植物组织培养考试重点

第一章

1植物离体培养：通过无菌操作，把植物细胞或其他类型的外植体，接种于人工配置的培养基上，给予人工控制的环境条件，使培养或操作对象表现生长发育等生命活动。

2细胞全能型：细胞具有该有机体的全部遗传信息，并具有形成有机体所有细胞类型的能力。3园艺植物生物技术的应用领域一在细胞工程的应用；1良种繁育，使繁殖系数大，周年生产，繁殖速度快，苗木整齐一致。2离体种质保存，克服常规保存方法占用大量土地或消耗大量人力物力等缺点，并方便种质资源的地区和国际交换，避免病虫的人为传播。3细胞工程育种，培育园艺新品种，克服远缘杂交育种障碍。4有用物质的生产，大规模的细胞发酵罐培养生产药物，食品，调料香精等日用化工品。二基因工程运用：作为园艺作物改良的有效手段之一。三：分子标记运用，加快育种速度，降低选育种的成本，有效提高品种改良的成效。四：在植物学基础研究上的应用：进行遗传多样性的分析，系谱分析，基因表达及调控的研究等。

4细胞脱分化：指外植体中已分化的细胞，在切割损伤和培养物内外因素作用下，逐渐丧失其原有的分化了的结构和功能，合成代谢变得旺盛，细胞壁由厚变薄，细胞内部结构发生变化，细胞高度液泡化，回复到分生组织状态，形成无组织的细胞团或愈伤组织的过程。

5器官分化：指培养条件下的组织或细胞团分化形成不定根，不定芽等器官的过程。

6胚胎发生：指从合子到成熟胚的发生发育过程，所形成的的胚称为合子胚。

7.离体胚胎发生和器官发生有何异同：自然条件下的器官分化是受植物体本身的自主调节控制，而在离体培养条件下，器官分化则是在人工辅助条件下完成的，有3个生长阶段，第一，外植体经过诱导形成愈伤组织。第二，形成生长中心（也成为拟分生组织）。第三，器官原基及器官形成、体细胞胚是离体培养的产物，体细胞胚起源于非合子细胞，体细胞经历了胚胎发育过程，与器官发生形成个体的途径不同。

第二章

外植体：用于接种培养的各种离体的植物材料，包括胚胎材料，各种器官，组织，细胞，原生质体等。

1.外植体的类型茎尖（最常用的材料。生长速度快，繁殖率高，不易产生遗传变异。）节间部（新梢节间容易灭菌，脱分化再分化能力较强）叶和叶柄（取材容易，新出叶片杂菌较少，实验操作方便。）鳞片（水仙、百合、葱、蒜、风信子经常以鳞片为材料。）其他（种子、根、块茎、块根、花球、花粉）

2.外植体的选择原则 1.再生能力强 2.遗传稳定性好

3.外植体来源丰富

4. 外植体灭菌容易

3.外植体的选择依据 1.植物的种类和基因型 2. 外植体来源 3.外植体大小

4.取材季节

5.外植体的生理状态和发育年龄

4.外植体的预处理及消毒 1.减少带菌的处理（在长期晴朗的天气条件下取材、选择信么萌发的幼芽或嫩梢、选择表面比较光滑的材料、对母株定期喷洒杀菌药剂、用纸袋或薄膜袋将枝条封套保护待其萌发新芽后取材、在室内采用水插粗芽后取材，或是在温室植株上取材等，都可以大大减少处事戴菌量。对一些戴菌量较大的植物，如茎尖，从室外取回经剪截处理后，置于烧杯内，杯口用纱布封好，置于水龙头下流水冲洗过夜） 2.消毒剂的杀伤力和材料对消毒剂的耐受力（不同消毒剂种类杀伤力不同，不同的外植体材料对同种消毒剂的耐受力也不同。选择消毒剂时，尽可能选用对微生物消灭作用强烈而对植物材料比较安全的种类。在选择外植体材料时，则应优先考虑体积较大戴菌量较少耐受力较强的类型。对于

坚硬致密的外植体材料，如枣核，可采用渗透力较强的消毒剂，如75%的酒精直接进行表面消毒，或用0.1%氯化汞消毒10分钟或更长时间。）3. 清洗的重要性（外植体经消毒后，必须用无菌水洗去残存的消毒剂，否则会对外植体造成长期伤害，尤其是氯化汞，应清洗多次，去除表面的汞离子）

5.褐变外植体接种后，于伤口处发生褐化，产生褐色物质，不仅使培养基变褐，而且可能造成外植体死亡，或严重抑制外植体脱分化再分化。

6.外植体褐变原理褐变包括酶促褐变和非酶促褐变，目前认为植物组织培养中以酶促褐变为主，多酚氧化酶（PPO)是植物体内普遍存在的一种末端氧化酶，它催化酚类化合物形成醌和水，醌在经非酶促聚合形成深色物质，对外植体材料产生毒害作用，影响其生长分化，严重时导致其死亡。

7.防止褐变的措施 1.选择适宜的外植体 2. 预处理母株和外植体 3. 筛选适宜的培养基和培养条件 4. 添加褐变抑制剂和吸附剂 5. 连续转移

8.培养基的基本成分 1.水 2.无机营养成分 A大量元素（氮磷钾钙镁硫）B微量元素（铁硼锰锌铜钼钴氯）3.有机营养成分（碳水化合物、维生素、肌醇、氨基酸）4.植物生长调节剂 A生长素类（吲哚乙酸IAA 萘乙酸NAA 吲哚丁酸IBA 2，4-D等，活性强度2，4-D>NAA>IBA>IAA）B 细胞分裂素类 C其他类（赤霉素、脱落酸、多效唑）5.琼脂 6.活性炭与硝酸银 7.抗氧化物8.染色剂 9.抗生素

9.培养基的类型 1.高盐型培养基（MS培养基是使用最广泛的培养基。特点是无机盐浓度高，养分齐全，铵态氮和硝态氮含量高，比例合适，不需要添加更多的有机附加物，离子平衡情况较好，使用误差较小，利于愈伤组织的诱导和增值，能满足植物组织对矿物质营养的需求，适用于高需肥量植物或生长迅速的培养材料）2.高硝酸钾型培养基（对于喜钾、喜硝态氮或忌铵态氮的外植体材料而言比较适宜，配方有B5 和N6，前者特点是铵盐浓度较低，盐酸硫胺素浓度较高，对枇杷胚状体诱导效果更佳）3.中盐型培养基 4.低盐型培养基（无机盐浓度低，适用于生根培养，成熟胚胎培养或种质材料的保存）

10.培养基的制备 1.母液的配制和保存 2.培养基的配置（先将储存母液按顺序放好，将洁净的各种玻璃器皿、量筒、烧杯、移液管、玻璃棒、漏斗等放在指定位置。称量好所需的琼脂、蔗糖并加热溶解，然后按母液顺序，根据各种母液的倍数吸取相应的量。加完所有的培养基组分，继续加温并不断搅拌，待琼脂完全融化后定容。）3.PH的调节 4.培养基的分装与灭菌

11.灭菌方法 1.培养基的高压湿热灭菌 2.金属器械的灼烧灭菌 3.玻璃器皿及耐热用具的干热灭菌 4. 不耐热物质的过滤灭菌 5.室内空间的紫外线和熏蒸灭菌 6.一些物体表面的药剂喷雾灭菌 7.外植体的表面消毒

12.紫外线灭菌：利用紫外线的辐射作用，引起细菌蛋白质变性或核酸结构发生变化，导致生物大分子发生严重破坏而造成死亡。

13.熏蒸灭菌：用加热焚烧，氧化等方法，使得化学药剂变为气体状态，扩散到空气中，杀死空气和物体表明的微生物

14.外植体的接种程序 1.接种室的消毒 2. 器皿灭菌 3.材料的分离、切去和接种（接种具体步骤：操作人员穿戴好洁净的工作服、帽子、口罩后，用70%的酒精擦拭双手双臂，在超净工作台上切取经过消毒的外植体。较大的材料可用肉眼直接观察切离，较小的材料需要在双筒实体显微镜下操作。切取材料通常在无菌培养皿或灭菌纸上进行。将试管或三角瓶瓶口靠近酒精灯火焰，瓶口倾斜，将瓶口外部在火焰上旋转烧灼数秒，然后轻轻取下封口物。将瓶口在火焰上旋转烧灼后，用烧灼后冷却的镊子将外植体均匀接种在培养基上。茎尖、茎段应保持直立、先端向上接种，叶片材料可用插接，也可以平放于培养基表面，但平放时一般将叶背朝下，以利于对培养基的吸收。接种时动作要轻，以防气流中夹带细菌进入培养容

器造成污染。接种完毕后，将封口物在火焰上旋转数秒后封住瓶口，在封膜上注明接种植物名称，接种日期、处理方法等，以便日后观察比较。）

15.培养条件的影响 1.温度（大多数在20-30摄氏度，通常控制在25摄氏度左右。低于15℃或高于35℃都会抑制细胞、组织的增殖和分化，不利于培养物生长。2.光照（光效应主要表现在光照度、光照时间、光质等方面。一般培养室要求光照12-16h/d，光照度1000-5000lx。一般来说，黑暗条件利于细胞、愈伤组织的增值，但器官分化往往需要一定光照。不同光波长对器官分化也有一定影响）3.氧和其他气体（接种时避免把整个外植体全部埋入琼脂中，否则会造成窒息。培养基中氧浓度低于临界水平时，促进形成胚状体，氧浓度高于临界水平时，有利于形成根。培养过程中培养物释放的微量乙烯和高浓度二氧化碳，有时利于生长，有时不利于生长。）4.湿度（组织培养室内一般要保持70%-80%相对湿度以保证培养物正常生长。湿度过低造成培养基失水干枯，湿度过高造成杂菌滋长导致大量污染）5.培养基的PH在5.4-6.0 之间

第三章

植物细胞培养是指把植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞或细胞团作为材料进行离体无菌培养，使其形成单细胞无性系或再生植株的技术细胞分离的方法是机械法和酶解法

细胞悬浮培养是指将游离的植物细胞按一定的细胞密度，悬浮在液体培养基中不断搅动或摇动的培养方法

细胞悬浮培养的方法 1.分批培养，分批培养是指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，当培养物增值到一定量时，转接继代，建立起单细胞培养物 2.半连续培养，半连续培养是利用培养罐进行细胞大量培养的一种方式 3.连续培养，是指利用特质的培养基容器进行大规模细胞培养的一种培养方式（可分为两类，一种为封闭式，一种为开放式）悬浮培养细胞的同步化饥饿法，抑制法，采用植物细胞连续培养的发酵器系统诱导同步分裂

单细胞培养的方法 1.平板培养法，指将制备好的单细胞悬浮液按照一定的细胞密度，接种在薄层固体培养基上进行培养的方法 2.看护培养法，是指利用活跃生长的愈伤组织看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的培养方法 3.微室培养法，是指人工制造无菌小室，将单细胞培养在微室中的少量培养基中，使其分裂形成单细胞无性系的培养方法 4.条件培养法，是指合成培养基中的细胞或细胞培养物由于开始接种密度太低而不能分裂，可采用条件培养基进行培养的单细胞培养方法 5.纸桥培养法，是植物茎尖分生组织常用的方法，也可用于单细胞培养

影响细胞培养的因素培养基、细胞密度、植物生长调节剂和其他附加成分、培养基ph、二氧化碳浓度

第四章

原生质体指去除了细胞壁的裸露且具有活力的细胞，是一种优越的单细胞体系

原生质体分离的步骤 1.酶解材料准备2.材料预处理3.酶解4.原生质体纯化5.原生质体活力测定

酶解使用的酶 1.纤维素酶 2.果胶酶3.半纤维素酶4.崩溃酶

原生质体活力测定的方法1.目测法，在显微镜下观察原生质体的形态和流动性，以确定原生质体的活力2.FDA法 3.伊凡蓝法

常用的原生质体培养方法及比较1液体浅层培养操作要点：将原生质体的液体培养基在培养皿底部铺薄一层，封口后进行培养。优点：操作简单，对原生质体的损伤小，且易于添加新鲜培养基和转移培养物；缺点：原生质体分布不均匀，易发生粘连现象，难以跟踪观察某一个细胞的发育情况。2琼脂糖包埋培养操作要点：常用的固化剂是低熔点琼脂糖，将原生质体悬浮液与液化后冷却到30度的琼脂糖培养基均匀混合，然后将混合后的含有原生质体的培养基铺于培养皿底部，封口后进行培养。包埋不宜过厚，否则束缚细胞分裂且影响通气条件。优点:可以跟踪观察单个原生质体的发育情况，易于统计原生质体分裂频率，可提高原生质体分裂频率。缺点：混合时的温度掌握必须合适，温度偏高影响原生质体的活力，温度偏低琼脂糖凝固太快，原生质体不易混合均匀。3固液体双层培养基一般先在培养皿的底部铺一层琼脂糖固体培养基，再将原生质体悬浮液滴于固体培养基表面。优点：固体培养基中的营养物质可以缓慢释放到液体培养基中。缺点：不易观察细胞的发育过程。

原生质体融合：也称细胞融合，指不同种类的原生质体不经过有性阶段，在一定条件下诱导融合并培养再生植株的过程。

第六章

离体繁殖也称为微型繁殖或快速繁殖，是指通过无菌操作，将分离的植物体的一部分即外植体接种于培养基上，在人工控制的环境条件下进行培养，使其在较短时间周期内快速地再生出大量的完整植株的一套技术与方法

离体繁殖再生途径 1.腋芽萌发，腋芽萌发

又称器官型再生，是指由培养的顶芽或腋芽直接萌发形成小茎后，再诱导小茎生根而形成完整植株的过程。 2.体细胞胚胎发生，是指外植体（含单细胞）脱分化后形成类似于合子胚结构的胚状体或体细胞胚的现象。 3.不定器官的发生，器官发生是指外植体脱分化后形成愈伤组织，再由愈伤组织形成不定器官的现象（包括不定芽、不定根、同步不定根与不定芽形成三种途径）

离体繁殖的特点①繁殖速度快②占用空间小③周年生产④便于种质保存和交换⑤有利于无病菌苗的培育⑥有利于其他的相关科学研究

离体繁殖技术5个阶段阶段0：母株的选择和栽培管理1.阶段Ⅰ无菌培养体系建立。这一阶段的特征是使外植体植入培养基后不受微生物污染并能生存。选择合适的合适的外植体、外植体的消毒和诱导外植体脱分化是本阶段的关键问题 2. 阶段Ⅱ继代增殖阶段。阶段二的主要目的是通过来自阶段一的增殖体反复继代培养，获得所需数量的胚、芽或其他器官。在这一阶段中，增殖体的细胞发生迅速分裂，原有培养基中的水分及营养多已耗尽，细胞的有害代谢物也已在培养基中积累，因此必须转移至新的培养基中，而且间隔一定时期（一般3至4周）重新转接一次，即继代增殖（培养基、植物生长调节剂、培养条件和微生物污染是此阶段的主要影响因素） 3阶段Ⅲ生根成苗阶段。这个阶段的目的是使繁殖体能成功地移植到土壤中，是一种涉及芽苗生根、植株硬化以及从异氧状态到自然状态的启动过程。 4. 阶段Ⅳ.移栽成活阶段。试管苗的移栽是试管苗从异氧到自养的转变，是试管苗从一个无菌、弱光照、温度恒定和湿度饱和的稳定环境到一个有菌、自然光照、低湿等不稳定环境的过程，也是决定离体繁殖能否在生产实际中应用的最后一关。

人工种子是指将离体培养产生的繁殖体包埋在含有养分和保护功能的物质中，并在适宜条件下萌发的类似于天然种子的颗粒体

人工种子的结构和特点 1.人工种子的结构完整的人工种子由繁殖体、人工胚乳和人工种皮3部分组成。体细胞胚（或类似物）相当于天然种子的胚，是具有生命的物质结构。人工胚乳一般由含有维持体细胞胚萌发所需养分和刺激物质的胶囊组成。胶囊之外的包膜成为人工种皮 2.人工种子不仅像天然种子一样可以储存、运输、播种、萌发和长成正常植株，而且

还有许多独特的优点①可使在自然条件下不结实或种子昂贵的植物得以繁殖②固定杂种优势。人工种子在本质上属于无性繁殖，一旦获得优良基因型，可以保持杂种优势，多年使用而不需三系配套等复杂的制种过程③快捷高效的繁殖方式。人工种子可在实验室常年获得，并可以用生物反应器大规模生产④可认为控制植物的生长发育与抗逆性。人工胚乳除了含有供胚状体发育成植株所必须的营养物质外，还可以在其中加入除草剂、杀菌剂、农药、抑制休眠的物质及对生物生长有益的细菌等，使其具备抗逆性和耐储存性等优良特性，也可添加激素类物质以调节植物的生长发育⑤与试管苗技术比较，人工种子技术在理论上具有成本低、储藏运输方便、无玻璃化的缺陷，减少移栽驯化过程和生产周期短等优点⑥人工种子能大量的从人工授粉杂种和遗传工程植株中筛选出来的优良基因型，并为不育和不稳定的基因型提供一种繁殖方法⑦人工种子技术还可以成为植物抗虫、抗病和抗除草剂等基因工程成果转向生产的桥梁

体细胞胚的诱导及影响因素体细胞胚胎发生包含两个步骤1外植体在条件培养基上进行胚性细胞的增殖或克隆，诱导或孕育；2胚性细胞在诱导培养基上进行胚的发育。影响因素：1基因型：不同植物基因型在产生胚状体的能力方面有很大差别。2外植体：能够诱导产生体细胞胚的外植体是多种多样的，主要有胚性预决定外植体和胚性重决定外植体。3生长调节物质，诱发不同的外植体产生体细胞胚所需要的植物生长调节剂种类是不同的。4氮素和氨基酸还原态氮如硝酸铵在诱导体细胞胚的发生中很有效，而氧化态氮效果不太明显。5光照和其他因子，体细胞胚对光暗周期的要求因植物种类而异，缺糖或低糖条件下，体细胞胚不形成，高糖条件下，体细胞胚的分化常不超过原胚时期。此外还有活性炭的有无，矿物盐浓度，以及低温和辐射处理都会影响体细胞胚的发生，单位容器中接种的外植体数目，培养基中可溶性氧含量等也会影响体细胞胚发生的频率。

2人工种子包埋的方法：液胶法：将胚状体或小植株悬浮在一种黏滞的流体胶中直接播入土壤。2干燥法：将体细胞胚经干燥后再用聚氧乙烯等聚合物进行包埋的方法。3 水凝胶法：指通过离子交换或温度突变形成的凝胶包裹材料的方法。

3植物脱毒：指通过各种物理或化学方法将植物体内有毒病毒及类似病毒去而获得无病毒植株的过程。

4植物脱毒的方法：1热处理脱毒2茎尖培养脱毒3微体嫁接脱毒4抗病毒剂的应用5其他脱毒方法（花器官培养脱毒和珠心胚培养脱毒）

5获得无病毒苗的途径：1从现有的栽培种质中筛选无病毒的单株2采用一定的措施脱除植株体内的病毒。

6热处理脱毒的原理：热处理利用病毒类病原与植物的耐热性不同，将植物材料在高于正常温度的环境条件下处理一定时间，使植物体内的病原钝化或失去活性，而植物的生长受到较小的影响，或在高温条件下植物生长加快，病毒的增殖速度和扩散速度跟不上植物的生长速度而被抛在其后，植物的新生部分不带病毒。

茎尖培养脱毒的原理：由White提出的“植物体内病毒分布学说”虽然病毒侵入植物体后是全身扩展的，但不同的组织和部位，病毒的分布和浓度有很大差异。一般而言，病毒粒子随着植物组织的成熟而增加，顶端分生组织是不带病毒的。

7脱毒苗的鉴定：一脱毒效果的检测：1生物学检测（草本指示植物检测，木本指示植物检测）2血清学检测（免疫电镜技术，酶联免疫吸附分析技术，组织免疫印迹技术）3分子生物学检测（双链核糖核酸分析，核酸杂交技术，聚合酶链式反应）

8实验室的基本结构和功能：1准备室：进行一些常规的实验操作，如组织培养所用器具的清洗干燥和保存，培养基的配置和灭菌，同时摆放常用的仪器和设备2无菌操作室：进行植物材料的消毒，接种以及培养物的继代转移操作。3培养室：接种后的材料放在培养室里培养，使其分化生长。4资料室：存放与实验有关的书籍，资料，实验记录等。

香石竹茎尖培养：1、取材、消毒和接种从盆栽或温室中选取无病害、生长健壮的植株，取其侧芽，逐层剥去叶片，留顶部未展开的2~3对嫩叶，用带有洗涤剂的自来水冲洗干净，然后用纱布吸干水分，至于超净工作台上备用。对材料的消毒，首先用70％消毒30~60s,再用0.1％~0.2％的氯化汞溶液（可适当加入吐温—80）消毒8~10分钟，最后用无菌水冲洗8~10次。2、诱导培养香石竹茎尖剥离下来后，放在有合适生长调节剂的培养中才能成活，添加生长调节剂一般为生长素类和细胞分裂素类，培养基中才能成活，添加生长调节剂一般为生长素类和细胞分裂素类，培养基可以是固体培养基也可以是液体培养基。常用的固体培养基：MS＋BA0.2~0.5mg/L＋IAA0.1~0.2mg/L或MS＋KT0.5~1.5mg/L＋NAA0.2~0.5mg/L,培养条件为温度（24~26度)，光照为12~16h/d,光照强度2000~3000lx。经过10d左右的培养，大部分茎尖开始萌动，逐渐长大，20d左右即可长成一小丛植株，然后转入增殖培养基。

3、增殖培养香石竹是由丛生芽途径快速繁殖的，在茎尖诱导20~30d时从芽基部分分离单株，每株有1~2个茎节和2~3个叶片，增殖用的培养及为MS＋BA0.5~1.0mg/L＋IAA0.1~0.2mg/L ,温度可适当降到22度左右，这样可以防止香石竹试管苗出现玻璃化现象。

4、生根培养待香石竹试管苗继代增殖到一定数量以后，将增殖后的香石竹芽丛分离为单株，即把长2~3cm的嫩茎切下，然后进行生根培养，一般经过7~10d可形成带根系的再生植株。

5、驯化移栽生根培养12~21d后，即可长出3~5条根，株高3~4cm，这时就可以用于移栽。移栽前要先将试管苗连瓶一起放入温室内，2~3d后揭开瓶盖进行炼苗，炼苗时间一般为2~3d ，然后用镊子将生根苗轻轻夹出，用清水洗净根部附着的培养基，并将基部的老叶摘去，该过程中注意不要碰伤根系和折断小苗。用镊子将小苗轻轻放入经高温灭菌的栽培基质中，栽培基质要求质地疏松、透气透水性好，可以选用细粒珍珠岩、蛭石、木屑、草炭等按一定比例混合使用。幼苗栽植深度不宜太深，不宜浇水。

香石竹组织培养脱毒技术1、热处理脱毒香石竹的热处理脱毒采用的温度为36~42度，处理时间为5~10周，一般情况下，经过热处理的植株可以脱去病毒，但是由于不同病毒对于热处理的敏感性不同，有的病毒经过热处理可以被钝化，例如香石竹花叶病毒，而有的病毒则较难祛除，例如香石竹条斑病毒，有的病毒用热处理几乎不能去除，例如香石竹蚀环病毒。

2、茎尖培养脱毒很多不能由单独的热处理脱除的病毒，可以通过茎尖培养脱除。茎尖培养最关键是切取茎尖的大小。茎尖的大小不仅对脱毒效果有很大的影响，而且与茎尖培养的成活率有直接关系。

3、茎尖培养结合热处理脱毒单一的热处理或者茎尖培养脱毒方法各有利弊，二者结合使用则效果更好，因此在实际生产中，常常采用茎尖培养结合热处理脱除病毒。

4、茎尖培养结合病毒钝化剂脱除该方法在培养基中添加碱性的孔雀绿、2，4-D以及硫尿嘧啶等病毒抑制剂，可显著提高茎尖培养的脱毒率，但是由于病毒对于病毒抑制剂的反应活性不同，因此，在实际生产中不常用该方法。

香石竹组织培养脱毒苗的检测鉴定 1、直接观察法 2、指示植物鉴定法 3、抗血清鉴定法 4、电镜鉴定法

香石竹无病毒苗培育过程中存在的问题1、香石竹茎尖脱毒不彻底2、香石竹试管苗玻璃化及其预防3、香石竹试管苗丛生状变异

菊花一、外植体的选取与消毒接种1、以茎尖为外植体以茎尖做外植体时，一般取3cm

左右长的顶稍，去掉展开的叶片后，将选取的材料放入纱布袋中用自来水冲洗5min，在无菌条件下，用70％乙醇消毒30s，用无菌水冲洗两次后，用0.1％的氯化汞溶液消毒十分钟，经无菌水漂洗一次后，再用次氯酸钠处理五分钟，无菌水冲洗6~8次，切取0.3~0.5厘米的茎尖，垂直接种到培养基上。如果是脱毒，则在超净工作台上借助体视显微镜剥取两个叶原基、不大于0.5mm的茎尖，迅速接种到准备好的培养基上。2、以茎段为外植体茎段去叶，留一段叶柄。将材料在自来水下冲洗15min，在无菌条件下，用70％乙醇消毒30s，用无菌

水冲洗2次后，用0.1％的氯化汞溶液消毒8~10min ，在氯化汞溶液中每100ml可滴3~5滴吐温-20，再用无菌水冲洗8~10次，放在超净工作台上待用。3、以花序轴为外植体以花序轴为外植体时，选取即将开放、健康饱满的花蕾，用自来水冲洗5~10 min，在超净工作台上，用70％乙醇消毒30s，用无菌水冲洗两次后，用0.1％的氯化汞溶液消毒6~8min，再用无菌水冲洗8~10次。吸干花蕾表面的水分，剥去花序轴外层的花被，得到透镜状或半球形的花序轴，视其大小，切成小块儿进行接种。从花蕾上剥下的舌状花，管花，也可切成小块儿小段儿进行接种。4、以花瓣为外植体取菊花未开放的花蕾，自来水冲洗5min，在洗衣粉上清液中浸泡5min，再用自来水冲洗10min 。在无菌条件下加入75％乙醇灭菌30s，用无菌水冲洗一次后，在次氯酸钙溶液中浸泡8min，无菌水冲洗4~6次，再用 0.1％的氯化汞溶液浸泡5min，无菌水冲洗6~8次。在整个灭菌和清洗过程中，应不停地摇动瓶子，使材料充分与消毒液和清洗液接触。然后将材料放入无菌培养皿中，用解剖刀将花蕾切成4块，剪去花序轴和总苞，将分散未开放的花瓣接入培养基中。

蝴蝶兰离体培养（同大花惠兰）1、培养基及培养条件 2、原球茎的诱导蝴蝶兰可以

通过茎尖、茎段、腋芽、叶片、根尖等诱导原球茎3、原球茎的增殖及分化在原球茎形成后，于无菌条件下取出切成小块儿（>2mm），转接到新的培养基上，在同样的条件下培养，就能产生许多原球茎4、壮苗及生根培养将分化出的芽接入新鲜培养基上，经过三个月的培养，可以发育形成新的小植株。随后移入壮苗及生根培养基上。培养一个月后，一般可发育形成具有4条根，4片叶，生长健壮的植株。5、驯化移栽试管苗具有3~4条壮根时，可以移栽。先将培养瓶移出实验室，打开瓶塞，在室温下炼苗一周。出瓶时，洗去根部的培养基在0.1％的高锰酸钾溶液中浸泡5min后风干叶面水分，移植于浸湿的水苔、椰子壳等基质中。移栽后应保持较高的空气湿度，半个月后每周施肥一次，冬季适量升温，5个月左右可以上盆，一般培养2~3年即可开花。

植物组织培养实验基本步骤。。

植物组织培养实验基本步骤 一、母液的配置 1、MS大量元素母液的配制 将大量元素配制成10倍的母液，使用时再稀释10倍。按照配方表中用量依次分别称取扩大10倍的：NH4NO3 、KNO3 、KH2PO4 、 MgSO4·7H2O 、CaCl2·2H2O ，所有药品称取完毕后用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，最后定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 2、MS微量元素母液的配制 将微量元素配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别依次称取：MnSO4· 4H2O 、ZnSO4·7H2O 、 H3BO3 、KI 、CuSO4·5H2O 、CoCl2·6H2O ，用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，用容量瓶定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 3、MS铁盐母液配制 将铁盐配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：称

FeSO4·7H2O 和Na2·EDTA ，把FeSO4·7H2O和Na2·EDTA·2H2O分别置于200ml蒸馏水中，加热并不断搅拌使之溶解（磁力搅拌器，边加热，边搅拌）。保持加热，把FeSO4溶液慢慢倒入Na2·EDTA溶液中并不断搅拌，接近沸腾时停止加热，待溶液冷却后加蒸馏水到最终容积500ml，置于棕色细口瓶中，用力振荡1～2min，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名。在室温下避光保存一段时间令其充分反应后，再置于4℃冰箱中保存备用。 4、MS有机化合物母液的配制 将有机化合物配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：肌醇、维生素B1 、烟酸、甘氨酸、维生素B6 、蔗糖，用蒸馏水依次溶解并定容至500ml后，转入500ml 细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 二、植物激素的配置 常见激素：二氯苯氧乙酸（2，4－D）、萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚－3－丁酸（IBA）、激动素（6-糠氨基嘌呤、 KT）、6－苄氨基嘌呤（6－BA）、赤霉素（GA3）、 1、生长素类： （1）、生长素类在组织培养中的主要作用是：诱导细胞的分裂和根的分化，诱导愈伤组织

18知识讲解植物的组织培养技术

植物的组织培养技术 【学习目标】 1、指导植物组织培养技术的基本原理和基本技术。 2、掌握植物培养过程中使用的无菌技术（重点）。 3、掌握植物知识培养的基本过程及操作。 4、说出被子植物花粉发育的过程及花药例题培养产生花粉植株的两种途径。 5、说出花药离体培养的因素，学习话要例题培养的基本技术。 【要点梳理】 要点一、植物组织培养的基础知识【高清课堂：植物的组织培养技术 高清未发布 课题1：基础知识】 1、植物组织培养的基本过程： 离体的植物器官、组织或细胞，在培养了一段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化（去分化）。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫再分化。再分化形成的试管苗移栽到地里，可以发育成完整的植物体。植物组织培养的过程可以简要归纳为： 离体的植物器官、组织或细胞（外植体）???→脱分化愈伤组织???→再分化根、芽—→植物体。 2、植物组织培养的理论基础：细胞的全能性 要点诠释： 细胞的全能性与植物组织培养间的关系 ①细胞的全能性是植物组织培养的理论基础。 植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。植物细胞只有脱离了植物体，在一定的外部因素作用下，经过细胞分裂形成愈伤组织，才能表现出全能性，由愈伤组织发育、分化出新的植物体。 ②高度分化的植物细胞仍具有全能性的原因是所有体细胞均来自受精卵的有丝分裂，均有和受精卵相同的一整套遗传信息。 ③植物体的组织、器官的形成，是基因选择性表达的结果，其细胞的全能性受到限制，在离体状态下，其全能性才容易得以表达，表达的过程须经过脱分化和再分化。 ④容易进行营养繁殖的植物细胞，其全能性容易表达，易进行植物组织培养。 要点二、影响植物组织培养的因素 1、无机营养 （1）大量元素：除碳（C ）、氢（H ）、氧（O ）外，还有氮（N ）、磷（P ）、钾（K ）、钙（Ca ）、镁（Mg ）、硫（S ）等元素。 （2）微量元素：包括铁（Fe ）、铜（Cu ）、钼（Mo ）、锌（Zn ）、锰（Mn ）、钴（Co ）、硼（B ）和碘（I ）等。 2、有机营养 （1）维生素类：植物组织培养中经常使用维生素C 、维生素B 1（盐酸硫胺素）、维生素B 6（盐酸吡哆醇）、维生素H （生物素）、叶酸和烟酸等，一般使用浓度为0.1～10 mol ／L 。 （2）氨基酸：有甘氨酸、丝氨酸、酪氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、水解酪蛋白（CH ）和水解乳蛋白（LH ）等，是重要的有机氮源。 （3）有机添加物：是一些成分比较复杂，大多含氨基酸、激素、酶等的复杂化合物，它们对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用。 3、植物生长调节物质 植物生长调节物质是培养基中的关键物质，对植物组织培养起着重要、明显的调节作用。植物生长调节物质包括生长素、细胞分裂素及赤霉素等。

植物组织培养试题与答案(集合版)

植物组织培养练习题 1.植物组织培养：指要人工控制的条件下，将植物体的任何部分，或器官、或组织、或细胞， 进行离体培养，使之发育形成完整植物体。所谓人工控制的条件，即营养条件和环境条件； 植物体的任何一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。 2.愈伤组织培养：将外植体接种在人工培养基上，由于植物生长调节剂的存在，而使其细胞 脱分化形成愈伤组织，然后通过再分化形成再生植株。 3.外植体：植物组织培养中的各种接种材料，包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质 体等。 4.脱分化：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象。 5、接种：把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞，转放到无菌培养基上的 全部操作过程。 6、褐变：外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类 物质，这种致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色，而且还会抑制其他酶的活性，严重影响外植体的脱分化和器官分化，最后变褐而死亡的现象。 二填空 植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。 2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。 3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、单倍体育种、种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。 4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快速繁殖和脱毒培养两种类型。 5、一般组织培养的几道工序如下：培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和高压灭菌；无菌操作——材料的表面灭菌和接种，培养；试管苗的驯化、移栽与初期管理。 6、在进行植物组织培养室设计时，其设计应包括洗涤室、准备室、灭菌室、无菌操作室、培养室、细胞学实验室、摄影室等分室，另加驯化室、温室和大棚。 7、培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、PH。 8、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。 9、细胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 10、玻璃化现象是指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。

2010-2014植物组织培养高考题汇编(含详解)汇总

1.（2014广东卷）（16分）铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下： 在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图17所示，请回答下列问题： ⑴选用新生营养芽为外植体的原因是，诱导外植体形成PLBs的过程称。 ⑵与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在，，。 ⑶脱落酸（ABA）能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题： ①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基后按比例加入。②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为。 ③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。

【答案】（1）细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs（2分）；细胞的脱分化（2分）（2）生长起始快（2分），快速生长时间较长（2分）；PLBs产量较高（2分）；（3）①灭菌、冷却（2分）；②75（2分）；③PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大（3分） 【解析】（1）新生营养芽分裂能力强，全能性容易表达；根据题干可知，PLBs类似愈伤组织，外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。（2）据图分析，光照下PLBs的重量高于黑暗条件下，原因可能是光照有利于细胞增殖、叶绿体的形成和进行光合作用制造有机物。（3）①由于ABA受热易分解，所以各种液体培养基灭菌后，冷却，再加入不同浓度的ABA ②根据题干可知，实验50天完成，每10天取样，需要取样5次，4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复，因此每次取样需要记录15个样品中的数据，共需要测定样品数75 ③适量的ABA可提高生物碱产量，当样品的平均值最大时，所对应的ABA浓度和时间为最适。 2.（2014江苏卷）（9分）为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题： （1）外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为。 （2）在愈伤组织悬浮培养时，细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如右图所示。细胞干重在12d后下降的原因有；培养液中蔗糖的作用是、。 （3）多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经处理，会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目，压片前常采用纤维素酶和酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞（2n）经诱导处理后，观察到染色体数为8n的细胞，合理的解释是、。 （4）为了更好地获得次生代谢产物，生产中采用植物细胞的固定化技术，其原理与酵母细胞固定化类似。下列说法正确的有（填序号）。 ①选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋②必须在光照条件下培养

《植物组织培养》综合复习题

植物组织培养综合测试题 一、填空题（每空0.5分） 1. 植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、__________、__________等几种类型. 2. 在分离原生质体的酶溶液内，需要加入一定量的_______其作用是保持原生质体膜的稳定，避免破裂. 3. 1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物_______的理论概念；1943年White提出植物细胞“_________”学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。 4. 用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_________℃的温度范围内，而若用它高温干燥灭菌则需在_________℃的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是_________℃. 5. 细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__________和__________的能力。

6. 1962年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__________培养基，其特点是__________浓度较高，且为较稳定的__________。 7. 7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进__________的生长，这时__________占主导地位；比值高促进__________的生长，这时__________占主导地位. 8. 植物组织培养按培养的方式分为_______培养和_______培养. 9. 组织培养的特点是：_______、_______、_______. 10. 1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得_________，这促进了花药和花粉培养的研究。 11. 在组织培养中，不耐热的物质用__________法灭菌，而培养基常用__________法灭菌. 12. 6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值__________促进根的生长，这时__________占主导地位；比值__________促进芽的生长，这时__________占主导地位。 13. 在组织培养中，非洲菊是靠__________的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以 __________的方式进行快繁的。

植物组培自测题与参考复习资料(简)

第1章复习测试题 二、填空题 1．根据外植体的不同，一般可以将植物组织培养分为：植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养和原生质体培养。 2．在植物组织培养中，外植体脱分化后，再分化形成完整植株的途径有两条：一是器官发生途径，二是胚状体途径。 3．通过器官发生再生植株的方式有三种：第一种最普遍的方式是先分化芽，再分化根；第二种是先分化根，再分化芽，这种方式中芽的分化难度比较大；第三种是在愈伤组织块的不同部位上分化出根或芽，再通过维管组织的联系形成完整植株。 4．体细胞胚发生的途径可分为间接途径和直接途径。 5．植物组织培养的整个历史可以追溯到19世纪末和20世纪初。一个多世纪来，植物组织培养的发展大致可以分为探索、奠基和迅速发展三个阶段。 6．在Schleiden和Schwann所发展起来的细胞学说推动下，1902年德国植物生理学家G．Haberlandt提出了细胞全能性的设想，并成为用人工培养基对分离的植物细胞进行培养的第一人。 7．White、Gautheret和Nobecourt在1939年确立的植物组织培养的基本方法，成为以后各种植物组织培养的技术基础，他们三人被誉为植物组织培养的奠基人。 8．1958年英国人Steward等将胡萝卜髓细胞培养成为一个完整植株，首次通过实验证明了植物细胞的全能性，成为植物组织培养研究历史中的一个里程碑。 9．1960年Cocking等人用酶分离原生质体获得成功，开创了植物原生质体培养和体细胞杂交工作。同年Morel培养兰花的茎尖，获得了快速繁殖的脱毒兰花。其后，国际上相继把组织培养技术应用到兰花的快速繁殖上，建立了“兰花工业”。 10．花药培养在20世纪70年代得到了迅速发展，获得成功的物种数目不断增加，其中包括很多种重要的栽培物种。烟草、水稻和小麦等的花培育种在我国取得了一系列举世瞩目的成就。 三、是非题 （×）1．从理论上说，所有的植物细胞与组织材料都能培养成功，其培养的难易程度基本相同。 （√）2．愈伤组织是一种最常见的培养类型，因为除了茎尖分生组织培养和少数器官培养外，其它培养类型都要经历愈伤组织阶段才能产生再生植株。 （√）3．在组织培养中可采用愈伤组织诱变、花粉培养诱变等方法来进行植物育种等。 （×）4．单倍体育种已成为改良植物抗病、抗虫、抗草、抗逆性、品质等特性的新的重要手段。 （√）5．利用植物组织或细胞大规模培养，可以从中提取所需的天然有机物，如蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱、天然色素以及其它活性物质。 四、选择题 1．在A中培养物生长过程中排出的有害物质容易积累，由此造成自我毒害，所以必须及时转移。

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告 Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020

院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号 姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。 植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件

把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加

植物组织培养的应用及发展前景修订稿

植物组织培养的应用及 发展前景 集团档案编码：[YTTR-YTPT28-YTNTL98-UYTYNN08]

植物组织培养技术应用及进展 摘要：本文综述了植物组织培养理论的发展，重点论述其再脱毒、快繁、育种与有机化合物工业生产以及种质资源的保存等方面的应用，并对应用的前景作简单的展望。 关键词:植物组织培养；应用；进展 中图分类号： 1.理论起源 19世纪30年代，德国家施莱登和德国动物学家创立了细胞学说，根据这一学说，如果给细胞提供和生物体内一样的条件，每个细胞都应该能够独立生活。1902年，德国植物学家哈伯兰特在的理论是植物组织培养的理论基础。1958年，一个振奋人心的消息从传向世界各地，美国植物学家斯等人，用韧皮部的细胞进行培养，终于得到了完整，并且这一植株能够开花结果，证实了哈伯兰特在五十多年前关于细胞全能的预言。 植物组织培养的简单过程如下：剪接植物器官或组织——经过（也叫去分化）形成愈伤组织——再经过形成组织或器官——经过培养发育成一颗完整的植株。 植物组织培养的大致过程是：在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，用纤维素酶与果胶酶处理用以去掉细胞壁，使之露出原生质体，然后放在适当的人工上进行培养，这些器官或组织就会进行，形成新的组织。不过这种组织没有发生分化，只是一团薄壁细胞，叫做。在适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下，愈伤组织便开始分化，产生出植物的各种器官和组织，进而发育成一棵完整的植株。 植物组织培养即植物无菌培养技术，又称离体培养，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官如根、茎、叶、茎尖、花、果实等）组织（如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等）或细胞（如大孢子、小孢子、体细胞等）以及,在无菌和适宜的人工培养基及光照、温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株的学科 2.植物组织培养发展简史 植物组织培养是20世纪30年代初期发展起来的一项生物技术。它是在人工配制的培养基上，于无菌状态下培养植物器官、组织、细胞、原生质体等材料的方法。 植物细胞的全能性是植物组织培养的理论基础。20世纪初，曾有人提出能否将植物的薄壁细胞培养成完整植株研究者从胡萝卜根的韧皮部取下一块组织，并在液体培养基中培养，使其分化出了愈伤组织，从愈伤组织又得到胚状体，胚状体转移到固体培养基上继续培养后，获得了完整的胡萝卜试管植株。经过栽培，此植株能够正常生长并开花结果，其种子繁衍出来的后代与正常植株的种子所繁衍出的后代别无二致。根据此实验可以得出以下结论：即不经过有性生殖过程也能将植物的薄壁细胞培养出与母体一样的完整植株。由于植物的每个有核细胞都携带着母体的全部基因，故在一定条件下，它们均能发育成完整植株，这就是所谓的植物细胞全能性。

植物组织培养试题

农业生物技术第二章植物组织培养试卷 班级___________ 姓名___________ 得分______________ 一、单项选择题（60） 1．植物组织培养是（） A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织B．愈伤组织培育成植株 C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体 D．愈伤组织形成高度液泡化组织 2．由于培养物脱离母株在试管内培养,故将植物组织培养又叫（） C．器官培养 D．离体培养 A.初代培养 B.继代培养 3．细胞形态和功能发生永久性变化过程称为（） A.分生 B.分化 C．脱分化 D．再分化 4．对外植体进行的第一次培养称为（） A.初次培养 B.器官培养 C．初代培养 D．继代培养 5．在人工培养基上通过诱导外植体而形成的一团无序的薄壁细胞团叫（） A.分生组织 B.保护组织 C．同化组织 D．愈伤组织 6．大量生产实践证明,通过（）可以有效地去除植物体内的病毒,获得无毒种苗. A.茎段培养技术 B.茎尖脱毒技术 C．组织快繁技术 D．转基因技术 7．植物体因受伤或生理上分离而失掉组织或器官后,恢复或复制失去的部分,形成新的完整植株的能力,称为（） A.植物细胞全能性 B.植物的极性现象 C．植物的再生功能 D．细胞的分化 8．下列关于细胞全能性叙述正确的是（） A.每个生物体内的所有细胞具有相同的功能 B.生物体内任何一个细胞可完成该生物体全部功能 C．生物体每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 D．生物体每个细胞都经过产生、分裂、生长、衰老、死亡的全过程 9．构成胚的所有细胞几乎都保持着未分化的状态和旺盛的分裂能力，称为（） A.脱分化细胞 B.成熟细胞 C．胚性细胞 D．再分化细胞 10．愈伤组织表面和内部形成很多胚状体，称为（） B.胚泡C．体细胞胚D．合子胚 A.胚囊 11．植物再生功能的产生是由于植物受伤组织产生了（） A.细胞分裂素 B.赤霉素 C．创伤激素 D．生长素 12．草莓茎尖在4℃黑暗条件下，可以保持生活力达（）年之久 A.4 B.5 C．6 D．8 13．脱毒培养指的是（） A.种苗消毒后的培养 B.种苗及土壤消毒后的培养 D．无毒茎尖的培养技术 C．外植体消毒后的培养

植物组织培养知识点归纳教学提纲

第一章 1、植物组织培养：是指在离体条件下，利用人工培养基对植物的器官、组织、细胞、原 生质体等进行培养，使其长成完整植株 2、外植体：在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物上提取下来的、接种在培养基上的 无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。 3、愈伤组织：指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 4、应用 一、农业上的应用 1. 种苗快速繁殖(rapid propagation) 2.无病毒苗(virus free)的培养 3.在育种上的应用(breeding) （1）倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显； （2）克服远缘杂交的不亲合性和不孕性（胚培养）； （3）保存种质 （4）创造变异 二、在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。用于基因工程技术创造植物新种质。用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。 三、利用组织培养材料作为植物生物反应器 第二章 1、细胞全能性（Totipotency）：指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成一个完整植 株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。 2、细胞分化（cell differentiation）：指导致细胞形成不同结构，引起功能或潜在的发育方式 改变的过程。 3、脱分化（Dedifferentiation）：指离体条件下生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构 和功能而恢复分生状态，形成无组织结构细胞团或愈伤组织 的过程。 4、再分化（Redifferentiation）：指脱分化的细胞重新恢复分化能力，形成具有特定结构和功 能的细胞、组织、器官甚至植株的过程。 5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施 一、污染及防治： 1、真菌污染后，如果已形成孢子，则必须经高压灭菌后扔掉。但若是细菌污染，只 要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可使用。 2、用抗生素等杀菌药剂的处理，会影响植物材料正常生长。 二、褐变及防止 （1）选择合适的外植体 （2）合适的培养条件 （3）使用抗氧化剂 （4）连续转移 三、玻璃化问题及其防止

植物组织培养技术所有填空题

植物组织培养技术所有填空题 填空题(每空1分，共20分) 1、去除植物病毒的主要方法是_组培法___和_理化法___两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。 2、原生质体的融合可实现__ 体细胞___的杂交，其融合的方式分为_自然融合__和_人工诱导融合_两类。 3、在组织培养中，非洲菊是靠__丛生芽 ____的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以__原球茎增殖_的方式进行快繁的。 4、单细胞培养的方法主要有 --看护培养--、 ---微室培养--- 及 ---平板培养----。 5、在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以 __0.3—0.5___mm、带__1—2__个叶原基为好。 6、植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为__ _光___培养和__ _暗__培养。 7、细胞的再分化有 ----器官发生--- 和 ---体胚发生---- 两种形式。 8、连续培养有 ----浊度恒定法---- 和----化学恒定法---- 两种方法。 9、通过茎尖培养脱毒苗的过程中，切取茎尖的大小与其成活率成__正比 __，而与脱毒效果成_反比 __。 10、一个已停止分裂的成熟细胞转变为_____未分化_____状态，并形成__未分化的愈伤组织___的现象称为"脱分化"。 11、植物的胚胎培养，包括____胚__培养、__ _胚乳____培养、____胚珠___培养、子房培养以及离体授粉的。

12、在组织培养中，IAA、ZT 和GA 必须用____过滤灭菌__法灭菌，而接种室空间采用_ __紫外线照射_或__甲醛熏蒸__法灭菌。 13、幼胚培养时，其发育过程有__ __早熟萌发__、_ _呸性发育____、_ __形成愈伤___三种方式。 14、原生质体的分离有__ _机械法___和__ 酶降解法____两种方法。 15、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为_普通茎尖培养__培养和__茎尖分生组织__培养两种类型。 16、花药培养是__ _器官__培养，花粉培养属于__ 细胞___培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成_单倍体植株_。 17、不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 ___ClO-_______来杀菌的;升汞是靠__重金属________来达到灭菌目的。 18、一个已停止分裂的成熟细胞转变为__ 分生__状态，并形成_ 未分化的愈伤组织__的现象称为"脱分化"。 19、White 培养基__ _无机盐____浓度低，适合生根培养。 20、在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成__ ___正比_____，而与脱毒效果成___ _反比_____。 21、由胚乳培养可以获得__ _单___倍体植株，经秋水仙素处理可以获得___二_倍体植株。 22、使单倍体植株染色体加倍的途径主要有 ---自然加倍--、 ----人工加倍---- 和 ---通过愈伤组织再生加倍。。 23、细胞悬浮培养有 ----成批培养--- 和 ----连续培养------ 两种类型。

植物组织培养实验报告

如对你有帮助，请购买下载打赏，谢谢！ 院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件 把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加入复杂的有机成分；微量元素种类全，浓度高。这类培养基是目前使用最广泛的培养基。 6.生长调节物质 包括天然植物激素额人工激素类似物。植物激素是一类植物自身合成、同时对其生长发育具有重要调节作用的有机化合物。生长调节物质对于离题培养中的细胞分裂分

植物组织培养重点

器官培养：即离体器官的培养。植株培养：对完整植株材料的培养。 组织或愈伤组织培养:是对植物体的各部分组织进行培养或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养，二者均通过再分化诱导形成植株. 细胞培养:是对由愈伤组织等进行液体振荡培养所得到的能保持较好分散性的离体单细胞或花粉单细胞或很小的细胞团的培养. 原生质体培养:是用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养。 初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程植物组织培养：是指通过无菌操作分离植物体的一部分（外植体），接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。 愈伤组织：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在植物体切面上产生。 外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。 植物细胞全能型：任何具有完成细胞核的植物细胞，能拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。 脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。 再分化:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。胚状体：在离体过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。 褐变现象：指在接种后，其表面开始褐变，有事甚至会使整个培养基褐变的现象。 继代培养材料的玻璃化：当植物材料不断的进行离体繁殖时，有些培养物的嫩芽，叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常成为玻璃化。 人工种子：通过植物组织培养的方法获得的具有正常发育能力的材料，外被有特定的物质，在适宜的条件下可以发芽成苗的植株幼体。 植板密度：形成的细胞团数/植板的细胞总数×100% 对称融合：双方原生质体均带有核基因组和细胞质基因组的全部遗传信息。 非对称融合：指一方亲本的全部原生质与另一方亲本的部分核物质及细胞质物质重组产生不对称杂种。 继代培养：是初代培养之后的连续数代的扩繁培养过程。目的：繁殖出相当数量的无菌苗，最后达到边繁殖边生根的目的。 细胞悬浮培养：将游离的植物细胞按一定的细胞密度悬浮在液体培养基中进行培养的方法。根据培养基的类型分为: 固体培养（琼脂、卡拉胶等固化），半液半固体培养(固液双层)，液体培养（震荡、旋转或静置培养）。 液体培养的优点：不使用凝固剂，节约生产成本，营养吸收充分；操作过程简化。 组织培养按培养对象可分为：植株培养，器官培养，组织培养，细胞培养，原生质体培养。 植物组织培养一般过程:初代培养，继代培养，生根培养，驯化移栽。 植物组织培养的特点：培养条件可以人为控制，生长周期短，繁殖率高，管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。 组织培养技术在农业生产上的应用主要体现于以下几个方面：快速繁殖优良苗木；获得脱毒苗；育种上应用；工厂化育苗。 1902年，德国著名的植物生理学家和植物学家哈伯兰特提出了高等植物细胞全能性。1958年，美国植物学家斯图尔德等人，用胡萝卜根韧皮部的细胞进行培养，得到了完整植株，证明了细胞全能性。 怀特于1943年发表了《植物组织培养手册》专著，使植物组织培养开始成为一门新兴的学科。 腺嘌呤与生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一，这一比例高时，产生芽，这一比例低时，则形成根，相等则不分化。 标准的组培实验室包括：1、洗涤室，器具的洗涤，干燥和消毒，2、配置室，进行药品的保存，配置，消毒，分装等，3、灭菌室，培养基及使用器具的消毒与灭菌，4、接种室，进行材料的接种，内置超净工作

植物组织培养技术考试复习题

植物组织培养技术 考试复习题 一、填空题 1、组织培养的理论依据是：植物细胞的全能性。 2、根据培养的外植体材料不同，可将植物组织培养分为以下几种类型：愈伤组织培养、器官培养、胚培养、 细胞培养、原生质体培养、遗传转化。 3、植物组织培养实验室一般划分为洗涤室、培养基配置室、缓冲室、无菌接种室、培养室、观察室、驯化室等分室，其中植物组织培养实验室对无菌条件要求最严格的区域是无菌接种室。 4、培养基成分主要包水分、无机盐类、有机营养成、植物生长调节物质、天然物质、 pH 、凝固剂。 5、目前应用最广泛的组培基本培养基是 MS培养基。 6、培养基最常用的碳源是糖类物质，使用浓度在1%-5% 常用 3%。 7、培养基中加入活性炭的目的：减少外植体的褐变。 8、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向，其比值高则有利于根的形成；其比值低则有利于芽的形成。 9、一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为"__脱分化__" 10、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行(高压蒸汽 )灭菌，而要进行过滤方法灭菌。 11、确定花粉发育时期最简捷有效的方法是压片镜检法。

12、液体培养基和固体培养基最主要的区别是：固体培养基中添加了琼脂粉，而液体培养基一般不添加。 13、细胞悬浮培养的方法有分批培养和连续培养。 14、外植体灭菌常用的消毒剂是酒精，使用浓度一般为 70—75％。 15、具有防止褐变作用的维生素是抗坏血酸（维生素c）。 16、常用防止褐变的试剂有有机酸、硫代硫酸钠。 17、组培中按照污染的对象分，常见的污染类型有细菌性污染、真菌性污染。 18、在使用超净工作台进行无菌操作前，应先将借种器械放进超净工作台，并打开紫外线灯和风机组工作进行消毒20分钟左右。 19、配制培养基调节pH值时常用氢氧化钠溶液和稀盐酸溶液。 20、某溶液在使用前已配制成100倍的母液，在使用时，若需要配制1/2 L的培养基，则需要吸取母液的量是 5ml 。 21、原球茎是兰科植物特有的一种快繁方式。 22、组织培养植株的再生途径有两条，分别是：器官发生途径和胚胎发生途径。 23、一般进行外植体培养时，须诱导形成新的分生组织，即形成愈伤组织。 24、在使用完移液枪后，应注意调回至该移液枪最大量程。 25、植物组织培养快速繁殖技术的基本过程包括材料的初代培养、继代培养、生根培养、驯化培养。

《植物组织培养》试题及答案教学教材

试卷编号NO： 高等函授教育《植物组织培养》试题 学号：姓名： 一名词解释：（10*2分=20分） 1、植物细胞组织培养 2、细胞全能性 3、脱分化 4、外植体 5、试管苗驯化 6、间接不定芽发生 7、双极性 8、微体嫁接 9、人工种子 10、体细胞无性系变异 二填空：（30*1分=30分） 1、目前植物组织培养应用最广泛的方面是 和。 2、由脱分化的细胞再分化出完整植株有两种途径，一种叫做，另一种叫做。 3、培养用具的常用灭菌方法有、、 。 4、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行，而要进行。 5、一般来说，黑暗条件下有利于的增殖，而往往需要一定的光照。 6、植物离体授粉技术通常包括、、 三个方面。 7、一般液体培养的继代时间较短，继代一次；而固体培

养继代时间可以长些，继代一次。 8、外植体器官发生的三种途径包括、、。 9、从再生植株倍性来看，小孢子培养通常产生植株，胚 培养通常产生植株，通常产生三倍体植株。 10、脱毒苗鉴定与检测的主要方法有、、 、。 11、在生长素中，对于许多作物花粉的启动、分裂、形成愈伤组织和胚状体起着决定性作用，但是对却有抑制作用。 12、用平板培养法培养单细胞或原生质体时，常用 来衡量细胞培养效果。 13、用药剂处理是诱导染色体加倍的传统方法。 三计算题（1*10分=10分） 某培养基的配方是MS＋BA 2.0mg/L＋NAA 0.5mg/L＋2.5%蔗糖＋0.7％琼脂粉。MS母液的浓度分别是：大量元素２０倍，微量元素500倍，铁盐100倍，有机物５０倍；BA母液浓度1.0 mg/ml ，NAA母液浓度0.1mg/ml。要配制400ml 该培养基，需要吸取各种母液各多少ml？分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克？（要求写出计算步骤）四简答题（5*5分=25分） 1、造成组织培养过程中发生污染的原因有哪些？如何有效控制污染？ 2、简述外植体消毒的一般步骤。

植物组织培养实验参考答案9

植物组织培养实验复习题 一、名词解释 1、大量元素:指含量占生物总重量万分之一以上的元素，包括C、H、O、N、P、S、K、C、Mg等。 2、微量元素:含量占生物总重量万分之一以下的元素。 3、植物生长调节剂:人工合成的对植物的生长发育有调节作用的化学物质。 4、外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官 5、细胞全能性：植物体的每个细胞都含有该植物全部的遗传信息。 6、基础培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人工配置的营养基质。 7、愈伤组织:人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团不定形的疏松排列的薄壁细胞。 8、褐变:植物组织中多酚氧化酶被激活，使酚类物被氧化成醌类物，可抑制其他酶活性，毒害外植体。 9、茎尖脱毒:茎尖分生区的病毒传播速度很慢，利用茎尖组培获得无病毒苗，来达到脱毒的目的。 10、不定芽：凡从叶、根或芽节间或是离体培养的愈伤组织上等通常不形成芽的部位生出的芽。 11、污染率：污染数除以接种数，再乘以100%。 12、诱导率：愈伤数除以未污染数，再乘以100%。 13、成活率：成活数除以未污染数，再乘以100%。 14、接种：将表面消毒的外植体转接到无菌的培养基上的过程。 15、消毒：消灭材料上的病菌（不损伤植物材料）。 16、灭菌：利用物理或化学的方法，达到组织培养所学的无菌环境。 17、母液：欲配培养液的浓缩液。 18、无病毒苗：指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要危害病毒在植物内的存在表现为阴性反应的苗木。 19、植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，培养在无菌培养基上和人工控制的环境中，使其生长、分化、增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。 20快速繁殖：采取培养基配制，材料灭菌，无菌培养，幼苗转移到苗床，成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式 21、继代培养：继代培养是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已经积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上的培养方式。 22、生根培养：将长到一定长度的微枝（>10mm）转移到生根培养基上培养。 23、玻璃化现象：试管苗的茎叶变成透明水渍状，生长畸形，增殖系数明显下降，难以诱导生根，即使诱导生根，其根系质量极差，移栽成活率极低。 24、暗培养： 25、液体培养：将所需培养物的悬浮液在液体培养基中培养的方法。 26、脱分化：一个成熟细胞回复到分生状态或胚性细胞状态的现象。 27、分化：由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变或发育方式改变的过程。 28、热处理脱毒：利用高温下使植物组织中的病毒部分钝化或完全失去活性的方法。 1 / 6 29、微尖嫁接技术：把极小（<0.2mm）的茎尖作为接穗嫁接到实生砧木上（无菌种子培养获无菌

植物组织培养复习重点

组培复习材料 一、名词解释 1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。 2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。 3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。 4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。 5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。 6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。 7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。—— 8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。） 二、简答题 1、MS培养基特点。 答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。目前应用最广泛。 2、植物组培生产特点。 答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点； ②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；