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人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒说明书

人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒说明书
人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒说明书

人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)酶联免疫分析(ELISA)

试剂盒使用说明书

厦门慧嘉生物科技有限公司

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的含量。

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)水平。用纯化的人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP),再与HRP标记的H-FABP抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)浓度。

试剂盒组成:

样本处理及要求:

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上

清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心

20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程

中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/

分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备

用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上

进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标

准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为900ng/L,600ng/L ,300ng/L,150ng/L,75ng/L)。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样

品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此

重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15分钟.

10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止

液后15分钟以内进行。

注意事项:

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

计算:

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,

在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD

值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释

倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标

准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值

代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释

倍数,即为样品的实际浓度。

试剂盒性能:

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批见应分别小于9%和11%

检测范围:

0.312 ng/ml-20 ng/ml

灵敏度:

0.078 ng/ml

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2..有效期:6个月

心脏型脂肪酸结合蛋白FABP地的综述

心脏型脂肪酸结合蛋白 一,FABP的生物学特性 脂肪酸结合蛋白( FABP) 是一组多源性的小分子细胞内蛋白质,分子量 14 ~ 15 kDa,。目前已发现的FABP有9种类型,其中心脏型FABP (H —FABP)较特异地存在于心肌组织中,红骨骼肌、主动脉壁的平滑肌细胞、内皮细胞、胃腺体的壁细胞和睾丸间质细胞中亦有,少量存在于肾脏、白骨骼肌、肾上腺、脑,但肝脏、脂肪组织内无H—FABP分布【1】。FABP 在骨骼肌中的含量是其在心肌中含量的1 /10。心脏中的FABP 称心型脂肪酸结合蛋白。H-FABP 具有稳定的细胞内半衰期,约2 ~ 3天。人心脏每克湿重中含0. 5 mg FABP,占胞质蛋白的15%。 生理情况下,血浆或细胞间液不存在H-FABP,细胞质的浓度比血中浓度高2 × 105 倍。健康人群的血浆含有少量H-FABP,是由骨髂肌损伤连续释放引起,年龄、性别、昼夜节律可显著影响H-FABP浓度。因为男性肌肉较多,所以男性浓度高于女性,H-FABP 大部分经肾清除,故随着年龄的增长,肾功能下降,血H-FABP 浓度逐渐升高,此外,和肌红蛋白一样,年老、锻炼会增加H-FABP 浓度。 二,临床应用 1.诊断急性冠脉综合征 H-FABP 血浆释放特点与肌红蛋白( myoglobin,Mb) 相同,但HFABP在心肌细胞内的含量高于Mb,而在血浆内的含量远低于Mb。因此,当心肌损伤后,血浆H-FABP迅速升高超正常上限,比Mb 和肌钙蛋白来得快,因而更有诊断价值。近年来众多研究表明血清H-FABP 能识别超急期急性心肌梗死,特别是胸痛发病6 h 内的患者,对决定是否住院、冠状动脉造影、介入治疗有很大帮助。陶日新等【2】就研究了cTnI和h-FABP诊断心梗的比较,结果证实:对于胸痛发作6h内的AMI患者,H—FABP的诊断敏感性最高,达到78.26%。而在胸痛发作超过6h的AMI患者中,cTnI检测的诊断敏感性有显著的上升,均达到了93.33%,所以可以对AMI进行确诊。 Orak 等【3】入选83 例可疑ACS 胸痛患者( 65 例最终确诊为ACS) ,于发病6 小时内测定H-FABP、cTnI、肌酸激酶同工酶(CK-MB)。H-FABP、CK-MB、cTnI 的灵敏度分别为98%、86% 和77%,特异性分别为71%、52% 和20%。提示H-FABP 在发病6 h 内具有较高的灵敏度和特异性,可用于早期诊断ACS。

人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒说明书

人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 厦门慧嘉生物科技有限公司 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)水平。用纯化的人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP),再与HRP标记的H-FABP抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)浓度。 试剂盒组成: 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程

中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤 1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标 准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为900ng/L,600ng/L ,300ng/L,150ng/L,75ng/L)。 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样 品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。 8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。 注意事项: 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

中链脂肪酸1

科研设计书 名称:探讨含中链脂肪酸的低乳糖奶粉对婴儿肝炎综合症患儿的辅助治疗 一.立项依据 婴儿肝炎综合症是指1岁以内婴儿(包括新生儿)由不同病因引起,主要以黄疸、肝功能损害、肝或脾大的一组症状。其一般治疗包括补充VitA、D、E、K,某些遗传性代谢缺陷病如半乳糖血症应停用一切奶类和奶类制品,改用豆浆及蔗糖喂养;酪氨酸血症给予低苯丙氨酸、低酪氨酸饮食。重要的是要护肝利胆,有报道使用熊去氧胆酸(商品名优思弗UDCA)治疗,安全性好,对婴儿肝炎综合症尤其是肝内胆汁淤积时具有良好的临床应用价值[1];另有报道使用“退黄汤”(成分:茵陈10g,田基黄8g,金钱草6g,灯草3g,黄柏6g,通草4g,生麦芽8g,茯苓10g)治疗,疗效较满意[2];中西医结合以茵陈蒿汤加味加氨苄青霉素治疗,避免了因长期使用激素治疗而致常见并发症的危险[3]。此处探讨含中链脂肪酸(MCFAs)的低乳糖奶粉对婴儿肝炎综合症的辅助治疗。 19世纪50年代MCFAs的酯类中链甘油三酸酯(MCTs)被引进作为广泛的临床应用,包括胰腺机能不全、脂肪吸收不良、损伤的淋巴乳糜微粒输送、严重的高乳糜微粒血症以及完全胃肠外营养。也被用于早产儿的营养配方,因此1994年,美国食品与药物管理局公认了食品中MCTs的安全性[4]。 中链脂肪酸(MCFAs)是从椰子油水解所获得的含C6~ C12的饱

和脂肪酸混合物。主要成分为己酸(C6:0),辛烷酸(C8∶0) , 葵烷酸(C10∶0)[5]。目前MCFAs主要的成分是15%椰子油,7.9%棕榈仁油,黄油6.8%,牛奶6.9%,酸乳酪6.6%,乳酪7.3%[6]。临床使用的MCT 乳剂主要有二种制剂。一种以物理混合形式的脂肪乳剂, 所含MCT 和LCT浓度比例可以为50∶50, 60∶40 和75∶25。另一种为化学合成形式的脂肪乳剂(结构脂或化学限定脂肪乳剂)。结构脂是将甘油三酯(TG) 水解后, 再将长链脂肪酸(LCFA ) 和MCFA 随机混合后再酯化而成。再酯化前改变MCFA 和LCFA 浓度, 可制得不同的结构甘油三酯[5]。 中链脂肪酸的代谢特点[5]: (1)MCFA 有很大的水溶性, 在单位时间内有更多供酶作用的接触界面。在胃和结肠中也可部分水解。故其消化时对胆盐和胰酶的依赖性小, 比LCT 吸收快而充分。 (2)MCFA 分子小及较低pk 值, 与再酯化酶和激活酶亲和性小, 极少再酯化, 并不参与组成乳糜微粒, 经门静脉直接转运到肝脏。(3)MCFA 不依赖肉毒碱直接进入线粒体内进行B2氧化。有报道发现在其氧化前有一个增加两个碳原子的特殊过程,若此过程缺陷,则影响中链脂肪酸治疗方案的成功[7]。 (4)MCFA 氧化迅速完全, 不易在脂肪组织和肝组织中蓄积。 1.MCT对碳水化合物代谢的影响 MCT对碳水化合物代谢的影响,与MCT的浓度和脂肪酸链长度有关。给予高浓度MCT时,血糖下降8%不等,可能是葡萄糖异生减少或摄取增

大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒说明书

大鼠皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒 使用说明书 厦门慧嘉生物科技有限公司 本试剂盒仅供体外研究使用! 预期应用 ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中皮质醇(Cortisol)含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗皮质醇(Cortisol)抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗皮质醇(Cortisol)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。ELISA法 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板:一块(96孔) 2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上, 然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为180 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成180 ng/ml,90 ng/ml,45 ng/ml,22.5 ng/ml,11.25 ng/ml, 5.63 ng/ml,2.82 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。 如配制90 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 180 ng/ml的上述标准品加入含有 0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3. 样品稀释液:1×20ml。 4. 检测稀释液A:1×10ml。 5. 检测稀释液B:1×10ml。 6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算 好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶 液A。 8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 11. 覆膜:5张 12. 使用说明书:1份 自备物品 1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热) 2. 微量加液器及吸头,EP管 3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸

血清铁浓度检测试剂盒说明书

货号:MS2802 规格:100管/96样 血清铁浓度检测试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: 血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁,该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。 测定原理: 亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+,Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。 自备实验用品及仪器: 离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、冰醋酸、氯仿和蒸馏水。 试剂组成和配置: 试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前配制,加入15mL蒸馏水充分溶解。 试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前配制,加入469μL冰醋酸,加入15mL蒸馏水充分溶解。 标准液:液体×1 支(EP管),100μmol/L Fe3+标准液,4℃保存。 测定: 1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到520nm,蒸馏水调零。 2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。 3. 空白管:取EP管,依次加入125μL蒸馏水,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧, 置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm 测定吸光度,记为A空白管。 4. 标准管:取EP管,依次加入125μL标准液,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧, 置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm测定吸光度,记为A标准管。 5. 测定管:取EP管,依次加入125μL血清,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧,置 于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm测定吸光度,记为A测定管。注意:空白管和标准管只需测定一次。 血清铁浓度计算公式: 血清铁含量(μmol/dL)=[C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总=10× (A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) C 标准液:100 μmol/L Fe 3+ 标准液;V 总:1 dL=0.1 L。 注意事项: 1、血清铁含量少,所用器皿(EP 管)需要注意,避免被铁污染。 2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。 3. 最低检出限为1μmol/L。 第1页,共1页

转铁蛋白试验(长征医院)

便隐血转铁蛋白临床实验应用体会 宓庆梅上海市长征医院 粪便隐血试验是检测消化道出血的一个重要指标,检测方法选择的不同会直接影响判断消化道是否出血和出血的程度。目前,常规的检测方法有化学法(邻甲联苯胺法)和血红蛋白法(单克隆免疫法)。化学检测法中,易产生假阳性,并且敏感性偏底,对于消化道内的微量出血不易测出;血红蛋白法中,敏感性强,可以检测出很微量的出血情况,但是,消化道内大量出血反而会导致假阴性的结果。便隐血检测是美国最常使用的结肠癌和直肠癌普查初筛试验,也是目前唯一通过随机临床试验证实的,可以降低结肠癌和直肠癌所致死亡的检查,实施每年粪便隐血检测可以早期发现结肠癌和直肠癌的发生,可以降低30%的结肠癌和直肠癌患者的死亡率。本文对化学法、血红蛋白法和转铁蛋白法三种便潜血检测方法抗体法进行了比对试验。用单克隆胶体金显色技术,以试纸条一步法检测粪便中血红蛋白,有较高的敏感性和特异性。转铁蛋白单克隆抗体法试纸是由底板、吸水板、硝酸纤维素膜、抗转铁蛋白单抗金标垫、玻璃纤维样品吸液层组成,底板中部为硝酸纤维素膜,硝酸纤维素膜上有一条转铁蛋白单抗反应线和一条羊抗鼠多克隆抗体控制线,在底板一端端头为吸水板,另一端端头为玻璃纤维样品吸液层,硝酸纤维素膜两端分别与吸水板和抗转铁蛋白单抗金标垫相互交叠连接,在抗转铁蛋白单抗金标垫上压有玻璃纤维样品吸液层。当人尿液、粪便中带有转铁蛋白抗原时,样品中转铁蛋白抗原可与抗转铁蛋白单克隆抗体金标探针发生特异结合而被抗转铁蛋白单克隆抗体识别,即发生双抗夹心特异结合,因而可测定尿液、粪便中的转铁蛋白含量。 1.材料和方法 1.1试剂: 1.1.1邻甲联苯胺试剂:邻甲联苯胺1g,溶于50ml冰醋酸和50ml无水乙醇的混合液中,置于4℃冰箱中,避光保存;3%过氧化氢液。 1.1.2粪便血红蛋白胶体金试剂盒(简称WH试纸条):万华普曼生物工程有限公司提供的万华牌“消康保”试纸条。 1.1.3转铁蛋白单克隆抗体法试剂盒:万华普曼生物工程有限公司提供的万华牌“消康保”试纸条。 1.2标本来源:本院2008年1月至3月的住院患者随机132例粪便,男81例,女51例,年龄为27岁至71岁。 1.3方法:

心型脂肪酸结合蛋白资料

心型脂肪酸结合蛋白

心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)是心脏中富含的一种新型小胞质蛋白,它具有高度心脏特异性(也就是主要在心脏组织中表达)。心肌缺血性损伤出现后,h-FABP可以早在胸痛发作后1至3小时在血液中被发现,6至8小时达到峰值而且血浆水平在24至30小时内恢复正常。心脏脂肪酸结合胞质蛋白由132个氨基酸组成,分子量为15 kDa。h-FABP基因位于染色体I上。它是心脏最丰富的蛋白质之一。h-FABP结合两个脂肪酸分子并参与脂肪酰基辅酶A的运输,活跃于氧化过程,从而在线粒体中产生能量。 h-FABP在生物学方面的几个特点,表明其是心肌损伤早期诊断有价值标志物:1.在心肌中高浓度;2.在细胞质中限制;3.低分子量和面积小;4.相对组织特异性;5.与心脏以外组织中CK-MB的分布相似;6.在心肌损伤后早释进入血浆和尿液。 心型脂肪酸结合蛋白检测在心血管疾病的诊断应用主要表现在三个方面: 一是h-FABP与急性心肌梗死。由于h-FABP可以早在胸痛发作后1至3小时在血液中被发现,故h-FABP能够提供最强的诊断能力,尤其是在急性缺血事件的前6小时内,有助于快速危险分层和更早预测患者预后。另外,h-FABP的早期使用可以克服急性胸痛早期心肌肌钙蛋白检测的陷阱。心肌肌钙蛋白在循环中越持久,可能越有助于急性心肌损伤的后期诊断。 二是h-FABP和手术后急性心肌损伤。h-FABP用于早期检测心肌损伤还被延伸到心脏手术。在心脏手术中松开主动脉钳夹后h-FABP血清浓度比CK-MB和TnT更早达到最高水平。普遍认为h-FABP释放量反映心肌损伤的程度。 三是h-FABP与急性冠脉综合征(ACS)。h-FABP在ACS发病早期可迅速释放到血液中,对于ACS的诊断具有时间优势,同时对心肌损伤具备高特异性、高灵敏度、高符合率的特点;h-FABP浓度在ACS长期预后中,可有效鉴别出AMI、心衰及不稳定心绞痛等不良事件的高危患者;h-FABP与肌钙蛋白联合检测可提高诊断敏感性,对ACS更具诊断价值。 随着h-FABP高特异性单克隆抗体的应用,h-FABP在ACS早期诊断及预后评估中的应用被广泛认可,而其与肌钙蛋白的联合检测则是未来临床对心血管疾病诊断应用的重点。 -通讯员陆卫良

心脏型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)胶体金快速检测试剂盒

心脏型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)胶体金快速检测试剂盒 使用说明书 (仅供专业人员体外诊断使用) 用途 心脏型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)检测试剂盒是应用免疫胶体金层析技术建立的快速、特异、操作简便的一步法定性检测方法,用于定性检测人血清或血浆中的心脏型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)。可用于急性心肌梗塞(AMI)的辅助诊断。 简介 用于早期诊断急性心肌梗塞(AMI, Acute Myocardial infarction)的指标主要有肌酸激酶异构酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(Troponin I)、肌钙蛋白T(Troponin T)和肌红蛋白(Myoglobin)等,但它们对于早期诊断AMI却很不理想,主要原因是:CK-MB、肌钙蛋白I、肌钙蛋白T缺乏敏感性,它们在胸痛后6-8小时才浓度上升;而肌红蛋白则缺乏特异性,它虽然在胸痛后2-3小时浓度上升,但不能区分骨骼肌和心肌损伤。 而心脏型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)则克服了以上两缺点,对于早期诊断AMI具有特异性和敏感性,它是15KD的小分子,动力学特征类似于肌红蛋白,即在胸痛后2-3小时后浓度开始上升,在12-24小时内恢复到正常水平,在4-8小时内达到最高值;而且h-FABP的免疫性不同于其它类型的FABP(如小肠型FABP 和肝脏型FABP),具有特异性,不会发生交叉反应。基于h-FABP以上特点使得其成为理想的AMI早期诊断生化指标。

检测原理 心脏型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)检测试剂盒是采用固相免疫胶体金层析技术,利用双抗体夹心法定性检测人血清或血浆中的h-FABP。 人血清或血浆扩散通过附着红色颗粒包被的抗体的滤膜,与滤膜中的包被抗体结合,在检测线(T)区域内,h-FABP-抗体复合物开始与包被在检测线区内的抗体接触,如果血清h-FABP浓度大于10ng/ml,在检测线区h-FABP-抗体复合物被抗-h-FABP的抗体捕获,并出现一条可见的红色条带。h-FABP浓度越高,检测线区出现色带的速度越快,色带越深。彩色颗粒包被的抗体扩散到质控线(C)区域被第二抗体捕获形成质控区红色带。 保存条件和有效期 铝箔袋包装, 4-25℃储存,切勿冷冻, 有效期1年。 试剂盒组成 每盒包装中含:单人份检测卡25包,使用说明书1份。 注意事项

人(Human)瘦素(LEP)ELISA试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒 使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被瘦素(LEP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素(LEP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品 1.酶标仪(450nm) 2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 操作注意事项 1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。 4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5.所有液体组分使用前充分摇匀。

铁测定试剂盒(PAPS显色剂法)产品技术要求huayuyikang

铁测定试剂盒(PAPS显色剂法) 适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中铁的含量。 1.1 产品型号/规格 试剂1:1×20 ml、试剂2:1×5 ml;试剂1:1×40 ml、试剂2:1×10 ml;试剂1:2×40 ml、试剂2:2×10 ml;试剂1:4×40 ml、试剂2:4×10 ml;试剂1:4×60 ml、试剂2:2×30 ml;试剂1:1×80 ml、试剂2:1×20 ml;试剂1:2×80 ml、试剂2:2×20 ml;试剂1:5×80 ml、试剂2:5×20 ml;试剂1:3×60 ml、试剂2:1×45 ml;试剂1:6×70 ml、试剂2:3×35 ml;试剂1:5×40 ml、试剂2:1×50 ml;试剂1:4×40 ml、试剂2:2×20 ml;试剂1:4×80 ml、试剂2:4×20 ml;试剂1:4×50 ml、试剂2:1×50 ml;试剂1:8×50 ml、试剂2:2×50 ml;试剂1:8×16.8 ml、试剂2:8×4.2 ml。 1.2 划分说明 试剂1:醋酸缓冲液 0.2 mol/L 表面活性剂适量 稳定剂适量 试剂2:PAPS 2.6 mmol/L 2. 性能指标 2.1 外观和性状 2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;中文包装标签应清晰、准确、牢固。 2.1.2 试剂1应为无色澄清液体;试剂2应为棕色液体。 2.2 净含量

不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在光径1 cm、主波长578 nm下,以蒸馏水为检测样本时,吸光度应不大于0.300 。 2.4 分析灵敏度 铁含量为30.00 μmol/L时,测定吸光度差值(△A)应大于0.080。 2.5 线性范围 铁试剂在线性范围(0~120] μmol/L内: (a)回归系数r应不小于0.990; (b)在(0~12.0 ] μmol/L范围内,线性绝对偏差应不大于±1.2 μmol/L;(c)在(12.0~120]范围内,线性相对偏差应不大于±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1 重复性 变异系数(CV)均应不大于5%。 2.6.2 批间差 相对偏差(R)应不大于5%。 2.7 准确度 采用GBW09152 冷冻人血清中无机成分分析标准物质对试剂盒进行测试,相对偏差应不超过±10%。 2.8 稳定性 铁试剂盒贮存于2 ℃~8 ℃、避光环境中,有效期为12个月。有效期满后应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

心型脂肪酸结合蛋白

心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)是心脏中富含的一种新型小胞质蛋白,它具有高度心脏特异性(也就是主要在心脏组织中表达)。心肌缺血性损伤出现后,h-FABP可以早在胸痛发作后1至3小时在血液中被发现,6至8小时达到峰值而且血浆水平在24至30小时内恢复正常。心脏脂肪酸结合胞质蛋白由132个氨基酸组成,分子量为15 kDa。h-FABP基因位于染色体I上。它是心脏最丰富的蛋白质之一。h-FABP结合两个脂肪酸分子并参与脂肪酰基辅酶A 的运输,活跃于氧化过程,从而在线粒体中产生能量。 h-FABP在生物学方面的几个特点,表明其是心肌损伤早期诊断有价值标志物:1.在心肌中高浓度;2.在细胞质中限制;3.低分子量和面积小;4.相对组织特异性;5.与心脏以外组织中CK-MB的分布相似;6.在心肌损伤后早释进入血浆和尿液。 心型脂肪酸结合蛋白检测在心血管疾病的诊断应用主要表现在三个方面: 一是h-FABP与急性心肌梗死。由于h-FABP可以早在胸痛发作后1至3小时在血液中被发现,故h-FABP能够提供最强的诊断能力,尤其是在急性缺血事件的前6小时内,有助于快速危险分层和更早预测患者预后。另外,h-FABP的早期使用可以克服急性胸痛早期心肌肌钙蛋白检测的陷阱。心肌肌钙蛋白在循环中越持久,可能越有助于急性心肌损伤的后期诊断。 二是h-FABP和手术后急性心肌损伤。h-FABP用于早期检测心肌损伤还被延伸到心脏手术。在心脏手术中松开主动脉钳夹后h-FABP血清浓度比CK-MB和TnT更早达到最高水平。普遍认为h-FABP释放量反映心肌损伤的程度。 三是h-FABP与急性冠脉综合征(ACS)。h-FABP在ACS发病早期可迅速释放到血液中,对于ACS的诊断具有时间优势,同时对心肌损伤具备高特异性、高灵敏度、高符合率的特点;h-FABP浓度在ACS长期预后中,可有效鉴别出AMI、心衰及不稳定心绞痛等不良事件的高危患者;h-FABP与肌钙蛋白联合检测可提高诊断敏感性,对ACS更具诊断价值。 随着h-FABP高特异性单克隆抗体的应用,h-FABP在ACS早期诊断及预后评估中的应用被广泛认可,而其与肌钙蛋白的联合检测则是未来临床对心血管疾病诊断应用的重点。-通讯员陆卫良

总铁结合力测定试剂盒(Ferene法)产品技术要求九州泰康

总铁结合力测定试剂盒(Ferene法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中的总铁结合力。1.1包装规格 试剂Ⅰ(R1):60mL×3、试剂Ⅱ(R2):20mL×3、试剂Ⅲ(R1):60mL×3、试剂Ⅳ(R2):20mL×3; 试剂Ⅰ(R1):60mL×2、试剂Ⅱ(R2):20mL×2、试剂Ⅲ(R1):60mL×2、试剂Ⅳ(R2):20mL×2; 试剂Ⅰ(R1):60mL×1、试剂Ⅱ(R2):20mL×1、试剂Ⅲ(R1):60mL×1、试剂Ⅳ(R2):20mL×1; 试剂Ⅰ(R1):45mL×1、试剂Ⅱ(R2):15mL×1、试剂Ⅲ(R1):45mL×1、试剂Ⅳ(R2):15mL×1; 试剂Ⅰ(R1):90mL×1、试剂Ⅱ(R2):15mL×2、试剂Ⅲ(R1):90mL×1、试剂Ⅳ(R2):15mL×2。1.2主要组成成分

2.1 外观 试剂盒外观应整洁,文字符号标识清晰;试剂均为澄清溶液,无未溶解物。2.2 装量 试剂瓶内试剂的净含量不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在波长A600nm,记录吸光度值,试剂空白吸光度(R1+R2)不超过0.80A,试剂空白吸光度(R3+R4)不超过0.80A。 2.4 分析灵敏度 Fe:测试浓度100μmol/L的样本,吸光度变化值不低于0.002A。 UIBC:测试浓度50μmol/L的样本,吸光度变化值不低于0.002A。 2.5 线性 2.5.1铁离子: 在[1,120]μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990; 在[1,30)μmol/L范围内,线性绝对偏差不超过±3.0μmol/L; 在[30,120]μmol/L范围内,线性相对偏差不超过±10%; 2.5.2不饱和铁: 在[1,80]μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990; 在[1,30)μmol/L范围内,线性绝对偏差不超过±3.0μmol/L; 在[30,80]μmol/L范围内,线性相对偏差不超过±10%。 2.6 重复性 2.6.1批内重复性

铁蛋白测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求furuirunkang

铁蛋白测定试剂盒(化学发光免疫分析法)适用范围:用于体外定量测定人血清中铁蛋白的浓度水平。 1.1规格 96T。 1.2 组成

2.1 外观 a)包装标签应清晰、无磨损; b)试剂盒各组份应齐全、包装完好,液体无渗漏。 2.2 线性 本试剂盒线性范围为:[0.1 ,600] ng/mL。线性相关系数r≥0.9900。 2.3空白限 不大于0.1ng/mL。 2.4准确度 将参考物质作为样本进行检测,其测量结果的相对偏差应在±10%范围内。 2.5重复性 重复检测质控品Q1和 Q2各10次,其批内变异系数(CV)应不大于10%。 2.6批间差 用三个批号的试剂盒检测质控品Q1和 Q2,三批号试剂盒之间的批间变异系数(CV)应不大于15%。 2.7质控品赋值有效性 质控品测量值应在质控范围内。 2.8特异性 2.8.1与甲胎蛋白的交叉反应 检测浓度为600 ng/mL的甲胎蛋白, 交叉反应率应小于1%。 2.8.2与转铁蛋白的交叉反应 检测浓度为600 ng/mL的转铁蛋白, 交叉反应率应小于1%。 2.8.3与尿微量白蛋白的交叉反应 检测浓度为600 ng/mL的尿微量白蛋白,交叉反应率应小于1%。 2.9稳定性 规定产品2℃~8℃储存,有效期6个月。取到效期后的样品检测准确度、空白限、线性、重复性,应符合2.2~2.5的要求。 2.10溯源性

根据《GB/T 21415—2008 体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供校准品的来源,赋值过程以及不确定度等内容,校准品溯源至中国食品药品检定研究院标准品(150540)。

生化名词解释

1.清道夫受体:主要存在于巨噬细胞表面,介导修饰LDL(包括氧化LDL和BVLDL)从血液循环中清除。其表达不受细胞内胆固醇浓度的调节。 2.残粒受体:能识别ApoE,是清除血液循环中CM残粒和β-VLDL残粒的主要受体,它也能结合含ApoE的HDL,又称为ApoE受体。 3.血浆脂蛋白:由于甘油三酯和胆固醇难溶于水,不能直接溶解在血液里被装运,在血浆中它们是与特殊的载体蛋白和极性类脂(PL)结合成微溶于水的一类球形大分子复合物微粒而被运输,这种复合物称为血浆脂蛋白。 4.高脂蛋白血症是指血浆中CM,VLDL,LDL,HDL等脂蛋白出现一种或几种浓度过高的现象。 5.水肿:当机体摄入水过多或排出减少,使体液中水增多时,称为水肿或水中毒。 6.P50:是指使Hb氧饱和度达50%时的PO2 7.酸碱平衡:机体会通过各种调节机制,排出体内多余的酸性和碱性物质,调节体液酸碱物质含量及其比例,维持体液PH在正常范围内,这个过程称为酸碱平衡。 8.内生肌酐清除率:肾在单位时间内,把若干毫升血浆中的内生肌酐全部清除出去的能力,称为内生肌酐清除率。 9.心肌损伤:伴有心肌细胞变性坏死的疾病,主要包括AMI、不稳定型心绞痛和心肌炎以及心肌病、心力衰竭等疾病。 10.心肌损伤标志物:心肌损伤标志物是指当心肌细胞损伤时,可大量释放至循环血液中,其血液浓度变化可反映心肌损伤及其程度的特异物质,其正确的检测可以为急性心肌梗死及其他伴有心肌损伤疾病的早期诊断,病情诊断,疗效观察提供具有价值的信息。 1.血脂:是血浆中脂质(类)的总称,包括甘油三酯(TG)、磷脂(PL)、游离胆固醇(FC)及胆固醇酯(CE)、游离脂肪酸(FFA)等 2.氧解离曲线:以血氧饱和度为纵坐标、PO2为横坐标作图,所得的曲线称为氧和血红蛋白解离曲线,简称氧解离曲线。 3.生物转化:机体对非营养物质进行代谢转变,使其极性增加,水溶性增强,易于排出的过程称为生物转化作用 4.高脂血症是指血浆中的TC和(或)TG水平升高。 1.简述血脂的超速离心法和电泳法的分类。 用超速离心法可将血浆脂蛋白分为:乳糜微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)。 利用琼脂糖电泳法,血浆脂蛋白可分为乳糜微粒、前-β、β和α四条脂蛋白区带。 4.简述血清甘油三酯的磷酸甘油氧化酶法测定原理。 用脂蛋白酯酶(LPL)使血清中TG水解成甘油与脂肪酸,甘油激酶(GK)及腺苷三磷酸(ATP)将甘油磷酸化,以磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化3-磷酸甘油(G-3-P)产生H2O2,最后以Trinder反应显色,A500nm的值与TG浓度成正比。 5.什么叫做脱水,根据失水和失钠的比例,脱水可分为哪几种情况? 脱水就是人体体液丢失造成细胞外液的减少。根据失水与失钠的比例不同,可分为: 高渗性脱水:失水高于失钠; 等渗性失水:失水等于失钠; 低渗性失水:失钠高于失水。 6.重氮盐改良JG法测定血清胆红素的原理。

铁测定试剂盒(亚铁嗪法)产品技术要求lepu

铁测定试剂盒(亚铁嗪法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中铁的浓度。1.1规格 试剂1: 1×30mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 2×60mL,试剂2: 2×20mL; 试剂1: 1×50mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 1×40mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 2×40mL,试剂2: 1×20mL; 试剂1: 2×40mL,试剂2: 2×10mL; 试剂1:3×28mL,试剂2:3×7mL; 试剂1:1×4L,试剂2:1×1L; 试剂1:2×4L,试剂2:1×2L。 1.2主要组成成分 试剂1主要组分: 试剂2主要组分: 2.1 净含量

应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1应为无色或浅色澄清液体,试剂2应为浅色或橙色澄清液体。外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 在600nm处测定试剂空白吸光度,应≤1.5; 2.4 分析灵敏度 测试25μmol/L的被测物时,吸光度变化(ΔA)应不低于0.005. 2.5 准确度 用参考物质(GBW09152)对试剂(盒)进行测试,相对偏差不超过±5%。 2.6 重复性 批内变异系数(CV)应不超过5%。 2.7 线性 2.7.1在[1,100]μmol/L 区间内,线性相关系数r应不低于0.990; 2.7.2[1,8)μmol/L区间内绝对偏差不超过±0.64μmol/L;[8,100]μmol/L区间内相对偏差不超过±8%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定,相对极差≤6%。 2.9 稳定性 取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测,应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。

血红蛋白转铁蛋白检测试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求wanhuapuman

血红蛋白/转铁蛋白检测试剂盒(胶体金免疫层析法) 适用范围:该产品用于体外定性检测人体粪便样本中的血红蛋白和转铁蛋白的含量。 1.1包装规格 24人份/盒。 1.2 主要组成成分 在血红蛋白检测条和转铁蛋白检测条的基础上外加筒形状的聚苯乙烯塑料外壳制成。血红蛋白检测条主要由塑料板,吸水板,硝酸纤维素膜,胶体金,吸水纸组成;硝酸纤维素膜由包被有羊抗鼠多克隆抗体的控制线(C线)和包被有鼠抗人血红蛋白单克隆抗体的反应线1(T线)组成;胶体金由鼠抗人血红蛋白单克隆抗体2标记制成;转铁蛋白检测条主要由塑料板,吸水板,硝酸纤维素膜,胶体金,吸水纸组成;硝酸纤维素膜由包被有羊抗鼠多克隆抗体的控制线(C线)和包被有鼠抗人转铁蛋白单克隆抗体的反应线1(T线)组成;胶体金由鼠抗人转铁蛋白单克隆抗体2标记制成。 2.1 外观 外观整洁完整、无破损、无污染;材料附着牢固、内容物齐全。包装完整、标签清晰。 2.2 宽度 膜条应宽于2.5mm。 2.3 移行速度 液体移行速度应不低于10mm/min。 2.4 临界值及重复性 2.4.1 分别检测含被测物相应检出限浓度(见表1)的阳性质控品各20次,其结果阳性率≥95%。 2.4.2 分别检测含被测物相应阴性检测浓度(见表1)的阴性质控品各20次,其结果阴性率≥95%。 表1 被测物检出限检测浓度点

2.5 分析特异性 检测含有宣称不产生交叉反应的最高浓度/水平的干扰物质(详见表2)结果应不出现阳性。 表2 常见的交叉反应源 2.6 批间差 抽取三个批次的试纸条各20人份,分别按临界值及重复性检测方法检测,阴性结果符合率应≥95%,阳性结果符合率应≥95%。 2.7 HOOK效应 检测2000μg/ml的人血红蛋白阳性质控品及400μg/ml的转铁蛋白阳性质控品,结果应均不出现阴性。 2.8 稳定性 检测试纸条在4℃-30℃避光保存36个月后,产品的性能应符合2.4,2.5,2.7的要求。

心型脂肪酸结合蛋白

心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)是心脏中富含的一种新型小胞质蛋白,它具有高度心脏特异性(也就是主要在心脏组织中表达)。心肌缺血性损伤出现后,h-FABP可以早在胸痛发作后1 至3小时在血液中被发现,6至8小时达到峰值而且血浆水平在24至30小时内恢复正常。心脏脂肪酸结合胞质蛋白由132个氨基酸组成,分子量为15 kDa。h-FABP基因位于染色体 I上。它是心脏最丰富的蛋白质之一。h-FABP结合两个脂肪酸分子并参与脂肪酰基辅酶A 的运输,活跃于氧化过程,从而在线粒体中产生能量。 h-FABP在生物学方面的几个特点,表明其是心肌损伤早期诊断有价值标志物:1?在心肌中高浓度;2?在细胞质中限制;3?低分子量和面积小;4?相对组织特异性;5?与心脏以外组织中CK-MB的分布相似;6?在心肌损伤后早释进入血浆和尿液。 心型脂肪酸结合蛋白检测在心血管疾病的诊断应用主要表现在三个方面: 一是h-FABP与急性心肌梗死。由于h-FABP可以早在胸痛发作后1至3小时在血液中被发现,故h-FABP能够提供最强的诊断能力,尤其是在急性缺血事件的前6小时内,有助于快速危险分层和更早预测患者预后。另外,h-FABP的早期使用可以克服急性胸痛早期心 肌肌钙蛋白检测的陷阱。心肌肌钙蛋白在循环中越持久,可能越有助于急性心肌损伤的后期 诊断。 二是h-FABP和手术后急性心肌损伤。h-FABP用于早期检测心肌损伤还被延伸到心脏 手术。在心脏手术中松开主动脉钳夹后h-FABP血清浓度比CK-MB和TnT更早达到最高水 平。普遍认为h-FABP释放量反映心肌损伤的程度。 三是h-FABP与急性冠脉综合征(ACS)。h-FABP在ACS发病早期可迅速释放到血液中,对于ACS的诊断具有时间优势,同时对心肌损伤具备高特异性、高灵敏度、高符合率的特点;h-FABP 浓度在ACS长期预后中,可有效鉴别出AMI、心衰及不稳定心绞痛等不良事 件的高危患者;h-FABP与肌钙蛋白联合检测可提高诊断敏感性,对ACS更具诊断价值。 随着h-FABP高特异性单克隆抗体的应用,h-FABP在ACS早期诊断及预后评估中的应 用被广泛认可,而其与肌钙蛋白的联合检测则是未来临床对心血管疾病诊断应用的重点。 通讯员陆卫良 心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP )是近几年国内外研究较多的一种新型的心脏生化标志物。其主要存在于心肌细胞中,参与心肌细胞内脂肪酸的吸收、代谢和运输。正常人外周血中H-FABP 的含量极少,当心肌细胞缺血、坏死时,H-FABP 可早期、快速、大量的释放入血液中,导致血液中的含量快速上升。H-FABP 在急性冠脉综合征中的临床应用包括以下几个方面。 1 心肌损伤的早期诊断 在急性心肌梗死发生的早期,有些患者的临床症状并不典型,心电图也没有特异性的改变,传统

脂肪酸结合蛋白及对动物脂肪代谢的作用

脂肪酸结合蛋白及对动物脂肪代谢的作用 邓莹莹 摘要:脂肪酸结合蛋白(FABP) 是一族小分子细胞内蛋白质, 对长链脂肪酸有很高的亲和力, 能把脂肪酸从细胞膜转运到细胞内利用位点, 在长链脂肪酸的代谢中起重要作用。本文就脂肪酸结合蛋白的结构、生物学功能及其对脂肪酸代谢调节方面的研究进行了综述。 关键词:脂肪酸结合蛋白质生物学功能脂肪代谢 1 导言 脂肪酸结合蛋白(FABP)是一种小分子量(14~15 kDa)的细胞溶质蛋白。1972年,Ockner和Mishkin首次报道了在大鼠细胞内存在FABP,并证实其对长链脂肪酸有高度的亲和性,对动物体内脂肪酸和它们的CoA衍生物的摄取、细胞内转运、氧化、脂化或合成均有重要作用。随后的研究表明,FABP还能协助将动物组织细胞内的脂肪酸运至其进行β-氧化的场所或甘油三酯和磷酯合成部位,促进心肌和脂肪细胞中甘油三酯的沉积,提高肌间脂肪、降低体脂沉积等调控作用。研究数据均有力支持将FABPs定义为脂肪酸转运蛋白。已经清楚知道FABPs周围包绕了大量的相关蛋白,一些除结合脂肪酸外,还结合了疏水的配体。最近几年,对FABPs 的组织分布,配体亲和力和特异性,以及其结构特性进行了集中研究,结果均表明FABPs参与细胞内脂质代谢。 2FABP的分类及结构特点 FABP的分类与分布 FABP作为细胞溶质蛋白,不仅广泛分布在哺乳动物的所有组织中,而且在鸟类、鱼类以及昆虫的脂肪代谢组织中均有发现。由于FABP在其纯化的过程都是将细胞溶质组分作为起始原料,因此通常以最初被分离的组织来命名。迄今为止发现结构不同、功能相似的FABP有:心肌型(H)、肝型(L)、肠型(I)、脂肪细胞型(A)、表皮型(E)、脑细胞型(B)、骨骼肌型(S)、肾脏型(K)、髓磷脂型(My)、牛皮癣相关性(PA)、回肠型(Ileum)、睾丸型、细胞视黄醇结合蛋白和细胞视黄醇酸结合蛋白。在同一细胞中可分布多种FABPs,例如在小肠内皮细胞上存在两种不同FABPs,即L-FABP和I-FABP,二者具有29%的同源性。在植物中也发现有FABPs。FABPs 大约有130个标准氨基酸,在小鼠L-FABP结构中有127个残基,包括启始N-甲酰蛋氨酸。不同类型FABPs 的氨基酸序列有38~70%的同源性,在空间结构上也有相似之处,都存在两个α螺旋和一个β折叠结构。各型FABPs的两个短α螺旋结构由肽链N末端的7个氨基酸组成,β折叠结构则是由92个氨基酸构成,分为βA~J八个片层。L-FABP是第一个克隆并纯化的FABP家族的成员,具有晶状体结构和氨基酸序列。 FABP的结构 胞浆脂肪酰COA结合蛋白,胞浆视黄醇分析各种FABP的一级结构,发现有如下规律:(1)大多数FABP的氨基酸组成缺乏或极少含有半胱氨酸和脯氨酸,疏水性侧链的氨基酸较多;(2)各型之间氨基末端(1~25)和中段(90~90)的均一性较强,羧基末端变异较大;(3)哺乳动物不同种系之间的相同器官,如心脏、肝脏和髓鞘的FABP具有高度均一性(80~90%),而不同器官类型之间的均一性仅为20~35%;令人惊奇的是牛心型FABP与泌乳乳腺中的生长抑制因子之间,只有6个位点的氨基酸残基不同,均一性达95%。Bansal从小鼠肝脏中分离出的硒结合蛋白与大鼠肝型FABP氨基末端的连续93个氨基酸的均一性达92%。Offneer(1988)等报道,人的H-FABP一级结构由132个氨基酸残基组成,其中含有多个苏氨酸和赖氨酸,缺少半胱氨酸。在N末端有一个乙酰化的缬氨酸残基。在48~54和114~119之间有两个相同的重复片段。在这两个片段之间形成β-结构并降低蛋白亲水性。上述两个片段位于较长的重复片断内(48~60、114~125),其中62%的序列是相似的。 下面是人肠型FABP的一级结构:

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