实验二 药物敏感性试验

实验二药物敏感性试验

实验目的与意义：

各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同，同种细菌的不同菌株对同一药物的敏感性也有差异，检测细菌对抗菌药物的敏感性，可筛选出最有疗效的药物，用于临床，对控制细菌性传染病的流行至关重要。

学会检测细菌对抗菌药物敏感性的操作程序和结果判定的方法，能更科学地确定临床治疗方案。

实验原理：

通过培养基培养的细菌用药后，药物的扩散，使一定距离内的细菌在培养基上停止生长并且死亡，由此来判定一种药物对细菌的杀菌或抑菌作用的强度。受到抑制形成抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。

实验材料

菌种(大肠杆菌)、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、三角瓶、烧杯、量筒、天平、高压灭菌器、PH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、棉绳、纱布、培养皿、微量移液器、涂布棒、药敏片、小镊子、酒精灯、尺子。

实验步骤：

（一）制备琼脂培养基：（略）

（二）抗菌药物圆纸片（药敏片）扩散试验：倾倒琼脂培养基，倾注平板时，厚度合适（约5-6mm），不可太薄，待培养基凝固时，取一菌种，均匀涂布于琼脂培养基表面，用无菌镊子将各种药敏片，分别贴于平板内并压实，各片距离要相等，每个平板上可放4－6片左右。然后标号，于37℃培养箱中放置18－24h。（三）实验结果观察：过夜培养后在纸片周围形成一个抑菌圈，测定抑菌环的直径，记录该菌对某一抗生素的敏感性。

实验结果与讨论：

请简要写出细菌药敏试验的临床意义？

注意事项：

应注意影响试验结果的因素：要在无菌条件下操作，培养基应根据试验菌的营养需要来配制，此外药物浓度、细菌浓度也对试验结果有一定的影响。

附：琼脂培养基的制备：

用牛肉膏5克，蛋白胨10克、氯化钠5克，磷酸氢二钾1克，蒸馏水1000ML，加热溶解用0.1N氢氧化钠校PH至7.4－7.6，再加入10－15克琼脂加热溶解，装入三角瓶中，高压灭菌20分钟。即可得到。

抗菌药物敏感性试验的技术要求

抗菌药物敏感性试验的技术要求 1 范围 本标准规定了临床抗菌药物敏感性试验的技术要求，包括常规药敏试验的药物选择和报告、药敏试验方法、各种属细菌药敏试验、常见菌特殊耐药表型检测、药敏试验的质量控制、商品化药敏试验检测系统的性能验证。 本标准适用于开展临床微生物学检验的各级临床实验室。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 抗微生物药物敏感性试验Antimicrobial susceptibility testing 检测微生物（本文件特指细菌）对抗微生物药物（本文件特指抗菌药物）的体外敏感性，以指导临床合理选用药物的微生物学试验，简称药敏试验。 2.2 最低抑菌浓度Minimal inhibitory concentration；MIC 在琼脂或肉汤稀释法药物敏感性检测试验中能抑制肉眼可见的微生物生长的最低抗菌药物浓度。2.3 折点Breakpoint 能预测临床治疗效果，用以判断敏感、中介、剂量依赖型敏感、耐药、非敏感的最低抑菌浓度（MIC）或者抑菌圈直径（mm）的数值。 2.3.1 敏感Susceptible；S 当抗菌药物对分离株的MIC值或抑菌圈直径处于敏感范围时，使用推荐剂量进行治疗，该药在感染部位通常达到的浓度可抑制被测菌的生长，临床治疗可能有效。 2.3.2 中介Intermediate；I 当菌株的MIC值或抑菌圈直径处于中介时，该数值接近药物在血液和组织中达到的浓度，从而治疗反应率低于敏感菌群。该分类意味着采用高于常规剂量治疗时或在药物生理浓集的部位，临床治疗可能

有效。该分类同样可作为“缓冲域”，以防止由微小、不可控的技术因素导致的重大偏差，尤其是毒性范围较窄的药物。 2.3.3 剂量依赖型敏感Susceptible-dose dependent；SDD 细菌菌株对抗菌药物的敏感性依赖于抗菌药物的剂量。当某种药物对菌株的MIC或抑菌圈直径在SDD 范围时，临床可通过提高剂量和（或）增加给药频率等修正给药方案以达到临床疗效。 2.3.4 耐药Resistant；R 当抗菌药物对分离株的MIC值或抑菌圈直径处于该分类范围时，使用常规治疗方案，该药在感染部位所达到的药物浓度不能抑制细菌的生长，和（或）被测菌株获得特殊耐药机制，且治疗性研究显示该药临床疗效不确切。 2.3.5 非敏感Nonsusceptible；NS 对于那些因未现或罕现耐药，而仅具有敏感折点的抗菌药物，当该药对某分离株的MIC值高于或抑菌圈直径低于敏感折点时，此分类为非敏感。 2.4 流行病学界值Epidemiological cutoff value；ECV 将微生物群体区分为有或无获得性耐药的MIC值或抑菌圈直径，是群体敏感性的上限。根据ECV，可将菌株分为野生型和非野生型。 2.4.1 野生型 Wild-type；WT 根据ECV值，将抗菌药物（包括抗真菌药物）评估中未获得耐药机制或无敏感性下降的菌株定义为野生型。 2.4.2 非野生型Non-wild-type；NWT 根据ECV值，将抗菌药物（包括抗真菌药物）评估中获得了耐药机制或存在敏感性下降的菌株，定义为非野生型。 2.5 效价Potency 抗菌药物中具有抗菌活性的成分，通过同类标准物质测定得出。单位mg/g、IU/g或用百分比表示。

细菌对药物的敏感试验

近年来，由于抗生素、磺胺等抗菌药物广泛应用，导致了耐药菌株不断出现。测定细菌对药物的敏感程度，对于临床治疗中选择用药，避免滥用药、及时有效地控制感染以及细菌鉴定，具有重要意义。 细菌敏感度的测定方法很多，世界卫生组织推荐的方法为Kirby-Bauer 纸片法，该方法具有操作简便、易于掌握、且重视性好的优点，本法是将含药纸片贴敷在接种细菌的琼脂平板上，利用含药纸片在琼脂上的扩散作用来测定细菌对药物的敏感性。K-B纸片法的原理是建立在抗菌药物抑菌环直径大小与细菌的最小抑菌浓度（MIC）之间呈负相关的基础上，即抑菌环直径越大，则MIC越小。 结果判定：按抑菌环直径大小报告敏感、中度敏感或耐药。 敏感：是指被测菌株所引起的感染可以用常用剂量的某种抗菌药物治疗。 中度敏感：是指通过提高种抗菌药物的剂量或在该药浓集的部位，细菌生长可被抑制，感染可被治愈。这类药物毒性较小，剂量可以加大。β-内酰胺类药物可出现中度敏感。 耐药：是指被测菌株所引起的感染不能用常规剂量的抗菌药物所治愈。 中介度：这一范围是“缓冲域”是由试验的误差造成的不作为报告形式。如确需明确的敏感度，应重复实验或做稀释法，抑菌环为中介度的药物不可提高剂量。

最低抑菌浓度（MID）：抗菌药物能够抑制细菌生长所需要的最低浓度。以针形接种器沾取菌液加至药盒各孔，35℃培养过夜，含抗菌素浓度最低而无细菌生长的（清亮孔），即为MIC。 最低杀菌浓度（MBC）：抗菌药物杀灭细菌所需要的最低浓度。经48小时35℃培养后，含抗菌素浓度最低而无细菌生长的（清亮孔），即为MBC。 由于纸片法影响因素多，很难控制精度，现大多数医院采用MIC测定盒。 MIC由经典二倍肉汤稀释演化而来，具有终点判断精确，重复性好，操作简便等优点。此方法采用病美国DYNATECH接种器，更具科学性。 使用国产“华士达微生物自动分析仪”所做的定量药敏（MIC）试验，报告自动由打印机印出，附印出抗菌素对受试菌的MIC外，还可提供各种药物的用量，给药途径（口服、肌注、静滴）及血和尿中可能达到的药物浓度一览表，供临床医师参考。 纸片法抑菌环直径及其相当的MIC（表16-4）。 表16-4 抑菌环直径标准及其相当的MIC（不包括嗜血杆菌和淋球菌） 1990.4.NCCLS

细菌药物敏感试验实验报告

细菌药物敏感试验实验报告 药物敏感性试验的基本原则 1药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药： 天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药。天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献。实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。 2药敏试验测试的前提条件： 实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。 错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。 3测试结果应准确： 实验室应遵照CLSI文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理

体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。建议保留菌株，以便复核。 具体的专业要求 1标本类型 临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。在规范临床送检的前提下，实验室进行药敏试验和报告药敏结果时，应首先考虑标本的特殊性。实际工作中需重点考虑的标本如下。 1．脑脊髓液： 正常和疾病状态不能穿透血脑屏障的药物，常规不应报告。报告审核时，对于分离自脑脊髓液的菌，下列药物不能报告：仅有口服剂型的抗菌药物、一、二代头孢菌素(除外静脉用头孢呋辛)、头霉素类、克林霉素、大环内酯类、四环素类和喹诺酮类。

实验11-抗生素的抑菌试验

实验十一抗生素的抑菌试验 一目的要求 1、掌握纸片法测定抗生素抗菌作用的基本方法 2、了解抗生素的抗菌谱 二实验原理 抗生素是某些植物与微生物生长到对数期前后所产生的次生代谢产物，其在低浓度下可其它微生物生长具抑制作用或杀死作用的物质。抗生素对敏感微生物的作用机理分为抑制细胞壁的形成、破坏细胞膜的功能、干扰蛋白质合成及阻碍核酸的合成。 由于不同微生物对不同抗生素的敏感性不一样，抗生素的作用对象就有一定的范围，这种作用范围成为抗生素的抗菌谱，作用对象广的抗生素称为广谱抗生素，作用对象少的抗生素称为窄谱抗生素。而且当某种抗生素长时间用于敏感微生物生长后，即使同一种菌的不同菌株对不同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生抗性菌株，则抗生素将失去对抗性菌株生长的抵制，只以采用新的抗生素才可能控制抗性菌株的生长与繁殖，因而不断开发新的抗生素是保健人类身体健康的重要工作。新抗生素产生菌的分离筛选应通过拮抗菌发酵，然后以发酵产物进行抗菌活性实验，根据实验结果而获得产新抗生素的菌株。微生物代谢产物的抗菌活性常以管碟法与纸法进行检测，根据透明抑菌圈的有无与大小作为依据。 三实验器材 1、菌种枯草杆菌、大肠杆菌。 2、培养基MH（Mueller-Hintion）琼脂。 3、试剂青霉素、链霉素。 四方法步骤 1、无菌滤纸片以孔径6mm打孔器将滤纸打为圆形纸片，放入培养皿内，121℃蒸汽湿热灭菌，100℃烘干2h。 2、抗生素溶液制备将取适量青霉素、链霉素，以无菌水溶解。 3、指示菌悬浮液的制备枯草杆菌、大肠杆菌斜面菌种分别以无菌水洗下菌苔细胞，到入无菌三角瓶内，制备适宜浓度的细胞悬浮液。 4、混菌平板制备取批示菌细胞悬浮液1mL加入无菌培养皿内，再加入温度为43~45℃的PDA培养基或牛肉膏蛋白胨琼脂培养基20mL，立即振荡使细胞与培养基混合均匀，静置冷凝。 5、平板加抗生素溶液将滤纸片在抗生素溶液中充分浸泡2min以上，然后将纸片放于混菌平板上，每皿呈三角形放3点，每点贴放纸片2张。 6、培养与观察将平板放于33℃左右的温度培养，每24h测量一次透明抑菌圈直径，共测量3次。

AYL-S7-352 药物敏感性试验标准操作规程

编写者：沈继录审核者：批准人： 生效日期：2012.1.1 文件发放范围：微生物组 文件年度审核 审核者：审核者：审核者：审核者： 日期：日期：日期：日期： 1. 目的 规范药物敏感性试验标准操作程序，确保药敏结果准确。 2．原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后会不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制，从而产生透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映检测菌对测定药物的敏感程度，并与该药对待检菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。 3．试剂 M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、标准比浊管或比浊仪。 4．质控 4.1 常用细菌药敏质控标准菌株参见CLSI规定。 4.2 质控菌株每日随临床标本一起进行药敏试验，测定质控菌株的抑菌环。质控菌株的抑菌环在允许范围之内，说明结果可信。 4.3 质控的频率由于纸片法药敏试验是很稳定的，在不失控的时候，可以每周作1～2次质控菌株的测定。如果发现有失控的情况，就必须每日作1次，寻找失控的原因并予以纠正。如果连续30日失控<3次的，可以恢复每周1次。 5．操作步骤 5.1 挑取4～5个纯培养菌落，接种于3～5mlM-H肉汤(0．5麦氏单位)中，经35℃培养6～8 h。 5.2 用无菌生理盐水或M-H肉汤校正菌液浊度，使其与标准比浊管的浓度相同。 5.3 用无菌棉拭蘸取校正过的菌液，在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个M-H平板表面，再重复两次，每次旋转平板60°，使整个平板涂布均匀，最后用

常见细菌药物敏感性试验报告规范

常见细菌药物敏感性试验报告规范中国专家共识 微生物学检验为感染性疾病的诊断、治疗和控制提供了必不可少的证据。因此微生物学检验报告是临床和实验室等多方共同关注的焦点。国内临床微生物学检验发展较为薄弱，报告存在着种种不足。同时，临床与实验室的沟通存在一定不足，密切协作非常必要。基于实际存在的问题，为规范国内临床微生物学检验药物敏感性试验报告，加强临床与实验室合作，发挥检验医师作用，特制订本共识，以期指导相关报告的规范化，减少错误，增加专业信息，提高服务质量，为临床医学诊、治、控提供坚实的科学依据。本共识限于常见细菌的药物敏感性报告。 一、药物敏感性试验的意义和基本原则 (一)意义 药物敏感性试验可以检测细菌对于抗细菌药物的敏感性，为临床用药、新药研究、监测耐药变迁、发现耐药机制等提供客观证据[1]。对于经验治疗，依据一方面来自医生自身的经验，一方面是实验室长期不断提供的数据积累。临床需要考虑不同感染的病原谱和常见病原对不同药物的敏感性；对于靶向治疗，特定分离株的具体药敏试验结果可以用于判断经验治疗选药合理性、经验治疗效果分析、调整治疗选药依据等。 (二)基本原则 1．药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药： 天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药[2]。天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献[3,4]。实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。 2．药敏试验测试的前提条件[5]： 实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。 3．测试结果应准确： 实验室应遵照C L S I文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。建议保留菌株，以便复核。 二、具体的专业要求 (一)标本类型 临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。

纸片法抗菌药物敏感实验操作标准

纸片法抗菌药物敏感实验操作标准 4.３标准比浊管 用硫酸钡比浊管(０、5麦氏比浊标准),标定接种菌液浓度。比浊管制备方 法如下:(１)0、048mｏl/L BaＣｌ 2,(１、175% w／v BaＣｌ 2 ·2H 2 O)0、５ml, 加到99、5ml的０、18 mol/Ｌ(0.3６N)H 2SＯ 4 (1％v/ｖ)溶液中,制成比浊管;(2) 用光径为1cｍ的分光光度计测定光吸收来标定比浊管。0、5麦氏标准比浊管在６25nｍ波长的吸收光度应为0、0８-0、1;(3)选管径与制备菌液试管相同的螺口试管,每管分装4-6ml;(4)将试管帽拧紧,放室温暗处保存;(5)用前,将比浊管在旋转振荡器上混匀。如出现大颗粒,应更换;(6)每个月更换比浊管或复检比浊管的浊度。 ５操作步骤 5、1 制备接种菌液 5、1、１增菌法步骤如下:(1)选琼脂平板上形态相同的菌落至少4-5个,用接种环挑其顶部,移至4－5ml肉汤或大豆酪蛋白消化液中;(２)置35℃培养至菌液浓度达到或超过比浊管浓度(一般需2－6小时),浓度约1－２×10８CFU/ml;(３)用生理盐水或肉汤校正菌液浓度,与比浊管相同。可用光电比浊。目测比浊须在适当光照下以黑色线条为反衬。 5、１、2 直接菌悬液法步骤如下:(1)做常规药敏试验,可直接用过夜培养的菌落(必须用无选择性培养基平板,如普通琼脂培养基)在盐水或肉汤中制备接种菌液。菌液浓度调至0、5麦氏管;(2)此法适用于在肉汤培养基中生长不好的细菌如嗜血杆菌、淋病奈瑟氏菌与链球菌及葡萄球菌的甲氧苯青霉素或苯唑青霉素的耐药试验;(３)当用此法做复方磺胺药的试验时,从平板上直接挑菌落时会携带相当量的拮抗剂,造成敏感菌株的抑菌环内出现轻微的生长菌膜。 ５.2 接种平板步骤如下:(1)校正的菌液须在15分钟内使用。用一无菌棉试子蘸取菌液并在上端管壁旋转挤压几次,去掉过多的菌液;(2)用试子涂布整个琼脂平板表面,反复涂布几次,每次将平皿旋转60度,保证涂布均匀。(3)将平皿盖打开3-5分钟,使培养基表面的水份吸收掉。然后贴药敏纸片;(4)注意:避免用过浓的菌液,禁用未经稀释菌或其她不标准菌液接种平板。 5、３贴纸片 (1)接种平板后,贴上药敏纸片。用镊子或针尖压一下纸片使其与培养基表面贴牢。纸片要贴得均匀,纸片与纸片中心距离不得小于24mm。原则上,直径150ｍm得平板贴１2张纸片,直径100mm平板贴5张纸片。纸片贴后不应再移动,因为有些药物会立即扩散;(2)贴上纸片15分钟内,须把平板倒放在35℃恒温箱中。因为抑菌环解释标准就是在普通环境中标定的,所以除嗜血杆菌与淋病 奈瑟氏菌外,平板不可放在高CO ２的环境中。ＣO 2 与某些因素作用可使抑菌环增 大。 5、4 读取结果 (１)经16-18小时培养后,观察结果。菌液浓度适合且涂得好,抑菌环规则,细菌呈融合生长。如果出现单个菌落,说明接种量小,需重做试验,测量抑菌环直径须包含纸片直径:手持平皿从背面目测检查每块平板,借反射光(黑色无放光背景),用卡尺、普通尺或特制的模板量取抑菌环直径,单位为毫米。培养基中如果加了血液,须打开平皿盖,借反射光,从正面量抑菌环。如果就是葡萄球菌或肠球菌,须培养２4小时后,经投射光检查苯唑青霉素与万古霉素的抑菌

细菌对抗菌药物敏感试验

怀化医专《微生物学检验》教案编号：10

细菌对抗菌药物敏感试验 药敏试验(antimicrobial susceptibility,AST) （一）概念：在体外检测药物抑制或杀死细菌能力的试验。 （二）检测意义： 1、疾病的治疗：指导用药。 2、耐药菌检测和流行病学调查。 3、评价新药抗菌作用。 4、某些菌种的鉴定。 第一节临床常用的抗菌药物 抗菌药物：是指具有杀菌或抑菌活性的抗生素和化学合成药物。 一、青霉素类抗生素： 青霉素种类抗菌活性 1、天然青霉素不产青霉素酶的G+G-球菌、普雷沃菌等。 青霉素G、青霉素V 2、耐青霉素酶青霉素产青霉素酶的G+G-球菌 甲氧西林、奈夫西林、苯唑西林等 3、广谱青霉素青霉素G敏感细菌、大部分大肠埃希菌、 氨苄西林、阿莫西林奇异变形杆菌、流感嗜血杆菌等G-菌 替卡西林、羧苄西林、氨苄西林无效的G-菌，产β-内酰胺酶 美洛西林、派拉西林克雷伯菌、铜绿假单胞菌、肠杆菌、厌氧菌 二、头孢菌素类抗生素： 1、第一代头孢菌素 （头孢噻啶、头孢噻吩、头孢氨苄、头孢唑啉、头孢羟氨苄等） 作用：对G+菌作用强，如金葡菌、链球菌等。 2、第二代头孢菌素 （头孢羟唑、头孢呋辛、头孢克洛、头孢尼西、头孢雷特等） 作用：产青β-内酰胺酶G-菌有作用，如肠杆菌科细菌，铜绿假单胞菌等。 3、第三代头孢菌素 注射用头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢派酮：对产青β-内酰胺酶G-菌有很大

抗菌活性。 口服用头孢克肟、头孢布坦等：对肠球菌、铜绿假单胞菌及不动杆菌无用。 4、第四代头孢菌素（头孢匹罗、头孢匹美） 作用：对肠杆菌科细菌和铜绿假单胞菌作用强。 三、其它β-内酰胺类抗生素： 1、单环β-内酰胺类抗生素（氨曲南、卡芦莫南） 对G-菌作用强 2、头霉素类：对G+菌、厌氧菌作用较好 氧头孢烯类抗生素：抗菌谱广，对产β-内酰胺酶G-菌作用强，对产酶的金葡菌有效3、碳青酶烯类抗生素（亚胺培南、米洛培南等） 广谱（最广），抗菌活力强 4、β-内酰胺酶抑制剂（克拉维酸、舒巴坦、他唑巴坦） 与β-内酰胺类抗生素联用能增强后者的抗菌活性。 四、氨基糖苷类抗生素： 链霉素、卡那霉素、妥布霉素、庆大霉素、奈替米星、阿米卡星等 作用：对需氧G-杆菌有强大抗菌活性 对沙雷菌属、气单胞菌属、产碱杆菌、不动杆菌属、分枝杆菌属也有一定抗菌活性。但对G-球菌效果差。 五、喹诺酮类抗生素： 第一代：（新恶酸等）窄谱抗生素（G-） 第二代：（环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星等）对G+G-菌均有作用。 第三代：（斯帕沙星、妥舒沙星、左氟沙星等）超广谱抗生素。 六、大环内酯类抗生素： 红霉素、麦迪霉素、乙酰螺旋霉素等 作用：和青霉素相似，主要是G+菌、厌氧菌。 新一代：克拉霉素、罗红霉素、地红霉素、氟红霉素、阿齐霉素等。 七、四环素、氯霉素、林可酰胺类抗生素： 八、糖肽类抗生素 九、磺胺类药物及其增效剂

微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程

微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程1．目的 规范药物敏感性试验标准操作规程，确保药敏结果准确。 2．原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后会不断的向纸片周围区域扩散，形成递减的浓度梯度，在纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制，从而产生透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映检测菌对测定药物的敏感程度，并与该待检菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。 3．试剂 M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、标准比浊管或比浊仪。 4．质控 4.1 常用细菌药敏质控标准菌株参见CLSI规定。 4.2 质控菌株每日随临床标本一起进行药敏试验，测定质 控菌株的抑菌环。质控菌株的抑菌环在允许范围之内，说明结果可信。 4.3 质控的频率由于纸片法药敏试验是很稳定的，在不 失控的时候，可以每周作1～2次质控菌株的测定。如果发现有失控的情况，就必须每日做1次，寻找失控的原因

并予以纠正。如果连续30日失控<3次的，可以恢复每周1次。 5.操作步骤 5.1 挑取4～5个纯培养菌落，接种于3～5ml M-H肉汤（0.5麦氏单位）中，经35℃培养6～8h。 5.2 用无菌生理盐水或M-H肉汤校正菌液浊度，使其与标准比浊管的浓度相同。 5.3 用无菌棉拭蘸取校正过的菌液，在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个M-H平板表面，再重复两次，每次旋转平板60°，使整个平板涂布均匀，最后用棉拭涂布平板四周缘一圈。 5.4 涂布菌液的平板于室温中干燥3～5分钟后，用纸片分配器或无菌镊子取药敏纸片，贴于平板表面，并用镊尖轻压一下纸片，使其贴平。每张纸片的间距不小于24mm，纸片的中心距平板的边缘不小于15mm，直径90mm的平板宜贴6张药敏纸片。 5.5 将贴好纸片的平板置35℃孵育18～24小时后，用卡尺量取抑菌圈直径。个别菌孵育温度，时间及条件应按照CLSI规定。 6.结果判断 7.根据CLSI M100最新标准将所测抑菌圈的大小，报告为敏感（S）、中介/中敏（I）或耐药（R）。

实验六抗菌药物的体外药效试验

实验六、抗菌药物的体外药效试验 （药敏试验） 各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同，同种细菌的不同菌株对同一药物的敏感性有差异，检测细菌对抗菌药物的敏感性，可筛选最有疗效的药物，用于临床对控制细菌性传染病的流行至关重要。此外，通过药物敏感试验可为新抗菌药物的筛选提供依据。药敏试验的方法很多，普遍使用的有滤纸片扩散试验 （Kirby-BaueerDiceDiffusion）；最低抑菌浓度试验（MinimumInhibitoryConcentration,MIC）和最低杀菌浓度试验（MinimumBactericidalConcentration,MBC）。 ［目的要求］ 1、熟悉体外抗菌试验操作技术。 2、掌握药物抗菌能力体外测定的常用方法及其用途。 ［实验原理］ 常用的体外测定药物抑菌能力的方法有两大类：琼脂渗透法与浓度系列稀释法。琼脂渗透法时利用药物能够渗透至琼脂培养基的性能，将实验菌混入琼脂培养基后倾注成平板；或将试验菌均匀涂于琼脂平板的表面，然后用不同的方法将药物置于已含试验菌的琼脂平板上。根据加药的操作方法不同而有滤纸片法、打洞法、管碟法及挖沟法等。经适宜温度培养后观察药物的抑菌能力。浓度系列稀释法时把药物稀释成不同的系列浓度，混入培养基内，加入一定量的试验菌，经适宜温度培养后观察结果，求得药物的最低抑菌浓度（MIC）。 1、细菌：所用细菌应包括主要致病菌。革兰氏阳性球菌包括金黄色葡萄球菌(产酶与不产酶菌株)、表皮葡萄球菌，链球菌、肠球菌等。革兰氏阴性球菌如淋球菌等。革兰氏阴性杆菌包括流感杆菌、肠杆菌科细菌8～10种，绿脓杆菌与其它假单孢菌属及不动杆菌属等，厌氧菌包括脆弱类杆菌、消化球菌和消化链球菌等。对临床应用有代表性的菌株数量，创新药应不小于1000株。其它类新药根据新药抗菌谱宽窄可作200-500株。试验时应包括有国际公认质控菌株(如金葡菌ATCC25925，大肠杆菌ATCC25922和绿脓杆菌ATCC27853等)。

抗菌药物敏感试验、细菌耐药性检测题库1-1-6

抗菌药物敏感试验、细菌耐药性检测题库 1-1-6

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]下列关于K-B纸片扩散法操作的描述错误的是（） A.各纸片中心距离不小于24mm B.纸片距平板内缘不应大于15mm C.直径90mm的平皿可贴6张纸片 D.纸片贴牢后避免移动 E.培养16~18小时后读结果 本题要点为纸片扩散法，其药物纸片各中心应相距24mm，纸片距平板内缘15mm，35℃培养16~18小时后阅读结果。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]培养基的pH过低时，其抑菌圈可扩大的是（） A.米诺环素 B.庆大霉素 C.红霉素 D.诺氟沙星 E.头孢菌素 本题要点为纸片扩散法的培养基要求，其pH值为7.2~7.4，过高或过低的pH值会影响药物效能。碱性可扩大氨基糖苷类药物的抑菌圈，酸性可扩大四环素类药物的抑菌圈，米诺环素为四环素类抗菌药物。

辽宁11选5 https://www.sodocs.net/doc/fd16292604.html, 问题： [单选,A2型题,A1A2型题]ESBL菌株感染者治疗应选用（） A.青霉素 B.氨苄青霉素 C.头孢氨苄 D.亚胺培南-西司他丁 E.氨曲南 目前认为亚胺培南是治疗产ESBL菌感染的最佳选择，产ESBL菌重症感染的患者应首选亚胺培南治疗。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]可同时做测定某种药物对多株菌的MIC的方法为（） A.纸片琼脂扩散法 B.肉汤稀释法 C.琼脂稀释法 D.E试验 E.直接药敏试验 琼脂稀释法是将不同剂量的抗菌药物，加入融化并冷至50℃左右的定量MH琼脂中，制成含不同递减浓度抗菌药物的平板，接种受试菌，孵育后观察细菌生长情况，以抑制细菌生长的琼脂平板所含最低药物浓度为MIC。本法优点是可在一个平板上同时做多株菌MIC测定，结果可靠，易发现污染菌；缺点是制备含药琼脂平板费时费力。

微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程

微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程 1．目的 规范药物敏感性试验标准操作规程，确保药敏结果准确。2．原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后会不断的向纸片周围区域扩散，形成递减的浓度梯度，在纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制，从而产生透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映检测菌对测定药物的敏感程度，并与该待检菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC 愈小。 3．试剂 M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、标准比浊管或比浊仪。 4．质控 4.1 常用细菌药敏质控标准菌株参见CLSI规定。 4.2 质控菌株每日随临床标本一起进行药敏试验，测定质控菌株的抑菌环。质控菌株的抑菌环在允许范围之内，说明结果可信。 4.3 质控的频率由于纸片法药敏试验是很稳定的，在不失控的时候，可以每周作1～2次质控菌株的测定。如果次，

寻找失控的原因1发现有失控的情况，就必须每日做 并予以纠正。如果连续30日失控<3次的，可以恢复每周1次。 5.操作步骤 5.1 挑取4～5个纯培养菌落，接种于3～5ml M-H肉汤（0.5麦氏单位）中，经35℃培养6～8h。 5.2 用无菌生理盐水或M-H肉汤校正菌液浊度，使其与标 准比浊管的浓度相同。 5.3 用无菌棉拭蘸取校正过的菌液，在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个M-H平板表面，再重复两次，每次旋转平板60°，使整个平板涂布均匀，最后用棉拭涂布平板四周缘一圈。 5.4 涂布菌液的平板于室温中干燥3～5分钟后，用纸片分 配器或无菌镊子取药敏纸片，贴于平板表面，并用镊尖轻压一下纸片，使其贴平。每张纸片的间距不小于24mm，纸片 的中心距平板的边缘不小于15mm，直径90mm的平板宜贴 6张药敏纸片。 5.5 将贴好纸片的平板置35℃孵育18～24小时后，用卡尺量取抑菌圈直径。个别菌孵育温度，时间及条件应按照CLSI 规定。 6.结果判断 7.根据CLSI M100最新标准将所测抑菌圈的大小，报告为。）

抗菌药物敏感试验题库1-2-10

抗菌药物敏感试验题 库1-2-10

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]下列可使K-B法抑制圈直径扩大的因素是（）. A.测量时未经过纸片中心 B.接种细菌浓度为1麦氏比浊 C.孵育时间36小时 D.药敏纸片失效 E.培养基厚度为3mm 纸片扩散法若菌悬液浓度若超过0.5麦氏浊度，若药敏纸片效力下降、测量时不经过纸片中心、细菌过度生长均可使抑菌圈变小，若MH培养基厚度不够4mm，则细菌生长不良使抑菌圈增大。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]耐甲氧西林表皮葡萄球菌是（）. A.MRS B.MRSA C.MRSE D.MRCNS E.SPA 耐甲氧西林表皮葡萄球菌（methecillinresistancestaphylococcusepidermidis），缩写即MRSE。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]容易引起过敏性休克的药物是（）. A.SMZTMP B.磷霉素 C.克林霉素 D.加替沙星 E.青霉素 青霉素或其降解产物、青霉素制剂中污染物所致过敏症。青霉素衍生物（如青霉酸）与蛋白质结合，形成青霉噻唑酰基衍生物，可作为半抗原，主要引起Ⅰ型超敏反应。 (辽宁11选5 https://www.sodocs.net/doc/fd16292604.html,)

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]下列既是ESBLs的主要产生菌，又是泌尿系统感染主要病原菌的是（）. A.大肠埃细菌 B.肺炎克雷伯菌 C.阴沟肠杆菌 D.铜绿假单胞菌 E.伤寒沙门菌 大肠埃希菌既是ESBLs的主要产生菌，又是泌尿系统感染的主要病原菌。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]K-B法试验中，头孢他定的抑菌环直径为20mm，头孢噻肟的抑菌环直径为22mm，正确判断是（）. A.报告头孢他定和头孢噻肟都敏感 B.报告头孢他定耐药，头孢嚷肟敏感 C.可排除该菌产生ESBLs D.怀疑该菌产生ESBLs E.可确认该菌为ESBLs菌株 筛选产ESBL菌时对头孢泊肟、头孢他啶抑菌圈≤22mm或氨曲南、头孢噻肟≤27mm时高度怀凝，需进行ESBL确证实验。

抗菌药物敏感性试验流程

抗菌药物敏感性试验流程 1. 目的：抗菌药物敏感性试验（药敏试验）的主要目的是检出细菌的耐药性，预测抗菌药物的临床治疗效果，并为临床医生针对某一特定的临床感染问题选用药物提供依据。 2. 适用范围 微生物实验室所有标本，环境。 3. 职责范围 微生物实验室各工作人员。 4. 药敏试验的一般规则 4.1 对任何感染的可疑病原菌，若不能从该菌的种属特征可靠地推知其对抗菌药物的敏感性，就需要进行药敏试验。如果感染是由公认的对某一高效药物敏感的微生物引起，常规不需要进行药敏试验，见附录6[技术说明（1）]。 4.2 同一患者连续分离培养出的同一种细菌，若最初药敏试验显示为敏感株，随后临床出现可疑的耐药表现，需重复进行药敏试验，见附录6 [技术说明（2）]。 4.3 进行细菌耐药性调查和抗生素疗效评估时需进行药敏试验。 4.4 除临床急症细菌学检查标本，并经直接涂片染色证实为单一致病菌外，一般不主张用临床标本直接做药敏试验。直接标本做药敏试验后，必须按标准方法重做一次。 4.5 当感染的性质不清楚、标本内含数种混合生长的细菌或正常菌群，而且这些细菌与感染的关系很小时，通常不必做药敏试验。 5. 常规药敏试验药物选择原则 5.1 选择适合的药物进行药敏试验一般应由临床微生物检验医师与感染科医师、药剂科、医院药事委员会和医院感染委员会成员共同协商作出决定。在选择抗菌药物时应考虑以下因素：

5.1.1 一般情况下，药敏试验所选用的抗菌药物应包含于本单位的处方手册中。 5.1.2 临床微生物实验室所服务的医疗机构的类型、规模及患者的构成不同，其所分离细菌的耐药谱不同，药敏试验的药物选择不同。 5.1.3 菌种类型不同，药敏试验的药物选择不同。 5.2 我国目前主要依照美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）/临床实验室标准化研究所（CLSI）所制定的药敏试验执行标准作为选药指南（见附录1～2）。该指南针对每一菌群所推荐的药物都具有确切的临床疗效，其体外试验结果也可以接受。在附录1～2表内小格中的列出个小框中列出的一群类似药物，由于它们的解释结果和临床效力都很相似，因此不必每个都进行试验。另外，用“或”字表示的一群相关的药物，其抗菌谱和结果解释几乎完全相同，其交叉耐药性和交叉敏感性也几乎完全相同。因此，通常每个小框(组或相关的群)中只选择一种药物进行试验。 5.3 NCCLS文件每年都有补充和更新，为了保证药敏试验的正确性和对临床的指导性，进行药敏试验时应依照最新版本（本规范中提供的是2005年修订的第十五版）。 6. 药敏试验方法 6.1 纸片扩散法 6.1.1 抗菌药物纸片：一般应购买合格的商品化的药敏纸片进行试验，药敏纸片的贮存见附录6[技术说明（3）]。 6.1.2 琼脂培养基非苛养菌的常规药敏试验使用MH（Mueller-Hinton）琼脂，其制备、贮存和使用方法见附录6[技术说明（4）]。 6.1.3 菌悬液的浊度标准使用0.5麦氏（McFarland）标准管，见附录6[技术说明（5）]。 6.1.4 纸片扩散法的操作 6.1.4.1 接种物的制备 6.1.4.1.1 生长法：从琼脂平板上选取至少3～5个形态特征一致的菌落，用接种环接触每个菌落顶部后将细菌转移到含4～5 ml适宜的肉汤培养管（如胰酶消化大豆肉汤）中，将此肉汤培养物置35℃孵育至其浊度等于或超过0.5麦氏标准（通常需2～6小时）。用无菌盐水或肉汤将旺盛生长的肉汤培养基的浊度调整到相当于0.5麦氏标准，细菌数约为1～2×108 CFU/ ml。

抗菌药物敏感试验题库1-0-8

抗菌药物敏感试验题 库1-0-8

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]关于K-B纸片扩散法结果判读的描述，下列说法错误的是（） A.平板置于黑色无反光背景 B.抑菌圈的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限 C.参照标准解释结果 D.培养基中如果加有血液需打开皿盖 E.加有血液的培养基应借透射光从正面测量抑菌圈 培养基中如果加有血液需打开皿盖，借反射光从正面测量抑菌圈。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]关于K-B纸片扩散法结果“I”的描述中，说法错误的是（） A.敏感性的度量 B.作为"缓冲域" C.为防止由微小的技术因素失控导致的结果偏差 D.不应作为临床报告 E.通过提高测定药物的剂量或在该药物浓度较高的部位，细菌生长可被抑制 中介度I不是敏感性的度量。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]下列药敏纸片描述中，不正确的是（） A.密封贮存于-20℃无霜冷冻箱 B.只能在有效期内使用 C.密封贮存于2～8℃冰箱 D.使用前将贮存器移至室温平衡1～2h E.吸水量20μl 反复使用的纸片可保存于2～8℃冰箱，长期保存需密封贮存于-20℃无霜冷冻箱。出处：山东11选5 https://https://www.sodocs.net/doc/fd16292604.html,;

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]目前结核分枝杆菌药物敏感性试验最常用的方法是（） A.直接比例法 B.间接比例法 C.直接绝对浓度法 D.间接绝对浓度法 E.耐药率法 目前结核分枝杆菌药物敏感性试验最常用的方法是间接比例法。

问题： [单选,A2型题,A1A2型题]下列不是CLSINCCLS推荐用于筛选ESBLs的细菌的是（） A.大肠埃希菌 B.肺炎克雷伯菌 C.产酸克雷伯菌 D.奇异变形杆菌 E.普通变形杆菌 CLSINCCLS推荐用于筛选ESBLs没有普通变形杆菌。

常见细菌药物敏感性试验报告规范中国专家共识

常见细菌药物敏感性试验报告规范中国专家共识微生物学检验为感染性疾病的诊断、治疗和控制提供了必不可少的证据。因此微生物学检验报告是临床和实验室等多方共同关注的焦点。国内临床微生物学检验发展较为薄弱，报告存在着种种不足。同时，临床与实验室的沟通存在一定不足，密切协作非常必要。基于实际存在的问题，为规范国内临床微生物学检验药物敏感性试验报告，加强临床与实验室合作，发挥检验医师作用，特制订本共识，以期指导相关报告的规范化，减少错误，增加专业信息，提高服务质量，为临床医学诊、治、控提供坚实的科学依据。本共识限于常见细菌的药物敏感性报告。 一、药物敏感性试验的意义和基本原则 (一)意义 药物敏感性试验可以检测细菌对于抗细菌药物的敏感性，为临床用药、新药研究、监测耐药变迁、发现耐药机制等提供客观证据[1]。对于经验治疗，依据一方面来自医生自身的经验，一方面是实验室长期不断提供的数据积累。临床需要考虑不同感染的病原谱和常见病原对不同药物的敏感性；对于靶向治疗，特定分离株的具体药敏试验结果可以用于判断经验治疗选药合理性、经验治疗效果分析、调整治疗选药依据等。 (二)基本原则 1．药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药：

天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药[2]。天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献。实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。 2．药敏试验测试的前提条件： 实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。 错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。3．测试结果应准确： 实验室应遵照CLSI文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。建议保留菌株，以便复核。 二、具体的专业要求 (一)标本类型 临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。在规范临床送检的前提下

实验三、药物敏感性实验

实验三、药物敏感性实验 对于一种病原微生物来说，往往有多种抗菌素对其具有抑制作用，比如对于炭疽杆菌、猪丹毒杆菌、链球菌以及葡萄球菌等革兰氏阳性菌来说，对其有效的有青霉素类（阿莫西林、氨苄青霉素）、大环内酯类（红霉素、泰乐菌素、螺旋霉素等）。对于像大肠杆菌、布氏杆菌、沙门氏菌等革兰氏阴性菌来说对其有效地抗菌素如链霉素、庆大霉素、卡那霉素、新霉素。但在实际上，由于人类对抗生素的大量使用甚至是滥用，导致了细菌产生耐药性，并且这种趋势正在逐渐加大，细菌作为自然界中的生物与其它种类一样也存在生存的竞争，举例（动物园中的羚羊，在没有天敌存在时体质和繁殖率较弱，当存在天敌时，体质弱的被淘汰而好的生存下来），细菌也一样在不断改造自己来适应环境，比如基因变异等，人类发现新药物的速度远远赶不上细菌的变异速度，因此对于人类来说这种形式比较危急，大家想想这几年几次疾病大流行就可以感觉到了，象非典、禽流感、最近新出现的71号病毒导致的手足口病等。细菌产生耐药性后一些理论上有效的抗生素就不管用了，因此必须通过药物敏感性实验来选择对其敏感的药物。 值得注意的是由于各地区对于同一种病原所用抗生素种类有所差异，因此可能导致不同地区同一种细菌的耐药性往往不同，因此，在临床治疗中要根据不同情况不同对待。 在临床应用中药敏试验还有另外一个重要的意义，当动物发病比较急、死亡率非常高并且不能立即诊断，不知道具体的病原就无法正确的用药，在这种情况下，为了尽快的止住病情以减少损失，往往来不及对病原进行鉴定，而是分离培养后直接进行药敏实验，选择效果好的药物马上予以治疗。 滤纸片扩散法：（简介作的过程） 1.含药滤纸片的制备： 滤纸片：用打孔机将滤纸打成直径为6毫米的圆纸片，121摄氏度高压灭菌。 药液配制：一般针对药物性质及单位含量不同其配制方法不同，方法根据规定的标准进行，有的药物用水稀释即可（如氯霉素、红霉素、卡那霉素），但有的药物则需用缓冲液（青霉素、链霉素、庆大霉素），还有的需要用强酸（磺胺药物）或强碱（呋喃西林）来溶解，并且药物浓度也各不相同。 将灭菌的滤纸片用无菌的镊子摊布于灭菌的平皿中，每100片加药液1mL，不时翻动，使滤纸片将药液均匀吸净，在37摄氏度温箱中烘干，时间不宜过长，以免某些抗菌药实效。之后贮存于青霉素小瓶中，放置于冷暗干燥处，备用。

抗菌药物的敏感性试验

目前，我国抗菌药物的应用现状是临床无指征治疗性、预防性用药严重及选择错误的品种、剂量及疗程。而不合理用药可导致治疗失败、不良反应增多、细菌耐药性增长迅猛、医药资源大量消耗等不良后果。而我们应该如何为临床正确选用抗生素呢？正确的答案是，我们应该根据感染菌株的药物敏感性试验合理选用抗生素。 抗菌药物的敏感性试验就是测定抗菌药物在体外抑制病原微生物生长的效力。目前，我科遵循美国临床实验室标准化研究所（CLSI）2010版抗微生物药物敏感性试验执行标准进行操作。由于CLSI标准的公认程度和准确性，许多国家都采用该标准。该标准根据不同的细菌分类（如肠杆菌科、葡萄球菌属、铜绿假单胞菌等）制定可选用的抗生素及其药敏试验的判读标准，并将它们分成四组：A组：一级试验并常规首选报告的抗微生物药物；B组：一级试验，临床使用的主要抗生素（尤其在院内感染时）有选择报告的药物；C组：补充试验，有选择报告的药物；U组：补充试验，仅用于泌尿道感染细菌的抗微生物药物。CLSI 标准所制定的三级划分制及临床意义如下：高度敏感（S）：用该种药物常用剂量治疗有效；中介（I）：仅在应用高剂量抗菌药物时才有效，或者细菌处于体内抗菌药物的浓缩部位（如尿液、胆汁等）才被抑制；耐药（R）：药物对某一细菌的MIC高于药物在血或体液中可能达到的浓度，有时细菌能产生灭活抗菌药物的酶，则不论其MIC值大小如何，均应判定该菌为耐药。 在临床实践中，我们常可以听到一些关于细菌药敏试验与临床药效不符的抱怨。这一现象的出现，国内外的一些文献认为主要与以下几方面有关。①与临床是否正确地获得合格的标本至为相关；我们应规范标本的取材、送检及减少送检污染部位的标本（如：痰、咽拭子等）。②可能出现真菌等二重感染。③CLSI药敏标准制定中的局限性。④细菌感染的诊断是否正确。⑤药敏试验操作不当。⑥用药剂量不足或出现耐药菌株。⑦一般医院的微生物实验室做细菌培养仅限于需氧非苛养菌的检测。总之体外药敏试验为临床治疗提供依据, 但疗效好坏应取决于医师和检验师的判断。没有最好的抗生素,只有最合适的抗生素；我们治疗的应该是感染菌,而非污染或定植菌! 2 临床感染性疾病的诊断与治疗结合，微生物实验室的药物报告 在各类医院的临床治疗中，大多数感染性疾病都是应用各类广谱抗生素，由于很多感染是由耐药菌株引起的，所以广谱抗生素根本没有任何效果，反而极易引起由真菌引发的二重感染，对临床治疗带来极大的困难。 以下是我院几例感染病例，从中看出细菌药敏试验的重要性。脑出血患者，行微创术后，气管切开，继发肺内感染，微生物鉴定结果是肺炎克雷伯菌感染，头孢类耐药，呱啦西林/舒巴坦还未广泛应用于临床，无法购到，以致于错过了最佳治疗时间，患者死于感染性休克。同一疗区，同样是一例脑出血患者行微创术后患者，未行气管切开术，亦出现肺内感染，右侧肺不张，实验室微生物鉴定亦为肺炎克雷伯菌感染，药敏试验亦为复方呱啦西林敏感，家