偏高。谷草转氨酶偏高，肝炎患者转氨酶数值老是居高不下，反映肝细胞炎症始终未停止，肝细胞肿胀、坏死等病变持续存在。测定血清中此酶含量可用以协助诊断疾病和观察愈后。 ★正常值 谷草转氨酶正常值是4-40U/L(单位每升)。 由于医院使用试剂的不同，以上正常值只供参考。 ★检测方法

空腹12小时取静脉血。也就是说，在检查谷草转氨酶前12小时，应保持空腹，不能进食，否则会引起检查结果出现偏差。 ★临床症状 临床上，如果乙肝病程过长、慢性化程度高、肝细胞实质损害重、预后较差者，通常表现为谷草转氨酶偏高，谷丙转氨酶/谷草转氨酶小于1.0。早期肝硬化及肝硬化患者也会表现谷草转氨酶偏高，谷丙转氨酶/谷草转氨酶比值均在1.0以下。谷草转氨酶高的临床症状，也是肝炎的常见症状，一般有低烧、厌油、恶心、呕吐、乏力、食欲差、肝脏肿痛等。 总之，如果发现自己谷草转氨酶高了，不要过于紧张，不要担心自己患了严重的肝脏疾病，但是也一定要给予足够的重视，好好休息，及时接受正规复查和治疗。 ★肝功能指标 谷草转氨酶是肝功能检查中的一项重要指标，高了说明肝脏

血清丙氨酸氨基转移酶值偏高的原因

如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 血清丙氨酸氨基转移酶值偏高的原因 导语：可能大家对于丙氨酸氨基转移酶还是不太熟悉的吧，其实丙氨酸氨基转移酶是我们体内参与蛋白质代谢的一种酶，丙氨酸氨基转移酶的值是比较固定 可能大家对于丙氨酸氨基转移酶还是不太熟悉的吧，其实丙氨酸氨基转移酶是我们体内参与蛋白质代谢的一种酶，丙氨酸氨基转移酶的值是比较固定的，我们可以通过观察丙氨酸氨基转移酶的值来知道我们肝脏的功能，如果丙氨酸氨基转移酶的值偏高或者偏低我们就应该引起重视才行。 谷丙转氨酶升高临床意义就在于对急性乙型肝炎、慢性肝炎、HBV 携带者、重型肝炎以及肝硬化、肝癌等一系列病毒性肝炎的诊断和分析，ALT的升高只表示肝脏可能受到了损害。除了肝炎，其他很多疾病都能引起谷丙转氨酶转氨酶升高。 在急性肝炎及慢性肝炎与肝硬化活动，肝细胞膜的通透性改变，谷丙转氨酶就从细胞内溢出到循环血液中去，这样抽血检查结果就偏高，转氨酶反映肝细胞损害程度。但谷丙转氨酶缺乏特异性，有多种原因能造成肝细胞膜通透性的改变，如：疲劳、饮酒、感冒甚至情绪因素等等。上述原因造成的转氨酶增高一般不会高于60个单位，转氨酶值高于80个单位就有诊断价值，需到医院就诊。另外需要注意，谷丙转氨酶活性变化与肝脏病理组织改变缺乏一致性，有的严重肝损患者谷丙转氨酶并不升高。因此肝功能损害需要综合其他情况来判断。 当丙氨酸氨基转移酶偏高时会出现食欲减退、恶心、呕吐、黄疸、肝区疼痛等症状，这些症状都会在丙氨酸氨基转移酶偏高时表现出来。有丙氨酸氨基转移酶高的症状并不一定是肝炎引起的，应及时确定谷丙转氨酶高的原因，建议检查乙肝两对半明确是否有乙肝病毒感染， 预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏

丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒(丙氨酸底物法)产品技术要求beihuakangtai

丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒(丙氨酸底物法) 适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。 1.1包装规格： 试剂1：10ml×10（干粉复溶后的体积）；试剂2：100ml×1。 1.2组成成份： 试剂1：α－酮戊二酸15mmol/L，乳酸脱氢酶≥1200U/L，L-丙氨 酸500mmol/L，NADH 0.18mmol/L； 试剂2：Tris 缓冲液100mmol/L。 2.1外观：试剂1为干燥粉末，试剂2为澄清溶液，外包装完整。 2.2 净含量：不少于标示值。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度：A≥1.0（波长340nm，光径10mm）。 2.3.2试剂空白吸光度变化率：△A/min≤0.004（波长340nm，光径10mm）。2.4 分析灵敏度：浓度为100U/L时,吸光度变化率应在-0.2～-0.01范围内。2.5 线性区间 2.5.1线性相关系数：[1，500]U/L范围内，线性相关系数r≥ 0.9900。 2.5.2线性偏差：[1，100] U/L时，绝对偏差不超过±10U/L；（100, 500] U/L 时，相对偏差不超过±10%。 2.6 精密度 2.6.1 重复性：重复测定高、低两个水平浓度的质控血清，变异系数（CV）≤5.0%。 2.6.2批内瓶间差：用高、低两个水平浓度的质控血清重复测试同一批号及同一瓶试剂，CV≤5.0%。

2.6.3批间差：用同一质控血清测试3个不同批号的试剂，相对极差≤10%。2.7 准确度：测定国家标准物质，相对偏差应不超过±10%。 2.8 稳定性 2.8.1效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃贮存有效期为24个月。保存至有效期末进行测定，试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.6.2、2.7的要求。 2.8.2复溶稳定性：工作液18℃～25℃可稳定8小时，2℃～8℃可稳定3天。测定结果满足2.5、2.7的要求。

赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶

实验十九 赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶 【原理】 L-丙氨酸 + α-酮戊二酸 α-丙酮酸 + L-谷氨酸 α-丙酮酸 + 2，4-二硝基苯肼 2，4-二硝基苯腙 （红棕色，λ=505nm ） 利用比色分析原理将样品显色与丙酮酸标准品配制成的系列标准液比较，求出样品中丙氨酸氨基转移酶（ALT ）活性。 【试剂】 1．0.1mol/L 磷酸二氢钾溶液 称取KH 2PO 4 13.61g ，溶解于蒸馏水中，加水至1 000ml ，4℃保存。 2．0.1mol/L 磷酸氢二钠溶液 称取Na 2HPO 414.22g ，溶解于蒸馏水中，并稀释至1 000ml ，4℃保存。 3．0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.4） 取420ml 0.1mol/L 磷酸氢二钠溶液和80ml 0.1mol/L 磷酸二氢钾溶液，混匀，即为pH7.4的磷酸盐缓冲液。加氯仿数滴，4℃保存。 4．基质缓冲液 精确称取D-L-丙氨酸1.79g ，α-酮戊二酸29.2mg ，先溶于0.1mol/L 磷酸盐缓冲液约50ml 中，用1mol/L NaOH 调pH 至7.4，再加磷酸盐缓冲液至100ml ，4～6℃保存，该溶液可稳定2w 。每升底物缓冲液中可加入麝香草酚0.9g 或加氯仿防腐，4℃保存。配成200mmol/L 丙氨酸与2.0mmol/Lα-酮戊二酸基质缓冲液。 5．1.0mmol/L 2，4-二硝基苯肼溶液 称取2，4-二硝基苯肼（AR ）19.8mg ，溶于1.0mol/L 盐酸100ml ，置棕色玻璃瓶中，室温中保存，若冰箱保存可稳定2个月。若有结晶析出，应重新配制。 6．0.4mol/L NaOH 溶液 称取NaOH 1.6g 溶解于蒸馏水中，并加蒸馏水至100ml ，置具塞塑料试剂瓶内，室温中可长期稳定。 7．2.0mmol/L 丙酮酸标准液 准确称取丙酮酸钠（AR ）22.0mg ，置于100ml 容量瓶中，加0.05mol/L 硫酸至刻度。此液不稳定，应临用前配制。丙酮酸不稳定，开封后易变质（聚合），相互聚合为多聚丙酮酸，需干燥后使用。 8．待测标本 病人血清或质控血清。 【操作步骤】 1．ALT 校正曲线绘制： （1）按表19-1向各管加入相应试剂。 表19-1 ALT 各标准管的配制方法 加入物（ml ） 1 2 3 4 5 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 2.0mmol/L 丙酮酸标准液 0 0.05 0.10 0.15 0.20 基质缓冲液 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 2,4-二硝基苯肼溶液 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 混匀，37℃水浴20min ??→?ALT ???→?碱性条件下

一谷草转氨酶

1,谷草转氨酶:又名天门冬氨酸氨基转移酶，是转氨酶中比较重要的一种，分别存在于肝细胞线粒体和细胞胞浆内。肝功能检查的指标，用来判断肝脏是否受到损害。 2,谷丙转氨酶((GPT、ALT)：谷丙转氨酶顾名思义是谷氨酸和丙酮酸之间的氨基转移酶，(蛋白质代谢时的生物化学反应形式之一就是氨基酸分子上氨基发生转移).GPT主要存在于肝细胞浆内，其细胞内浓度高于血清中1000-3000倍。只要有1%的肝细胞坏死，就可以使血清酶增高一倍。因此，GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。 3,胆红素：红细胞中血红蛋白代谢产物。体内的胆红素大部分来自衰老红细胞裂解而释放出的血红蛋白。血红蛋白分子中的血色素会分解成为正铁血红素和血红素。正铁血红素生成胆绿素,胆绿素再生成胆红素。经肝脏处理后的胆红素叫直接胆红素，反之叫间接胆红素。胆红素组成胆汁的重要成分，储存在胆囊,随胆汁排入肠道，最后经大便排出，少部分经肠道再吸收入血经肾脏随尿排出。间接胆红素与直接胆红素之和就是总胆红素。上述的任何一个环节出现障碍，均可使总胆红素增高，人就发生黄疸。如果红细胞破坏过多，产生的间接胆红素过多，肝脏不能完全把它转化为直接胆红素，可以发生溶血性黄疸；当肝细胞发生病变时，或者因胆红素不能正常地转化成胆汁，或者因肝细胞肿胀，使肝内的胆管受压，排泄胆汁受阻，使血中的胆红素升高，这时就发生了肝细胞性黄疸；一旦肝外的胆道系统发生肿瘤或出现结石，将胆道阻塞，胆汁不能顺利排泄，而发生阻塞性黄疸。肝炎患者的黄疸一般为肝细胞性黄疸，也就是说直接胆红素与间接胆红素均升高，而淤胆型肝炎的患者以直接胆红素升高为主 5,总蛋白: 血液(准确称血桨或血清)中蛋白质总量.增高：主要是血清中水分减少，使总蛋白浓度相对增高，如高度脱水所致血液浓缩（腹泻、呕吐、休克、高热、大量出汗）及多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等；慢性肾上腺皮质功能减退时，钠丢失继发水分丢失，进而促使血浆出现浓缩现象。降低：各种原因引起的水钠潴留，使血浆被稀释，或静脉注射过多的低渗溶液而形成血浆中总蛋白降低。肝功能障碍，则肝脏合成蛋白质减少，主要以白蛋白的 下降明显。 6, 白蛋白:由肝脏合成，是正常人体血清总蛋白中的主要蛋白质成分。增高：主要由于血液浓缩而致相对性增高，如严重脱水和休克、严重烧伤、急性出血、慢性肾上腺皮质功能减低症。 减低：见于肝硬变合并腹水及其他肝功能严重损害（如急性肝坏死、中毒性肝炎等）、营养不良、慢性消耗性疾病、糖尿病、严重出血、肾病综合征等。当降低至25g／L以下，易生腹水。 7,球蛋白:总蛋白减去白蛋白后的主要蛋白.由人体免疫器官生成.因具有免疫性也称免疫球蛋白.球蛋白检测常用于肝病的判断。例如肝病中的慢性乙肝、酒精肝、药物性肝损伤、肝硬化等都会引起球蛋白高 8,白蛋白/球蛋白：肝脏功能判断指标。比值降低表示肝功能降低 9,,前白蛋白: 又称转甲状腺素蛋白，由肝细胞合成。在急性炎症、恶性肿瘤、肝硬化或肾炎时其血浓度下。.前白蛋白可作为实体瘤患者化疗后肝功能损害的预见性指标。在接受化疗的实体瘤患者中,在化疗前PA下降群体中发生肝功能损害概率为72.2%,而在化疗前PA 正常群体中为4.4%,两者之间存在统计学差异(P<0.01)。 10,胆汁酸：胆汁酸是胆汁的主要成分，在脂肪代谢中起着重要作用。增高:肝胆疾病,血清胆汁酸的测定，对于检测肝细胞毒性药物急性中毒患者的肝损伤，以及跟踪检测此类患者的肝功能均具有重要价值。在检测肝细胞毒性药物的治疗剂量效应方面，血清总胆汁酸水平也是一项重要的检测指标。

丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程

1.检测目的 用于定量测定人体血清或血浆中丙氨酸氨基转移酶的含量 2.检测原理 IFCC速率法：谷丙转氨酶催化L-丙氨酸的氨基转移，生成丙酮酸。丙酮酸与NADH在LDH的催化下反应生成乳酸和NAD+。NADH在340nm处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中ALT的活性成正比，在340nm处测定NADH下降速率，即可测出ALT活性。 ALT L-丙氨酸+ a-酮戊二酸---------- 丙酮酸+ L-谷氨酸 LDH NADH + 丙酮酸+ H+---------- L-乳酸+ NAD+ 3．适用范围 血清，或用肝素抗凝的血浆 4．试剂 1.试剂品 迈瑞公司ALT试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

由迈瑞公司提供的校准液,在更换试剂批号或出现质控漂移；仪器进行保养；仪器重要零件更换后进行校准。 3.质控品 由迈瑞公司提供的定值质控血清，在每一批标本测定前做质控血清一次，采用Westgard多规则质控规则，如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，在确认重新恢复控制状态后开始标本检测。 4.仪器 迈瑞BS-800型号仪器 5．操作步骤 装载试剂—→进行校准—→进行质控—→输入标本检测项目—→加载标本—→标本测定—→结果复核—→报告 6．注意事项 1.不能测试严重溶血、脂浊、黄疸的标本, 血浆标本可用肝素抗凝,待测样品室 温不超过24小时，可于2℃-8℃保存72小时。 2.不能使用过期的试剂，2℃-8℃保存。 3.定标液，质控液应在冰冻保存。 7.结果计算 ΔA/min×V t×1000 ALT(U/L) = ----------------------------- e×V s×d 式中：ΔA/min——每分钟吸光度变化率； e —— 6.3 摩尔吸光系数； V t——反应液总体积（ml）； d —— 1 比色杯光径（cm）； 1000——变化因数； V s——标本体积（ml）；

谷丙转氨酶谷草转氨酶是什么

谷丙转氨酶谷草转氨酶是什么 谷丙转氨酶又称ALT，谷草转氨酶又称AST。而转氨酶是一项反映肝脏功能的重要指标，这时，有人去做体检时就会造成一种误会，以为转氨酶高了，就是得了肝炎，其实不然。 那就让我们一起来了解了解谷丙转氨酶谷草转氨酶是什么吧。 转氨酶反映肝脏健康状况转氨酶是人体代谢过程中必不可少的“催化剂”，主要存在于肝细胞内。当肝细胞发生炎症、坏死、中毒等，造成肝细胞受损时，转氨酶便会释放到血液里，使血清转氨酶升高。 那转氨酶高是肝炎吗？ALT的升高只表示肝脏可能受到了损害。除了肝炎，其他很多疾病都能引起转氨酶增高。引起转氨酶升高的常见原因有以下几则：

1、肝脏本身的疾患，特别是各型病毒型肝炎、肝硬变、肝脓肿、肝结核、肝癌、脂肪肝、肝豆状核变性等，均可引起不同程度的转氨酶升高。 2、除肝脏外，体内其他脏器组织也都含有此酶，因此当心肌炎、肾盂肾炎、大叶性肺炎、肺结核、乙型脑炎、多发性肌炎、急性败血症、肠伤寒、流脑、疟疾、胆囊炎、钩端螺旋体病、流感、麻疹、血吸虫病、挤压综合征等，亦均可见血中转氨酶升高。 3、因为转氨酶是从胆管排泄的，因此如果有胆管、胆囊及胰腺疾患，胆管阻塞，也可使转氨酶升高。 4、药源性或中毒性肝损害，以及药物过敏都可引起转氨酶升高，并常伴有淤胆型黄疸和肝细胞损伤。例如生病时吃了会损伤肝脏的药物，红霉素、四环素、安眠药、解热镇痛药、

避孕药，还有半夏、槟榔、青黛等中药。在停用这些药物后，转氨酶水平会很快恢复正常。 5、正常妊娠、妊娠中毒症、妊娠急性脂肪肝等也是转氨酶升高的常见原因。 6、对于一些看起来没什么大病的人来说，还有可能因为长期酗酒导致酒精肝，或饮食结构不合理导致脂肪肝，造成转氨酶高。 如果由于以上的那些原因而导致转氨酶升高的话，就要好好的休息一下，等过了一段时间后再去医院做一下体内酶的检查，原来的酶水平又恢复到正常值了。所以在发现自己转氨酶高时，不用过于紧张，也不要过于担心自己患上了严重的肝脏疾病，但是也一定要给予一定的重视，及时地接受正规复查和治疗。

丙氨酸氨基转移酶60偏高日常饮食

丙氨酸氨基转移酶60偏高日常饮食 丙氨酸氨基转移酶标准是0-40，所以一旦升高以后，就会严重破坏自己的身体健康，特别是对自己的肝脏，损伤更严重，所以当自己的丙氨酸氨基转移酶标准升高以后，一定要引起自己的重视，下面就详细介绍了出现这种症状的日常饮食，你可以全面了解一下。 谷丙转氨酶高的患者，在日常饮食方面应注意综合营养，合理搭配，防止偏食。每日要摄取足量的维生素、脂肪、碳水化合物、蛋白质。一日三餐要合理搭配，荤素相间，尽可能少食辛辣等刺激性较强的食物，避免养成偏食的不良习惯。每天坚持喝一杯牛奶，吃一个鸡蛋、二到三两精瘦肉，一块豆腐，每天两种蔬菜交换搭配，吃两个水果。另外要尽可能避免食用麻辣火锅、海鲜发物、油炸油煎、动物内脏等不易消化的食品。同时，要禁酒戒烟。 水果

谷丙转氨酶高的患者在饮食上宜食用一些酸性的蔬菜和水果，例如山楂、杏肉、酸枣、西红柿等。另外，香菇、木耳等食用菌含有较为丰富的多糖类物质，对于加强肝病病人机体免疫功能十分有益。绿色食品是保肝养肝的最佳选择，对于新鲜的蔬菜，患者既可以生食，也可以煮汤，每日交换食用。 个性化饮食 对于谷丙转氨酶高吃什么好，谷丙转氨酶偏高的患者还应根据自己病情的轻重缓急，遵循个性化的饮食原则。例如肝硬化患者的谷丙转氨酶高，则饮食以软、凉、易消化食物为主。需要提醒谷丙转氨酶高的患者的是，转氨酶高的患者不能只关注吃什么好，饮食治疗只是一种辅助治疗，只对降低转氨酶起促进作用，不能本末倒置，忽视了针对病因的治疗。否则肝纤维化的风险依然存在，肝病就还会发展为肝硬化、肝癌。比如对于谷丙转氨酶高的乙肝患者，除了降酶治疗，还要进行抗病毒、抗纤维化、恢复肝功能等综合治疗。 不管出现什么样的疾病，通过日常的饮食调理，都能更好的预防疾病和治疗疾病，丙氨酸氨基转移酶60偏高，通过日常的饮食，也能更好的有一个大的治疗和改善，所以以上介绍的一些日常饮食，一定要引起很多患者的重视，可以尽快的选择让自己

血清丙氨酸氨基转移酶测定

血清丙氨酸氨基转移酶测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2 实验原理 本试剂以国际临床化学会(IFCC)推荐方法为基础，所采用的反应原理与反应式如下。 ⑴样本中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化丙氨酸的氨基转换至α-氧代戊二酸，生成丙酮酸和L谷氨酸。 ⑵丙酮酸被试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）还原为L-乳酸的同时还原型辅酶I（NADH+ H+）被氧化为辅酶I（NAD+），而使波长340nm处的吸光度值下降。通过对波长340nm处吸光度值的下降速率进行监测，即可测得样本中丙氨酸氨基转移酶（ALT）的活性。 (3)样本中内源性丙酮酸的干扰，可由试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）在测定的延迟时间内快速、完全地消除，不会对测定产生干扰。

ALT L-丙氨酸 + -酮戊二酸丙酮酸 + L-谷 LDH（乳酸脱氢酶） 氨酸 丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸 + NAD+ + H2O 3 标本 3.1病人准备：12小时禁食。 3.2 类型：血清。 3.3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～ 25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。 3.4 标本运输：常温条件下保存运输。 3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。 4 实验材料 4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司ALT试剂盒（沪 食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014） 4.1.1 试剂组成 试剂1 L丙氨酸 600mmol/L 乳酸脱氢酶＞1820U/L

（R1）： NADH 0.26mmol/ L Tris缓冲液 80mmol/L 试剂2（R2）：Tris缓冲 液 80mmol/L α氧代戊二 酸 36mmol/L EDTA 5.0mmol/ 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。 4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 4.1.5 注意事项：试剂中含有稳定剂，可能存在一定的刺激作用和毒性，请勿直接接触皮肤及眼睛。一旦接触，即用大量清水冲洗。请勿吞服。 4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的ALT校准品对自动分析仪进行校准。

检查项目名称结果单位正常范围值 血清谷丙转氨酶

检查项目名称结果单位正常范围值血清谷丙转氨酶(S-ALT) 28 U/L 0-60 血清谷草转氨酶(S-AST) 19U/L0-40 空腹血糖（Glu）医生：王香芝检查项目名称结果单位正常范围值血糖(空腹)(S-Glu) 6.2 ↑mmol/L 3.80-6.11肾功二项（肌酐、尿素氮）医生：王香芝检查项目名称结果单位正常范围值血清尿素氮(BUN) 7.39mmol/L2.5-8.3血清肌酐(S-Cr) 54.9 umol/L 32-133血尿酸医生：王香芝检查项目名称结果单位正常范围值血清尿酸(S-UA) 241.95 mmol/L 90-420血液分析医生：于迎晨检查项目名称结果单位正常范围值白细胞(WBC) 5.210^9/L4.0-10.0淋巴细胞比率(L YMPH%) 27.9%20-40中值细胞比率(MONO%) 16.6 ↑%1-15中性细胞比率(NEUT%) 55.5%50-70淋巴细胞数(L YM#) 1.410^9/L0.6-4.1中值细胞数(MONO#) 0.910^9/L0.1-1.8中性细胞数(NEU#) 2.910^9/L2.0-7.8红细胞(RBC) 5.4610^12/L3.5-5.5血红蛋白(HGB) 160g/L110-160红细胞压积(HCT) 48%32-48红细胞平均体积(MCV) 92.1fl80-99平均血红蛋白量(MCH) 29.5pg22-36平均血红蛋白浓度(MCHC) 320 g/L 320-360 红细胞分布宽度-(RDW-CV) 12.9%11.5-17.5血小板(PLT) 18310^9/L100-300血小板容积(PCT) 0.20%0.13-0.43平均血小板体积(MPV) 9.3fl4.5-12.5 血小板分布宽度(PDW) 11.6 % 8-17 血脂二项（TG、CHOL）医生：王香芝检查项目名称结果单位正常范围值血清甘油三酯(S-TG) 1.3mmol/L0.3-1.92血清总胆固醇(S-Chol)6.25 mmol/L 3.6-6.5总检医生血常规 项目名称单位参考范围项目名称单位参考范围红细胞计数10E12/L 4-5.5 血小板计数10E9/L 100-300 红细胞压积L/L 42-49 血小板平均体积f1 6-14 红细胞平均体积f1 82-95 血小板压积L/F 0.108-0.282 % 15-17 红细胞平均血红蛋白pg 27-33 血小板体积分布 宽度 平均血红蛋白浓度g/L 320-360 红细胞体积分布 % 10.6-15 宽度 血红蛋白g/l 120-160 单核细胞绝对值10E9/L 0.1-0.9 白细胞计数10E9/L 4-10 淋巴细胞相对百 % 20-40 分比 淋巴细胞绝对值10E9/L 0.8-4 粒细胞相对百分 % 50-75 比 中性粒细胞绝对值10E9/L 2-7 单核细胞相对百 % 3-9 分比 尿常规- 尿蛋白（PRO）- 尿酸碱值 4.5-8 尿糖（GLU）- 镜检红细胞0-3 尿胆红素（BLL）umol/L - 镜检白细胞0-5 尿胆原（URO）- 上皮细胞 尿潜血（BLO）- 管型 尿酮体（KET）- 结晶 亚硝酸盐（NIT）- 粘液丝 尿白细胞（LEU）- 尿比重（）1-1.03

血清谷草转氨酶

血清谷草转氨酶 血清谷草转氨酶介绍： 门冬氨酸氨基转移酶(AST)是通常所称的谷草转氨酶(GOT)，此酶心肌含量较高，肝次之，肝内AST/ALT之比为2.5∶1.0。血清AST测定主要用于心肌和肝胆疾病及骨髓疾病的诊断和疗效观察。测定AST的常用方法是比色法和连续监测法。 血清谷草转氨酶正常值： (1)比色法：8～28卡门单位。 (2)连续监测法：基质中不含P-5'-P，成人5～40U/L。血清谷草转氨酶临床意义：由于AST分子量较ALT小，在肝脏中含量较ALT高，但半寿期较短。因此，在肝脏受损的不同阶段，二者增高的幅度及其比值也不同。根据其活性及比值变化，可用于肝脏病的鉴别和对肝细胞损伤的判断，健康人血清AST/ALT比值为1.15∶1。 (1)急性肝炎时AST升高，但升高幅度不如ALT，AST/ALT比值<1。若该比值明显升高，则预示暴发型肝炎。 (2)慢性肝炎，尤其是肝硬化时，AST升高幅度大于ALT，故该比值测定有助于肝病的鉴别诊断。在慢性肝炎中，该比值按慢性迁延性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、肝癌(该比值>2)的顺序依次升高。昆明医学院附属肝病康复医院专家指出，在肝炎恢复期，若ALT已恢复正常，而AST仍轻度升高，说明仍未痊愈。 (3)急性心肌梗死时AST活性显着升高，在发病4～12h开始升高，20～48h达峰值，因此AST 测定是诊断急性心肌梗死的重要酶学指标之一。心绞痛时AST正常，故可用于鉴别诊断。 (4)其他肌肉疾病，如进行性肌营养不良、皮肌炎、多发性肌炎等AST亦增高，其AST/ALT 比值大于1。 血清谷草转氨酶偏高的原因 通常谷草转氨酶升高意味着肝脏已经受损，因为转氨酶，主要存在于肝脏、心脏和骨骼肌中。肝细胞或某些组织损伤或坏死，都会使血液中的谷丙转氨酶升高，昆明市人民西路183号专家表示，临床上有很多疾病可引起转氨酶异常。谷草转氨酶升高的原因有以下几种： 1、对于健康人，谷草转氨酶有时也是可能高出正常值的。如：剧烈运动、过度劳累。对于这种谷草转氨酶暂时高的情况，只要稍作休息即可。 2、心肌梗死或心肌炎也会引起谷草转氨酶升高，这时，就要医院介入治疗了。

丙氨酸氨基转移酶

丙氨酸氨基转移酶 丙氨酸氨基转移酶是一种参与人体蛋白质新陈代谢的酶），起加快体内蛋白质氨基酸在体内转化的作用，它广泛存在于人体各种组织、器官、肌肉、骨骼中，以肝脏细胞的线粒体中最多。谷丙氨酸氨基转移酶主要存在于肝细胞浆内，细胞内浓度高于血清中1000-3000倍。只要有1%的肝细胞被破坏，就可以使血清酶增高一倍。因此，谷丙转氨酶被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。 目录 1简介 2正常值 3肝炎相关 4检测意义 5症状 6临床意义 7偏高成因 8怎样治疗 9与AST的区别 10与AST共同判断病情 11治疗ALT增高的药物 12ALT注意事项 12.1 生活注意事项 12.2 药物治疗的注意事项 13氨酸氨基转移酶偏高的危害 14丙氨酸氨基转移酶偏高吃什么好 14.1 日常饮食 14.2 水果 14.3 个性化饮食 15常用药物 16传染性 17孕妇alt偏高怎么办 1简介 名称：血清丙氨酸氨基转移酶（转氨酶）有时也称：血清丙氨酸氨基转 英文名称：Alanine aminotransferase(ALT) 一种参与人体蛋白质新陈代谢的酶（相当于工业生产中的催化剂），起加快体内蛋白质氨基酸在体内转化的作用，它广泛存在于人体各种组织.器官.肌肉.骨骼中，以肝脏细胞的细胞浆中最多， 丙氨酸氨基转移酶试剂盒

血清中ALT的正常含量参考值是：男9---51U/L，女8---41U/L（各医院的测试方法不同，参考值不完全相同）。当人体内各组织器官活动或病变时，就会把其中的ALT释放到血液中，使血清ALT含量增加。例如，肝脏发炎时，转氨酶就会从肝细胞释放到血液中，肝脏有病，血清转氨酶一定增高，当肝细胞千分之一有炎症时，血清转氨酶含量就会增高一倍以上，因此，血清转氨酶数量是肝脏病变程度的重要指标。 2正常值 比色法：0～40U/L； 连续监测法：6～24U/L。 3肝炎相关 很多种因素都能引起丙氨酸氨基转移酶偏高，虽然肝炎时往往有丙氨酸氨基转移酶偏高。但是其谷丙转氨酶偏高并不意味着一定是肝炎。如服用药物、长期饮酒或一次饮用较大剂量时，均能引起丙氨酸氨基转移酶偏高。此外发热、心脏疾病急性心肌梗塞、心肌炎、心力衰竭、胆道疾病胆囊炎、胆石症急性发作时也可以引起丙氨酸氨基转移酶偏高[1]。 4检测意义 谷丙氨酸氨基转移酶主要存在于肝细胞浆内，细胞内浓度高于血清中1000-3000倍。只要有1%的肝细胞被破坏，就可以使血清酶增高一倍。因此，谷丙转氨酶被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。 如果丙氨酸氨基转移酶（ALT)血清值超过正常上限2－3倍，并持续两周以上，表明有肝胆疾病存在的可能，但须排除嗜酒、化学药物中毒等对肝脏的损害；接触化学物质如四氯化碳、某些重金属、砒霜等可引起中毒性肝炎）及生理状态下，如过度劳累、剧烈活动（乳酸在体内大量生成、积聚，使机体相对缺氧及低血糖，致使肝细胞膜通透性增加，引起转氨酶升高）月经期时等都可能使转氨酶暂时性升高。 丙氨酸氨基转移酶（ALT)升高要根据相关检查、结合病史、症状、体征等来综合判断。当乙肝患者谷丙转氨酶升高，到正常值上限的2倍以上时，就应该进行抗病毒治疗。转氨酶水平越高，说明患者体内的免疫功能越活跃，抗病毒治疗的效果也就越好。此时就是乙肝抗病毒治疗最佳时期。 5症状 偏高 当丙氨酸氨基转移酶偏高时会出现食欲减退、恶心、呕吐、黄疸、肝区疼痛等症状，这些症状都会在丙氨酸氨基转移酶偏高时表现出来。有丙氨酸氨基转移酶高的症状并不一定是肝炎引起的，应及时确定谷丙转氨酶高的原因，建议检查乙肝两对半明确是否有乙肝病毒感染，如果症状重，做对症治疗。 胆道疾病时，症状为发热、恶心、呕吐、腹痛、黄疸，临床上检查还可能伴随血胆红素升高。心脏疾病时，症状为胸闷、气短、浮肿、心悸，临床上检查伴有谷草转氨酶升高。 肝脏疾病时，症状为低热、乏力、恶心、呕吐、食欲不振、失眠多梦、腹痛腹泻、肝区不适等。 偏低 丙氨酸氨基转移酶主要存在于肝细胞中，它的正常值是0-40单位之间。当其明显升高或降低时常提示有肝损伤。这个肝损伤只是“结果”，还不能提示肝损伤的病因，更不能武断地认为就是肝炎，还必须进一步追查病因，如有无肝炎病毒、是否嗜酒、身体是否肥胖、有无脂肪肝、有无心脏病、有无化学药物中毒史、有无寄生虫病史等。 对于健康人来说，丙氨酸氨基转移酶水平在正常范围内升高或降低，并不意味着肝脏出了问题，因为转移酶本身非常敏感，健康人在一天之内的不同时间检查，转水平都有可能产生波动。早晨有可能会有偏低的情况,一旦有所运动，丙氨酸氨基转移酶水平就会有所变化,甚至

血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定(赖氏法)

授课对象：06级检验1-5班 课时：2学时 血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定（赖氏法） 目标：1.掌握赖氏法测血清ALT的原理及注意事项 2.掌握试剂的配制熟练地制作标准曲线 3.规范地进行ALT测定 4.了解血清ALT测定的临床意义 实验用品：配制试剂用的各种器皿（烧杯、容量瓶、电炉、分析天平等）、37℃水浴箱、721型风光光度计、坐标纸等 原理： 丙氨酸和α-酮戊二酸在血ALT的作用下生成丙酮酸及谷氨酸，在酶反应达到规定时间时，加入2.4-二硝基苯肼-盐酸溶液以终止反应。生成的丙酮酸与入2.4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸入2.4二硝基苯腙，苯腙在碱性条件下显红棕色。根据显色之深浅，求得血清中丙氨酸氨基转移酶活力。 试剂： 1. 0.1molPH7.4磷酸盐缓冲液称取磷酸氢二钠（Na2HPO4AR）11.928g,磷酸二氢钾（KH2PO4AR） 2.176g，加少量蒸馏水溶解并稀释至1000mL。 2. ALP基质液称取DL丙氨酸[CHCH（NH）COOH]1.79g，α-酮戊二酸[COOH （COCOOH）29.2mg于烧杯中，加入0.1mol/L PH7.4磷酸盐缓冲液80mL,煮沸溶解后待冷，用摩尔NaOH溶液调节PH至7.4（约加入0.5ml），再用0.1mol/LPH7.4磷酸盐缓冲液稀释至100mL,混匀，加氯仿数滴，置冰箱保存数周。 3．1mmol/L2.4-二硝基苯肼溶液称取 2.4-二硝基苯肼[（NO）CHNHNH AR]19.8mg，用10mol/L HC110mL溶解，然后加蒸馏水至100mL，置棕色瓶内，冰箱保存。 4．0.4mol/L NaOH溶液。 5．2mmol/L丙酮酸标准液精确称取丙酮酸钠[CHCOCOONa AR]22.0mg于

丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(单试剂速率法)

丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(单试剂速率法) 简介： 转氨酶是催化α-氨基酸和α-酮酸之间氨基转换反应的一组酶，丙氨酸氨基转移酶(ALT)旧称谷丙转氨酶(GPT)主要存在于肝细胞浆内，细胞内ALT浓度远高于血清，肝细胞破坏后，血清ALT立即迅速升高，因此谷ALT被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。 Leagene 丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(单试剂速率法)其检测原理是丙氨酸氨基转移酶催化丙氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，丙酮酸与NADH经LDH催化生成NAD+，上述方法实际为ALT速率法，其反应公式如下： L-丙氨酸+α-酮戊二酸→丙酮酸+L-谷氨酸。 丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD+。 在上述偶联反应中，NADPH的氧化速率与样本中酶活性呈正比。对于单试剂速率法，血清与试剂完整成分的底物溶液混匀，ALT催化反应立即启动，通过分光光度计或自动分析仪检测在吸光度下降速率(-ΔA/min)，下降速率(-ΔA/min)与ALT活性呈正比，比色杯光径1.0cm，进而计算酶的活性单位。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、蒸馏水 2、比色杯 3、分光光度计或自动分析仪操作步骤(仅供参考)： 1、准备样品：编号 名称TE0125 100T TE0125 200T Storage ALT检测液(R) 成分终浓度 2×50ml 2×100ml 4℃避光Tris缓冲液100mM L-丙氨酸500mM 酮戊二酸15mM NADH 0.18mM LDH 1700U/L 防腐剂15mM 使用说明书1份

①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定， -20℃保存1个月有效，用于ALT/GPT的检测。 ②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存1个 月有效，用于ALT/GPT的检测。 ③(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的ALT/GPT含量。 分光光度计检测：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。注意：由于酶促反应时间极短，Leagene建议加入丙酮酸工作液后立即检测，加样时间越短越好，其反应基本在1-2min内，其后反应趋于平缓。Leagene对照检测参考值在1-3min变化为1.1-0.8之间。由于检测仪器、操作手法以及样品酶活性高低等条件的不同，参考值范围会有波动。 2、，如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。 加入物对照管测定管 ALT检测液(R)(μl) 900 900 混匀，37℃孵育30min。 蒸馏水(μl) 45 － 待测样品(μl) －45 混匀，37℃孵育60s，在340nm处各管吸光度变化，计 算各管ΔA/min。 3、生化分析仪检测：按照下表设置主要参数。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用 量或适当稀释后再进行测定。 波长340nm 反应温度37℃ 孵育时间90s 连续监测时间60s 比色杯光径 1.0cm 系数3376 待测样品15μl ALT检测液(R) 300μl 计算： 分光光度计计算公式：ALT(U/L)=ΔA/min×(106/6220)×(945/45)=ΔA/min×3376 式中：6220=NADH的吸光度 945=反应液的总体积(μl)

血清丙氨酸氨基转移酶测定

血清丙氨酸氨基转移酶测定 1.实验原理 国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。 ALT L-丙氨酸+ -酮戊二酸丙酮 LDH（乳酸脱氢酶） 酸+ L-谷氨 丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸+ NAD++ H2O 上述偶联反应中，NADH的氧化速率与`样品中ALT的活力成正比,在340nm处NADH呈现特性吸收峰，而NAD+则没有。因此，可在340nm监测吸光度的下降速率（-△A/min）,计算出ALT的活性单位。 2. 标本： 2.1 病人准备：12小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。 3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。 4. 标本运输：常温条件下保存运输。 5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。

6. 实验材料 6.1 试剂欧泰克ALT测定试剂盒 6.1.1 试剂组成 Tris缓冲液pH 7.4 80mmol/L L-丙氨酸800mmol/L LDH（乳酸脱氢酶）≥1200U/L a-酮戊二酸18mmol/L NADH 0.18mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。 6.2 校准品：使用罗氏公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。

谷草转氨酶性能验证

谷草转氨酶(AST) 检测方法学性能验证评价报告 验证内容：正确度、重复精密度、中间精密度、线性范围、临床可报告范围及参考区间的确认验证人员： 一检测系统信息 项目：AST 仪器名称: 强生Vitros 仪器型号:V350 试剂及厂商：Ortho-Clinical Diagnostics公司 检测方法：速率法 二厂商提供的相关参数 三验证过程 1 正确度 1.1 目的：评价仪器测试结果与接受参考值之间的一致程度。通过实验室检测数据的偏倚从而评价和验证实验室检测结果的准确性。 1.2 评价方法：参加卫生部临检中心的室间质评，本组参加室间质评的项目一律用回报结果作为评价标准，最近一次参加卫生部室间质评卫生部质控值。 1.3 结果判断方式：<1/2 CLIA’88 正确度验证试验数据记录表

2 精密度 2.1 重复精密度 2.1.1 目的：考察仪器检测方法的随机误差 2.1.2 原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20个结果，判断这20个独立结果间的 一致程度 2.1.3 方法：选择新鲜混合血清标本（病人高值、低值）各20份，测量前先定标，再做质控， 质控结果在控制范围内，连续重复测定20次，计算SD，CV，得到重复性精密度。 2.1.4 标本来源：高、低值标本均为混合血清。 2.1.5 结果判断方式：<1/4CLIA’ 88 5% 重复性精密度验证试验数据记录表

2.2 中间精密度： 2.2.1 目的：考察目前实验室检测方法中间精密度。 2.2.2 原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20天，取得20个结果，判断这20个 独立结果间的一致程度。 2.2.3 方法：取一个月的室内质控值（高值、低值）计算CV、SD，得到批间精密度。 2.2.4 结果判断方式：<1/3 CLIA’ 88 6.67% 中间精密度验证试验数据记录表