高效液相色谱法与化学发光微粒子免疫检测法测定血浆苯妥英浓度的一致性评价

高效液相色谱法与化学发光微粒子免疫检测法测定血浆苯妥英

浓度的一致性评价

鲁静;陈岩;郭美华;钱钊;曲婷;段丽娟;海鑫

【期刊名称】《医药导报》

【年(卷),期】2017(36)2

【摘要】Objective To establish a high performance liquid chromatography (HPLC) method for determining phenytoin concentration in epilepsy patients' plasma,and compare this method with chemiluminescence microparticle immunoassay (CMIA),and to evaluate the consistency of the two methods.Methods HPLC and CMIA methods were applied to determine the plasma concentration of phenytoin in 60 epileptic patients,respectively.The difference of results was analyzed by two-side paired t-test,and then the correlation and consistency of the two methods were investigated with Passing-Bablok regression and Bland-Altman method.Results There was no significant difference between the results of the two methods (P ＞0.05).The regression equation of the determination results by HPLC (Y) and CMIA (X) was Y=0.992 9X +0.143 7 (R2 =0.992 6,n =60),which indicated the correlation of the two methods was good.Bland-Altman analysis showed that the consistency of the two methods for determining was good.Conclusion HPLC and CMIA method in monitoring plasma concentration of phenytoin have good correlation and consistency.Both methods can be used for therapeutic drug monitoring of

phenytoin.%目的建立高效液相色谱(HPLC)法和化学发光微粒子免疫检测(CMIA)法测定癫(痫)患者血浆苯妥英浓度,评价2种测定方法的一致性.方法分别用HPLC 法和CMIA法测定60例癫(痫)患者血浆中苯妥英的浓度,并对2种方法测定结果进行统计分析.对测定值采用双侧配对t检验比较差异,并用Passing-Bablok回归法和Bland-Altman偏差图法分析,考察2种方法的相关性及一致性.结果 2种方法测定结果差异无统计学意义(P＞0.05).2种方法回归方程为Y=0.992 9X+0.143

7(R2=0.992 6,n=60),显示2种方法相关性良好.Bland-Alrman法分析表明2种测定方法的一致性良好.结论 HPLC法和CMIA法测定癫(痫)患者血浆中苯妥英的浓度具有较好的相关性与一致性,2种测定方法均可用于苯妥英浓度的测定.

【总页数】5页(P131-135)

【作者】鲁静;陈岩;郭美华;钱钊;曲婷;段丽娟;海鑫

【作者单位】哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔滨150001;哈尔滨医科大学附属第一医院药学部,哈尔滨150001

【正文语种】中文

【中图分类】R971.6;R969.1

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临床医学检验技师初级(师)临床免疫学及检验(放射免疫分析、化学发光免疫分析技术)-试卷1

临床医学检验技师初级（师）临床免疫学及检验（放射免疫分析、化学发光免疫分析技术）-试卷1 (总分：72.00，做题时间：90分钟) 一、 B1型题(总题数：2，分数：16.00) A．核素标记抗原B．核素标记抗体C．限量D．等量E．过量（分数：8.00） (1).放射免疫分析的标记物是用（分数：2.00） A. √ B. C. D. E. 解析： (2).免疫放射分析的标记物是用（分数：2.00） A. B. √ C. D. E. 解析： (3).放射免疫分析中标记物的使用为（分数：2.00） A. B. C. √ D. E. 解析： (4).免疫放射分析中标记物的使用为（分数：2.00） A. B. C. D. E. √ 解析：解析：放射免疫分析使用核素标记抗原，标记物为限量使用；免疫放射分析使用核素标记抗体；标记物为过量使用。 A．竞争抑制B．非竞争结合C．针对多克隆抗体特异性较低D．针对单克隆抗体特异性较强E．与两种抗体无关（分数：8.00） (1).放射免疫分析的反应模式是（分数：2.00） A. √ B. C. D. E. 解析： (2).免疫放射分析的反应模式是（分数：2.00） A.

B. √ C. D. E. 解析： (3).放射免疫分析的特异性是（分数：2.00） A. B. C. √ D. E. 解析： (4).免疫放射分析的特异性是（分数：2.00） A. B. C. D. √ E. 解析：解析：放射免疫分析反应模式为竞争抑制，反应针对多克隆抗体特异性较低；免疫放射分析反应模式为非竞争结合，反应针对单克隆抗体特异性较强。 二、 A1型题(总题数：26，分数：52.00) 1.放射性标记物的放射化学纯度一般要求大于 （分数：2.00） A.75％ B.85％ C.95％√ D.98％ E.100％ 解析：解析：放射化学纯度是指单位标记物中结合于被标记物上的放射性占总放射性的百分率，一般要求大于95％。 2.RIA试验中抗原抗体复合物的放射性强度与待测抗原呈 （分数：2.00） A.正比关系 B.函数关系 C.反比关系√ D.曲线关系 E.正弦关系 解析：解析：RIA是采用放射性核素标记的抗原和非标记的待测抗原竞争性结合有限量特异性抗体的反应，故放射强度与待测抗原浓度呈反比。 3.目前RIA常用的分离方法不包括 （分数：2.00） A.第二抗体沉淀法 B.聚乙二醇沉淀法 C.PR试剂法 D.活性炭吸附法 E.琼脂糖凝胶电泳√ 解析：解析：目前RIA常用的分离方法包括第二抗体沉淀法、聚乙二醇沉淀法、PR试剂法、活性炭吸附法。 4.与RIA比较，IRMA的特点不包括 （分数：2.00）

检验仪器学题库(试题+答案)

单选(题下选项可能多个正确，只能选择其中最佳的一项) 1.[1分]物质的分子、原子或离子接受外界能量，由基态跃至高能态，再由高能态回到基态而产生的光谱是 A:吸收光谱 B:发射光谱 C:散射光谱 D:跃迁光谱 E:原子吸收光谱 标准答案：B 2.[1分]电化学分析技术是指将待测物质溶液组成一个化学池，通过测量电池的变量，使待测物质的浓度转变为电学参数而进行检测的分析技术。这些变量不包括 A:电位 B:电流 C:电量 D:电阻 E:电容 标准答案：E 3.[1分]当用散射免疫比浊法测定抗原或抗体的含量时，当光源发出的光通过待测样品，样品中的抗原与其特异性抗体形成抗原-抗体复合物，散射光的强度与复合物的含量的关系是A:倍比 B:正比 C:等比 D:反比 E:无关 标准答案：B 4.[1分]色谱法利用混合物中各组分在互不相溶的两相之间的何种差异而使物质的各组分得到分离，再对其进行定性或定量测定 A:质量 B:分配系数 C:分子量 D:溶解度 E:挥发性 标准答案：B 5.[1分]免疫固定电泳也是临床上常规开展的一种电泳技术，利用琼脂糖凝胶电泳技术分离血清、尿液、脑脊液或其他体液中的抗原，因为这些抗原具有不同的

B:电荷和分子量 C:电渗效应 D:浓度 E:溶解度 标准答案：B 6.[1分]荧光免疫技术是用以下哪种物质标记抗体，从而提高了反应的特异性、敏感性和直观性 A:酶蛋白 B:放射性核素 C:荧光素 D:化学发光剂 E:电化学发光剂 标准答案：C 7.[1分]放射免疫技术是以下列哪种物质为示踪物标记抗原(或抗体)，测定样本中抗体(或抗原)的一种标记免疫技术 A:酶蛋白 B:放射性核素 C:荧光素 D:化学发光剂 E:电化学发光剂 标准答案：B 8.[1分]酶免疫技术用下列哪种物质作为标记物和抗原.抗体反应的高特异性相结合 A:酶蛋白 B:放射性核素 C:荧光素 D:化学发光剂 E:电化学发光剂 标准答案：A 9.[1分]基于物质的分子或原子对辐射能的选择性吸收而得到的分子或原子光谱即为 A:吸收光谱 B:发射光谱 C:散射光谱 D:衍射光谱 E:原子吸收光谱

化学发光免疫分析

化学发光免疫分析 化学发光免疫分析，也称为化学发光法或发光免疫测定法，是一种高灵敏度和高特异性的生物分析技术。它结合了免疫学、生物学和化学的原理，利用特异性抗体与其抗原（或其他生物分子）相互作用，通过化学反应使其辐射出光信号，从而定量地检测目标物质的存在和含量。 一、化学发光免疫分析原理 化学发光免疫分析原理基于化学发光原理和免疫学原理。化学发光原理就是将化学反应的能量通过光子的辐射转换为光的能量。免疫学原理是利用特异性免疫反应来识别和区分不同的抗原或抗体。 化学发光免疫分析技术的基本步骤如下： 1.选择特异性的抗体与目标物质的结合； 2.引入辐射源激活化学发光前体（例如，过氧化物或二氧化硫酞）； 3.目标物质与抗体发生结合后，释放了辐射源激活前体，使其进一步分解并产生化学发光； 4.测定样品中的荧光强度，用于定量分析目标物质的存在和含量。 化学发光免疫分析发出的荧光信号对于抗原-抗体的结合非常敏感和特异。比较常见的荧光标记物包括酶（如辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、荧光染料（如荧光素和荧光素衍生物）、金纳米粒子等。 二、化学发光免疫分析的应用

化学发光免疫分析的应用涉及生物分子、环境污染、中 药等领域。下面将从这些不同应用领域来介绍化学发光免疫分析技术的具体应用。 1.生物分子分析 生物分子分析是化学发光免疫分析技术的主要应用领域 之一。常见的生物分子包括蛋白质、核酸、糖等。如免疫荧光分析技术可以快速、准确地分析细胞表面分子、内部生物分子和变态反应特异性IgE。同时，化学发光免疫分析技术可以用 于患者体液中的特定免疫球蛋白或蛋白质的定量检测。 2.环境污染分析 环境污染分析是化学发光免疫分析技术的另一个主要应 用领域。通过测量土壤、水、空气等样品中的污染物含量，可以快速精准地确定其存在和含量。化学发光免疫分析技术可用于检测重金属、有机污染物、致癌物等。该技术不仅检测灵敏，而且简便易行。 3.中药分析 中药分析中常用的技术包括高效液相色谱法、气相色谱法、电化学法等。随着化学发光免疫分析技术的不断发展，越来越多的中药研究人员开始使用这种新型的分析方法来分析中药药材和提取物中的活性成分。例如，利用化学发光免疫分析技术可以快速、敏感、准确地分析人参、当归、黄芪等传统中药中的有效成分，提高中药质量控制和研究的效率。 三、化学发光免疫分析的优缺点 优点： 1.极高的灵敏度和特异性。 2.分析过程简单易实现，操作简便快速，且样品量少、 检测时间快。

三基检验试题1

检验试题1 姓名__________ 考试时间____________ 得分______________ 考试时间：120分钟总分：100分 一．单选题（共100题，每题1分） 1.下列试验不属于凝集试验的是( ) A．肥达试验B．外斐试验C．RPR D．TRUST E．MHA-TA 2.下列哪种自身抗体是干燥综合征中最常见的自身抗体’?( ) A．抗Sm抗体B．抗SSA-Ro抗体C．抗Jo-1抗体D．抗Scl一70抗体E．抗U1RNP持仕 3.下列哪种病毒主要经粪口途径传播( ) A．柯萨奇病毒B．黄热病病毒C．腺病毒D．森林脑炎病毒 E．流行性乙型脑炎病毒 4.受溶血影响较小的测定项目为( ) A．LD B．AST C．γ-GT D．ChE E．ACP 5.不会引起嗜酸性粒细胞数量增高的疾病是( ) A．慢性粒细胞性白血病B．多发性骨髓瘤C．脾切除术后D．长期应用肾上腺皮质激素E．猩红热 6.吞噬细胞免疫缺陷病( ) A．X-LA B．DiGeorge综合征C．SCID D．X-CGD E．慢性皮肤黏膜念珠病 7.下列哪项符合骨髓的有关叙述( ) A．分为黄骨髓、红骨髓和白骨髓B．红骨髓主要有脂肪细胞组成C．黄骨髓主要由造血细胞组成D．白骨髓主要为支架细胞E．黄骨髓具有造血的潜能 8.下列组合，错误的是( ) A．淋球菌一血液传播B．布氏杆菌一接触传播C．伤寒杆菌一消化道传播D．乙型链球菌引起的猩红热一呼吸道传播E．脑膜炎球菌一呼吸道传播 9.光学显微镜下可( ) A．看见所有的病毒B．看不见病毒C．看见大小约20nm的病毒 D．看见大小约200nm的病毒E．看见有包膜的病毒 10.下列哪一种基因是抑癌基因( )

体内药物分析（1）

体内药物分析（1） 2.治疗药物监测：以药动学药效学为理论为基础，应用现代分析技术，测定体液中的药物浓度，研究药物浓度和与疗效和毒性之间的关系，为临床给药方案个体化提供科学依据。 8.质控样品QC：是指在空白生物介质中加入已知量待测物标准物质制成的样品，用于监测生物分析方法的重复性和评价每一分析批中未知样品分析结果的完整性和正确性。10.分析批：包括待测样品、适当数目的标准样品和QC样品的完整系列。 12.定量下限：是指符合准确度和精密度要求的生物样品中药物的最低定量浓度，其反映了方法的灵敏度。13:高效液相色谱法：是在经典液相色谱的基础上，以高压泵输送流动相，采用高效微粒型固定相及高灵敏度检测器，发展而成的现代分离分析技术。 14.等度洗脱：在同一分析周期内流动相组成比例保持恒定，适合于组分数目较少，性质差别不大的样品。15.梯度洗脱：是在一个分析周期内程序控制改变流动相的组成比例，适合于分析组分数目多，性质差别较大的复杂试样。 16.提取回收率：系指从生物样本基质中回收得到分析物质的响应值与标准物质的响应值之比，也称萃取回收率或绝对回收率。 18.非临床药代动力学：通过对动物体内、外和人体外研究方法，揭示药物在体内的动态变化规律，获得药物的基本药代动力学参数，阐明药物的吸收，分布，代谢和排泄的过程和特点。 19.临床药代动力学：阐明药物在人体内的吸收，分布，代谢和排泄的动态变化规律。 20.生物等效性：是指一种药物的不同制剂在相同的实验条件下，给以相同的剂量，其活性成分吸收速率和程度的差异无统计学意义。 21.群体药代动力学：通过定量考察群体患者中血药浓度和效应的决定因素，研究给予标准剂量药物时个体间血药浓度、药物效应的变异性。22.治疗窗：把最低有效浓度作为治疗浓度的下限，最小中毒浓度作为治疗的上限，这个范围称为治疗窗。23.室内质控：是指在实验

CKMB的活性测定和质量测定方法

CKMB的活性测定和质量测定方法 CK-MB是肌酸激酶同工酶，由肌酸激酶（CK）在心肌组织中产生。CK-MB在临床上被广泛应用于心肌梗死的早期诊断和进程监测。CK-MB的活性测定和质量测定方法都是评估心肌损伤的重要手段。 CK-MB活性测定方法： CK-MB活性测定通常采用酶反应法，通过检测CK-MB催化的底物转变为产物的速率来间接测定CK-MB活性。常用的方法有： 1.动力学酶测定法：该方法是通过观察CK-MB催化底物转变的动力学反应过程来测定CK-MB的活性。常用的底物是磷酸甘油酸二酯（CPG）。该方法具有较高的灵敏性和准确性，但需要专业仪器和操作技术。 2.光度法：光度法是通过测定在特定波长下产物的吸光度来测定CK-MB活性。常用的底物是肌酸和ATP，产物是肌酸和ADP。该方法简单、快速，适用于大规模样本测定，但在测定前需要将样本纯化或稀释。 3.察因子法：察因子法是通过测定CK-MB催化产物与辅酶（NADH）间的反应速率，间接测定CK-MB活性。该方法简单、经济，适用于常规实验室。 CK-MB质量测定方法： CK-MB的质量测定是通过直接测量样品中CK-MB浓度来评估心肌损伤的严重程度。常用的方法有： 1.免疫测定法：免疫测定法是通过特异性CK-MB抗体与CK-MB结合，形成免疫复合物，并用化学发光、荧光等技术进行检测和定量。该方法具有高灵敏度和高特异性，可用于早期心肌梗死的诊断。

2.实时荧光定量PCR法：该方法通过特异性引物和探针结合CK-MB基因的特定区域，利用聚合酶链反应（PCR）技术扩增CK-MB基因，然后通过荧光信号来定量CK-MB的数量。该方法具有高灵敏度和高特异性，适用于早期心肌梗死的诊断。 3.高效液相色谱法（HPLC）：该方法通过分离和测量样品中CK-MB的浓度。该方法需要专业仪器和技术，但可以同时测定多个同工酶，对临床诊断和监测心肌梗死非常有帮助。 总结起来，CK-MB的活性测定方法主要采用酶反应法，包括动力学酶测定法、光度法和察因子法。CK-MB的质量测定方法主要有免疫测定法、实时荧光定量PCR法和高效液相色谱法。通过结合这些方法的应用，可以更准确地评估心肌损伤的程度。

环孢霉素标准操作规程

环胞霉素标准操作规程 1.【实验目的】 为了保证环孢霉素可测定结果的准确性，以及可靠性。 2.【职责】 2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。 2.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、 科主任。 3.【样品类型及实验前准备】 3.1样本准备： ARCHITECT 环孢霉素检测中仅可使用采集于EDTA管中的人全血样本。按照生产商的指导说明使用全血采集管。建议在样本上标示采集时间和最后一次给药时间。液体抗凝剂可能会起到稀释作用，从而降低患者样本的浓度。ARCHITECT i系统不具备验证样本类型的功能。操作人员必须对ARCHITECT 环孢霉素检测中所用样本的正确性进行验证。 3.1.1样本出现如下状况时，请勿使用： 热灭活样本 明显受微生物污染的样本 处理患者样本时必须小心，以防止交叉污染。建议使用一次性移液管或者吸头为了对结果进行优化，样本应该无纤维，血红细胞，或其他微粒物质。使用前，对含有纤维，血红细胞，或其他微粒物质的样本进行离心分离，以确保结果的一致性。 3.1.2样本储存： 采集于EDTA抗凝管中的样本检测前可在2-8 ° C最多冷藏储存7天。如果检测被推迟7天以上，需要把样本冷冻储存在-10 ° C或更低温度中。样本融化后必须彻底混匀，以确保检测结果前后一致。 3.2患者准备：实验前正常饮食，晨起空腹，安静状态下抽取静脉血，条件特殊情况下可空腹抽 血检测。 3.3容器，添加剂类型：血浆（EDTA三钾），使用玻璃管或塑料管分离样本。 3.4仪器设备：雅培ARCHITECTi10SR,低速离心机 3.5实验试剂： ARCHITECT环孢霉素试剂盒（1L75） 微粒子：1瓶（8.0 mL环孢霉素抗体小鼠，单克隆）包被的微粒子，储存于含有蛋白（牛）稳定剂的MOPS缓冲液中。 防腐剂：叠氮钠和ProClin 950 结合物：1瓶（12.0 mL吖啶酯标记的环孢霉素结合物，储存于含有清洁剂的柠檬酸盐缓冲液中。 防腐剂：ProClin 3项目稀释液：1瓶（10.0 mL项目稀释液含有MES缓冲液和氯化钠。防腐剂：ProClin 3 其他试剂 ARCHITECT i 预激发液 预激发液含有1.32%（w/v）过氧化氢。 ARCHITECT i 激发液 激发液含0.35 N氢氧化钠。

高效液相色谱(文献综述)

高效液相色谱结合化学发光的简要介绍 （孙鑫环境学院Z1009006） 摘要：目前，高效液相色谱(HPLC)法由于对复杂样品中的分析物具有极高的分离效率而成为最有效的分离方法。将具有高灵敏度的化学发光分析法和具有高分离效率的高效液相色谱分离法相结合已引起了国内外分析化学家的极大兴趣。本文简单概述了高效液相色谱化学发光的特点、发展史、检测原理、化学发光反应体系以及发展前景。 1.引言 高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）是一种具有高效、快速及应用广泛的现代分离技术，它是在经典液相色谱法的基础上，引入了气相色谱法的理论和技术，以高压输送流动相，采用高效固定相及较高灵敏度检测器，发展而成的现代液相色谱分析方法己经成为有机物质分析的支柱技术，在生物化学、临床医学、食品检验、石油化工及环境污染监测等领域得到广泛的应用，成为分析化学家和生物化学家用以解决他们面临各种实际分析和分离必不可缺的工具。与经典的液相色谱法相比，高效液相色谱法具有下列主要优点：①应用了颗粒极细、规则均匀的固定相，传质阻抗小，柱效高，分离效率高； ②采用高压输液泵输送流动相，流速快，一般试样的分析需数分钟，复杂试样分析在数十分钟内即可完成；③广泛使用了高灵敏检测器，大大提高了灵敏度。高效液相色谱仪是由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。 从上个世纪70年代以来，人们经过努力已研究和开发了多种检测器，如紫外-可见光检测器(UV一Vls)、光电二极管阵列检测器(PDA)、荧光检测器(FLD)、示差折光检测器(RID)、电化学检测器(ECD)、蒸发激光散射检测器(ELSD)、光电导检测器(PCD)、磁旋光检测器(MDR)、放射性检测器(RD)、热离子化检测器(TID)、化学发光检测器(CLD)和质谱(Ms)检测器等等。 随着色谱技术的发展，结合计算机各种软件的开发，使HPLC与各种检测仪器联用。在众多的HPLC检测器中，化学发光检测器(CLD)结构简单，灵敏度高。

治疗药物血药浓度监测

治疗药物血药浓度监测 一、需要进行监测的药效学和药动学原因 1.安全范围窄，治疗指数低一些药物治疗浓度和最小中毒浓度接近甚至重叠，极易中毒，只有通过TDM调整剂量，才能既保证疗效又不致产生毒性； 2.以控制疾病发作或复发为目的的用药此类用药多需数月或数年的长期用药，如果不进行TDM，临床只能根据病症是否出现或复发、毒性反应是否发生为调整剂量的依据。而一旦发生上述情况再调整剂量，将导致不必要的经济损失或延误病情，甚至不可逆的后果； 3.不同治疗目的需不同的血药浓度； 4.药物过量中毒； 5.药物治疗无效原因查找； 6.已知治疗浓度范围内存在消除动力学方式转换的药物； 7.首过消除强及生物利用度差异大的药物； 8.存在影响药物体内过程的病理情况； 9.长期用药及可能产生药动学相互作用的联合用药。 二、需要进行TDM的药物特点 1.治疗指数低、安全范围窄，毒性反应强的药物； 2.药代动力学的个体差异大的药物； 3.具有非线性动力学特性的药物； 4.患心、肝、肾和胃肠道等脏器疾病时使用的药物； 5.为预防慢性病发作需长期使用的药物； 6.治疗浓度与中毒浓度很接近的药物； 7.产生不良相互作用、影响药物疗效的合并用药； 8.常规剂量下出现毒性反应的药物。 具有以下特点的药物不需要进行检测 1.有客观而简便的观察其作用指标的药物； 2.有效血药浓度范围大、毒性小的药物； 3.短期服用、局部使用或不易吸收进入体内的药物。 三、TDM的临床应用和意义 1.监督临床用药，制定合理的给药方案，确定最佳治疗剂量，保证个体化给药，提高疗效和减少不良反应。 2.研究与确定常用剂量情况下，不产生疗效或出现意外毒性反应的原因。 3.确定患者是否按照医嘱服药。 表1 临床常需要进行血药浓度监测的药物 分类临床使用的代表药物 强心甙地高辛、洋地黄毒甙、毒毛花苷K、西地兰 抗心律失常药奎尼丁、利多卡因、普鲁卡因、胺碘酮 抗癫痫药苯妥英钠、苯巴比妥、卡马西平、扑米酮、丙戊酸钠、乙琥胺、 加巴喷丁、拉莫三嗪、非氨酯、托吡酯、氨己烯酸、唑泥沙胺、 奥卡西平、泰加平、左乙拉西等 抗抑郁药丙米嗪、地昔帕明、阿米替林、多虑平等

体内药物分析习题集

浙江大学继续教育学院 《体内药物分析》习题集 一、名词解释 1.反相HPLC 答：即流动相极性大于固定相极性的HPLC。 2.ODS 答：即十八烷基硅烷键合硅胶，为常用反相HPLC的固定相。 3.荧光光谱答：以发射波长为横坐标，荧光强度为纵坐标所作的图。 4.激发光谱答：以激发波长为横坐标，荧光强度为纵坐标所作的图。 5.RSD 答：相对标准偏差，即精密度的一种表示方法。 6.一相代谢答：指药物在体内发生的氧化反应、还原反应、水解反应。 7.二相代谢答：指药物在体内的结合反应，包括：葡萄糖醛酸结合、硫酸酯化、甲基化、乙酰基化、氨基酸缀合、谷胱甘肽缀合等。 8.检测限答：表示药物的最低可测度，不必定量，通常以S/N=2~3倍时被测药物的绝对量表示。 9.定量限答：表示药物可定量测定的最低量，须符合一定精密度和准确度要求，常以标准曲线最低浓度点来 确定，或以 S/N=5～10确定。 10.血清答：全血经离心后的上清液。 11.血浆答：全血加抗凝剂（肝素等），经离心后的上清液。 12.酶免疫分析答：酶免疫分析是在放射免疫分析基础上发展起来的一种免疫分析方法，以酶代替同位素来标记 药物，酶与底物、辅酶等反应后引起吸收光谱变化而被检测。 13.手性药物答：分子结构中含有不对称碳原子（即手性中心）的药物称为手性药物。 14.TDM 答：治疗药物监测，为英文“therapeutic drug monitoring”的缩写。 15.冷冻答：指－20℃及以下温度。 16.人工抗原答：全称为人工完全抗原，将药物等小分子半抗原与蛋白质、多肽等大分子物质经人工合成而得， 具有免疫原性。 17.生物转化答：主要指体内代谢反应。 18.提取回收率答：指药物加入到生物样本中经前处理后测得的量与理论加入量的比值。 19.CYP1A2 答：细胞色素P450 1族A亚族第2个酶基因。 20.毛细管电泳答：即高效毛细管电泳(HPCE),是以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据各组分之间的 迁移速度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。 二、填空 1.气相色谱法中常用的检测器有氢焰离子化检测器、氮磷检测器、电子捕获检测器、MS 等。 2.分析方法认证的主要指标线性范围、准确度、精密度、专属性、灵敏度、稳定性等。

临床检验主管检验师临床免疫学和免疫检验—临床免疫检验的质量保证 复习资料汇编

临床检验主管检验师临床免疫学和免疫检验—临床免疫检验的质量保证复习资料汇编 临床实验室的测定数据是为患者疾病的诊疗或临床实验研究服务的，因而为保证患者临床诊疗或临床实验研究的有效性，就要求临床实验室采取一系列有效的措施证明其测定数据能够达到所确定的质量标准，这就是质量保证的内容，涵盖了实验室内进行的涉及临床检测的所有活动。 第一节概述 一、与质量保证相关的定义 1.质量保证（QA）：为一产品或服务满足特定的质量要求提供充分可信性所要求的有计划的和系统的措施。 2.室内质量控制（IQC）：由实验室工作人员采取一定的方法和步骤，连续评价本实验室工作的可靠性程度，旨在监测和控制本室常规工作的精密度，提高本室常规工作中批内、批间样本检验的一致性，并确定当批的测定结果是否可靠，可否发出检验报告。 3.室间质量评价：为客观地比较某一实验室的测定结果与靶值的差异，由外单位机构，采取一定的方法，连续、客观地评价实验室结果，发现误差并校正结果，使各实验室之间的结果具有可比性。 4.准确度：待测物的测定值与其真值的一致性程度。准确度不能直接以数值表示，通常以不准确度来间接衡量。对一分析物重复多次测定，所得均值与其真值或参考靶值之间的差异亦即偏倚即为测定的不准确度。 5.偏倚：待测物的测定值与一可接受参考值之间的差异。偏倚又分批内偏倚和批间偏倚，批内偏倚反映的是该批测定的系统误差，如校准不准、非特异显色等。批间偏倚所反映的问题要更大一些，如试剂或校准物变质所致的误差。 6.精密度：在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。与准确度一样，精密度同样也是以不精密度来间接表示。测定不精密度的主要来源是随机误差，以标准差（SD）和（或）变异系数（CV）具体表示。SD或CV越大，表示重复测定的离散度越大，精密度越差，反之则越好。 准确度好的实验，其精密度不一定好；准确度差的实验，其精密度则不一定差；反之亦然。 7.重复性条件：是指在短的间隔时间内，在同一实验室对相同的测定项目使用同一方法和同一仪器设备，由相同的操作者获得独立的测定结果的条件。 8.批：在相同条件下所获得的一组测定。 9.均值：一组测定值中所有值的平均值，亦称均数。均值为计算值，在实际测定数据中可能会出现该数值，也可能没有。 10.标准差：为表示一组测定数据的分布情况，即离散度，可用标准差来表示。 11.变异系数：将标准差以其均数的百分比来表示，即为变异系数。 12.正态分布：当一质控物用同一方法在不同的时间重复多次测定，当测定数据足够多时，如以横轴表示测定值，纵轴表示在大量测定中相应测定值的个数，则可得到一个两头低，中间高，中为所有测定值的 均值，左右对称的“钟形”曲线，亦即正态分布，又称高斯分布。正态分布的基本统计学含义可用均值（）＝标准差（s）和概率来说明，均数位于曲线的正中线所对应的值，s则表示测定值的离散程度，s越大，曲线越宽大，s越小，曲线越窄。曲线下的面积为概率，其与和s的关系可阐述如下：所有测定值处于均值±1s范围内的概率为0.68；处于均值±2s范围内的概率为0.955；处于均值±3s范围内的概率为0.997。 二、实验方法诊断效率评价 1.诊断敏感性：是指将实际患病者正确地判断为阳性（真阳性）的百分率。本指标可用于评价测定方

论文 高效液相色谱在药物分析中的应用

高效液相色谱法在药物分析中的应用与发展 摘要：色谱分析作为重要的分离分析技术，已成为药物研制开发、生产单位、药品检验部门及医院临床检验等各个领域中药物质量控制必不可少的方法和技术。高效液相色谱法是20世纪60年代末70年代初出现的分析速度快、分离效率高、操作自动化的新型色谱分析方法。它已逐渐成为药物分析领域中重要的分析手段及主要制备方式之一。 关键词：高效液相色谱法药物分析 1.前言 高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography , HPLC），又称“高压液相色谱法”或“高速液相色谱法”，是20世纪60年代末，在经典液相色谱的基础上引入气相色谱的理论与实验方法，并加以改进而发展起来的一种重要分离分析方法。HPLC采用了高压输液泵，高效固定相和高灵敏度在线检测器等技术，具有分离效能高、分析速度快、灵敏度高、色柱可以反复使用、流动相可选择范围宽、流出组容易收集、适用范围广和安全等优点，特别适合挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物的分离分析测试，广泛应用于医学、药学、化学、生化、工业、农业、环保、商检和法检等科学领域错误!未找到引用源。。近年来，高效液相色谱法在药物分析中发挥着越来越重要的作用，主要是鉴别相关物质、检查药物中有关物质的含量限度以及测定有效成分或主要成分含量，世界各国已将该法收载于药典。本文就高效液相色谱法在药物分析研究中的应用和发展综述如下。

2.高效液相色谱法在药物分析中的应用 2.1高效液相色谱法在药物鉴别中的应用 在HPLC法中，保留时间与组分的结构和性质有关，是定性的参数，可用于药物的鉴别。如中国药典收载的药物头孢羟氨苄的鉴别项下规定：在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致。头孢拉定、头孢噻酚钠等头孢类药物以及地西泮注射液、曲安奈德注射液等多种药物均采用HPLC法进行鉴别。王维剑[7]王维剑,张军仁,庞华.替莫唑胺含量测定方法的研究[J].药物分析杂志,2003 ,23 (5) :344.等以ODS柱，甲醇-0.5%乙酸(1:9)为流动相，DVD检测器，波长329 nm测定了一种新型抗肿瘤药替莫唑胺(temzolo-mide)，为申报新药提供了数据。崔静茹[8]崔静茹,杜智敏.半夏止咳糖浆的制备与鉴别[J].实用新闹肺血管病杂志. 2008, 16(7): 61-63.等以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，分别以甲醇-冰乙酸-水(30∶4∶66)和以乙腈-0·1%磷酸液(9∶91)为流动相，检测波长分别为283 nm、207 nm，对半夏止咳糖浆中的陈皮、麻黄进行鉴别，方法简便准确，专属性强，重复性好，可用于控制此中药制剂的内在质量。王小平[9]王小平，林励，白吉庆．HPLC指纹图谱法鉴别蜂胶和树胶[J]．陕西农业科学，2009，55(3)：133—135．等还采用HPLC 指纹图谱法对蜂胶和树胶进行鉴别。这些应用无疑为进一步完善、开发药物鉴别的方法提供了一种新的思路。 2.2高效液相色谱法在含量测定中的应用 用高效液相色谱法测定含量可以消除药物中的杂质，制剂中的附加剂及共存的药物对测定的干扰，因此药物成分含量测定中HPLC法应用广泛。杜洪光[10] 杜洪光,赖宇宏,王丽等. HPLC法测定苯甲酸

血药浓度监测方法研究

血药浓度监测方法研究 何莎学号：201202191501 摘要：当前临床用药中，需要进行临床血药浓度监测的药物有几十种，有时用药目的也决定了药物需进行血药浓度监测，血药浓度监测的必要性已受到越来越多的重视和强调。针对血药浓度监测不同方法的研究，本文分别从高效液相、液质联用、免疫分析等方面进行概述，探讨不同监测方法的异同和优劣，为临床血药浓度监测提供参考。 关键词：血药浓度监测；方法；临床 The research on method of Monitoring of Blood concentration Abstract:In the current clinical use, the drugs whitch need for monitoring of blood concentration have a few kinds, sometimes the purpose also determines the drugs for blood concentration monitoring, the necessity of blood drug concentration monitoring has been more and more attention and emphasis. According to the different methods of research on blood concentration monitoring , this paper respectively focus on from the high performance liquid, liquid mass combined, immune analysis, whitch were summarized and discussed the similarities and differences of different monitoring methods, and the advantages and disadvantages, for clinical blood concentration monitoring to provide reference. Keywords: blood concentration monitoring; Methods; clinical 前言 众所周知，当药物经各种途径进入体内后，血液成为体内转运的中枢，绝大多数药物经血液循环到达作用部位或受体部位，并以一定浓度产生药效（也包括副作用，甚至毒性作用）。由于药物进入体内到产生药理作用是一个十分复杂的过程，故各种因素都可影响药理作用的强弱，而探讨各种因素对药理作用的影响就显得尤为重要了

他克莫司药物浓度测定的方法学评价

他克莫司药物浓度测定的方法学评价 摘要目的：通过西门子Viva-E全自动药物分析仪（Siemens Viva-E）和雅 培ARCHITECT i2000SR全自动免疫分析系统（Abbott ARCHITECT i2000SR）对 免疫抑制剂他克莫司血药浓度进行检测，分析两种仪器的精密度、准确性、一致性。方法：分别采用Siemens Viva-E（酶免疫增强放大法）和Abbott ARCHITECT i2000SR（化学发光微粒免疫分析方法）分别测定低、中、高3个水 平昆莱室内质控品，分析仪器的精密度；分别测定2021卫生部临床检验中心提 供的室间质量评价质控品，以液相色谱串联质谱联用仪（LC-MS）测定法为参考 方法，分析两种方法与其的相关系数，评价检测结果的准确性；分别测定672份 他克莫司谷浓度临床标本，分析不同方法学的一致性。结果：室内质控品在 Abbott ARCHITECT i2000SR变异系数较较Siemens Viva-E低，但在低、中浓度 水平p>0.05，无统计学差异，在高浓度水平p＜0.05，差别有统计学意义；室间 质控品测定结果与参考方法相比相关系数良好，均>0.99；临床标本测定结果显 示两种仪器检测数据一致性良好，P＞0.05，没有统计学差异。结论：目前临床 实验室常用的Siemens Viva-E和Abbott ARCHITECT i2000SR在测定他克莫司 血药浓度水平上没有明显的统计学差异，但是在高浓度室内质控品，Abbott ARCHITECT i2000SR较Siemens Viva-E变异系数小，精密度高。 关键词：他克莫司质控品 Siemens Viva-E Abbott ARCHITECT i2000SR 他克莫司是从土壤微生物中分离提纯所获得的一种大环内酯类免疫抑制剂[1]，属于钙调磷酸酶抑制剂中的一种[2]，是临床上用于肾脏、肝脏和心脏等各种实体 器官移植术后的一线免疫抑制剂[3]，还应用于自身免疫性疾病的治疗，比如自身 免疫性红斑狼疮、类风湿性关节炎等[4]。临床上通过长期监测血液他克莫司浓度 以指导临床用药剂量，本文对Siemens Viva-E和 Abbott ARCHITECT i2000SR 仪器进行性能评价。 1 资料与方法

中国大剂量甲氨蝶呤循证用药指南(2022版)

中国大剂量甲氨蝶呤循证用药指南(2022版) 大剂量甲氨蝶呤（high-dose methotrexate，HDMTX）指甲氨蝶呤（methotrexate，MTX）的给药剂量大于500mg/m2，常用于急性淋巴细胞白血病（acutely mphoblastic leukemia，ALL）、非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）、骨肉瘤等疾病的一线化疗。目前，HDMTX在临床治疗中存在较高的用药风险，且毒副作用表现出显著的个体差异，其相关代谢酶基因检测以及血药浓度监测时机、目标浓度等个体化用药方面亟待规范。 《中国大剂量甲氨蝶呤循证用药指南》（以下简称“指南”）是一部由北京大学第三医院药剂科发起，经中国药理学会治疗药物监测研究专业委员会批准制订，由中国药学会循证药学专业委员会、中国循证医学中心和推荐意见分级的评价、制定与评估（GRADE）中国中心提供方法学支持的临床实践指南。指南的使用人群为临床医师、药师、护师和其他相关者，目标人群为接受HDMTX 治疗的血液恶性肿瘤或骨肉瘤患者。指南项目组成员包括指导委员会、共识专家组、制订工作组以及外审专家组。其中，指导委员会负责指南的重要决策，审核并批准推荐意见和指南发布；共识专家组由临床药学、血液肿瘤学、骨肿瘤学、循证医学及药物经济学等多学科专家组成，负责临床问题的确定与推荐意见共识的达成。 2017年5月，指南在国际实践指南注册平台上进行注册，注册号为IPGRP-2017CN021。指南项目组严格遵从临床实践指南的最新定义与世界卫生组织指南制订的方法学规范，在系统分析、梳理2.5万余篇研究证据的基础上，对HDMTX药物治疗证据进行了循证评价和定性、定量整合，采用GRADE方法进行证据质量评价与推荐意见强度分级，并考虑了国内7家医院共计124例患者的意愿[3]，经过9家医院共计48位专家同行的外部评审后完成制订，最终形成了涵盖临床用药全流程的28条推荐意见，涉及用药前评估、预处理与常规给药方案、治疗药物监测（therapeutic drug monitoring，TDM）、亚叶酸钙解救、不良事件管理等。指南全文于2022年2月发表于British Journal of Clinical Pharmacology期刊，指南编写组现就指南的推荐意见进行中文版本的总结和解读，以促进指南更好地在我国进行推广实施，为HDMTX全程个体化给药提供全面的技术支撑和使用建议。 1 证据分级与推荐强度 指南采用GRADE方法进行证据质量评价与推荐意见强度分级，即证据质量分为高、中、低、极低4个等级，推荐意见强度分为强推荐、弱推荐2个等级。推荐意见的强度主要基于对利弊的权衡，不完全依赖于证据质量。此外，对于必须在指南中形成推荐意见但已发表文献证据有限的临床问题，通过综合临床经验与专家证据，参考已发布的专家共识或诊疗规范，并经指南指导委员会与共识专家组取得共识后形成推荐意见，在指南中将此类证据分级标记为“专家意见”。 2 推荐意见总结与解读

我国药物分析前沿技术十年发展回顾

我国药物分析前沿技术十年发展回顾 摘要 2012年到2022年十年间，创新药物层出不穷，药物的定性定量分析方法呈现多样化和复杂化特点，由此推动了药物分析前沿技术的迅猛发展。笔者围绕化学药物分析技术、中药分析技术、生物药物分析技术及药物分析新技术4个方面，对近十年来我国药物分析前沿技术的发展历程进行综述，并展望了未来药物分析领域应重点关注的方向，以期为推进药物分析技术“传承精华，守正创新”而奠定科学基础。 关键词 化学药物分析；中药质量控制；中药有效性分析；生物药物分析；药物分析新技术 化学药物分析技术 1.1 药品标准物质标定 国家药品标准物质是指供国家药品标准中物理和化学测试及生物方法试验用、具有确定特性量值、用于校准设备、评价测量方法或者给供试药品赋值的材料或物质，应具备稳定性、均匀性和准确性。在药品标准物质的定性表征方面，常规的分析技术有：紫外光谱（UV）可提供双键、苯环等发色团片段；红外光谱（IR）可提供特定官能团信息；质谱（MS）可提供分子式组成；核磁共振技术（1H-NMR、13C-NMR、NOE/NOESY、HSQC、HMBC、1H-1H COSY）则能对其复杂结构进行准确归属。田治等综合采用高分辨质谱、核磁共振光谱技术等对盐酸伊达比星进行结构确证，并运用质量平衡法进行定量，为其质量控制提供有力保障。在药品标准物质的定量分析方面，质量平衡法是国际通用的对照品赋值法，但存在不同杂质响应值差异、色谱分离能力限制等不确定因素，

常引起较大偏差。随着分析技术和仪器检测水平的不断提高，刘阳等提出采用定量氢核磁共振（qHNMR）对替比夫定标准物质进行定量，测定结果为99.0%，与质量平衡法结果（99.6%）基本一致，且qHNMR法快速易操作、样品无损测定、耐用性佳，在传统含量测定基础上提供一种全新的定值手段，更适用于没有对照品的创新化学药物定量分析。 1.2 仿制药质量和疗效一致性评价 国家药品监督管理局最新统计数据表明，我国已有化学药品批准文号12.2万个，其中仿制药占比超过95%。开展仿制药质量和疗效一致性评价，是保障人民用药安全、减轻社会医疗负担、提升中国药企国际竞争力的一项重要举措。朱凤昌等通过建立仿制药原研药品数据库，快速分析归纳相关药品信息，为后续遴选参比制剂等提供便利。为实现仿制药与原研药的临床可替代性，仿制药须同时满足药学等效和生物等效。口服固体制剂的药学等效常通过体外溶出行为来衡量，吕蓓蓓等运用高效液相色谱结合相似因子法评价奥卡西平刻痕片仿制药和原研药体外溶出曲线的相似性，同时考察两者外观、脆碎度、晶体形貌等指标。郜继东等采用离子色谱技术检测硫酸阿米卡星注射液中的未知杂质，并对杂质来源和降解途径进行溯源研究，大大降低仿制药不良反应发生率。生物等效又称为治疗等效，用于反映生物利用度和临床效果的一致性，目前主要采纳药时曲线下面积（AUC）和最大血浆浓度（Cmax）为评价标准。 拉考沙胺片在健康受试者空腹和餐后单次口服下的生物等效性，运用高效液相色谱串联质谱法测定血浆药物浓度，并计算主要药动学参数。结果显示，AUC和Cmax的90%置信区间均在80%~125%内，拉考沙胺片仿制药与原研药具有生物等效性。此外，张锦琳等通过构建兰索拉唑肠溶胶囊的药动学（PK）模型，反推

仿制药质量一致性评价人体生物等效性研究

附件3 仿制药质量一致性评价人体生物等效性研究 技术指导原则 一、概述 药物制剂要产生最佳疗效，其药物活性成分应当在预期时间段内释放吸收并被转运到作用部位达到预期的有效浓度。大多数药物是进入血液循环后产生全身治疗效果的，作用部位的药物浓度和血液中药物浓度存在一定的比例关系，因此可以通过测定血液循环中的药物浓度来获得反映药物体内吸收程度和速度的主要药代动力学参数，间接预测药物制剂的临床治疗效果，以评价制剂的质量。允许这种预测的前提是制剂中活性成分进入体内的行为是一致并且可重现的。 生物利用度（Bioavailability,BA）是反映药物活性成分吸收进入体内的程度和速度的指标。过去出现的一些由于制剂生物利用度不同而导致的不良事件，使人们认识到确有必要对制剂中活性成分生物利用度的一致性或可重现性进行验证，尤其是在含有相同活性成分的仿制产品要替代它的原研制剂进入临床使用的时候。鉴于药物浓度和治疗效果相关，假设在同一受试者，相同的血药浓度-时间曲线意味着在作用部位能达到相同的药物浓度，并产生相同的疗效，那么就可以药代动力学参数作为替代的终点指标来建立等效性，即生物等效性（Bioequivalence, BE）。

BA和BE研究已经成为评价制剂质量的重要手段。本指导原则将重点阐述BA和BE研究的相关概念、应用范围和BA和BE研究的设计、操作和评价等。 本指导原则主要是针对化学药品普通固体口服制剂质量一致性评价的人体生物等效性研究。因为在具体应用过程中有可能面临多种情况，对于一些特殊问题，仍应遵循具体问题具体分析的原则。 二、BA和BE基本概念及应用 1.生物利用度：是指药物活性成分从制剂释放吸收进入全身循环的程度和速度。一般分为绝对生物利用度和相对生物利用度。绝对生物利用度是以静脉制剂（通常认为静脉制剂生物利用度为100%）为参比制剂获得的药物活性成分吸收进入体内循环的相对量；相对生物利用度则是以其他非静脉途径给药的制剂（如片剂和口服溶液）为参比制剂获得的药物活性成分吸收进入体循环的相对量。 2.生物等效性：是指药学等效制剂或可替换药物在相同试验条件下，服用相同剂量，其活性成分吸收程度和速度的差异无统计学意义。通常意义的BE研究是指用BA研究方法，以药代动力学参数为终点指标，根据预先确定的等效标准和限度进行的比较研究。在药代动力学方法确实不可行时, 也可以考虑以临床综合疗效、药效学指标或体外试验指标等进行比较性研究，但需充分证实所采用的方法具有科学性和可行性。 了解以下几个概念将有助于理解BA和BE： 原研药（Innovator Product）：是指已经过全面的药学、药