ACCESS2化学发光仪

Beckman Coulter ACCESS2®

全自动微粒子化学发光仪操作规程

1 目的

此规程用于Beckman Coulter ACCESS2全自动微粒子化学发光仪的操作与维护工作。

2 适用范围

适用于Beckman Coulter ACCESS2 全自动微粒子化学发光仪。

3 方法与原理

3.1以碱性磷酸酶标记抗原，抗体；

3.2以磁性微粒子（d<7μ）为载体；

3.3发光底物为AMPPD（Dioxetane-phosphate）

3.4免疫学反应模式：夹心法和竞争法

4 检测项目

4.1生殖激素

β-HCG ， Prolactin ，FSH ， LH ，Progesterone

Estradiol ， Unconjugated Estriol ， AFP-ONTD

Testosterone ，DHEA-S

4.2甲状腺激素

T3 ，T4 ，TU ，HYPERsnesitive hTSH ，FT4 ，FT3

Anti-TPO ，Thyroglobulin ， Anti-Thyroglobulin

4.3贫血

VitB12，Folate ，RBC Folate ，Ferritin

4.4心血管系统

CK-MB ，Digoxin ，Mylglobin ，Accu Troponin I

4.5肾上腺/垂体

Cortisol ，Urine Cortisol ，Human Growth Hormone

PTH ，ACTH*

4.6肿瘤标志物

AFP ，CEA ，PSA，Hybritech PSA，Hybritech free PSA CA19-9 ，CA125 ，CA15-3

4.7感染性疾病

Chlamydia Ag ，Urine Chlamydia Ag ，Chlamydia Ag Confirmatory

Toxo IgG，Toxo IgM ，Rubella IgG，Rubella IgM ，CMV IgG* ，CMV IgM*

4.8糖尿病

Ultra Sensitive Insulin

4.9过敏性疾病

Total IgE

4.10治疗药物监测

Theophylline ，Digoxin

4.11骨代谢

Ostase ，μDpd*

4.12血液病毒

HIV ½ ** ，HBsAg ， HBsAg Confirmatory ， HBsAb ，HCV Ab ** HAV IgM ， HAV Ab， HBc Ab， HBc IgM ， HBeAg* ，HBe Ab *

4.13产前筛查

AFP ，β-HCG , uE3

4.14 表1化学发光免疫分析仪项目速查表

表1 ACCESS化学发光免疫分析仪项目速查表

5 硬件结构介绍

ACCESS2硬件结构简介

5.1 系统组成部分

工作站（显示器，键盘），打印机，分析仪

5.2 分析仪组成部分

5.2.1转盘模块

5.2.1.1转盘门

标本转盘

可容纳6个标本架

共60个标本

具备原始管标本系统功能

5.2.1.2条码阅读器

可扫描标本架以及标本管条码

5.2.1.3试管探测器

对于各种标本架条码均能探测标本管是否存在

对于1－57号标本架，允许在同一架上放置3种规格的标本管

5.2.1.4转盘试剂

24个试剂舱位；50测试/试剂盒，共1200人份

试剂冷藏装置，确保试剂保存于3－10摄氏度

5.2.2主探针模块

5.2.2.1多功能主探针

用于标本及试剂采样

超声波发生器

混均试剂盒内的磁性微粒子

超声波清洗

标本液面感应

混均反应管中的反应混合物

5.2.2.2主探针导轨

5.2.2.3精密泵

5.2.3分析模块

5.2.3.1反应试管转载器

具有内部锁,运行过程中前盖被打开时将停止一切机械动作在不通过功能键装载反应试管时有报警功能

5.2.3.2反应试管供应

每架98只管一次最多加入3架，共294只试管

5.2.3.3孵育带

共60只反应管的位置

保持37摄氏度

双向，异步，高速

5.2.3.4读数（检测）转盘

3个磁性微粒子清洗站

清洗臂包括：

3根吸液针

3根清洗缓冲液放液探针

1根发光剂探针

检测器（光电倍增管）

每秒记数10次

计算RLU（相对发光单位）平均值

封闭式的反应管回收袋

5.2.4液路模块

清洗缓冲液

成份为Tris缓冲液

供应装置为个2升塑料瓶和1个2升储液灌

具有液面感应功能

废液液路

冲洗站废液由真空泵排走

清洗转盘废液经吸液针由真空泵排

废液灌

容量为4升

由重量感应器监测

发光剂液路

5.2.5电路模块

印刷电路板

电源系统

3.5英寸软盘驱动器

2.1GB硬盘驱动器

重启动按钮

9针RS232接口

5.2.6外围设备

外置条码扫描器

彩色显示器

键盘及托架

惠普喷墨打印机

6 运行条件

6.1 运行环境

为保证仪器的正常运行，仪器必须在满足下列条件和维持相应环境的情况下使用。

6.1.1 灰尘少，换气良好的环境

6.1.2 避免阳光直接照射。

6.1.3电源电压在220±10v 之内

6.1.4有保护性接地

6.1.5室内温度保持在18-32℃，相对湿度保持在20-80%。

6.1.6亮度：0-200呎烛光环境下，结果不受影响。

6.1.7最大海拔高度：6500英尺

6.1.8仪器附近没有发射高频的机械（离心机、放电装置等）

6.1.9不能有身体可察觉的振动。

6.2安全条款

6.2.1在使用对人体有危险或发生感染的样品时，请使用橡胶手套，不要直

接接触。

6.2.2在仪器上面和周围不要使用可燃性危险品、避免引起火灾和爆炸。

6.2.3在仪器运转过程中，勿触及样品针、试剂针、搅拌棒、反应容器、清

洗机构等，避免人身伤害。

6.2.4仪器的操作、保养应按规定的程序进行。

6.2.5在电源开关处于on状态下接触线路板有触电危险。

6.2.6禁止打开仪器前右侧、背面及侧面面板。会损害线路板。

6.2.7请勿用肉眼直视光源灯光。否则会伤害眼睛。

7 开关机程序

7.1 开机步骤

7.1.1打开电脑显示器

7.1.2按下机器右侧后部开关

7.2 开机前试验准备

7.2.1检查耗材F3（Supplies）

7.2.2 F6观察温度，待温度稳定方可进行测试

7.3 本机为24小时待机设计，无特殊原因无需关机。

7.4关机步骤

关闭电脑显示器及仪器右侧后部开关

7.5机器状态检查

7.5.1加注系统

探针是否沾有水滴、脏污，是否弯曲、堵塞；各清洗槽是否堵塞、脏污。

7.5.2清洗液

检查清洗液，不足时添加。

7.5.3废液桶

倒掉废液，清洗废液桶。

7.5.4 仪器台面

确认仪器台面清洁、无杂物。

7.6 供电电源

检查UPS开关应在on状态。

8 仪器设置

8.1检测项目的打开\关闭

8.1.1主菜单下按[F8]-系统设置；

8.1.2按[F2]-项目；

8.1.3在项目列表中找出所需设置项目；

8.1.4在Enabled打上对勾选择打开，去掉对勾选择关闭。

8.1.5按Back-主菜单

注意：只有当检测项目打上对勾即打开状态时，才可进行该项目的试剂装载.

8.2检测项目单位及有效位数设置

8.2.1主菜单下按[F8]-系统设置；

8.2.2按[F2]-项目；

8.2.3将光标移到所需设置项目处；

8.2.4按[F2]-单位选择；

8.2.5将光标点到所需设置样本类型处，按下拉框后出现单位列表；

8.2.6选择所需单位，按F1确认；

8.2.7将光标右移到有效位数处，可输入“1”、“2”、“3”表示小数点

后的位数；

8.2.8按Back-主菜单

注意：在仪器和中文电脑上选择的项目单位必须一致，才能保证结果准确

8.3 项目组合设置

8.3.1主菜单下按[F8]-系统设置；

8.3.2 按F3-项目组合；

8.3.3 按F4-添加组合；

8.3.4 在组合名称处输入组合名字；

8.3.5 将所需选择项目从左侧添加至右侧组合处；

8.3.6 按F1保存：

8.3.7 在测试ID处输入序号，在Enabled处打对勾激活；

8.3.7按Back-主菜单

9 ACCESS2微粒子化学发光分析仪日常操作

9.1装载反应试管

9.1.1. 主菜单下选择[F3]-耗材;

9.1.2. 选择[F4]-装载反应杯;

9.1.3. 撕开反应杯盒包装纸，打开耗材供应槽上盖

9.1.4. 放入整架反应杯，用力关闭上盖

9.1.5. 打开上盖，取出反应杯空架，关闭上盖

9.1.6. 选择[F1]-完成

9.1.7. 选择Back-主菜单，或选择[F4]-装载反应杯，装载下一架反应杯

注意:

在加入反应杯后,切记要取出反应杯空架；

不可装载超过3架反应试管；

避免在未装入反应试管时按下完成键，导致虚假记数

9.2试剂装载

9.2.1 主菜单下选择[F3]-耗材;

9.2.2 选择[F1]-试剂装载;

9.2.3 取出试剂，扫描试剂盒条形码，轻轻混匀试剂;

9.2.4 打开试剂转盘上盖，放入试剂，关闭上盖

9.2.5 选择[F1]-DONE

9.2.6 选择Back 回主菜单，或者选择[F1]-试剂装载，装载下一试剂

注意:

当条码弄脏或破损时,可以用手工输入条码下的数字与字母

新试剂盒在装入前需轻轻颠倒摇匀；

已经使用的试剂再次装入时不可颠倒混匀；

9.3 更换基质

9.3.1 提前18小时将需更换的新基质置室温预温；

9.3.2 主菜单下选择[F3]-耗材；

9.3.3 选择[F5]-更换基质；

9.3.4 打开空基质瓶，注意勿触及基质导管及内盖；

9.3.5 换上新的基质并扫描条码确认；

9.3.6 选择[F1]-完成；

9.3.7 选择Back-主菜单；

注意：

必须提前18小时以上预温发光基质

9.4更换废反应试管袋

9.4.1 主菜单下选择[F3]-耗材；

9.4.2 选择[F6]-更换废反应试管袋；

9.4.3 取一新袋，充分拉开；

9.4.4 打开耗材舱门，取出已经装满的试管袋；

9.4.5 把新袋装入正确位置，将塑料边卡入金属槽内；

9.4.6 盖上耗材舱门；

9.4.7 按[F1]-完成；

9.4.8 按Back-主菜单。

9.5试剂卸载

主菜单下选择[F3]-耗材;

选择需要卸载之试剂名称;

选择[F2]-试剂卸载;

9.5.4 打开试剂转盘上盖，拿出试剂，关闭上盖;

9.5.5 选择[F1]-DONE;

9.5.6 选择Back-回主菜单，或继续选择下一需卸载的试剂; 注意:

卸载下的试剂不可以用于另一台ACCESS，

否则会导致试剂计数错误。

9.6删除试剂(已用完)

9.6.1 主菜单下选择[F3]-耗材；

9.6.2 选择[F7]-试剂库存

9.6.3 选择所需要的试剂

9.6.4 选择[F5]-删除试剂

9.6.5 选择“OK”

9.6.6 选择Back-主菜单

注意：

确认该批号试剂已经用完才能删除；

如果一未用完试剂被删除后再重新装载，将被仪器当作全新

试剂，导致吸量错误。

9.7更换废液

9.7.1 直接开盖倒空废液桶，然后放回原位，盖上盖即可

9.8单个编程：

9.8.1主菜单下按F1

9.8.2输入样本架号，回车 (如果这一架已编过程，则先清除：按F7清除) 9.8.3按F3测试申请

9.8.4输入样本号，选择要做的项目

9.8.5检查样本所有项目都编好了，返回上一屏

9.8.6选上要放入的样本架，按F1，放入样本架

9.8.7按OK确认

9.8.8按RUN运行

9.9批量编程：

9.9.1菜单下按F1

9.9.2输入样本架号，回车 (如果这一架已编过程，则先清除：按F7清除) 9.9.3按F3测试申请

9.9.4输入起始样本号，选择要做的项目

9.9.5按F8出现选项

9.9.6光标移到第一项Trun Batch Request On,回车

9.9.7此时批量方式己打开只须输入样本号，回车,此时所输入的样本号都做同样的项目。

9.9.8如果光标再移到F8中的第二项Turn Auto Sample ID On，回车，样本号将自动生成。

9.9.9编完后，检查样本所有项目都编好了，返回上一屏

9.9.10选上要放入的样本架，按F1，放入样本架

9.9.11按OK确认

9.9.12按RUN运行

9.9.13如果批量方式已打开，要关闭：

9.9.13.1主菜单下按F1，再按F3，

9.9.13.2按F8出现选项

9.9.13.3光标移到第一项Trun Batch Request Off，回车

9.9.13.4光标移到第二项Turn Auto SampleID Off，回车

9.10做完标本后取出架子：

9.10.1主菜单下按F1

9.10.2输入要取出的架子号（在屏幕右边On Board栏中）

9.10.3按F6，取架

9.10.4取出后按F1

9.10.5如果要清除该架的标本，请确认

9.10.6如果没有清除，该样本架子会出现在左边（Off Board）栏中。选中该架子，按F7可以清除。

9.11急诊、稀释、不同样本类型测试申请

9.11.1主菜单下选择[F1]-样本管理；

9.11.2输入选用的架号，“ENTER”；

9.11.3选择[F3]测试申请；

9.11.4输入样本号，回车，选择所需要的测试项目（若项目菜单未出现，按F3显示）；

9.11.5选择“STAT”表示急诊；如有稀释，选择“Dilution”并输入稀释倍数; 在“Sample Type”修改样本类型；

9.11.6样本申请完成后，按BACK键返回；

9.11.7选择要装载的样本架；

9.11.8按[F1]-装载样本架；

9.11.9按[F1]-完成。

9.12定标

9.12.1新批号的定标液须先在系统设置中输入定标液信息：

9.12.1.1在主菜单按F5定标

9.12.1.2再按F5定标设置

9.12.1.3按F1增加定标液

9.12.1.4当出现对话框后，扫描定标液的条形码（或手工输字符）

9.12.1.5按OK确认。

9.12.2当系统配置中已有定标液信息后，实测定标：

9.12.2.1菜单下按F1样本管理

9.12.2.2输入一个空的样本架号,回车

9.12.2.3按F3测试申请

9.12.2.4按F6定标申请

9.12.2.5光标移到所用的定标液名称上，回车

9.12.2.6可选择更改试剂批号

9.12.2.7返回上一屏

9.12.2.8选上要放入的定标架，按F1，放入标本架

9.12.2.9按OK确认

9.12.2.10按RUN运行

9.12.3查看定标曲线：

9.12.3.1主菜单下按F5

9.12.3.2选择查看的项目

9.12.3.3按F2查看定标曲线

9.12.3.4按F1 看最后一次定标结果（F2 看当前定标结果 F3看前次定标结果）左上角出现 Status Accept 表示定标通过

9.13 结果查询：

9.13.1主菜单下按F2

9.13.2按F1 选择结果筛选方式

9.13.3OK，显示结果

9.13.4选择结果

9.13.5按F5把结果送到中文电脑（按F7打印结果）

9.13.6选OK

9.14保存数据至软磁盘

9.14.1主菜单下按[F2]-结果浏览；

9.14.2按[F1]-筛选，显示所需要数据；

9.14.3选择所需要保存的数据(按CTRL键可多选)；

9.14.4插入1张DOS格式(1.44MB)软磁盘到软磁盘驱动器内；

9.14.5按[F6]-保存已选择结果；

9.14.6确认；

9.14.7当保存完毕后，输入文件名；

9.14.8取出软磁盘；

9.14.9按Back-主菜单。

注意：

保存至软磁盘的数据可以用Microsoft Excel打开。

9.15系统初始化

当仪器因某种原因处于未准备好状态（即显示屏左上方为红色）时，需要进行仪器系统初始化，使仪器回到预备状态。

9.15.1主菜单下选择[F7]-诊断程序

9.15.2按[F1]-系统初始化

9.15.3 选择YES

注意：此过程会将孵育带上所有反应管排出

10 ACCESS 化学发光分析仪日常保养

10．1每日保养

10.1.1检查系统温度状态（温度超范时以红色显示）；

10.1.2检查系统液路部分；

10.1.3检查系统耗材，打印纸，废液罐的状态；

10.1.4用拭子蘸去离子水清洁基质针外壁；

10.1.5用拭子蘸去离子水清洁吸液，排液针外壁；

10.1.6运行冲洗基质程序（需5分钟）；

10.1.7运行清洗针操作（需15分钟）；

10.1.7.1在一样品架上装载3个2毫升样品杯，各杯分别加入以下液体：

1号杯：Contrad 70 (碱性)

2号杯：20% Citranox(酸性)

3号杯：去离子水

10.1.7.2 操作步骤如下：

10.1.7.2.1主菜单下选择 [F1]-Sample Manager

10.1.7.2.2 输入所选用的样本架，回车

10.1.7.2.3选择[F4]-Maintenance Request

10.1.7.2.4选择Daily Clean System, 按OK，检查样

本杯摆放顺序

10.1.7.2.5 按Back返回上屏

10.1.7.2.6选择F1，把样品架放入转盘

10.1.7.2.7按DONE确认

10.1.7.2.8按RUN开始运行每日清洁

10.2每周保养

10.2.1 检查主探针上导轨 / 使用无纤维拭子清洁主探针下导轨

10.2.2 清洁仪器外表

10.2.3 运行特殊清洗程序;具体步骤如下：

10.2.3.1在一个样品架上装载6个2毫升样品杯，分别加入以下液体： 1号杯：Contrad 70(碱性)

2号杯：20%Citranox(酸性)

3号杯：去离子水

6，7，8号杯：70%甲醇

10.2.3.2主菜单下选择 [F1]-Sample Manager

10.2.3.3输入所选用的样本架，回车

10.2.3.4选择[F4]-Maintenance Request

10.2.3.5选择Special Clean, 按OK,检查样本杯摆放顺序

10.2.3.6按Back返回上屏

10.2.3.7选择F1，把样品架放入转盘

10.2.3.8按DONE确认

10.2.3.9按RUN开始运行特殊清洁

（注意：凡是当日运行了维生素B12检测，必须运行特殊清洁。）

10.2.4使用乙醇拭子清洁主探针上部

10.2.5检查废液罐过滤器

10.2.6运行系统检测(system check)

10.2.6.1在一个样品架上装载4个2毫升样品杯，分别加入以下液体： 1号杯：未稀释系统检测液

2号杯：清洗缓冲液

3号杯：空样品杯

4号杯：1：501稀释系统检测液（20ul系统检测液加10ml

清洗缓冲液）

10.2.6.2 操作步骤如下：

10.2.6.2.1主菜单下选择 [F1]-Sample Manager

10.2.6.2.2输入所选用的样本架，回车

10.2.6.2.3选择[F4]-Maintenance Request

10.2.6.2.4选择No Clean，选择System Check，选择All，按OK，

10.2.6.2.5检查样本杯摆放顺序，按Back返回上屏

10.2.6.2.6选择F1，把样品架放入转盘

10.2.6.2.7按DONE确认

按RUN开始运行系统检测（运行过程需32分钟）

10.2.7 系统检测数据分析

1号杯：CV of Washed RLUs必须≤12%

RLUs均值为 5000-20000

3号杯：CV of Substrate RLUs 必须≤5%

RLUs均值 5000-9000

4号杯：CV of Unwashed RLUs 必须≤2%

RLUs均值为 4000000-8000000

Mean Washed RLUs 必须≥mean Substrate RLUs

Wash Efficiency必须≤5PPM

10.3每月保养

10.3.1清洁反应管检测器

打开仪器上盖，在反应管仓右侧一小室内可见两支反应管。用镊子取出反应管，再用无纤维拭子小心擦拭小室内部后，将反应管放回。注意：取、放反应管时，保持反应管清洁。

10.3.2手工清洁吸液针内壁

打开仪器上盖，在清洗站中较长的针即为吸液针，将针支架上黑色针接头向下一按，再顺时针旋转即可取下吸液针；拔去塑料管，用保养盒中专配的针刷反复刷洗针内壁，并在自来水下冲洗，直至针内无异物，且水流呈直线流出。再用蒸馏水冲洗针后，将针

接回塑料管，安回支架原处，向下一压，再逆时针旋转即可固定。

11 异常结果信息注释

注意：

F为严重错误，NF为非严重错误

12 常见问题及其解决

12.1 常见故障实例及解决方案

故障表现处理方法

Device failure：

原因：1.传感器赃或坏处理：清洗

2.设备赃或坏做HOME

3.设备运动过程中有杂物使之卡住冲洗

Temp Out：

原因：1.仪器刚启动，温度未稳定处理：等待稳定

2.环境温度变化大

3.传感器坏或未搞好

Level sensor/Ultrasonic：

原因：1.标本量不足

2.容器类型不对

Dark Counts：

Sample Counts：

原因：无发光剂处理：检查Substrate瓶和底物泵

Lumi drift：

原因：光电倍增管漂移处理：调整H.V.Voltage

Shut err. Before clean out：

原因：1.Waste bag 没有插好处理：重新插Waste bag

2.Shuttle 与Incb belt出口处堵塞清理

3.RV倒

Vacuum Under：

原因：Vacuum阀漏气处理：插紧；清洗

Analog：

原因：地线或I/O板赃

Waste：

原因：废液满

No Vessel：

原因：1.Pos 1或2的传感器赃处理：清洁传感器2．Pos1或2的传感器电压漂移

Sanding Lis：

原因：1.中文电脑未开

2.传输设置错误

12.2 ACCESS 2 定标失败原因分析

12.2.1当定标失败时，有以下几种常见的错误代码：

12.2.1.1.Insuff Data

由于定标液不够或仪器错误导致某一点浓度定标测试被取消；

12.2.1.2Not Fit

测得足够数据，但软件不能将其拟合为曲线；

12.2.1.3 Max Iter

软件能拟合曲线，但不能得出最佳拟合；

12.2.1.4 Bad Fit

软件拟合到最佳曲线，但曲线未通过软件的精密度协议文件；

12.2.1.5 CV std 0

重复测试的CV%超出范围；（仅用于TU）

12.2.2 错误原因分析原则及步骤

12.2.2.1 检查错误信号的内容，看是否有“QNS”，或系统错误而导致定标失败；

12.2.2.2观察各点结果精密度；如果精密度良好，错误有可能来自某些操作失误；再观察RLU值是否接近上一次对应的值；

12.2.2.3 检查是否作了每日保养及每周保养；

12.2.2.4观察定标得到的目标值浓度是否接近印在定标卡上的值，如果不

是，则可通过系统设置来修改对应的值；

12.2.2.5观察RLU值是否随曲线平滑上升（夹心法）或下降（竞争法），如果不是，须检查是否把定标液位置摆错，或者某一浓度的定标液受到污染；

12.2.2.6 如果定标曲线非常平坦，而且RLU值很低（夹心法）或RLU

值很高（竞争法），表明使用了错误的定标液或试剂盒；

12.2.2.7 如果定标曲线平坦，且不论夹心法或竞争法，RLU值均很低，则须检查发光剂是否用完或发光剂液路是否正常；

12.2.2.8 如果定标结果精密度较差，原因可能是：

缓冲液或发光剂液路内混入气泡；

采样针太脏；

清洗转盘混匀功能故障；

超声系统故障；

与排液或吸液有关的泵或阀门故障。

Access 2化学发光仪操作程序 (01)

Access 2化学发光仪操作程序 1、运行前准备 1.1检查：机盖无杂物，市电供应正常，UPS供电正常； 1.2擦拭：打开仪器前盖，用75%乙醇擦拭主探针（包括针下端的黄色塑料圈）、排废针（2、4、6号）； 如果底物针（7号）有结晶也要擦拭，无结晶不擦7号针。 （操作时注意：如果针上有结晶，擦拭前先用纸片挡住针下端，避免擦针时结晶落入仪器内部。）1.3机外耗材准备：仪器左边的瓶内的缓冲液是否快用完，清空废液瓶。 1.4机内耗材准备：点击主菜单消耗品F3→观察显示的四类消耗品，RV供应、RV废物、发光底物和各 测定项目试剂。各类消耗品的添加方法如下： ①加RV管：取一盒新RV管，用手双面压紧以保证脱盒后RV管不掉落→点击屏幕安装RV F4→打 开仪器上黑色的RV管机盖→放入脱盒而不掉落的RV管→压下黑色的RV机盖→打开机盖，拿走RV管上面的网格→检查所有RV管位置是正常竖立状态（有倾斜者扶正）→关好机盖→点击完成。 ②更换RV废物袋：取出机内RV废物袋，倒空后重新放好在仪器上，点击更换RV废物袋F6→再点 击提示屏“完成”。 ③更换发光底物：（注意：底物使用之前要室温平衡18小时，最少10小时，残存的底物不得倒入 新瓶内！）点击更换发光底物F5→扫描底物条码→换底物瓶到仪器左边放置位，拧紧传感器瓶盖→点击完成F1 (残余底物可放入冰箱集中保存)。注意：更换底物后，系统会弹出冲洗提示窗口，一定要点击“是”，待仪器完成冲洗各程序，以保证检测结果不受底物更换的影响。 ④加试剂：安装试剂盒F1→扫描新试剂的条形码→打开试剂仓盖→把试剂正确放入试剂仓→检查 放置无误→点击完成F1。 1.5 观察温度：点击主菜单，保养回顾→观察孵育带，冲洗转盘，发光底物，冰箱，仪器盒各区温度正 常无报警→后退。 1.6冲洗管路：诊断F7→冲洗液体管路→把屏幕布上发光底物的循环次数改为1，再把三个选项都打√， 点击开始冲洗，运行结束后点击完成。 2、定标（定标时间在有效期内，测试数据稳定情况下不做！） 2.1如果没有项目（有项目时不需此步操作）：设置→测试项目→找到测试项目（可用定标卡前三位来 找项目）→打“√”→后退 2.2定标液换批号（定标液批号与原来相同不需此步操作）：主菜单→定标（F5）→定标液设置(F5) → 添加定标液（F1）→扫描定标卡上的条形码→检查扫描的标准液条形码无遗漏→确定（F1） 2.3用已有定标液定标： ①主菜单→样本管理(F1) →输入样本架号→回车→测试请求（F3）→请求定标（F6）→选择定标液名 称（可用↑↓键）→确定 ②选取要放入的定标架→放入样品杯→按顺序每杯加入（s0—s5）定标液（每个350ml左右）→检查 确认无气泡→安装样品价（F1）→把加好定标液的架放入仪器→完成 ③确认上述操作无误后，观察主菜单为蓝色的“就绪”状态→点击“运行” 3.样品测试 3.1样本输入：注意根据发光底物及试剂的数量输入测度样本数 3.1.1单个样本输入 主菜单→样本管理（F1）→输入样本架号码→回车→测试请求（F3）→点击位置号→输入样本ID号→回车→选择要做的项目→后退 3.1.2批量样本输入

电化学发光免疫检测原理

电化学发光免疫检测原理 电化学发光免疫测定的基本原理 (Electrochemiluminescence immunoassay,ECLI) 是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术，是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物。它的标记物的发光原理与一般的化学发光(CL)不同，是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上包括了电化学和化学发光二个过程。ECL与CL的差异在于ECL是电启动发光反应，而CL是通过化合物混合启动发光反应。ECL 不仅可以应用于所有的免疫测定，而且还可用于DNA,RNA探针检测。 2+其检测原理(以TSH检测为例):第一步:结合了活化的三联吡啶钌衍生物即[Ru(bpy)] + N3羟基琥珀酰胺酯(NHS)的TSH抗体和结合了生物素的TSH抗体与待测血清同时加入一个反应杯中孵育9分钟。 第二步:将被链霉亲和素包被的磁珠加入反应杯中，再次孵育9分钟，使生物素通过与亲和素 的结合将磁珠、TSH抗体连接为一体，形成双抗体夹心法。

2+下一步，蠕动泵将形成的 [Ru(bpy)],抗体,抗原,抗体,磁珠复合体吸入流动测量室，此3 时，磁珠被工作电极下面的磁铁吸附于电极表面。同时，游离的TSH抗体(与生物素结合的和2+与[Ru(bpy)]结合的抗体)也被吸出测量室。 3 紧接着，蠕动泵加入含三丙胺(TPA)的缓冲液，同时电极加电压，启动ECL反应过程。发光2+剂 [Ru(bpy)]和电子供体TPA在阳极表面可同时各失去一个电子而发生氧化反应，使二价的32++?[Ru(bpy)]被氧化成三价，后者是一种强氧化剂;另一方面，TPA 被氧化成阳离子自由基TPA，3+?后者很不稳定，可自发失去一个质子(H)，形成自由基TPA，这是一种很强的还原剂，可将3+2+一个电子给三价的[Ru(bpy)]，使其形成激发态的[Ru(bpy)]，而TPA自身被氧化成二丙胺332+和丙醛。激发态的[Ru(bpy)]通过荧光机制衰减，发射出一个波长620nm的光子，重新生成32+基态的[Ru(bpy)]。该过程在电极表面周而复始地进行，产生许多光子，光电倍增管检测光32+强度，光强度与[Ru(bpy)]的浓度呈线性关系,故可测出待测抗原的含量。 3

全自动生化免疫分析仪的发展现状及其在急诊检验中的应用

全自动生化免疫分析仪的发展现状及其在急诊检验 中的应用 莆田大学——陈玲2014-5-28 14:16:22 随着医改的深入，医院就诊人数逐年增加，医院规模（门诊量和住院床位数）不断扩大，急诊工作量也与日俱增。保质保量地完成实验室工作，得益于高效的检测设备。随着急诊医疗要求的提高和检验医学的发展，新技术和仪器不断上市，特别是全自动生化免疫分析仪，极大地提高了急诊检验工作的效率和质量，并为临床工作提供了更快速、全面、准确的结果。 1发展历程 世界上第一台生化分析仪是美国泰克尼康（Technicon）公司于1957年根据Skeggs教授的设计方案制造的。此后，该仪器的发展十分迅速，出现了单通道（一次测一个项目）、双通道、多通道（一次测多个项目）仪器。1965年又诞生了分立式自动分析仪。这是一种敞开式的仪器，工作原理与手工操作相似，样品在彼此分立的反应杯中进行反应并检测。直到20世纪70年代中期，才研制出连续流动式自动化分析仪SMAC，测试速度达到150测试/小时，每份标本可同时测试20个项目，使得连续分析水平达到一个新的高度。70年代，干化学分析仪的出现开辟了生化分析仪的另一分支，提高了准确性、精密性、多功能性和分析速度。80年代初，Technicon公司为克服样品之间交叉污染，发明任选式测定方式的仪器。90年代以来，生化分析仪的技术主要是向完善仪器各种功能的方向发展，尤其是微电脑的广泛应用，使仪器在分析的准确性、精密度、高效率、低能耗和参与实验室管理方面更好地满足不同层次的要求。到了21世纪初，自德灵公司（即现在Siemens公司）开创的整合式工作站的概念，就是要将一系列重要的免疫测试，与常规的生化检测结合到同一平台上，无需样本分杯，从而大大提高了实验室的工作效率，尤其是在急诊实验室中得到了很好使用和验证。 2生化免疫分析仪系统结构、原理、性能特点 针对功能繁多、结构复杂的各种全自动生化免疫分析仪，使发展中的高新技术和新方法在临床实验室中得到充分体现，现就目前应用于急诊检验较有代表性的全自动生化免疫分析仪型号及主要技术特征进行比较如下。 各仪器的设计格局不同：一种设计格局是通过轨道连接把两种不同的分析系统整合在一起，例如BeckmanCoulter公司的第一款生化免疫分析仪——UniCelDXC600i。它的样本处理程序是先将样本通过进样器移送到CTA（样本等分器），再由CTA样本针分杯到免疫分析仪的样本架，然后再将样本移送到生化系统上（DXC600）。此时会出现两方面的弊端：其一，如果测量大量的免疫分析项目，会造成大批量样本滞留在CTA上面，而生化系统需要等待；

常用化学发光仪器简介

㈠、ACS：180SE全自动化学发光免疫分析系统 ACS全自动化学发光免疫分析系统由拜耳公司生产，采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合的免疫分析系统。20世纪90年代初首次推出全自动化学发光免疫分析系统ACS：180。90年代中期推出第二代产品为ACS：180SE 分析系统(图2)，最近该公司又推出了ACS：CENTAUR。第二代产品将微机与主机分开，软件程序加以改进，使操作更灵活，结果准确可靠，试剂贮存时间长，自动化程度高等优点。 1.仪器测定原理 该免疫分析技术有两种方法：一是小分子抗原物质的测定采用竞争法；二是大分子的抗原物质测定采用夹心法。该仪器所用固相磁粉颗粒极微小，其直径仅1.0μ m，这样大大增加了包被表面积，增加抗原或抗体的吸附量，使反应速度加快，也使清洗和分离更简便。其反应基本过程：⑴竞争反应：用过量包被磁颗粒的抗体，与待测的抗原和定量的标记吖啶酯抗原同时加入反应杯温育，其免疫反应的结合形式有两种，一是标记抗原与抗体结合成复合物；二是测定抗原与抗体的结合形式。⑵夹心法：标记抗体与被测抗原同时与包被抗体结合成一种反应形式，即包被抗体 -测定抗原-发光抗体的复合物。 上述无论哪种反应凡所结合的免疫复合物均被磁铁吸附于反应杯底部，上清液吸出后，再加入碱性试剂；其免疫复合物被氧化激发，发射出 430nm波长的光子，再由光电倍增管将光能转变为电能，以数字形式反映光量度，计算测定物的浓度。竞争法是负相关反应。夹心法是正相关反应。 2.实验操作 本仪器测定所用试剂均包括两种：固相磁粉和液相发光试剂。每套试剂可放臵于试剂托盘的任意位臵上，由仪器扫描标签条码后自动加样。根据测定项目不同，试剂用量在50~450μl之间。测定标本必须用血清，禁止用血浆，以防纤维蛋白将管路堵塞。 由于是自动化仪器，其操作极其简单：①将样品编号排入样品盘。②按试验项目将所用试剂放入试剂盘，并观察辅助试剂。③自由编排程序，按“START” 键运行，根据所编工作表，在微机的控制下，仪器自动放臵反应杯，自动加样与试剂，并根据实验项目不同进行温育。温育时间一般在 2.5~7.5分。从第一个测定开始至16分钟，分析仪自动计算报告结果。然后每20秒有一个结果报出，

血检四项化学发光法调查

血检四项化学发光法调查 目前血检四项（HBsAg、HCV、HIV、TP）的检测方法主要有酶联免疫（ELISA）、核酸扩增（PCR）、胶体金标记、以及化学发光（CLIA）。现就CLIA在血检项目中的应用情况做一调查分析。 一．化学发光免疫分析法简介。 化学发光免疫分析法(Chemiluminescence imnunoassay，CLIA)是建立在放射免疫分析技术(radioimmunoassay，RIA)理论的基础上，以标记发光剂为示踪物信号建立起来的一种非放射标记免疫分析法。 CLIA是利用化学反应中释放大量自由能，产生激发态中间体，当其回到稳定的基态时发射出光子（hν），用发光信号测量仪对所发出的光量子进行定量测量。鲁米诺(1umino1)、异鲁米诺(isolumino1)及其衍生物、吖啶酯(acIidinim ester)衍生物、辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase，HRP)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)是目前CLIA中使用最多的四类标记物。 表1 化学发光法类型 注：* 严格意义上属于荧光免疫。 二．国内外化学发光法的仪器和试剂情况。 国外化学发光法检测仪器的生产厂家以贝克曼、雅培、罗氏、拜耳这四家的市场占有率

较高。其中罗氏拥有唯一的电化学发光技术，雅培则独占微粒子酶联免疫（EMIA）。不同厂家的仪器有各自的优势检测项目，主流的仪器型号如下： 表2 国外主要化学发光免疫分析仪厂家 国内也逐渐有厂家研制化学发光试剂，配合国外引进的仪器（多为半自动）共同销售，也有自发研制的化学发光仪（泰格科信）。针对血检四项（HBsAg、HCV、HIV、TP），除北京科美生物（科美东雅）外，所有厂家试剂均只有HBsAg试剂。 表3 国内主要厂家仪器和试剂情况 国外厂家的试剂大多随仪器配送，并没有在SFDA单独注册。目前SFDA注册的血检四项化学发光法试剂列表如下。就检测项目来看，除梅毒外，其余三项均可使用化学发光法；就现有资料，国内外只有北京科美东雅配有梅毒检测试剂。 表4 SFDA注册的血检四项试剂 三．化学发光法的优势及劣势。 上世纪70 年代末，Halmann 和Vela首先把化学发光(CL)与酶免疫反应结合起来，建立了化学发光酶免疫分析法(CLIA)。目前，它已成为生命科学研究中的一个重要的分析手段，

（仅供参考）化学发光常见问题集锦

（仅供参考）化学发光常见问题集锦 Beckman Coulter ACCESS 系列全自动微粒子化学发光 免疫分析系统 常见问题及答疑 目录 第一部分：化学发光基础知识第1--17问第二部分：仪器应用部分第18--76问第三部分：项目应用部分第77—109问 第一部分：化学发光基础知识 1 什么是化学发光，与放免、酶免比较有何不同？ 化学发光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是将化学发光与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。 化学发光免疫分析比放射免疫，酶联免疫具有更高灵敏度，具备操作简便、快速的特点，易于标准化操作。且测试中不使用有害的试剂，试剂保存期长，应用于生物学、医学研究和临床实验诊断工作，成为非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一。 （1）与放免（RIA）产品比较 与放射免疫试剂（RIA）比较，化学发光避免了放射性核素的污染以及对操作人员的伤害，大大缩短了反应时间，同时兼具高灵敏度的优势。 （2）与酶免（ELISA）产品比较 灵敏度与可测范围远远高于酶免产品，兼具ELISA法简便的操作方法与较短的反应时间。 2 什么是标记免疫技术，它的三大要素是什么？ 将Ag或Ab用标记物(如荧光素、酶、放射性同位素、化学发光物质等)进行标记，在与标本中的相应Ab或Ag反应后，可以不必测定Ag-Ab复合物本身，而测定复合物中的标记物，通过标记物的放大作用，进一步提高了免疫技术的敏感性。 三要素：通常在检测系统中会使用到一种叫标记物（labeling）

的物质,常标记在抗体上通常会有一个分离（separation）的过程在最后读取信号前 需要去仔细关注一下分析的模式（format） 3 标记免疫技术主要有哪几种？ 主要经历了四种标记免疫技术的发展：荧光素(Fluorophores) –FIA 放射性同位素(Radioisotopes) – RIA 酶(Enzymes) – EIA 化学发光物质 - CLIA 4 ACCESS化学发光原理？ 分析方法及过程 ACCESS系统采用磁性微粒作为固相载体，以AMPPD作为发光剂，固相载体的应用扩大了测定的范围。以竞争法、夹心法等免疫测定方法为基础。试剂包装采用特殊的设计，每个试剂包有5个小室分别把不同的试剂分开，减少了交叉污染，保证了检测质量。 ⑴、抗原抗体结合：将包被单克隆抗体的顺磁性微粒和待测标本加入反应管中，标本中的抗原与微粒子表面的抗体结合，再加入碱性磷酸酶标记的抗体，经温育后形成固相包被抗体-抗原-酶标记抗体复合物。 ⑵、洗涤、分离：在电磁场中进行3次洗涤，很快将未结合的多余抗原和酶标记抗体洗去。 ⑶、加入底物AMPPD发光剂：AMPPD被结合在磁性粒子表面的碱性磷酸酶的催化下迅速去磷酸基因，生成不稳定的中介体AMPD。AMPD很快分解，从高能激发态回到低能量的稳定态，同时发射出光子，这种化学发光持续而稳定，可达数小时之久。通过光量子阅读系统记录发光强度，并从标准曲线上计算出待测抗原的浓度。 5 什么是钩状效应（hook effect），如何判断及解决？ 免疫测定的实质是抗原抗体反应，抗原抗体反应是按一定的分子比例结合，当二者比例适中时，形成的免疫反应最强烈，形成复合物或检测的信号与所测的抗原或抗体成比例关系，但当抗原或抗体其中

贝克曼库尔特DXI800化学发光仪标准操作程序

贝克曼库尔特DXI800化学发光仪标准操作程序 1目的 建立规范标准的贝克曼库尔特DXI800化学发光仪的使用和维护程序，保证仪器正常运行及检测结果的准确无误。 2仪器简介、工作原理 贝克曼库尔特DXI800化学发光仪是一种体外诊断设备，用于人体体液各种分析物浓度的定量、半定量或者定性测定。系统由两个主要的子系统组成：执行所有样品处理功能的仪器，以及提供人机界面的系统控制台。 工作原理：以金刚烷AMPPD为标记底物，采用微粒子酶促化学发光法检测。 3仪器运行环境 3.1仪器的使用环境要求 3.1.1安装环境 为了能够准确安全的操作设备，要确保安装空间，距离墙壁至少需要500mm的距离；避免直接面对阳光；要水平放置，倾斜度小于1/200；避免震动；适于2000米以下的地方使用；放置设备的房间温度应在18-32℃之间，温度波动不大于+2℃；相对湿度（RH）在20-80%之间，没有冷凝现象，根据具体情况选择是否安装空调； 3.1.2电气和噪音条件 与该设备10m内，要有一个电源连接器；该设备的电源开关板上得短路开关负荷等于或者小于30安培；强烈推荐UPS，确保本设备已经接地；交流电AC220V（+10%）50/60Hz （+3%），功率6kV A 3.1.3给排水 给水：设备距离去离子水出水孔在10m以内；去离子水导电度应不大于2us/cm（电阻率0.5MΩ·cm或更大），去离子水温在5-28℃之间；水压应在0.49x105到3.92x105Pa之间；平均用水量62L/h，最大用水量2.5L/min 排水：排水孔距离设备10m以内，并必须通向收集传染性废液的容器；排水孔的高度不能高于基底1.5m 3.1.4系统结构 ANL：1060mm（W）x1580mm（D）x1260mm（H）重量：600kg ISE：450mm（W）x1140mm（D）x1210mm（H）重量：320kg SMP：1090mm（W）x1500mm（D）x1600mm（H）重量：150kg 3.2 仪器使用环境

Bland-Altman分析法在两种化学发光仪器一致性评价上的应用案例

Application of Bland-Altman Analysis Method in the Consistency Evaluation of Two Kinds of Chemiluminescence Instruments 作者：宁铮美[1] 作者机构：[1]江苏省体育科学研究所,江苏南京210033 出版物刊名：运动精品 页码：52-54页 年卷期：2018年第2期 主题词：运动人体科学;一致性;Bland-Altman分析;数据行为分析 摘要：[目的]减少不同仪器间与运动员机能状态诊断相关的指标间的差异,保证实验室内不同检测系统间检测结果的一致性,为科研实验人员对运动员机能状态的监控和纵向跟踪研究提供准确数据,通过案例应用使实验人员能够合理正确运用Bland-Altman分析法解决一致性评价问题。[方法]分别使用ACCESS1和ACCESS2全自动化学发光免疫分析仪,随机选择的77例男性和60例女性的血清检测睾酮值,138例血清检测皮质醇值。使用Medcalc16.4.3医学统计软件对数据进行整理和统计分析,作出BA 图和获得计算结果。参照临床实验室TEA可接受范围来确定检测结果一致性。[结果]两种机器测量女性睾酮结果数据行为良好,但在B-A分析中的一致性区间的上下限值不满足临床要求,两台仪器检测女性睾酮值不具有一致性;两台机器测量其余项目数据行为不良,不适宜应用Bland-Altman法进行一致性评价。[结论]Bland-Altman分析法在实际应用中对数据情况还存在诸多要求,评价方法自身的系统性和全

面性还有待完善,专业领域使用该方法来进行一致性评价还需慎重。

质控品保存对心肌损伤标志物测定室内质控结果的影响

质控品保存对心肌损伤标志物测定室内质控结果的影响 陈昌国;马聪;刘敏;张云;赵强元;靳冰;杨思佳;刘丽娟 【期刊名称】《临床检验杂志》 【年(卷),期】2013(031)003 【总页数】1页(P222) 【关键词】质控品;保存;心肌损伤;标志物;质控 【作者】陈昌国;马聪;刘敏;张云;赵强元;靳冰;杨思佳;刘丽娟 【作者单位】中国人民解放军海军总医院检验科,北京 100048;中国人民解放军海军总医院检验科,北京 100048;中国人民解放军海军总医院检验科,北京 100048;中国人民解放军海军总医院检验科,北京 100048;中国人民解放军海军总医院检验科,北京 100048;中国人民解放军海军总医院检验科,北京 100048;中国人民解放军海军总医院检验科,北京 100048;中国人民解放军海军总医院检验科,北京 100048【正文语种】中文 【中图分类】R446.1 心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)是监测心肌损伤的重要标志物。为改进实验室的质控质量，本研究通过调整质控品的保存方式，观察对质控品测定结果的影响。 1.1 仪器与试剂 ACCESS2微粒子化学发光仪及配套cTnI试剂 (批号A78803)、Mb试剂 (批号973243)、CK-MB试剂(批号386371)和耗材购自美国Beckman Coulter 公司；cTnI、Mb、CK-MB质控品，包括低值(批号29781)、中值(批号

29782)、高值(批号29783)，购自美国Bio Rad公司。 1.2 质控品的保存及使用 cTnI、Mb和CK-MB靶值)由质控品说明书给出的数值 结合本实验室长期在控数据设置[1]。质控品2种常用处理方法：(1)溶解质控品，置于4 ℃保存，检测前室温平衡5 min，低值、中值、高值3个水平各取200 μL 检测后将质控液再置于4 ℃保存；(2)溶解质控品后按每管200 μL分装，置于-20 ℃保存，检测前室温复融15 min并用200 μL加样器充分混匀。 1.3 方法严格按本科SOP文件对仪器进行定标；质控品保存1 d后同时取4 ℃保存的和-20 ℃保存的质控液，室温下分别平衡5 min和15 min后，按本科SOP 文件检测cTnI、Mb和CK-MB值，连续检测12 d。 1.4 统计学分析用SAS 9.2软件进行。正态分布的资料用±s表示，与靶值间的比 较用单样本t检验；非正态分布的资料用M(P25，P75)表示，与靶值间的比较用 符号秩检验。P<0.05为差异有统计学意义。 质控品不同处理方法cTnI、Mb、CK-MB 室内质控结果见表1。第1种质控品处 理方法，cTnI高值质控结果与靶值比较，t=3.21，P<0.05；Mb低、中、高值质控结果与靶值比较，t(S)分别为3.21、39.00、12.42、-39.00，P<0.05。第2种 处理方法，Mb高值质控结果与靶值比较，t=2.66，P<0.05。根据Westgard多 规则[1]，第1种质控品处理方法，cTnI有3次触发12s规则、1次触发13s规则，Mb则触发失控规则，CK-MB有3次触发12s规则;第二种处理方法，未触发规则。质控能反映实验室检测能力并帮助提示检测质量。分装保存质控品可节约成本并有利于室内质控的进行。Bio Rad质控品说明书要求质控品-20～-80 ℃保存，溶解 后2～8 ℃可稳定保存20 d。本实验参照文献并结合实际工作，将心肌损伤标志 物质控液由4 ℃整瓶保存调整为每管分装200 μL -20 ℃保存。4 ℃保存下质控液使用过程中由于多次复温造成质控结果不稳定；改用分装-20 ℃保存后3个检测指标的低、中、高3个水平的质控液质控结果均较好，与薛晓明和郑希林等[2-3]的

贝克曼DXI800与ACCESS2化学发光仪间测定结果的可比分析

贝克曼DXI800与ACCESS2化学发光仪间测定结果的可比分 析 摘要】目的探讨同一实验室的贝克曼DXI800和ACCeSS2 两台化学发光仪测定结果的可比性。方法参考美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP9-A2 文件，以DXI800为目标检测系统（比较方法），ACCeSS2为实验检测系统（实验方法）， 同时检测不同浓度血清FT3、FT4及TSH，并对检测结果进行比对分析。结果检 测系统的结果相关性良好（r2﹥0.95），FT3、FT4结果偏差在允许偏差范围内， 可以接受，而TSH结果为部分接受。结论两个检测系统TSH测定结果临床可接受性能评价存在部分不可比性。当同一实验室存在两个或两个以上检测系统检测同 一项目时，应定期进行方法比对和偏倚评估，以确保结果的一致性。 【关键词】化学发光仪方法比对一致性 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）05-0036-02 本科室先后配备有DXI800和ACCeSS2两台全自动电化学发光仪，为保证两台仪器检测结果的一致性，笔者参照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP9- A2文件的要求，对本科室两台不同型号的贝克曼化学发光分析仪进行甲状腺功能三项（FT3、FT4、TSH）结果比对分析，现报道如下。 1 材料与方法 1.1标本本院住院及门诊患者新鲜血清，根据所测各项目参考范围尽量选取 具有高、中、低值的标本40份。同时使用美国伯乐公司质控物（高浓度、低浓度）。 1.2仪器与试剂贝克曼公司的DXI800和ACCESS2两台全自动电化学发光分析 仪及贝克曼公司原装配套试剂与标准品。 1.3方法以DXI800为目标检测系统即比较方法（X），ACCESS2为待评检测系统即实验方法（Y）。参照EP9-A2文件要求进行方法间比对试验，测定项目有 FT3、FT4、TSH三项，每次分析前对仪器进行常规维护与保养和日常质量控制， 质控在控时再进行血清样本测定， 1.4数据收集与处理 1.4.1实验数据采集本院门诊及住院患者血清，选取8个具有高、中、低浓度的样本，随机与当天待检样本在同条件下进行测量。每台仪器各对比项目每天测 两次，一次是从高到低浓度排列，另一次是从低到高浓度排列，标本在2h内检 测完毕。连续检测5个工作日，得到40组数据。对质控品（高浓度、低浓度） 进行重复测定20次。 1.4.2实验数据可信度判断按NCCLS-EP9-A2文件要求进行两台仪器测定值间 离群值检查及判断。由于临床实验室每个测定都有其固有误差，EP9-A2文件指出：如果对比方法取值范围有足够宽。r2≥0.95则认为X范围适合，反之则说明实验方法的精密度较差或实验数据范围不合适，需改进方法的精密度后重新实验。 1.4.3两台仪器偏差估计将各个项目给出的医学决定水平浓度（XC）代入回归方程，计算出预期偏差（SE）及相对偏差（SE%），SE=|YC- XC |， SE%=(SE/XC)×100%。 1.4.4临床可接受性能判断以澳大利亚内分泌项目室间质评允许误差为判断依据，由方法学比较评估的相对误差(SE%)不大于允许误差为临床可接受水平，即各 检测系统间测定结果具有可比性。

贝克曼ACCESS 2化学发光仪产筛项目操作规程作业指导书

贝克曼ACCESS 2化学发光仪产筛项目操作规程作业 指导书 一．激活项目： 对于新开展的项目，首先要“激活项目”：主屏幕——F8设置——F2测试——把要激活的项目打勾——退出 二．装载消耗品 装载试剂：主屏幕——F3消耗品——F1装载试剂——扫描试剂条码——打开试剂仓盖后放入试剂盒——F1 完成 卸载试剂：主屏幕——F3消耗品——F2卸载试剂——打开试剂仓盖后取出试剂盒——F1 完成 装载反应管：主屏幕——F3消耗品——F4装载RV管——打开反应管仓盖——放入整包的RV管——关上黑色仓盖，往下压——打开黑色仓盖，取出支架——关上仓盖——F1完成

更换废物袋：主屏幕——F3消耗品——F6更换废物袋——取出废物袋，换上新的袋子——F1完成 更换发光底物：主屏幕——F3消耗品——F5更换发光底物——扫描底物的条码信息——换上新的试剂盒——F1完成 三．定标 定标液信息输入：主屏幕——F5定标——F5定标液设置——F1添加定标液——逐条扫描定标液条码——F1完成 定标步骤：主屏幕——F1样本管理——输入架子号——F3测试请求——F6请求定标——选取所需定标液——F1完成——F1装载架子——放入架子——等待样本架扫描确认后，点击“运行” 查看定标结果：主屏幕——F5定标——选取要查看的项目——F2查看结果 四．样本编程 单个样本编程：主屏幕——F1样本管理——输入架子

号——F3测试请求——输入相应的标本号——选取要做的项目——F1装载样本架——放入架子——等待样本架扫描确认后，点击“运行” 批量样本编程：主屏幕——F1样本管理——输入架子号——F3测试请求——输入相应的标本号——选取要做的项目——光标移到下一个位置——F8更多选项——F1启动批量生成 自动生成样本ID号：主屏幕——F1样本管理——输入架子号——F3测试请求——输入相应的标本号——选取要做的项目——光标移到下一个位置——F8更多选项——F2启动自动ID生成 五、结果查询 主屏幕——F2结果查询 六、清除标本 机上架子清除：主屏幕——F1样本管理——选取需要取出的架子——F6处理——扫描完成后——取出架子——F1清除（F2不清除，仅移到机外）

化学发光法与ELISA法测定血清癌胚抗原的比较

化学发光法与ELISA法测定血清癌胚抗原的比较 摘要】目的：探讨化学发光法与ELISA法测定血清癌胚抗原（CEA）的方法结果。方法：选取2017年6月—2018年6月期间收治的消化系统肿瘤患者100例为研 究对象,抽取患者血清样本进行血清癌胚抗原测定,对两种方法的阳性率进行比较。结果：分别用化学发光法和ELISA法的血清癌胚抗原测定阳性率分别为53.0%和55.0％，两组阳性率无显著差异无统计学意义(P>0.05)。结论：化学发光和ELISA 法对血清癌胚抗原（CEA）含量较为准确，有较高的一致性，对消化系统肿瘤患 者的诊断具有良好诊断价值。 【关键词】化学发光法；ELISA法；测定；血清癌胚抗原 【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）36-0062-02 癌胚抗原（CEA）是一种糖蛋白，它存在于2～6个月胎儿消化系统（胃肠道、胰腺、肝脏）内，能被肝脏摄入并迅速地崩解。大多数结肠癌组织能合成CEA， 而未分化腺癌或癌细胞分化极低者无合成CEA的能力。此外，CEA也可由正常或 炎症性肠黏膜产生。目前，癌胚抗原（CEA）主要作为结肠癌术后复发的信号和 疑有结肠癌患者的辅助诊断。临床实验室应用较普遍的方法有ELISA法、放射免 疫法（RIA）、化学发光法等[1]，本研究对化学发光法和ECLIA法检测CEA的结果可比性进行评估，为高通量ELISA法检测癌胚抗原（CEA），现将检测结果分析如下。 1.资料与方法 1.1 一般资料 选取2017年6月—2018年6月期间收治的消化系统肿瘤患者100例为研究 对象，其中男56例，女44例，年龄35～74岁，平均年龄53.5±3.5岁。 1.2 方法 静脉血5ml或胸腹水5～10ml，用血清避免使用肝素抗凝。或用红帽真空管 或黄帽真空管静脉采血，分离血清后如不能立即测定应冷冻。 1.2.1 ELISA法按照试剂盒说明书操作。操作步骤如下：取出试剂盒平衡至室 温（18～25℃），取出微孔反应板条，按要求配好试剂。在已包被抗CEA抗体的 孔中加入待测血清（或其他检样）100μl，37℃1小时。用洗涤液洗孔5次。将CEA标准品（0、3、5、10、20ng/ml）和阴性对照、阳性对照与检样按同法同时 进行操作，同时设空白对照孔。每孔加酶（HRP）标记抗CEA单克隆抗体100μl （空白孔不加），37℃1小时后洗孔 5次。叩干孔内液体，每孔加酶底物/色原溶 液100μl，37℃避光反应15分钟呈色。每孔加2mol/L H2S0450μl终止反应。用酶 联仪在相应波长测吸光度。计算以标准品的浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标， 在半对数坐标纸上绘出校正曲线，根据样品的吸光度值由校正曲线杏出相应的浓度；或用标准品的浓度与吸光度值计算出校正曲线的直线回归方程式，将样品的 吸光度值代人方程式，计算出样品浓度[2]。 1.2.2化学发光法采用Access全自动微粒子酶免疫化学发光仪，按照仪器操 作说明书进行，分离血清上机包括加样、分离、搅拌、温育、打印结果等各项操 作自动完成。 1.3 统计学处理分析 采用SPSS20.0统计学软件对所有数据进行统计学分析，计量资料采用平均值 ±标准差（x-±s），t检验；计数资料采用百分比率（%）表示，χ2检验。以P＜

江苏省张家港地区妊娠妇女红细胞叶酸水平调查

江苏省张家港地区妊娠妇女红细胞叶酸水平调查 孙建方;蔡新红;蒋冯霞;陈静 【摘要】目的分析张家港地区妇女妊娠早、中、晚各期红细胞叶酸水平,探讨红细胞叶酸水平在孕期的变化,全方位对孕妇孕期保健提供科学诊断依据.方法对2014年8月8日～2015年6月23日在张家港市妇幼保健所建卡的665例孕妇,采用Beckman Coulter Access2化学发光免疫测定方法,定量测定妊娠早、中、晚各期红细胞叶酸水平.结果妊娠早、中、晚期红细胞叶酸含量分别为 672.27±212.38,862.41±276.17和818.25±290.96 ng/ml,不同孕期间红细胞叶酸水平差异有统计学意义(t=-21.557,-14.696,5.260,均P<0.01).从检测数据来看,张家港市孕妇总体红细胞叶酸水平在正常范围,孕早期相对孕中、晚期稍低;孕早期20～30岁和大于30岁年龄段红细胞叶酸水平低于推荐值者占6.51％(43/661).结论张家港市孕妇红细胞叶酸水平处于相对可控范围,部分孕妇孕早期相对略低可能与主动补充叶酸的频率有关,不断提高补充叶酸依从性不容忽视. 【期刊名称】《现代检验医学杂志》 【年(卷),期】2018(033)005 【总页数】4页(P117-120) 【关键词】叶酸;红细胞叶酸;化学发光法;孕妇 【作者】孙建方;蔡新红;蒋冯霞;陈静 【作者单位】张家港市妇幼保健所,江苏张家港 215600;张家港市妇幼保健所,江苏张家港 215600;张家港市妇幼保健所,江苏张家港 215600;张家港市妇幼保健所,江苏张家港 215600

【正文语种】中文 【中图分类】R715.3 叶酸(folic acid)是机体正常细胞生长和DNA合成的一种重要必需维生素。叶酸缺乏会导致巨幼细胞性贫血并最终引发严重的神经系统疾病[1～3]。尤其预防孕早期妇女叶酸缺乏是胎儿神经管畸形(neural tube defects，NTDs)发生在围孕期不可 忽视的一项重要工作。人体叶酸水平常用血浆叶酸、血清叶酸和红细胞叶酸来衡量。血浆或血清叶酸易受到膳食习惯等因素影响，相关报道数据差距较大。而红细胞叶酸与红细胞更新过程有关，能反映人体内叶酸的较长期变化状态和叶酸储备情况。用红细胞叶酸含量作为评价预防NTDs及相关疾病的生物学指标已被国内外学者 认同[4，5]。叶酸定量检测，目前有四类方法：微生物法、放射免疫法、高压液相色谱法和化学发光免疫测定法。化学发光类免疫检测相对较新，且基本实现了全自动化，适宜医疗机构即时和规模化的大样本检测。由于叶酸检测方法不尽相同，即便相同的仪器所给用户有用的参考值不一，造成可用以借鉴数据相差明显[5，6]，在国内尚缺乏统一比对数据情况下，我们严格实验室质量控制，对665例孕妇在 不同孕期进行了红细胞叶酸含量监测，以提供本地区孕妇注册并实施补充叶酸后的随机状态下红细胞叶酸数据的表达。 1 材料和方法 1.1 研究对象 2014年8月8日～2015年6月23日在张家港市妇幼保健所建卡 的665例孕妇，年龄17～44岁。按年龄分组，<20岁4例，20～30岁523例，>30岁138例。其中孕早期为9～12周，孕中期为13～27周，孕晚期为28～产前，分别行早孕、中孕、晚孕期各三次红细胞叶酸检测。 1.2 仪器和试剂 Beckman Coulter Access2全自动微粒子化学发光仪(贝克曼-库

贝克曼发光

贝克曼库尔特免疫分析仪免疫检测项目菜单 免疫检测项目菜单 肾上腺，垂体生殖激素 皮质醇（可的松）Cortisol 硫酸脱氢表雄酮DHEA-S 过敏雌二醇Estradiol 总IgE Total IgE 未结合雌三醇uE3 贫血人类卵泡刺激素hFSH 促红细胞生成素EPO 人类黄体生成素hLH 铁蛋白Ferritin 抑制素A InhibinA 红细胞叶酸Folate/RBC 妊娠相关蛋白A* PAPP-A 抗内因子抗体Intrinsic Factor Ab 孕酮Progesterone 维他命B12 Vitamin B12 泌乳素Prolactin 可溶性转铁蛋白受体* sTfR 性激素结合球蛋白SHBG 血液病毒*睾酮Testosterone 甲肝抗体* HAV Ab 人绒毛膜促性腺激素总β亚单位β-hCG 甲肝甲肝IgM* HAV IgM 甲状腺功能检测 乙肝核心抗体* HBc Ab 游离T3 Free T3 乙肝核心抗体IgM* HBc IgM 游离T4 Free T4 乙肝表面抗原* HBs Ag 超敏促甲状腺激素Hypers.hTSH 乙肝表面抗体* HBs Ab 甲状腺球蛋白Thyroglobulin 丙肝抗体* HCV Ab 抗甲状腺球蛋白抗体Tg Ab II 艾滋病毒* HIV 1/2 总T3（三碘甲状腺原氨酸）Total T3 骨代谢总T4（甲状腺素）Total T4 甲状旁腺激素常规/术中模式Intact PTH 抗甲状腺过氧化物酶抗体TPO Ab 骨特异性碱性磷酸酶Ostase 甲状腺摄取率T-Uptake 超敏人体生长激素Ultrasensitive hGH 肿瘤标志物 心脏标志物甲胎蛋白Alpha-fetoprotein 心肌肌钙蛋白I（增强）AccuTnI, Enhanced CA153 BR Monitor 肌酸激酶MB 同工酶CK-MB (Mass) 癌胚抗原CEA

CA125联合β-HCG对比孕酮联合β-HCG对r妊娠先兆流产预后的效果评价

CA125联合β-HCG对比孕酮联合β-HCG对r妊娠先兆流 产预后的效果评价 郭志利;张春光;刘蕾;张雅玲;刘洁 【摘要】目的探讨妊娠先兆流产孕妇血清中人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、糖链抗原125(CA125)、孕酮水平变化及其相关性.方法选取确诊为宫内早孕的90例孕妇为研究对象,依据妊娠早期是否流产分为3组,即正常妊娠组、先兆流产继续妊娠组、早期流产组,各组30例.应用全自动电化学分析仪检测各组孕5周、6周、7周及血清CA125、β-HCG和孕酮水平.结果孕5～7周时,3组孕妇血清CA125水平明显升高,且早期流产组孕妇高于其余两组孕妇,组间对比差异有统计学意义(P<0.05);3组孕妇血清β-HCG水平呈上升趋势,正常妊娠组、先兆流产继续妊娠组孕妇血清β-HCG水平高于早期流产组,且正常妊娠组孕妇血清β-HCG水平高于先兆流产继续妊娠组孕妇,组间对比差异有统计学意义(P<0.05);3组孕妇血清孕酮水平明显升高,组间对比差异有统计学意义(P<0.05).血清CA125与β-HCG呈负相关(rs=-0.654,P<0.05).结论血清CA125、β-HCG和孕酮水平与早期妊娠流产有一定的相关性,联合检测有助于早孕的预后和流产的诊断. 【期刊名称】《当代医学》 【年(卷),期】2018(024)019 【总页数】2页(P168-169) 【关键词】流产;糖链抗原125;人绒毛膜促性腺激素;孕酮 【作者】郭志利;张春光;刘蕾;张雅玲;刘洁

【作者单位】包钢集团第三职工医院,内蒙古包头 014010;包钢集团第三职工医院,内蒙古包头 014010;包钢集团第三职工医院,内蒙古包头 014010;包钢集团第三职工医院,内蒙古包头 014010;包钢集团第三职工医院,内蒙古包头 014010 【正文语种】中文 先兆流产是一种比较常见的妇产科病症，在妊娠中占有比率为10%～15%，引起先兆流产的原因十分复杂，可能和遗传、感染、内分泌等因素相关。在经济快速发展、优生优育要求基础上，先兆流产治疗受到了越来越多家庭的重视。通过筛查早期流产病例，给予恰当处理，以此减轻孕妇身心伤害。现今，怎样在短时间内，利用简单的方法预测先兆流产结局，成为了妇产科研究的重要课题。本文现对妊娠5～7周血清糖类抗原125（CA125）、β-人绒毛膜促性腺激素（β-hCG）、孕酮与妊娠流产的关系予以探究，为预测先兆流产妊娠结局提供一定理论依据。 1 资料与方法 1.1 临床材料选取确诊为宫内早孕的90例孕妇为研究对象,依据妊娠早期是否流产分为3组，即正常妊娠组、先兆流产继续妊娠组、早期流产组，各组30例。孕妇年龄20～35岁，平均27.81岁，均为单胎，宫内早孕。随访时间为妊娠5～7周。3组年龄、体质量、孕产次无显著差异。本次符合伦理委员会要求，3组孕妇自愿参加，且签署知情同意书。 1.2 方法采集初次就诊及就诊后孕妇空腹静脉血3 ml，给予离心处理，并采用德国贝克曼Access2全自动化学发光分析仪及配套试剂检测孕妇孕5～7周时血清中CA125、βhCG、孕酮水平。所有孕妇均给予黄体酮、维生素E等药物保胎治疗，并叮嘱孕妇适当休息，同时给予心理疏导。 1.3 统计学方法由SPSS 19.0软件对3组孕妇临床数据进行统计学处理，用重

ACCESS化学发光仪回收试剂的性能评价

ACCESS化学发光仪回收试剂的性能评价 摘要】目的对ACCESS化学发光仪回收试剂的性能进行评价分析，探讨回收试 剂的再利用价值。方法用ACCESS化学发光仪回收试剂进行精密度、准确度、线 性试验等验证实验，并进行分析。结果回收试剂的日内、日间精密度均＜10%， 回收率均在90%～110%内，线性试验等结果全为可接受。结论 ACCESS化学发光 仪回收试剂评价项目的精密度、准确度和线性范围的性能评价均能达到临床检测 要求，可回收利用。 【关健词】ACCESS化学发光仪回收试剂验证实验性能评价 ACCESS化学发光仪每试剂盒测试用完后都会有剩余试剂量，实际还可剩余10％～20％残余试剂，为了充分利用医疗资源,降低测试成本，我们对残余试剂 进行回收，为确保临床实验室检验结果的准确与可靠，对回收试剂进行验证实验，探讨回收试剂的再利用。 1 材料与方法 1.1仪器和试剂 1.1.1 仪器美国贝克曼ACCESS全自动微粒子化学发光免疫分析仪。 1.1.2 试剂美国贝克曼公司提供的ACCESS化学发光仪配套试剂、回收试剂和 定标液。 1.1.3 样本来源收集一天内新鲜血清于干净容器内混匀,即时分装成40份冰冻 于－20℃冰箱内备用为精密度样本。 1.2方法 1.2.1 实验检测项目 AFP(甲胎蛋白)、CEA(癌胚抗原)、SF(铁蛋白)、T3(三碘甲状腺原氨酸)、FT3 （游离T3）、T4（甲状腺素）、FT4（游离T4）、TSH（促甲状腺素）。 1.2.2 精密度实验 日内精密度测定：取出冰冻于－20℃冰箱内的精密度测定样本20份，置室温下解冻30分钟，用回收试剂检测AFP、CEA、SF、T3、FT3、T4、FT4、TSH浓度，记录数据，计算各检测项目的均值、标准差、变异系数。日间精密度测定：用回 收试剂每天检测一次精密度测定样本AFP、CEA、SF、T3、FT3、T4、FT4、TSH浓度，累计检测20次，收集实验数据，计算各检测项目的均值、标准差、变异系数。 1.2.3 准确度实验 用回收试验验证准确度。取广西区临床检验中心的室间质评样本8份作为基 础样本（肿瘤标志物样本3份、内分泌样本5份），分别加入等量的AFP、CEA、SF、T3、FT3、T4、FT4、TSH定值标准品作为分析样本，对检测项目AFP、CEA、SF、T3、FT3、T4、FT4、TSH用回收试剂检测基础样本浓度值，后检测分析样本 浓度值各2次，各取平均值，计算回收率。回收率=∣回收浓度-基础样本浓度∣/ 加入浓度。回收率在90%～110%，结果为可接受[1]。 1.2.4 线性范围实验 大部分方法的可报告范围与线性范围、测量范围是一致的[1]，所以用线性试 验验证可报告范围即线性范围。收集本院患者和体检者样本血清，取AFP、CEA、SF、T3、FT3、T4、FT4、TSH各评价项目的高值（H）和低值（L）血清（结果在 检测范围内）各一份，然后按5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H的体积比 混合成6个不同浓度的样本，每个浓度样本重复检测2次,取平均值。以预期值为