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小鼠肠道细胞类型

小鼠肠道细胞类型

(最新版)

目录

1.肠道细胞的重要性和多样性

2.小鼠肠道细胞的分类和功能

3.研究小鼠肠道细胞的意义

正文

肠道细胞是构成消化系统的重要组成部分,它们的功能和多样性对于人体的健康至关重要。近年来,随着科学技术的进步,研究人员对肠道细胞的研究越来越深入。其中,小鼠肠道细胞的分类和功能成为研究热点,为我们提供了许多有关肠道细胞生物学的重要信息。

一、肠道细胞的重要性和多样性

肠道细胞是消化和吸收养分的主要场所,它们的功能直接影响着人体的营养状况和健康。此外,肠道细胞还参与免疫反应和炎症反应,对维护人体健康起到重要作用。

肠道细胞的种类繁多,根据其功能和形态特点,可以分为上皮细胞、腺细胞、杯状细胞、潘氏细胞等。其中,上皮细胞是构成肠道上皮屏障的主要细胞类型,负责阻挡肠道内的病原微生物和有害物质;腺细胞和杯状细胞则负责分泌消化液,帮助肠道消化和吸收养分;潘氏细胞则是肠道内的一种免疫细胞,参与肠道免疫反应。

二、小鼠肠道细胞的分类和功能

小鼠作为常用的实验动物模型,其肠道细胞的研究为我们提供了许多有关肠道细胞生物学的重要信息。根据最近的研究发现,小鼠肠道细胞可以分为以下几类:

1.上皮细胞:小鼠肠道上皮细胞主要包括肠上皮细胞和肠内分泌细胞。

肠上皮细胞负责构成肠道上皮屏障,肠内分泌细胞则分泌多种激素,调节肠道功能。

2.腺细胞:小鼠肠道腺细胞主要分泌消化液,帮助肠道消化和吸收养分。

3.杯状细胞:小鼠肠道杯状细胞是肠道内的一种特殊细胞类型,主要负责分泌黏液,保护肠道上皮细胞免受胃酸和消化酶的侵蚀。

4.潘氏细胞:小鼠肠道潘氏细胞是一种免疫细胞,参与肠道免疫反应,维护肠道内环境的稳定。

三、研究小鼠肠道细胞的意义

研究小鼠肠道细胞不仅为我们提供了关于肠道细胞生物学的重要信息,还为我们提供了许多有关肠道疾病治疗和预防的重要线索。例如,肠道上皮屏障的损伤和功能障碍是导致肠道炎症和感染的主要原因,研究肠道上皮细胞的功能和调控机制有助于我们找到新的治疗方法。

总之,研究小鼠肠道细胞的分类和功能对于我们理解肠道细胞的生物学特性、预防和治疗肠道疾病具有重要意义。

原代小肠上皮细胞提取步骤

小鼠原代小肠上皮细胞(Small intestinal epithelial cells, IECs)提取 一、材料准备 1、动物 2、用于组织消化和细胞分离的材料 (1) 75%乙醇; (2) 组织清洗液:D-hank’s液: NaCl 8g,Na2HPO4·12H2O 0.126 g,KCl 0.4 g,KH2PO4 0.06 g,D-Glucose 1.00 g,Na2CO3 0.35 g,配制成1L D-hank’s液,过滤除菌后加入200 U/ml青霉素和0.2 mg/ml链霉素。 (3) 无菌眼科剪和刀片; (4) 酶消化液:D-hank’s液配制含胶原蛋白酶XI 300 U/ml和中性蛋白酶I 0.1 mg/ml; (5) 组织分散液:DMEM+5% FBS+2%山梨糖醇; (6) 器皿:洁净的60 mm培养皿若干,15 ml离心管,50 ml离心管; 3、用于细胞培养的材料 (1) 完全培养基:DMEM,5-10% FBS,0.25 IU胰岛素,50 μg/ml肝素,20 ng/ml EGF,100 U/ml青霉素,0.1 mg/ml链霉素; (2) 鼠尾胶原蛋白(铺板),12/24孔板; 二、原代小肠上皮细胞提取和培养 组织前处理(1)-(3) (1) 取出生19天左右小鼠颈椎脱臼处死后用75%乙醇浸泡消毒; (2) 将小鼠移入超净台内平皿中,剖开腹中线,从盲肠末端开始向上取约15 cm即回肠部,用注射器吸取冰冷的组织清洗液充分清洗去除肠腔中的食物残渣,移入干净的装有清洗液的平皿中; (3) 充分清理去除肠系膜,沿中线剪开肠管,并在清洗液中充分清洗3-5次(每次换液); 酶消化(4)-(5) (4) 将小肠剪成约1 mm3的组织块,移入50 ml EP管中,加入清洗液静止10 min后弃掉上清液,并加入适量酶消化液,37℃摇床孵育20-30 min,孵育结束后上下颠倒离心管3-5 min;(5) 吸取少许与显微镜下观察小肠壁各层分离情况(消化液中由肌肉碎片,多细胞上皮聚集体,单细胞和碎片组成),若70%以上“隐窝/绒毛”单元从肠上皮分离则可加入适量组织分散液或含血清培养基终止酶消化; IECs纯化(6)- (8) (6) 轻轻吹打悬液混匀,静置1 min后搜集上清,弃掉沉淀,沉淀中主要为不需要的肌肉碎片等; (7) 将搜集的上清在800-1000 rpm下离心5 min,弃掉上清,并用组织分散液重悬沉淀; (8) 重复(6)-(7)操作3-5次,最后一次离心后用完全培养基重悬沉淀; IECs培养(9)-(12) (9) 用鼠尾胶原蛋白包被12/24孔板(具体根据说明书进行); (10) 计数细胞悬液,将细胞种植到孔板中,24-48小时候观察细胞状态,根据状态2-3天换液一次; (11) 待细胞状态恢复,并铺满孔板后可按照常规操作进行细胞传代和冻存; (12) 原代细胞非永生细胞,随着传代代数增加,细胞增殖能力下降,但代数较少时细胞增殖能力也可能尚未完全恢复,因此通常取第3-6代细胞进行实验。 三、原代小肠上皮细胞鉴定: 广谱角蛋白(pan Cytokeratin)免疫荧光染色阳性。

《自然》发布单细胞RNA测序重要图谱:首张小肠细胞图谱

《自然》发布单细胞RNA测序重要图谱:首张小肠细胞图谱 研究人员检测了小肠中5.3万多个细胞的基因表达,为了解炎症性肠病和食物过敏的生物学机制提供了丰富的参考资料。 小肠图 我们肠道上皮是人体内多样性最高,最具活力的组织之一, 作为机体与外界的主要界面之一,组成了一个细胞的生态系统。 为了更好地理解这些复杂的组织及其功能,还有影响它的疾病,麻省理工学院、哈佛大学和麻省总医院研究人员领导的一个研究团队通过分析从小鼠肠道或肠道类器官中取样的5.3万多个单独的细胞,完成了一张高分辨率、以构成小肠的细胞基因表达为基础的细胞图谱。这为研究影响肠道疾病的各种生物学条件提供参考, 如炎症性肠病、小肠癌、乳糜泻(celiac disease)和食物过敏,也增强了我们对肠道细胞产生激素和其他信号的理解, 并为肠道如何对不同入侵病原菌做出应答提供了新的线索。 这一重要成果公布在11月8日的Nature杂志上,由麻省总医院Aviv Regev领导完成,此前Regev还曾与张锋一道,报道了新测序技术Div-Seq的最新成果。 肠道执行的功能很多, 包括吸收养分, 产生身体的许多激素, 并拒绝有毒物质和病原体的入侵。为此, 它需要依赖于许多特殊细胞的活性和互动。其中一些细胞是我们所知的, 但迄今仍有不解之谜。 scRNA-seq 在这篇文章中,研究人员通过大量的单细胞转录组RNA测序(scRNA-seq)揭示了之前未知的细胞亚型,并详细说明了细菌和病原

体入侵感染时,小肠上皮发生的变化。scRNA-seq是一套有效的基因组技术, 能够识别个体细胞内的特定基因表达谱。 Aviv Regev表示,“每一个新技术都是更详细的研究细胞和组织的一个新机会, 这能帮助我们提出新的生物学问题, 或重新审视旧的问题。” “我们希望利用单细胞RNA测序技术,在更深层次里了解什么是正常的肠道组织。有了这个基线, 我们就可以开始分析疾病了。” 文章的另外一位作者,博士后 Moshe Biton说,“肠道上皮与免疫系统,以及肠道微生物都有联系, 因此肠道是细胞连接的主要中枢, 对我们来说了解健康和疾病的肠道生理是非常重要的。而且这也是一个我们研究多时的组织,我们对其的了解不少,现在我们需要重新审视它, 看看我们是否可以通过scRNA-seq找到新的东西。” 新的细胞类型 利用这一技术,研究人员共同获得了总共53,193个小肠上皮细胞的表达谱。利用这一数据,他们针对已知的细胞类型 (如肠道细胞、杯状细胞、潘氏细胞(Paneth cells)、塔夫细胞(tuft cells)),特定的细胞亚型或种群(如细不同成熟阶的肠道细胞段) 和稀有细胞(如M 细胞)的表达特征进行了精确的描述。 “这项研究的一大成果就是对与每个上皮细胞类型相关的已知,之前未知的感应分子进行了归类,我们希望这对靶向代谢失序疾病的药物设计有一定帮助,”文章作者之一Nogal Rogel说。 研究数据还发现了之前无法识别的细胞亚型,并为其分类提供了信息,比如说,研究小组发现了一种新型的化学传感塔夫细胞,这种

小鼠 小肠he染色形态描述

小肠HE染色形态描述 一、HE染色简介 1. HE染色的原理 2. HE染色的意义 二、小肠组织结构概述 1. 小肠的解剖结构 2. 小肠的主要功能 三、小肠上皮细胞形态描述 1. 刷状缘毛的形态特征 2. 小肠绒毛的形态特征 3. 淋巴细胞的形态特征 4. 微绒毛细胞的形态特征 四、小肠黏膜细胞染色质形态描述

1. 染色质的组织排列方式 2. 染色质的形态特征 3. 染色质的染色情况 五、小肠黏膜细胞核形态描述 1. 细胞核的形态特征 2. 细胞核的位置 3. 细胞核的染色情况 六、小肠上皮细胞形态的变化 1. 生理变化 2. 病理变化 七、小肠上皮细胞形态与功能的关系 1. 细胞形态与吸收功能的关系 2. 细胞形态与分泌功能的关系 3. 细胞形态与屏障功能的关系

八、小肠上皮细胞形态变化的临床意义 1. 细胞形态变化的临床检测方法 2. 细胞形态变化与疾病的关系 3. 细胞形态变化的治疗措施 九、小肠HE染色形态描述的局限性 1. HE染色与其他染色方法的对比 2. 小肠组织形态描述的局限性 十、总结 1. 对小肠形态描述的重要性和必要性 2. 小肠HE染色形态描述的研究价值和应用前景 以上是关于小肠HE染色形态描述的详细内容,从HE染色的原理和意义入手,接着介绍了小肠的组织结构和主要功能。在描述小肠上皮细胞形态时,主要包括刷状缘毛、绒毛、淋巴细胞和微绒毛细胞等的形态特征。染色质和细胞核的形态描述也是文章的重点内容。同时讨论了小肠上皮细胞形态的变化、形态与功能的关系,以及形态变化的临床意义和局限性。文章的结尾对小肠HE染色形态描述的重要性和研究价值进行了总结。通过本文的探讨,读者可以全面了解小肠HE染色形态描述的相关知识,并对其在临床应用中的重要性有所认识。

小鼠结肠成纤维细胞处理方法(标准版)

在实验室研究中,处理小鼠结肠成纤维细胞通常涉及几个步骤:组织的收集、成纤维细胞的分离、培养以及后续的实验操作。下面提供一个基本的概述,供研究人员参考: 1. 结肠组织的收集: 在无菌条件下对小鼠进行解剖,取出结肠组织。 将结肠组织置于含有预冷生理盐水的培养皿内,去除残留的粪便和杂质。 使用生理盐水多次清洗结肠组织,以去除血液和粘膜层。 在适当的情况下,可能需要将结肠开放成片状,以便更好地处理。 2. 成纤维细胞的分离和培养: 酶消化法:使用胶原酶和DNase等消化酶处理结肠组织,分离出成纤维细胞。组织块培养法:将处理好的结肠组织切成小块,放在含有成纤维细胞培养基的培养皿中,使细胞长出。 细胞通常在37℃、5% CO₂的条件下培养。 等待细胞从组织块中爬出并贴壁生长,换新鲜培养基维持细胞生长。 通过传代培养可获得更纯净的成纤维细胞群。 3. 成纤维细胞的纯化: 成纤维细胞与其他类型的细胞(如上皮细胞)混合生长时,可使用差速贴壁法分离。 成纤维细胞通常比上皮细胞更快贴壁,因此先更换培养基可以去掉未贴壁的上皮细胞。 重复上述步骤直至获得较纯净的成纤维细胞群。 4. 成纤维细胞的鉴定: 通过免疫荧光等方法检测成纤维细胞标志物(如vimentin)来鉴定细胞类型确保培养的是成纤维细胞。

5. 后续应用: 纯化的成纤维细胞可以用于多种实验,包括药物筛选、基因表达研究、细胞通讯研究等。 根据不同的研究目的,可能需要对成纤维细胞进行基因转染、蛋白质分析、细胞增殖和凋亡实验等。 注意事项: 所有操作应在无菌条件下进行,以防微生物污染。 使用的酶和培养基成分可能需要根据实验目的和细胞类型进行优化。 保证实验动物的使用符合伦理和法规要求。 这是一个非常基础的操作流程,具体细节和步骤需要根据研究的具体目的和实验设计进行调整。对于特定的实验操作,应查阅相关文献或操作手册以获得精确的实验条件和操作技术。

小鼠肠上皮细胞线粒体形态_概述及解释说明

小鼠肠上皮细胞线粒体形态概述及解释说明 1. 引言 1.1 概述 小鼠肠上皮细胞线粒体形态是指小鼠肠道细胞内线粒体的外观和结构特征。线粒体作为细胞的能量中心,对维持正常的生理功能至关重要。然而,随着研究的深入,越来越多的证据表明线粒体形态异常与多种疾病的发生和发展密切相关。因此,了解小鼠肠上皮细胞线粒体形态及其对细胞功能的影响具有重要意义。 1.2 文章结构 本文将分为五个主要部分进行探讨。首先是引言部分,包括概述、文章结构以及目的。其次是小鼠肠上皮细胞线粒体形态概述,主要介绍线粒体的基本结构和功能,并阐述小鼠肠上皮细胞的特点和重要性以及线粒体形态对其功能的影响。第三部分是针对小鼠肠上皮细胞线粒体形态进行解释说明,包括形态变化与细胞代谢关系的探讨、线粒体融合与分裂机制及其调控因素,以及线粒体形态与相关疾病之间的关联性分析。接着是结论部分,总结主要的论点。最后是可能存在的问题和未来展望,讨论线粒体形态研究中的局限性和挑战,并提出未来的研究方向、重点以及预期的研究成果和应用前景。 1.3 目的

本文旨在全面概述小鼠肠上皮细胞线粒体形态,并解释说明其对细胞功能以及相关疾病的影响。通过对线粒体形态与细胞代谢关系、线粒体融合与分裂机制、以及与相关疾病之间关联性等方面进行探讨,我们希望为进一步理解小鼠肠上皮细胞线粒体形态的重要性提供科学依据,并为未来的相关研究提供参考。 2. 小鼠肠上皮细胞线粒体形态概述: 2.1 线粒体的基本结构和功能: 线粒体是细胞内的一个重要器官,起着能量供应和细胞生命活动调控的关键作用。线粒体有两层膜结构,外膜光滑,内膜上有许多呈现出褶皱状的筒状结构,称为线粒体内膜嵴。这种结构增加了线粒体内膜表面积,提供更多的位置供呼吸链酶复合物定位。 线粒体主要通过三系列反应产生能量:糖解途径、三羧酸循环和氧化磷酸化。这些反应使线粒体能够将食物中提取的能量转化为高能分子ATP。此外,线粒体还参与细胞凋亡过程、离子平衡和钙离子调节等重要功能。 2.2 小鼠肠上皮细胞的特点和重要性: 小鼠肠上皮细胞是组成小鼠肠道黏膜屏障的主要细胞类型之一。它们具有许多细胞形态和功能特点,包括高度分化、细胞极性和强烈的吸收和分泌能力。 小鼠肠上皮细胞对于维持肠道屏障功能至关重要。它们通过形成紧密连接和黏附

小鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage)培养

小鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage)培养 发布: 2010-02-22来自: 易生物实验阅读数:2683次 1 材料 1.1 动物:各个品系的小鼠2-4 只。 1.2 试剂:RPMI1640 培养基(含酚红),小牛血清,双抗,培养液(10%小牛血清、RPMI1640、双抗),台盼兰等。碘酒绵球和酒精绵球。 1.3 器械:一次性注射器、手术器械。 2 方法 如果采用刺激物,则可在实验前三天腹腔注射3%巯基乙醇酸钠每只2 mL,获得的巨噬细胞数要多一些。不采用刺激物,直接开始下面的步骤。 2.2.1 拉颈处死小鼠,在75%酒精浸泡1-2 分钟,移入超净台中,仰卧位固定于解剖板上,碘酒消毒腹部皮肤,酒精绵球脱碘。用手术直剪充分剪开腹部皮肤,暴露腹部肌层,再用酒精绵球消毒腹部肌层。 2.2.2 用注射器抽取5 mL 含双抗的RPMI1640 培养基注入腹腔,用绵球轻揉腹部1-2 min,然后,用眼科镊稍提起腹腔,并用眼科剪剪开一个小口,用吸管吸取细胞悬液,移入离心管中(个人认为,此法比用注射器抽吸好一些)。 2.2.3 1000 rpm 离心5 min 后,用含双抗的RPMI1640 培养基洗涤一次,再次离心,重悬细胞于含10%小牛血清的RPMI1640 培养液中,如果是作为饲养细胞使用,则选择相应的培养液。台盼蓝拒染法计数,将细胞稀释到目的浓度后,接种即可。 2.2.4 如果是作为饲养细胞使用,调整浓度至2x105个/mL,接种到96 孔板中,每孔100-200 μL;如果作为其它实验使用,可以调整成2x106/mL,加到24 孔平底培养板中,1 mL/孔;5% CO2温箱孵育2 h 后,换液,并用RPMI1640 培养基洗1-2 次,弃去未粘附细胞,贴壁细胞为单层的巨噬细胞。 3 结果和讨论 巨噬细胞刚贴壁时偏圆形,或者类似鹅卵石形状,然后慢慢伸出伪足,铺开呈三角形或多角形。巨噬细胞有吞噬的特性,当与细菌混合在一起的时候,在40 倍物镜下可以看到巨噬细胞吞噬细菌,因此,巨噬细胞作为饲养细胞可以清除部分污染的细菌、支原体和部分细胞碎片。巨噬细胞一般没有特殊的鉴定方法,有两条经验:一,巨噬细胞是终末分化细胞,不会增殖;二,很难消化下来,所以接种的时候,必须直接接种到目的培养器皿中。 几点注意事项:严格无菌操作,在超净台内进行;为避免交叉感染,每一只小鼠更换注射器;吸管吸取细胞悬液的时候,尽量不要吸到大小肠,否则容易引起成纤维细胞污染。

小鼠肠道细胞提取完整版

小鼠肠道细胞提取 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】

小鼠结肠固有层单个核细胞(LPMCs)提取及细胞表面染色 1.成功麻醉小鼠后,取血并脱颈处死,取出结直肠肠道切成4 cm~5 cm每 段,置于预冷的1×PBS中; 2.镊子固定肠道组织一侧,去除排泄物,切除剩余的肠系膜脂肪组织和派尔 集合淋巴结(Peyer’s patches, PPs); 3.将结肠纵向剪开,用预冷的1×PBS清洗排泄物后,将肠道切成1 cm大小 (可在Tube管内剪),2000 rpm离心5 分钟,弃上清; 4.将组织收集到装有5 ml消化液的50 ml 离心管中,37oC培养箱中80转缓 慢旋转孵育25分钟;(消化液的量由消化效果和组织数量决定) 5.孵育过程中每10分钟震荡离心管20秒,孵育完成后,再强烈的涡旋震荡 细胞悬液20秒,并用70 μm的细胞筛网过滤细胞至50 ml离心管中,收 集细胞冰上放置(或加PBS终止反应); 6.收集细胞筛网中剩下的肠道组织至50 ml 离心管中,加5 ml 消化液。 37oC培养箱中60 g缓慢旋转孵育25分钟;重复第8-9步,将组织消化完 全,直至在过滤器中不出现肉眼可见的粘连组织块(一般反复消化共3次即 可); 7.将多次消化后的单细胞悬液合并在50 ml离心管中,3500 rpm离心5 分钟 后弃上清; 8.用FACS缓冲液(或PBS)重悬细胞沉淀,3500 rpm离心5分钟后弃上清; 9. 6 ml 40% percoll重悬细胞沉淀,后用巴氏吸管将细胞悬液小心加入到含 3 ml 80% percoll的15 ml离心管中(percoll的量:一般3只鼠对应1 份percoll); 10.1000 g 20oC离心20分钟(升5降0)。离心后,可见白色的LPMCs细胞层 在两层分离液之间; 11.用PBS洗一次,1800rpm,,离心,弃上清; 12.1×PBS重悬细胞,计数。 1.消化液的配制 Reagent Final concentration Collagenase D mg/ml DNase I mg/ml Dispase II 3 mg/ml 小鼠肠道组织消化液配置体系(现用现配,用前37℃水浴) 2.Percoll的配制(需要在无菌环境中,以7份为例): 40%percoll= 6ml×7=42ml ≈45ml 【即18ml母液+ 27ml 1×PBS,2/5+3/5】80%percoll= 3ml×7=21ml ≈20ml 【即16ml母液+ 4 ml 1×PBS, 4/5+1/5】

Nature:在小鼠肠道中,神经细胞是免疫系统的“眼睛和耳朵”

Nature:在小鼠肠道中,神经细胞是免疫系统的“眼睛和耳 朵” Nature:在小鼠肠道中,神经细胞是免疫系统的“眼睛和耳朵” 2016-07-15生物探索 7月13日,《Nature》期刊发表一篇有趣的研究,主要论述了肠道神经系统如何充当免疫细胞的“眼睛和耳朵”,进而启动免疫防御的过程。 肠道神经系统由胃肠道壁内神经成分组成,具有调节控制胃肠道的功能,被称为“第二大脑”。来自于葡萄牙分子生物研究所的Henrique Veiga-Fernandes及其团队发现,当神经系统从肠道接收到胁迫信号后,它会分泌因子激活免疫细胞。 “三驾马车”:先天淋巴细胞、神经胶质细胞、肠道上皮细胞 肠道神经系统与免疫系统之间的互作已经不是什么新鲜事。Veiga-Fernandes团队在这基础上,深入挖掘了其中的分子机制。 首先,研究团队在先天淋巴细胞表明发现了一种受体蛋白Ret。已

有研究表明,肠道神经细胞同样表达有Ret蛋白,扮演着“天线”的角色,负责接收其他细胞传递的化学信号。那么,肠道免疫细胞表面的Ret蛋白的功能是什么? 为了解开谜团,研究人员以小鼠为模型,用荧光标记先天淋巴细胞表面的Ret蛋白。结果显示,肠壁聚集着成千上万的细胞群,每个群包含了100-200个表达Ret蛋白的先天淋巴细胞。而且,这些免疫细胞在Ret蛋白的调控下,分泌白介素-22(interleukin-22,IL-22),参与肠壁修复过程。 通过构建转基因小鼠,研究人员发现,当Ret蛋白不表达时,小鼠肠道上皮细胞再生、肠壁修复能力下降;而Ret蛋白过表达后,免疫细胞会对入侵病原体完全抵抗。 以上研究说明,Ret蛋白对于免疫细胞功能的发挥必不可少。但是,这一重要蛋白如何被激活呢?也就是说,Ret蛋白从哪里接受信号呢? Veiga-Fernandes团队发现,所有先天淋巴细胞群都紧邻着神经胶质细胞。当肠道上皮细胞受到胁迫时,它们会释放出警戒素(alarmins)。此外,入侵病原体也会携带信号。这些信号会传递至神经胶质细胞,促使其分泌神经营养因子,进一步激活先天淋巴细胞表面的Ret蛋白。 这就类似于一辆“三驾马车”:肠道上皮细胞传递胁迫信号,神经胶质细胞接受到后会分泌神经营养因子,激活下游的先天淋巴细胞,启动免疫防御和肠壁修复过程。这一体系一旦出现变化,易引发肠道炎症、感染等问题。 这一最新研究成果将有望用于开发针对慢性肠道炎症的预防和治疗策略,甚至于肠癌。目前,研究人员正在挖掘绕过神经胶质细胞,

小鼠小肠粘膜上皮细胞处理方法及细胞说明书

小鼠小肠粘膜上皮细胞处理方法及细胞说明书 小鼠小肠粘膜上皮细胞处理方法及细胞说明书仅供参考,具体操作还需要根据到货时细胞密度,细胞生长状态等具体情况,酌情处理。 一.小鼠小肠粘膜上皮细胞贴壁细胞 客户接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。 肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X 各一张)。 显微镜观察细胞,当细胞融汇80%左右(可以传代的情况下),细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培养。 严格无菌操作,打开细胞培养瓶。 将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。 用PBS2-3ml/次轻轻洗细胞表面,加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。1000rpm,5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。二.小鼠小肠粘膜上皮细胞悬浮细胞 1.接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)

培养瓶外部。 2.肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。 3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。 4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)。 5.1000rpm,5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,37℃,5%CO2培养

小鼠单核细胞、上皮细胞的marker基因-概述说明以及解释

小鼠单核细胞、上皮细胞的marker基因-概述说明以 及解释 1.引言 1.1 概述 概述 小鼠单核细胞和上皮细胞是生物学研究中常见的细胞类型,在研究过程中,为了更好地识别和表征这些细胞,科学家们通常会使用一些特定的标记基因来标记它们。这些标记基因具有独特的表达模式,能够帮助研究人员准确地鉴定细胞类型并了解其功能和特性。本文将重点介绍小鼠单核细胞和上皮细胞的marker基因,包括其定义、特点、常见的标记基因以及在科研中的应用和意义。通过深入了解这些marker基因,可以为相关研究提供重要的参考和指导,有助于推动细胞生物学和疾病研究领域的发展。 1.2 文章结构 文章结构部分主要介绍了本文的整体结构,可以包括文章的各个章节及其内容概要。在本篇文章中,文章结构包括三个主要部分: 1. 引言部分:介绍了文章的背景和意义,概述了小鼠单核细胞和上皮细胞marker基因的研究现状和重要性。

2. 正文部分:分为两个小节,分别讨论了小鼠单核细胞和上皮细胞的marker基因。其中包括定义和特点、常见的marker基因、以及应用和意义等内容。 3. 结论部分:总结了本文所介绍的内容,并展望了小鼠单核细胞和上皮细胞marker基因研究的未来发展方向。最后得出结论,强调marker 基因在细胞研究中的重要性。 文章结构的明确和清晰有助于读者理解整个文章的逻辑架构,使文章内容更加一目了然。 1.3 目的: 本文旨在系统总结小鼠单核细胞和上皮细胞的marker基因,探讨它们的定义、特点、常见的marker基因以及应用和意义。通过对这些marker 基因的深入了解,可以为相关研究提供参考和指导,促进对这两类细胞的更深入研究,为相关领域的发展提供有益的知识支持。同时,也旨在促进对小鼠模型在生物医学研究中的应用,为未来相关研究工作提供指导和参考。用和意义": {} } }, "3.结论": { "3.1 总结": {},

肠道中的免疫细胞爱吃甜食

肠道中的免疫细胞爱吃甜食 2022-08-17 08:47·康加号 编辑推荐:研究人员发现驻留在肠道中的白细胞,一种特殊的免疫细胞群,称为组织驻留淋巴细胞,使用糖作为能量来源,比血液循环中的淋巴细胞代谢更快。这些发现表明在感染期间,肠道中当地的糖可用性有助于免疫反应,并可能对宿主更快地解决感染产生影响,强调了均衡饮食对健康免疫反应的重要性。 新的研究发现,组织驻留白细胞利用葡萄糖作为能量来源来应对感染。 一项由里斯本医学学院副教授Marc Veldhoen领导,并发表在PNAS (《美国科学院院报》)上的新研究,发现肠道中的白细胞是一种特殊的免疫细胞,被称为“组织常驻淋巴细胞”,它们将糖作为能量来源比血液中循环的淋巴细胞新陈代谢更快。这些发现表明,在感染期间,肠道内的局部糖供应有助于免疫反应,可能会对宿主更快地解决感染产生影响,强调均衡饮食对健康免疫反应的重要性。 众所周知,淋巴细胞在体内的血管中循环,起到监控系统的作用,但还有一组特殊的淋巴细胞永久驻留在组织中。为了正常运作,细胞适应环境很重要。在这项研究中,研究人员发现驻留在肠壁上的一组特定的淋巴细胞适应了这种组织的新陈代谢。 “循环淋巴细胞一生中大部分时间都在淋巴结中度过,那里有大量的能量。就好像淋巴结里装满了午餐盒。这些细胞可以永久地充满能量,甚至当它们离开淋巴结在全身循环时,会抓起一个盒子离开。”这项研究的负责人Marc Veldhoen解释道:然而,驻留在组织中的淋巴细胞没有相同的能量。“这些细胞一直处于半激活状态,随时准备对感染等挑战做出反应。我们发现这些常驻淋巴细胞能够适应它们在肠道中的环境,并根据葡萄糖的可用性调节它们的活动。” “葡萄糖被这些细胞迅速吸收,生成乳酸或丙酮酸,这些分子被

小肠内分泌细胞系的处理方法与培养步骤【详细】

小肠内分泌细胞系的处理方法与培养步骤【详细】一、细胞介绍 STC-1细胞来源于双重转基因小鼠的肠肿瘤组织。含有连接大鼠胰岛素基因启动子与多瘤病毒小T抗原的融合基因与含有连接大鼠胰岛素基因与SV40的基因结合产生双转基因小鼠。这些小鼠一般患有肠肿瘤以及胰腺β细胞瘤。STC-1细胞产生激素分泌素。 二、细胞特性 1、来源:肠道 2、形态:上皮细胞样,贴壁生长 3、含量:>1x106 4、污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5、规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 三、细胞的运输和保存 可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式 (1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏; (2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。 (3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

四、细胞接收后的处理方法 1、收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。 2、在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X 物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X 和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。 3、观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37培养箱放置约2-3h。 4、贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。 5、悬浮细胞:T25瓶置于37培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。 6、备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1:2传代。

在小肠,杯状细胞传输抗原到树突状细胞CD103

在小肠,杯状细胞传输抗原到树突状细胞CD103+ 肠道免疫系统接触到外来的混合物中,抗原来自饮食、共生的植物和潜在的病原体。了解特异性免疫病原是怎样引发的,在无关痛痒的背景下避免发生不恰当的反应。对理解和治疗肠道感染和炎症性疾病,抗原是必不可少的。树突状细胞(dc)能诱导肠道对摄入蛋白质抗原产生耐受性,这是提高T cells免疫的一部分。固有层(LP)在大量的吸收绒毛状上皮细胞之下,吸收细胞包含大量的树突状细胞 (CD11c+CD11b+MHCII+cells)主要由CD103+CX3CR1- DCs两个组成,它能促进IgA生产、印在肠道淋巴细胞上和调节T细胞的发展。CX3CR1 +、CD103 -DCs(带有巨噬细胞的特征),促进肿瘤坏死因子(tnf- a)产生、结肠炎和T H17 T细胞的发展。然而,这个机制下不同的肠道固有层树突状细胞捕获肠道抗原在体内还没有被探测到。使用最低限度的破坏性体内成像方法表明在稳定状态。小肠道杯状细胞的功能就像是一个通道使低分子量的可溶性抗原从肠道内腔到固有层下面的CD103+ LP-DCs。优先传送的抗原对树突状细胞带有耐受的属性,暗示着杯状细胞的能功对维持肠道免疫有关键作用。 我们用荧光标记老鼠树突细胞,在双光子显微镜下检查了体内肠道LP-DCs结合抗原的行为(补充图 1 a)。肠道腹膜腔成像和能够得到不是从完整的肠浆膜就是从小肠支架表面通过小的纵向切口的图像(无花果。1 a,b和补充电影1、上面板)。准备足够稳定的允许树突细胞在小肠组织深处运行的三维成像(无花果。1 c 和补充Movie1,左下方面板)和保障血液流动及上皮屏障完整为了超过4小时的连续成像。 在管腔内注射10KDs的罗丹明葡聚糖作为抗原模型后,通过双光子显微镜我们评估了的抗原分布。上皮表面染色的葡聚糖充满了绒毛和隐窝之间的空间 (Fig.1a,b)。此外,我们还发现圆柱右旋糖酐列直径大约5微米,穿过上皮绒毛约20微米长,到达固有层,当从浆膜或腔的方向成像图(1a-c,补充图1 b和补充电影1、上面板和面板右下)。经上皮的右旋糖酐列通常穿过十二指肠到回肠的贯穿整个小肠,并没有排斥在自固有层外的右旋糖酐而引起上皮屏障破坏如图所示(无花果。

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