Brdu标记-Brdu作为一种胸腺嘧啶核苷的类似物,像胸腺嘧啶核苷一样可掺入到细胞合成的DNA中

Brdu标记-Brdu作为一种胸腺嘧啶核苷的类似物，像胸腺嘧啶核苷一样可掺入到细胞合成的DNA中

Brdu标记-Brdu作为一种胸腺嘧啶核苷的类似物，像胸腺嘧啶核苷一样可掺入到细胞合成的DNA中。当细胞处于DNA合成期而同时又有Brdu存在时，就会有Brdu掺入新合成的DNA中，只要细胞不消亡，这种Brdu就在胞核的DNA中长期存留。

学术术语来源---

骨髓间充质干细胞移植大鼠梗死心肌后的存活状况

文章亮点：

骨髓间充质干细胞移植梗死心肌后对心功能的改善，已得到大多数研究的共识，但其具体机制尚不清楚。实验动态观察骨髓间充质干细胞移植梗死心肌后的存活状况，以及随移植时间延长其凋亡速度，间接了解干细胞移植梗死心肌后发挥作用的时期，为进一步研究其作用机制提供依据。

关键词：

干细胞；移植；急性心肌梗死；骨髓间充质干细胞；心肌梗死模型；细胞移植

主题词：

骨髓；间质干细胞移植；心肌梗塞；模型，动物

摘要

背景：初步研究结果证实骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死安全、有效，但是其确切的治疗机制尚不清楚。有关移植后干细胞的存活状况及发挥作用时机的研究较少。

目的：观察大鼠骨髓间充质干细胞移植梗死心肌后的存活状况。

方法：密度梯度离心法培养骨髓间充质干细胞。制作大鼠心肌梗死模型80只，于心肌梗死后14 d，在心肌梗死周边区分4个点用微量注射器移植骨髓间充质干细胞，取移植干细胞后仍存活良好的70只大鼠，分别于移植后第3，5，7，10，14，20，28天检测骨髓间充质干细胞的存活情况。

结果与结论：移植后第3，5，7，10，14，20，28天免疫组化染色高倍视野(×400)内Brdu标记阳性骨髓间充质干细胞数分别为(36±12)，(33±13)，(28±9)，(15±5)，(5±3)，0，0个。移植后骨髓间充质干细胞数整体呈下降趋势，骨髓间充质干细胞数与移植天数呈负相关(r=-0.47，P < 0.01)，其中移植1周后下降明显，至第20天已无存活骨髓间充质干

细胞。结果可见骨髓间充质干细胞移植大鼠梗死心肌后不能长期存活且不会转化为心肌组织。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

作为一种胸腺嘧啶核苷的类似物,像胸腺嘧啶核苷一样可掺入到细胞合成的DNA中

Brdu标记-Brdu作为一种胸腺嘧啶核苷的类似物，像胸腺嘧啶核苷一样可掺入到细胞合成的DNA中 Brdu标记-Brdu作为一种胸腺嘧啶核苷的类似物，像胸腺嘧啶核苷一样可掺入到细胞合成的DNA中。当细胞处于DNA合成期而同时又有Brdu存在时，就会有Brdu掺入新合成的DNA中，只要细胞不消亡，这种Brdu就在胞核的DNA 中长期存留。 学术术语来源--- 骨髓间充质干细胞移植大鼠梗死心肌后的存活状况 文章亮点： 骨髓间充质干细胞移植梗死心肌后对心功能的改善，已得到大多数研究的共识，但其具体机制尚不清楚。实验动态观察骨髓间充质干细胞移植梗死心肌后的存活状况，以及随移植时间延长其凋亡速度，间接了解干细胞移植梗死心肌后发挥作用的时期，为进一步研究其作用机制提供依据。 关键词： 干细胞；移植；急性心肌梗死；骨髓间充质干细胞；心肌梗死模型；细胞移植主题词： 骨髓；间质干细胞移植；心肌梗塞；模型，动物 摘要 背景：初步研究结果证实骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死安全、有效，但是其确切的治疗机制尚不清楚。有关移植后干细胞的存活状况及发挥作用时机的研究较少。 目的：观察大鼠骨髓间充质干细胞移植梗死心肌后的存活状况。 方法：密度梯度离心法培养骨髓间充质干细胞。制作大鼠心肌梗死模型80只，于心肌梗死后14 d，在心肌梗死周边区分4个点用微量注射器移植骨髓间充质干细胞，取移植干细胞后仍存活良好的70只大鼠，分别于移植后第3，5，7，10，14，20，28天检测骨髓间充质干细胞的存活情况。 结果与结论：移植后第3，5，7，10，14，20，28天免疫组化染色高倍视野(×400)内Brdu标记阳性骨髓间充质干细胞数分别为(36±12)，(33±13)，(28±9)，(15±5)，(5±3)，0，0个。移植后骨髓间充质干细胞数整体呈下降趋势，骨髓间充质干细胞数与移植天数呈负相关(r=-0.47，P < 0.01)，其中移植1周后下降明显，至第20天已无存活骨髓间充质干细胞。结果可见骨髓间充质干细胞移植大鼠梗死心肌后不能长期存活且不会转化为心肌组织。

化疗药物的作用机理

化疗药物的作用机理 抗肿瘤药物种类繁多，其作用机理各不相同，根据药物的作用点不同可以将其作用机理归纳如下。 一、干扰核酸的合成代谢：大多数化疗药物主要是通过阻碍核酸特别是DNA成分的形成和利用，而起到杀伤细胞的作用。这类药物的化学结构和核酸代谢的必需物质相似。 1.抑制脱氧胸苷酸合成酶：阻止胸腺嘧啶核苷酸的合成：氟尿嘧啶、脱氧氟尿苷等药物在体内的衍生物可抑制脱氧胸嘧啶核苷酸合成酶，阻止脱氧脲嘧啶核苷酸的甲基化，从而影响DNA合成。 2.抑制二氢叶酸还原酶：甲氨蝶呤与二氢叶酸还原酶结合，使二氢叶酸不能被还原成四氢叶酸，导致5，10-二甲基四氢叶酸缺乏，使脱氧脲苷酸不能接受来自5，10-二甲基四氢叶酸的碳单位形成脱氧胸苷酸，DNA合成受阻。 3.阻止嘌呤核苷酸合成：巯嘌呤进入体内转变成活性型硫代肌苷酸，抑制磷酸腺苷琥珀酸合成酶和肌苷酸合成酶，阻止肌苷酸（IMP）转变为鸟苷酸和腺苷酸，又可反馈抑制磷酸核糖焦磷酸（PRPP）转变为磷酸核糖胺（PRA），从而影响RNA和DNA合成。 二、直接与DNA作用干扰其复制等功能：氮芥、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、白消安、卡莫司汀等烷化剂和博莱霉素、丝裂霉素等抗生素，这类此物具有活泼的烷化基团，能与核酸、蛋白质中的亲核基团（羧基、氨基、巯基、磷酸根等）发生烷化反应，以烷基取代亲核基团中的氢原子，引起DNA双链间或同一链G、G 间发生交叉联结，使核酸、酶等生化物质结构和功能损害，不能参与正常代谢。 三、阻止防锤丝形成，抑制有丝分裂：抗肿瘤植物药如长春碱类和秋水仙碱能与微管蛋白结合，阻止微管蛋白聚合，使防锤丝形成障碍，结果是染色体不能向两极移动，有丝分裂停留于中期，最终细胞核结构异常导致细胞死亡。 四、抑制蛋白质合成：放线菌素D、玫瑰树碱等能嵌入到DNA双螺旋链间形成共价结合，破坏DNA模板功能，阻碍mRNA和蛋白质的合成；L-门冬酰胺酶可将门冬酰胺水解，使肿瘤细胞合成蛋白质的原料L-门冬酰胺缺乏，限制了蛋白质的合成；三尖杉酯碱使核蛋白体分解，抑制蛋白质的合成的起始阶段。 许多学者致力于开发不同作用机理的新药，取得了可喜的成果，相继提出了

氟尿嘧啶及其衍生物的临床应用原理

氟尿嘧啶及其衍生物的应用原理 1. 氟尿嘧啶（5-FU） 5-FU是尿嘧啶的嘧啶环5-位碳原子上的氢被氟原子取代而得到的，合成的理论基础是发现鼠肝癌组织较正常组织更易利用放射性核素标记的尿嘧啶，说明尿嘧啶存在不同的酶代谢途径。目前在临床上，5-FU主要用于消化道腺癌、乳癌、及头颈部鳞癌的治疗,对5-FU细胞内代谢过程的详细了解促进了与生化调节剂的联合使用，增强了5-FU的细胞毒性。 1.1 5-FU的激活与分解途径 5-FU在细胞内通过一系列的酶促反应作用于核苷酸的形成，其代谢活动可能以以下两条途径中的一条为主： ①5-FU(胸苷磷酸化酶TP) FdUrd(胸苷激 酶TK)→FdUMP→FdUDP→FdUTP（参与DNA合成） ②5-FU（乳清酸磷酸核糖转移酶OPRT） FUMP→FUDP→FUTP(参与RNA 合成) (尿苷磷酸化酶UP) FUrD(尿苷激酶UK) 其中由OPRT酶催化的途径可能是正常组织代谢5-FU的主要途径（Oxo？），因为核苷酸的代谢产物别嘌呤醇对该途径的抑制作用降低了

5-FU对骨髓和胃肠道粘膜的毒性反应。而且发现在一些种类的癌细胞中，代谢5-FU主要通过TP和UP的作用。不过虽然某一类癌细胞中某一代谢途径占优势，但两条途径通常都会被利用。 5-FU的分解途径如下： 5-FU（二氢吡啶脱氢酶DPD） DHFU（二氢嘧啶酶） FUPA FBAL （二氢氟尿嘧啶） (α氟脲基-丙酸) （氟-β丙氨酸）DPD催化5-FU还原成二氢氟尿嘧啶的反应是5-FU分解代谢的初始限速反应，5-乙炔基尿嘧啶是DPD的灭活剂，同时口服时5-FU的生物利用度接近100% DPD的活性影响 5- FU的抗肿瘤活性，但是，大剂量的DPD的缺失与5-FU用药后的严重毒性反应相关。 1.2 5-FU的作用机制 1.2.1 对胸苷酸合成酶（TS）的抑制作用 FdUMP与胸苷酸合成酶(TS)紧密结合阻止dTMP的合成，dTMP是生成dTTP的关键底物，而dTTP是DNA的合成和修复的必需物质。 功能性TS是由两个相同亚基组成的二聚体，每个亚基上有一个核酸结合位点和两个特殊的叶酸盐合成位点。FdUMP与dUMP竞争结合TS 催化位点，在正常由dUMP甲基化生成dTMP的过程中，叶酸（5，10-CHFH4）上甲基基团转移到dUMP是伴随嘧啶第5个碳原子上氢原子丢失过程而发生，但这个丢失过程不可能发生在FdUMP上牢固连接的F原子上，并且 TS被局限在一个可逆性较慢的“三元复合体”中（TS、叶酸、FdUMP），TS的生理功能受阻，随后的“胸嘧啶缺乏状态”对分裂活跃的细胞产生毒性。

3H胸腺嘧啶核苷掺入检查法

3H胸腺嘧啶核苷掺入检查法 3H胸腺嘧啶核苷(3Hthymidine,3HTdR)掺入试验，是体外淋巴细胞转化试验较客观、重复性好、结果准确的方法之一。 (一) 原理当淋巴细胞受分裂原(PHA等)或特异性抗原刺激发生转化时，必然伴有DNA的大量合成，若将具有放射性的3HTdR加到培养液内，则可被作为合成DNA的原料而摄入转化中的细胞内，测定细胞内放射性物质的相对数量(以脉冲数表示)，就能客观地反映淋巴细胞对刺激物的应答水平。 3HTdR掺入法最初是利用分离纯的淋巴细胞进行试验，近年来逐渐推广采用微量全血法，该法具有采样少，操作简便，并能较正确地反映整个机体免疫状态等优点。 (二) 器材 国产FJ353型或YSJ76型液体闪烁计数器，恒温箱，水浴箱，离心机，培养瓶(10ml 链霉素瓶)，其他常用器材。 (三) 试剂 1 培养基RPMI1640或TC199培养液。 2 小牛血清50℃ 30min灭活后使用。 3 PHA同形态学方法。 4 3HTdR最好选用比活性为2～10mci/mg分子的制品，将1mci/ml溶液用生理盐水稀释为100μci/ml，于4℃冰箱保存，临用时，再用培养液稀释成10μci/ml 溶液。 5 3%冰醋酸。 6 浓甲酸。

7 30%H2O2。 8 闪烁液PPO(2,5二苯基口恶唑)5g，P OPOP〔1,4双(5苯基口恶唑基2苯)〕 03g，无水乙醇200ml，甲苯800ml。 (四) 方法及结果 1 培养液按1%体积加青、链霉素溶液(含青霉素1万u/ml、链霉素001g/ml)及肝素液(含肝素125u/ml)。用35%碳酸氢钠溶液调整pH值为72～74，然后加灭活小牛血清使浓度为20%。再加所需要的PHA，无菌分装于培养瓶内，每瓶1ml。 2 无菌取静脉血05～15ml，按每毫升血加入肝素125u抗凝，进行白细胞计数及分类。 3 将肝素抗凝血液样品注入含1ml培养液的培养瓶内，每瓶01ml，每份样品2～3管，37℃培养72h。在培养结束前16～24h，每瓶加入3HTdR 1μci。 4 培养结束后，将培养物移到离心管内，用3%冰醋酸6ml分两次冲洗培养瓶，并将冲洗液也放入离心管内，2000 r/min离心10min，如此反复两次。 5 最后在沉淀中加30% H2O2 1滴，85℃水浴加温15min，待溶液呈无色，再加浓甲酸0.5ml后，继续加热30min，使沉淀物完全消化溶解。 6 将消化溶解的液体移于测样杯内，用红外线灯或80℃热空气烘烤至液体体积少于01ml，加闪烁液5ml，用液体闪烁计数器测定每分钟脉冲数(cpm)。 7 取各管测定读数的平均值，即为01ml全血检测的脉冲数。再按血样淋巴细胞计数结果，校正成每百万淋巴细胞的脉冲数(cpm/106淋巴细胞)。 亦可用刺激指数(SI)表示试验结果。为此，须在培养时设同样数量的不加PHA 的对照管，试验管脉冲数之比即为刺激指数。SI=加PHA管cpm不加PHA管cpm (五) 注意事项

卡介菌多糖核酸联合5-氟脲嘧啶治疗扁平疣疗效观察

卡介菌多糖核酸联合5－氟脲嘧啶治疗扁平疣疗效观察 发表时间：2012-07-17T17:47:57.870Z 来源：《中外健康文摘》2012年第10期供稿作者：马琼[导读] 由于淋巴因子的综合协同作用而发挥细胞免疫功能，进而溶解和破坏病毒感染的靶细胞，达到排斥疣病变细胞的目的。 马琼（湖北随州曾都医院皮肤科湖北随州441300） 【中图分类号】R969【文献标识码】B【文章编号】1672-5085（2012）10-0261-01 本科于2009年月1月－2011年1月使用卡介菌多糖核酸联合5－氟脲嘧啶治疗扁平疣82例，现将结果报告如下。 1 资料与方法 1.1临床资料 入选标准：（1）临床确诊者；（2）皮损主要分布于面部者；（3）近4周内未经任何治疗者；（4）无面部皮炎湿疹者。82例均为本科门诊扁平疣患者，其中男38例，女44例，年龄14－46岁，病程1个月－4年。随机分为A、B两组各41例。 1.2方法 1.2.1治疗方法 A组：采用卡介菌多糖核酸注射液0.5mg肌肉注射，隔日一次，6周一疗程。B组：采用A组治疗方法基础上同时外涂5-氟脲嘧啶溶液，每日三次，共6周。 1.2.2疗效判断标准痊愈：皮损消退100%，随访半年无复发；显效：皮损消退70%～99%；有效：皮损消退30%～69%；无效：皮损消退<30%。 1.2.3统计学方法采用X2检验，P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1疗效 临床疗效分析：B组疗效明显优于A组，两组痊愈率和有效率差异有统计学意义。 A、B两组疗效对比 2.2不良反应 B组患者中仅2例在外用5-氟脲嘧啶溶液后出现色素沉着。 3 讨论 扁平疣是由人类乳头瘤病毒( HPV)感染引起的扁平丘疹，HPV通过皮肤粘膜微小破损进入细胞内复制、增殖，导致上皮细胞异常角化和增生，引起上皮性赘生物，免疫功能低下及外伤者易患此病。 卡介菌多糖核酸是牛结核杆菌的减毒活菌苗，目前使用的是去除菌体蛋白后提取的菌体多糖，它是一种具有免疫调节功能的物质。笔者认为卡介菌多糖核酸的治疗扁平疣机制是卡介菌多糖核酸是一种非特异性免疫增强剂，能调节机体的细胞及体液免疫，刺激网状内皮系统，激活单核-巨噬细胞，从而增强机体的抗病毒能力，其通过对T细胞的致敏产生细胞介导的免疫致敏T细胞在抗原的特异性刺激下合化、增殖并合成。释放一系列淋巴因子。由于淋巴因子的综合协同作用而发挥细胞免疫功能，进而溶解和破坏病毒感染的靶细胞，达到排斥疣病变细胞的目的。 5-氟脲嘧啶是嘧啶类抗代谢药，在体内转变为5-氟脱氧尿嘧啶核苷酸，能有效地抑制细胞的DNA合成，导致细胞损伤和死亡。因此，通过对比观察，卡介菌多糖核酸联合5-氟脲嘧啶治疗扁平疣安全有效，值得推广。

氟脲嘧啶片药品说明书

氟脲嘧啶片药品说明书 氟脲嘧啶片药品说明书 【药品名称】通用名称： 氟脲嘧啶片 英文名称：Fluorouracilum Tablets 商品名称：氟脲嘧啶片 【是否处方】处方药 【是否医保】否 【运动员慎用】否 【性状】本品为白色片。 【药理作用】在体内先转变为5-氟-2-脱氧尿嘧啶核苷酸，后者抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶，阻断脱氧尿嘧啶核苷酸转变为脱氧胸腺嘧啶核苷酸，从而抑制DNA的生物合成。此外，还能掺入RNA，通过阻止尿嘧啶和乳清酸掺入RNA而达到抑制RNA合成的.作用。本品为细胞周期特异性药，主要抑制S期瘤细胞。 【药代动力学】本品主要经肝脏分解代谢，大部分降解为二氧化碳经呼吸道排出体外，约15%在给药1小时内经肾以原型药排出体外。大剂量用药能透过血脑屏障，静注后于半小时内到达脑脊液中，并可维持3小时，t1/2为10～20分钟，t1/2β为20小时。 【适应症】抗肿瘤药。用于结肠癌、直肠癌、胃癌、肝癌、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、头颈部鳞癌及皮肤癌等。 【用法用量】口服一次0.1～0.2g 一日0.3～0.6g。 【不良反应】1、恶心、食欲减退或呕吐，一般剂量多不严重，偶见口腔粘膜炎或溃疡，腹部不适或腹泻。周围血白细胞减少常见(大多在疗程开始后2～3周内达最低点，约在3～4 周后恢复正常)，血小板减少罕见。极少见咳嗽、气急或小脑共济失调等; 2、长期应用可导致神经系统毒性; 3、偶见用药后心肌缺血，可出现心绞痛和心电图

的变化。如发生经证实的心血管反应(心律失常，心绞痛，ST段改变)则氟尿嘧啶不能再用，因有猝死危险。 【禁忌】 人类有极少数由于在妊娠初期三个月内应用本品而致先天性畸形者，并可能对胎儿产生远期影响。故在妇女妊娠初期三个月内禁用本药。由于本品潜在的致突、致畸及致癌性和可能在婴儿中出现的毒副反应，因此在应用本品期间不允许哺乳。当伴发水痘或带状疱疹时禁用本品。氟尿嘧啶禁忌用于衰弱病人。 【注意事项】 用药期间应严格检查血象。 【相互作用】曾报告多种药物可在生物化学上影响氟尿嘧啶的抗癌作用或毒性，常见的药物包括甲氨喋呤、甲硝唑及四氢叶酸。与甲氨喋呤合用，应先给甲氨喋呤4～6小时后再给予氟尿嘧啶，否则会减效。先给予四氢叶酸，再用氟尿嘧啶可增加其疗效。本品能生成神经毒性代谢产物-氟代柠檬酸而致脑瘫，故不能作鞘内注射。别嘌呤醇可以减低氟尿嘧啶所引起的骨髓抑制。 【贮藏】遮光，密闭保存。 【规格】50mg 【批准文号】国药准字H***-*****

注射用氟脲苷说明书

注射用氟脲苷说明书 【药品名称】 通用名：注射用氟脲苷 英文名：Floxuridine for Injecion 汉语拼音：Zhusheyong Funiaogan 【成份】 化学名：5-氟-2'-脱氧尿嘧啶核苷 化学结构式为： 分子式：C9H11FN2O5 分子量：246.20 CAS No.：3094-09-5 辅料为：甘露醇，氢氧化钠或盐酸。 【性状】本品为白色疏松状固体，有引湿性。 【适应症】适用于肝癌、直肠癌、食道癌、胃癌、乳腺癌和肺癌等。 【规格】0.25g 【用法用量】 每瓶用2.5ml的注射用水溶解制成每1ml约含氟脲苷100mg的溶液，使用时5%葡萄糖或0.9%氯化钠注射液适当稀释。 治疗肝癌产肝动脉插管给药疗效较好，每次250-500mg，每疗程用量遵医嘱。 静脉滴注：一般按体重一次15mg/kg，一日一次，滴注2-8小时，连续使用5天，以后剂量减半，隔日一次，直至出现毒性反应。 【不良反应】 本品不良反应通常与局部动脉灌注并发症相关。 通常表现为恶心、呕吐、腹泻、肠炎、口炎和局限性红斑。常见实验性异常为：贫血，白细胞减少，碱性磷酸激酶、血清转氨酶、血清胆红素和乳酸脱氢酶升高，大多在继续用药或减量、停药后恢复正常。其它不良反应有： 胃肠道：十二指肠溃疡、十二指肠炎、胃炎、出血、胃肠炎、舌炎、咽炎、厌食、痉挛、腹痛，还可能有肝胆硬化。 皮肤病：脱发、非特异性皮肤毒性、皮疹。 心血管：心肌局部缺血。 各种临床反应：发烧、嗜睡、身体不适、虚弱。 局部动脉灌注所引起的并发症：动脉瘤、动脉局部缺血、动脉血栓、栓塞、纤维肌炎、血栓性静脉炎、肝坏死、脓肿、导管感染、导管出血、导管阻塞、渗漏。 【禁忌症】

核苷酸代谢

第十二章 核苷酸代谢 、 单项选择题 D. 3 -丙氨酸 9、在体内能分解为 3-氨基异丁酸的核苷酸是 D. UMP A. AMP B. GMP C. XMP D. UMP E. IMP 5. 嘧啶核苷酸的从头合成途径中， 先合成下列核苷酸 A. TMP B. CMP C. UMP D. UDP E. UTP 6.体内生成dTMP 的直接前体是 A. TMP B. dUMP C. dUDP D. dCMP E. dCDP 7. 关于嘧啶碱分解的正确叙述是 A. 产生尿酸 B. 代谢异常可引起痛风症 D. 产生 NH 3、 CO 与a -氨基酸 E. 产生NH 、CQ 与3 -氨基酸 嘌呤核苷酸的从头合成途径中， 先合成下列核苷酸 4. 8. 5-氟尿嘧啶（5Fu ）治疗肿瘤的机理是 C. 需要黄嘌呤氧化酶 1. 合成嘧啶和嘌呤环的共同原料是 A. 一碳单位 B. 甘氨酸 C. 谷氨酸 D. 天冬氨酸 E. 蛋氨酸 2. 嘌呤核苷酸的补救合成途径主要在下列器官进行 A. 脑 B. 肝脏 C. 小肠粘膜 D. 肾脏 E. 胸腺 3. 人体内嘌呤碱分解的终产物是 A. 尿酸 B. 尿素 C. 肌酸 E. 尿素氮 A. 本身直接杀伤作用 B. 抑制胞嘧啶合成 C. 抑制尿嘧啶合成 D. 抑制胸苷酸合成 E. 抑制四氢叶酸合成 A. CMP B. AMP C. TMP E. IMP

10. 使用谷氨酰胺的类似物作抗代谢物，不能阻断核酸代谢的哪些环节? B. XMi GMP E. UTP ^ CTP 11 ?临床常用别嘌呤醇治疗痛风症，主要通过抑制下列酶活性而减少尿酸的生成 A.磷酸酶 B.转氨酶 C.合成酶 D. 黄嘌呤氧化酶 E.水解酶 12. 下列代谢途径需要 PRPP 提供R — 5 - P ,例外的是 A.嘌呤核苷酸的从头合成途径 B.嘧啶核苷酸的从头合成途径 C. 嘌呤核苷酸的补救合成途径 D.嘧啶核苷酸的补救合成途径 E. 脱氧尿嘧啶核苷酸代谢转变为脱氧胸腺嘧啶核苷酸 13?脱氧核苷二磷酸（dNDP ）是在下列核苷酸水平上还原生成 A. NMP B. NDP C. NTP D. dNMP E. dNTP 14. dUMP 分子的C-5发生甲基化生成dTMP,其一CH 是由下列 形式的一碳单位提供 A. N 5-甲基四氢叶酸 B. N 5亚氨甲基四氢叶酸 C. N 5 ,N 10 —甲炔基四氢叶酸 D. N 5 —甲酰基四氢叶酸 E. N 5,N 10—甲烯基四氢叶酸 二、多项选择题 1. 下列辅酶或辅基分子中哪些含 AMP 成分 A. IMP 的生成 D. UMP> dTMP C. UMA CMP + + A. NAD B. NADP D. HSCoA E. FAD 2. 合成嘧啶环的原料是 A.谷氨酸 B. 谷氨酰胺 D. CO 2 E. 一碳单位 3. 合成嘌呤环的原料是 A. CO 2 B. 天冬氨酸 D.谷氨酰胺 E. 甘氨酸 4.下列哪些物质可以作为合成嘌呤环和嘧啶环的原料 A.甘氨酸 B. 一碳单位 C. FMN C. 天冬氨酸 C. 谷氨酸 C. 天冬氨酸 D. 谷氨酰胺 E. CO

核苷酸

核苷酸 一、化学结构与理化性质 核苷酸（nucleotide）是由含氮碱基、戊糖（核苷）和磷酸组成的化合物。是构成核酸 的基本组成单位。可由核酸水解得到，也可以单体形成存在于生物体内。其中，根据 核苷的不同，核苷酸有核糖核苷酸（RNA）及脱氧核糖核苷酸（DNA）两类。根据碱基 的不同，又有腺嘌呤核苷酸（腺苷酸，AMP）、鸟嘌呤核苷酸（鸟苷酸，GPM）、胞 嘧啶核苷酸（胞苷酸，CMP）尿嘧啶核苷酸（尿苷酸，UMP）、胸腺嘧啶核苷酸（胸 苷酸，TMP）及次黄嘌呤核苷酸（肌苷酸，IMP）等。核苷酸中的磷酸又有1分子、2 分子及3分子等形式。此外，核苷酸分子内部还可脱水缩合成为环核苷酸。 核苷酸为白色粉末或结晶状物，溶于水，水溶液呈酸性，不溶于丙酮、乙醇等有机溶剂，具旋光性，在260mm左右有强吸收峰。 二、主要来源与生产制备方法 主要来源 天然食物中的核苷酸主要以核酸的形式存在，动物肝脏和海产品含量最丰富，豆类次之，谷物籽实含量较低。 生产制备方法 核苷酸经磷酸二酯水解或化学法降解制得，也可由微生物发酵生产，如以制啤酒的废 酵母为原料，采用弱碱法加热进行酵母破壁，离心分离出含核酸的提取液，再经5’—磷酸二酯酶（从大麦芽根部提取获得）降解，制备出核苷酸粗品，利用活性炭纯化 后得到核苷酸。该方法提取的核苷酸产品得率高、纯度好、成本低且工艺流程简单， 适合工业化生产。 三、分析方法 GB GB/T15356-1994 纸层析/薄层层析法（纯度及定性鉴定）、分光光度法（含量测定）核苷酸测定通则。 AOAC 未查见分析方法。 其他高效液相色谱-紫外分光光度法、高效液相色谱-质谱法等。 四、生理功能及作用 免疫调节作用 外源性核苷酸对维持正常的细胞免疫及体液免疫有重要的作用，如提高机体对细菌和 真菌感染的抵抗力，增加抗体产生，增强细胞免疫能力，刺激淋巴细胞增生等。饮食 摄入核苷酸对婴儿免疫系统的发育有明显的促进作用。 对肠胃道生长发育的作用

胸腺嘧啶核苷的原理及配置方法

胸腺嘧啶核苷的原理及配置方法 胸腺嘧啶核苷的应用： 胸腺嘧啶核苷为生化试剂，用于制备生物培养基，例 如HAT选择性培养基的制备。 胸腺嘧啶核苷的原理： 在单抗制备中，由于需要进行选择性杀死非目标细胞， 所以使用添加HAT的选择性培养基，其依据是细胞中的DNA合成有两条途径：一条途径是生物合成途径（“D途径”），即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，为DNA分子的合成提供原料。在此合成过程中，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程，而HAT培养液中氨基蝶呤是一种叶酸的拮抗物，可以阻断DNA合成的“D途径”。另一条途径是应急途径或补救途径（“S途径”），它是利用次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸，两种酶缺一不可。因此，在HAT培养液中，未融合的效应B细胞和两个效应B细胞融合的“D途径”被氨基蝶呤阻断，虽“S途径”正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10d左右会死亡。对于骨髓瘤细胞以及自身融合细胞而言，由于通常采用的骨髓瘤细胞是次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型（HGPRT）细胞，因此自身没有“S途径”，且“D途径”又被氨基蝶呤阻断，所以在HAT培养液中也不能增殖而很快死亡。只有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，既具有效应B细胞的“S途径”，又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性，因此能在HAT培养液中选择性存活下来，并不断增殖。通常HAT中，H（次黄嘌呤）的浓度为1×10-4M，A（氨基蝶呤）为4×10-7M，T（胸腺嘧啶）为1.6×10-5M，在HT培养基中，只需要不加氨基蝶呤，其它都同HAT。 HAT培养基的配制： 100×A（氨基喋呤）贮存液：称取1.76mg氨基喋呤溶于90ml超纯水中，滴加1mol/L 的NaOH 0.5ml助溶，待完全溶解后，加1mol/L HCL 0.5ml 中和，再补加超纯水到100ml。 0.22um膜过滤除菌，小量分装，-20℃保存。

氟脲嘧啶注射液说明书

氟尿嘧啶注射液说明书， ／． 一(药品名称) ，適用名’；．‘氟尿嘧啶注射液 英文名：Fluorouraci!Injection。 ' 汉语拼音：Funiaomiding Zhusheye 本品主要成份为：，．氟尿啼啶． (性状}本品为无色或几乎五色的證明褲体。 (药理毒理} 本品在俸内先转变为肛氟．．T2囉氟尿嘧啶核苷酸，后翥抑制胸腺嘧瞳核苷酸合成酶，阻断脱氧尿嘧啶核苷酸转变为脱氧胸腺嘧啶核苷酸，从而抑制p恥的生物合成。此外，通过阻止尿嘧啶和乳清酸掺入RNA，达到抑制RNA合成的侔周剪毒品出繈胞風期特异性药，主要抑制S玥细胞。．．；…‘＼广．：’．一、一，．’ (药代动力学} 一、．：…；千j ，本品主要经肝脏代谢．分解为二氧化碳经呼吸道排出林外譬钩I 驪的氟尿嘧啶在给药1小时内经肾以原型药排出体外．大荊量用药能透过血脑屏障，．静脉漓柱半小时后到达脑脊液中／可维持糾埘卜T．内d 为10~20分钟卜T l／2疊为幼小时。，，、斗．；’ ．(适应症L ：、”’卜 一．‘‘．． + ，’：．．：’；’，’，．‘．… 本品的抗瘤谱较广，主要用于治疗消化道肿瘤广或暖大剂量氟尿嚼啶抬疗绒毛膜上皮癌。亦常用于治疗乳腺癌、卵巢癌、肺癌、宫颈癌、膀脆癌及皮肤癌等非：：、．’：

[Jll~illll] 、‘’’；．’一＼／／．．；：氟尿嘧啶作静脉注射或静脉滴注所用剂量相差甚大。单药静脉注射剂量”般为按体重一日lO~20mg／kg，连用5----10 1~，每疗程5'----7克(甚至10克)：若为静脉滴注／通常按体表面积一日300—500mg／m气连用3—5天。每次静脉滴注时间不得少于萨斟时；静脉滴注时可用输液泵连续给药维持24小时。用于原发性或转移性肝癌，一麥零用动脉插管注药。腹腔内注射按体表面积一次500—600m砂矿。’’每周重次卜2／i4次为’l疗程。 (不良反应} ’…’：．．一、 *“… 1．恶心、食欲减退或呕吐。一般剂量多不严重。偶见口腔鞘緙炎或溃瘍，腹部不适或腹泻．周围血白细胞减少常见(大多在疗程开始后2‘一3周丙达最低点；约在3—4周后恢复正常)，血小板减少罕见。极少见咳嗽、气急或小脑共济失调等。 2。长期应用可导致神经系统毒性。 3．偶见用药后心肌缺血，可出现心绞痛和心电图的变化。如经证实心血管不良反应‘4律失常，．勰腦’臟三 ．{鬃惡丁 人类有极少数由于在妊娠初期三个月内应用本品而致先天性畸形哲L若可能对==孟y謐鸚鷓紹缎鬬’薑畸及致癌性和可能在婴儿中出现的毒副反应，因此在应翔本韶期何不允许哺凯。当伴发水痘或带状疱疹时禁用本品。氟尿嘧啶禁忌用毕簑弱病火广“””’’，‘ (注意事项) 、：扒1十：毒品槿动物资验中壽致畸和巍殤怪芦+世在艘千真致夾、．萄曲陳!致擒性均明显低于氮芥类或其他细胞毒性药物，长期应用本品导

第十章核苷酸代谢

第十章核苷酸代谢 一、教学基本要求 复述核苷酸的生理功能。 记住嘌呤核苷酸有两条合成途径。结合嘌呤核苷酸结构与从头合成途径，写出嘌呤核苷酸各元素或组成的材料来源，IMP、AMP与GNP相互转变。熟记二磷酸核苷还原生成脱氧嘌呤核苷酸。写出与嘌呤核苷酸补救合成有关的酶名称、功能、酶缺陷相关的疾病。 结合嘌呤核苷酸合成途径、调节，熟记嘌呤核苷酸抗代谢药物作用机理及临床意义。 记住嘌呤核苷酸体内分解代谢终产物尿酸及其与医学的关系。 熟记嘧啶核苷酸从头合成的原料及合成调节。写出CTP、TMP生成方式。说出嘧啶核苷酸补救合成所需要的酶及其催化的反应。论述嘧啶核苷酸抗代谢药物作用机理，记住嘧啶核苷酸分解代谢产物名称。 二、教材内容精要 核苷酸的生物学功用要点：①合成核酸的原料。②构成能量物质：如ATP、GTP、UTP、CTP等。③参与代谢调节：如cAMP和cGMP。④辅酶组成成分：如NAD＋、NADP＋、FAD、FMN 和CoASH等。⑤参与组成活性中间代谢物：如UDPG、CDP-胆碱、CDP-乙醇胺等。 （一）嘌呤核苷酸代谢 1.嘌呤核苷酸从头合成 两个阶段： 第一阶段生成次黄嘌呤核苷酸（IMP)。 第二阶段生成腺嘌呤核苷酸（AMP）和鸟嘌呤核苷酸（GMP）。 （1）第一阶段 要点： 1)嘌呤核苷酸合成原料：天冬氨酸、谷氨酰氨、甘氨酸、CO2和一碳单位。 记忆：记住5个字就记住了嘌呤核苷酸合成的原料—天、谷、甘、碳(CO2)、碳(一碳单位)。 2)重要的中间产物：磷酸核糖焦磷酸（PRPP）是嘌呤从头合成中的重要中间产物，主要在于a.PRPP是5磷酸核糖的活性形式；b.PRPP可以直接与嘌呤碱生成嘌呤核苷酸（见补救途径）；c.PRPP可以促进关键酶酰胺转移酶的活性，可视为调节物质。 3)关键酶：PRPP合成酶和酰胺转移酶，这两个酶可受代谢物反馈调节。 4)反应过程中，凡有谷氨酰胺和一碳单位参与的反应，均可分别被抗代谢物氨基酸类似物氮杂丝氨酸和叶酸类似物氨甲蝶呤所阻断。 5)嘌呤核苷酸的从头合成一开始就在磷酸核糖的分子上逐步合成嘌呤核苷酸，此点与嘧啶核苷酸合成不同。 （2）第二阶段 要点： 1)IMP可分别经腺苷酸代琥珀酸生成AMP，以及经黄嘌呤核苷酸(XMP)生成GMP。由IMP 生成AMP的过程同氨基酸代谢过程所讲授的嘌呤核苷酸循环的联合脱氨基作用,可参阅氨基酸代谢章。 2）GTP可促进IMP生成AMP，ATP可促进IMP生成GMP。其意义在于AMP和GMP在体内按需要合成，不至于使某种生成过多，而另一种生成过少。