蛋白质组学期末复习题

蛋白质组学相关试题及答案

解释

1． Proteome(蛋白质组)：由一个细胞或者组织的基因组所表达的全部相应的蛋白质，称为蛋白质组。

2. Proteomics(蛋白质组学)：指应用各种技术手段来研究蛋白质组的一门新兴学科，即研究细胞在不同生理或病理条件下蛋白质表达的异同，对相关蛋白质进行分类和鉴定。更重要的是蛋白质组学的研究要分析蛋白质间相互作用和蛋白质的功能.

3. Mass Spectrometer（质谱仪）：质谱仪是一个用来测量单个分子质量的仪器，但实际上质谱仪提供的是分子的质量与电荷比（m/z or m/e）。分离和检测不同同位素的仪器。即根据带电粒子在电磁场中能够偏转的原理，按物质原子、分子或分子碎片的质量差异进行分离和检测物质组成的一类仪器。质谱仪最重要的应用是分离同位素并测定它们的原子质量及相对丰度。

4. Proteome sample holographic preparation（蛋白组样品的全息制备）：（1）keep protein information

（2）adapted to separation and identification methods

（3）different samples,different extraction.

蛋白质样品制备是蛋白质组研究的第一步，也是最关键的一步。因为这一步会影响蛋白质产量、生物学活性、结构完整性。因此要用最小的力量使细胞达到最大破坏程度同时保持蛋白质的完整性。原则是，保持蛋白质的所有信息；选择合适的分离和鉴定方法；对于不同的样品要用不同的提取方法。

5. Post translational modification(蛋白质翻译后修饰)

肽链合成的结束，并不一定意味着具有正常生理功能的蛋白质分子已经生成。已知很多蛋白质在肽链合成后还需经过一定的加工（processing）或修饰，由几条肽链构成的蛋白质和带有辅基的蛋白质，其各个亚单位必须互相聚合才能成为完整的蛋白质分子。

6. De novo sequencing(从头测序)

从头测序为蛋白质组研究提供了一种不用借助于任何蛋白质序列数据库信息，直接解读串联质谱数据的方法。其基本算法主要由4个部分组成：质谱图的构建、

离子类型的确定、测序算法以及打分算法。

7. Tandem mass spectrometry(串联质谱)

串联质谱法是指用质谱作质量分离的质谱方法。它还有几种名称，如质谱-质谱法、多级质谱法、二维质谱法和序贯质谱法。

作用：1、诱导第一级质谱产生的分子离子裂解，有利于研究子离子和母离子的关系，进而给出该分子离子的结构信息。

2、从干扰严重的质谱中抽取有用数据，大大提高质谱检测的选择性，从而能够测定混合物中的痕量物质。 s

8.Peptide mass fingerprint(肽指纹谱)

peptide molecular weight肽指纹图谱，PMF，peptide mapping fingerprint,蛋白酶解后产生多个肽片断，然后利用质谱（通常用MALDI－TOF）测量这些肽段的分子量，然后上网进行蛋白谱库搜索，以确认此蛋白是何种蛋白，此为PMF。这些肽段就像蛋白的指纹一样，有了这些肽段，就可以确认蛋白了。

9. Collision-induced dissociation(CID)(碰撞诱导解离)：

离子经过电喷雾源在进入质量检测器前，施加一定的电压，使离子的运动速度大大提高，当离子与中性分子撞击时，发生如下反应：A++N→(A+)*→B++C++D+ 10. Peptide sequence tag 肽序列标签：将蛋白质进行酶切降解做电喷雾质谱产生包括多电荷峰在内的肽质量指纹谱，选择有一定丰度的双电荷峰经气体碰撞活化池碰撞后产生碎片，其中包含着结构信息，由这些信息可以推出蛋白质的某一肽段的部分氨基酸序列测定出的部分氨基酸序列和其序列两段的质量称为肽序列标签。

11. Phage display technology（噬菌体展示技术）：

To allow the presentation of large peptideand protein libraries on the surface of filamentous phage,which leads to the selection of peptides and proteins。噬菌体展示技术是一种基因表达产物和亲和选择相结合的技术，他以改构的噬菌体为载体，把待选基因片段定向插入噬菌体外壳蛋白质基因区，使外源多肽或蛋白质表达并展示于噬菌体表面，进而通过亲和富集法表达有特异肽或蛋白质的噬菌体

12. Two-dimensional Gel Electrophoresis双向凝胶电泳（2-DE）：

即双向凝胶电泳（2-DE），该技术是根据蛋白质的等电点和分子量的差异，连续进行垂直方向的两次电泳而将待测蛋白质进行分离。第一向为等电聚焦（IEF）电泳，其基本原理是利用蛋白质分子的等电点的不同进行蛋白质的分离。第二向为十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE），其基本原理是利用蛋白质分子量大小的不同进行蛋白质分离，从而把复杂蛋白质混合物在二维平面上分开。该技术是目前蛋白质组学研究中分辨率最高，信息量最大的分离技术，是比较蛋白质组学研究中也是不可取少的手段。

13. Structural biology（结构生物学）：is a branch of molecular biology, biochemistry, and biophysics concerned with the molecular structure of biological macromolecules, especially proteins and nucleic acids, how they acquire the structures they have, and how alterations in their structures affect their function. 以生物大分子的特定空间结构及结构的特定运动与其生物学功能的关系为基础，阐明生命现象的学科。研究特殊分子的性质以及分子间的相互作用，如膜蛋白的拓扑学、蛋白质的二级结构中残基的接近和移动以及蛋白质的三级折叠等。

14. Protein-protein interaction（蛋白质互作）：（1）Proteins might interact for a long time to form part of a protein complex（2）a protein may be carrying another protein （3）a protein may interact briefly with another protein just to modify it 蛋白质之间的相互作用。蛋白质之间的相互作用是蛋白质发挥调节作用的重要方式。

15. Yeast Two-Hybrid Assays（酵母双杂交分析）：a molecular biology technique used to discover protein-protein interactions by testing for physical interactions (such as binding) between two proteins 酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白－蛋白的相互作用。主要有二类载体: a 含DNA -binding domain的载体; b 含DNA-activating domain 的载体。上述二类载体在构建融合基因时，测试蛋白基因与结构域基因必须在阅读框内融合。融合基因在报告株中表达，其表达产物只有定位于核内才能驱动报告基因的转录。

16. Matrix-assisted laser desorption/ionization基质辅助激光解吸电离

技术 (MALDI) 是以激光脉冲照射在固定于平面电极上的蛋白质分子，经平行电场加速，再由质谱仪进行分析。以波长337nm的氮气激光脉冲击打固定于基质上的蛋白质分子，使得蛋白质从基质上游离并带上微弱的正电荷。此时再经由高能平行电场加速提高核质比，进入质谱仪进行分析，此方式能分析带电量低的分子，以及含有许多不同种类分子的混合物

17. Subproteomics:亚蛋白质组学

Proteins located in subcellular structure亚细胞结构, such as membrane proteome

亚细胞蛋白质组学是以亚细胞结构如亚细胞区室、特定蛋白质组分、细胞器等所包含的所有蛋白质为研究对象的一个蛋白质组学的分支学科。亚细胞结构在细胞的生命活动中都与特定的细胞功能相联系。分离、鉴定其在不同生理状态下的蛋白质表达情况对于全面了解细胞的功能具有重要意义。由于亚细胞蛋白质组学研究的着眼点在蛋白质组的特定成分，而非整个蛋白质组，就有效的能够有效弥补目前蛋白质组研究方法学上的不足。即一方面可以为我们提供更多生命活动的本质、细胞功能紊乱的分子机制等信息。另一方面多种疾病相关的基因表达产物与某些特定的细胞器相关联，直接分析这些细胞器的蛋白质表达变化，能够更容易、更快速地寻找到有诊断、治疗价值的信息。

18. ICAT: Isotope-Coded Affinity Tags

Determine differences in protein expression by measuring relative TOF MS intensities of light vs. heavy MS/MS and sequence tag searching同位素标记的亲和标签（ICATs）是一种免费方法凝胶定量蛋白质组学上依赖化学标记试剂。[1] [2]这些化学探针元素一般包括三个：一组定义能够反应标签的氨基酸侧链（例如，碘乙酰胺修改半胱氨酸残基），一同位素编码的连接器和一个标签（例如，生物素肽）的蛋白质/亲和隔离标记。对于两个蛋白质组定量比较，一个样品的同位素标记光（第0）探针和与同位素重（D8的）版本等。为了尽量减少错误，然后合并两个样本）消化蛋白酶（如胰蛋白酶，并受到素亲和层析分离试剂标记同位素标记肽编码。然后分析这些肽是由液相色谱质谱（LC - MS法）。大规模的差异标记肽对信号强度的比率量化来确定两个样本

的蛋白质的相对水平。

19. MALDI TOF MS

即基质辅助激光解析离子化/飞行时间质谱，是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱，仪器主要由两部分组成：基质辅助激光解析电离离子源（MALDI）和飞行时间质量分析器（TOF）。MALDI的原理是利用一定波长的激光脉冲，在极短的时间间隔内，对含被测样品靶物的一个微小区域提供高能量，从固相直接获得离子的电离方法。因此它是一种软电离技术，适用于混合物及生物大分子的测定，并特别适用于对热敏感化合物或不会发化合物的离子化。TOF的离子分离是用非磁方式达到的，离子在离子源中形成后被电场加速，进入真空无场漂移区，具有不同质荷比的离子因其通过漂移区的时间不同而实现分离，先后到达检测器而产生信号。MALDI-TOF-MS无论在理论上还是在技术上都十分简单、高效、快速、准确，并且质量测定范围大，故为生命科学等领域提供了一种强有力的分析测试手段，并正扮演着越来越重要的作用。

20. 离子交换层析：

离子交换层析是利用离子交换剂对分离的各种离子有不同的亲和力而达到分离的目的。这种亲和力是基于各种离子所带电荷的不同，对相近的生物分子带电量有差别就可达到分离的目的。生物分子几乎都具有极性而且带电，所以离于交换层析在生化分离技术上，成为极有用的一种工具。

用离子交换剂作为支持物，或固定相，在离子交换剂上含有许多可解离的基团，这些基团可以与溶液中的离子进行交换。离子交换的原理是基于溶液中分子所带电荷不同而进行分离的一种技术。

问答题

1、Describe the main steps, principles and disadvantages of two-dimensional gel electroporesis?

双向电泳的主要步骤和原理，缺陷与面临的挑战是什么？

主要步骤：样品制备，双向电泳，着色或印记，图像分析，切除溶解，质谱分析，生物信息学鉴定

原理：双向电泳的第一向是等电聚焦电泳，根据蛋白质的PI不同进行分离，第

二向为变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，根据分子量不同进行分离，样品经过电荷和质量两次分离后，得到等电点和分子量的信息。

缺陷和挑战：

（1）对低丰度蛋白质的检测来说灵敏度不够

（2）对劳动密集性的工作/费力和费时的操作程序

（3）不同实验间蛋白质所在位置的漂移

（4）不能全面代表膜蛋白或疏水蛋白的真实情况

（5）某些蛋白质在等电聚焦缓冲液中低溶解度

（6）蛋白质间着色的差异引致定量的误差

（7）碱性蛋白检测难

（8）特大分子量的蛋白质的检测难

（9）特小分子量的蛋白质的检测难

（10）蛋白质从1D电转移到2D凝胶过程中的损失

（11）某些蛋白质带电荷的微不均一性

（12）易受污染

（13）要求在变性的条件下进行

2、质谱仪的组成及其主要技术指标。

质谱仪一般由进样装置、离子化原、质量分析器、离子检测器、数据分析系统组成。其中，离子化原用来待分析的分子转化成气态离子。在质量分析器中，不同荷质比m/z离子在一个随时间变化的电场作用下分离。离子检测器用来接受在质量分析器中分离的带有不同荷质比的离子检测m/z值以及不同m/z的离子密度。主要技术指标包括：灵敏度，分辨率，准确度，稳定性，质量范围，动态范围

3. Describe the main parts of biological mass spectrum instrument. Describe the principle and pplication of MALDI. 生物质谱仪主要有哪几部分组成？基质辅助激光解析电离的主要原理是什么？适用于哪些方面？

质谱仪有五个主要的系统：进样系统、离子源系统、质量分析仪、离子探测器、数据处理系统。

MALDI可使热敏感或不挥发的化合物由固相直接得到离子。待测物质的溶

液与基质的溶液混合后蒸发，使分析物与基质成为晶体或半晶体，用一定波长的脉冲式激光进行照射时，基质分子能有效的吸收激光的能量，使基质分子和样品分子进入气相并得到电离。MALDI适用于生物大分子，如肽类，核酸类化合物。可得到分子分离峰，无明显碎片峰。此电离方式特别适合于飞行时间质谱计。4、蛋白质组学定量分析方法的主要原理。

蛋白质组学定量分析主要包括两种方法：

1、建立在2－DE基础上的电泳方法：其原理是通过比较通过比较蛋白质在不同胶上的染色强度来进行相对定量。提供蛋白质表达水平的信息。

2、利用质谱检测技术：对来自不同样品的肽段标上一个内部标准，使得可以识别不同样品来源的肽段，以质谱峰的信号强度就可以作为定量的依据。

5、免疫共沉淀的概念及原理。

Co-Immunoprecipitation（Co-IP），是以抗体-抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。基本原理：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留下来。如果用蛋白质x的抗体免疫沉淀x，那么与x在体内结合的蛋白质y也能被沉淀下来。该技术可用于鉴定两种目标蛋白质是否在体内结合以及进行结合位点分析，还可用来筛选一种特定蛋白质的新的作用搭档。

6、Western Blotting 的流程

第一步：蛋白样品制备

蛋白抽提质量的好坏直接决定着Western结果的好坏，因此，根据标本类型和检测类型选择合适的蛋白制备方法是至关重要的。

第二步：蛋白定量

为确保每个蛋白样品的上样量一致，收集的蛋白样品均应测定蛋白浓度。蛋白浓度的测定方法，应根据组织细胞裂解或匀浆所使用的方法及裂解液的不同选用，因为去垢剂和还原剂等对不同蛋白浓度测定方法的影响差别很大。

第三步：电泳

(1) SDS-PAGE凝胶配制

(2) 样品处理

(3) 上样与电泳

第四步：转膜

具体的转膜时间要根据目的蛋白的大小而定，目的蛋白的分子量越大，需要的转膜时间越长，目的蛋白的分子量越小，需要的转膜时间越短。

转膜效果可以通过预染蛋白质分子量标准观察转膜效。

第五步：封闭

丽春红染色后可用铅笔在膜上做出适当标记，然后用预先准备好的WB洗涤液漂洗3～5min，将膜上的红色洗去。弃去洗液后，加入10%的脱脂奶粉，在摇床上缓慢摇动,室温封闭60min。如背景较高，可以在4℃封闭过夜。第六步：孵育

1．一抗孵育

参考一抗的说明书，按比例稀释一抗。在室温下孵育2小时，然后用WB洗涤液漂洗膜，每次10min，共3次。

2．二抗孵育

参考二抗的说明书，按比例稀释二抗。在室温下孵育1小时，然后用WB洗涤液漂洗膜，每次10min，共3次。

第七步：显色

建议选用Pierce公司生产的ECL发光液。

第八步：显影

ECL发光液处理过的膜，用保鲜袋包裹后，与X光片一起置于暗合中。根据荧光的强弱进行适当时间的曝光，取出X光片置于显影液，定影液中显影。

7. What are the principles for protein sample preparation in 2-PE?please outline the interfering substances in the sample preparation.双向电泳分析中的蛋白质样品的制备原则？

制备原则：（1）要使用新鲜的样品或者速冻（液氮或-70）保存的新鲜样品（2）注意防止污染（3）在合适的盐浓度下溶解所有的蛋白质，实验具有重复性；（4）

避免低溶解度蛋白（膜蛋白）在第一维等电聚焦时沉淀；（5）避免蛋白化学修饰（蛋白降解酶，尿素热分解）（6）去除核酸，多糖，脂类和其它干扰物质；（7）目标蛋白在检测限内，有时需要去除高丰度蛋白（8）处理步骤尽量少，操作过程要在低温中进行，避免蛋白质的降解、修饰。

制备原则：

（1）保留蛋白质的信息

（2）适用于分离和鉴定的方法

（3）不同的样品，不同的提取方法。（细胞、动物组织、植物组织、体液、质蛋白、膜蛋白、核蛋白、低丰度蛋白、目标蛋白）

双向电泳分析中影响样品制备的主要干扰物质有哪些？

主要干扰物质：

（1）盐：（增加导电性，使得等点聚焦所需时间延长，出现电内渗现象（EEO），导致胶内不均匀的水分布（失水区和水过饱和区））

（2）离子去污剂（SDS）：（影响第一维等点聚焦）

（3）核酸：（通过静电作用与蛋白结合，妨碍聚焦过程；可阻碍丙烯酰胺基质孔道）

（4）脂类：（通过疏水作用与蛋白结合，影响等电点及分子量，蛋白-脂类复合物在水溶性溶液中不溶解）

（5）多聚糖：（会阻碍丙烯酰胺基质孔道）

（6）酚类复合物（植物）：通过氢键与蛋白结合

8.蛋白质组学在心血管基础和临床研究中的目的和意义。

①从蛋白质水平研究相关心血管疾病的发病机制；

②应用心血管疾病蛋白标记物来更早、更准确地检测心血管疾病，尤其是急性冠脉综合征(ACS)；

③蛋白质组学来源的信息作为目前患者诊断的补充；

④蛋白质组检测获得的信息有利于个体化治疗，为其提供新的治疗靶位；

⑤蛋白质组学检测工具和信息用于治疗的各个阶段，可以适时评估治疗的效果和

校正治疗方案。

9. 层析法的概念和分类

（一）定义

层析分离技术(色层法)：是一种物理分离方法，利用混合物中各组分物理化学性质的差别（如吸引力，分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等），使各组分以不同程度分布在两个相中，其中一个相为固定的，称为固定相，另一相则流过此固定相，称流动相，从而使各组分以不同速度移动而达到分离。

将分离的样品加到柱上(层析介子上)称上样或加样；使样品分离的操作叫洗脱，洗脱的溶剂叫洗脱液，也称流动相。以洗脱液的体积为横坐标，组兮的浓度为纵坐标作图，称洗脱曲线或层析图。

（二）层析法分类

根据分离原理分类：

（1）吸附层析：用吸附剂作为支持物，一种吸附剂对不同的物质有不同的吸附能力。在洗脱过程中，不同物质在柱上的迁移速度不同，在最后完全被分离。

（2）分配层析：它是根据在一个有不同组分同时存在的溶剂系统中，不同物质的分配系数不同而设计的一种层析方法。

（3）离子交换层析：用离子交换剂作为支持物，或固定相，在离子交换剂上含有许多可解离的基团，这些基团可以与溶液中的离子进行交换。离子交换的原理是基于溶液中分子所带电荷不同而进行分离的一种技术。

（4）凝胶层析：用一种具有一定孔径大小凝胶颗粒为支持物的层析法，分子大小不同的物质随洗脱液流过柱床时，分子量大于凝胶孔径的物质不能进入胶中而首先被洗脱，分子量小的进入胶中流程长而后被洗脱。因此这是一种根据分子量大小不同进行分离的方法。

（5）亲和层析：这是专门用于分离生物大分子的层析法。它是利用一种特殊吸附剂作固定相，根据溶液中生物分子化学结构与功能的不同进行选择性的（专一性的）及可逆性吸附，通过适当方法进行解吸附。实际也是一种吸附层析。

举例题

1、请列举预测蛋白质相互作用的方法。

1、酵母双杂交法：主要原理是将可能存在相互作用的蛋白之一与Gal4的DB结构域融合。另外一个与Gal4的AD结构域的酸性区域融合。如果在两个待测蛋白之间存在相互作用, 那么分别位于这两个融合蛋白上的DB和AD就能重新形成有活性的转录激活因子, 从而激活相应基因的转录与表达。通过对报道基因表达产物的检测, 反过来可判别作为“诱饵”和“猎物”的两个蛋白质之间是否存在相互作用。

2、免疫共沉淀法：免疫共沉淀是一种比较经典的蛋白质相互作用方法，其实验比较简单。裂解细胞后，加入抗体，抗原被沉淀下来后洗涤，去除非特异性亲和再分析结合复合体。目前常使用Pull－down实验结合免疫共沉淀可以对可能的蛋白质相互作用进行验证。

3、高通量质谱蛋白质鉴定：使用一分子标签如FLAG标记把蛋白，使融合蛋白在细胞内过表达。通过免疫亲和（FLAG抗体）捕获到抽提物中把蛋白形成的蛋白质复合物。SDS-PAGE分离复合体各组分，胰酶酶切后，进行质谱分析。此法适合于分析天然状态下细胞内浓度较低的蛋白质，但是如果蛋白质浓度过高则背景较强，产生假阳性。

4、串联亲和纯化（tandem affinity purification, TAP）：该技术核心是设计一个双重分子标签，包括A蛋白（IgG binding protein）、TEV蛋白酶切位点、钙调素结合蛋白。将TAP标签构建到靶蛋白上，然后在宿主细胞内表达融合蛋白，表达水平接近把蛋白的天然状态。可以与把蛋白相互作用的其他蛋白质结合到融合蛋白上，形成复合体。细胞裂解物和IgG基质温浴在一起，通过A蛋白复合物结合在IgG上。冲洗后，加入TEV蛋白酶，洗脱复合物。在Ca2+存在的情况下，洗脱液与包被钙调素的温育在一起，复合物就结合在珠子上。进一步洗去杂质后，加入EGTA鳌合，复合物脱落。SDS-PAGE分离复合体各组分，胰酶切割后进行质谱分析。该方法检测到的蛋白质相互作用更加接近自然条件下蛋白质的性质，包括浓度，定位和翻译后修饰。适合于检测大量蛋白质之间的相互作用而形成的复合物，而不局限在两个蛋白质之间相互作用。但是不能检测蛋白质复合物形成的顺序。需要与酵母双杂交等方法互补。

论述题

1. Describe the difference and relationship between proteomics and genomics.论述蛋白质组学与基因组学的区别和联系。

2. 试述如何应用2D-PAGE进行差异蛋白质组学的研究，并分析其优缺点。

2D-PAGE原理是根据蛋白质的等电点和分子量的差异而使之分别在等电聚焦（isoelectric focusing，IEF）和聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）中分离出来。

应用2D-PAGE进行差异蛋白质组学研究主要步骤有：

1、在应用2D-PAGE研究差异蛋白质组学问题时首先要获得要进行差异比较的组织，如肿瘤组织与癌旁正常组织，然后裂解组织和细胞，抑制蛋白酶活性，出去非蛋白质的DNA，RNA，脂类等物质，溶解蛋白质，溶解并抽提总蛋白质。

2、将准备好的蛋白质进行2D-PAGE实验，先选择合适的PH范围进行等电聚焦，平衡胶条，再进行第二维的聚丙烯酰胺凝胶电泳。

3、对2D凝胶进行染色处理（可选择各种染色方法），利用软件分析比较成对组织的2D结果，找到上调或下调的蛋白质点。

4、将有差异的蛋白质点切割下来进行质谱分析，质谱谱图通过查询数据库找得蛋白质点对应的蛋白质。

5、对于得到的有差异的蛋白质要进一步进行验证，常用的手段包括：Western Blot, RT-PCR, 免疫组织化学等。

利用2D－PAGE进行差异蛋白质组学分析的优点主要在于：

1、效率高：目前，一块胶板(16cm×20cm)可检测到3000～4000个甚至10000个蛋白斑点。

2、可重复性好：80年代开始采用固定化pH梯度胶的IEF，克服了载体两性电解质阴极漂移等许多缺点而得以建立非常稳定的可以随意精确设定的pH梯度，可建立很窄的pH范围(0.05U/cm)，对特别感兴趣的区域做第二轮分析，大大提高了分辨率。固定化pH梯度胶已有商品生产，基本解决了重复性的问题；

3、灵敏度高：SDS-PAGE有垂直板和水平超薄胶电泳两种方法，可分离10～100kD 分子量的蛋白质；银染色法可检测到4ng蛋白，同位素标记法最灵敏，可测定20ppm的标记蛋白。

利用2D－PAGE进行差异蛋白质组学分析的缺点主要在于：

1、对盐，DNA等杂质高度敏感。

2、对于溶解度低的输水性蛋白质，酸性，碱性蛋白质效果不好。

3、对PH和MW的范围有所限制。

4、耗时，无法自动化。

3. 翻译后修饰（包括糖基化、磷酸化、泛素化等）的蛋白质组学研究中共性核心技术是什么？简述如何将这些技术应用到你的课题研究中。

研究翻译后修饰的蛋白质组学方法的共性是都要首先从细胞或组织的总蛋白中分离出带有特定修饰集团的蛋白质，然后经过电泳，酶解，富集有修饰的肽段，最后通过质谱分析和数据库检索确定被修饰的蛋白质种类以及被修饰的位点。例如：设计如下的蛋白质组学课题“高通量寻找食管鳞癌组织中磷酸化修饰异常的蛋白质”，则可以按照上述核心技术流程设计以下实验：

1、设计并制备磷酸化蛋白特异性抗体（单抗或多抗）。

2、分别从食管癌组织和癌旁正常组织中提取总蛋白。

3、分离磷酸化蛋白：使用磷酸化特异性抗体进行免疫共沉淀。或者将磷酸化抗体连在亲和层析柱上，将总蛋白过柱分离磷酸化蛋白质。

4、分离得到的食管癌组织的总蛋白和癌旁正常上皮的总蛋白分别进行2D－PAGE 实验。

5、用软件分析比较2D-PAGE胶，找到有差异的蛋白质点，则可能是磷酸化修饰异常的蛋白质。

6、选取差异的蛋白质点，用酶切成肽段。

7、采用亲和层析法富集磷酸化肽段（因为磷酸化肽段在总肽段中所占比例少，需要富集）。

8、进行质谱分析，数据库检索确定磷酸化肽段序列。再进一步确定磷酸化的蛋白质。

9、为了提高结果的可信度还要在体外验证结果的真实性。如果有条件还要在较大样本中确定这种磷酸化修饰的异常在人群中的比例，以及与食管癌发生发展的关系。

4. 蛋白质组学在研究与应用上有哪些局限性？

答：蛋白质组学在研究与应用上有如下局限性:

1.蛋白质组中的蛋白质数量巨大，据基因组学的研究结果显示，仅一个人体细胞在不同时段，不同水平表达的蛋白质就有15000种之多，但是目前最好的分离方法也只能分离1500种左右的蛋白质。因此，急需建立分辨率更高的分离技术平台。

2.蛋白质组中蛋白质含量的动力学范围很宽。据已有的研究结果表示，细胞内表达的蛋白质的动力学范围为106 ，血浆中表达的蛋白质的动力学范围高达1012 。蛋白质组学的研究要求得到蛋白质组的“全部信息”，同时又坚定具有重要生物学功能的微量蛋白质，而目前还没有一种生物分析化学技术能够完全满足这样的分析要求。

3.临床蛋白质组学研究对检测灵敏度也提出了很高的要求，比如对拷贝数为101 —102 的低表达蛋白质的分析，要求方法学检测灵敏度达到10-22 mol/L甚至更高，而目前的技术难以满足该要求。

4.由于生命活动过程中蛋白质的表达和功能的发挥有着明显的时空依从性，因此对蛋白质组的原位和实时监测非常重要，但是在实际的研究和临床应用中难以实现。

5.对蛋白质相互作用的监测是蛋白质组学研究中一个非常重要的内容，但由于方法本身的限制性和分析条件的特异性，往往会造成假阳性或假阴性的结果。

6.临床样本的处理往往是临床蛋白质组分析中瓶颈环节，临床蛋白质组学研究的试验样本材料难以像实验室研究材料那样严格控制实验条件，因此会对实验结果产生很大的影响。

所以，仅仅通过一、两种技术，显然是不可能完成对蛋白质组内成千上万种不同性质的蛋白质的分离和检验。因此，新的生物分析化学方法学的研究与实践在其中具有重要地位。

教 案(五.1 花键轴的铣削)

教案课程名称：《铣工工艺与技能训练》

课程名称：《铣工工艺与技能训练》 教学过程及内容提要 时间分配及 备注 项目描述 明确铣床的使用常识、安全文明生产要求；掌握铣床操作方法。 能正确和较熟练地安排铣削加工工艺、工序、工步，掌握各种工装、刀具、 夹具的安排和使用技能。 项目目标 通过本项目的学习，明确铣床的使用常识、安全文明生产要求；掌握 铣床操作方法。能正确和较熟练地安排铣削加工工艺、工序、工步，掌握各 种工装、刀具、夹具的安排和使用技能。 在本项目的学习过程中，学生要按照机床操作规程、注重产品的质量、 严格遵守劳动纪律、培养团结合作的职业素质。 一、花键连接简介 花键连接是两零件上等距分布且齿数相同的键齿相互连接，并传递转矩或运动的同 轴偶件，即花键连接是由带齿的轴（外花键）和轮毂（内花键）所组成。 花键连接是一种能传递较大转矩和定心精度较高的连接形式，在机械传动中应用广 泛。机床、汽车、拖拉机、工程机械等的变速箱内，大都用花键齿轮套与花键轴配合的 滑移实现变速传动，如图11.1所示。

课程名称：《铣工工艺与技能训练》 教学过程及内容提要 时间分配及 备注二、花键的种类与工艺要求 1．花键的种类 花键的种类较多，根据键齿的形状（齿廓）不同，可分为矩形齿花键、梯形齿花键、渐开线齿花键等，如图11.2所示。根据花键的定心方法不同，可分为外径 定心花键、内径定心花键和齿侧定心花键。 2.花键的工艺要求 铣床一般只能铣削以大径定心的矩形齿外径花键，这种花键一般有以下工艺要 求： （1）尺寸精度。大径一般要求为h6，g6，f 7或f 9，键宽一般要达到e8， f 9或d9。 （2）表面粗糙度。大径一般要求达到Ra0.8 μm，小径为Ra6.3 μm，键侧 为Ra3.2 μm。 （3）大径与基准轴线的同轴度。 （4）键的形状精度和等分精度。 3、矩形齿花键 矩形齿花键的齿廓为矩形，加工容易，所以得到广泛的应用。矩 形齿花键的定心方式有三种：小径定心、大径定心和齿侧（即键宽）定心， 如图11.3所示。其中，因为内花键的小径可用内圆磨床加工、外花键的小径 可由专用花键磨床加工，可以获得很高

铣工工艺学期末试题一

专业部：机加学科：铣工工艺学出题人王宏伟印制份数：80 适合班级：16数一、四班 一、填空题：（每小题分，共分） 1、铣削加工是以____________作为主运动，________或__________作进给运 动的切削加工方法；一般具有较高的加工精度，其加工经济精度一般____________级，表面粗糙度Ra值为_________。 2、铣削的主要特点是用旋转的________________进行切削加工，所以效率较 高。 3、在铣床上使用各种不同的铣刀可以加工________________， ________________，________________，________________和切断材料等。 使用分度装置可加工________，________，________，________________和________________等。 4、坚持安全文明生产时保障________________和________________的安全， 防止________和________ 的根本保证，也是搞好____________________的重要内容之一。 5、常用的铣床有_______________，_______________，_______________和 _______________四种。 6、X6132型铣床横梁和挂架的主要作用是用来支撑________________，以增 强刀杆的________________。 7、X6132型铣床的主轴为前端带有锥度为________锥孔的主轴。 8、铣刀切削部分常用材料有____________和________________两大类。 9、铣削用量的要素有__________、____________、____________和 _____________。 5、在圆柱形铣刀的铣削过程中，工件上会形成三种表面，即____________________，___________________和___________________。 7、铣削时，工件与__________ 的__________ 称为铣削运动。铣削运动的主运动是_______________________。 8、X6132型铣床工作台面的宽度为__________mm。 9、平面质量的好坏，主要从平面的__________________和表面的

蛋白质组学期末作业

蛋白质组学期末作业

1、一、常用的样品制备技术： 1、高丰度蛋白去除技术（抗体亲和法：通过抗原抗体反应原理，用针对样品中多种高丰度蛋白的单克隆或多克隆抗体来特异性去除样品中的高丰度蛋白；染料亲和法：通过高丰度蛋白与染料环结构之间复杂的静电、疏水及氢键相互作用去除样品中的高丰度蛋白，其特异性相对较低。） 2、自由流电泳技术（FFE）（FFE分离原理－IEF （等电聚焦）条件下：根据等电点的不同进行样品分离，主要用于分离蛋白质。ZE（区带电泳）条件下：根据样品表面电荷密度不同进行分离，主要用于分离细胞器。FFE的特点：1、是基于液体的样品分离/制备技术，与所有下游分离技术兼容；2、分离非常快； 3、液相分离保证初始样品具有很高的回收率； 4、采用连续模式，上样和分离连续同时进行； 5、分析对象广泛； 6、分离条件温和，适合活性生物材料的分离纯化。 二、2－DE技术，即双向电泳，是当前蛋白质组学研究中分辨率最高、信息量最大的分离技术。它的优点有：1. 可以将上千种不同的蛋白质分离开来，并得到每种蛋白质的等电点、表观

质膜的纯度鉴定方法 11、形态学方法（常规透射电镜、免疫电镜观察其切片，纯细胞膜成空的膜泡或片状结构）2免疫印迹法（常用抗体:抗caveolin、Na+--K+--ATPase、flotillin、5`-nucleotidase 等） 3、酶活测定法（测 AP、ADP、Na+-K+-ATPase、5`-nucleotidase的活性） 4、膜组分分析法（分析脂质与蛋白质的比例） 由于细胞器在细胞内结构上与许多其他亚细胞组分相关联，和细胞器组成的动态性，所以分离得到的细胞器很难达到100% 的纯度。所以，亚细胞组分的纯度问题和亚细胞组分生物学功能的深入挖掘是亚细胞蛋白质组研究所面临的挑战。现在已经有一些研究策略来解决这一难点问题，如Schirmer等提出的差减蛋白质组学方法来解决核膜的内质网污染问题；Andersen 等提出的蛋白质校正谱图分析法(protein correlation profiling，PCP)来分析可能定位

生物信息学试题整理

UTR的含义是（B ） A.编码区 B. 非编码区 C. motif的含义是（D ）。 A.基序 B. 跨叠克隆群 C. algorithm 的含义是（B ）。 A.登录号 B. 算法 C. RGR^ （D ）。 A.在线人类孟德尔遗传数据 D.水稻基因组计划 下列Fasta格式正确的是（B） 低复杂度区域 D. 幵放阅读框 碱基对 D. 结构域 比对 D. 类推 B. 国家核酸数据库 C. 人类基因组计划 A. seql: agcggatccagacgctgcgtttgctggctttgatgaaaactctaactaaacactccctta B. >seq1 agcggatccagacgctgcgtttgctggctttgatgaaaactctaactaaacactccctta C. seq1:agcggatccagacgctgcgtttgctggctttgatgaaaactctaactaaacactccctta D. >seq1agcggatccagacgctgcgtttgctggctttgatgaaaactctaactaaacactccctta 如果我们试图做蛋白质亚细胞定位分析，应使用（D） A. NDB 数据库 B. PDB 数据库 C. GenBank 数据库 D. SWISS-PROT 数

据库 Bioinformatics 的含义是（A ）。 A. 生物信息学 B. 基因组学 C. 蛋白质组学 D. 表观遗传学 Gen Bank中分类码PLN表示是（D ）。 A.哺乳类序列 B. 细菌序列 C.噬菌体序列 D. 植物、真菌和藻类序列 ortholog 的含义是（A）0 A.直系同源 B.旁系同源 C.直接进化 D.间接进化 从cDNA文库中获得的短序列是（D ）o A. STS B. UTR C. CDS D. EST con tig的含义是（B ）o A.基序 B. 跨叠克隆群 C. 碱基对 D. 结构域 TAIR （AtDB）数据库是（C）o A.线虫基因组 B. 果蝇基因组 C. 拟南芥数据库 D. 大肠杆菌基因组ORF的含义是（D ）o A.调控区 B. 非编码区 C.低复杂度区域 D. 幵放阅读框

异形零件加工

异形零件的加工 摘要：在我校校办工厂生产中遇到的一种 “拐臂” 零件，该零件具有异形零件的形状复杂、不规则特点，造成加工工艺复杂等棘手问题，使质量和进度受到了很大影响。本文就此“拐臂”零件加工过程中遇到的一些问题为例，经过具体实践分析、总结，对异形零件工艺、夹具、刀具进行合理改良，提高了生产效率，保证了产品的质量，也为同类异形零件的加工提供了参考。 关键词：异形零件 工装 夹具 加工方法 异形零件，即一些形状复杂、不规则的零件。在机械加工中，对于简单的长方体类、轴类零件，使用通用的工艺、夹具就能满足其要求;对于这类复杂或者不规则的零件的加工，采用一般的加工方法很难达到其要求，且其加工工艺相当复杂。而采用科学的工艺流程、设计专用的工装设备则能较好地解决此类零件的加工，特别是批量加工时才能保证加工过程的顺利进行。 该零件形状如图1所示，其材料为铸铁。加工要求： ① 2组厚度为0 05.040-mm 的平面，且2组005.040-的中心平面相距35 〒0.1mm 。 ② φ10mm 、φ16mm 两通孔相距70〒0.05mm,且两孔轴线平行度0.05。 ③ 35mm 〓28mm 封闭孔、35mm 〓20mm 封闭孔两端相切且与φ16mm 基准孔尺寸0 1.0136-

1 最初方案一的工艺流程 工序：①铣削面Ⅰ②铣削面Ⅱ③铣削面Ⅲ④铣削面Ⅳ⑤铣削面Ⅴ ⑥钻、镗φ16基准孔⑦铣削1.0 15 直槽⑧钻镗φ10⑨钻削M16螺纹底 孔⑩铣削35〓28封闭孔、35〓20封闭孔（预钻落刀孔省略）⑾攻M16螺纹⑿去毛刺、交检。 2 分析方案一在加工过程中出现的工艺，夹具，刀具问题 ⑴铣削面Ⅰ中，粗基准选择不合理，没有遵循粗基准选择原则中的较大而平整这一原则。以未加工的面Ⅴ为粗基准，该面小而不平整，加之两侧面为毛坯，很大程度上是以点接触，在受到切削冲击力时，工件的前端就会产生上浮或下沉，至使面Ⅰ过切，面Ⅱ、面Ⅴ余量不均匀甚至局部没加工余量，导致报废。如图2所示

铣工工艺学试卷

一、填空题（0.5′×50 =25′） 1．在铣床上钻孔是主运动，工件或钻头沿的移动是进给运动。 2．钻孔时的切削深度等于麻花钻的一半。 3．用简易镗刀杆在铣床上镗单孔，对刀的方法有、和三种。 4．曲面上凸圆弧面与凹圆弧面相切的部分，应先铣削。 5．铣削等速圆柱凸轮时，交换齿轮的配置方法有和两种。 6．在回转工作台上铣曲面时，应先校正回转工作台轴线与的同轴度，然后校正工件圆弧面轴线与的同轴度。 7．等速圆柱凸轮的工作廓线是；等速盘形凸轮的工作廓线是。 8．铣削圆柱矩形螺旋槽时，选用的立铣刀直径应； 9．球面被截平面分割成两部分，每部分称为；两平行平面截球时，两截平面之间的球面部分称为。 10．当等速圆柱凸轮的导程Ph<16.67 mm时，应采用配置交换齿轮。 11．立铣头主轴轴线与进给方向不平行，镗出的孔呈。 12．用倾斜铣削法铣削等速盘形凸轮时，立铣刀轴线与工件轴线，并相对于工作台台面。 13．直齿条的齿线是于齿的运动方向的直线；斜齿条的齿线是于齿的运动方向的。 14．铣削等速盘形凸轮的方法有和两种。 15．铣削等速盘形凸轮时，为了保证铣削处于逆铣状态，凸轮工件的旋转方向应与铣刀的旋转方向，并从向逐渐铣出。 16．直齿圆柱齿轮的齿线为；斜齿圆柱齿轮的齿线为。 17．直齿圆柱齿轮用于传动；斜齿圆柱齿轮用于或传动。 18．直齿圆柱齿轮的基本参数有、、、和五个。 19．生产现场常用的齿轮的测量有和两种。 20．测量公法线长度时，卡爪与齿面的接触处应尽量在分度圆周附近，因为这个部位的齿廓曲线比较准确。 21．铣削直齿圆柱齿轮时，铣刀廓形的与齿坯中心对不准，会产生现象，影响齿轮的加工质量。 22．斜齿圆柱齿轮中的模数为标准模数，在内具有渐开线齿形。 23．铣削齿条时，控制齿距的方法有、二种。 二、选择题（1′×15 =15′） 1．机用铰刀的校准部分分圆柱部分与倒锥部分，其中倒锥部分起作用。 A．减少摩擦 B．修光加工表面 C．导向 2．在铣床上用机用铰刀铰削直径为16 mm的孔时，铰削余量一般取 mm。 A．0．05 B．0．10 C．0．20 D．O．50 3．在铣床上镗孔，孔距精度可控制在 mm左右。 A．O．01 B．O．02 C．0．05 D．0．10 4．铰刀的工作部分最前端有45°的倒角部分，其功用是 A．使铰刀在铰削开始时容易进入孔中 B．起主要切削作用 C．起辅助切削作用 5．为了保证镗刀杆和镗刀头有足够的刚性，被加工孔的直径在30～120 mm范围内时，镗刀杆的直径一般为孔径的倍。 A．0．3～0．4 B．O．5～0．6 C．0．7～0.8 D．0．9～1．0 6．用回转工作台铣削工件的圆弧面，当校正圆弧面中心与回转工作台中心重合时，应转动。 A．机床主轴 B．回转工作台 C．机床工作台 D．工件 7．用回转工作台铣削工件的凸圆弧面时，铣刀中心与回转工作台中心的距离等于。 A．凸圆弧半径 B．凸圆弧半径与铣刀半径之和 C．凸圆弧半径与铣刀直径之和 D．凸圆弧半径与铣刀半径之差 8．铣削球面时，因造成工件球面表面粗糙度值太大。 A．工作台调整不当 B．圆周进给不均 C．铣削用量过大 D．对刀不准确 9．铣削等直径双柄外球面的球面半径R=25 mm，柄部直径d=30 mm。则铣刀刀尖的回转半径rc= mm。 A．40 B．30 C．23.7 D．15 10．铣削圆柱螺旋槽时，要求工件每回转一周，工作台移动的距离。 A．一个导程 B．一个螺距 C．2倍螺矩 D．2倍导程 11．用侧轴挂轮法铣削圆柱螺旋槽，交换齿轮应配置在和分度头侧轴之间。 A．铣床主轴 B．分度头主轴 C．工作台纵向传动丝杠 D．工作台横向传动丝杠 12．凸轮每回转一个单位角度时，从动件上升或下降的距离叫做凸轮的。 A．位移量 B．升高率 C．升高量 D．导程 13．在卧式万能铣床上铣削一直齿条，其模数m=3 mm，若用刻度盘移距，每铣一齿后，刻度盘应摇 mm。 A．7．85 B．9．425 C．10．99 D．12．567 14．直齿圆柱齿轮在粗铣后，若测得公法线长度比图样规定要求大1 mm，则应将工作台上升 mm后，再进行精铣。 A．1 B．1．17 C．1．37 D．1．46 15．测量公法线长度必须按规定的跨测齿数进行。跨测齿数k是根据齿轮的齿数z和决定的。 A．齿轮模数m B．齿形角a C．分度圆直径d D．齿轮的齿厚s

蛋白质化学作业及答案

班级_______ 学号__________________ 姓名 ___________ 第二章《蛋白质化学》作业及参考答案 第一部分试题 1 ?氨基酸的侧链对多肽或蛋白质的结构和生物学功能非常重要。用三字母缩写形式列出其侧链为如下要求 的氨基酸： (a)含有一个羟基；b)含有一个氨基；c)含有一个具有芳香族性质的基团；(d)含有分支的脂肪族烃链；(e)含有硫；(f)含有一个在pH 7 —10范围内可作为亲核体的基团或原子，指出该亲核基团或原子。 2. 某种溶液中含有三种三肽：Tyr - Arg - Ser , Glu - Met - Phe 和Asp - Pro - Lys , a - COOH基团的pKa为 3.8; a -NH3基团的pKa为8.5。在哪种pH (2.0,6.0或13.0)下，通过电泳分离这三种多肽的效果最好？ 3. 利用阳离子交换层析分离下列每一对氨基酸，哪一种氨基酸首先被pH7缓冲液从离子交换柱上洗脱出来。 (a)Asp 和Lys ； (b) Arg 和Met ；c) Glu 和Vai ； (d) Gly 和Leu (e) Ser 和Ala 4?胃液(pH = 1.5)的胃蛋白酶的等电点约为1,远比其它蛋白质低。试问等电点如此低的胃蛋白酶必须存在有大量的什么样的官能团？什么样的氨基酸才能提供这样的基团？ 5. —个含有13个氨基酸残基的十三肽的氨基酸组成为： Ala, Arg,2 Asp, 2Glu, 3Gly, Leu, 3Val。部分酸水解后得到以下肽段，其序列由Edman降解确定，试推断原始寡肽的序列。 (a)Asp - Glu - Val - Gly - Gly - Glu - Ala (b)Val - Asp - Val - Asp - Glu (c)Val - Asp - Val (d)Glu - Ala -Leu - Gly -Arg (e)Val - Gly - Gly - Glu - Ala - Leu (f)Leu - Gly - Arg 6 ?由下列信息求八肽的序列。 (a)酸水解得Ala , Arg , Leu, Met, Phe, Thr, 2Val (b)Sanger 试剂处理得DNP-Ala。 (c)胰蛋白酶处理得Ala , Arg , Thr和Leu, Met, Phe , 2Val。当以Sanger试剂处理时分别得到DNP-Ala 和DNP-Val。 (d)溴化氰处理得Ala, Arg，高丝氨酸内酯，Thr, 2Val，和Leu , Phe ,当用San ger试剂处理时，分别得 DNP-Ala 和DNP-Leu。 7 ?下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中： CNBr异硫氰酸苯酯丹黄酰氯脲6mol/LHCl 3 -巯基乙醇水合茚三酮过甲酸胰蛋白酶胰凝乳蛋白酶。其中哪一个最适合完成以下各项任务？ (a)测定小肽的氨基酸序列。 (b)鉴定肽的氨基末端残基。 (c)不含二硫键的蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂？ (d)在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。 (e)在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。 (f)在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键。 8?已知某蛋白是由一定数量的链内二硫键连接的两个多肽链组成的。 1.00g该蛋白样品可以与25.0mg还原型谷胱甘肽(GSH, MW = 307)反应。

蛋白质组学试题整理 - 副本

蛋白质组学相关试题及答案 1…Proteome(蛋白质组)：由一个细胞或者组织的基因组所表达的全部相应的蛋白质，称为蛋白质组。 Proteomics(蛋白质组学)：指应用各种技术手段来研究蛋白质组的一门新兴学科，即研究细胞在不同生理或病理条件下蛋白质表达的异同，对相关蛋白质进行分类和鉴定。更重要的是蛋白质组学的研究要分析蛋白质间相互作用和蛋白质的功能. 2…. Mass Spectrometer（质谱仪）：质谱仪是一个用来测量单个分子质量的仪器，但实际上质谱仪提供的是分子的质量与电荷比（m/z or m/e）。分离和检测不同同位素的仪器。即根据带电粒子在电磁场中能够偏转的原理，按物质原子、分子或分子碎片的质量差异进行分离和检测物质组成的一类仪器。质谱仪最重要的应用是分离同位素并测定它们的原子质量及相对丰度。 3. Proteome sample holographic preparation（蛋白组样品的全息制备）：（1）keep protein information（2）adapted to separation and identification methods（3）different samples,different extraction.蛋白质样品制备是蛋白质组研究的第一步，也是最关键的一步。因为这一步会影响蛋白质产量、生物学活性、结构完整性。因此要用最小的力量使细胞达到最大破坏程度同时保持蛋白质的完整性。 原则是，保持蛋白质的所有信息；选择合适的分离和鉴定方法；对于不同的样品要用不同的提取方法。 4.Post translational modification(蛋白质翻译后修饰) 肽链合成的结束，并不一定意味着具有正常生理功能的蛋白质分子已经生成。已知很多蛋白质在肽链合成后还需经过一定的加工（processing）或修饰，由几条肽链构成的蛋白质和带有辅基的蛋白质，其各个亚单位必须互相聚合才能成为完整的蛋白质分子。 5.De novo sequencing(从头测序) unknow peptide从头测序为蛋白质组研究提供了一种不用借助于任何蛋白质序列数据库信息，直接解读串联质谱数据的方法。其基本算法主要由4个部分组成：质谱图的构建、离子类型的确定、测序算法以及打分算法。

机床切削加工(铣工) 教学计划 改050409 OK

陕西省技工院校2015级机床切削加工（铣工）专业 实施性教学计划 一、专业名称 机床切削加工（铣工） 二、招生对象 具有初中毕业学历者可注册课程学习。 三、学制 三年 四、培养目标 本专业培养与我国社会主义现代化建设要求相适应，德、智、体、美全面发展，具有综合职业能力，在机械加工生产第一线工作的机械加工操作人员。 五、课程设置及教学要求 1.德育 本课程旨在使学生通过学习和研究，了解德育的基本常识，掌握德育的基本概念和基本原理，寻求观察德育问题的多种视角，构建分析问题的理性框架，探索解决问题的一般思路，在此基础上形成教书育人的意识和能力。 2.体育

在以前相关课程的基础上，进一步学习体育与卫生保健的基础知识和运动技能，掌握科学锻炼和娱乐休闲的基本方法，养成自觉锻炼的习惯；培养自主锻炼、自我保健、自我评价和自我调控的意识，全面提高身心素质和社会适应能力，为终身锻炼、继续学习与创业立业奠定基础。 3.语文 在初中语文的基础上，进一步加强现代文和文言文阅读训练，提高学生阅读现代文和浅易文言文的能力；加强文学作品阅读教学，培养学生欣赏文学作品的能力；加强写作和口语交际训练，提高学生应用文写作能力和日常口语交际水平。通过课内外的教学活动，使学生进一步巩固和扩展必需的语文基础知识，养成自学和运用语文的良好习惯，接受优秀文化熏陶，形成高尚的审美情趣。 4.数学 在以前数学基础上，进一步学习数学的基础知识。必学与限定选学内容：集合与逻辑用语、不等式、函数、指数函数与对数函数、任意角的三角函数、数列与数列极限、向量、复数、解析几何、立体几何、排列与组合、概率与统计初步。选学内容：极限与导数、导数的应用、积分及其应用、统计。通过教学，提高学生的数学素养，培养学生的基本运算、基本计算工具使用、空间想像、数形结合、思维和简单实际应用能力，为学习专业课程打下基础。 5.英语 在以前英语的基础上，巩固、扩展学生的基础词汇和基础语法；培养学生听、说、读、写的基本技能和运用英语进行交际的能力；使学生能听懂简单对话和短文，能围绕日常话题进行初步交际，能读懂简单应用文，能模拟套写语篇及简单应用文；提高学生自主学习和继续学习的能力，并为学习专门用途英语打下基础。 6.计算机应用基础

2010-2011年度第二学期《铣工工艺学》期末试卷A

《铣工工艺学》A 卷 第 1 页 共 2 页 烟台汽车工程职业学院2010—2011学年第二学期期末考试 《铣工工艺学》中专试卷 A 卷 适用班级：08数控技术应用五年一贯制班 考试时间： 60 分钟 一、填空题 （每空1分，共30分） 1. 在铣床上铣削外花键常用的方法有 、 和 三种。 2. 牙嵌式离合器按其齿形可分为 、 、 和 离合器等几种 3. 铣齿侧间隙的方法有 和 两种。 4. 在铣床上钻孔 是主运动，工件或钻头沿 的移动 是进给运动。 5. 铰刀的工作部分主要由 、 和 组成。 6. 直素线较短的简单特型面一般称为 ，可用 在 铣床或仿 形铣床加工。 7. 圆柱螺旋线的要素有 、 、 、 、 和旋向等 8. 直齿圆柱齿轮用于 传动；斜齿圆柱齿轮用于 或 传动。 9. 铣刀几何参数对铣削时金属的 、 、 和铣 刀的 都有显著的影响。 10. 端铣刀的直径应比工件宽度略大，一般按工件宽度的 选取。 二、判断题（每小题2分，共20分） 1. 铣削等高齿离合器时，分度头主轴应垂直于工作台台面；铣削收缩齿离合器时，分度头主 轴必须倾斜一个角度。 （ ） 2. 在铣床上铣削外花键时，选用的三面刃铣刀外径越小越好，宽度越宽越好，这样可以提高 铣刀刚度。 （ ） 3. 铣削尖齿形离合器时，不论其齿数是奇数还是偶数，每分度一次只能铣出一条齿 槽。 （ ） 4. 尖齿形齿、梯形齿和锯齿形齿离合器都是收缩齿离合器。 （ ） 5. 钻孔时，麻花钻主切削刃上各点处的切削速度不一样，外缘处最大，钻心处的切削速度为 零。 （ ） 6. 铰孔是一种孔的精加工方法，可以提高孔的尺寸精度，形状和位置精度。 （ ） 7. 铣削相切的两凹圆弧面时，应先铣削半径较小的凹圆弧面。 （ ） 8. 靠模的型面形状和尺寸必须与工件的形状和尺寸相同。 （ ） 9. 直齿锥齿轮规定大端端面模数为计算各部分尺寸的依据，并采用标准值。 （ ） 10. 粗铣时用粗齿铣刀，精铣时用细齿铣刀。 （ ） 三、选择题 （每小题2分，共20分） 1. 铣削__________离合器时，对刀的方法是先用试切对中法对刀使铣刀廓形的对称线对准离 合器轴线，然后按2 tan 22θ T B e += 将工作台横向移动跑离e 。 A ．梯形收缩齿 B ．梯形等高齿 C ．尖齿形齿 D ．锯齿形齿 2. 用三面刃铣刀铣削__________齿离合器时，常在全部齿槽铣完后将工件转过一个 4 ~2

蛋白质组学期末复习题

蛋白质组学相关试题及答案 解释 1． Proteome(蛋白质组)：由一个细胞或者组织的基因组所表达的全部相应的蛋白质，称为蛋白质组。 2. Proteomics(蛋白质组学)：指应用各种技术手段来研究蛋白质组的一门新兴学科，即研究细胞在不同生理或病理条件下蛋白质表达的异同，对相关蛋白质进行分类和鉴定。更重要的是蛋白质组学的研究要分析蛋白质间相互作用和蛋白质的功能. 3. Mass Spectrometer（质谱仪）：质谱仪是一个用来测量单个分子质量的仪器，但实际上质谱仪提供的是分子的质量与电荷比（m/z or m/e）。分离和检测不同同位素的仪器。即根据带电粒子在电磁场中能够偏转的原理，按物质原子、分子或分子碎片的质量差异进行分离和检测物质组成的一类仪器。质谱仪最重要的应用是分离同位素并测定它们的原子质量及相对丰度。 4. Proteome sample holographic preparation（蛋白组样品的全息制备）：（1）keep protein information （2）adapted to separation and identification methods （3）different samples,different extraction. 蛋白质样品制备是蛋白质组研究的第一步，也是最关键的一步。因为这一步会影响蛋白质产量、生物学活性、结构完整性。因此要用最小的力量使细胞达到最大破坏程度同时保持蛋白质的完整性。原则是，保持蛋白质的所有信息；选择合适的分离和鉴定方法；对于不同的样品要用不同的提取方法。 5. Post translational modification(蛋白质翻译后修饰) 肽链合成的结束，并不一定意味着具有正常生理功能的蛋白质分子已经生成。已知很多蛋白质在肽链合成后还需经过一定的加工（processing）或修饰，由几条肽链构成的蛋白质和带有辅基的蛋白质，其各个亚单位必须互相聚合才能成为完整的蛋白质分子。 6. De novo sequencing(从头测序) 从头测序为蛋白质组研究提供了一种不用借助于任何蛋白质序列数据库信息，直接解读串联质谱数据的方法。其基本算法主要由4个部分组成：质谱图的构建、

蛋白质组学蛋白质组学相关技术及发展文献综述

蛋白质组学蛋白质组学相关技术及发展文献综述 蛋白质组学相关技术及发展文献综述张粒植物学211070161概念及相关内容1994年澳大利亚Macquaie大学的Wilkins和Williams等在意大利的一次科学会议上首次提出了蛋白质组proteome这个概念该英文词汇由蛋白质的“prote”和基因组的“ome”拼接而成并且最初定义为“一个基因组所表达的蛋白质”1。然而这个定义并没有考虑到蛋白质组是动态的而且产生蛋白的细胞、组织或生物体容易受它们所处环境的影响。目前认为蛋白质组是一个已知的细胞在某一特定时刻的包括所有亚型和修饰的全部蛋白质2。蛋白质组学就是从整体角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成、表达水平与修饰状态了解蛋白质之间的相互作用与联系提示蛋白质的功能与细胞的活动规律。2蛋白质组学的分类蛋白质组学从其研究目标方面可分为表达蛋白质组学和结构蛋白质组学。前者主要研究细胞或组织在不同条件或状态下蛋白质的表达和功能这将有助于识别各种特异蛋白3目前蛋白质组学的研究在这方面开展的最为广泛其运用技术主要是双相凝胶电泳Two-dimensional gel electrophoresis2DE技术以及图像分析系统当对感兴趣的蛋白质进行分析时可能用到质谱。由于蛋白质发生修饰后其电泳特性将发生改变这些技术可以直接测定蛋白质的含量并有助于发现蛋白质翻译后的修饰如糖基化和磷酸化等4。结构蛋白质组学的目标是识别蛋白质的结构并研究蛋白质间的相互作用。近年来酵母双杂交系统是研究蛋白质相互作用时常用的方法同时研究者也将此方法不断改进5。有研究者最近发现在研究蛋白质相互作用时通过纯化蛋白复合物并用质谱进行识别是很有价值的4。3蛋白质组学相关技术目前蛋白质组学研究在表达蛋白质组学方面的研究最为广泛其分析通常有三个步骤第一步运用蛋白质分离技术分离样品中的蛋白质第二步应用质谱技术或N末端测序鉴定分离到的蛋白质第三步应用生物信息学技术存储、处理、比较获得的数据。3.1蛋白质分离技术这类技术主要是电泳其中应用最多的是双向电泳技术其他还有SDS-PAGE、毛细吸管电泳等。除了电泳外还有液相色谱通常使用高效液相色谱HPLC和二维液相色谱2D-LC。另外还有用于蛋白纯化、除杂的层析技术、超离技术等。 3.1.1双相凝胶电泳双相凝胶电泳two-dimensional gel elec—trophoresis2DE这是最经典、最成熟的蛋白质组分离技术产生于20世纪70年代中叶但主要的技术进步如实验的重复性、可操作性蛋白质的溶解性、特异性等是在近lO年取得的。它根据蛋白质不同的特点分两相分离蛋白质。第一相是等电聚焦IEF电泳根据蛋白质等电点的不同进行分离。蛋白质是两性分子根据其周围环境pH可以带正电荷、负电荷或静电荷为零。等电点pI是蛋白质所带静电荷为零时的pH周围pH小于其pI时蛋白质带正电荷大于其pI时蛋白质带负电荷。IEF时蛋白质处于一个pH梯度中在电场的作用下蛋白质将移向其静电荷为零的点静电荷为正的蛋白将移向负极静电荷为负的将移向正极直到到达其等电点如果蛋白质在其等电点附近扩散那么它将带上电荷重新移回等电点。这就是IEF的聚焦效应它可以在等电点附近浓集蛋白从而分离电荷差别极微的蛋白。pH梯度的形成最初是在一个细的包含两性电解质的聚丙烯酰胺凝胶管中进行。在电流的作用下两性电解质可形成一个pH梯度。但由于两性电解质形成的pH梯度不稳定、易漂移、重复性差80年代以后研究人员研制了固定pH梯度的胶条IPG。此种胶条的形成需要一些能与丙烯酰胺单体结合的分子每个含有一种酸性或碱性缓冲基团。制作时将一种含有不同酸性基团的此分子溶液和一种含有不同碱性基团的此分子溶液混合两种溶液中均含有丙烯酰胺单体和催化剂不同分子的浓度决定pH的范围。聚合时丙烯酰胺成分与双丙烯酰胺聚合形成聚丙烯酰胺凝胶。第二相是SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE根据蛋白质的分子量不同进行分离。此相是在包含SDS的聚丙烯酰胺凝胶中进行。SDS是一种阴离子去污剂它能缠绕在多肽骨架上使蛋白质带负电所带电荷与蛋白质的分子量成正比在SDS聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质分子量的对数与它在胶中移动的距离基本成线性关系。SDS-PAGE装置有水平和垂直两种形式垂直装置可同时跑多块胶如Amersham pharmacia Biotech的Ettan DALT II系统可同时跑12块胶提高了操作的平行性。经过2DE

最新铣工工艺学理论测试题

铣工工艺学理论测试题 一、填空题（每空0.5分、共20分） 1、高速钢在600度的高温下，其硬度仍能保持在（），具有较好的切削性能 2、硬质合金是由高硬度难熔的（）和（），用粉末冶金工艺制 成 3、P类的硬质合金适于加工（）的黑色金属，例如（）；K类硬 质合金适于加工（）的黑色金属 4、铲齿铣刀在刀齿截面上，其齿背的截形是一条特殊曲线，一般为（） 5、用硬质合金铣刀作高速切削时，若必须适用切削液，则应在（）之前就连 续充分地浇注 6、1英制等于（）毫米 7、正弦规一般用来测量带有（）和（）的零件 8、用端面铣削的方法铣出的平面，其平面度的好坏，主要决定于铣床主轴轴线与进给方向 的（） 9、平口虎钳又称机用虎钳，常用的平口虎钳有（）和非回转式两种 10、检验平面度要求高的平面时，可在标准平板的平面上涂（）或龙丹紫溶液， 再将工件上的平面放在标准平板上，进行对研。 11、为了提高铣床立铣头回转角度的精度，可采用（）检测找正。 12、在铣平行面时，往往还有尺寸精度的要求，单件生产时一般采用铣削-测量--铣削循环进 行，测量时，用千分尺测量工件的（）及中部 13、在铣床上铣削斜面的方法有：（）、铣刀倾斜铣斜面、角度铣刀铣斜面 14、铣阶台时，夹具必须（），否则铣出的工件会产生倾斜情况 15、键槽铣刀一般都是双刃的，端面刃能直接切入工件，故在铣封闭槽之前可以不必 （） 16、键槽的宽度通常用（）来检验；深度和长度可用游标卡尺来检验。 17、在轴上铣削键槽时，常用的对刀方法有切痕对刀法、（）、擦边对刀法|、 环表对刀法 18、（）锯片铣刀适宜于作锯断工件之用 19、许多机械零件，如花键、离合器、齿轮等在铣削时，需要利用（）进行圆 周分度，才能铣出等分的齿槽 20、在F11125分度头上加工一六角螺钉，当每铣一面时，分度手柄应转过（）r 21、为了避免每次分度要数一次孔数的麻烦，并且为了防止摇错，所以在孔盘上附设一对 （） 22、在复式轮系传动时，当中间轴为（）时，则主动轮和被动轮轴的转向相同 23、在铣床上镗孔时，常用的对刀方法有：按划线调整、（）、 （）、用槽规调整。 24、在镗孔时出现孔径超差的情况，其产生的原因有：镗刀回转半径调整不当、 （）、（） 25、铰孔时，高速钢铰刀粗铰时可取（）的铰削余量 26、（）用于传递两相交轴之间的回转运动 27、为保证两个齿轮均匀地转动，齿轮的的齿形曲线应采用（）、 （）、圆弧线 28、相互啮合的两个标准圆柱齿轮齿形角α=（） 29、常用的分度方法有四种：简单分度法；（）；（）和直线移距分度法。 30、铣削键槽时，常用以下对刀方法：（）；（）；擦边对刀法和环 表对刀法 31、不锈钢的硬度不高，故采用（）铣刀铣削，在铣削时，由于硬化特别严重， 故每齿进给量Fz一般不应小于( )

蛋白质组学常见问题

HPLC 篇 1 ． HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足：解决办法为增加样品量 样品未从柱子中流出：可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 样品与检测器不匹配：根据样品化学性质调整波长或改换检测器 检测器衰减太多：调整衰减即可。 检测器时间常数太大：解决办法为降低时间参数 检测器池窗污染：解决办法为清洗池窗。 检测池中有气泡：解决办法为排气。 记录仪测压范围不当：调整电压范围即可。 流动相流量不合适：调整流速即可。 检测器与记录仪超出校正曲线：解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。 2 ．做 HPLC 分析时，柱压不稳定，原因何在? 如何解决? 原因可能有： ? 泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理； 比例阀失效，更换比例阀即可。 泵密封垫损坏，更换密封垫即可。 溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法； 系统检漏，找出漏点，密封即可。 梯度洗脱，这时压力波动是正常的。 3 ．我购买的 HPLC 柱验收测试时柱压过高，请问为什么? 柱压过高是 HPLC 柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。

拆去保护柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查； 把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查。 将柱子的进出口反过来接在仪器上，用 10 倍柱体积的流动相冲洗柱子， ( 此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动性 ) 。这时，如果柱压仍不下降，再检查； 更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明你的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛 板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间 接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题， SGE 提供的Rheodyne 7315 型过滤器就是解 决这一问题的最佳选择。 4 ．液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么? 筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。 存在干扰峰，解决办法为使用较长柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子。 双向电泳篇 1. 重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽，直接跑 2D 的一向吗？ 一般情况下是可以的。但当上样量特别大时，可能会有一部分蛋白质没有被胶条吸收，这 样跑完 1D 和 2D 胶后，会有很多横向条纹。所以在这种情况下，最好在重泡胀后，将胶条 转移到另外一个电泳漕中进行电泳。 2. 为什么我在等电聚焦前加的矿物油在聚焦后会减少，暴露出了胶条的背面？ 这是因为BioRad的电泳槽有个盖子。为了固定电泳槽中的胶条，这个盖子上设计了对应 的突起，以便压住胶条。由于虹吸作用，这个突起会导引矿物油到相邻的空电泳槽，从而 降低有胶条的电泳槽中的矿物油液面。如果由此把胶条暴露在空气中，那对等电聚焦的影 响将是毁灭性的。为了防止这个现象的发生，可以在相邻的空电泳槽里，也加入适量 （ 80 ％满）的矿物油。 3. 跑第一向时，为什么要设定一个电流的最大值电压(50 μ A/ 胶)？ 电流的平方和功率成正比。电流增大，功率增大，放出的热量也随之增大，就会导致胶条 的温度增加。当温度超过30 摄氏度时，缓冲液里的尿素就容易解离，产生一些极性分子，从而对等电聚焦产生影响。

浅析数控专业一体化教学分析报告

数控专业一体化教学分析报告 数控技术系唐华 前言 一体化教学已成为当今中高级职业学校教学模式发展的新趋势。为了配合我校教务教改工作的深入落实,本文就一体化教学的定义以及我校数控专业开展一体化教学应做的工作、具体实施的方案、以及开展一体化教学应避免的几个误区进行分析。 目前，我校数控专业正处在快速发展阶段,实训中心已建成并投入使用两年多,数控实习设备总投入达到数百万元，形成了以中高端设备为后盾,前沿技术为主导内容的多领域、多模块教学模式。数控专业师资也随之扩大。在拥有良好的教学软硬件资源的前提条件下，如何保证学生的培养质量,满足企业需求，是我们学校课程改革的首要任务。如何让数控专业实训与其专业理论课程有机的联系在一起应该是当前课程体系改革中的一个关键环节。为此,我们主要应在数控专业关于学校教务教改上的“一体化教学”思想进行积极的探索。 一、一体化教学的定义 要讲一体化，首先要定义什么是一体化。一体化教学有狭义和广义两个概念。 狭义的一体化教学就是理论、实习教学按照课程的实际需要融合起来的整体。针对一门专业有一体化教学，对一节课而言也有一体化教学，重点实行项目教学法。具体指的是理论与实习相结合。我校的办学特色是通过强调以实习为主的原则体现的，但我系普遍存在理论

与实习脱节的情况。只有将理论与实习结合在一起，才能真正达到学校教学改革新战略的要求,培养出高质量的学员。这样既符合学校模块化教学的改革方针,同时也符合我系的实际情况。 广义上的一体化教学，指的是学生管理与专业学习有机的结合为一体。它将本专业的公共课、专业基础课、专业课和实习课所涉及到的所有资源融合到每个课题，每个项目与学生日常管理中。使学生不仅在课堂上学到知识，日常生活中也能得到相关的辅导,始终遨游在知识的海洋中，感受到学校、教师对他们的关爱，同时提高我系学生管理水平。 二、我校数控专业课程一体化应做的工作 (一)在学校数控专业场地、设备、师资等基本条件具备一体化的前提下，怎样有效的开展专业课程一体化，是摆在我们面前的一个重要课题。结合我校的实际情况,具体要从以下三个方面逐步开展工作： 1、修订教学计划和教学大纲，明确一体化教学课程 我们学校理论课的教学计划和实习课的教学大纲是具体指导我们开设课程、开设课时、教学内容的纲领性文件。我们要实行一体化，必须从源头有一个根本性指导思想。为确保相关文件的科学性,我们必须本着国家“以服务为宗旨,以就业为导向,以能力为本位”的职业教育教学目标，认真调研市场对毕业生的专业需求,及时走访毕业生的就业反馈，结合职业技能鉴定的要求和我校具体的实习条件，由数控技术系牵头，学科带头人负责，教务处与学校给予政策支持,联合数控各个模块专业教师,讨论并制定新的教学计划和教学大纲。新计划中的核心专业课程模块应当全部实行一体化教学,明确专业核心课程模块中哪些课程可以合并成为一体化课程，如《车工工艺学》和普车实习,《铣工工艺学》和铣床实习,《数控加工工艺学》和数控车、铣加工以及数控仿真实习。同时,还必须明确每门课程讲叙哪些基本内容，体现出学历教育版块大专班和中专班内容区别在哪里,技能培训版块初级班、中级班、高级班内容区别在哪里。

《铣工工艺》教学大纲

《铣工工艺学》教学大纲 （三年制共130学时） 一、课程的性质和任务 铣工工艺学是中等职业技术学校机械类铣工专业的一门专业技术课程。课程的任务是使学生掌握中级铣工应具备的专业理论知识，并用以指导相应的操作技能训练。通过技能训练又进一步加强对理论知识的理解。消化、巩固和提高。 二、课程教学目标 （一）知识教学目标 1、掌握常用铣床的主要结构、传动系统、操作使用、日常调整和维护保养方 法。 2、能合理地选择和正确的使用夹具、刀具和量具。掌握其使用方法和维护保 养方法。 3、能熟练地掌握铣削过程中的有关计算方法，并能查阅有关技术手册和资料。 4、能合理地选择铣削用量和切削液。 5、能合理地选择工件的定位基准，掌握工件定位、夹紧的基本原理和方法。 6、能制定中等复杂程度零件的铣削工艺，能吸收和应用较先进的工艺和技术。 7、熟悉安全、文明生产的有关知识，养成安全文明生产习惯。 三、教学内容及要求 铣削是铣刀旋转作主运动、工件或铣刀作进给运动的切削加工方法。铣削的主要特点是用旋转的多刃刀具进行切削加工。所以效率较高、加工范围广。铣削是加工平面的主要方法之一。在铣床上用各种不同的铣刀可以加工平面（水平面、垂直面、斜面）、台阶、沟槽（直角沟槽和V形槽、T形槽、燕尾槽等特形沟槽）、特形面和切断材料等。使用分度装置可加工需同向等分的花键、齿轮、牙嵌式离

合器、螺旋槽等。此外，在铣床上还可以进行钻孔、铰孔、镗孔等工作。（一）铣床的基本知识 1、理论模块 （1）了解常用铣床主要部件的名称，功用和结构特点。 （2）了解常用铣刀的材质，初步掌握铣刀的种类及几何要素。 （3）了解铣削运动和铣削用量的基本概念。 （4）了解切削液的作用、种类及选用 （5）熟悉铣工常用的量具及其使用 2、实践模块 （1）掌握机床的型号，机床的主要参数。 （2）常用铣床的主要结构，部件及其功用。 （3）能操纵x6132型卧式万能升降台铣床、x5032型立式升降台铣床、x8126型万能工具铣床、x2010c型龙门铣床。 （二）铣刀简介 1、理论模块 铣刀是多刃刀具，种类繁多，结构复杂且角度存在较多变化。刀齿的几何角度分析对学生空间想象能力要求较多。而选刀又是制定加工方案，确定加工方法的重要步骤。所以对常用铣刀的识别是重点。而对铣刀主要部分的名称和几何角度的教学是难点。 2、实践模块 （1）对各种刀具工作的条件和特点识别认知。 （2）知道各种铣刀分类和标记，懂得他们的用途和规格标记。 （3）懂得铣刀主要部分的名称和几何角度。并掌握具体名称和角度。对照实物和图标的识读，以及各角度对应符号的标注。 （三）常用量具 1、理论模块 知道常用量具的用途及识读方面相关知识，并通过对具体零件的检测演