westernblot详细图案解析

Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。

与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。

经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以

检测电泳分离的特异性目的基因表

达的蛋白成分。该技术也广泛应用

于检测蛋白水平的表达。

实验材料蛋白质样品

试剂、试剂盒丙烯酰胺SDS Tris-HCl β-巯基乙醇ddH2O 甘氨酸Tris 甲醇PBS NaCl KCl Na2HPO4 KH2PO4 ddH2O 考马斯亮兰乙酸脱脂奶粉硫酸镍胺H2O2 DAB试剂盒

仪器、耗材电泳仪电泳槽离心机离心管硝酸纤维素膜匀浆器剪刀移液枪刮棒

实验步骤一、试剂准备

1. SDS-PAGE试剂：见聚丙烯酰胺凝胶电泳实验。

2. 匀浆缓冲液：1.0 M Tris-HCl(pH 6.8) 1.0 ml；10%SDS 6.0 ml；β-巯基乙醇0.2 ml；ddH2O 2.8 ml。

3. 转膜缓冲液：甘氨酸2.9 g；Tris 5.8 g；SDS 0.37 g；甲醇200 ml；加ddH2O定容至1000 ml。

4. 0.01 M PBS(pH7.4)：NaCl 8.0 g；KCl 0.2 g；Na2HPO4 1.44 g；KH2PO4 0.24 g；加ddH2O至1000 ml。

5. 膜染色液：考马斯亮兰0.2 g；甲醇80 ml；乙酸2 ml；ddH2O118 ml。包被液（5%脱脂奶粉，现配）：脱脂奶粉1.0 g 溶于20 ml的0.01 M PBS中。

6. 显色液：DAB 6.0 mg；0.01 M PBS 10.0 ml；硫酸镍胺0.1 ml；H202 1.0 μl。

二、蛋白样品制备

1. 单层贴壁细胞总蛋白的提取

（1）倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会

儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。

（2）每瓶细胞加3 ml 4℃预冷的PBS （0.01M pH7.2～7.3）。平放轻轻摇动1 min洗涤细胞，然后弃去洗液。重复以上操作两次，共洗细胞三次以洗去培养液。将PBS 弃净后把培养瓶置于冰上。

（3）按1ml裂解液加10 μl PMSF（100 mM），摇匀置于冰上。（PMSF要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合。）

（4）每瓶细胞加400 μl含PMSF的裂解液，于冰上裂解30 min，为使细胞充分裂解培养瓶要经常来回摇动。

（5）裂解完后，用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧（动作要快），然后用枪将细胞碎片和裂解液移至1.5 ml离心管中。（整个操作尽量在冰上进行。）

（6）于4℃下12000 rpm离心5 min。（提前开离心机预冷）

（7）将离心后的上清分装转移倒0.5 ml的离心管中放于－20℃保存。

2. 组织中总蛋白的提取

（1）将少量组织块置于1～2 ml匀浆器中球状部位，用干净的剪刀将组织块尽量剪碎。

（2）加400 μL单去污剂裂解液裂（含PMSF）于匀浆器中，进行匀浆。然后置于冰上。

（3）几分钟后再碾一会儿再置于冰上，要重复碾几次使组织尽量碾碎。

（4）裂解30 min后，即可用移液器将裂解液移至1.5 ml离心管中，然后在4℃下12000 rpm离心5 min，取上清分装于0.5 ml离心管中并置于－20℃保存。

3. 加药物处理的贴壁细胞总蛋白的提取

由于受药物的影响，一些细胞脱落下来，所以除按1操作外还应收集培养液中的细胞。以下是培养液中细胞总蛋白的提取：

（1）将培养液倒至15 ml离心管中，于2500 rpm离心5 min。

（2）弃上清，加入4 ml PBS并用枪轻轻吹打洗涤，然后2500 rpm离心5 min。弃上清后用PBS重复洗涤一次。

（3）用枪洗干上清后，加100 μL裂解液（含PMSF）冰上裂解30 min，裂解过程中要经常弹一弹以使细胞充分裂解。

（4）将裂解液与培养瓶中裂解液混在一起4℃、12000 rpm离心5 min，取上清分装于0.5 ml离心管中并置于－20℃保存。

三、蛋白含量的测定

1. 制作标准曲线

（1）从－20℃取出1 mg/ml BSA，室温融化后，备用。

（2）取18个1.5 ml离心管，3个一组，分别标记为0 mg，2.5 mg，5.0 mg，10.0 mg，20.0 mg，40.0 mg。

（3）按下表在各管中加入各种试剂。

（4）混匀后，室温放置2 min。在生物分光光度计（Bio-Photometer，Eppendorf）上比色分析。

2. 检测样品蛋白含量

（1）取足量的1.5 ml离心管，每管加入4℃储存的考马斯亮蓝溶液1 ml。室温放置30 min后即可用于测蛋白。

（2）取一管考马斯亮蓝加0.15 mol/L NaCl 溶液100 ml，混匀放置2分钟可做为空白样品，将空白倒入比色杯中在做好标准曲线的程序下按blank测空白样品。

（3）弃空白样品，用无水乙醇清洗比色杯2次（每次0.5 mL），再用无菌水洗一次。

（4）取一管考马斯亮蓝加95 ml 0.15 mol/L NaCl NaCl溶液和5 ml待测蛋白样品，混匀后静置2 min，倒入扣干的比色杯中按sample键测样品。

注意：每测一个样品都要将比色杯用无水乙醇洗2次，无菌水洗一次。可同时混合好多个样品再一起测，这样对测定大量的蛋白样品可节省很多时间。测得的结果是5 ml样品含的蛋白量。

四、SDS－PAGE电泳

1. 清洗玻璃板

一只手扣紧玻璃板，另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲，再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。

2. 灌胶与上样

（1）玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。（操作时要使两玻璃对齐，以免漏胶。）

（2）按前面方法配10%分离胶，加入TEMED后立即摇匀即可灌胶。灌胶时，可用10 ml枪吸取5 ml胶沿玻璃放出，待胶面升到绿带中间线高度时即可。然后胶上加一层水，液封后的胶凝的更快。（灌胶时开始可快一些，胶面快到所需高度时要放慢速度。操作时胶一定要沿玻璃板流下，这样胶中才不会有气泡。加水液封时要很慢，否则胶会被冲变型。）

（3）当水和胶之间有一条折射线时，说明胶已凝了。再等3 min使胶充分凝固就可倒去胶上层水并用吸水纸将水吸干。

（4）按前面方法配4%的浓缩胶,加入TEMED后立即摇匀即可灌胶。将剩余空间灌满浓缩胶然后将梳子插入浓缩胶中。灌胶时也要使胶沿玻璃板流下以免胶中有气泡产生。插梳子时要使梳子保持水平。由于胶凝固时体积会收缩减小，从而使加样孔的上样体积减小，所以在浓缩胶凝固的过程中要经常在两边补胶。待到浓缩胶凝固后，两手分别捏住梳子的两边竖直向上轻轻将其拔出。

（5）用水冲洗一下浓缩胶，将其放入电泳槽中。（小玻璃板面向内，大玻璃板面向外。若只跑一块胶，那槽另一边要垫一块塑料板且有字的一面面向外。）

（6）测完蛋白含量后，计算含50 ng蛋白的溶液体积即为上样量。取出上样样品至0.5 ml离心管中，加入5×SDS 上样缓冲液至终

浓度为1×。（上样总体积一般不超过15 μl，加样孔的最大限度可加20 μl样品。）上样前要将样品于沸水中煮5 min使蛋白变性。

（7）加足够的电泳液后开始准备上样。（电泳液至少要漫过内测的小玻璃板。）用微量进样器贴壁吸取样品，将样品吸出不要吸进气泡。将加样器针头插至加样孔中缓慢加入样品。（加样太快可使样品冲出加样孔，若有气泡也可能使样品溢出。加入下一个样品时，进样器需在外槽电泳缓冲液中洗涤3次，以免交叉污染。

3. 电泳

电泳时间一般4～5 h，电压为40 V较好，也可用60 V。电泳至溴酚兰刚跑出即可终止电泳，进行转膜。

五、转膜

1. 转一张膜需准备6张7.0～8.3 cm的滤

纸和1张7.3～8.6 cm的硝酸纤维素膜。切滤纸和膜时一定要戴手套，因为手上的蛋白会污染膜。将切好的硝酸纤维素膜置于水上浸2 h才可使用。（用镊子捏住膜的一边轻轻置于有超纯水的平皿里，要使膜浮于水上，只有下层才与水接触。这样由于毛细管作用可使整个膜浸湿。若膜沉入水里，膜与水之间形成一层空气膜，这样会阻止膜吸水。

2. 在加有转移液的搪瓷盘里放入转膜用的夹子、两块海绵垫、一支玻棒、滤纸和浸过的膜。

3. 将夹子打开使黑的一面保持水平。在上面垫一张海绵垫，用玻棒来回擀几遍以擀走里面的气泡。（一手擀另一手要压住垫子使其不能随便移动。）在垫子上垫三层滤纸（可三张纸先叠在一起在垫于垫子上），一手固定滤纸一手用玻棒擀去其中的气泡。

4. 要先将玻璃板撬掉才可剥胶，撬的时候动作要轻，要在两个边上轻轻的反复撬。撬一

会儿玻璃板便开始松动，直到撬去玻板。（撬时一定要小心，玻板很易裂。）除去小玻璃板后，将浓缩胶轻轻刮去（浓缩胶影响操作），要避免把分离胶刮破。小心剥下分离胶盖于滤纸上，用手调整使其与滤纸对齐，轻轻用玻棒擀去气泡。将膜盖于胶上，要盖满整个胶（膜盖下后不可再移动）并除气泡。在膜上盖3张滤纸并除去气泡。最后盖上另一个海绵垫，擀几下就可合起夹子。整个操作在转移液中进行，要不断的擀去气泡。膜两边的滤纸不能相互接触，接触后会发生短路。（转移液含甲醇，操作时要戴手套，实验室要开门以使空气流通。）

5. 将夹子放入转移槽槽中，要使夹的黑面对槽的黑面，夹的白面对槽的红面。电转移时会产热，在槽的一边放一块冰来降温。一般用60 V转移2 h或40 V转移3 h。

6. 转完后将膜用1×丽春红染液染5 min （于脱色摇床上摇）。然后用水冲洗掉没染上的染液就可看到膜上的蛋白。将膜晾干备

用。

六、免疫反应

1 . 将膜用TBS从下向上浸湿后，移至含有封闭液的平皿中，室温下脱色摇床上摇动封闭1h。

2. 将一抗用TBST稀释至适当浓度（在1.5 ml离心管中）；撕下适当大小的一块儿保鲜膜铺于实验台面上，四角用水浸湿以使保鲜膜保持平整；将抗体溶液加到保鲜膜上；从封闭液中取出膜，用滤纸吸去残留液后，将膜蛋白面朝下放于抗体液面上，掀动膜四角以赶出残留气泡；室温下孵育1～2 h后，用TBST在室温下脱色摇床上洗两次，每次10 min；再用TBS洗一次，10 min。

3. 同上方法准备二抗稀释液并与膜接触，室温下孵育1～2 h后，用TBST在室温下脱色摇床上洗两次，每次10 min；再用TBS洗一次，10 min，进行化学发光反应。

七、化学发光，显影，定影

1. 将A和B两种试剂在保鲜膜上等体积混合；1 min后，将膜蛋白面朝下与此混合液充分接触；1 min后，将膜移至另一保鲜膜上，去尽残液，包好，放入X-光片夹中。

2. 在暗室中，将1×显影液和定影液分别到入塑料盘中；在红灯下取出X－光片，用切纸刀剪裁适当大小（比膜的长和宽均需大1 cm）；打开X-光片夹，把X－光片放在膜上，一旦放上，便不能移动，关上X-光片夹，开始计时；根据信号的强弱适当调整曝光时间，一般为1 min或5 min，也可选择不同时间多次压片，以达最佳效果；曝光完成后，打开X-光片夹，取出X-光片，迅速浸入显影液中显影，待出现明显条带后，即刻终止显影。显影时间一般为1～2 min（20～25℃），温度过低时（低于16℃）需适当延长显影时间；显影结束后，马上把X-光片浸入定影液中，定影时间一般为5～10 min，以胶片透

明为止；用自来水冲去残留的定影液后，室温下晾干。

应注意的是：显影和定影需移动胶片时，尽量拿胶片一角，手指甲不要划伤胶片，否则会对结果产生影响。

八、凝胶图象分析

将胶片进行扫描或拍照，用凝胶图象处理系统分析目标带的分子量和净光密度值。

收起

注意事项1. 一抗、二抗的稀释度、作用时间和温度对不同的蛋白要经过预实验确定最佳条件。

2. 显色液必须新鲜配置使用，最后加入

H2O2。

3. DAB有致癌的潜在可能，操作时要小心仔细。

其他一、免疫反应

1. 用0.01 M PBS洗膜，5 min ×3次。

2. 加入包被液，平稳摇动，室温2 h。

3. 弃包被液，用0.01 M PBS洗膜，5 min ×3次。

4. 加入一抗（按合适稀释比例用0.01 M PBS稀释，液体必须覆盖膜的全部），4℃放置12 h以上。阴性对照，以1%BSA取代一抗，其余步骤与实验组相同。

5. 弃一抗和1%BSA，用0.01 M PBS分别洗膜，5 min×4次。

6. 加入辣根过氧化物酶偶联的二抗（按合适稀释比例用0.01 M PBS稀释），平稳摇动，

室温2 h。

7. 弃二抗，用0.01 M PBS洗膜，5 min×4

次。

8. 加入显色液，避光显色至出现条带时放入

双蒸水中终止反应。

展

实验

材料

蛋白质样品

试剂、试剂盒裂解液PBS G 250考马斯亮蓝溶液NaCl SDS上样缓冲液电泳缓冲液转移缓冲液丽春红染液封闭液TBST TBS 洗脱抗体缓冲液显影液定影液抗体化学发光试剂

仪器、耗材高压锅玻璃匀浆器高速离心机分光光度仪-20℃低温冰箱垂直板电泳转移装置恒温水浴摇床多用脱色摇床

实验一、操作步骤：

步骤

1. 蛋白样品制备

（1）单层贴壁细胞总蛋白的提取：

①倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立

放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。

②每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS（0.01 M pH7.2～7.3）。平放轻轻摇动

1 min 洗涤细胞，然后弃去洗液。重复以上操作两次，共洗细胞三次以洗

去培养液。将PBS弃净后把培养瓶置于冰上。

③按1ml裂解液加10 μl PMSF（100 mM），摇匀置于冰上。（PMSF

要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合。）

④每瓶细胞加400 μl含PMSF的裂解液，于冰上裂解30 min，为使细胞

充分裂解培养瓶要经常来回摇动。

⑤裂解完后，用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧（动作要快），然后

用枪将细胞碎片和裂解液移至1.5 ml 离心管中。（整个操作尽量在冰上进行。）

⑥于4℃下12000 rpm离心5 min 。（提前开离心机预冷）

⑦将离心后的上清分装转移倒0.5 min 的离心管中放于-20℃保存。

（2）组织中总蛋白的提取：

①将少量组织块置于1～2 ml 匀浆器中球状部位，用干净的剪刀将组织块尽量剪碎。

②加400 l单去污剂裂解液裂（含PMSF）于匀浆器中，进行匀浆。然后置于冰上。

③几分钟后再碾一会儿再置于冰上，要重复碾几次使组织尽量碾碎。

④裂解30 min后，即可用移液器将裂解液移至1.5 ml 离心管中，然后在4℃下12000 rpm 离心5 min ，取上清分装于0.5 ml 离心管中并置于-20℃保存。

（3）加药物处理的贴壁细胞总蛋白的提取：

由于受药物的影响，一些细胞脱落下来，所以除按（1）操作外还应收集培养液中的细胞。以下是培养液中细胞总蛋白的提取：

浅谈苗族服饰纹样

浅谈苗族服饰纹样 在各式服装纹样中，苗族服饰对我来说有着某种特殊的感情，我不知道出于什么原因，仅仅觉得苗族之着装让我仿佛能够看到他们所特有的性格：纯朴、善良、可爱、勤劳且富有朝气…… 苗族服饰纹样中，象征性成为了她的灵魂，从而使得她独具魅力。苗族传统服饰纹样按照象征性含义的不同，可大致划分为力量性、生命性和吉祥性三种类型。 一、力量性 在人类早期，人们缺乏对自然界的认识，由于生产力水平的限制，对于自然界有许许多多无法解释的东西，人们认为一切事物都是有生命的，都是有灵魂的；神灵无处不在，无所不能，于是人们产生了对神灵的崇拜，认为神灵的力量超于一切。因此，有学者认为“世间最有力量的象征就是神灵，神灵与神话故事世代相传，以其潜移默化的能力影响着一代又一代的生活。” 苗族在其社会历史发展过程中，同样经历了从原始人类混沌时期的“万物有灵”认识观，演化成“神灵崇拜”的巫术活动以至宗教信仰的形成这一过程。苗族先辈在变幻莫测的大自然面前，在与自然界的对立之中，从最初的恐惧、崇拜开始，继而祈望自己拥有巨大的力量，以征服自然、征服猛兽、征服敌人。这种力量在现实生活中是苗族人的精神支柱，因此，代表着苗族人智慧和力量的象征性纹样开始大量出现，并体现在服饰上。 在苗族服饰纹样中有许多龙纹，其形态是综合了飞禽走兽及其它

动物最突出的特点后，经过创造性的艺术加工而塑造的（如图1）。 图1 龙纹图 它特定的寓意是：宽阔突起的前额表示聪明智慧，鹿角表示社稷和长寿，牛耳寓意名列魁首，虎眼表现威严，鹰爪表现勇猛，剑眉象征英武，狮鼻象征宝贵，金鱼尾象征灵活，马齿象征勤劳善良等等。总之，龙代表的是英雄之美、力量之美。同其他民族一样，苗族人民把龙的形象比作坚毅、强大、奋发、进取的民族精神象征，并以有这样源远流长的龙文化而感到自豪。在湘西苗族山寨，保留了“接龙”的习俗。接龙时，山寨苗王所穿的接龙衣，衣领及胸前背后都刺缀着成对的龙。 在苗族传统服饰纹样中，鸡纹也占有十分重要的地位。只不过是理想化的鸡。在苗族姑娘们的衣背、衣袖和围腰上随处可见那似鸡非鸡的飞禽，有的头如孔雀，张开双翅作飞翔状，有的头如龙头，顶上有冠，或单独使用或周围配以花卉、蝴蝶（如图2）。

苗族服饰演讲稿

苗族服饰——花中奇葩 苗族的历史文化是靠口头文学和服饰图画艺术来表达的。与许多无字民族不同的是，苗族不仅将历史传统倾注于口头文学之中，更将它倾注于图画之中，这主要表现在苗族的刺绣图案里。苗族老人对苗族少年进行历史文化教育时，常指点着服饰图案而说。苗族叙事性服饰图案不仅长盛不衷，而且十分丰富发达，可谓到了以服饰再现历史的地位，成为苗族传世的“无字史书”。它们包括缅怀祖先的创世图案、祭祀图案和记载先民悲壮历史的战争迁徙图案。在黔东南苗族服饰里，大量使用着“蝴蝶妈妈”、“姜央射日月”、“天地”、“黄河”、“长江”、“骏马飞渡”、“江河波涛”、“平原”、“城池”、“洞庭湖”等母题图案，这些图案均显示着苗族历史发展的轨迹。 苗族刺绣 苗族刺绣，代表了中国少数民族刺绣的最高水平。刺绣是苗族源远流长的手工艺术，是苗族服饰主要的装饰手段,是苗族女性文化的代表。他们的服饰有便装与盛装之分，平日着便装，节目或姑娘出嫁时着盛装，无论服装还是头饰，工艺复杂，做工精细。苗族刺绣的题材选择虽然丰富，但较为固定，有龙、鸟、鱼、铜鼓、花卉、蝴蝶，还有反映苗族历史的画面。苗族刺绣十分美丽，技法有12类，即平绣、挑花、堆绣、锁绣、贴布绣、打籽绣、破线绣、钉线绣、绉绣、辫绣、缠绣、马尾绣、锡绣、蚕丝绣。这些技法中又分若干的针法,如锁绣就有双针锁和单针锁，破线绣有破粗线和破细线。 苗族刺绣有一种极常见的人骑龙或骑水牯纹样，体现了苗族人民英勇无畏的气概和生活情趣。苗族民间艺术中的骑龙、驯龙、双龙的各种图案，再现了人们对龙敬而不畏的心理。苗族刺绣种类很多，从色彩上分，大体上可分为单色绣和彩色绣两种。单色绣以青线为主，刺绣手法比较单一，其作品典雅疑重，朴素大方；彩色绣用七彩丝线绣成，刺绣手法比较复杂，或平绣或盘绣或挑绣，多以自然界中的花鸟虫鱼或龙凤麒麟为题材，刺绣成品色彩斑斓，栩栩如生，是凤凰民族工艺品中的精品。苗族刺绣另一特色是借助色彩的运用、图案的搭配，达到视觉上的多维空间。挑花也称数纱绣，是苗族特有的技艺，不事先取样，利用布的经纬线挑绣，反挑正取，形成各种几何纹样。挑花就是借助色彩和不规则几何纹样的搭配，形成多视角的图案，从而达到“则看成岭近成峰”的立体与平面统一的视觉效果。 刺绣是苗族妇女的特长，很多作品都具有技术高超，造型奇特，想象丰富，色调强烈，风格古朴的特点。苗族刺绣图案色调多种多样，松桃地区以花、鸟、虫、鱼为主，喜欢用粉红、翠蓝、紫等色，较为素净。黔东南多以龙、鱼、蝴蝶、石榴为图案，喜欢红、蓝、粉红、紫等颜色。黔中地带喜欢用长条、长方、斜线等组成几何图案，喜欢大红、大绿、涤蓝等颜色。古藏衣上刺绣的蝴蝶纹，是苗族纹饰中最常见和最重要的装饰文化，除了蝴蝶纹绚丽的因素外，还与苗族一个家喻户晓的神话传说——蝴蝶妈妈相关。在苗族人的心目中蝴蝶妈妈、大宇鹡鸟是苗族的始祖，是创业者，把这些蝴蝶、鸟纹绣在衣服上用以表示对祖先的尊敬与崇拜。这些图案还有明显的阴阳结合、创造生命的寓意。表达了苗族祖先对自然、宇宙、对生命起源的理解和认识。 苗族的银饰 苗族姑娘胸前大都佩戴着硕大的银锁，银锁是苗族银装中的主要饰物，制作得十分精美，银匠在压制出的浮雕式纹样上錾出细部、纹样有龙、双狮、鱼、蝴蝶、绣球、花草等。银锁

从符号学角度中国传统吉祥图案

2011年第10卷第9期 产业与科技论坛2011.（10）.9 Industrial &Science Tribune 从符号学角度分析中国传统吉祥图案 □王志广 【摘 要】本文主要从符号学的角度对中国传统的吉祥图案进行解析，从而揭示出笔者对传承和发展中国传统图案的看法，希 望对读者有所帮助。 【关键词】符号学；索绪尔；传统文化；吉祥图案【作者简介】王志广，北京理工大学设计艺术学院硕士研究生；研究方向：工业设计、交互设计 一、符号学基本理论知识 符号学是研究符号一般理论的科学。它研究事物符号的本质、符号的变化，发展规律及符号的各种意义。从本世纪60年代符号学才作为一门学问得以研究，现在符号学已经成为一项科学研究，其理论成果也已经渗透到其他诸多学科之中。符号学的理论体系主要包括符号学之父瑞士的费·德·索绪尔现代语言学理论、美国符号学鼻祖查·桑·皮尔斯的符号论思想、法国的格雷马斯的符号学矩阵、意大利艾柯的一般符号学。 索绪尔侧重于符号社会功能的探索，他认为每种符号可 分为符征与符旨。前者称“能指”，是物体呈现出的符号形式；后者称“所指”，指物体潜藏在符号背后的意义，即思想观 念。能指与所指建构出事物成立的两面性。他认为符号代表的意义是根据整体社会文化系统而定。由此对前面所提 到的“图案”实例，可以从符号的所指和能指的角度去理解，为我们对事物的认识开辟了新的思路。在恩斯特·卡西尔、苏珊·朗格的符号形式哲学中，卡西尔认为：人类所有的精神文化都是符号活动的产物；人的 本质即表现在他能利用符号去创造文化。他将艺术定义为一种符号，一种符号语言，而后由苏珊·朗格等完善的文艺符号学把文艺看作是表现人类情感的符号形式。由此从符号学的角度对中国传统图案重新认识是对其传承和应用的重要手段。 二、从符号学的角度分析吉祥图案 吉祥图案的产生与人们对自然崇拜的原始信仰有密切的关系。图腾信仰是古代大自然信仰中发展起来的一种原始氏族标志的信仰形式。在原始人的信仰中， 一般认为本氏族人都源于某一个特定的物种，大多数情况下被认为是某种动物的亲缘关系。我国的那些著名的原始部落首领几乎都是某一动物的化身，或本来就是某种动物。如龙凤图案，就凝聚了中华民族对祖先的崇拜和对自然理解的心态。 在儒家强调“修身”作为冶国平天下之根本的入世思想影响下，中国人，特别是知识分子，自觉性较高，忧患意识较强。以孔子“岁寒，知松柏之后凋也”之语为人格原型的松、力于真正的主题和重要的关键词，因为它们在思维导图中最为显眼，可以在关键词之间产生清晰、合适的联想，改善创造力和记忆力， 大脑更易于接受和记忆有视觉刺激、多重色彩、多维度的思维导图，而不是单调烦人的文字。在做思维导图的时候， 学生会处在不断有新发现和新关系的状态，这会鼓励思想不间断、无止境地流动。思维导图与大脑本身寻求完整的特性相一致， 满足了学生对学习的欲望。大脑不断地利用其所有的皮层技能，越来越清晰，越来越愿意接受新事物。思维导图会自动地激发学生的兴趣，因而学生更易接受，在教室里更具有合作精神。它们会让课堂和讲解更出自自发行为，更有创造性，更令人喜悦，学生和教师都是如此。教师的教案不会随着年龄增加而变得相对僵硬，反而会更有弹性，更容易更改。在这样一个瞬息万变的社会，教师需要改变，需要能够不断迅速而轻松地为教案添加新的内容。因为思维导图只把相关的材料以非常清晰和容易记忆的形式表现出来。因此学生很有可能在考试中获取更好的成绩。思维导图不仅显示一些事实，而且把事实之间的关系也列举出来，这样就让学生对课题有更深的理解。教案的篇幅少了 相当大的一部分， 思维导图对于有学习障碍的学生特别有用。它可以让学生从“语义的束缚”中解脱出来，从而使他们更加自然完整和快速地表达自己的思想。思维导图可以让 学生有效地组织别人思想，即通过阅读学习，也可以组织自己的思想， 即作即席演讲或者报告，以作为泛读教学的评价手段和检查是否理解并应用所学知识的最佳方法。小组讨论、合作学习以及任务型教学所要求的过程都可以通过思维导图方法来实现。 思维导图比较有效地解决了高职英语泛读课堂上出现的一些常见问题，而且学生学习反馈效果也不错。但是如何让学生有效快速掌握思维导图的具体方法，如何在课堂解决绘制思维导图的过程还有待更多的实践。 【参考文献】 1．博赞著；叶刚译．思维导图［M ］．北京：中信出版社，20092．博赞著；丁大刚，张相芬译．博赞学习技巧［ M ］．北京：中信出版社， 20093．博赞著；丁叶然译．快速阅读［M ］．北京：中信出版社，2009 · 951·

浅谈苗族服饰的纹样

浅谈苗族服饰的纹样 摘要 苗族历史悠久，聚居地域辽阔而复杂，苗锦苗绣服饰图案艺术的发展体现了苗族妇女的价值认同以及对美好生活追求的民族审美个性。不同的地域环境和支系形成了绮丽多变、纹饰繁富的多样性风格。 关键词：苗族服饰妇女价值纹样艺术绮丽多姿民族审美 引言 苗族服饰向来以绮丽多姿、纹饰繁富的特点为世人称道。令人难以想象的是，苗族有些简陋的吃住生活与他们织绣染装服饰艺术的五彩缤纷、灿烂夺目形成了非常鲜明的反差。在苗族服装饰纹图案精美绚丽多姿的背后，有些人家连床铺被盖尚不齐全，食物常年以酸汤菜为主的条件下，在服饰上从不含糊行事。从发生学的角度上来看，任何民间艺术品背后所蕴藏着的意涵、人文涵及象征意义都与该民族或群体的生存、发展和思维方式休戚相关，特别是一些民族风俗习惯在民族和群体中一般来说是约定成俗、口传心授的。 正文 一、苗族服饰图案纹样艺术的人文背景 服饰织绣染装艺术在苗族社会中能占有如此重要的地位，千百年来得以经久不衰的繁荣和发展，一方面体现了这一约定成俗的民族风俗习惯；另一方面则体现了苗族妇女自身的价值观，即能力的体现和审美的体现。这两种价值观的体现对其社会声誉和择偶、婚姻缔结产生直接而重大的影响。苗族是以家庭为生产单位的自给自足的小农经济，吃的、用的都基本上由家庭自己生产，妇女除参加农业劳动和家务劳动之外，纺织、刺绣或蜡染是她们一生的主要劳作。因此，纺织绣染在苗族中成为人们评价妇女能力高下的一个主要标准。美誉四方的妇女，必定是纺织绣染做得最好、心灵手巧的妇女，她们会受到人们的敬重和喜爱。反之，不善纺织绣染的妇女，会受到人们鄙视，给待婚姑娘在择偶、婚姻上带来不利甚

westernblot详细图解

Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。 与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。 经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以

检测电泳分离的特异性目的基因表 达的蛋白成分。该技术也广泛应用 于检测蛋白水平的表达。 实验材料蛋白质样品 试剂、试剂盒丙烯酰胺SDS Tris-HCl β-巯基乙醇 ddH2O 甘氨酸Tris 甲醇PBS NaCl KCl Na2HPO4 KH2PO4 ddH2O 考马斯亮兰乙酸脱脂奶粉硫酸镍胺H2O2 DAB试剂盒 仪器、耗材 电泳仪电泳槽离心机离心管硝酸纤维素 膜匀浆器剪刀移液枪刮棒 实验步骤一、试剂准备 1. SDS-PAGE试剂：见聚丙烯酰胺凝胶电泳实验。 2. 匀浆缓冲液：1.0 M Tris-HCl(pH 6.8) 1.0 ml；10%SDS 6.0 ml；β-巯基乙醇0.2 ml；ddH2O 2.8 ml。 3. 转膜缓冲液：甘氨酸2.9 g；Tris 5.8 g；SDS 0.37 g；甲醇200 ml；加ddH2O定容至1000 ml。

苗族服饰文献综述

苗族服饰 苗族历史悠久，人口众多，主要分布于我国贵州、湖南与四川地区。在其漫长而曲折的发展中，服装与银饰成为苗家人最具代表性的民族符号。如果说银饰是苗族女性的代表标志，那么服饰则代表着苗家人独特的艺术作品。苗族服饰以夺目的色彩、繁复的装饰和耐人寻味的文化内涵著称于世，所以对于苗族服饰的研究在某种意义上也是对苗族历史的回顾。 苗服形成的历史渊源 根据史籍记载和传说，苗族先民殷周时代已在今湖北清江流域和湖南洞庭湖一带生息。约在春秋战国时期，在巴蜀、夜郎以及荆州都有苗族先民活动。秦汉时，大部分苗族先民在武陵郡、牂柯郡、越巂郡、巴郡、南郡等地区定居，小部分继续迁徙到黔东南都柳江流域。嗣后，由于战争、饥馑、疾病流行、生育繁密、农田丢荒等原因而不断迁徙。同样也正因为这样，造就了苗服所独具的深厚的文化内涵与历史价值。 关于苗服的产生民俗界有多种观点，但是有一点是比较统一的：苗服的产生是多次迁徙与抗争的产物。 冯悦在《苗族服饰记在衣上的史诗》做如下描述“五千多年前苗族的祖先雄居于长江中下游和黄河下游这

片阔富饶的土地上，然而部落间的战争迫使他们不得不放弃故土被迫南迁，传说当时姑娘们舍不得故土的奇花异草和珍禽异兽，她们含着泪用千针万线把那些美丽的动植物绣在自己的衣裙上，带到很远的地方去并将这种服饰传给她们的后代，今滇黔旁乌蒙山区的花苗服饰，据说就是对故园山水、田林的记录。”石鑫进在《论述湘西苗女服》中叶对此做了侧面论证“湘西苗族的古代服饰，男女差别较小，一律穿刺绣花衣，包赭色绣花帕，配以诸多银饰。自清代雍正年间改土分流、政府指令服饰宜分男女之后，变化极大。” 苗服的地域特点 苗族服饰有性别、年龄及盛装与常装之分，且有地区差别。据清代《百苗图》所载，凡八十三种。另有湘西型苗族服饰考察资料称百余种。纷繁复杂的苗族服饰分为湘西型、黔东型、川黔滇型、黔中南型以及海南型等五大类别和若干款式。 湘西型，流行于湖南湘西州及湘、黔、川、鄂四省交界一带。古代男女蓄发椎髻的习俗已消失。今女我穿圆领大襟短衣，盘肩、袖口等处有少许绣花；宽脚裤，裤筒边缘多饰花边；包扎又高又大的青布或花布头帕，戴银饰。

吉祥图案在现代产品设计中的应用分析

目录 第一章绪论 1.1 吉祥图案简介 1.2 吉祥图案与现代产品设计 第二章吉祥图案题材内容在现代产品设计中的应用 2.1题材内容的直接运用 2.2题材内容的变形应用 2.2.1题材内容的夸张变化 2.2.2题材内容的简化变化 第三章吉祥图案构图形式在产品设计中的体现 3.1 “S”型构图形式的体现 3.2 变化统一构图形式的体现 第四章吉祥图案语义与现代产品设计研究 4.1 产品语义 4.2 吉祥图案语义与产品语义 4.2.1 吉祥图案语义与产品的功能语义 4.2.2 吉祥图案语义与产品的象征语义 4.2.3 吉祥图案语义与产品的趣味语义 4.2.4 吉祥图案语义与产品的关怀语义 第五章吉祥图案设计所体现的设计思维与产品设计研究 5.1 整体观念 5.2 共赢共生 5.3 以人为本 5.4 善待自然 第六章结语

第一章绪论 1.1吉祥图案简介 1.1.1吉祥图案含义 《辞海》对吉祥图案解释是：中国传统装饰纹样的一种。它是通过某种自然物象的寓意、谐音或附加文字等形式，来表达人们的愿望、理想的图案，主要流行在民间。 1.1.2 吉祥图案题材 动物纹为先民对飞禽走兽、家畜虫鱼等赋予各种吉祥 寓意；祥禽瑞兽纹主要包括龙、凤、麒麟、貔貅等，它们 集多种动物形象于一体；植物纹为植物自身的生长特性被 赋予各种寓意，如荷花、梅花、竹子等都有自己不同的寓 意；几何纹是以简练的 1.1.3 吉祥图案寓意 “图必有意，意必吉祥”是对民间艺术特征的高度概括，在表达吉祥图案的 寓意方面多采用借语、比拟、双关、象征及谐音等方法，利用图案和吉祥语的完美结合，赋予祈求吉祥、免难消灾的含义。 1.2 吉祥图案与现代产品设计 现代工业设计不再是简单、符合人机的造形设计，而是富有文化内涵的设计。民间艺术吉祥图案博大精深，它深刻而又吉祥的寓意在工业设计的运用是一个创新的过程。在工业设计中，对民间艺术吉祥图案的运用，主要是对吉祥造物主的运用以及吉祥图案的再设计，这种再设计绝不是表面形式上的模拟，而是提取民间艺术精髓与工业产品相结合后的一种民族气质的展现。 第二章吉祥图案题材内容在现代产品设计中的应用

湘西凤凰苗族服饰采风汇报

湘西凤凰苗族服饰采风汇报 湘西凤凰苗族是一个古老的民族，在长期的历史发展过程中形成了自己独特的风情和文化。苗族服饰作为少数民族丰富的精神文化遗产之一，服饰之丰富，样式之繁复，为中国56个民族所罕见，以至于可以依其样式、颜色来区分苗族各支系的名称。由于苗族人民长期居住于西南相对较为封闭的地区，因此服饰中还保留着较多的原始风貌，但随着社会的不断进步和开放，其传统服饰也产生了相应的变化，至今很多传统服饰和纹样都已失传。因此探究苗族服饰这部“无字史诗”就显得尤为重要。苗族的服饰图案是丰富多彩的，其中蕴含着民族的历史记忆，蕴藏着民族的宗教信仰，蕴藏着民族对生活的希冀和诠释，是我们探究苗族服饰渊源的最为有利的依据。图腾崇拜是原始社会的一种较早的宗教信仰。原始人相信每个氏族与某种动物、植物或无生物有着亲属或其它关系。此物就成为该氏族的图腾——吉祥物或象征。对崇拜之物，人们往往有着各种各样的风情习俗，也有着各种崇拜仪式，常常会纹在身上或将图案绣在衣服上以期保佑。 苗族的服饰 苗族的服饰花色纷繁,过去人们曾根据他们的穿戴而称呼他们为青苗、白苗、红苗、花苗,以及长裙苗、短裙苗等等。他们的穿著往往因地而异，居住在湖南西部的苗族妇女,上身著大襟右袵衣,下身穿裤子,衣袖、衣领和裤腿都镶有宽阔的花边。 苗族服饰纹样概说苗族服饰纹样的基本特征之一。以苗族服饰中频繁出现的交鱼纹图案为例 ,通过图案纹样的流变 ,以及对该图案出现部位和组合关系的归纳演绎 ,揭示这一图案的原生象征意义在于凭借对鱼类交配情景的描绘 ,从而寄寓了生生不息、代代繁衍的礼赞。这是一种高度抽象化了的生殖崇拜。将这样的图案融会到苗族服饰纹样中 ,用意在于祈求个体的世代延续、家族的兴旺繁衍、民族的繁荣昌盛。这不是一般意义上的美学诠释所能揭示的苗族文化深层意念 而湘西苗族妇女服饰的主要精神特征是巫术,这种巫术的精神特征又和艺术及现实完美结合,对稳定苗族族群关系起着重要作用。苗族妇女服饰是中国乃至世界服饰史上的一朵奇葩。沈从文先生在其《中国古代服饰研究》中赞誉苗族妇女服饰为“中国服装史上的活标本”,其绚丽多彩、丰富多样为其他民族所罕见。湘西苗族是苗族的一个分支,俗称“红苗”。杜甫曾留下过“五溪衣服共云天”的赞美诗句。 苗族银饰、头饰 银饰在苗族服饰中占有重要地位,是苗族财富和地位的象征。在苗族妇女的节日盛装中,银饰占有特殊的位置。由于经济文化、生活习俗和审美情趣的不同,各地苗族银饰品的种类和佩戴情况互有差异。湘西地妇女,除戴耳环、手镯、项圈外,还有银签、银冠、银披肩,其中银签造型古朴,具有形制精美、声音清脆、色泽光亮、一签多用的特点。 假若盛装的苗族姑娘汇聚在一起，那一定会变成一个美丽的银色世界。喜戴银饰是苗族姑娘的天性，她们挽发髻于头顶，戴上高约20公分左右，

蛋白质印迹法westernblot

蛋白质印迹法 蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。 其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。 蛋白免疫印迹(Western Blot )是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术，现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。 中文名蛋白质印迹法外文名Western Blot 蛋白免疫印迹Western Blot 类似方法1 Southern Blot 杂交方法 类似方法2 Northern Blot 杂交方法 使用材料聚丙烯酰氨凝胶电泳⑴

原理 与Southern Blot 或Northern Blot 杂交方法类似，但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAG（聚丙烯酰胺凝胶电泳）分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。⑴ 分类 Western Blot 显色的方法主要有以下几种: i. 放射自显影 ii. 底物化学发光ECL iii. 底物荧光ECF iv. 底物DAB呈色

吉祥图案剪纸

人美版小学美术三年级下册第11课 吉祥图案--- 剪纸 课时：1课时课型：综合课授课对象：小学三年级学生 雁江区三贤九义校李丹 一、学情分析： 本课是“设计---应用”领域的一节课。吉祥图案是一种比较简单的，也是一种比较容易掌握的民间艺术形式。三年级学生对我国民族传统文化及吉祥图案的了解还不够，通过本课学习，让学生充分发挥想象力和创造力，自主动手制作吉祥图案，并掌握吉祥图案---剪纸的特点、形式、作用和运用。 二、导学目标： 1、知识与技能目标：欣赏不同类型的吉祥图案，了解有关吉祥图案的文化及其发展。知道部分典型的吉祥图案，了解它们的造型特点及所表达的含义。 2、过程与方法目标：通过对吉祥图案的欣赏，使学生初步了解有关吉祥图案的知识，能够自己动手制作吉祥图案。 3、情感态度与价值观目标：启发学生感受并表现生活中的美好事物，从而体验到生活的乐趣。通过生动有趣的教学活动，培养学生健康向上的情感与态度，以及形象表达能力和创造力。 三、导学重难点： 1、导学重点：通过了解有关吉祥图案的文化，加深对民族传统艺术的了解。尝试用剪纸的形式，制作吉祥图案，表达自己的美好祝愿。 2、导学难点：在制作过程中，注意图案的造型要生动、有趣，并能表达自己的美好愿望。 四、导学方法： 讲述法、欣赏法、自主动手法、提问法、分析法。 五、导学过程： （一）组织教学： 师生礼仪，稳定学生情绪，组织学生上课。检查学生用具准备情况。 （二）导入新课： 以一张剪纸图案导入，让同学们思考： 问题1、这张图上有什么看到它，谁能马上联想到一个什么成语（连年有余） 问题2、谁能解释一下这个成语的意思呢（学生自由回答）教师解释“连年有余”的意思，分析图案的内容及其寓意。

浅谈苗族服饰

浅谈苗族服饰 艺术概论之浅谈苗族服饰 浅谈苗族服饰 交通学院勘查技术与工程 1803090227 张帆 摘要: 苗族的服饰蕴含着丰富的民族文化内涵，具有极高的文化艺术价值。它的美学价值表现在服饰的造型美和文化内涵上，体现了一个古老民族厚重的历史文化积淀。本文通过对苗族服饰的造型、色彩以及图案三方面的基本特征进行论述。 一、苗族服饰概述 史料记载，苗族是蚩尤部落的后代。苗族的历史也流传悠久，苗族有自己的语言，有自己的文明，但是，苗族没有文字。那苗族的文明怎样传承下来，他们的文明怎样传承给下一代呢, (1) 苗族服饰的特点从其支系上看有所不同，分白苗和花苗。关于苗族支系的服饰特点，有这样一个民间传说:很早以前，苗族被一个使用刀枪的民族打败而逃散，记录苗族文字的典籍也在战争中大部分遗失，他们为了保存一些尚存的文字，就把这些文字和他们原先的居住地、房屋、田地等都用蜡画在妇女的裙子上，这种苗族就成了花

苗;而没有在裙子上记录 文字和地图，仍然穿着传 统白裙的就叫白苗;还有 一部份苗族，他们为了防 止用刀枪的人把他们赶 尽杀绝，就把穿裙子改为 穿裤子，这些人就成了汉 苗。这些传说体现了苗民 是一个把自己民族历史、文化和艺术穿在身上的民族。花苗的服饰是最能体现其传统文化艺术特点和制作工艺的，她们的所有服装包括衣、裙、包头、腰带、绑腿及背包、背兜等，都绣满了各式各样的图案。图案的用色以红、黄、白三色为主调。主色调在整个图案中所占比例很大。在图案构成上，较多地使用菱形、方 1 南京工业大学 艺术概论之浅谈苗族服饰 块等几何图案和花边图案的单独纹样，二方连续纹样和放射状线条也较常用，每件绣品都由多种不同形状的图案组合而成。图案参差交错，粗看繁杂紊乱，其实它们的组合很有规律。 苗族服装大多为麻织，风吹日晒会逐渐变黄变脆，既不美观，也不耐用。所以苗族服饰除了刺绣外都使用蜡染，这样不但能使麻料保持原有的色彩，而且蜡液对麻面具有保护作用，能延长其使用年限，更为重要的是使裙子得到了美化。 苗族服饰色彩鲜艳明亮，图案千变万化，绣工简洁粗犷，生动秀丽，富于装饰性。苗族在服饰方面保留着自己浓厚的民族特点，以蓝黑色的棉布料为主。女子服装非常讲究和精细，其上衣多为蓝黑棉布，衣服较大而长，尺寸因人而不同。苗族服饰在造型、色彩、图案方面有其相对固定的规则，用色繁杂，色彩组合方式千变

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Western免疫印迹（Western Blot） 是将蛋白质转移到膜上，然后利用 抗体进行检测的方法。对已知表达 蛋白，可用相应抗体作为一抗进行 检测，对新基因的表达产物，可通 过融合部分的抗体检测。 与Southern或Northern杂交方法 类似，但Western Blot采用的是聚 丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋 白质，“探针”是抗体，“显色”用标记 的二抗。 经过PAGE分离的蛋白质样品，转 移到固相载体（例如硝酸纤维素薄 膜）上，固相载体以非共价键形式 吸附蛋白质，且能保持电泳分离的 多肽类型及其生物学活性不变。以 固相载体上的蛋白质或多肽作为抗 原，与对应的抗体起免疫反应，再 与酶或同位素标记的第二抗体起反 应，经过底物显色或放射自显影以 检测电泳分离的特异性目的基因表 达的蛋白成分。该技术也广泛应用 于检测蛋白水平的表达。 实验材料蛋白质样品 试剂、试剂盒丙烯酰胺SDS Tris-HCl β-巯基乙醇 ddH2O 甘氨酸Tris 甲醇PBS NaCl KCl Na2HPO4 KH2PO4 ddH2O 考马斯亮兰乙酸脱脂奶粉硫酸镍胺H2O2 DAB试剂盒 仪器、耗材电泳仪电泳槽离心机离心管硝酸纤维素膜匀浆器剪刀移液枪刮棒 实验步骤一、试剂准备 1. SDS-PAGE试剂：见聚丙烯酰胺凝胶电泳实验。 2. 匀浆缓冲液：1.0 M Tris-HCl(pH 6.8) 1.0 ml；10%SDS 6.0 ml；β-巯基乙醇0.2 ml；ddH2O 2.8 ml。 3. 转膜缓冲液：甘氨酸2.9 g；Tris 5.8 g；

SDS 0.37 g；甲醇200 ml；加ddH2O定容至1000 ml。 4. 0.01 M PBS(pH7.4)：NaCl 8.0 g；KCl 0.2 g；Na2HPO4 1.44 g；KH2PO4 0.24 g；加ddH2O至1000 ml。 5. 膜染色液：考马斯亮兰0.2 g；甲醇80 ml；乙酸2 ml；ddH2O118 ml。包被液（5%脱脂奶粉，现配）：脱脂奶粉1.0 g 溶于20 ml的0.01 M PBS中。 6. 显色液：DAB 6.0 mg；0.01 M PBS 10.0 ml；硫酸镍胺0.1 ml；H2021.0 μl。 二、蛋白样品制备 1. 单层贴壁细胞总蛋白的提取 （1）倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。 （2）每瓶细胞加3 ml 4℃预冷的PBS （0.01M pH7.2～7.3）。平放轻轻摇动1 min 洗涤细胞，然后弃去洗液。重复以上操作两次，共洗细胞三次以洗去培养液。将PBS弃净后把培养瓶置于冰上。 （3）按1ml裂解液加10 μl PMSF（100 mM），摇匀置于冰上。（PMSF要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合。） （4）每瓶细胞加400 μl含PMSF的裂解液，于冰上裂解30 min，为使细胞充分裂解培养瓶要经常来回摇动。 （5）裂解完后，用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧（动作要快），然后用枪将细胞碎片和裂解液移至1.5 ml离心管中。（整个操作尽量在冰上进行。） （6）于4℃下12000 rpm离心5 min。（提

Westernblot实验步骤及注意事项

Westernblot实验步骤及注意事项 Westernblot 实验步骤 1. 组织块称重 2. 利用液氮、研钵粉碎组织块 3. 加入RIPA缓冲液（每克组织3 ml RIPA），PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PMSF），利用Polytron进一步匀浆（15,000转/分*1分钟）维持4℃ 4. 加入PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PMSF），冰上孵育30分钟 5. 移入离心管4℃约20,000 g（约15,000转）15分钟 6. 上清液为细胞裂解液可分装-20℃保存 7. 进行Bradford比色法测定蛋白质浓度 8. 取相同质量的细胞裂解液（体积*蛋白质浓度），并加等体积的2×电泳加样缓冲液 9. 沸水浴中3分钟 10. 上样 11. 电泳（浓缩胶20mA，分离胶35mA） 12. 电转膜仪转膜（100mA 40分钟） 13. 膜用丽春红染色，胶用考马斯亮蓝染色 14. Westernblot 试剂盒显色 15. 分析比较记录 western blot的实验步骤及注意事项的资料 1. 把聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质电泳转移到硝酸纤维膜上。 1）转移缓冲液洗涤凝胶和硝酸纤维素膜，将硝酸纤维素膜铺在凝胶上，用5ml移液管在凝胶上来回滚动去除所有的气泡。 2）在凝胶/滤膜外再包一张3mm滤纸（预先用转移缓冲液浸湿），将凝胶夹在中间，保持湿润和没有气泡。薄膜滤纸按照厂家建议方法放入电泳装置中，凝胶面向阴极。/凝胶/）将此滤纸3．

4）将上述装置放入缓冲液槽中，并灌满转移缓冲液以淹没凝胶。 5）按照厂家所示接通电源开始电泳转移。 6）转移结束后，取出薄膜和凝胶，弃去凝胶。 2. 将薄膜漂在氨基黑中快速染色，直至分子量标准显现时取出，记录下标准位置。 3. 用100ml水洗涤纤维素膜，必要时可用脱色缓冲液。 4. 膜置印迹缓冲液中于37℃保温1小时。 5. 室温下，用PBS-Tween缓冲液洗涤薄膜。 6. 用封口机将薄膜封入塑料袋中，尽可能不留空气。 7．袋的一角剪一缓冲液的小口，用透析袋夹紧。 8．混合：NGS(100微升)，印迹缓冲液中的抗体（10毫升），加在装薄膜的袋中，于室温下摇动2小时（或4℃过夜） 9．用总体积300ml PBS-Tween缓冲液，分4次在一浅盘中洗涤薄膜，每次75ml。 10．将连接生物素的羊抗兔IgG（40微升溶于10毫升印迹缓冲液/100微升NGS）加在袋内，于室温下摇动1小时。 11．按步骤9洗涤。 12．加入抗生素蛋白-HRP（40微升溶于10毫升印迹缓冲液/100微升NGS），于室温下摇动。 注意事项： western blot中转移在膜上的蛋白处于变性状态，空间结构改变，因此那些识别空间表位的抗体不能用于western blot检测。这种情况可以将表达目的蛋白的细胞或细胞裂解液中的所有蛋白先生物素化，再用酶标记亲和素进行western blot。实验中取胶和膜需带手套。 Western实验步骤 Western，也称Western blot、Western blotting、Western印迹，是用抗体检测蛋白的重要方法之一。Western 可以参 考如下步骤进行操作。 1. 收集蛋白样品(Protein sample preparation) O 可以使用适当的裂解液，例如碧云天生产的Western及IP细胞裂解液，裂解贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品。对于某些特定的亚 细胞组份蛋白，例如细胞核蛋白、细胞浆蛋白、线粒体蛋白等，可以参考相关文献提取这些亚细胞组份蛋白，也可以使用试剂盒 进行抽提，例如碧云天生产的细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒。 O 收集完蛋白样品后，为确保每个蛋白样品的上样量一致，需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同，需要 采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大。如果使用碧云天生

古代过年流行的十大吉祥图案有何寓意

古代过年流行的十大吉祥图案有何寓意 ·中国古代最常见的吉祥图案：“龙凤呈祥”。 在中国传统艺术宝库中有一支独特的历史奇葩，人们称它为“吉祥图案”。它那丰富多彩的内涵、真善美的理念，正是我们民族文化的象征。 吉祥图案是指以含蓄、谐音等曲折的手法，组成具有一定吉祥寓意的装饰纹样。它的起始可上溯到商周，吉祥图案起始于商周，发展于唐宋，鼎盛于明清。明清时，几乎到了图必有意，意必吉祥的地步。它们所要表达的只有四个含意：“富、贵、寿、喜”：贵是权力、功名的象征；富是财产富有的表示，包括丰收；寿可保平安，有延年之意；喜，则与婚姻、友情、多子多孙等均有关。吉祥图案作为中国传统文化的重要部分，已成为认知民族精神和民族旨趣的标志之一。明清丝绸吉祥纹样的题材十分广泛，。花草树石、蜂鸟虫鱼、飞禽走兽、无不入画。貌似平凡，其中不乏真趣与深情。一般有三种构成方法：一是以纹样形象表示，二是以谐音表示，三是以文字来说明。 在中国古代，流传着许多含有吉祥意义的图案。每到年节或喜庆的日子，人们都喜欢用这些吉祥图案装饰自己的房间和物品，以表示对幸福生活的向往，对良辰佳节的庆贺。 中国的吉祥图案虽然始于距今3000多年前的周代，但是，今天吉祥图案仍然是人们生活中，尤其是过年时候不可缺少的内容。古代过年时的吉祥图案内容极其广泛，最为人们喜闻乐见的有以下十种图

案： 一、狮子滚绣球： 解析：狮，哺，纲猫科动物。雄狮壮硕雄健，颈有鬣。我国古代 加工，提炼并加以图案化的结果， 较真狮英武而活泼。绣球是用丝织 品仿绣球花制作的圆球。古代视绣 球的为吉祥喜庆之品。据《汉书·礼 乐志》，汉代民间流行“狮舞”，两 人合扮一狮，一人持彩球逗之，上 下翻腾跳跃，活泼有趣。“狮子滚绣 球”图案，来源于此。舞狮子为民俗喜庆活动，且寓意祛灾祈福。由绣球组成的图案又叫“绣球锦”、“绣球纹”等。 二、象驮宝瓶： 解析：太平，谓时世安宁和平。《汉书-王莽传上》：“天下太平，Array五谷成熟。”唐朝诗人温庭筠《长安春晚》 有“四方无事太平年”一句，指的就是连 年丰收。《汉书·食货志上》：“进业曰登， 再登曰平……三登曰太平。”象，哺. 动 物。体高约三米，鼻长筒形，能蜷曲。门 齿发达。象寿命极长，可达二百余年，被 人看作瑞兽。象也喻好景象。宝瓶，传说

中国传统纹样赏析

中国传统纹样赏析 姓名：于泽江 班级：工美2班

关于先秦时期青铜器纹样赏析 在众多的中国传统纹样中，最打动我的时关于先秦时期青铜器上的纹样，或许是因为刚当兵回来，依然保持着部队的一种审美，粗旷质朴，整齐简单，大方有力，先秦时期的青铜器纹样就给我一种与众不同的视觉体验，一种十分纯粹的变现欲望，带着这种感觉，认真的浏览了一番此类书籍，得出以下认知。 在商周时期，以及之后的春秋战国时期，青铜器文化一直时贯穿人生活的重要组成部分，在夏商周时期，我给政治仍是奴隶制国家，政权是王权神权相结合的方式，人们对于自然的力量十分敬畏，于是，这种想法在生活中也体现的十分的明显，其中，纹样也是人表达感情的一个释放点，在商周时期，人们对于自然的一切都是无奈与畏惧，他们就会希望自己也能拥有一些神秘力量，能够对抗自然，那时期的青铜器也多用来宗教崇拜使用，纹样多事狞厉怪异的样子，但这样不是出于奇异的审美观念，而是出于对自然力量崇敬和支配它的欲望表达，这种纹样是和生活离不开的，所用的纹样也都是同自然界有关的，工匠们会夸张或分割图案来拼凑成力量，所以，青铜器上多是恐惧，瞪眼，咧嘴，带有一丝杀气，让人看到有种严肃紧张，可拍的感觉，给人以震撼力量，同时也体现了统治者的威严（这同当时使用价值有关，青铜器多是贵族和仪式使用），其中突出表现就是饕餮纹。 随着生产力的发展，人运用工具，智慧来与自然对抗，渐渐融合自然，此时的纹样又发生了变化，当然，这个变化时循序渐进的。其

中就表现为动物纹样趋于程序化，前期为主要的饕餮纹等逐步减少，所传递的力量也在逐步减少，看上去也不在怪异狰狞，逐渐悲动物纹，几何图案或人物纹所代替。 到了春秋战国时期，青铜器逐步走入平民百姓生活，青铜器也多向生活用品发展，所以纹样也在发生着变化，多变于细腻繁荣灵巧，列如蟠螭纹，多是蛇纹互相穿插，连续展开的形式，经济基础决定上层建筑，生产力的发展，使人们对关注自然专项关注自己，在青铜器上出现了绘画方式表现生活场景，当然，影响变化的因素也有很多种。列如工具的使用变化，工匠自身或使用者的兴趣爱好等等。 中国青铜器的体现主要夏商周三个朝代，随后就进入了铁器使用，青铜器就淡出了人们的视野，青铜器在此时期的变化也在于从祭祀礼器转变成使用器具，纹样由庄重狰狞变成富有美感的韵律纹样，这种变化就在于社会改革，而背后根基与当时的文化思想。 在夏商周，春秋战国时期，人都是干脆，在表达方式上都是比较直率，甚至连两军交战都是约好地点，正面交战，是什么就是什么，而今，我们的心理，交流方式都发生着天翻地覆的变化，却有很少人再去关注曾经粗旷野蛮的一些古代文化，有时候，是否是我们的社会少了一股刚性，尚武情怀。

最详细的WesternBlot过程步骤详解

最详细的W e s t e r n B l o t 过程步骤详解

最详细的W e s t e r n B l o t 过程步骤详解 Pleasure Group Office【T985AB-B866SYT-B182C-BS682T-STT18】

Western Blot详解(原理、分类、试剂、步骤及问题解答) Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。 本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术: 一、原理 二、分类 i.放射自显影 ii.底物化学发光ECL ECF iv.底物DAB呈色 三、主要试剂 四、主要步骤 五、实验常见的问题指南 1.参考书推荐 2.针对样品的常见问题 3.抗体 4.滤纸、胶和膜的问题 的相关疑问 6.染色的选择 7.参照的疑问

8.缓冲液配方的常见问题 9.条件的摸索 10.方法的介绍 11.结果分析 一、原理 与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。 二、分类 现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，目前发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理如下（二抗用HRP标记）：反应底物为过氧化物+鲁米诺，如遇到HRP，即发光，可使胶片曝光，就可洗出条带。

中国吉祥图案分析

中国吉祥图案-八仙仰寿 图案：八仙、寿星、仙鹤。 解题：寿星，星名。亦神仙名，又称南极仙翁。在《史记·封禅书》、《西游记》、《白蛇传》中均有描写。传统形象：长头大耳，短身躯，白髯，慈眉善目，手捧仙桃，拄仙杖，或骑仙鹤，乘空飞翔。明清时的年画，有画寿星坐厅堂中或骑仙鹤立于云端，八仙作祝寿状，叫「八仙庆寿」或「八仙仰寿」。有的添画一白猿献桃。民间鼓词《白猿偷桃》曲，叙述白猿之母患病，需仙桃，白猿求诸看守仙桃园的孙真人（膑），孙真人怜其孝，赐一桃予之。母病愈，令白猿将天书一册赠孙真人，是即孙子兵法也。

八仙寿字南瓜罐 盖上16个寿字，罐肩24个寿字，八瓣型罐身是八仙，罐底有“大清乾隆年制”红章。 “八仙”习俗 “八仙”的形象本来是统治阶级的“仙话”人物。流传“过海”这段故事时“仙话”就变成了民间百姓中的“神话”，“八仙”开始有了生命力，成为百姓喜爱的一组神仙形象。我国民间百姓对八仙是很熟悉的，在民间许多地方许多村庄，在那里的图画、戏剧、小说和

工艺品上都可以看到他们的身影。随着故事的广泛流传，民间与八仙有关的许多习俗广泛为大众熟知。 八仙仰寿图 其一，旧时舟山群岛在渔民中有一个禁忌：凡驶船出海上不能坐七男一女。老渔民讲，这禁忌不知传承了多少年。据说坐七男一女，就会在大海里出事。它是与八仙过活的故事有关的。相传有一次八仙过海欲云蓬莱仙岛，铁拐李把自己手杖变成一艘大龙船。八人坐在船上观赏海上美景，一时高兴奏起仙乐：韩湘子吹箫，曹国舅打响板，张果老擂起渔鼓，何仙姑和蓝采和唱曲，再加吕纯阳(洞宾)舞剑，汉钟离摇扇，助兴作乐，热闹非凡。结果声震东海龙宫，惊动了龙王第七个儿子“花龙太子”。他因见何仙姑妙龄女郎，色世皆绝，就兴风作浪，把她抢入龙宫。七位大仙见少了何仙姑，就各自祭起法宝，一

研究性学习结题报告总汇——浅谈黔南苗族服饰

研究性学习项目结题报告 浅谈黔南苗族服饰 夏兴志陈洋沈朝安周帮琴高德群杨连勇（贵州省贵定一中2014届高一(10) 班） 指导老师:田婷 活动时间：2011.10——2011.12 研究的意义：黔南布依族苗族自治州有苗族34万余人,分别聚居杂居在12个县(市)的部分村寨里。其服饰的风格式样、图案色彩、装饰手法、装饰部位等等,千姿百态,五彩缤纷。除支系不同有不同样式外,同一支系同一种苗族服饰中,还有青年式和老年式的区别;青年妇女服饰中又有婚前婚后之分,生育前和生育后之分,盛装和便装之分。这些丰富多彩的苗族服饰,是苗族人民物质和精神文化特质的重要外表。在没有文字记载的情况下,服饰纹样也可以说就是文字,通过它,可以寻找出民族迁徙、民族性格及其审美意识的形成等等痕迹。通观贵州各地苗族服饰,皆以不同的地域形成不同的文化圈,因而有不同的美学特征。黔东南苗族服饰以艳丽的点组合成五彩斑斓的美学特征;黔西北苗族服饰以明显的几何块面组合成粗犷朴实的美学特征;黔西南苗族服饰以秀丽的线组合成含蓄内在的美学特征;而黔则以动态的挑花图案组合清新自然的美学特征;但黔南最具代表性的要属平塘等地的苗族服饰. 平塘县的苗族分为黑花苗和红花苗二种系列。最具代表性的有新塘、公峨的喜雀苗，大塘上莫、掌布的摆榜苗，鼠场、油岜、甲桐、金桥的红花苗，卡罗、牙舟、谷硐的榜木苗等。 1、新塘地区的喜雀苗，女子掺假发盘于头顶，呈圆盘形，围银泡花头帕，插银吊花和红缨流苏、野鸡花羽毛。上穿大襟对开大袖短衣，衣领背后叠缀3-4层背褡，衣襟、袖口饰有挑花或蓝白布片。下着滚白布边的青布百褶裙，系挑花

腰带，垂吊红、绿绣球。戴3-7个银项圈、银耳环，背挂串串海贝，海贝串下端加挂银饰品和铜钱板。脚缠蜡染白布或羊毡绑腿，束红花带，耳吊银耳环，手戴银或玉石手镯，脚穿草鞋或布鞋，服饰分生活装和盛装。男子头包蜡染圆点纹头帕，上穿长衫，系条纹腰带，下穿裤，脚穿布鞋。 2、鼠场、油岜的苗族女子掺假发绾髻，呈蘑菇形，用黄须彩带捆扎，垂流苏于腰后，插银饰。上穿贯首服，前摆至腹，后摆达臀。前后摆缀十字纹和方块纹，衣袖缀织锦花纹。下着彩色百褶裙，裙上有彩色人物或鸟纹图案，裙脚接红布片，系红白挑花飘带。缠白布绑腿，脚穿布鞋。男子穿青布长衫，系腰带，包头帕。 3、卡罗、牙舟、谷硐榜木苗少女头顶部留长发，四周剪短发，头后打髻插红梳，妇女绾髻于头后，呈钩状，插骨钗，额头围海贝花。上穿贯首长袖衣，前摆短至腹，后摆长至臀。前后摆，衣袖缀挑花图案，后摆连彩穗。下着青布百褶裙，系青布腰带。缠白布绑腿，脚穿布鞋。戴顶圈，银链和大耳环等银饰。 4、大塘里中摆榜苗的少女四周留短发，顶发打髻于头后，垂长发，髻上插银饰和红线花。妇女绾发髻于头后，插木梳。上穿对襟青布短衣，衣襟缀花纹，披长方形背牌，牌上装饰圆形银花和海贝。下着青布百褶裙，裙脚缀白布滚边。系蓝布腰带，拴银铃，银花飘带，戴5-7个银项圈。缠青布绑腿，穿布鞋或草鞋。 参考文献:<<黔南州志>><<贵州民族研究>><<黔南官网苗族>>