铁皮石斛组培方案
铁皮石斛组织培养方案报告
一、实验目的
了解铁皮石斛培养的方法和步骤，熟练掌握外植体的取材、消毒、接种、初代培养的操作过程。
二、实验器材
超净工作台、高压灭菌锅、电磁炉、长镊子、培养皿、酒精灯、接种工具、烧杯、玻璃棒、移液管、培养箱、剪刀、培养瓶等。
三、实验步骤
配方：
根据不同阶段，培养基配方有所差异。如表1
10%香蕉（w/w）+MS +3%蔗糖（w/w）+0.8%琼脂（w/w）+2.0mg/L NAA
1）量取800ml蒸馏水于洁净的大烧杯中，加热至沸腾；
2）准确称量100g香蕉果肉，切成碎片状，并倒入上述烧杯中，加热煮沸5min，其间搅拌使之充分溶解；
3）按照大量、微量、Fe2+盐、有机Ⅰ、有机Ⅱ顺序，量取MS各种母液于盛有50ml蒸馏水的烧杯，混合均匀；
4）将2）和3）的溶液混合，然后加入30g蔗糖，并移取2ml NAA（0.1mg/ml），混合均匀；
5）加热至沸腾，加入8g琼脂并煮沸5min，其间不断搅拌使之充分溶解；
6）冷却至50±5℃时，调pH至5.4—5.6。分装于培养瓶内，33.3ml/瓶。注意事项：
①溶解香蕉的蒸馏水尽可能多，以确保香蕉各种成分完全溶解；
②各种母液混合时，要按照大量、微量、Fe2+盐、有机Ⅰ、有机Ⅱ的顺序；
③煮沸时，小心溶液溢出；
④分装时不要污染培养瓶瓶口。
灭菌：
1）检查灭菌锅的水位、电源、排气阀、排气管、安全阀以及压力表，确保灭菌锅各指标和功能的正常，以防事故发生；
2）把带灭菌的培养基装入锅内，盖上锅盖，对称而均匀地扭紧螺丝；
3）打开电源和排气阀，调节电压至220V；
4）待排气阀排除水蒸气30s—1min后，关闭排气阀；
5）当温度上升到121℃后，调节电压至135V，保持20min；
6）关闭电源，使之自动降温至0℃。10min后，打开排气阀和锅盖；
7）5—10min后，取出培养基放于试验台上冷却，待用。
表2 灭菌时间统计
注意事项：
①启动灭菌前，应检查水位、电源、排气阀、安全阀、排气管等，确保正常；
②灭菌锅底部应铺垫一层报纸，以防培养瓶机械破损；
③灭菌电压不宜超过220V，否则灭菌锅会剧烈摇晃，造成不必要的损害和安全隐患；
④当温度达到121℃后，调节电压至135V，并且时不时注意温度的变化，确保温度介于121-122℃之间；
⑤气压降至0后，不宜立即揭盖；最好在5-10min后揭盖，这样才能缓和内外“气压和温度差”；
⑥揭盖5-10min后，再转移锅内培养基，以免烫伤。
⑦每锅只能灭菌18瓶
转接
转接前准备
1）培养皿、镊子、剪刀等转接用具的灭菌（可以在培养基灭菌时附带）；
2）检查超净台内各种用具，及时补充酒精灯的酒精，确保用具齐全；
3）放置待转接材料和待接入培养基，以“方便操作为宜”而陈列；
转接
1）揭去防尘膜，打开电源、通风和紫外灯，灭菌15—20min；
2）关掉紫外，打开白炽灯，用75%酒精仔细擦拭手指、指甲、材料瓶瓶盖及盖边缘、工作区等处，确保“消毒”彻底；
3）点燃酒精灯，用无菌镊子把材料夹取于无菌培养皿内，挑选生命力旺盛的植株用于转接；
4）用无菌剪刀修去多余的根系，“双镊子”法将材料转接于新的培养基中；
5）标注相关日期和品系，转至培养室培养。
注意事项
①操作时，所有用具均不能从“核心工作区”和开启的培养瓶上面晃过，防止细菌落入而导致污染；
②在打开材料瓶和培养瓶后，其盖均在酒精灯外焰灼烧3-5s，瓶口灼烧5-10s；盖瓶盖时，亦如此操作；
③转接时，确保手一直在超净台内，以免带入外界细菌。
培养：
培养条件：白炽灯12h/黑暗12h＋20℃
PDA培养基的配制方法，培养基的湿热灭菌操作
一、目的要求
1．学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。
2．学习并掌握棉塞的制作方法。
二、培养基的配制原理
培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质，用以培养、分离、鉴定、
保存各种微生物或积累代谢产物。在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加上实训
和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，但不论是何种培养基，均应含有水分、碳源、
氮源、能源、无机盐等。不同微生物对pH值要求不一样，所以配制培养基时，还应根据不
同微生物对pH值的要求，将培养基调到合适的pH值范围。
三、实训材料和用具
琼脂，可溶性淀粉，葡萄糖，10﹪NaOH，10﹪HCl，1mol／L NaOH，lmol／L HCl，KNO3，NaCl，K2HPO4·3H20，MgSO4·7H20，FeSO4·7H2O；试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，牛角匙，PH试纸，棉花，牛皮纸，记号笔，纱布，
四、操作方法与步骤
(一) 培养基的配制
PDA培养基的配制其配方如下：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000mL，pH值自然。
(1)称量和熬煮药品实际用量计算后，按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小
块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20－30min，用可用2层纱布趁
热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g（提前搞碎），然后放
在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再
补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用
三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1／5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超
过其容积的一半为宜；半固体培养基以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。
(4) 加棉塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试
管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防
止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
(二) 棉塞的制作
棉塞的作用有二：一是防止杂菌污染；二是可过滤空气，保证通气良好，并可减缓培养基水分的蒸发，所以正确地制备棉塞是培养基制备中重要的一环。正确的棉塞是形状、大小，松
紧应与试管口(或三角烧瓶)完全适合。过紧则妨碍空气流通，操作不便；过松时，空气会毫无障碍地进入试管(或三角烧瓶)中，达不到灭菌的目的。棉塞过小往往易掉进试管内，因此棉塞质量的优劣对实训的结果有很大的影响。正确的棉塞头较大，加塞时，应使棉塞长度的1／3留在试管口外，2／3在试管口内（见实训图6-4）。目前，有条件的实训室已使用坚固的塑料试管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞，制作棉塞要选纤维较长的棉花，一般不选用脱脂棉。因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格也贵。棉塞制作方法见图6-5
实图6-4棉塞实图6-5 棉塞的制作方法（三）斜面与平板培养基的制作
斜面与平面培养基是常用的琼脂固体培养基。将熬制好的琼脂培养基趁热装入试管灭菌
后摆鞋面，凝固后即成斜面培养基。斜面培养基常用于菌种培养、菌种保藏等工作。将灭菌
后的琼脂培养基倾注于无菌培养皿中，凝固后即成平板培养基。平板培养基常用于分离菌种、菌落计数、菌落形态观察及菌种鉴定等。斜面与平板培养基的制作过程大致为：溶解原料、
融化琼脂、调PH、分装、灭菌和制斜面或平板。
1、溶解原料
为加速原料的溶解，最好用热水。先将原料依次加入到占配制量一半的水中，待全部
溶解后在加足水量。如配方中有马铃薯、麸皮、胡罗卜、豆芽等天然原料，需将其熬制约
30min，取出定量滤液，在将所需的其他原料加入滤液中。
2、融化琼脂
琼脂的用量可灵活掌握。用作保藏菌种的培养基，琼脂用量可提高至 2.5%，以增加
持水性。冬季的气温低，琼脂用量可适当减少。琼脂用前可剪成小段，以利于融化。待溶
液煮沸是再加入，不断搅拌至完全无琼脂块状物时再停止加热。
3、调整PH
用洁净干燥的玻璃棒沾一点培养基滴在试纸上，立即与比色板比较。一般用10%NaOH
或HCl调节。
4、分装
将培养基趁热倒入垫有纱布的漏斗中，使培养基直接滤至试管或三角瓶中，试管装量一般
为管高的1/4左右，三角瓶的装量约为其容量的一半。勿使培养基玷污容器口部。口部塞
有棉塞，试管每7或9 支扎一捆，棉塞外面包牛皮纸，以防在灭菌过程中被水汽打湿。
5、灭菌
分装后的培养基应随即灭菌。除特殊情况外，一般培养基均用高压蒸汽灭菌，在104kPa 压力下，灭菌20-30min 。
6、制作斜面或平板
将灭菌后的试管趁热斜置于棍条上，倾斜度以试管中的培养基约占试管长度的1/2为宜，凝固后即成斜面培养基。待灭菌后三角瓶内的培养基冷却至45~50时，以无菌操作法向无菌培养皿中倒入培养基，装置以刚覆盖整个培养皿底部为宜（约15ml）,凝固后即成平板培养基。
五、高压蒸汽灭菌法
该法使用高压灭菌锅，在121℃，O．105MPa压力下灭菌15～30min。微生物实训所需的一切器皿、器具、培养基(不耐高温者除外)、无菌水、工作服等物品都可用此法灭菌。
高压蒸汽灭菌锅是能耐一定压力的密闭金属锅，有立式或卧式(实图8-1、2 )两种。
灭菌锅上附有压力表、排气阀、安全阀、加水口、排水口等。卧式灭菌锅还附有温度计。有的还有蒸汽人口。灭菌锅的加热源有电、煤气和蒸汽三种。
高压蒸汽灭菌的操作过程
(1) 加水将灭菌锅内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，以水面与三角架相平为宜。立式锅是直接加水至锅内底部隔板以下1／3处。有加水口者由加水口加入至止水线处。
(2) 装料将装料桶放回锅内，装入待灭菌的物品。放置装有培养基的容器时要防止液体溢出，瓶塞不要紧贴桶壁，以防冷凝水沾湿棉塞。
(3) 加盖摆正锅盖，对齐螺口，然后以同时旋紧相对的两个螺栓的方式拧紧所有螺栓，打开排气阀。
(4) 排气用电炉或煤气加热，待水煮沸后，水蒸气和空气一起从排气孔排出。一般认为，当排气流很强并有嘘声时，表明锅内空气已排净(沸后约5min)。
(5) 升压当锅内空气排净时，即可关闭排气阀，压力开始上升。
实图7-1 立式灭菌锅实图7-2 卧式灭菌锅
1．安全阀2．压力表3．放气阀
4．软管5．紧固螺栓6．灭菌桶
7．筛架8．水
(6)保压当压力表指针达到所需压力刻度时，控制热源，开始计时并维持压力至所需时间。本实训用121℃、20rnin灭菌。
(7)降压达到所需灭菌时间后，关闭热源，让压力自然下降到零后，打开排气阀。放净余下的蒸汽后，再打开锅盖，取出灭菌物品，排掉锅内剩余水。
(8)无菌检查将已灭菌培养基冷却后置于37℃恒温箱内培养24h，若无菌生长，则放人冰箱或阴凉处保存备用。
4．化学药品灭菌化学药品消毒灭菌法是用能抑制或杀死微生物的化学制剂进行消毒灭菌的方法。能破坏细菌代谢机能并有致死作用的化学药剂为杀菌剂，如重金属离子等；仅阻抑细菌代谢机能，使细菌不能增殖的化学药剂为抑菌剂，如磺胺类及大多抗生素等。化学药品对微生物的作用是抑菌还是杀菌以及作用效果，还与化学药品浓度的高低、处理微生物的时间长短、微生物的种类及微生物所处的环境等有关。
微生物实训室中常用的化学药品有2％煤酚皂溶液(来苏尔)、O．25％新洁尔灭、0．1％升汞、3％～5％的甲醛溶液和75％乙醇溶液等。
5．注意事项
(1)使用高压灭菌锅应严格按照操作程序进行，避免发生事故；灭菌时，操作者切勿擅自离开；务必待压力降到零后，才可打开锅盖。
(2)干热灭菌时电烘箱中物品不要摆得太拥挤，以免阻碍空气流通而影响灭菌效果；灭菌物品不要与电烘箱内壁的铁板接触，以防包装纸烤焦。
(3)记述高压蒸汽灭菌的操作过程及注意事项。
铁皮石斛繁殖技术
铁皮石斛繁殖技术 铁皮石斛别称黑节草、云南铁皮等，为微子目兰科石斛属多年生附生草本植物，分布于我国安徽、浙江、福建等地，其茎入药，属补益药中的补阴药，繁殖方法主要有分株繁殖、分芽繁殖和扦插繁殖，下面我们就一起来看一看铁皮石斛繁殖技术吧！
分株繁殖 选择铁皮石斛生长较密的植株，开过花后将其从盆中取出，除去老很从丛生茎的基部切开，分切时尽最少伤根系，只掩剪开相互连接的很状呈部位，根部用手位开，不必用刀切。以主株为一组，再将老根进一步剪除。将新芽靠近盆中央，填入新的基质并压实，即成新的植株。
分芽繁殖 盆裁3年以上的植株或部分秋石斛茎的顶部或基部长有小植株时可以进行切芽繁殖，选择具有3～4片叶，2～3条根，根长4～5厘米的小植株，从母株上切下，用草木灰或70%的代森锰锌处理伤口，将苗植入盆中即可，汪意要浅植，栽培2年后一般可开花成为商品花。
扦插繁殖 铁皮石斛扦插繁殖可以结合花后换盆和分株时一起进行，选择未开花且较充实的整做播条，将技条切成数段，每段具2～3个节，在伤口上涂上草木灰或70%的代森锰锌处理伤口。将茎一段一段地插入苔藓和泥炭混合的基质中，一半露在外面，放于半阴、潮湿处。插后1周不必浇水，然后经常喷雾保湿，适当遮阴。经过1～2个月，在节部有新芽长出，新芽下部长出2～3条小根形成新的植株。将新植株连向老茎一起上盆，栽培2～3年可开花，扦插时间以4～8月为好。
组织快繁 铁皮石斛组培苗栽培前应先进行14～21天的炼苗，具体措施是将组培苗移至炼苗房，使其在开放变化的环境中逐渐适应自然环境，待组培苗叶色浓绿时即可出瓶种植。出瓶前先将瓶盖打开，让瓶苗在室外空气中放置2～3天，让其适应自然温湿度。然后进行洗苗，洗苗时将带有培养基的幼苗轻轻取出，置于盆中清洗，污染苗和裸根苗或少根苗应分开放置。组培苗先用自来水清洗，主要是应洗掉琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，而后再用清水漂洗一下。洗苗时最好根据苗的大小和优劣同步进行分级，以便栽培、管理，提高组培苗的成活率并使其生长整齐。
铁皮石斛组织培养
铁皮石斛组织培养研究进展组织培养 摘要：近年来，对铁皮石斛的需求日趋增加，而野生资源难以满足市场需求，组织培养技术使大规模人工栽培成为可能。从种子萌发、原球茎分化、生根与壮苗、原球茎增殖等方面阐述了近年来关于铁皮石斛组织培养技术的研究概况，并展望了发展前景。 铁皮石斛为兰科石斛属植物，是传统名贵中药材。《神农本草经》列为上品，具有益胃生津、滋阴清热、止咳润肺的功效。现代药理研究表明，石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管的作用。由于石斛自然繁殖力低，种子需与真菌共生才能萌发，加上长期采挖，使得野生铁皮石斛资源日渐枯竭，成为濒危植物，被列为国家重点保护的野生药材品种。为了满足市场的需求，国内许多科研人员进行了铁皮石斛组织培养技术的研究。 1 种子萌发 1.1 胚龄 不同种龄的种子萌发率不一样。叶秀嶙等取铁皮石斛2~ 6 个月种龄的种子进行组织培养发现，种龄愈长，萌发率愈高。2 个月种龄的种子接入改良N6培养基中，萌发率仅为6 % ; 3 个月种龄的种子接入改良叹培养基中，培养2 周后开始萌发，萌发率为87 % ; 4 一6 个月种龄的种子接入培养基中，只要培养一周即可萌发，萌发率为95 ％。曾宋君等将铁皮石斛种子接入改良N6培养基中进行组织培养，亦得到相似的结论，幼胚胚龄在60d 以下时，萌发率极低，随着胚龄的增长，其萌发期逐渐缩短，萌发率逐渐升高，成苗率也逐渐
升高，但到达一定的胚龄后，差异并不明显。 1.2 基本培养基 铁皮石斛种子在N6，改良N6，MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、KundsonC , 1 / 2N6，White等培养基上均可萌发。赵天榜等比较风、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响，除残外，所有的基本培养基均优于其减半培养基，其中以N6最好，SH 、Kn 、MS 次之，l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH 、改良N6、MS 、KS 、VW 、KundsonC 培养基中培养，得出最适培养基为改良N6或自制PT 培养基。罗吉凤等比较了MS 、l / 2MS 、1 / 2 N6和White 培养基对铁皮石斛种子萌发的影响，30d 种子发芽率均达到95 % ，但1 / 2MS 培养基上所萌发的原球茎较大。 1.3 激素 在培养基中添加一定浓度的NAA 可促进种子的萌发，浓度以0.2 一0.5mg/L最适合胚的萌发和生长，过高起抑制作用。2 , 4-D对胚的萌发起抑制作用。6 一BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。KT 、IAA 对胚萌发和成苗的影响不大，当浓度超过1mg/L 时，对胚萌发和成苗起抑制作用。ABA 有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用，但张铭等发现ABA 能显著提高铁皮石斛原球茎的质量，浓度以0.5mg/L 为最佳。 1.4 天然添加物 在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发，但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不
铁皮石斛组培技术
铁皮石斛的组织培养研究 专业班级： 姓名： 学号： 课程：植物组织培养
目录 摘要 (3) Abstract (4) 前言 (5) 1.培养基 (6) 配方 (6) 配制（以1000ml幼株的生根壮苗培养基为例） (6) 灭菌 (8) 2.转接 (9) 转接前准备 (9) 转接 (9) 培养 (9) 3.炼苗 (10) 炼苗目的 (10) 炼苗方法 (10) 4.移栽 (11) 基质选择 (11) 移栽技术要求 (11) 5.结论与分析 (12) 参考文献 (13)
摘要 铁皮石斛(Dendrobium officinale)是兰科(Orchidaceae)石斛属(DendrobiumSw．)多年生草本植物。铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。铁皮石斛是传统名贵中药材，有生津益胃、清热养阴和清咽利嗓等功效，主要药用成分石斛多糖是一种免疫调节剂。铁皮石斛蒴果成熟时易开裂，且种子粒径小，自然繁殖率低。为了保护和有效利用铁皮石斛，通过组织培养技术大量快速繁殖铁皮石斛组培苗显得尤为重要。 关键词：铁皮石斛组织培养移栽培养基转接快速繁殖
Abstract Dendrobium orchid Dendrobium is a perennial herb. It is the ultimate in DendrobiumSw,named for its ferric green a rare traditional Chinese herbal medicine,it contributes to dry dampness and strengthen the spleen,clear away lung-heat ,nourish yin ，clear away heat ,and so main medicinal components of Dendrobium polysaccharide is a kind of immune mature,its capsule cracks,in which seeds are in small particle size and have a low rate of natural order to protect and utilize the Dendrobium orchid Dendrobium ,it is particularly important to establish a rapid propagation by the tissue culture technique . key words:Dendrobium orchid Dendrobium tissue culture culture medium adapter rapid propagation
铁皮石斛组培方案
铁皮石斛组织培养方案报告 一、实验目的 了解铁皮石斛培养的方法和步骤，熟练掌握外植体的取材、消毒、接种、初代培养的操作过程。 二、实验器材 超净工作台、高压灭菌锅、电磁炉、长镊子、培养皿、酒精灯、接种工具、烧杯、玻璃棒、移液管、培养箱、剪刀、培养瓶等。 三、实验步骤 配方： 根据不同阶段，培养基配方有所差异。如表1 表1 各种培养基配方 配制（以1000ml幼株的生根壮苗培养基为例） 10%香蕉（w/w）+MS +3%蔗糖（w/w）+0.8%琼脂（w/w）+2.0mg/L NAA 1）量取800ml蒸馏水于洁净的大烧杯中，加热至沸腾； 2）准确称量100g香蕉果肉，切成碎片状，并倒入上述烧杯中，加热煮沸5min，其间搅拌使之充分溶解； 3）按照大量、微量、Fe2+盐、有机Ⅰ、有机Ⅱ顺序，量取MS各种母液于盛
有50ml蒸馏水的烧杯，混合均匀； 4）将2）和3）的溶液混合，然后加入30g蔗糖，并移取2ml NAA（0.1mg/ml），混合均匀； 5）加热至沸腾，加入8g琼脂并煮沸5min，其间不断搅拌使之充分溶解； 6）冷却至50±5℃时，调pH至5.4—5.6。分装于培养瓶内，33.3ml/瓶。 注意事项： ①溶解香蕉的蒸馏水尽可能多，以确保香蕉各种成分完全溶解； ②各种母液混合时，要按照大量、微量、Fe2+盐、有机Ⅰ、有机Ⅱ的顺序； ③煮沸时，小心溶液溢出； ④分装时不要污染培养瓶瓶口。 灭菌： 1）检查灭菌锅的水位、电源、排气阀、排气管、安全阀以及压力表，确保灭菌锅各指标和功能的正常，以防事故发生； 2）把带灭菌的培养基装入锅内，盖上锅盖，对称而均匀地扭紧螺丝； 3）打开电源和排气阀，调节电压至220V； 4）待排气阀排除水蒸气30s—1min后，关闭排气阀； 5）当温度上升到121℃后，调节电压至135V，保持20min； 6）关闭电源，使之自动降温至0℃。10min后，打开排气阀和锅盖； 7）5—10min后，取出培养基放于试验台上冷却，待用。
铁皮石斛组培方案教学文案
铁皮石斛组培方案
铁皮石斛组织培养方案报告 一、实验目的 了解铁皮石斛培养的方法和步骤，熟练掌握外植体的取材、消毒、接种、初代培养的操作过程。 二、实验器材 超净工作台、高压灭菌锅、电磁炉、长镊子、培养皿、酒精灯、接种工具、烧杯、玻璃棒、移液管、培养箱、剪刀、培养瓶等。 三、实验步骤 配方： 根据不同阶段，培养基配方有所差异。如表1 10%香蕉（w/w）+MS +3%蔗糖（w/w）+0.8%琼脂（w/w）+2.0mg/L NAA 1）量取800ml蒸馏水于洁净的大烧杯中，加热至沸腾； 2）准确称量100g香蕉果肉，切成碎片状，并倒入上述烧杯中，加热煮沸5min，其间搅拌使之充分溶解； 3）按照大量、微量、Fe2+盐、有机Ⅰ、有机Ⅱ顺序，量取MS各种母液于盛有50ml蒸馏水的烧杯，混合均匀； 4）将2）和3）的溶液混合，然后加入30g蔗糖，并移取2ml NAA （0.1mg/ml），混合均匀； 5）加热至沸腾，加入8g琼脂并煮沸5min，其间不断搅拌使之充分溶解； 6）冷却至50±5℃时，调pH至5.4—5.6。分装于培养瓶内，33.3ml/瓶。注意事项： ①溶解香蕉的蒸馏水尽可能多，以确保香蕉各种成分完全溶解； ②各种母液混合时，要按照大量、微量、Fe2+盐、有机Ⅰ、有机Ⅱ的顺序； ③煮沸时，小心溶液溢出； ④分装时不要污染培养瓶瓶口。 灭菌： 1）检查灭菌锅的水位、电源、排气阀、排气管、安全阀以及压力表，确保灭菌锅各指标和功能的正常，以防事故发生； 2）把带灭菌的培养基装入锅内，盖上锅盖，对称而均匀地扭紧螺丝； 3）打开电源和排气阀，调节电压至220V； 4）待排气阀排除水蒸气30s—1min后，关闭排气阀； 5）当温度上升到121℃后，调节电压至135V，保持20min；
铁皮石斛的组织培养
由于石斛自然繁殖力极弱，生长缓慢，加之人们掠夺性采挖，资源已严重枯竭。而石斛栽培一直未解决其存活率低、进入盛产期年限长等问题，故石斛药源一直处于紧张状态。因此，组织培养、遗传转化、菌根技术、悬浮培养等生物技术在石斛的应用意义重大，甚为迫切。石斛的组织培养，可用种子、根、茎尖、茎节及叶等为外植体，但以种子进行组培快繁的为多。原球茎的增殖分化是石斛试管苗繁殖的关键，因此，研究原球茎增殖分化的适宜培养条件非常重要。特别是应用组织培养技术快速大量繁殖石斛试管苗，是解决其种苗与发展生产的有效途径。 铁皮石斛的组织培养 铁皮石斛，又名铁皮兰、节草、耳环石斛等。野生铁皮石斛为国家珍稀濒危保护植物（三级）。由于其生长环境要求特殊，野生资源已濒临灭绝。现云南晨安生物科技开发有限公司对铁皮石斛的组培快繁已获成功，月出苗量50万瓶以上，为铁皮石斛工厂化育苗和大面积栽培闯出了一条新路。 1 胚培养（种子培养）：取人工授粉的铁皮石斛果实，用75％的乙醇表面消毒，30s后再用0.1％升汞溶液消毒8min，无菌水冲洗4~5次。在无菌操作下，把果实切成0.1mm见方的小块，接种到培养基上，每瓶3~5块。研究结果表明，N6培养基对种子萌发和生长最好，蔗糖浓度2％最佳，NAA浓度0.2~0.5mg/L最适合胚的萌发和生长；种子培养中加入椰乳对胚萌发和萌发后的初期生长起促进作用；而香蕉汁对继代培养中石斛的生根和壮苗起促进作用，生根和壮苗培养中不加入NAA，只用N6+10％香蕉汁，苗长得更粗壮。培养温度25~28℃，光照强度1600~2000lx，每日10~12h。种子萌发后，转管3~4次，当幼苗长出4~5片真叶并具有3~4条1~2cm长的根时，可将试管苗进行炼苗后移栽。 在实验中尚发现，石斛原球茎的增殖与胚龄相关，不同胚龄培养，其萌发率不同：胚龄45
石斛组织培养研究进展
石斛组织培养研究进展 张明1,夏鸿西2,朱利泉2,张玉进2 (1.重庆市中药研究院,重庆400065; 2.西南农业大学,重庆400716) [摘要]目的:综述国内外对石斛组织培养进行的深入研究。方法:系统查阅国内外近10年来的有关文献20余篇。结果与结论:介绍了石斛组培的多种方法,对培养基、激素及多种条件对组培的影响作了论述,并提出了存在的问题及对策。 石斛属Dendrobium为兰科第2大属,多年生草本植物,全球计有1 500种。多生于树皮或岩石上,开花多,结果少,每果可含100万粒种子。种子细如粉尘[1],每粒重约0.3～0.4μg。种胚不超过球形阶段,即存在后熟现象。由于缺乏胚乳组织,需与真菌共生(symbiotical)才能萌发,自然条件下发芽率一般不及5%。石斛为合轴生长(sympodial),分株是其繁殖的主要方式,对生长条件的要求较为苛刻。石斛属植物中有不少是名贵中药,在《本草纲目》中石斛被列为上品。我国76种石斛属植物中有近40种作药用[2],著名的有 D.nobile(金钗石斛)、D.candium(铁皮石斛)、D.huosanness(霍山石斛)等。具有强阴益精、补肾益力、轻生延年等作用,其应用范围正迅速扩大。石斛属植物约有四分之一可供观赏[3],称为石斛兰 D.orchids,以花艳丽而著称,近年作为观赏植物发展迅速,已形成独立产业。集药用和观赏于一体的价值,加之过度的采伐利用和繁殖率低,造成了石斛供需之间的紧张状况,
我国已将其列为濒于绝灭的受保护的中药品种之一。自1960年法国人Gmorel利用石斛基尖组织培养无病毒植株的无性繁殖技术创立以来,石斛组织培养逐步走向深入化。近年来,石斛组织培养的最佳条件,包括光照、温度、pH以及如何选用外植体,选用激素等取得长足进展,并利用组培技术研究种子萌发过程中的生理生化变化等,还获得了转基因石斛植株。我国石斛组织培养研究起步较晚,直到1984年,徐云鹏等才首次报道获得霍山石斛试管苗[4]。此后又利用铁皮石斛、束花石斛、兜唇石斛的茎尖、叶尖或种胚获得了再生植株。 1石斛组织培养再生植株的获得 组织培养获得石斛再生植物株的途径有器官发生型和原球茎发生型两种。器官发生型通过外植体组织培养,使预先存在的分生组织形成芽(如腋芽)或不定分生组织(如子叶、茎段、愈伤组织等)形成不定芽。此途径又可分为3种类型:无菌短枝型(又称节培法),芽增殖型,器官发生型;原球茎发生途径通过石斛适宜外植体诱导产生胚性愈伤组织并增殖,随后形成类胚组织原球茎进而发育成完整的再生植株。通常由种子离体培养产生的胚性组织称原球茎(protocorm),而上外植体叶尖、基尖等诱导形成的胚性组织称为拟原球茎(protocorm like bodies)即PLBs。原球茎或拟原球茎转入不含任何激素或生长素的培养基(如MS)便可再生出完整小植株。 1.1原球茎发生 影响原球茎发生的主要有外植体的大小、来源、生理状态、培养基类型、激素浓度,种类、处理时间及一些其它因素。
铁皮石斛种子的组织培养
铁皮石斛种子的组织培养 考虑了好久，在网上买了一粒种子，不是不舍得，就是不知道是不是真的铁皮石斛，终于下手了，管他呢，至少是石斛吧，O(∩_∩)O~ 种子是买回来了，又犯懒了，本人最大的毛病就是思想很勤快，要是干实事，很懒，我是没见过我这么懒的人。懒也得做啊，种子再开口了怎么办？狠狠心开始干! 准备：首先是配制培养基，查了下资料，种子的无菌萌发培养基为1/2ms培养基，蔗糖20g，我稍微做了下调整，培养基1/2ms，蔗糖由20g变成25，琼脂为5g。 无菌萌发培养基：1/2ms培养基+蔗糖25g+琼脂5g（灭完菌接种的时候才发现，有点硬了！） 首先，我没有蒸馏水，用的就是大桶水，（态度不严谨啊O(∩_∩)O哈哈~)把琼脂5g，1/2ms培养基 2.14g，蔗糖25g一股脑的倒入800ml的冷水里 （注：个人认为，琼脂在开水的时候倒入容易结块，不容易溶解，当然用温水是好的，但何必呢，所以先倒入冷水，然后再加热，大家以为对不对啊）， 轻轻的搅拌，让培养基和蔗糖完全溶解，然后定容，注意，定容的时候要定容到1100ml，因为我们在加热的时候还有高压灭菌的时候，会有大量的水蒸气出现，多出的100ml是减少这部分的损失。
然后测量一下ph值，大概在3.4（当时记录了，但后来不知道弄哪里去了，也可能是4.2），先不管他，加热溶解！把烧杯放到液化气灶上开最小火，把烧杯放上，然后开始加热边搅 拌............................ 好漫长啊！ 大概10分钟的样子，终于好了，拿下来，开始测量ph值，然后慢慢的一滴一滴的加入氢氧化钠溶液边搅拌边测量，5.8！
铁皮石斛组织培养
铁皮石斛组织培养研究进展组织培养摘要：近年来，对铁皮石斛的需求日趋增加，而野生资源难以满足市场需求，组织培养技术使大规模人工栽培成为可能。从种子萌发、原球茎分化、生根与壮苗、原球茎增殖等方面阐述了近年来关于铁皮石斛组织培养技术的研究概况，并展望了发展前景。 铁皮石斛为兰科石斛属植物，是传统名贵中药材。《神农本草经》列为上品，具有益胃生津、滋阴清热、止咳润肺的功效。现代药理研究表明，石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管的作用。由于石斛自然繁殖力低，种子需与真菌共生才能萌发，加上长期采挖，使得野生铁皮石斛资源日渐枯竭，成为濒危植物，被列为国家重点保护的野生药材品种。为了满足市场的需求，国内许多科研人员进行了铁皮石斛组织培养技术的研究。 1 种子萌发 1.1 胚龄:不同种龄的种子萌发率不一样。叶秀嶙等取铁皮石斛2~ 6 个月种龄的种子进行组织培养发现，种龄愈长，萌发率愈高。2 个月种龄的种子接入改良N6培养基中，萌发率仅为6 % ; 3 个月种龄的种子接入改良叹培养基中，培养2 周后开始萌发，萌发率为87 % ; 4 一6 个月种龄的种子接入培养基中，只要培养一周即可萌发，萌发率为9 5 ％。 1.2 基本培养基:铁皮石斛种子在N6，改良N6，MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、KundsonC , 1 / 2N6，White等培养基上均可萌发。赵天榜等比较风、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响，除残外，所有的基本培养基均优于其减半培养基，其中以N6最好，SH 、Kn 、MS 次之，l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。 1.3 激素:在培养基中添加一定浓度的NAA 可促进种子的萌发，浓度以0.2 一0.5mg/L最适合胚的萌发和生长，过高起抑制作用。2 , 4-D对胚的萌发起抑制作用。6 一BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。KT 、IAA对胚萌发和成苗的影响不大，当浓度超过1mg/L 时，对胚萌发和成苗起抑制作用。 1.4 天然添加物:在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发， 1.5 炭源:在组培过程中适当添加活性炭，可以吸附代谢过程中产生的废弃物，防止组织褐变，并刺激胚胎的发生与生根，可加人2 ％蔗糖。 2 原球茎增殖 2.1 基本培养基:铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS，MS等作为基本培养基。 2.2 激素:适宜的NAA 、KT 、6 一BA 浓度对原球茎的增殖起促
铁皮石斛种植技术资料大全
铁皮石斛种植技术大全 铁皮石斛成品价格目前在云南省内为800元左右一公斤，采用温棚种植法，一般亩产量在300到500公斤。第一次种植后，一般可连续采收数年。从瓶苗开始种植到第一次收获成品，时间在18个月左右。种植铁皮石斛，经济效益较为可观。 铁皮石斛种植技术 移栽时先将已经长大的石斛种苗取出，用清水洗去根部的培养基，洗净为止，动作要轻，避免损伤其根和叶。如果有条件的话，还可在将石斛苗植入基质之前20分钟，将石斛苗放入促进生根的药液中浸泡两分钟。然后栽种在基质中，再放入苗盘。种植用的基质首选材料为树皮，其次为锯木屑，也可用水苔。铁皮石斛驯化栽培首要因素是必须提供其根系良好的生长环境。锯木屑因其疏松透气，又能保持水分及肥料，适合根系生长的要求。无论选用何种基质，都要预先经过消毒处理。种植时，需要把系分开，不能搓成一束。根系不能种得太深，把根埋住即可。 栽培方法：将组培苗取出，洗去培养基，即可定植。移栽时将石斛的根部放在基质上，然后用基质盖住根部，直至不见根后，浇足水。移栽前一定对基质进行灭菌消毒。对铁皮石斛大苗生长最为有离的株距为15公分，行距为20公分。如
果小苗种植后不再进行移植，可一次按这一标准进行种植。。对于小苗的正常管理，应保持湿度80％，温度不可超过35℃，不接受长时间的阳光直射。刚种植的幼苗，一般以两天浇水一次为宜。 石斛喜温暖、湿润及阴凉的环境，生长期年平均温度在18℃～21℃之间，1月份平均气温在8℃以上，无霜期250～300天；年降雨量1000mm以上，生长处的空气相对湿度以80%以上为适宜。在光照太强或过弱、气温过高或太低、土质贫瘠或保水性差的环境则生长不良。 栽种方法 石斛栽种宜选在春（3～4月）秋（8～9月）季栽种为好，尤以春季栽种比秋季栽种更宜。这主要是充分利用阳春三月，气候回升，风和日暖，春雨如油，万物复苏的黄金季节，适宜的温湿度，日照，雨水等条件，有利于刺激石斛茎基部的腋芽迅速萌发
铁皮石斛工厂化生产技术研究
铁皮石斛工厂化生产技术研究 铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是一种兰科石斛属多年生附生草本植物,主要生长于高海拔的山地较阴湿的岩石上,自古以来就由于被认为具有增强人体免疫力和抗衰老的功能,而被认为是一味珍贵的中草药。本论文的试验从铁皮石斛原球茎入手,进行PLB离体条件培养优化,从PLB增殖的优化到多糖含量的测量,然后用改进后的最佳增殖培养基进行铁皮石斛工厂化育苗生根壮苗的培养、优化,探究了不同LED光源对组培苗生长的影响,再到大田移栽中最适宜的栽培基质。 最后,本文尝试建立铁皮石斛原球茎多糖工厂化生产模式,并对该模式进行了效益分析。1、铁皮石斛原球茎离体培养条件的优化通过铁皮石斛原球茎进行PLB的离体培养优化。 (1)铁皮石斛原球茎添加2.0 mg/L的6-BA时,增殖的效果也显著。最佳的原球茎增殖的配方为1/2MS+1.0mg/L 6-BA+100g/L土豆泥。 改良MS中KNO3, KH2PO4比例分别为0.5和1倍时,原球茎的增长系数最高。 (2)添加茉莉酸甲脂对铁皮石斛原球茎增殖的效果不明显。 (3)有机添加物组合增殖系数较高的有：1/2MS (KNO3, KH2PO4:0.5和 1)+50g/L土豆、1/2MS (KNO3, KH2PO4:0.5和1)+50g/L椰子+100/L土豆、1/2MS (KNO3, KH2PO4:0.5和1)+50g/L番茄汁+100/L土豆1/2MS1/2MS (KNO3, KH2PO4:0.5和1)+50g/L香蕉泥+100/L椰子。综合工厂化的经济效益来看,在增殖效果相当的情况下,只添加50g/L的土豆是最经济实惠且增殖系数又较高的。 2、在添加不同激素和有机添加物时原球茎多糖含量的比较在添加不同配比的激素和有机添加物条件下,测量并比较原球茎的多糖含量发现,不同激素加添
铁皮石斛营销策划
目录
第二部分：跨境电商行业潜力 第三部分：公司介绍 第四部分：牡丹籽油项目背景 第五部分：牡丹籽油行业市场分析第六部分：产品与技术 第七部分：营销规划 第八部分: 财务分析 第九部分：风险分析 第十部分：应对措施
第二部分：跨境电商行业潜力 跨境电子商务作为21世纪一种新型跨境贸易方式，在我国取得了飞速的发展，目前已经成为我国经济发展新的潜力点和电商行业新的领域，但它仍在海关、物流、监管等方面依然存在着影响其进一步发展的诸多障碍因素。目前世界贸易增速日益缓慢，为了开拓市场的广泛性、提高效益的增速，越来越多的跨境电商开始放眼于减少流通渠道、降低流通成本价格、与国外消费者距离亲近，因此跨境电商正为此提供了非常有利的发展的渠道 亚马逊公司是在1995年7月16日由杰夫·贝佐斯成立的，一开始叫Cadabra。性质是基本的网络书店）然而具有远见的贝佐斯看到了网络的潜力和特色，当实体的大型书店提供20万本书时，网络书店能够提供比20万本书更多的选择给读者。亚马逊公司的最初计划原本是在4到5年之后开始有营利，2000年的网络泡沫造成了亚马逊公司平稳成长的风格成为独树一帜的佳话，在1990年代有相当多网络公司快速成长，当时亚马逊公司的股东不停抱怨贝佐斯的经营策略太过保守和缓慢，而网络泡沫时候，那些快速成长的网络公司纷纷结束营业，只有亚马逊还有获利，2002年的第四季，亚马逊的纯利约有500万美金。2004年则成长到3亿多美金。
第三部分：公司介绍 郑国药用植物研究有限公司成立于2016年6月，主营药用植物种植技术研究、药用植物产品研发和销售及信息交流等业务。 公司根据新郑市委、市政府关于具茨山开发要体现“生态、文化、旅游、扶贫”原则的总体要求，投资建设具茨山大型生态健康养生产业园项目。项目以生态、健康和养生为主题，以地方文化（炎黄文化、郑国文化、岐黄文化、本草文化）营造为主线，以珍奇药用植物研究产业化为核心，计划在3-5年内建成郑国药用科技产业园、郑国药用植物园、郑国中医养生健康园、郑国文化旅游观光园，打造一个集药用植物科研科普、药用植物和绿色农产品开发、传统文化体验、休闲观光、健康养生等服务于一身、融合一二三产于一体的多功能健康养生产业综合体。 项目目前已建成投用1500平方米的专家科研楼、400平方米现代化组培室、400平方米技术先进的低温冷库，建成投用5个总面积达
铁皮石斛 组织培养 栽培 试验 实验
铁皮石斛茎段组织培养与栽培 摘要: 为试验铁皮石斛茎段组织培养与栽培，以铁皮石斛茎段为外植体，结合铁皮石斛的生物学特性，综述铁皮石斛组织培养与栽培的过程技术。观察研究基本培养基、天然附加物和植物生长调节剂对铁皮石斛生长的影响。验证和探究铁皮石斛茎段组织培养技术并对铁皮石斛的组织培养与栽培管理技术进行了思考与展望。 关键词: 铁皮石斛; 组织培养; 茎段; 移栽; 驯化 0.引言 铁皮石斛( Dendrobium officinale Kimura et Migo) 是兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium Sw．)多年生草本植物，又名黑节草，俗称铁皮枫斗，分布于云南、安徽、贵州、浙江、江西、广东和广西等地，是我国传统名贵珍稀中药材，其有效成分主要为石斛多糖、石斛碱、氨基酸等，其中石斛多糖的含量高达21.7%，能显著提高机体免疫功能，具有养胃出津、补肾益力、滋阴清热、耐缺氧、抗疲劳、抗肿瘤等功效。现代药理学研究发现，石斛还具有抗衰老和扩张血管的作用。 铁皮石斛喜荫凉、湿润的环境，常附在高海拔悬崖峭壁或林内树干和岩石缝隙中。由于其药用价值高、生长条件特殊和分布受局限，且经长期人为采挖，野生资源濒临灭绝。铁皮石斛是2005版《中华人民共和国药典》收载的3种石斛属植物之一，为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。铁皮石斛蒴果成熟时易开裂，且种子粒径小，自然繁殖率低，是一种珍稀的药用植物和和名贵的室内观赏植物.。
铁皮石斛自然繁殖力极低, 常规繁殖又较困难, 且多年来对铁皮石斛的采集量远大于其生长量, 野生铁皮石斛自然繁殖已濒临绝迹。由于药用价值高，人为的过度开采与生态破坏，野生铁皮石斛已濒临灭绝，1987年国务院将其列为国家重点保护植物。 1 材料与方法 1. 1 试验材料 野生云南铁皮石斛，取材于浙江农林大学组培实验室，取其茎段作为外植体进行组织培养。 1. 2 试验方法 1. 2. 1 外植体消毒 取铁皮石斛的茎，去除多余叶片后用解剖刀将茎切成含 3 ～ 4 个节点的茎段，保留节点。依次用中性洗涤剂清洗，自来水冲洗20min，用70% 的乙醇浸泡10 ～60 s，再转入0. 1% 的氯化汞中，灭菌 5 ～11 min 后倒去氯化汞溶液，用无菌水反复漂洗材料3-5 次。用无菌纸吸去茎段上多余水分，将其切成1 ～2 cm 带一个芽点的茎段，接种到培养瓶中培养。 1. 2. 2 培养基制备 铁皮石斛培养基均添加3% 蔗糖，0. 7% 琼脂，pH 值为5. 8。按不同目的在基本培养基中加入6-BA、NAA、IBA，每个培养瓶分装50 m 培养基，密封。经过121 ℃高温灭菌25 min。不定芽的诱导培养基是在基本培养基MS 中加入细胞分裂素和生长素，采用不用浓度水平的NAA 和6-BA。组培苗的壮苗与生根，将生长状态稳
铁皮石斛组培苗移栽新技术
铁皮石斛组培苗移栽新技术 铁皮石斛喜荫凉、湿润的环境，常附在高海拔悬崖峭壁或林内树干和岩石缝隙中。由于其药用价值高、生长条件特殊和分布受局限，且经长期人为采挖，野生资源濒临灭绝，因而国内市场供应紧缺，国际市场每公斤干品价已达1000美元以上。 铁皮石斛自然繁殖率极低，通过组织培养快速大量繁殖铁皮石斛组培苗成为解决种苗问题的有效途径。虽然铁皮石斛组培苗移栽方面的相关报告很多，笔者也才曾按照这些报告去操作，但移栽成活率最多只有60%，且操作麻烦，不能从根本上解决成活率低的问题。笔者认为主要原因是不易满足铁皮石斛组培苗生长环境的特殊要求，尤其是水分和透气两方面因素不易控制，稍一操作不当，就易死苗。笔者的研究表明，通过搭建高架种植畦来移栽铁皮石斛组培苗，非常简单地解决了以上难题。因在高架畦上种植铁皮石斛组培苗，可以随时喷雾浇水，随时排走多余水分，不会因为水分太多而造成烂根死苗，而且能保证根系通风透气，因而移栽成活率大大提高，能达到95%以上。这一技术为大面积人工栽培铁皮石斛提供了可靠的技术依据。 1移栽前的准备 1.1炼苗 移栽前先将瓶苗至炼苗房进行2~3周的炼苗，让瓶苗从封闭稳定的环境向开放变化的环境过渡，慢慢适应自然环境，等瓶苗生长健壮、叶色正常，根长3cm以上，肉质茎有3~4个节间、长有4~5片叶，叶色正常，根长3cm以上，有4~5条根，根皮色白中带绿，无黑色根，无畸形，无变异。 1.2出瓶 组培苗出瓶时，打开瓶塞将培养基与小苗一起轻轻取出，整齐放置于盆中待清洗，污染苗、裸根苗或少根苗分别放置。正常组培苗先在自来水中洗净培养基，特别要洗掉琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，再换自来水清洗一次。裸根或少根组培苗经过上述清洗后，还需将小苗根部置于100mg/L的ABT生根粉中浸泡15分钟，以进行生根诱导。污染苗经过清洗后，用1000倍多菌灵浸泡整株小苗10分钟。后期管理得当可有效控制污染的发生。 1.3基质的准备 移栽铁皮石斛组培苗要选择适宜的基质。铁皮石斛的根是气生根，有明显的好气性和浅根性，因此，要求基质以疏松透气、排水良好、不易发霉、无病菌和害虫潜藏者为宜。可以选择水苔、石灰石、碎砖、树皮、刨花、蕨根、板边、菌糠、木糠等为移栽基质。
1.4栽培场地的选择 铁皮石斛喜温暖、多雾、微风、清洁、散射光环境，忌阳光直射和曝晒。在移栽过程中要创造条件，为铁皮石斛创造最佳的生长环境。铁皮石斛原产区大多处于温带和亚热带，全年气候温暖、湿润，冬季气温在0℃以上。根据铁皮石斛的生长习性，要考虑场地的光照、温度、湿度、通风等自然因素。笔者认为最好选择在大棚内移栽，而且要移栽在高架畦，这样容易满足铁皮石斛生长的最佳环境要求，而且很多自然因素容易控制。在建造育苗大棚时要满足以下三个条件： （1）育苗大棚要通电、通水铁皮石斛喜荫凉、湿润的环境，常附在高海拔悬崖峭壁或林内树干和岩石缝隙中。由于其药用价值高、生长条件特殊和分布受局限，且经长期人为采挖，野生资源濒临灭绝，因而国内市场供应紧缺，国际市场每公斤干品价已达1000美元以上。 铁皮石斛自然繁殖率极低，通过组织培养快速大量繁殖铁皮石斛组培苗成为解决种苗问题的有效途径。虽然铁皮石斛组培苗移栽方面的相关报告很多，笔者也才曾按照这些报告去操作，但移栽成活率最多只有60%，且操作麻烦，不能从根本上解决成活率低的问题。笔者认为主要原因是不易满足铁皮石斛组培苗生长环境的特殊要求，尤其是水分和透气两方面因素不易控制，稍一操作不当，就易死苗。笔者的研究表明，通过搭建高架种植畦来移栽铁皮石斛组培苗，非常简单地解决了以上难题。因在高架畦上种植铁皮石斛组培苗，可以随时
铁皮石斛组织培养
小苗可以用苔藓或水苔!中苗就要树皮石子加苔藓!大苗可用石子树皮等!至于用来 培养组织苗的培养基属难告知 恩，这个我知道，我就想出了MS培养基，没有其他适合的了吗？培养基也属于商业秘密啊？ 很多好一些的营养基都是商业密秘!我会去给你找个适合石斛的营养基.只能给你个普通的!希望你喜欢 石斛较常见的培养基配方,花宝三克,百分之十到百分之二十的萍果汁一千毫升,蔗糖浓度百分之三点五.琼脂十五克.蒸溜水一千克氢离子浓度调节到一万纳摩/升(PH5.0) 常规铁皮石斛开花后采用人工方法授粉，将其种子接种在１／２ＭＳ液体培养基中非共生萌发培养时，再转入含有０．０１％Ｏｒｙｚａｌｉｎ＋０．０１％秋水仙碱的１／２ＭＳ液体培养基中进行诱变处理，然后转入１／２ＭＳ固体培养基上，光照；取新生长的根尖固定，用压片法制备染色体标本，卡宝品红染色液染色，染色体数目为２ｎ＝７６的幼苗为四倍体铁皮石斛，按通常方法进行栽培管理。 现在大部分采用松树皮发孝后来种的！ 铁皮石斛组织培养的培养基用到的主要基本培养基是MS培养基，也不只是这一种，其它的WV、winte等都可以用，但是一般多用MS培养基，也可以用1/2MS培养基，大量元素减半，其它元素不变。 除此之外，还有加一些生长素（如IAA、IBA、NAA等），细胞分裂素（如6-BA等）。但是不同的培养时期也不同的激素配合。如诱导愈伤组织时，要两种激素的配合。增殖传代时也要两种激素的配合，但生长素为主；分化时以分裂素为主，壮苗和生根以生长素不主。一般用量都是0.1-10mg/L这个范围里。 此外，还有的加了什么香蕉素，椰看你是用什么外植体，或是想诱导什么先了， 一般如果是茎段的话，用一般的MS+0.3mg/L NAA+5mg/L 6-BA做诱导培养基就好，但是如果你要用根茎做外植体诱导原球茎的话，最号用1/2MS加上水解乳蛋白和激动素和6-BA 就好,量看你外植体了，不同的类型不同 乳等。 一般NAA：6-BA是10：1，即2：0.2mg/L （一）繁殖技术 石斛的繁殖方法分为有性繁殖和无性繁殖两大类，目前生产上主要采用无性繁殖方法。 1、有性繁殖即种子繁殖。石斛种子极小，每个蒴果约有20000粒，呈黄色粉末状，通常不发芽， 只在养分充足、湿度适宜、光照适中的条件下才能萌发生长，一般需在组培室进行培养。不过，尽管石斛繁殖系数极高，但其有性繁殖的成功率极低。 2、无性繁殖 （1）分株繁殖：在春季或秋季进行，以3月底或4月初石斛发芽前为好。选择长势良好、无病虫害、
铁皮石斛种植全过程图文教程
铁皮石斛种植全过程图文教程 铁皮石斛种植全过程图文教程 一.铁皮石斛种植基质准备铁皮石斛种植的基质就是用上面大小木块1:1:1 铁皮石斛种植基质是木块，树皮，松果皮混合物比例为1:1:1 举例：比例为:木屑,树皮1:1 幼苗期也可木屑,珍珠岩1:1 成苗期木屑树皮1:2 或者1:3 (小知识:基质4:1混合羊粪密封发酵2-3个月) 铁皮石斛种植的基质要本着因地制宜的原则!!! 可用颗粒在1厘米见方的碎砖瓦、木炭、褐煤、栎树皮、杞木树皮、松树皮、松球、碎刨花、杉木树枝条的切碎段及树木的须根、蕨根等。铁皮石斛种植注意不可用基质: 不宜用腐叶土、山基土等做基质。用各种树皮做基质的，要用水浸泡一个星期排酸、杀虫、杀菌后用多菌灵等防病农药消毒后使用。基质一定要把过细粉末筛除后使用。铁皮石斛种植的基质的作用: 栽培石斛所用基质有这样几个作用：一是固定作用；二是提供水分作用；三是提供低离子浓度养分作用。所选用的基质应当是：保水又不积水，保证通气，含有一定的养分，耐腐烂，不带害虫卵及病源。根据基质的作用和对基质的要求，能用于作栽培石斛基质来源也较广泛。铁皮石斛种植的基质
的处理办法: 上述材料在使用时，可随时配制，用树皮也可以单独使用。如：碎砖瓦、木炭（蕨叶灰碳）占1/4，各种树皮、刨花、 杉木树枝条占3/4。还可配上一定量的羊屎或人工制作的有 机肥料颗粒。从目前的实验来看，松树皮、松球颗粒加上部分枥树皮、蕨叶碳灰、羊屎颗粒是较好的栽培基质。注意：配用农家肥时，一定要发酵后才可以使用。基质以疏松透气、排水良好且能保水保肥、不易发霉、无病菌和害虫潜藏者为宜。基质在使用前应该经药剂浸泡（多菌灵、甲基托布津、高锰酸钾，（800～1500倍液）等方式消毒. 铁皮石斛种植的基质注意不可用处理办法: 铁皮石斛种植的基质最好不要使用高温消毒处理.这样处理 出来的基质种植的苗不长.容易封顶.原因：因为高温消毒后 基质内的细菌会全部被灭杀，本身对石斛有用的益生菌也会被杀死。而且这样的基质用于外界更易感染外来细菌，幼苗期更容易生病。因为菌群不平衡的原因。二.铁皮石斛的瓶苗的处理 1.铁皮石斛的炼苗 移栽前先将瓶苗至炼苗房进行2~3周的炼苗，让瓶苗从封闭稳定的环境向开放变化的环境过渡，慢慢适应自然环境，等瓶苗生长健壮、叶色正常，根长3cm以上，肉质茎有3~4个节间、长有4~5片叶，叶色正常，根长3cm以上，有4~5
铁皮石斛栽培管理
铁皮石斛栽培管理 铁皮石斛(Dendrobium candidumWall．eX Lindl．)是传统名贵中药，自古以来被认为是滋阴补益的珍品。早在1 400多年前的《神农本草经》和400多年前的《本草纲目》等古籍中，就有铁皮石斛具有滋阴生津等功效的记载。利用现代的医学手段也证实铁皮石斛含有石斛碱、石斛次碱等生物碱及次甲基石斛素、石斛醌、挥发油和多糖等成分。铁皮石斛主要分布在海拔600-2500m的山谷半阴湿林中树上或林缘岩石上，要求的生态环境比较特殊。而且铁皮石斛坐果率低，种子不易发芽，自然繁殖率极低；又因森林遭受破坏，生境恶化，加上人们长期的采挖，野生铁皮石斛资源愈来愈稀少，种源已临枯竭，处于濒临灭绝的境地，在《中国植物红皮书》(1991年出版)中被列为濒危种。因此发展铁皮石斛的人工栽培成为保护和利用铁皮石斛资源的必然之路。 1 铁皮石斛的生物学特性 1.1 形态特征 铁皮石斛的茎丛生，圆柱形，直立，绿色或铁灰色，有明显的节和纵槽纹，基部稍窄；高几厘米至几十厘米不等。多节，节间略膨大，节部稍缢缩，黑褐色并具明显光泽。叶少数，互生于茎上部，无柄，叶片长圆状披针型；叶鞘膜质，紧抱节间，灰白色；叶面与叶鞘均具淡紫色斑点。总状花序生于具叶或无叶茎的上部节上，花2～5朵，淡黄绿色或淡黄色。果实为蒴果，长卵状，蒴果种棱为3棱，色暗绿至青绿色，布有棕褐色斑点；种子小而多，种皮是一层透明的薄壁细胞。有加厚的环纹．种皮含大量空气；种内胚发育不全或不成熟，无胚乳。根附生于岩石上，为无分枝的气生根，扁圆，白色，绿色或灰白色、灰袍色，粗1 mm 左右，长度与株高一般。 1.2 生长特性 1．2．1生长环境 铁皮石斛多生长于海拔600-2500m之间、年平均气温12-18℃、相对湿度60％-75％、透光度60%左右、生长季节温度20-28℃、冬季气温9-12℃、无霜多雾、年降雨量500-1000mm 的常绿阔叶林中。铁皮石斛自然结实率很低．何平荣等认为平均自然结实率为0.31％。其中以开花当天萼片还没有完全展开时的人工授粉结实率最高。铁皮石斛以异花授粉为主，其自花授粉成功率极低、仅30％左右，而异花授粉成功率达100％。铁皮石斛野生种子的成活率很低。 1．2．2生长周期 铁皮石斛的假鳞茎基部具分孽能力，自然条件下分孽很慢，一般1年只分孽l茎，每年分孽茎生长量也增加，因此一般可以根据茎数和茎的高矮判断其株丛“年龄”。一年生新茎下萌生须根，春季和夏季是生长高峰，秋季进入休眠状态时叶不脱落，属于常绿生活型：二年生茎主要是积累营养和孕花，一般不再生长，第2个生长季节结束后，茎上的叶逐渐脱落；三年生茎开花结果，开花茎落叶后则不再萌生新叶，呈赤裸状：四年生茎丧失分孽能力；五年生和六年生的茎相继枯萎死亡。 2 铁皮石斛栽培管理 就铁皮石斛栽培地区的选择而言，我认为应根据铁皮石斛的生物学特性，充分考虑场地的光照、温湿度、通风等自然因素(一般选择有野生铁皮石斛分布的地区)。为了获得高产、优质的铁皮石斛，必须做到规范化种植、集约化栽培，人为创造一个优越的生长环境，使种植条件基本接近其野生的环境气候条件，以满足它的生长需要。一般在温室中苗床上种植，这样很多因素都可以进行人工控制。 2.1栽培前的准备工作
铁皮石斛高效栽培技术及综合利用(省)形考二-0003
形考二-0003 试卷总分：100 判断题(共10题,共40分) 开始说明： 结束说明： 1.(4分) 在铁皮石斛种子培养中，1/2MS培养基用于种子萌发、原球茎分化和试管苗生根，MS用于 原球茎增殖和壮苗的培养。 √ × 2.(4分) 铁皮石斛在整个花期内进行人工杂交授粉结果，开花后两周内座果率可达100%。 √ × 3.(4分) 铁皮石斛北种南引，导致不适应引入地的生态和栽培条件，冬季不能正常越冬而死亡。
√ × 4.(4分) 铁皮石斛原球茎继代培养条件为：16 小时光照，光照强度1500～2500勒克斯，温度为26～28℃；8 h暗培养，温度为20～22℃。 √ × 5.(4分) 现有铁皮石斛品种均为野生种质人工驯化而成，选育方法相对传统，选育程序有待完善。 直至20世纪80年，我国几乎没有科技人员从事药用植物育种。 √ × 6.(4分) 铁皮石斛用茎段、根尖均可成功诱导出愈伤组织、原球茎或直接转化成芽获得再生植株。 √ × 7.(4分) 2010年版《中国药典》规定铁皮石斛多糖含量不得低于10.0％ √
× 8.(4分) 常见的铁皮石斛快繁初代培养：选择饱满无破损的铁皮石斛种子，经消毒后，接种到培养 基上培养就可。 √ × 9.(4分) 国际上，药用植物育种起步也很晚，1969年在德国召开了第一次药用和芳香植物育种研 究国际会议。 √ × 10.(4分) 铁皮石斛良种选育时，用于原生态栽培，必须具有很好的环境适应能力，如抗低温与高温、 干旱与水湿、病害与虫害能力等特点。 √ × 单选题(共5题,共30分) 开始说明： 结束说明： 11.(6分)