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细胞工程学专业复习资

细胞工程学专业复习资
细胞工程学专业复习资

绪论

一.细胞工程(Cell Engineering):(定义)是应用细胞生物学和分子生物学方法,借助工程学的实验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性,以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。

分类(包括):(填空)植物细胞工程和动物细胞工程

植物细胞工程:(定义)以植物细胞组织为基本单位,在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作,使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而改良品种或创造新物种,或加速繁殖植物新个体,或获得有用物质的过程。

动物细胞工程:(定义)是根据细胞生物学及工程学原理,定向改变动物细胞内的遗传物质从而获得新型生物或特种细胞产品的一门技术。

二.(填空)细胞学说的提出:施旺,施莱登(1838年)

三.1902年,H aberlandt提出了细胞全能性学说。

第一章基本技术

一.湿热灭菌:103-137kPa(121-126°C),15-30min.

二.干热灭菌:利用烘箱加热到位60-180°C

三.培养基基本成分:无机盐(大量元素,微量元素),有机成分(激素,植物生长调节剂),水

常用有机成分:糖类(蔗糖),维生素,肌醇,腺嘌呤,氨基酸

激素:生长素(根),细胞分裂素(芽),赤霉素(细胞伸长)

四.基本培养基种类:MS,B5,N6,White(P26)

(1)高盐平衡培养基:MS培养基、LS培养基、BL培养基、BM培养基和ER培养基。特点:无机盐浓度较高,元素间的比例适当,离子平衡性好,具有较强的缓冲性;营养丰富;微量元素种类全,浓度高。

(2)高硝态氮培养基:B5培养基,N6培养基及SH培养基等。特点:硝酸钾的含量高,氨态氮的含量低,含有较高的盐酸硫胺素。

(3)中盐培养基:H培养基、Nitsch培养基、Miller培养基和Blaydes培养基。特点:大量元素无机盐约为MS的一般,微量元素种类减少而含量增高,维生素种类比MS多。

(4)低盐培养基:White培养基、WS培养基、HE培养基、改良Nitsch培养基及HB培养基等。特点:无机盐含量低,有机成分含量相对也很低。

五.培养基配制:1000ml母液需100ml大量元素(10*),10ml微量元素(100*)……

1 培养基母液配制

无机盐按大量元素、微量元素和铁盐3部分分别配制。大量元素一般配制成(10-20)×母液,微量元素和铁盐则配制成(100-200)×母液。有机成分最好单独配制。配好的母液需贮存于

2-4℃冰箱中。

植物激素使用的浓度很低,因此,一般分别配制成0.1-1mg/L浓度的溶液。

2 培养基制备

制备培养基时是根据实际需要配制,首先按大量元素、微量元素、铁盐及有机成分的顺序,依次吸取各母液的需要量,加入一适当体积的烧杯或其它配制培养基的容器中,再加入适当体积的蒸馏水,并称取相应量的蔗糖放入其中溶解,调节pH值,加入琼脂,加热使其完全融化,最后用蒸馏水定容并分装。

六.外植体:指用于离体培养的活的植物组织,器官等材料。

三种来源:1.生长在自然环境下的植物 2.在温室控制环境条件下生长的植物 3.无菌环境下培养的植物(最优)。

第二章细胞全能性与形态发生

一.细胞全能性:(定义)一个细胞所具有的产生完整个体的固有能力称之为细胞的全能性。细胞全能性的表达是通过细胞脱分化和再分化实现的,在大多数情况下,脱分化是细胞全能性表达的前提,再分化是细胞全能性表达的最终体现。

二.细胞脱分化(cell dedifferentiation ):(定义)培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。

分化细胞脱分化分生细胞再分化分化细胞

静止细胞启动分裂是分化细胞成功脱分化的重要标志。

蛋白体的出现和细胞质密度增加被认为是细胞开始脱分化的标志。

三.细胞分化(Differentiation):(定义)是指导致细胞形成不同结构,引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。

四.极性(polarity):(定义)是指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。

五.激素是离体培养条件下调控细胞脱分化和再分化的主要因素。

先用生长素处理,后用细胞分裂素处理,有利于细胞分裂而不利于细胞分化;反之,则有利于细胞分化。如果两者同时处理,则可促使分化频率的提高。

六.(简答)植物的离体器官发生:是指培养条件下的组织或细胞团(愈伤组织)分化形成不定根、不定芽等器官的过程。

不定根、不定芽:是指在一些非正常发生部位形成的根或芽,离体培养中通常是指从愈伤组织上发生的根或芽。

器官发生方式:1)先芽后根:先分化芽,芽形成后,在芽的基部长出根进而形成完整植株。2)先根后芽:先分化根,再在根上产生不定芽进而形成完整植株。

3)在愈伤组织的不同部位形成芽和根,再通过维管组织的联系形成完整植株。

七.愈伤组织:实质上是一团无序生长的细胞,这些细胞大多处于随机分裂的状态。

(器官、组织培养时细胞分裂首先发生在伤口部位)

八.体细胞胚或胚状体(定义):离体培养下没有经过受精过程,但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物(不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞),统称为体细胞胚或胚状体。

界定:

1)体细胞胚是离体培养的产物,只限于离体培养范围使用,以区别于无融合生殖胚。

2)体细胞胚起源于非合子细胞,以区别于合子胚。

3)体细胞经过了胚胎发育过程,以区别于离体培养中器官发生形成个体的途径。

研究体细胞胚的模式植物:胡萝卜。

九.体细胞胚的形成途径:(简答)

1.体细胞胚从外植体上直接发生:诱导阶段。胚胎发育阶段

2.间接发生:A.经过愈伤组织的体细胞胚的形成:诱导愈伤组织的形成→诱导愈伤组织胚

性化→体细胞胚的形成 2,4-D(浓度高)

2,4-D(浓度低) 2,4-D(浓度更低)

B.经过悬浮细胞的体细胞胚的形成:诱导愈伤组织的形成→诱导愈伤组织胚性化→悬浮培养的胚性细胞团→体细胞胚的形成。

十.植株再生的两种方式:器官发生,体细胞胚发生。

第三章体细胞遗传变异

一.体细胞无性系:由任何形式的细胞培养所产生的植株统称为体细胞无性系。

体细胞无性系变异:由体细胞无性系表现出来的变异。

从对生物遗传的影响而言,细胞工程技术本身即包含了双重性:遗传稳定性和变异性。二.离体培养中的遗传与变异特点:遗传稳定性;变异的普遍性;变异的局限性;嵌合性三.非遗传变异

四.体细胞无性系变异的诱导与选择:(愈伤组织>再生植株(变异))

诱变起始材料的选择原则:目标性状的可行性;实验植物的细胞培养技术水平;适当的细胞类型

七.设计实验:培养抗纹枯病的水稻——

突变体的选择:(1)直接选择

(2)间接选择:

外遗传变异

生理适应性变异

基因表达(生长素自养型变)

第四章植物组织细胞培养

一.植物脱毒:利用植物组织培养技术脱出植物细胞中侵染的病毒,生产健康的繁殖材料。二.脱毒基本原理:病毒在植物体内的分布具有不均匀性。

三.脱毒苗制备流程:索取材料的病毒检测外植体的选择及预处理茎尖分生组织培养再生植株脱毒效果检测脱毒苗的保存与繁殖

四.(填空、简答)培养物的增殖方式:1.腋芽增殖2.不定芽增殖3.体细胞胚增殖

4.愈伤组织增殖

五.花药培养(定义):把发育到一定阶段的花药接种在人工培养基上,使其发育和分化成为植株的过程。

从培养类型来讲,花药培养仍然属于器官培养的范畴。

花粉培养(定义):又叫小孢子培养,是从花药中分离除花粉粒,使之成为分散的或游离的状态,通过培养使花粉粒脱分化,进而发育成完整植株的过程。花粉培养属于细胞培养的范畴。

花粉培养取材时期:四分体小孢子时期;

花药培养取材时期:单核晚期,双核早期。

六.花药培养的基本程序:外植体选择—外植体预处理—外植体消毒—剥取花药—接种—诱导培养—分化培养。

七.花粉分离方法:

(1)机械分离法:将花药置于盛有少量液体培养基或与培养基等渗的蔗糖溶液的培养皿中,用平头的玻璃棒或注射器内管轻轻挤压花药,使其散出花粉。

(2)花药漂浮培养自然释放法:将经过一定时间低温处理的花药,接种于液体培养基中,培养数天后,花药开裂,释放出花粉粒。

(3)磁拌法:将花药接种于含有液体培养基的三角瓶中,然后放入一根磁棒,置于磁力搅拌器上,低速转至花药呈透明状。

八.根据在培养中所取的外植体的部位不同,植物胚胎培养包括:胚培养,胚乳培养,胚珠培养,子房培养。

九.幼胚培养的关键技术:

取材时期:多为球形胚至鱼雷形胚阶段。

十.幼胚离体培养的常见的生长发育方式:胚性发育,早熟萌发,愈伤组织。

十一.悬浮培养:是细胞培养的基本方法,是将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。

应用:1.愈伤组织诱导:要求:松散性好、增殖快、再生能力强。其外观一般是色泽鲜艳的乳白或淡黄色,呈细小颗粒状,疏松易碎。

诱导愈伤组织选择适宜的外植体:幼胚、胚轴、子叶是最常使用的外植体。

诱导愈伤组织选择适宜的培养基:较高浓度激素浓度;必要的附加物质。

2.悬浮系的建立与继代培养:

一个成功的悬浮细胞培养体系必须满足三个条件(简答):

A.悬浮培养物分散性良好,细胞团较小,一般在30-50个细胞以下,在实际培养

中很少会有完全由单细胞组成的植物细胞悬浮体系。

B.均一性好,细胞形状和细胞团大小大致相同。悬浮体系外观为大小均一的小颗粒,培养基清澈透亮,细胞色泽呈鲜艳的乳白色或淡黄色。

C.细胞生长迅速,悬浮细胞的生长量一般2-3天甚至更短时间便可增加一倍。

3.悬浮细胞的生长动态:P89图5-6 (填空——五个时期)

延滞期,对数生长期,直线生长期,减慢期,静止期。(在减慢期进行继代培养)

4.悬浮培养细胞的同步化:

细胞同步化:同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。

(填空)同步化的方法:分选法;饥饿法;抑制剂法;低温法P91

十二。单细胞培养方法:1、平板培养 2、看护培养 3、微室培养 4、双层滤纸植板培养5、悬浮培养(简答)P86

十三。培养条件下的植物细胞次生产物积累特性:1.生长偶联型:产物合成与细胞生长成正比。如长春花碱、烟碱的合成 2.中间型:产物仅在细胞生长下降时合成,细胞处于指数生长期或停止生长产物都不合成。如蒽醌类物质合成的植物细胞 3.非生长偶联型:产物合成在细胞生长停止以后。如紫草宁的合成。

第五章原生质体培养及杂交

一.原生质体(protoplast):除去细胞壁的裸露细胞。

二.原生质体的纯化方法:(填空)

1、沉降法:甘露醇作渗透压调节剂,低速离心,原生质体沉降于管底。

2、漂浮法:蔗糖作渗透压调节剂,离心,原生质体漂浮于溶液表面。

3、梯度离心法:利用比重不同的溶液,离心,原生质体处在两液相的界面之间。

三.原生质体培养方法:(P118)1。液体浅层培养2。固体平板培养3。固液双层培养4.琼脂糖珠培养(摇床震荡)5.悬滴培养法:在培养皿盖上滴悬浮液,皿底加入培养液,皿盖翻过来盖于皿底上,封口培养。6.微滴培养法:悬浮液滴于皿底,封口培养。7.饲养层培养法:又称看护培养。先制备饲养层,再在其上培养有活力的原生质体。

四.原生质体活力测定方法:(P114)

1.形态识别法

2.荧光素双醋酸酯(FDA)染色法:有活力的原生质体产生绿色荧光。

3.酚藏花红染色法:有活力的原生质体不能被染色。4、荧光增白剂染色法:有活力的原生质体随着细胞壁的再生产生绿色荧光。5、伊凡蓝染色法:有活力的原生质体不能被染色。

※五.植物体细胞杂交:又称为原生质体融合,是指将植物不同种、属、甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合,然后进行离体培养,使其再生杂种植株的技术。

植物细胞杂交的类型:1)体细胞杂交2)体细胞-配子杂交3)配子间细胞杂交4)微细胞杂交原生质体融合的种类(完整程度):1)对称融合 2)非对称融合

※六.原生质体的融合方法之一:PEG诱导融合法

1)特点:优点是成本低;融合子产生的异核率高;不受物种限制。缺点是融合过程繁琐,PEG 对细胞有毒害。

2)作用机理:PEG分子具有轻微的负极性,可与带正极性基团的水、蛋白质和碳水化合物等形成H键,在原生质体之间形成分子桥,使原生质体发生粘连进而促使原生质体的融合;PEG还鞥增加类脂膜的流动性,使原生质体的核、细胞器发生融合成为可能。

七.原生质体的融合方法之二:电融合的基本过程

细胞膜的接触:原生质体在电场作用下极化而产生偶极子,使原生质体紧密接触排列成串。

膜的击穿:给予高频直流脉冲就可以使原生质膜击穿,从而导致两个紧密接触的细胞融合在一起。

优点:1)不存在对细胞的毒害问题2)融合效率高3)融合技术操作简便

八.(填空)原生质体的融合产物:异核体(核未融合)、同核体(同一亲本融合 AA)、未发生融合的双亲原生质体。

九.杂种细胞的选择系统与体细胞杂种植株的鉴定(P131-132)(实验设计题)

例:材料月季(红)玫瑰(白)培养月季式玫瑰……

分离……原生质体:纯化、活力测定融合方法杂种选择杂种植株鉴定

膜的融合---细胞质融合(发生膜融合后的数小时)---核融合(可能发生在细胞间期,也可能发生在第一次同步分裂过程中)。

第六章人工种子及种质贮藏

一.人工种子(artificial seeds):任何一种经人工种皮包被或裸露的,具有形成完整植株能力的繁殖体。

根据包被的程度可将人工种子分为三大类:裸露的或休眠的繁殖体、人工种皮包被的繁殖体、水凝胶包埋再包被的繁殖体。

二.繁殖体的种类及其培养技术:体细胞胚、微型变态器官、微芽。

三.人工种子由以下三部分组成:繁殖体,人工胚乳,人工种皮。

四.包埋介质的要求:1、要能对繁殖体起保护作用,要对繁殖体没有毒害。2、要求具有一定的缓冲强度,以保证繁殖体在生产、运输和种植操作中的安全。3、能够提供类似于胚乳的营养物质以供繁殖体发芽的需要。4、应含有适当的杀菌剂。

五.理想的人工种皮:1具有一定的封闭性以保证人工胚乳的各种成分不易流失;

2具有良好的透气性,以保证繁殖体维持生理活性的需要;

3有一定的坚硬度,以加强人工种子的耐储运性和适于机械化操作;

4无毒无害,能保证繁殖体顺利穿透发芽。

第七章动物细胞培养

一.离体培养的动物细胞可分为:贴壁依赖型,非贴壁依赖型,兼性贴壁细胞。

二.原代培养:将机体取出的细胞或组织进行实效培养的过程。实效培养的细胞大约增殖10代左右,这样的细胞称为原代细胞。

三.传代培养:从原代培养的细胞继续转结培养称为传代培养。

四.细胞系:由初代培养产生的能进行无限次传代培养的细胞群称作细胞系

五.培养细胞的保存1、冻存2、复苏。(慢冻快融)。

第八章干细胞

干细胞:是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。

第九章克隆技术与转基因动物

一.细胞核移植定义:利用显微操作技术将一种动物的细胞核转入同种或异种动物的去核成熟卵内的精细技术。细胞核移植所得的杂种称为核质杂种。根据移植对象的不同分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。

二.克隆技术的应用:1、检验动物细胞的全能性;2、制备转基因克隆动物,进行生物药物生产3、培育优良畜种,扩大良种种群;4、开展异种动物克隆,拯救濒危动物;5、与干细胞技术结合,开展治疗性克隆;6、利用核移植技术,研究生物学的基本问题。

三.转基因动物:指在基因组内稳定的整合以实验方法导入外源基因,并且外源基因可以稳定遗传给后代的遗传工程动物。

四.转基因动物的制备过程:1、目的基因的分离与克隆;2、表达载体的构建;3、受体细胞的获得;4、基因导入;5、受体动物的选择及转基因胚胎的移植;6、转基因整合表达的检测;7、转基因动物的性能观测及转基因表达产物的分离与纯化;8、转基因动物的遗传性能研究以及性能选育;9、组建转基因动物新类群。

新课标高中生物选修三2.1植物细胞工程导学案

2.1 植物细胞工程 一、知识与技能目标 1、简述植物组织培养和体细胞杂交技术,掌握它们的原理、过程及关键环节。 2、了解植物繁殖的新途径及作物新品种的培育的具体方法。 二、过程与方法目标 1、尝试进行植物组织培养,运用细胞的基础知识,分析植物细胞工程的理论基础;收集植物细胞工程的相关资料并进行整理、分析、交流。 2、以植物细胞工程的基本技术为基础,弄清楚其在生产实践中的实际应用。 三、情感与价值观目标 1、体验植物组织培养技术,讨论植物细胞工程的社会意义及细胞学基础理论与技术开发之间的关系。 2、搜集相关的实际技术应用,积极参加各种技术应用的讨论,体验现代生物科技的新进展带来的社会效益,激发学习生物学的兴趣。 四、教学过程 1、植物细胞的基本结构包括、、。 2、植物细胞主要的增殖方式是,细胞分化是指,_______________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________。原因是。 3、全能性是指,已分化的细胞表现为全能性的原因是。 4、织物组织培养就是在和条件下,将培养在上,给予条件,诱导其产生形成完整的植株。 5、植物体细胞杂交就是将细胞在一定条件下融合成,并把它培养成的技术,优点是。 6、生物体可遗传变异类型包括、、。

根据变异类型育种的方法有、、、等。 7、植物的微型繁殖技术指,_____________举例_________________________________________________________。 8、获得脱病毒的植株的方法 。 9、神奇的人工种子指。 10、生物育种技术比较 技术原理优点缺点 诱变育 种基因突变 提高生物变异的频率,使后代变异频率 较快稳定;可大幅度改良某些性状,缩 短育种进程 盲目性大,需大 量处理供试材料 杂交育 种基因重组 使位于不同个体的优良性状,集中于一 个个体 周期长,难以克 服远缘杂交的障 碍 单倍体 育种染色体变异获得个体均为纯种,明显缩短育种年限 技术复杂,须与 杂交育种配合 多倍体 育种染色体变异器官大,提高产量和营养成分 适用于植物,动 物方面难以开展 基因工 程育种分子遗传学原理 打破物种界限,定向地改造生物遗传性 状 细胞工程育种细胞生物学和分 子生物学原理 克服远缘杂交不亲和的障碍;扩大了用 于杂交的亲本组合范围;定向改变生物 遗传性状 不能按人们的需 要表现出亲代的 优良性状

细胞生物学试题整理

细胞生物学与细胞工程试题 一:填空题(共40小题,每小题分,共20分) 1:现在生物学“三大基石”是:_,__。 2:细胞的物质组成中,_,_,_,_四种。 3:膜脂主要包括:_,_,_三种类型。 4:膜蛋白的分子流动主要有_扩散和_扩散两种运动方式。 5:细菌视紫红质蛋白结构的中部有几个能够吸光的_基因,又称发色基因。6:受体是位于膜上的能够石碑和选择性结合某种配体的_。 7:信号肽一般位于新合成肽链的_端,有的可位于中部。 8:次级溶酶体是正在进行或完成消化作用的溶酶体,可分为_,_,及_。 9狭义的细胞骨架(指细胞质骨架)包括_,_,_,_及_。 10:高等动物中,根据等电点分为3类:α肌动蛋白分布于_;β和γ肌动蛋白分布于所有的_和_。 11:染色质的化学组成_,_,_,少量_。 12:随体是指位于染色体末端的球形染色体节段,通过_与_相连。 13:弹性蛋白的结构肽链可分为两个区域:富含_,_,_区段。 14:细胞周期可分为G1期,S期,G2期,G2期主要合成_,_,_等。 二:名词解释(每个1分,共20小题) 1:支原体 2:组成型胞吐作用 3:多肽核糖体 4:信号斑 5:溶酶体 6:微管 7:染色单体 8:细胞表面 9:锚定连接 10:信号分子 11:荧光漂白技术

12:离子载体 13:受体 14:细胞凋亡 15:全能性 16:常染色质 17:联会复合体 18组织干细胞 19:分子伴侣 20:E位点 三:选择题(每题一分,共20小题) 1:细胞中含有DNA的细胞器有() A:线粒体B叶绿体C细胞核D质粒 2:细细胞核主要由()组成 A:核纤层与核骨架B:核小体C:染色质和核仁 3:在内质网上合成的蛋白质主要有() A:需要与其他细胞组分严格分开的蛋白B:膜蛋白C:分泌性蛋白 D:需要进行修饰的pro 4:细胞内进行蛋白修饰和分选的细胞器有() A:线粒体 B:叶绿体 C:内质网 D:高尔基体5微体中含有() A:氧化酶 B:酸性磷酸酶 C:琥珀酸脱氢酶 D:过氧化氢酶6:各种水解酶之所以能够选择性的进入溶酶体是因为它们具有()A:M6P标志 B:导肽 C:信号肽 D:特殊氨基序列7:溶酶体的功能有() A:细胞内消化 B:细胞自溶 C:细胞防御 D:自体吞噬8:线粒体内膜的标志酶是() A:苹果酸脱氢酶 B:细胞色素 C:氧化酶 D:单胺氧化酶9:染色质由以下成分构成() A:组蛋白 B:非组蛋白 C:DNA D:少量RNA

细胞生物学期末复习附带答案及作业题目

细胞生物学期末复习附带答案及作业题目 一选择 1 最早发现细胞的是:胡克 2 观察无色透明细胞:相差显微镜;观察运动细胞:暗视野显微镜。 3 信号传递中,重要的脂类是:磷酸酰基醇。 4 多药性蛋白属于ABC转运器。 5 植物细胞与细菌的协助运输借助于质子浓度梯度。动物则借助钠离子浓度梯度。 6 鞭毛基体和中心粒属于三联微管。 7 叶绿体质子动力势产生是因为类囊体腔的PH值低于叶绿体基质的PH值。 8 Hela细胞属于宫颈癌上皮细胞。 9 电子显微镜的分辨力:0.2nm。光镜:0.2um。人眼: 0.2mm。 10 鞭毛轴丝由9+2微管组成。 11 矽肺与溶酶体有关。 12 纺锤体的微管包括:星体微管,动粒微管,极微管。 13 具有细胞内消化作用的细胞器是:溶酶体。 14 细胞生命活动所需能量均来自线粒体。 15 信号识别颗粒是一种核糖核蛋白,包括RNA和蛋白质。 16 抑制脂质分裂的是:松弛素。 17 钙离子浓度上升时,PKC转移到质膜内表面。 18 类囊体膜上电子传递方向:PSII---PSI---NADP+。 19 由膜围成的细胞器是胞内体。 20 氚标记的尿嘧啶核苷用于检测细胞中RNA转录。

21 膜脂不具有的分子运动是跳跃运动。 (具有的是:侧向,旋转,翻转) 22 膜流的正确方向:内质网——高尔基体——质膜。 23 初级溶酶体来自粗面内质网和高尔基体。 24 线粒体合成ATP。 25 微丝重要的化学成分是肌动蛋白。 26 不消耗能量的运输方式是:电位门通道。 27 肌质网可贮存钙离子。 28 高尔基体功能功能:分泌颗粒形成。 29 微丝在非肌细胞中功能:变形运动,支架作用,吞噬运动。 30 中心粒:9组3联。 31 胞内信使有:C,CGMP,DG。生长因子:EGFR。、 32 流式细胞术可快速测定细胞中DNA含量。 33 完成细胞膜特定功能的组分为膜蛋白。 34 细胞质外层的一个复合结构体系和多功能体系成为:细胞膜。 35 酪氨酸蛋白激酶受体是血小板衍生生长因子受体。 36 肝细胞解毒作用发生在滑面内质网。 37 衰老细胞器被膜包裹形成自噬体。 38 线粒体中ADP---ATP在基粒中。 39 组成微丝的主要化学成分是:纤维状肌动蛋白。 40含不溶性脂蛋白颗粒的细胞内小体为脂褐质。 41 微管形态一般是中空圆柱状。 42 细胞氧化过程中,乙酰辅酶A生成在线粒体基质中。 43 粗面内质网作为核糖体附着支架。

细胞工程学教学大纲

《细胞工程学》教学大纲 课程名称:细胞工程学 课程类别:专业必修课 学时:32 学时 学分:2学分 考核方式:考试 适用专业:生物技术 开课学期:第5学期 一、课程性质、目的任务 《细胞工程》是通过对细胞及其组分的人工操作,研究生命活动规律;实现对动植物的遗传改造,用于农业、林业、园艺等生产实践;结合非生物材料等手段,生产用于治疗人类疾病或缺陷的人工器官,组织, 细胞及其代谢产物或用于深入研究的材料等为主要研究内容的一门新兴学科。 通过本课程的学习,使学生系统掌握该门学科形成与发展,理论与原理,技术与方法等基础知识,结合科研实际以及最新研究动态,使学生对本课程有一个全面的了解;以适应后基因组学时代在教学、科研和生产开发各方面对当代生命科学人才知识结构的需求。 二、课程基本要求 通过对细胞工程学的特性和内容,细胞工程的主要类型和技术操作,细胞工程学研究的基本方法等进行阐述,使学生能够掌握如何将细胞工程学知识应用于生产实践。 三、学时分配

四、教学方法与考核 1.教学方法:讲授法、案例分析法 2.课程考核方法:考试 1)平时成绩占20%,期末考试成绩占80% 2)平时成绩评分标准 平时成绩(100分),包括学生课堂出勤情况(20分)、课堂发言及积极参与情况(20分)、课后作业完成情况及质量(60分)。此项成绩需由教师提供评分依据及记录。 3)期末成绩评分标准 以评分标准为依据,所得卷面成绩为准,以考试试卷形式考查,考试形式为笔试,满分100分,试题包括基本知识概念,知识的理解和应用,综合应用等能力等教学内容的考查。全面涵盖本课程知识重点和难点,渗透学科前沿及进展,能够真实反映学生对本课程的知识和能力的学习情况。 五、大纲正文 绪论(2学时) 【目的要求】 1. 了解细胞工程的发展历史。 2. 了解生物工程学的组成内容 3. 了解细胞工程的应用。 4. 理解生物工程学与其它学科之间的学科交叉。 5. 理解细胞工程学与生物工程的其他技术之间的联系。 6. 掌握细胞工程学的主要组成。 7. 培养严谨、认真的科学观。

大学细胞工程试题及答案

细胞模拟试题及答案 一、填空(每空一分,共25分) 1.实验室的物理防护是由隔离的设备、实验室的设计、实验实施等三个方面组成,根据其密 封程度的不同,分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一细胞 群体。 3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细 胞增殖形成的细胞群。 4.干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞的增殖特性为缓慢性和自稳性。 5.培养细胞的生长特点为贴附、接触抑制和密度抑制。 6.植物细胞培养的原理是基于动物细胞的全能性。 7.植物细胞悬浮培养的方法为分批培养法、连续培养法和半连续培养。 8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中,消毒的基本原则是既要杀死附着其上的微生物又 不损伤材料。 9.细胞生长测定的一般方法为:细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞和非贴附型细胞。 11.人工种子的组分包括胚状体、人工胚乳和人工种皮。 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核融合几 个步骤。其中细胞桥形成是最关键的一步。 13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作,然后让它继续发育, 获得人们所需要的成体动物。 15.人工诱导单倍体形成的方法包括:远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药培养等。 二、单项选择题(每题1分,共10分) 1.人参皂甙粉是人参中重要的药用成分,以前只能从人参中提取产量极低,因而价格昂贵。 目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取(B) A.基因工程 B.植物组织培养 C.植物体细胞杂交 D.发酵工程

细胞工程学复习题

细胞工程学习题 1.诱导试管苗生根时,培养基的调整应 A.加大盐的浓度B.加活性炭 C.加大分裂素的浓度D.加大生长素的浓度 2.下列实验中可能获得三倍体植株的是 A.小麦的茎尖培养B.番茄花药培养 C.玉米胚乳培养D.玉米花粉培养 3.动物体内各种类型的细胞中,具有最高全能性的细胞是 A.体细胞B.生殖细胞C.受精卵D.干细胞 4.下列哪个是植物离体培养常用的主要糖类 A.葡萄糖B.果糖C.麦芽糖D.蔗糖 5.农杆菌介导的转化方法主要适用于 A.草本植物B.木本植物C.单子叶植物D.双子叶植物 6.原生质体纯化步骤大致有如下几步: ①将收集到的滤液离心,转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准,一般以500r/min离心15min。用吸管谨慎地吸去上清液。

②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外,其他成分和酶液相同),再次离心,去上清液,如此重复三次。 ③将原生质体混合液经筛孔大小为40~100um的滤网过滤,以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质,收集滤液。 ④用培养基清洗一次,最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为104~106/ml。 正确的操作步骤是:() A ①②③④B②③①④C③①②④D③②①④ 7.常用的细胞融合剂是 A.刀豆球蛋白B.聚乙二醇(PEG)C.细胞松弛素B D.脂质体 8.利用细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体过程中,HAT培养基用来进行 A.细胞融合B.杂交瘤选择C.检测抗体D.动物免疫 9.下列过程中,没有发生膜融合的是 A.植物体细胞杂交B.受精过程 C.氧进入细胞中的线粒体D.单克隆抗体的产生 10.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生 大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的是 A.经过免疫的B细胞B.没经过免疫的T细胞

大学 细胞工程试题及答案

细胞模拟试题及答案 一、填空(每空一分,共25分) 1.实验室得物理防护就是由隔离得设备、实验室得设计、实验实施等三个方面组成,根据其密 封程度得不同,分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级、典型得P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2、细胞系就是原代培养经初步纯化获得得以一种细胞为主得、能在体外长期生存得不均一细 胞群体。 3.细胞株就是指从一个经过生物学鉴定得细胞系用单细胞分离培养或通过筛选得方法,由单细胞增殖形成得细胞群。 4。干细胞就是一类具有自我更新与分化潜能得细胞。干细胞得增殖特性为缓慢性与自稳性。 5.培养细胞得生长特点为贴附、接触抑制与密度抑制。 6、植物细胞培养得原理就是基于动物细胞得全能性。 7、植物细胞悬浮培养得方法为分批培养法、连续培养法与半连续培养。 8。植物组织培养中培养材料得消毒过程中,消毒得基本原则就是既要杀死附着其上得微生物又不损伤材料、 9.细胞生长测定得一般方法为:细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10、体外培养得细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞与非贴附型细胞。 11.人工种子得组分包括胚状体、人工胚乳与人工种皮、 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核融合几 个步骤。其中细胞桥形成就是最关键得一步、 13。花粉单倍体植株得鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14。胚胎工程主要就是对哺乳类动物得胚胎进行某种人为得工程技术操作,然后让它继续发育,获得人们所需要得成体动物。 15.人工诱导单倍体形成得方法包括:远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药培养等、二、单项选择题(每题1分,共10分) 1。人参皂甙粉就是人参中重要得药用成分,以前只能从人参中提取产量极低,因而价格昂贵、目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取(B) A.基因工程 B.植物组织培养

细胞工程学相关考试题及答案

细胞工程学名词解释及问答题 一、名词解释 1、细胞工程(cytotechnology或cell engineering):它是以生物细胞、组织或器官为研究对象,运用工程学原理,按照预定目标,改变生物性状,生产生物产品,为人类生产或生活服务的科学。 或应用细胞生物学和分子生物学和分子生物学的理论和方法,按照人们的设计蓝图,在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株,并可以产生新的物种或品系。 2、看护培养(nursing culture):用一块活跃生长的愈伤组织来促进培养细胞持续分裂增殖的方法。 3、细胞杂交(cell hybridization):指用人工方法把不同类型的两个或两个以上细胞合并成一个细胞的技术。 4、外植体〔explant〕:从植物体上分离下来的用于离体培养的植物组织、器官等材料。 5、人工种子:是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。 6、花药培养(anther culture):将成熟或未成熟的花药从母体植株上取下,放在无菌的条件下,使其进一步生长、发育成单倍体细胞或植株的技术。(指离体培养花粉和花药,使小孢子改变原有的配子体发育途径,转向孢子体发育途径,形成花粉胚或花粉愈伤组织,最后形成花粉植株,并从中鉴定出单倍体植株,使之二倍化的细胞工程技术。 7、条件培养基(conditioned medium):培养过程中,有些细胞可能会分泌活性物质到培养液中,这种培养过某种细胞以后,含有细胞分泌物的培养液称为条件培养基。 8、植物脱毒:由人工用物理、化学和生物方法将植物体组织器官病原体消除,以使这些组织器官生成完整植株。 9、原代细胞系:指从机体中取出而直接培养的细胞,从一代到十代的细胞培养是原代培养,形成的整个系统叫原代细胞系。 10、体细胞杂交:指在人工控制条件下,不经过有性过程,两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。 11、胚胎培养:是指胚或具胚器官(如子房、胚珠等)在离体无菌条件下发育成幼苗的技术。 12、互补选择:是指利用两个亲本具有不同的遗传和生理特征,在特定培养条件下,具有发生互补作用的杂种细胞才能生长的选择方法。 13、悬浮培养(suspension culture):是细胞培养的基本方法,是将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。 14、植板率:植板率是能长出细胞团的单细胞在接种单细胞中所占的比例。 15、玻璃化冻存:是指液体转变为非晶态(玻璃态)的固化过程。 16、接触抑制(contact inhibition):当细胞在基质上分裂增殖,逐渐汇合成片即每个细胞与其周围的细胞相互接触时,细胞就停止增殖,即细胞密度不再增加,这一现象称之为接触抑制或密度依赖抑制现象。 17、非对称融合(aymmetric fusion):利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再进行融合。 18、对称融合(symmetric fusion):两个完整的细胞原生质体融合。 19、胞质体:不含细胞核而仅含有部分细胞质的原生质体。 20、体细胞胚:离体培养下没有经过受精过程,但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物(不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞)。 21、永久细胞系:大多数细胞系在有限的代数内以不变的形式增殖,当超过有限世代后,在体外永久存活下来发育成永久细胞系或称连续细胞系。

细胞工程 期末考试复习题目

细胞工程期末考试复习题目 细胞工程填空:20个ⅹ分=10分选择:10个ⅹ2分=20分名词:10个ⅹ6分=30分简答:5个ⅹ6分=30分论述: 1个ⅹ10分=10分第一章绪论1、细胞工程的定义及特点?细胞工程:是指主要以细胞为对象,应用生命科学的理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞,组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。细胞工程的特点:前沿性:现代生物技术的热点争议性:新技术给伦理道德带来的冲击综合性:多学科交叉应用性:工程类课程,重在产品与技术第二章细胞培养的设施与基本条件:1、什么是细胞及组织培养?组织工程:习惯上繁殖所有的体外培养,即器官培养,组织培养和细胞培养的总称。其本

意是指从活的机体中去取出器官、组织或细胞,模拟机体内生理条件,在体外建立无菌、室温和一定营养条件等,使之生长和生存,并维持其结构和功能能的技术称为组织培养。细胞培养:将组织块用机械方法或酶解法分离成单个细胞,做成细胞悬液,再培养于固体基质上,成单层细胞生长,活在培养液中呈悬浮转肽培养的技术称为细胞培养。2、了解细胞培养实验室的基本规划及相关注意事项?实验室规划:⑴准备室:培养用具清洗、消毒和做实验准备的场所,一般建在通风和光线充足的地方。⑵缓冲间:保护操作室的无菌环境,避免空气对流。 ⑶操作间:要求无菌。最好设在阴面,防止室温过高;天花板高度不超过2米,保证紫外线有效杀菌效应;门用拉门,避免空气流动。室内天花板、地板和四周墙壁要光滑无死角,要镶瓷砖或涂油漆,便于清洗与消毒,不易在墙角推挤灰尘。3、细胞培养的设备有

哪些?有何基本作用⑴超净工作台①最好安装在无尘室内,最好在无菌间,避免过多灰尘使滤器阻塞,降低净化效果,缩短使用寿命。②新安装的或长期未使用的工作台,工作前必须对工作台和其周围环境用真空吸尘器或不产生纤维的工具进行清洁工作,在采用药物灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。③每次使用时,应先用75%酒精擦洗台面,并进行30~50min紫外线灭菌灯处理净化工作区内累积的微生物,在关闭紫外灯后,应启动送风机使之转运2min后在进行培养操作。④净化工作区内不应存放不必要的物品,以保持洁净气流不受干扰⑤高效过滤器3年更换一次。请专业人员操作,以保持密封良好。定期将粗过滤器中的过布拆下清洗。⑥每次使用净化台要即使清楚工作台面上的物品,并用酒精擦洗台面使之始终保持洁净。⑵CO2培养箱:①一定浓度的CO2生长,尤其是原代培养和单

细胞工程学复习资料迟长凤

细胞工程学 1. 细胞工程指以细胞为研究对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目地利用或改造生物遗传性状,以获得特定细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术 2. 显微操作术借助显微操作仪和微针。微吸管等工具实现细胞操作和研究的一种技术 3. 细胞培养指从组织分离细胞,模拟体内环境,在无菌,适当条件下使其生长繁殖的一种技术 4. 原代培养直接取材于有机体组织的细胞进行培养 传代培养把原代培养的细胞从培养瓶中取出进行培养 5. 细胞工程的研究对象:动物、植物、微生物 6. 发现鸡神经元在生理盐水中可以存活,并使用了“组织培养”一词——Roux 卢克斯分离蝌蚪神经组织,开创动物组织培养先河——Harrison 哈里森 7. 植物组培奠基人:Went,Gautheret,Nobercount 8. 第一个体外受精动物——试管兔——张明觉仓鼠肾细胞的悬浮培养,为动物细胞大规模培养技 术的建立提供了基础——Capstick 9. Carlson -- 用NaN03作为融合诱导剂进行烟草原生质体融合,获得世界第一个体细胞杂种 植株 10. 成功利用胚胎细胞克隆出一只绵羊,首次证实的通过核移植技术克隆的哺乳动物—— Villadsen 多莉羊——证明高等动物体细胞细胞核的全能性 11. 血细胞计数板使用方法 12. 单细胞的获得:有限稀释法、显微操作分离法、流式细胞仪分离法、激光捕获纤维切割、免 疫磁珠分离 13. 细胞保存方法: 传代培养保存法 低温冷冻保存法:a低温保存(-20C左右)b超低温保存(液氮-196C) 14. 细胞培养方式:分批式、流加式、半连续式、连续式、灌流式 15. 分批培养的5 个时期: 适应期:cell很少分裂,营养不消耗平台期:cell浓度max,生长静止 指数生长期:max-V生长,细胞浓度指数增长衰退期:cell开始自溶,死亡 减速期:cell 生长受抑制,V 生下降 16. 外植体指用于离体培养的植物或组织切段 17. 人工种子指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒 18. 植物组织培养的应用:快速繁殖、种苗脱毒、突变育种、基因工程育种、远缘杂交 19. 常用生长素(根):吲哚乙酸(IAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2, 4-D)、萘乙酸(NAA)、吲哚 丁酸(IBA) 常用细胞分裂素(芽):6-芐氨基嘌呤(BA)、6-呋喃氨基嘌呤(激动素KT) 生长素/ 细胞分裂素:高(根的形成,愈伤组织的形成)中(根芽分化)低(芽的分化) 2 0 .人工种子三大结构:人工种皮外层、人工胚乳、胚状体或芽 2 1 .胚状体同步发育的调节方法(5 种):抑制剂法、低温法、渗透压法、通气法、分离筛选法

细胞工程学专业复习文件

绪论 一.细胞工程(Cell Engineering):(定义)是应用细胞生物学和分子生物学方法,借助工程学的实验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性,以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。 分类(包括):(填空)植物细胞工程和动物细胞工程 植物细胞工程:(定义)以植物细胞组织为差不多单位,在离体条件下进行培养、生殖或人为的精细操作,使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而改良品种或制造新物种,或加速生殖植物新个体,或获得有用物质的过程。 动物细胞工程:(定义)是依照细胞生物学及工程学原理,定向改变动物细胞内的遗传物质从而获得新型生物或特种细胞产品的一门技术。 二.(填空)细胞学讲的提出:施旺,施莱登(1838年)

三.1902年,H aberlandt提出了细胞全能性学讲。 第一章差不多技术 一.湿热灭菌:103-137kPa(121-126°C),15-30min. 二.干热灭菌:利用烘箱加热到位60-180°C 三.培养基差不多成分:无机盐(大量元素,微量元素),有机成分(激素,植物生长调节剂),水 常用有机成分:糖类(蔗糖),维生素,肌醇,腺嘌呤,氨基酸 激素:生长素(根),细胞分裂素(芽),赤霉素(细胞伸长)四.差不多培养基种类:MS,B5,N6,White(P26) (1)高盐平衡培养基:MS培养基、LS培养基、BL培养基、BM培养基和ER培养基。特点:无机盐浓度较高,元素间的比例适当,离子平衡性好,具有较强的缓冲性;营养丰富;微量元素种类全,浓度高。 (2)高硝态氮培养基:B5培养基,N6培养基及SH培养基等。特点:硝酸钾的含量高,氨态氮的含量低,含有较高的盐酸硫胺素。(3)中盐培养基:H培养基、Nitsch培养基、Miller培养基和Blaydes培养基。特点:大量元素无机盐约为MS的一般,微量元素种类减少而含量增高,维生素种类比MS多。

复试试题

中国海洋大学2005年招收硕士研究生入学考试试题一.基本概念 1、现代生物技术:利用生物有机体或组成部分发展新产品或新工艺的一种技术体系。 一般认为生物技术包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程,其中基因工程、 细胞工程是现代生物技术的主要内容。 2、细胞工程:运用精巧的细胞学技术,有计划地改造细胞遗传结构,从而培育出人们 所需要的生物晶种或具有某性状的细胞群体。 3、环境污染:指有害物质或因子进入环境,并在环境中扩散、迁移、转化,使环境系 统结构与功能发生变化,对人类以及其他生物的生存和发展产生不利影响的现象。 4、生态破坏:指人类不合理地开发、利用造成森林、草原等自然生态环境遭到破坏, 从而使人类、动物、植物的生存条件发生恶化的现象。 5、效应:表示接触一定剂量化学物质引起机体个体发生的生物学变化。 6、反应:指接触一定剂量化学物质后,表现一定程度某种效应的个体在一个群体中所 占的比例。 7、突变/致突变作用/致突变物:生物体的遗传物质发生了基因结构的变化称为突变。 某些物质引起生物体的遗传物质发生基因结构改变的作用,称为致突变作用。具有 引起生物体的遗传物质发生基因结构变化的物质称致突变物。 8、毒物:在一定条件下,以较小剂量给予机体时,能与生物相互作用,引起生物体功 能或器质性损伤的化学物质,或剂量虽微,但累积到一定的量,就能干扰或破坏集 体的正常生理功能,引起暂时或持久性的病理变化,甚至危及生命的化合物,亦称 毒物。 9、效应器官:污染物作用于靶器官后,其毒作用直接由靶器官表现出来,则此靶器官是效应器官。 10、蓄积器官:污染物毒物在体内的蓄积部位。污染物在蓄积器官内的浓度高于其他器官,但对蓄积器官并不一定显示毒作用。 11、环境质量基准:环境因素在一定条件下作用于特定对象(人或生物)而不产生不良或有害效应的最大阈值。 12、环境质量标准:国家权力机构为保障人群健康和适宜生存条件,为保护生物资源、维持生态平衡,对环境中有害因素在限定的时空范围内容许阈值所作的强制性的法规。 二.简述题 1、污染物对机体酶的作用机制? 答:生物机体的生物化学过程是构成整个生命活动的基础,酶在这一过程中起着重要的作用。污染物进入机体后,一方面在酶的催化下,进行代谢转化;另一方面也导致体内酶活性改变,许多污染物的毒作用就是基于与酶的相互作用。污染物可影响酶的数量和酶的活性。污染物对酶的诱导和阻遏影响酶的数量。对酶活性的激活和抑制影响酶的活性。酶数量和活性的影响将导致生物机体体内一系列的生物化学变化。 2、酶的诱导化合物主要包括哪些物质? 答:目前一发现许多环境污染物能诱导生物机体体内酶活性增加,在这些环境污染物中,大多属于有毒有害的有机化合物,他们来自各种工业废水、生活污水、农业废水和固体废弃物,例如有机氯杀虫剂、多氯联苯和多环芳烃、表面活性剂、增塑剂和染料中间体等。 3、需氧生物的防御过氧化损害系统包括哪些组分? 答:在长期进化中,需氧生物防御过氧化损害的系统,其组成包括:水溶性组分如谷胱甘肽、维生素C;脂溶性组成如维生素E,B-胡萝卜素,酶如谷胱甘肽过氧化酶、超氧化物歧化酶、

细胞工程学习题资料

(?题号前有问号题表示需斟酌!) 一、名词解释 1、细胞工程学(cytotechnology或cell engineering):是以生物细胞、组织或器官为研究对象,运用工程学原理,按照预定目标,改变生物性状,生产生物产品,为人类生产或生活服务的科学。 2、转基因动植物(transgenic animal and plant):指用细胞工程结合基因工程的方法将人们需要的目的基因导入受体动植物基因组中,使外源基因与其基因整合在一起,并随细胞分裂而增殖,在动植物体内表达,并稳定地遗传给后代。 3、原生质培养(protoplast culture):指将微生物或植物细胞游离成原生质体,在适宜培养条件下,依据细胞全能性使其再生细胞壁,并进行细胞分裂分化,形成完整个体的技术。 4、植物胚胎培养(embryo culture):指使胚或具胚器官(如子房、胚珠等)在离体无菌条件下发育成正常植株的技术。 5、克隆动物(cloned animal):是动物的无性繁殖,指不经两性结合,个体不断增值、复制出外形、性能和基因型一致的个体。 6、细胞周期(cell cycle):从细胞一次分裂结束开始,到下一次细胞分裂结束所经历的过程。 7、端粒(telomere):端粒是由富含鸟嘌呤核苷酸的短的串联重复序列组成,伸展到染色体3’端,染色体复制一次,端粒重复序列的长度就缩短一些;端粒酶:具有合成端粒重复序列、补偿正常的端粒序列丢失的功能的酶。 ?8、细胞分化(cell differentiation或cytodifferentiation):是胚胎细胞分裂后未定型的细胞,在形态和生化组成上向专一性或特异性方向分化,或由原来较简单具有可塑状态向异样化稳定状态进行分化的过程。/ 指的是在多细胞生物中,一个干细胞在分裂的时候,其子细胞的基因表达受到调控,变成不同细胞类型的过程。 9、细胞去分化(dedifferentiation):是指已分化的细胞失去其分化特征,回复到分化组织状态。 10、干细胞(stem cells, SC):是一类具有自我复制能力(self-renewing)的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。 11、细胞系的转化:指细胞在体外培养过程中发生与原代细胞形态、核型、增殖或者其他特性的可遗传的变化。 12、细胞融合(cell fusion):指将两个或两个以上的细胞合并成一个细胞的技术。 13、细胞系(cell line):原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。 14、细胞决定(cell determination):细胞在发生形态和功能的分化之前,就已经受到约束,而具有向着特定方向分化的趋势,之一时期称为细胞决定。 15、愈伤组织:去分化的细胞,往往经过细胞分裂形成一团无特定结构和功能的松散的薄壁细胞团,称为愈伤组织。 16、植冰:在液氮中冷却后的镊子或者棉签夹住塑料细管上端,使抗冻液迅速通过-6℃左右的冰点,强制性的使细胞外液结成冰晶,叫做植冰。 17、性别控制:指通过人为干预或操作,使动物按照人们的设计繁殖出所需性别后代的技术。 二、符号题 GH(Growth hormone)/生长激素;酵母提取液/YE(yeast extract);编程性细胞死亡/PCD (programmed cell death);多能干细胞/PSC(pluripotent stem cell);白血病抑制因子/LIF(leukemia inhibitory factor);二甲基亚砜/DMSO(dimethyl sulphoxide);细胞松弛素B/CB(cytochalasin B);前列腺素/PG(prostaglandin);促卵泡素/FSH(follicle stimulating hormone);促黄体素/luteinazing hormone;牛血清蛋白/BSA(bovine serum albumin);体外成熟/IVM(in vitro maturation);体外受精/IVF(in vitro fertilization);表皮生长因子

大学细胞工程试题及答案

大学细胞工程试题及答 案 TTA standardization office【TTA 5AB- TTAK 08- TTA 2C】

细胞模拟试题及答案 一、填空(每空一分,共25分) 1.实验室的物理防护是由隔离的设备、实验室的设计、实验实施等三个方面组成, 根据其密封程度的不同,分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不 均一细胞群体。 3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方 法,由单细胞增殖形成的细胞群。 4.干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞的增殖特性为缓慢性和自 稳性。 5.培养细胞的生长特点为贴附、接触抑制和密度抑制。 6.植物细胞培养的原理是基于动物细胞的全能性。 7.植物细胞悬浮培养的方法为分批培养法、连续培养法和半连续培养。 8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中,消毒的基本原则是既要杀死附着其上的 微生物又不损伤材料。 9.细胞生长测定的一般方法为:细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞和非贴附型细胞。 11.人工种子的组分包括胚状体、人工胚乳和人工种皮。 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核 融合几个步骤。其中细胞桥形成是最关键的一步。

13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作,然后让它继续 发育,获得人们所需要的成体动物。 15.人工诱导单倍体形成的方法包括:远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药 培养等。 二、单项选择题(每题1分,共10分) 1.人参皂甙粉是人参中重要的药用成分,以前只能从人参中提取产量极低,因而价 格昂贵。目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取(B) A.基因工程 B.植物组织培养 C.植物体细胞杂交 D.发酵工程 2.下列有关动物细胞培养的叙述不正确的是(C) A.通过动物细胞培养可获得大量的细胞分泌蛋白 B.动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理,以使细胞分散 C.细胞癌变都发生于原代培养过程中 D.目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的,以保持其正常核型3. 尽管各种合成培养基给动物细胞培养带来极大方便,但许多实验表明,单纯使用 合成培养基细胞的贴壁增殖效果常常不理想。因此,在使用时通常仍然需要加入一定量的(C) A.平衡盐溶液B. 琼脂糖 C. 动物血清 D. 甘露醇 4.制备人工种子的关键是控制(A) A.胚状体的同步发育 B.人工种皮的同步发育 C.胚状体的单独发育 D.人工种皮的单独发育

细胞工程学复习题

细胞工程学复习题 1.原代培养将机体内的某组织取出,分散成单细胞,在人工条件下培养使其生存并不断生长、繁殖的方法。 2.传代培养当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止;另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。此时就需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养。 3.细胞系原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。 4.细胞株通过纯系化或选择法从原代培养细胞或细胞系中分离出来的、具有特异性状或标志性状的细胞群体。 5.细胞融合人工的或自然发生的细胞合并形成多核细胞的现象。 6.单克隆抗体高度均质性的特异性抗体,由一个识别单一抗原表位的B细胞克隆所分泌。一般来自杂交瘤细胞 7.超数排卵应用外源性促性腺激素诱发卵巢多个卵泡发育,并排出多个具有受精能力的卵 子的方法 8.胚胎移植将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术。 9.同期发情就是利用某些激素制剂人为地控制并调整一群母畜发情周期的进程,使之在预定时间内集中发情。 10.体外受精雌雄配子在体外结合成合子的过程 13.性别控制。通过遗传学或内分泌学等手段对生物体的性别分化进行人工调控。 14.转基因动物通过基因转移技术获得的整合有外源基因的动物个体。 15、造血干细胞骨髓中的干细胞,具有自我更新能力并能分化为各种血细胞前体细胞,最终生成各种血细胞成分,包括红细胞、白细胞和血小板。 16.生物安全实验室通过防护屏障和管理措施,达到生物安全要求的生物实验室和动物实验室。17.胚胎分割借助显微操作技术或徒手操作方法切割早期胚胎成二、四等多等份再移植给受体母畜,从而获得同卵双胎或多胎的生物学新技术 18.乳腺生物反应器是基于转基因技术平台,使外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺,利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力,在动物的乳汁中生产一些具有重要价值产品的转基因动物的总称。 1.目前,常用的植物细胞培养基种类有哪些?各有什么特点?固体培养基液体培养基半固半液培养基完全培养基 2.常用的灭菌方法各有哪些优缺点? 高压蒸汽灭菌 为湿热灭菌方法的一种。是微生物培养中最重要的灭菌方法。这种灭菌方法是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去,而聚集在密封的容器中,在密闭的情况下,随着水的煮沸,蒸汽压力升高,温度也相应增高。压力和温度之间的关系见表9-1。 高压蒸汽是最有效的灭菌法,能迅速地达到完全彻底灭菌。一般在15磅/英寸2压力下(121.6℃),15~30分钟,所有微生物包括芽孢在内都可杀死。它适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。 2.干热灭菌 微生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌。一般在电烘箱中进行。干热灭菌所需温度较湿热灭菌高,时间也较湿热灭菌长。这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固。一般须在160℃左右保持恒温3~4小时,方能达到灭菌的目的。 干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌,凡带有橡胶的物品和培养基,都不能进行干热灭菌。

细胞生物学细胞工程试题整理(含答案)

细胞生物学和细胞工程试题 一:填空题(共40小题,每小题0.5分,共20分) 1:现在生物学“三大基石”是:_,__。 2:细胞的物质组成中,_,_,_,_四种。 3:膜脂主要包括:_,_,_三种类型。 4:膜蛋白的分子流动主要有_扩散和_扩散两种运动方式。 5:细菌视紫红质蛋白结构的中部有几个能够吸光的_基因,又称发色基因。6:受体是位于膜上的能够石碑和选择性结合某种配体的_。 7:信号肽一般位于新合成肽链的_端,有的可位于中部。 8:次级溶酶体是正在进行或完成消化作用的溶酶体,可分为_,_,及_。 9狭义的细胞骨架(指细胞质骨架)包括_,_,_,_及_。 10:高等动物中,根据等电点分为3类:α肌动蛋白分布于_;β和γ肌动蛋白分布于所有的_和_。 11:染色质的化学组成_,_,_,少量_。 12:随体是指位于染色体末端的球形染色体节段,通过_与_相连。 13:弹性蛋白的结构肽链可分为两个区域:富含_,_,_区段。 14:细胞周期可分为G1期,S期,G2期,G2期主要合成_,_,_等。 二:名词解释(每个1分,共20小题) 1:支原体 2:组成型胞吐作用 3:多肽核糖体 4:信号斑 5:溶酶体 6:微管 7:染色单体

8:细胞表面 9:锚定连接 10:信号分子 11:荧光漂白技术 12:离子载体 13:受体 14:细胞凋亡 15:全能性 16:常染色质 17:联会复合体 18组织干细胞 19:分子伴侣 20:E位点 三:选择题(每题一分,共20小题) 1:细胞中含有DNA的细胞器有() A:线粒体B叶绿体C细胞核D质粒 2:细细胞核主要由()组成 A:核纤层与核骨架B:核小体C:染色质和核仁 3:在内质网上合成的蛋白质主要有() A:需要与其他细胞组分严格分开的蛋白B:膜蛋白C:分泌性蛋白 D:需要进行修饰的pro 4:细胞内进行蛋白修饰和分选的细胞器有() A:线粒体 B:叶绿体 C:内质网 D:高尔基体5微体中含有() A:氧化酶 B:酸性磷酸酶 C:琥珀酸脱氢酶 D:过氧化氢酶6:各种水解酶之所以能够选择性的进入溶酶体是因为它们具有()A:M6P标志 B:导肽 C:信号肽 D:特殊氨基序列7:溶酶体的功能有() A:细胞内消化 B:细胞自溶 C:细胞防御 D:自体吞噬

高中生物选修细胞工程学案带答案 (1)

专题二细胞工程 2.1植物细胞工程 【学习目标】 1、描述植物组织培养的原理和过程。 2、简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。 3、尝试进行植物组织培养。 【重难点】 1、描述植物组织培养的原理和过程。 2、简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。 学以致用 一、细胞工程 1.概念:应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过 细胞水平或细胞器水平上的操作,按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 2.分类:根据操作对象不同,可分为植物细胞工程、动物细胞工程。 二、植物细胞的全能性 1.概念:高度分化的细胞,仍然具有发育成完整生物体的潜能。 2.细胞具有全能性的原因:细胞内含有本物种的全部__ 遗传信息___。 3.在理论上,生物的任何一个细胞都具有发育成完整植株的潜能,但在生物的生长发育过程中,细胞并不表现出全能性性,而是分化成各种组织和器官。这是因为在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达出各种蛋白质,从而构成生物体的不同组织和器官。 4.细胞全能性大小比较:(填﹥或﹤) 受精卵____﹥___生殖细胞___﹥____体细胞 植物细胞的体细胞___﹥_____动物细胞的体细胞 胚胎干细胞﹥其它干细胞﹥体细胞 三、植物组织培养技术 1.原理:植物细胞具有全能性。 2.过程 离体植物的器官、组织或细胞 ? ?→ ?脱分化_ 愈伤组织? ?→ ?再分化幼根和芽或胚状体 ? ?→ ?发育完整植株。 3.细胞脱分化:已分化的细胞经过诱导后,失去其特有的结构和功能 而转变成未分化细胞的过程。 4.植物组织培养:在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整植株。 思考:合作探究 1.离体的器官、组织或细胞如果不进行脱分化处理,能否培养成完整的植物体?为什么? 不能,当已分化的植物器官、组织或细胞脱离母体后,在一定的营养物质、激素等外界条件作用下分化形成愈伤组织(一种相对没有分化的细胞团),继而在植物激素等诱导下发生再分化,才能表达出全能性。发育成完整植株。

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