发酵过程优化原理复习剖析.doc
1、发酵过程优化的目标
答：①建立生物反应过程的数量化处理和动力学模型。②实现发酵过程优化，以更好地控制发酵过程；
③规避生物技术产业化过程的技术风险，追求其经济效益；
2、发酵过程优化主要涉及的研究内容
答：①细胞生长过程研究，了解微生物从非生物培养基中摄取营养物质的情况和营养物质通过代谢途径转化后的去向，确定不同环境条件下微生物的代谢产物分布②根据微生物代谢反应符合质量守恒定律，对微生物反应的化学计量进行研究，简化对发酵过程的质量衡算③研究生物反应速率及其影响因素，建立生物反应动力学，这也是是发酵过程优化研究的核心内容。④生物反应器工程，包括生物反应器及参数的检测与控制，它们是发酵过程优化最基本的手段。
3、Hasting（1954年）指出生化工程要解决的十大问题是哪些？
答：深层培养、通气、空气除菌、搅拌、结构材料、容器、冷却方式、设备及培养基除菌、过滤、公害。
其中通气搅拌与放大是生化工程学科的核心，其中放大是生化工程的焦点。
4、Cooney指出，要实现发酵过程的优化与控制，必须解决好哪些问题？
答：必须解决好5个问题：①生物模型；②传感器技术；③适用于生物过程的最优化技术；④系统动力学；⑤计算机-监测系统-发酵罐之间的接口技术
5、流加发酵、分批发酵、连续发酵方式的优缺点比较
答：①与传统的分批发酵相比，流加发酵可以解除底物抑制、葡萄糖效应和代谢阻遏等；与连续发酵相比，流加发酵则具有染菌可能性更小，菌种不易老化变异等优点。
②与流加发酵和连续发酵相比，分批发酵工艺操作简单，比较容易解决杂菌污染和菌种退化等问题，对营养物的利用效率较高，产物浓度也比连续发酵要高。但其人力、物力、动力消耗较大，生产周期较长，生产效率低。
③连续发酵最大的优点是，微生物细胞的生长速度、代谢活性处于恒定状态，可达到稳定高速培养微生物或产生大量代谢产物的目的，且便于进行微生物代谢、生理生化和遗传特性的研究，在工业上可减少分批培养中每次清洗、装料、消毒、接种、放罐等操作时间，提高了生产效率和自动化程度。
6、重组生物药物生产过程的优化包括哪6个方面
答：①适宜宿主的选择；②重组蛋白积累位点（如可溶的胞内积累、胞内聚合积累、周质积累或胞外积累）的确定；③重组基因最大表达的分子策略；④细胞生长和生产环境的优化；⑤发酵条件的优化；⑥后处理过程的优化。
7、操作细胞循环生物反应器时必须考虑哪两个因素？为什么？
答：①稀释率（流速/体积），因为稀释率的大小影响细胞的生长速率，不同的实验目的对稀释率的要求也不同；
②循环速率（指通过过滤系统的培养基速率），因为高的循环速率可使组分混合均匀，但循环速率过高会使作用在细胞上的剪切力过高，也会导致过滤单元膜的迅速损坏。因此，很难同时确定合适的稀释率与循环速率，这也是限制细胞循环技术应用的一个重要因素。
8、细胞生长过程可以分为哪3个步骤，运输过程包括其中的两个步骤，在细胞膜上的运输过程是研究者普遍关心的内容，在细胞膜上可能存在哪些运输机制？各有何特点？
答：（1）细胞生长过程的3个步骤：①底物传递进入细胞；②通过胞内反应，将底物转变为细胞质和代谢产物；③代谢产物排泄进入非生物相；
（2）研究表明在膜上存在3种不同的运输机制：①自由扩散；②协助扩散；③主动运输。
特点：①自由扩散和协助扩散只有存在浓度梯度时，由高浓度向低浓度的运输才可能发生，统称被动运输，在运输过程中不需要提供外部能量；
自由扩散分子扩散的质量通量遵守Fick第一定律，通过自由扩散进行运输的化学物质主要有氧气、二氧化碳、水、有机酸和乙醇等；协助扩散是通过膜上的转运蛋白来进行物质运输的，具有选择性，其运输速率比自由扩散又快又多，运输速率遵循典型的饱和型动力学。
③主动运输是逆着浓度梯度进行运输，需要输入一定的吉布斯自由能，以特定的膜内蛋白作为运输过程的媒介，可以逆着浓度梯度的方向进行运输，因此是一个耗能的过程，根据运输动力来源可以分为一级主动运输和次级主动运输两大类，还有一种特别的主动运输过程为基团转移。
9、发酵过程数量化处理包括哪些方面的内容？常规的参数一般包括哪些？通常如何测量这些参数？
发酵过程的数量化处理包括：①发酵过程的速度；②化学计量学和热力学；③生产率、转化率和产率；
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two
10、比速率和速率有什么区别？
答：比速率是一个相对速度，表示细胞的个体行为，反应了细胞的生长和代谢能力，它与生物量（以细
胞干重表示）或有催化活性物质的量（如酶量）有密切的关系，各种比速率的单位均为h -1，定义类似于化学
反应动力学中比速率r i *的定义
速率：是绝对速率，所表示的是细胞的整体行为，不能代表系统的特征。
11、生物反应过程中有关的宏观产率系数及定义
答：宏观产率系数（或称得率系数）Y i/j （i 表示菌体或产物，j 表示底物）是常用于对C 源等底物形成菌体或产物的潜力进行评价，将消耗的量同形成的量关联起来，定量表示细胞或产物甚至热量的产率，也能用于定量的表示不同消耗量之间或形成量之间的相互关系，最初是由Monod 以质量单位和商的形式定义的：
12、Y ATP 与其它产率系数相比有何特点？ 答： ，是Bauchop 以异化代谢中ATP 的生长量作为菌体产率的基准而定义的。Y ATP 与微生物及底物种类无关，基本为一常数。
在复合培养基的厌氧培养中，不管微生物和环境的性质如何，Y ATP 总是约为10.5g/mol 。但该值对微生物生长具有普遍性。在基本培养基中无论是厌氧还是需氧培养，单一碳源中一部分作为能源通过异化代谢分解，其余部分用于同化构成菌体。假设用于同化的这部分碳源与ATP 生成无关，则对于异化代谢的碳源亦服从Y ATP ≈10g/mol 。
13、复合培养基厌氧培养过程中细胞的生物合成步骤及ATP 的生成和利用途径 P26
14、代谢产物理论产率系数和实际过程产率系数有何区别？影响实际过程产率系数的因素有哪些？ 答：假设发酵过程中完全没有菌体生成，则Y P/S 可以达到最高值，即为理论代谢产物产率，可以根据化学计量关系、生物化学计量关系计算。
而在实际发酵过程中的实际产率是变化的，所以需对产率系数的概念进行修正。实际产率值取决于各种生物和物理参数。，式中μ为比生长速率；m 为混合度；s 为底物浓度；t 为平均停留时间；t m 为混合时间；OTR 为氧传递速度
15、微生物反应动力学模型的类型及着眼点。Monod 模型属于什么模型？其使用的条件包括哪些?
答：（1）①类型：可分为概率论模型和决定论模型两大类，其中决定论模型又可分为均相模型和生物相
分离模型，或结构模型与非结构模型。
②着眼点：对底物、菌体和产物3个状态变量进行数学描述
（2）非结构动力学模型
（3）满足的条件为：①菌体生长为均衡性非结构生长；②培养基中只有一种底物是生长限制性底物；
③菌体产率系数恒定
16、对于一个具体的发酵产品，需要使用哪些模型才能完整地对其进行描述？为什么？
答：（1）温度和pH 恒定时，μ随培养基组分浓度变化而变化。若着眼于某一特定培养基组分的浓度s ，并假设其它培养基组分浓度不变，则得到Monod 模型为： （2）延迟期动力学模型 ， （3）生长稳定期动力学模型：r X =α.x （1 – x/β）α和β是经验常数，取α=μmax 和β=x max ，在微生物生长停止时才出现产物形成的情况下，它具有较好的适用性。
细胞的生长、繁殖代谢是一个复杂的生物化学过程，该过程既包括细胞内的生化反应，也包括胞内与胞外的物质交换，还包括胞外物质的传递及反应。该体系具有多相、多组分、非线性的特点。同时，细胞的培养和代谢还是一个复杂的群体的生命活动，每个细胞都经历着生长、成熟直至衰老的过程，同时还伴有退化和变异。要对这样一个复杂的体系进行精确的描述，在各个发酵阶段必须合适的发酵动力模型。为了优化反应过程，首先要进行合理的简化，就必须在简化的基础上建立过程的物理模型，再据此推导得出数学模型，对发酵过程进行合理优化。
17、Gaden 根据产物生成速率和细胞生长速率之间的关系，将产物形成分成了哪几种类型？除此之外，底物消耗的质量细胞形成的质量
==-=≈--=??-=ds dx dt ds dt d Y r r //x s s x x s x s x t 00t s /x Y M Y A x ATP/s s x/s ?=??=TP Y ATP )1(),(/max e s K s t s t t s L --+=μμs K s s +=μμmax
还有哪两种模型？
答：类型Ⅰ：也称偶联模型，即产物的形成与细胞的生长相偶联；或代谢产物的生成与微生物生长完全同步。
类型Ⅱ：也称部分偶联模型，即产物的形成与底物的消耗存在部分偶联。这类代谢产物通常是在能源代谢中间接生成的，代谢途径较为复杂。
类型Ⅲ：也称非偶联模型，即产物的形成与细胞的生长没有直接关系，当细胞处于生长阶段时，没有产物积累，当细胞生长停止以后，产物大量形成。
还有两种模型：一种是q p与μ负偶联的模型，例如黑曲霉生产黑色素，其q p与μ的关系可表示为： q p=q p，max-Y P/Xμ；另外一种是q p与μ没有关系的模型，一般只适用于休眠细胞中，此时细胞本身代谢仅利用少量底物，只起到酶载体的作用，有：r p=α.r x+β.x-k d.p
18、发酵过程优化一般包括哪些步骤？具体陈述
答：简化、定量化、分离、建模型，最后把分离开的现象重新组合起来。
①反应过程的简化：微生物反应是一个复杂的过程，简化必须保证不损失基本信息，例如将微生物细胞当作黑匣子，其简化的结果是从宏观上通过分析、计算液相中各种浓度变化来间接地反应细胞中发生的代谢反应；
②定量化：分析方法的选择必须要求可以保证测定结果的可用性和代表性能够满足优化的要求。
③分离：指在生物过程和物理过程的各种速度相互不影响的情况下，精心设计实验以获得关于生物和物理现象的数据，只能通过计算机模拟的方式，通过检测液体培养基中的外部变化，才能来反应代谢反应的内部变化。
④数学建模：是能以简化的形式表征过程行为，并实现特定目的的数学公式。数学模型可将特定结果通用化，并为推论系统的其它性质提供基础。
19、系统优化方法的基本原则，具体陈述
答：（1）整体性原则：①不能从系统的局部得出有关系统整体的结论；②分系统的目标必须服从于系统整体的目标。
（2）有序相关原则：凡是系统都是有序的，为获得预期的整体功能，从方法论上应把注意力集中于系统内部各要素（分系统）之间的相互关联上。
（3）目标优化原则：是系统优化技术的指导思想和优化目标，优化问题是在不可控参数发生变化的情况下，根据系统的目标，经常、有效地确定可控参数的数值，使系统经常处于最优状态。系统最优化离不开系统模型化，先有模型化而后才有系统最优化。
（4）动态性原则：应把实施对象看作一个动态过程，分析系统内外的各种变化，掌握变化的性质、方向和趋势，采取相应的手段，改进研究方法，在动态变化中对系统整体进行优化。
（5）分解综合原则：分解对系统来说就是归纳出相对独立、层次不同的分系统。综合则是完成新系统的筹建过程，即选择具有性能好、适用性强的分系统，设计出它们的相互关系，形成具有更广泛价值的系统，以达到预定的目标。分解的原则是既要满足系统的结构要求，又要便于进行研究。一般可按结构要素、时间要素、功能要素、空间状态等方法进行分解。
（6）系统创造思维原则：其基本原则有两条：第一、把陌生的事物看作熟悉的东西，用已有的知识加以辨识和解决。第二、把熟悉的对象看作陌生的东西，用新的方法、新的原则加以研究，从而创造出新的理论、新的技术。
总之，对生物系统进行优化，首先是要构建一个系统，然后使这一系统高效运行。
20、构建ATP再生系统必须满足那些条件？目前报道的ATP再生系统按底物不同可以分为哪几类？根据酶源的不同，可分为哪几类？各有何特点?
答：（1）条件：①用于合成产物的酶的活性必须足够强且稳定；②能够大量提供廉价、稳定的前体物质；
③再生ATP的活性足够强且稳定，能与生物合成酶反应成功耦合；④提供廉价的能量底物和磷酸基团供体以利于ATP再生；⑤若有类似于分解反应的有害副反应，则必须对其加以控制；⑥若底物或预定的产物不能透过细胞膜，则必须设法提高膜的通透性。（2）按底物不同来分类，目前所报道的ATP再生系统可以分为转移高能磷酸基的反应系统和用碳水化合物作基质的反应系统（3）根据酶源不同分的类型：①自耦合ATP再生系统：在该系统中，生物合成酶反应所消耗的ATP被具有ATP合成活性的同种微生物菌株再生，以后再用于生物合成反应，故只需提供葡萄糖和目标产物的前体，生物合成反应便可以进行下去。②种间耦合ATP再生系统：即一种微生物作为ATP合成活性的供体，另一种微生物作为于此相偶联的生物合成酶活性的供体。该系统的优点在于：合成酶活性供体可以自如地从多种微生物中选择；采用重组DNA技术可显著促进特定酶的活性。21、ATP再生系统存在的问题答：第一、除了合成产物所需的关键酶以外，细胞内还有许多种酶，其中一些具有分解活性，能将反应的底物和预定的产物转化为副产物；第二、微生物细胞具有很强的自我保护功能，作为渗透屏障的细胞膜可防止胞内物质渗出。当细胞用作酶源时，这种屏障就会阻碍底物和产物进出
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细胞。因此，有必要寻求一种在不降低合成酶活性前提下提高细胞膜通透性的方法。
22、采用ATP再生系统来生产有用物质时，固定化微生物细胞进行这些有用物质的生产具有什么优点？
答：优势:①无需提取和纯化酶的过程；②细胞可重复利用；③可实现连续操作；④反应器占地小；⑤反应控制容易；⑥处理的液体体积小；⑦可获得高纯度产品；⑧工厂污染减轻。
23、E.coliⅡ-1是一株合成GSH的重组微生物，请分析有机溶剂和前体氨基酸对其合成GSH的影响
答：细胞未经有机溶剂处理，几乎不能在胞外积累GSH，而经过一定浓度的甲苯（最好）、苯乙醇和甲醇处理后，胞外GSH浓度明显提高。主要是由于通过有机溶剂的处理，提高了细胞膜的通透性，使ATP、其它底物及产物能够自由出入细胞，从而促进了GSH合成反应的进行。
实验浓度范围内，随L-Glu的浓度的增加，GSH的合成量相应增加；随Gly浓度的增加，GSH的合成量很快增加至一高点，然后维持稳定；随L-Cys浓度的增加，GSH的合成量出现高点之后逐渐下降。上述结果表明，L-Glu很可能对GSH-Ⅰ的活性具有促进作用，而过高浓度的L-Cys很可能对GSH-Ⅰ的活性有抑制作用。24、有机废水处理如何与PHAs的合成耦合？分析影响耦合的有关因素答：该思路的具体实施包括5个方面①合成废水生产PHAs的初步条件；② R.eutrophus发酵生产PHAs最佳有机酸种类，包括以有机酸为底物生产PHAs的代谢机理、理论产率和PHAs发酵的实际产率；③高效厌氧酸化工艺，包括酸化率达100%时有机酸分布的工艺学条件等；④在小型发酵罐中，以不同浓度的酸化废水为碳源进行分批发酵实验，在对PHAs发酵过程动力学分析的基础上，建立较为合理的发酵过程动力学模型；⑤进行有机废水生产PHAs流加发酵的初步研究，比较分批和流加发酵过程中丁酸对PHAs产率的变化。影响耦合的因素：①不同初始酸浓度对PHAs发酵过程的影响：②产物分布影响因子的影响；③HRT对酸化产物分布的影响；④不同pH条件下UASB反应器出水产物分布的影响。25、在有机废水酸化工艺中，HRT对酸化产物分布的影响？答：进水葡萄糖浓度为30g/L，自然pH时， HRT对酸化产物的组成有明显影响。HRT=3h时，乳酸＞乙酸＞丁酸；随着HRT 的增加，酸化产物的组成发生变化，丁酸浓度大幅度增加，乳酸浓度下降，乙酸和丙酸的浓度略有增加。因此，延长HRT有可能使产酸相中丁酸成为主要产物。26、生物反应与产物分离的组合系统具有什么特征？应用该系统时，分离技术的选择是关键，分离技术的选择主要考虑哪些因素？内部随程溶剂萃取和外部随程溶剂萃取各有何特点？答：（1）3个特征：①耦合过程是一种集成式单元操作，其生物反应器具有特殊的结构；②实现产物及时分离的方法必须考虑产物的特性及具体的生物反应体系来合理选择和设计；③耦合过程作为一种新的反应工程技术，可适用于各种生物反应过程（2）分离技术的选择主要基于4个方面的因素：①分离技术应当具备生物相容性，适宜的分离技术对生物反应不造成负面影响，不会造成生物催化剂或细胞的失活、变性和死亡，也不会改变生物反应的代谢和调节机制；②应当考虑产物或副产物的物理化学性质和生物学特性；③考虑系统的流体特性，因为流体力学性质决定并影响分离过程的传质，从而影响分离的容量和速度，如高粘度的非牛顿流体就不能用膜分离技术④考虑工程及经济因素，理想的分离技术应当是操作费用低、性能稳定、工程上易于实现的技术。3）内部随程萃取是指萃取剂在反应器中与培养基直接接触，以便将产物萃取到溶剂中去。内部随程萃取的特点是溶剂和液相混合均匀，因而有利于传质的进行。但溶剂也可能在培养液中形成稳定的乳化作用，这对溶剂和产物的分离不利。外部随程萃取是指萃取剂和培养液在反应器外的萃取装置中逆流接触，从而萃取产物的过程。用这种方法可以减轻内部溶剂萃取中的乳化问题。
27、流加发酵的分类
答：（1）单一补料分批培养，特点是补料一直到培养液达到额定值为止，且在培养过程中不取出培养液。（2）重复补料分批培养，特点是在培养过程中每隔一定时间，取出一定体积的培养液，同时在同一时间间隔内加入相等体积的培养液，如此反复。分五类：间歇补料操作流加发酵、连续补料操作流加发酵、循环补料操作流加发酵、循环连续补料操作流加发酵、循环间歇补料操作流加发酵。
28、赖氨酸的生产方法有哪些？酶法生产赖氨酸的工艺有哪些？
答：水解法(已淘汰)、合成法、酶法和直接发酵法。酶法（3种）：①合成ε-苯甲酰-α-乙酰-DL-赖氨酸，采用消旋酶处理制成ε-苯甲酰-L-赖氨酸，经酸水解得产品；②合成DL-4-氨基丁基乙内酰脲，采用微生物酶使其转变为L-赖氨酸；③由环己烯合成DL-氨基己内酰胺，采用水解酶和消旋酶共同作用使其变成L-赖氨酸。29、目前通常采用哪些方法来保持高产菌株遗传性能的稳定，防止其回复突变？
答：①选育遗传性能稳定的菌株。经诱变处理后，在易出现回复突变的培养基中反复传代，选出不发生回复突变的菌株②定向赋加生产菌的遗传标记。如选育双缺菌株，增加抗回复突变性能；对于抗性株，尽量选育多重抗性突变株；③在保藏过程中除选择合理的保藏方法外，对于营养缺陷型菌株要提供足够的营养物，抗性株可添加适量的抗性物质④必须定期进行分离、纯化工作，保持其遗传性能的稳定。
30、黄色短杆菌是我国赖氨酸发酵的常用菌株，请分析其产赖氨酸的合成途径及调控机制，根据其赖氨酸合成途径及代谢调控机制，可以采用哪些育种策略？这些问题与发酵过程优化有什么关系？答：（1）如右图：（2）①切断代谢支路：选育和应用营养缺陷型菌株，切断丙氨酸、苏氨酸和蛋氨酸的分支途径是积累赖氨酸的有效手段。②解除反馈抑制：选育抗结构类似物的突变株，可以得到对AK反馈抑制脱敏的菌株，代谢调节被遗传性地解除，这是赖氨酸发酵育种的重要手段。特别是选育营养缺陷型兼具结构类似物抗性的突变
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株，极有希望获得高产菌株。
③增加前体的生物合成：关键酶AK的催化反应速度与底物天门冬氨酸浓度的之间的关系呈S型，随着底物浓度的增加，AK与天门冬氨酸的亲和协同性增大。根据变构酶的S型动力学特性，为了提高赖氨酸的产量，应设法增加前体物质天门冬氨酸的浓度，以抵消变构抑制剂的影响。因此选育丙氨酸缺陷型，抗天门冬氨酸结构类似物的突变株。
④解除代谢互锁：赖氨酸与亮氨酸的生物合成之间存在代谢互锁，因此可以考虑选育亮氨酸缺陷型，抗亮氨酸结构类似物的突变株。
31、FB42（Leu－Thr－AECrAHVrLysHxr）是一株能大量合成赖氨酸的黄色短杆菌，在分批发酵中，初糖浓度、溶氧、pH对其发酵过程有什么影响？Thr、Leu、生物素对其分泌赖氨酸有何影响？为什么其发酵动力学模型的建立需要首先进行发酵过程的动力学分析？应当如何评价所建立的动力学模型？
答：（1）①菌体浓度存在一个饱和值，只要满足一定的初糖浓度，菌体的生长都能达到这个饱和值。只是不同的初糖浓度时菌体达到饱和值的时间不一样。随着初糖浓度的逐渐升高，菌体浓度达到饱和值的时间将逐渐延长，表明初糖浓度对FB42的生长有抑制作用。
②对于菌体生长来说，在满足一定的溶氧水平前提下，菌体在不同的溶氧水平时其生长量均能达到一个饱和值，但菌体的生长速度不同。结合图4-27和图4-26发现，当K La=531.8h-1时，菌体的生长比速最大，过高的K La反而对菌体的生长有抑制作用。综合菌体生长和产物形成的结果表明，菌体生长和产物合成所需的合适溶氧水平不一致。
③pH对许多酶的催化过程有很大的影响，pH变化能改变体系酶的环境和营养物质的代谢流，使得诱导物和生长因子在活性和非活性之间变化。pH的变化对赖氨酸的发酵影响很大：当pH7.0时产酸最高，pH偏高或偏低，产酸均降低。pH对菌体生长量总的来说影响不大，但进一步的研究却发现pH同时影响了菌体的生长比速和产物的形成比速，偏低的pH对菌体生长有利，实验范围内pH6.0时菌体的生长比速最高，而产物形成比速在pH7.0时最高。
（2）当苏氨酸浓度＞150mg/L时，就能满足菌体生长的需求，且实验范围内未发现过高的苏氨酸浓度对菌体生长有抑制作用。对产酸而言，苏氨酸浓度有一合适范围（100~350mg/L之间），过高对FB42产赖氨酸有抑制作用；亮氨酸对菌体生长和产酸的影响相似，即存在合适的生长和产酸浓度（400~600mg/L），过高会抑制菌体生长和产酸；高生物素浓度将抑制谷氨酸的分泌而应该有利于赖氨酸分泌。通过合成培养基进行的发酵实验表明，生物素浓度必须大于150μg/L。发酵中，添加3%的玉米浆即可满足要求。
（3）建立和评价的一般规律：
①明确建模目的，主要从宏观角度出发，实现产物最大生长比速及最短生产周期，获得满意的经济效益，同时要求动力学模型尽量简单；
②对模型做出合理的假设，并确定模型应用范围；
③选择合理的模型参数，模型中的参数最好容易测定，才能使控制容易进行；
④建立模型来实施最佳工艺控制，建模才能够通过优化工艺和管理，将发酵控制在最佳工艺；
⑤模型的校验与修改，模型是否合理，需要进行试验和生产的检验，以及进行不要、合理的修改，修改从第②步开始；
⑥对模型的评价主要考虑在实验范围内，模型是否符合实验结果、是否简单、是否具有一定
的通用性，参数是否恰当，这些因素以生产中容易应用为基本出发点。
32、以赖氨酸发酵生产为例，请你结合发酵过程优化的基本原理，谈谈你的优化思路。
33、以丙酮酸发酵生产为例，请你结合发酵过程优化的基本原理，谈谈你的优化思路。
34、利用WSH-IP12菌株发酵法生产丙酮酸时，氮源、碳氮比对其丙酮酸发酵有何影响？
答：①初始葡萄糖浓度为80g/L，当培养基中蛋白胨浓度为15g/L时，丙酮酸产量较高，低于15g/L时，葡萄糖消耗速度较慢，细胞干重和丙酮酸产量也较低；而高于15g/L时，丙
酮酸产量明显下降。酵母粉是一种常用的氮源和生长因子的来源，但“随着
发酵培养基中酵母粉浓度的增大，细胞干重不断增大而丙酮酸产量却迅速降
低”实验结果表明酵母粉不适合研究菌株发酵生产丙酮酸。豆饼水解液浓度
为5g/L时，发酵液中丙酮酸产量较高，但低于蛋白胨。不过，由于豆饼水
解液来源广、价格低，因而仍是一种有潜力的氮源。
②小型发酵罐的实验结果表明:葡萄糖和蛋白胨的浓度按碳:氮=25：
1的原则同时提高，丙酮酸的生产会得到促进；若蛋白胨浓度保持不变，在
此基础上再提高葡萄糖浓度（即C:N增大），发酵后期（40h后）细胞生长速
度和葡萄糖消耗速度明显下降，丙酮酸产率也显著降低。
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35、WSH-IP12与WSH-IP303相比主要有什么差异？维生素对WSH-IP303菌株过量合成丙酮酸中的影响
答：（1）WSH-IP303可以以无机氮化合物为唯一氮源并大量积累丙酮酸，且WSH-IP303对氮源的需求量也有所下降；而WSH-IP12虽可利用硫酸铵、氯化铵、磷酸氢铵和尿素为唯一氮源生长，但其丙酮酸产量均不及以蛋白胨和豆饼水解液为氮源的情况。
（2）①培养基中若缺乏烟酸、硫胺素、吡哆醇和生物素中的任何一种，细胞生长均很弱，丙酮酸产量也很低；
②细胞生长不需要核黄素，但添加适量的核黄素对丙酮酸的生产有一定的促进作用；
③细胞积累丙酮酸时，对不同维生素浓度变化的敏感程度不同。
正交实验的结果表明：
①硫胺素是影响细胞生长、葡萄糖消耗及丙酮酸合成的最重要因素；②增大吡哆醇、生物素和核黄素的浓度，对细胞生长和葡萄糖消耗没有显著影响，但对丙酮酸合成有一定的促进作用；③增大烟酸浓度可促进葡萄糖的消耗，但不利于丙酮酸的合成。细胞以葡萄糖为碳源积累丙酮酸时，烟酸和硫胺素较优浓度的确定，对维持丙酮酸合成与降解的平衡非常重要。
一，基于微生物反应原理的培养环境优化技术
基本思想:基于底物运输、生化反应、产物排出,确定不同环境条件对微生物生长和代谢产物分布的
影响,优化微生物生长的物理和化学环境,保证微生物生长处于最适条件。内容：培养基组成的优化技术，
发酵环境条件的优化技术。目的：1.确定培养基组分的最小用量，避免底物的过量或不足2.减少副产物
的形成，使底物转化率明显提高，3、对关键物质的浓度及其供给方式进行优化，使目标产物产量明显
提高，4、分析不同环境条件下微生物的生理学二、基于微生物代谢特性的分阶段培养技术
发酵过程的动力学参数(μ，qp，qs)流变学参数的变化特性，不同T、pH、RPM、DO，分阶段控制策略，
控制环境条件在最适合细胞生长或最适合产物合成的水平。利用分阶段培养技术还可以将细胞生长期和
产物形成期人为分开，从而实现优化发酵过程的目的。三、基于反应动力学和人工智能的优化和控制技
术以数学模型为基础的优化，建立动力学模型，求解参数并评价其适用性，优化发酵过程，对发酵进
程和产量指标进行预测。以生理模型为基础的优化，采用人工神经网络、专家系统、模糊逻辑控制技术，
对发酵过程进行在线状态预测和模式识别，自适应最优化控制系统的开发、计算机模拟和实际应用。四、
基于代谢通量分析的过程优化技术：参考已知的生化反应计量关系、代谢途径、生理、特征，构建、合
成不同产物的代谢网络，利用代谢通量分析方法，计算得出胞内各条代谢途径的通量变化。目的：分析
不同发酵产品合成途径中主要代谢节点的性质，结合发酵过程中胞内能量代谢情况，提出一系列发酵优
化策略。五、基于环境胁迫条件下微生物生理应答的过程优化技术：环境压力或胁迫：饥饿、高温、高
压、机械剪切、冷冻、强酸、强碱、高渗透压（高盐）、活性氧、有毒化学物质等等。长期胁迫－可遗
传性的应答（遗传变异）短期胁迫－不可遗传性的应答（生理性的)。细胞结构、基因转录和蛋白表达
的临时改变，酶原的激活以及代谢途径的临时调整等。学术思想：研究一些重要的工业微生物的抗胁迫
因子及其抗胁迫机制，考察环境胁迫条件下特定微生物蛋白转录和代谢途径变化，采用不同环境胁迫手
段或措施对微生物的生长或代谢进行调控，促进微生物生长或大量合成目的产物。六：基于微生物代
谢的辅因子调控的过程优化技术：研究辅因子形式及其浓度在物质代谢和信号传递途径中控制代谢流方
向和流量分配的作用机制、物质流和辅因子流的变化规律，对微生物的生长或代谢进行调控，促进微生
物合成目的产物的代谢流的最大化和快速化。
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第10章 发酵过程的优化和放大
第10章生物过程的优化和放大 生物过程的研究一般经历 摇瓶培养→小罐培养→中试→生产规模 10.1 生物过程的优化 优化方法 1单次单因子法 2统计法：Plackett-Burman法，部分因子设计法响应面法，响应面法 响应面法：中心组合设计法，Box-Behnken法 3改进单纯形法 统计法一般需要经过以下几步：实验设计；实验结果的数据分析，以得到合适的数学模型；数学模型的检验，即方差分析；求解最优化值及其校验。 一、Plackett-Burman法 Plackett-Burman法是一种两水平的实验设计方法，它试图用最少的实验次数达到使因子的主效果得到尽可能精确的估计，适用于从众多的考察因子中快速有效地筛选出最为重要的几个因子，但无法考察各因子对发酵的相互交叉的影响，因此常作为响应面法的初步实验，用于确定影响发酵过程的重要因子。 1. 实验设计 Hadamard矩阵 设计的准则为： 1)若要考察k 个因子，则需要进行N=k+1个实验，为便于进行方差分析，往往要求k 至少 包括1-3个虚构变量，即空项，且k为奇数； 2)每个因子取两个水平，即用“＋”、“－”分别代表其高、低水平，低水平为原始培养条件， 高水平约取低水平的1.25倍； 3)矩阵每行含“＋”的数目为(k+1)/2，含“-”的数目为(k-1)/2，而每列含“+ ”、“-”的数目相等； 4)矩阵第一行任意排列，但必须符合上述要求，最后一行全部为“-”；其余行以上一行的最 后一列为该行的第一列，上一行的第一列为该行的第二列，其余类推。 2. 数据分析 3. 方差分析 二、响应面法 1. 实验设计 2. 数据分析 3. 方差分析 4. 优化 10.2 生物过程的放大 不管是微生物细胞、动、植物细胞还是重组质粒，要进行工业化生产，都必须经过放大中试阶段，生化过程的放大有各种各样的方法和手段，其放大方法和原理林林总总，对具体某一体系来说，用何种放大模式可以快捷地成功过渡到工业化生产，没有固定模式，必须针对具体菌种生理生化及培养基及环境条件的放大效应综合考虑，至目前为止，生化过程放大一直是个长脖子的事。 传统的工业放大，一般要经过四个阶段：实验室摇瓶培养、实验室小型发酵罐培养、中间工厂和生产工厂。 一、摇瓶与罐培养的差异 摇瓶的试验条件放大到生产罐或小发酵罐的试验条件转移到大发酵罐时，它们所得产物的产量往往不完全一致，特别是产抗生素的新菌株，差异更大，当然也有一致的巧合。引起这种
微生物发酵培养基的优化方法
工业发酵进展
微生物发酵培养基的优化方法 对于微生物的生长及发酵，其培养基成份非常复杂，特别是有关微生物发酵的培养基，各营养物质和生长因子之间的配比，以及它们之间的相互作用是非常微妙的。面对特定的微生物，人们希望找到一种最适合其生长及发酵的培养基，在原来的基础上提高发酵产物的产量，以期达到生产最大发酵产物的目的。发酵培养基的优化在微生物产业化生产中举足轻重，是从实验室到工业生产的必要环节。能否设计出一个好的发酵培养基，是一个发酵产品工业化成功中非常重要的一步。以工业微生物为例，选育或构建一株优良菌株仅仅是一个开始，要使优良菌株的潜力充分发挥出来，还必须优化其发酵过程，以获得较高的产物浓度（便于下游处理），较高的底物转化率（降低原料成本）和较高的生产强度（缩短发酵周期）。设计发酵培养基时还应时刻把工 实验室最常用的优化方法是单次单因子法，这种方法是在假设因素间不存在交互作用的前提下，通过一次改变一个因素的水平而其他因素保持恒定水平，然后逐个因素进行考察的优化方法。但是由于考察的因素间经常存在交互作用，使得该方法并非总能获得最佳的优化条件。另外，当考察的因素较多时，需要太多的实验次数和较长的实验周期[3]。所以现在的培养基优化实验中一般不采用或不单独采用这种方法，而采用多因子试验。 2.多因子试验 多因子试验需要解决的两个问题: (1)哪些因子对响应具有最大(或最小)的效应，哪些因子间具有交互作用。 (2)感兴趣区域的因子组合情况，并对独立变量进行优化。
3.正交实验设计 正交实验设计是安排多因子的一种常用方法，通过合理的实验设计，可用少量的具有代表性的试验来代替全面试验，较快地取得实验结果。正交实验的实质就是选择适当的正交表，合理安排实验的分析实验结果的一种实验方法。具体可以分为下面四步： （1）根据问题的要求和客观的条件确定因子和水平，列出因子水平表； （2）根据因子和水平数选用合适的正交表，设计正交表头，并安排实验； （3）根据正交表给出的实验方案，进行实验； （4）对实验结果进行分析，选出较优的“试验”条件以及对结果有显著影响的因子。 正交试验设计注重如何科学合理地安排试验，可同时考虑几种因素，寻找最佳因 次 报道。CastroPML报道用此法设计20种培养基，做24次试验，把gamma干扰素的产量提高了45%。 6.部分因子设计法 部分因子设计法与P1ackett-Burman设计法一样是一种两水平的实验优化方法，能够用比全因子实验次数少得多的实验，从大量影响因子中筛选出重要的因子。根据实验数据拟合出一次多项式，并以此利用最陡爬坡法确定最大响应区域，以便利用响应面法进一步优化。部分因子设计法与Plaekett-Burman设计法相比实验次数稍多，如6因子的26-2部分因子设法需要进行20次实验，而Plackett-Burman设计法只需要7次实验。 7.响应面分析法
发酵过程优化原理复习
发酵过程优化原理复习 1、 发酵过程优化的目标 答：①建立生物反应过程的数量化处理和动力学模型。 ②实现发酵过程优化，以更好地控制发酵过程； ③规避生物技术产业化过程的技术风险，追求其经济效益； 2、发酵过程优化主要涉及的研究内容 答：①细胞生长过程研究，了解微生物从非生物培养基中摄取营养物质的情况和营养物质通过代谢途径转化后的去向，确定不同环境条件下微生物的代谢产物分布； ②根据微生物代谢反应符合质量守恒定律，对微生物反应的化学计量进行研究，简化对发酵过程的质量衡算； ③研究生物反应速率及其影响因素，建立生物反应动力学，这也是是发酵过程优化研究的核心内容。 ④生物反应器工程，包括生物反应器及参数的检测与控制，它们是发酵过程优化最基本的手段。 3、Hasting （1954年）指出生化工程要解决的十大问题是哪些？ 答：深层培养、通气、空气除菌、搅拌、结构材料、容器、冷却方式、设备及培养基除菌、过滤、公害。其中通气搅拌与放大是生化工程学科的核心，其中放大是生化工程的焦点。 4、Cooney 指出，要实现发酵过程的优化与控制，必须解决好哪些问题？ 答：必须解决好5个问题：①生物模型；②传感器技术；③适用于生物过程的最优化技术；④系统动力学；⑤计算机-监测系统-发酵罐之间的接口技术 5、流加发酵、分批发酵、连续发酵方式的优缺点比较 答：①与传统的分批发酵相比，流加发酵可以解除底物抑制、葡萄糖效应和代谢阻遏等；与连续发酵相比，流加发酵则具有染菌可能性更小，菌种不易老化变异等优点。 ②与流加发酵和连续发酵相比，分批发酵工艺操作简单， 比较容易解决杂菌污染和菌种退化等问题， 对营养物的利用效率较高，产物浓度也比连续发酵要高。但其 人力、物力、动力消耗较大，生产周期较长，生产效率低。 ③连续发酵最大的优点是，微生物细胞的生长速度、代谢活性处于恒定状态，可达到稳定高速培养微生物或产生大量代谢产物的目的，且便于进行微生物代谢、生理生化和遗传特性的研究，在工业上可减少分批培养中每次清洗、装料、消毒、接种、放罐等操作时间，提高了生产效率和自动化程度。 6、重组生物药物生产过程的优化包括哪6个方面 答：①适宜宿主的选择；②重组蛋白积累位点（如可溶的胞内积累、胞内聚合积累、周质积累或胞外积累）的确定；③重组基因最大表达的分子策略；④细胞生长和生产环境的优化；⑤发酵条件的优化；⑥后处理过程的优化。 7、操作细胞循环生物反应器时必须考虑哪两个因素？为什么？ 答：①稀释率（流速/体积），因为稀释率的大小影响细胞的生长速率，不同的实验目的对稀释率的要求也不同； ②循环速率（指通过过滤系统的培养基速率），因为高的循环速率可使组分混合均匀，但循环速率过高会使作用在细胞上的剪切力过高，也会导致过滤单元膜的迅速损坏。 因此，很难同时确定合适的稀释率与循环速率，这也是限制细胞循环技术应用的一个重要因素。 8、细胞生长过程可以分为哪3个步骤，运输过程包括其中的两个步骤，在细胞膜上的运输过程是研究者普遍关心的内容，在细胞膜上可能存在哪些运输机制？各有何特点？ 答：（1）细胞生长过程的3个步骤：①底物传递进入细胞；②通过胞内反应，将底物转变为细胞质和代谢产物；③代谢产物排泄进入非生物相； （2）研究表明在膜上存在3种不同的运输机制：①自由扩散；②协助扩散；③主动运输。 特点：①自由扩散和协助扩散只有存在浓度梯度时，由高浓度向低浓度的运输才可能发生，统称被动运输，在运输过程中不需要提供外部能量； 自由扩散分子扩散的质量通量遵守Fick 第一定律，通过自由扩散进行运输的化学物质主要有氧气、二氧化碳、水、有机酸和乙醇等；协助扩散是通过膜上的转运蛋白来进行物质运输的，具有选择性，其运输速率比自由扩散又快又多，运输速率遵循典型的饱和型动力学。 ③主动运输是逆着浓度梯度进行运输，需要输入一定的吉布斯自由能，以特定的膜内蛋白作为运输过程的媒介，可以逆着浓度梯度的方向进行运输，因此是一个耗能的过程，根据运输动力来源可以分为一级主动运输和次级主动运输两大类，还有一种特别的主动运输过程为基团转移。 9、发酵过程数量化处理包括哪些方面的内容？常规的参数一般包括哪些？通常如何测量这些参数？ 发酵过程的数量化处理包括：①发酵过程的速度；②化学计量学和热力学；③生产率、转化率和产率； 10、比速率和速率有什么区别？ 答：比速率是一个相对速度，表示细胞的个体行为，反应了细胞的生长和代谢能力，它与生物量（以细胞干重表示）或有催化活性物质的量（如酶量）有密切的关系，各种比速率的单位均为h -1，定义类似于化学反应动力学中比速率r i *的定义 速率：是绝对速率，所表示的是细胞的整体行为，不能代表系统的特征。 11、生物反应过程中有关的宏观产率系数及定义 答：宏观产率系数（或称得率系数）Y i/j （i 表示菌体或产物，j 表示底物）是常用于对C 源等底物形成菌体或产物的潜力进行评价，将消耗的量同 形成的量关联起来，定量表示细胞或产物甚至热量的产率，也能用于定量的表示不同消耗量之间或形成量之间的相互关系，最初是由Monod 以质量单位和商的形式定义的： 12、Y A TP 与其它产率系数相比有何特点？ 答： ，是Bauchop 以异化代谢中ATP 的生长量作为菌体产率的基准而定义的。Y ATP 与微生物及底物种类无关，基本为一常数。 在复合培养基的厌氧培养中，不管微生物和环境的性质如何，Y ATP 总是约为10.5g/mol 。但该值对微生物生长具有普遍性。在基本培养基中无论是厌氧还是需氧培养，单一碳源中一部分作为能源通过异化代谢分解，其余部分用于同化构成菌体。假设用于同化的这部分碳源与ATP 生成无关，则对于异化代谢的碳源亦服从Y ATP ≈10g/mol 。 13、复合培养基厌氧培养过程中细胞的生物合成步骤及ATP 的生成和利用途径 P26 14、代谢产物理论产率系数和实际过程产率系数有何区别？影响实际过程产率系数的因素有哪些？ 答：假设发酵过程中完全没有菌体生成，则Y P/S 可以达到最高值，即为理论代谢产物产率，可以根据化学计量关系、生物化学计量关系计算。 而在实际发酵过程中的实际产率是变化的，所以需对产率系数的概念进行修正。实际产率值取决于各种生物和物理参数。 ，式中μ为比生长速率；m 为混合度；s 为底物浓度；t 为平均停留时间；t m 为混合时间； OTR 为氧传递速度 15、微生物反应动力学模型的类型及着眼点。Monod 模型属于什么模型？其使用的条件包括哪些? 底物消耗的质量细胞形成的质量==-=≈--=??-=ds dx dt ds dt d Y r r //x s s x x s x s x t 00t s /x Y M Y A x ATP/s s x/s ?=??=TP Y ATP
榨汁机原型分析报告(优)
产品分析报告 随着人们生活水平的提高，人们对健康、对生活品质有更高的需求。水果蔬菜榨汁机，它能使蔬菜及水果中的维生素，矿物质及其它营养成份不被破坏，并可按您的要求榨出各种新鲜的饮料。榨出的饮料具有健康和美容的功能，能有效地预防高血压、糖尿病等，使肌肤光滑而有生气。可以调制各种各样的中、西饮品、汤类或酱汁，以至婴儿食品，可以制作新鲜豆浆。海外早已流行吃生蔬菜水果长寿保健，因为这类生菜、水果中的营养丝毫没有被破坏，常吃这些食品，是很多百岁以上长寿者的秘诀，美国人能生吃的决不熟吃，象冬瓜、青菜都可生吃。因此，榨汁机在生活中是有很大的生存空间的。 产品现状 目前市面上能见到的榨汁机主要有以下几种类型 粉碎式 这种榨汁机在榨汁前要先将水果切成小块，去 核，开启榨汁机后将果块放入进料口，用推进棒 送料，高速旋转的刀具很快将果块粉碎，通过离 心力甩出渣滓，果汁从过滤网流出。一般产品的 外形比较大，部件较多，功率为200到400瓦之 间。 搅拌式搅拌后用过滤网过滤果汁 这种搅拌机身采用、可分离式刀叶和果汁过滤 网。搅拌机可令您随心所欲的制作各种果汁。动 力强劲的750瓦马达不费吹灰之力便可轻松搅 拌、粉碎或切割各种物料。借助其多级速度旋钮 及专用快捷按钮，便可按自己的方式进行碎冰或 调制果汁。利用果汁过滤网，您可以轻松制作出 无果核或果仁的清澈果汁。使用完毕后，可将分 离式刀叶和果汁过滤网放入洗碗机内进行清洗.
压榨式利用杠杆原理 水果蔬菜榨汁机，该手动榨汁机利用杠杆原理可快 速榨取果汁，省时省力，在家里便可轻松享受自制 新鲜果汁的乐趣。本产品外型新颖，方便清洗且节 约能源，是现代家庭厨房必备。它能使蔬菜及水果 中的维生素，矿物质及其它营养成份不被破坏，并 可按您的要求榨出各种新鲜的饮料。榨出的饮料具 有健康和美容的功能，能有效地预防高血压、糖尿 病等。 螺旋挤压式 电机带动螺旋刀具高速旋转将水果 粉碎，从而获得果汁， 这种榨汁机不用电能，操作方便， 环保。 多功能组合式 这种搅拌榨汁机集多项功能于一身，除可在家 中调制各种各样的中、西饮品、汤类或酱汁， 以至婴儿食品，还附有豆浆网，可以制作新 鲜豆浆，而个别型号也有干磨器及碎肉器选 择，让你可制作更多美食及甜品。
发酵过程及优化实验
发酵过程及优化实验 ——产淀粉酶细菌的优化实验 淀粉酶是一类能催化淀粉糖苷键水解的酶类，作用于淀粉分子产生糊精、低聚糖及葡萄糖等多种产物。而淀粉酶是应用最广的酶制剂之一，占全球酶工业市场份额的25%-33%。淀粉酶广泛分布于动物、植物和微生物有机体中。 目前，已报道的能够产生淀粉酶的微生物种属包括不动杆菌属、微球菌属、黄隐球酵母、盐单胞菌属、青霉菌属、类芽孢杆菌属、链霉素属、假单胞菌属和杆菌菌属等。 实验一培养基的配置、灭菌 一、实验目的 1. 温故配制微生物培养基的原理及配制的一般方法、操作步骤。 2. 了解鉴别性培养基的原理，并掌握配制鉴别性培养基的放到和步骤。 二、实验原理 鉴别性培养基是一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只需用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。如对于淀粉酶产生菌的筛选，选用的是在含有淀粉的培养基中培养微生物，滴加碘液进行染色，若出现透明圈，则表明该菌能产生胞外淀粉酶。 三、材料和器材 （1）培养基： 普通培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，自来水1000mL，pH7.2~7.4。鉴别型培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，可溶性淀粉10g，NaCl 5g，琼脂20g，自来水1000mL，pH7.2~7.4。另一个鉴别性培养基加可溶性淀粉15g每1000ml。（2）器皿：电子天平，烧杯，锥形瓶，量筒，培养皿，玻棒，涂布棒，移液管等。 （3）其他：药匙，记号笔，报纸等。 （4）碘原液：称取碘化钾22g，加少量蒸馏水溶解，加入碘11g，溶解后定容至500mL，贮于棕色瓶中。 稀碘液：取碘原液2mL，加碘化钾20g，用蒸馏水定容至500mL，贮于棕色瓶中。 四、方法和步骤 1．配制基本培养基，分装50mL至250mL锥形瓶，供实验菌株扩增。 2．配制鉴别培养基，检测实验菌株是否能产胞外淀粉酶。
榨汁机工作原理分析
北京航空航天大学研究生课程考核记录 2010－2011 学年第一学期 学号姓名李梁成绩 课程名称：《高等机械原理》 论文题目：榨汁机工作原理分析 任课教师评语： 任课教师签字：考核日期：年月日
《产品设计与虚拟样机》 课题：榨汁机工作原理分析 姓名：李梁 学号： 班级： 指导教师：郭卫东教授 2011年2月28日
目录 1 榨汁机的工作过程 (4) 2 分析说明 (4) 3 榨汁机总体结构设计 (5) 4 典型机构设计 (6) 5 总结 (7) 参考文献 (7)
榨汁机工作原理分析 中航工业沈阳飞机工业（集团）有限公司李梁 摘要：机械传动已经伴随人们走过了几千年的历史，无论是在生活还是生产方面，它都为人类的发展进程作出了巨大的贡献。为了深入的了解机械传动的发展给人们生活带来的影响，本文阐述了榨汁机的工作原理。 关键字：机械传动榨汁机送果压榨出汁 1.榨汁机的工作过程 送果阶段——压榨阶段——出汁、排渣阶段——复位 2.分析说明 果子被送果机构抛入下榨碗后，上碗开始迅速下降，当上下碗接触后，下降速度变慢，使果子进入以下变化：果子受压变形，果皮含油层破裂出油，同时上碗帽内喷淋环喷出的水将油及时冲走，防止皮油进入果汁。当果子受压达到一定程度后，下刀在底部打出一圆孔，上碗继续下压，将果子内部成份从刚才底部切开的圆孔，通过下刀口压进漏汁管，在压榨接近终结过程中，上刀立即在果子顶部打孔，果皮进入上碗间隙处，这一过程中去芯孔管迅速上移，对漏汁管内的成分进行挤压。压榨结束时，果皮被上切刀切断进入上碗帽，果汁通过漏汁管细孔被压入果汁收集槽，籽核从去芯孔管下方开口出排出，乳装皮油混合物从下碗座流出。榨汁完成后，上碗机构迅速上移，去芯孔管清孔漏汁管，做好下一个压榨准备。
发酵工艺优化
发酵工艺优化 从摇瓶试验到中试发酵罐试验的不同之处 1、消毒方式不同，摇瓶是外流蒸汽静态加热（大部分是这样的），发酵罐是直接蒸汽动态加热，部分的是直接和蒸汽混合，会因此影响发酵培养基的质量，体积，PH，透光率等指标。扩大时摇考虑 2、接种方式不同，摇瓶是吸管加入，发酵罐是火焰直接接种（当然有其他的接种方式），要考虑接种时的菌株损失和菌种的适应性等。 3、空气的通气方式不同，摇瓶是表面直接接触。发酵罐是和空气混合接触，考虑二氧化碳的浓度和氧气的融解情况。 4、蒸发量不同，摇瓶的蒸发量不好控制，湿度控制好的话，蒸发量会少。发酵罐蒸发量大，但是可以通过补料解决的。 5、搅拌方式不同，摇瓶是摇转方式进行混合搅拌，对菌株的剪切力较小。发酵罐是直接机械搅拌，注意剪切力的影响和无菌的影响。 6、PH的控制，摇瓶一般通过碳酸钙和间断补料控制PH，发酵可以直接流加控制PH，比较方便。 7、温度控制，摇瓶是空气直接接触或者传热控制温度，但是发酵罐是蛇罐或者夹套水降温控制，注意降温和加热的影响。 8、注意染菌的控制方法不一样，发酵罐根据染菌的周期和染菌的类型等可以采取一些必要的措施减少损失。 9、发酵罐可以取样或者仪表时时检测，但是摇瓶因为量小不能方便的进行控制和检测。 10、原材料不一样，发酵所用原材料比较廉价而且粗旷，工艺控制和摇瓶区别很大等等 发酵工艺中补料的作用 补料分批培养(fed—batch culture简称FBC)是指在分批培养过程中、间歇或连续地补加一种或多种成分的新鲜培养基的培养方法、与传统的分批集中补料培养相比、它有以下优点： (1)可以避免在分批发酵中因—次投料过多造成发酵液环境突变，造成菌丝大量生长等问题，改善发酵液流变等性质，使得发酵过程泡沫得以控制，节省消泡剂，并提高了装罐系数。 (2)可以控制细胞质量，以提高芽抱的比例，并使pH得以稳定。 (3)可以解除底物抑制，产物反馈抑制和分解阻遏。 (4)可以使“放料和补料”方法得以实施。该方法在发酵后期、产生了一定数量代谢产物后，在发酵液体积测量监控下，放出一部分发酵液，同时连续补充——部分新鲜营养液，实现连续带放、既有利于提高产物产量．又可降低成本，使得发酵指数得以大幅度提高。 (5)利用FBC技术、可以使菌种保持最大的生产力状态．随着传感技术以及对发酵过程动力学理沦深入研究、用模拟复杂的数学模型使在线方式实最优控制成为可能。 连续补料控制目前采用有反馈控制和无反馈控制两种方式。有反馈控制：选择与过程直接关系的可检测参数作为控制指标，例如可以测量、控制发酵液PH、采用定量控制葡萄糖流加。稳定PH在次级代谢最旺盛水平。而无反馈控制FBC是指无固定的反馈参数，以经验和数学模型相结合的办法来操作最优化控制、从而使抗生素发酵产量得以大幅度提高。例如发酵过程中前体的补加。由此可见，要实现对发酵过程的有效控制，就先要解决补科的连续控制问题。 目前国外发酵生产过程连续补料采用：流量计(电磁流量计、液体质量流量计)、小型电动、气动隔膜调节阀和控制器来实现连续补料控制。菜发酵工厂在中试试验中还成功地运用了电子称加三阀控制的自动补科系统 至于装液量的问题，应该从以下几个方面考虑： 1、保持在你所需要的转速培养情况下（尤其是在后期，菌丝很多时，转速很高时），不能让发酵液把你的塞子湿掉，容易造成染菌。 2、装液量的体积在消毒过程中，不能因为沸腾把塞子湿掉，或者跑出三角瓶，装液量太多会出现这样的情况。很容易染菌。 3、根据你的菌种的情况和发酵液的粘度，需要的混匀程度等等方面也要考虑。 4、建议你做一个梯度试验（40－50－60－70－80等）就可以找到你所需要的装液量。 关于剩余空气的排除在灭菌完毕后（100度左右），立刻用盖子或者其他的用品把你的培养摇瓶盖好，有时候这么点空气根本对兼性厌氧发酵没有什么影响，如果你的菌种要求很严的话，最好用干冰加入已经灭菌的空摇瓶后，立刻用其他的样品培养基分装即可。当然也可以用氮气。最好是二氧化碳。 你可以再查查看是否有其他的方法，我说的也不完全。！！
发酵工艺优化
发酵工艺优化---现代发酵工业调控策略 发布日期：2010-04-10 来源：[标签:来源] 作者：[标签:作者] 浏览次数：716 发酵是细胞大规模培养技术中最早被人们认识和利用的。发酵技术在医药、轻工、食品、农业、环保等领域的广泛应用，使这一技术在国民经济发展中发挥着越来越重要的作用。为了提高发酵生产水平，人们首先考虑的是菌种的选育或基因工程的构建。而实际上，发酵工艺的优化，包括生物反应器中的工程问题，也同样非常重要。发酵环境条件的优化发酵环境条件的优化是发酵过程中最基本的要求，也是最重要、最难掌握的技术指标。温度、pH值、溶氧、搅拌转速、氨离子、金属离子、营养物浓度等的优化控制，依据不同的发酵而有所不同。同时，微生物在 发酵是细胞大规模培养技术中最早被人们认识和利用的。发酵技术在医药、轻工、食品、农业、环保等领域的广泛应用，使这一技术在国民经济发展中发挥着越来越重要的作用。为了提高发酵生产水平，人们首先考虑的是菌种的选育或基因工程的构建。而实际上，发酵工艺的优化，包括生物反应器中的工程问题，也同样非常重要。发酵环境条件的优化发酵环境条件的优化是发酵过程中最基本的要求，也是最重要、最难掌握的技术指标。温度、pH 值、溶氧、搅拌转速、氨离子、金属离子、营养物浓度等的优化控制，依据不同的发酵而有所不同。同时，微生物在生长的不同阶段、生产目的代谢产物的不同时期，对环境条件可能会有不同的要求。因此，应该在生物反应器内，使温度、pH值、溶氧、搅拌转速等不断变换，始终为其提供最佳的环境条件，以提高目的产物的得率。在发酵放大实验中，一般都很注重寻找最佳的培养基配方和最佳的温度、pH值、溶氧等参数，但往往忽视了细胞代谢流的变化。例如：在溶解氧浓度的测量与控制时，关心的是最佳氧浓度或其临界值，而不注意细胞代谢时的摄氧率；用氨水调节pH值时，关心的是最佳pH值，却不注意添加氨水时的动态变化及其与其他发酵过程的参数的关系，而这些变化对细胞的生长代谢却非常重要。基于此，华东理工大学的张嗣良提出了“以细胞代谢流分析与控制为核心的发酵工程学”的观点。他认为，必须高度重视细胞代谢流分布变化的有关现象，研究细胞代谢物质流与生物
发酵过程中的优化
发酵过程中的优化 高望 （兰州理工大学生命科学与工程学院） 摘要：发酵过程优化控制技术是发酵工程的重要技术。综述了近年来微生物发酵过程优化控制技术的研究现状，综合运用微生物反应计量学、生化反应和传递动力学、生物反应器工程及代谢工程理论，(1) 基于微生物反应计量学的培养环境优化技术；(2) 基于微生物代谢特性的分阶段培养技术；(3) 基于反应动力学模型的优化技术；(4) 基于代谢通量分析的优化技术；(5) 基于系统观点的生物反应系统优化技术；（6）基于环境胁迫的优化技术；（7）基于辅因子调控的优化技术 关键词：发酵过程优化 1 发酵过程优化技术 1.1基于微生物反应计量学的培养环境优化技术 研究微生物从培养基中摄取营养物质的情况和营养物质通过代谢途径转化后的去向，确定不同环境条件对微生物生长和代谢产物分布的影响，进而优化微生物生长的物理和化学环境，保证微生物生长处于最适的环境条件下，为进一步的发酵过程优化奠定基础。：(1) 培养基组成的优化技术。 (2) 发酵环境条件的优化技术。研究表明，培养基中的氮含量与葡
萄糖消耗及丙酮酸积累密切相关。氮源缺乏时, 葡萄糖消耗和丙酮酸生产均受到抑制。在小型反应器流加发酵中采用氨水控制pH 值( 相当于同时提供氮源) , 细胞能够持续、快速地积累丙酮酸。[1]李寅；陈坚；梁大芳营养条件对光滑球拟酵母发酵生产丙酮酸的影响[J]生物工程学报2000,16（2）：225-227 1.2 基于微生物代谢特性的分阶段培养技术 对分批发酵过程的研究发现，适合微生物生长的温度、pH 值、剪切和溶解氧浓度往往并不一定适合目标产物的形成，提出分阶段溶解氧和搅拌转速控制策略、分阶段温度控制策略及分阶段pH 值控制策略，将环境条件控制在最适合细胞生长或最适合产物合成的水平。研究表明，郑美英等以Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｍｏｂａｒａｅｎｓｅ为出菌株，研究了培养中温度控制策略，并在小型发酵罐上进行了验证。得出ＴＧ发酵过程中温度控制策略为：Ｏ～１８ｈ，控制温度为３２℃，１８ｈ后将温度切换到２８℃。采用此温度控制策略在２．５Ｌ小罐上进行ＴＧ发酵，酶活比未控制温度时的最好水平提高了１４%，发酵时间也缩短了６ｈ。由此可见，采用合理的温度控制策略确实能够显著提高ＴＧ的发酵过程中的各项指标。郑美英堵国成陈坚分批发酵生产谷氨酰胺转氨酶的温度控制策略[J]生物工程学报，200,16（6）：759-761 刘延岭，邓林，周昌豹，陈丽微生物发酵生产谷氨酰胺转胺酶的研究进展四川食品与发酵 2004,4：1-4 1.3 基于反应动力学模型的发酵过程优化和控制技术 研究不同目标代谢产物发酵过程的反应动力学，应用统计热力学理论和功能单元扩展理论，建立目标代谢产物分批发酵过程的动力学模型，用龙格库特法求取模型方程数值解，然后用单纯形搜索法或最速下降法寻出动力学模型方程中的最优参数，并对动力学模型的适用性进行评价。基于分批发酵动力学模型，在下列3 个方面已取得一定成果：①采用奇异优化理论，优化透明质酸的流加培养过程，并通过重复操作和优化补料组合发酵模式，显著提高透明质酸的生产强度[23]；②应用最小值原理，分别建立真氧产碱杆菌细胞生长期和聚羟基丁酸合成期底物流加的准优化控制策略，确定以指数速率流加和变速流加相结合的流加操作方式，得到以聚羟基丁酸最大生产强度和最高转化率为目标的准优化控制策略并成功应用[24－25]；③在无反馈控制的情况下，比较了不同流加培养模式对重组大肠杆菌生产谷胱甘肽的影响，发现采用简单的指数速率流加方式即可实现重组大肠杆菌的高密度培养[26]。 1.4 基于代谢通量分析（MFA）的发酵过程优化技术 参考已知的生化反应计量关系和特定微生物的代谢途径和生理代谢特征，构建生物合成特定目标代谢产物的代谢网络。利用代谢通量分析方法，对代谢中间产物进行拟稳态假设，然后通过测定细胞和代谢产物浓度的变化速率，计算得出胞内各条代 谢途径的通量变化。根据代谢通量分析的计算数据，分析特定目标代谢产物，如丙酮酸、透明质酸和生物絮凝剂生物合成途径中主要代谢节点的性质(刚性、弱刚性或弹性)，结合发酵
发酵工艺优化
发酵工艺优化 发酵工艺优化 从摇瓶试验到中试发酵罐试验的不同之处 1、消毒方式不同，摇瓶是外流蒸汽静态加热（大部分是这样的），发酵罐是直接蒸汽动态加热，部分的是直接和蒸汽混合，会因此影响发酵培养基的质量，体积，PH，透光率等指标。扩大时摇考虑 2、接种方式不同，摇瓶是吸管加入，发酵罐是火焰直接接种（当然有其他的接种方式），要考虑接种时的菌株损失和菌种的适应性等。 3、空气的通气方式不同，摇瓶是表面直接接触。发酵罐是和空气混合接触，考虑二氧化碳的浓度和氧气的融解情况。 4、蒸发量不同，摇瓶的蒸发量不好控制，湿度控制好的话，蒸发量会少。发酵罐蒸发量大，但是可以通过补料解决的。 5、搅拌方式不同，摇瓶是摇转方式进行混合搅拌，对菌株的剪切力较小。发酵罐是直接机械搅拌，注意剪切力的影响和无菌的影响。 6、PH的控制，摇瓶一般通过碳酸钙和间断补料控制PH，发酵可以直接流加控制PH，比较方便。 7、温度控制，摇瓶是空气直接接触或者传热控制温度，但是发酵罐是蛇罐或者夹套水降温控制，注意降温和加热的影响。 8、注意染菌的控制方法不一样，发酵罐根据染菌的周期和染菌的类型等可以采取一些必要的措施减少损失。 9、发酵罐可以取样或者仪表时时检测，但是摇瓶因为量小不能方便的进行控制和检测。 10、原材料不一样，发酵所用原材料比较廉价而且粗旷，工艺控制和摇瓶区别很大等等 发酵工艺中补料的作用 补料分批培养(fed—batch culture简称FBC)是指在分批培养过程中、间歇或连续地补加一种或多种成分的新鲜培养基的培养方法、与传统的分批集中补料培养相比、它有以下优点： (1)可以避免在分批发酵中因—次投料过多造成发酵液环境突变，造成菌丝大量生长等问题，改善发酵液流变等性质，使得发酵过程泡沫得以控制，节省消泡剂，并提高了装罐系数。 (2)可以控制细胞质量，以提高芽抱的比例，并使pH得以稳定。 (3)可以解除底物抑制，产物反馈抑制和分解阻遏。 (4)可以使“放料和补料”方法得以实施。该方法在发酵后期、产生了一定数量代谢产物后，在发酵液体积测量监控下，放出一部分发酵液，同时连续补充——部分新鲜营养液，实现连续带放、既有利于提高产物产量．又可降低成本，使得发酵指数得以大幅度提高。 (5)利用FBC技术、可以使菌种保持最大的生产力状态．随着传感技术以及对发酵过程动力学理沦深入研究、用模拟复杂的数学模型使在线方式实最优控制成为可能。 连续补料控制目前采用有反馈控制和无反馈控制两种方式。有反馈控制：选择与过程直接关系的可检测参数作为控制指标，例如可以测量、控制发酵液PH、采用定量控制葡萄糖流加。稳定PH在次级代谢最旺盛水平。而无反馈控制FBC是指无固定的反馈参数，以经验和数学模型相结合的办法来操作最优化控制、从而使抗生素发酵产量得以大幅度提高。例如发酵过程中前体的补加。由此可见，要实现对发酵过程的有效控制，就先要解决补科的连续控制问题。 目前国外发酵生产过程连续补料采用：流量计(电磁流量计、液体质量流量计)、小型电动、气动隔膜调节阀和控制器来实现连续补料控制。菜发酵工厂在中试试验中还成功地运用了电子称加三阀控制的自动补科系统
微生物发酵过程优化控制技术进展
微生物发酵过程优化控制技术进展 摘要发酵工程是生化工程和现代生物技术及其产业化的基础。在发酵工程领域，为了提高发酵水平和生产率，更多的研究工作集中在菌种的筛选和改造上。随着生物科学技术的发展，基因工程与代谢工程研究领域都出现了长足的进步与发展，利用基因重组与诱发等技术可以实现高产菌株普遍生产。但只有通过发酵过程的优化控制，才能实现产品质量最高、生产力最大、成本消耗最低的生产过程，因此对微生物发酵过程的优化控制成为发酵工程中研究人员日益关注的焦点。 关键词微生物发酵；影响因素；优化控制技术 1 培养基对发酵的影响 1.1 发酵培养基碳源和氮源的选择 碳源用于提供微生物能量来源、构建细胞以及形成产物。碳源包括单糖、双糖、多糖、天然复合物、油脂等，比如葡萄糖、蔗糖、淀粉以及豆油等。氮源是微生物蛋白质和其他含氮有机物的重要来源，与此同时，氮源也参与形成含氮产物。氮源包括无机氮源以及有机氮源，比如氨盐、硝酸盐、蛋白胨以及豆粉等。 1.2 发酵培养基中无机盐对发酵的影响 无机盐对代谢产物的生成及微生物的正常生长都具有相当重要的影响。在微生物的生长代谢过程中，磷参与了微生物细胞中核酸等辅酶的构成，是微生物能量代谢、生长的重要因素之一。在苏云金芽泡杆菌的发酵产物苏云金素的分子结构中包含磷酸根，所以在其发酵培养基中添加更多磷酸盐，更有利于产物苏云金素的合成。钙离子在微生物发酵过程中的主要作用是调节细胞的生理状态，比如说维持细胞的胶体状态、降低细胞膜的通透性等。与此同时，在大多数发酵培养基里面，添加适量的CaCO3，能够对发酵液含菌量的变化起到相当明显的影响，其主要原因是CaCO3的添加对发酵液的pH具有非常良好的缓冲作用，从而大大改善了菌体的生长环境。镁元素是许多酶的催化剂。锰、锌、铁、钼以及钴等元素是微生物所需要的微量元素[1]。 2 培养条件对发酵的影响 2.1 种子质量对发酵的影响 在发酵培养基中接入合适的接种量以及种龄适宜的优质种子液，能够使目标微生物更加迅速地进入到对数生长期，从而使发酵周期大大地减短，进而促使产物质量得以有效提升。如果种龄过长则会直接导致菌体过早的发生衰退，菌体的生产能力也随之而有一定程度的下降；如果种龄过短，则会直接导致菌体生长缓慢，产物合成时间大大推迟。若接种量过小，那么便会使得菌体细胞的生长量变
发酵工艺条件的优化修订稿
发酵工艺条件的优化集团档案编码：[YTTR-YTPT28-YTNTL98-UYTYNN08]
发酵工艺条件的优化 发酵优化对于搞发酵的工作者而言是非常必需的，下面结合其他战友的一些经验之谈引出此专题，希望大家踊跃讨论，以其提高发酵水平和解决实际问题。 发酵工艺的优化在发酵行业起到很大的作用,尤其是在发酵生产中,它是提高发酵指标的一项非常,有用的技术手段.同时也是搞发酵行业的人的必备知识要求之一,借此我想通过和大家交流共同提高发酵方面的知识水平.发酵工艺优化方法与思路:发酵工艺优化的方法有很多,它们之间不是孤立的,而是相互联系的。在一种发酵中,往往是多种优化方法的结合,其目的就是发酵是细胞大规模培养技术中最早被人们认识和利用的。发酵技术在医药、轻工、食品、农业、环保等领域的广泛应用，使这一技术在国民经济发展中发挥着越来越重要的作用。为了提高发酵生产水平，人们首先考虑的是菌种的选育或基因工程的构建。而实际上，发酵工艺的优化，包括生物反应器中的工程问题，也同样非常重要。发酵环境条件的优化是发酵过程中最基本的要求，也是最重要、最难掌握的技术指标。温度、pH值、溶氧、搅拌转速、氨离子、金属离子、营养物浓度等的优化控制，依据不同的发酵而有所不同。同时，微生物在生长的不同阶段、生产目的代谢产物的不同时期，对环境条件可能会有不同的要求。因此，应该在生物反应器内，使温度、pH值、溶氧、搅拌转速等不断变换，始终为其提供最佳的环境条件，以提高目的产物的得率,在发酵放大实验中，一般都很注重寻找最佳的培养基配方和最佳的温度、pH值、溶氧等参数，但往往忽视了细胞代谢流的变化。例如：在溶解氧浓度的测量与控制时，关心的是最佳氧浓度或其临界值，而不注意细胞代谢时的摄氧率；用氨水调节pH值时，关心的是最佳pH值，却不注意添加氨水时的动态变化及其与其他发酵过程的参数的关系，而这些变化对细胞的生长代谢却非常重要。 注意:大家可以从以下各个方面进行交流.尽量能够分类进行叙述,我总结了以下几累,也不是很全,当然从其他的方面进行交流也可以,但是希望你注明附加说明!!!谢谢大家的参与!!!!!!!!!一. 好氧发酵1. PH 工艺的优化2. 溶氧工艺的优化3.原材料工艺的优化4.消毒(灭菌)工艺的优化5.菌种制备工艺的优化6.小试到中试,中试到生产等扩大实验的工艺优化7.成本工艺优化8.种子罐工艺的优化9.发酵罐工艺参数控制的优化10.仪表控制的工艺优化11.环境的工艺优化12.染菌处理的工艺优化13.紧急情况处理的工艺优化(停电\停水\停气\停汽等)14.补料工艺的优化15.倒种工艺的优化16发酵设备的工艺优化17.其他的工艺优化 二. 厌氧工艺的优化三.固体发酵的工艺优化四.其他1. PH工艺的优化A.配料中的PH 很重要,其中有配前PH,配后PH,消前PH,消后PH,接种前PH,工艺控制PH等,配前PH,配后PH,可以用来检测厡材料的质量,初步估计配料的情况,如果出了错误,有时候可以从PH中的变化看出来,能够减少错误的发生.B.另外,每次有新的配方我们总是要用PH方法检测其中的每种厡材料是否会和其他的发生反应,可以互相两两混合,检测PH的变化,也可以用来作为配微量元素的检测.C.消前PH可以用来减少消毒过程对培养基的破坏,因为培养基在消毒中会有PH的变化,在不同的PH条件下对培养基破坏也不一样,因此可以在消毒的时候选择合适的PH,消毒完后可以调节过来,这样一来可以对PH敏感的一些原材料减少破坏,这种方法在生产中已经取得了初步的成绩,提高了指标.D.工艺控制的PH,在发酵的产抗期间,通过在不同的发酵时间调整不同的P H,可以减少杂质的产生,同时还可以缓解溶氧,比如在头孢发酵中,通过在后期调整PH可以减少DCPC的含量,给提取工序带来很大的好处,E.补料罐通过PH的调节可以更好的通过流加物料而不影响发酵.(部分发酵在不同时期的PH有所不同,所以通过补料罐的调整可以对发酵指标有所提高)F.发酵过程中的PH调节可以通过各种方法,不一定要添加氨水和氢氧化钠,可以添加玉米桨等其他的物料来进行调节.G.控制放罐时的PH可以对后面的过滤有所影响,所以一定要控制好放罐前的PHH.绘制种子瓶和种子罐以及发酵罐等整个发酵过程的PH生长曲线,可以用来参考控制工艺,检测无菌情况的发生.A. 华东理工大学的张嗣良提出了“以细胞代谢流分析与控制为核心的发酵工程学”的观点。他认为，必须高度重视细胞代谢流分布变化
微生物发酵过程优化控制技术进展
CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS 2008年第27卷第8期·1210· 化工进展 微生物发酵过程优化控制技术进展 王建林，冯絮影，于涛，薛尧予 （北京化工大学信息科学与技术学院，北京 100029） 摘要：微生物发酵过程优化控制技术是发酵工程的重要技术。综述了近年来微生物发酵过程优化控制技术的研究现状，讨论了机理分析建模、黑箱建模、混合建模等发酵过程建模方法，对基于模型的优化控制策略进行了分析。指出了基于混合模型和多目标优化策略建立动态优化控制器，是微生物发酵过程优化控制的有效方法，并给出了实现优化控制需要解决的关键问题。 关键词：发酵过程；过程建模；非线性控制；优化控制 中图分类号：TP 18；TP 274 文献标识码：A 文章编号：1000–6613（2008）08–1210–05 Research progress of optimal control techniques in fermentation process WANG Jianlin，FENG Xuying，YU Tao，XUE Yaoyu （School of Information Science and Technology，Beijing University of Chemical Technology，Beijing 100029，China）Abstract：The optimal control technology of the microbial fermentation process is a crucial part of fermentation engineering. The researches on bioprocess optimal control techniques in recent years are reviewed from two points，modeling and control methods. The modeling techniques include the mechanism based methods，the experience based ‘black-box’ methods，and the hybrid methods by combining different modeling techniques. The progress of the research in the model based optimal control strategies are reviewed. It demonstrates that an efficient method to deal with the control problems in bioprocess optimization is to construct a dynamic optimization controller，based on hybrid modeling and multi-objective optimization techniques. Finally，some important problems which need to be resolved in the implementation of fermentation optimal control are presented. Key words：fermentation process；process modeling；non-linear control；optimal control 发酵工程是生化工程和现代生物技术及其产业化的基础。在发酵工程领域，为了提高发酵水平和生产率，更多的研究工作集中在菌种的筛选和改造上[1]。尽管现代生物技术在基因工程和代谢工程领域内有了长足的进展，通过诱发变异、基因重组和培养能够得到高产菌株，然而，通过优化控制使发酵过程产品生产最优（即生产能力最大、成本消耗最低、产品质量最高）仍是发酵工程领域中存在的主要问题之一，因此对微生物发酵过程优化控制的研究日益受到重视。微生物发酵过程优化控制的主要问题是建立过程模型和制定优化控制策略和算法。近年来，微生物发酵过程优化控制技术研究已经取得了一些进展，发酵过程建模方面的主要研究成果包括：机理分析建模、黑箱建模和混合建模。发酵过程优化控制策略方面的主要研究成果包括：基于线性化近似的经典优化控制，基于直接寻优算法的仿真优化控制，基于非线性系统理论的优化控制以及基于人工智能技术的优化控制。 1 微生物发酵过程建模 1.1 基于过程机理分析的建模 发酵过程机理分析建模是基于质能平衡、Monod方程、Contois方程等建立过程机理模型[2]，以及从基因分子、细胞代谢和反应器等多尺度建立 收稿日期：2007–12–28；修改稿日期：2008–03–25。 基金项目：国家自然科学基金资助项目（20676013）。 第一作者简介：王建林（1965—），男，博士，教授，主要研究方向 为复杂工业过程智能检测与优化控制。电话010–64433803；E–mail wangjl@https://www.sodocs.net/doc/c59077383.html,。