无菌检测法

Ⅱ-Ⅺ H无菌检查法

无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件

下未发现微生物污染。

无菌检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行，其全过程中必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试

方法》的现行国家标准进行洁净度验证。隔离系统按相关的要求进行验证，其内部环

境的洁净度须符合无菌检查的要求。

培养基

培养基的制备

培养基可按以下处方制备，也可使用按该处方生产的符合规定的脱水培养基。配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。制备好的培养基应保存在2～25℃、避光的环境。培养基若保存于非密闭容器中，一般在三周内使用；若保存于密闭容器中，一般可在

一年内使用。

1、硫乙醇酸盐流体培养基（用于培养好氧菌、厌气菌）

酪胨（胰酶水解）15g；氯化钠 2.5g；葡萄糖5g；新配制的0.1%刃天青溶液 1.0m l；L-胱氨酸0.5g（或新配制的0.2%亚甲蓝溶液0.5m l）；硫乙醇酸钠0.5g；琼脂0.75g （或硫乙醇酸0.3m l）；水1000m l；酵母浸出粉5g

除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解后，调节p H为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节p H值使灭菌后为7.1±0.2，分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）

不超过培养基深度的1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则，须经100℃水浴加热至粉红色消失（不超过20分钟）迅速冷却，只限加热一次，并应防止被污染。

硫乙醇酸盐流体培养基置30～35℃培养。

2、改良马丁培养基（用于培养真菌）

胨5g；磷酸氢二钾1g；酵母浸出粉2g；硫酸镁0.5g；葡萄糖20g；水1000m l

除葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调节p H值约为 6.8，煮沸，加入葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调节p H值使灭菌后为 6.4±0.2，分装，灭菌。

改良马丁培养基置23～28℃培养。

3、选择性培养基

按上述硫乙醇酸盐流体培养基或改良马丁培养基的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适量的中和剂或表面活性剂，如对氨基苯甲酸（用于磺胺类供试品）、聚山

梨酯80（用于非水溶性供试品）或β-内酰胺酶（用于β-内酰胺类供试品）等。中和剂或表面活性剂的用量应通过验证。

4、营养肉汤培养基

胨10g；牛肉浸出粉 3.0g；氯化钠5g；葡萄糖 5.0g；水1000m l

取上述成分混合，微温溶解，调节p H为弱碱性，煮沸，滤清，调节p H值使灭菌后为7.2±0.2，分装，灭菌。

5、营养琼脂培养基

按上述营养肉汤培养基的处方及制法，加入14.0g琼脂，调节p H值使灭菌后为7. 2±0.2，分装，灭菌。

6、0.5%葡萄糖肉汤培养基（用于硫酸链霉素等抗生素的无菌检查）

胨10g；葡萄糖5g；氯化钠5g；牛肉浸出粉 3.0g；水1000m l

除葡萄糖外取上述成分混合，微温溶解后，调节p H为弱碱性，煮沸，加葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调节p H值使灭菌后为7.2±0.2，分装，灭菌。

7、改良马丁琼脂培养基

按改良马丁培养基的处方及制法，加入14.0g琼脂，调节P H值使灭菌后为 6.4±0. 2，分装，灭菌。

培养基的适用性检查

无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基等应符合培养基的无菌性

检查及灵敏度检查的要求。本检查可在供试品的无菌检查前或与供试品的无菌检查同时进行。

无菌性检查每批培养基随机不少于5支（瓶），培养14天，应无菌生长。

灵敏度检查。

培养基灵敏度检查法

1.菌种：培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物

学特性。

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus） [CMCC（B） 26 003]

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa） [CMCC（B） 10 104]

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis ） [CMCC（B） 63 501]

生孢梭菌（Clostridium sporogenes） [CMCC（B） 64 941]

白色念珠菌（Candida albicans） [CMCC（F） 98 001]

黑曲霉（Aspergillus niger ） [CMCC（F） 98 003]

菌液制备：接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤获营养琼脂培养基中，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30～35℃培养18～24小时；接种白色念株菌的新鲜培养物至改良马丁培养基或改良马丁培养基中，23～28℃培养24～48小时，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1 m l含菌数小于100c f u（菌落形成单位）的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，23～28℃培养5～7天，加入3～5m l0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，吸出孢子悬液（用管口带有薄的无菌棉花或纱布能过滤菌丝的无菌毛

细吸管）至无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1m l含孢子数小于100c f u的孢子悬液。

培养基接种：取每管装量为12m l的硫乙醇酸盐流体培养基9支，分别接种小于10 0c f u的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2支，另1支不接种作为空白对照，培养3天；取每管装量为9m l的改良马丁培养基5支，分别接种

小于100c f u的白色念株菌、黑曲霉各2支，另1支不接种作为空白对照，培养5天。逐日观察结果。

结果判断：空白对照管应无菌生长，若加菌的培养基管菌生长良好，判该培养基的灵敏度检查符合规定。

稀释液、冲洗液及其制备方法

稀释液、冲洗液配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。

1.0.1%蛋白胨水溶液：取蛋白胨 1.0g，加水1000m l，微温溶解，滤清，调节P H值至7.1±0.2，分装，灭菌。

2.P H7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾

3.56g、磷酸氢二钠7.23g、氯化钠

4.30g、蛋白胨 1.0g，加水1000m l，微温溶解，滤清，分装，灭菌。

如需要，可在上述稀释液或冲洗液的灭菌前或灭菌后加入表面活性剂或中和剂等。

方法验证或试验

当建立药品的无菌检查法时，应进行方法的验证，以证明所采用的方法适合于该药品的无菌检查。若药品的组分或原检验条件发生改变时，检查方法应重新验证。

验证时，按“供试品的无菌检查”的规定及下列要求进行操作。对每一对试验菌应逐一进行验证。

菌种及菌液制备：同培养基灵敏度检查。

薄膜过滤法：将规定量的供试品薄膜过滤法过滤，冲洗，在最后一次的冲洗液中加入小于100c f u的试验菌，过滤。取出滤膜接种至硫乙醇酸盐流体培养基或改良马丁培养基中，或将培养基加至滤筒内。另取一装有同体积培养基的容器，加入等量试验菌，作为对照。按规定温度培养3～5天。各试验菌同法操作。

直接接种法：取符合直接接种法培养基用量要求的硫乙醇酸盐流体培养基8管，分别接入小于100c f u的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2管；取符合直接接种法培养基用量要求的改良马丁培养基4管，分别接入小于100c f u 的白色念株菌、黑曲霉各2管。其中1管接入规定量的供试品，另1管作为对照品，

按规定的温度培养3～5天。

结果判断：与对照管比较，如含供试品各容器中的试验菌均生长良好，则供试品的该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计，照此检查法和检查条件进行供

试品的无菌检查。如含供试品的任一容器中微生物生长微弱、缓慢或不生长，则供试

品的该检验量在该检验条件下有抑菌作用，可采用增加冲洗量，或增加培养基的用量，或使用中和剂或灭活剂如β-内酰胺酶、对氨基苯甲酸，或更换滤膜品种等方法，消除供试品的抑菌作用，并重新进行方法验证。

方法验证试验夜可与供试品的无菌检查同时进行。

供试品的无菌检查

检验数量：检验数量是指一次试验所用供试品最小包装容器的数量。除另有规定外，出厂产品按表1规定；上市产品监督检查按表2、表3规定。表1、表2、表3中最少检验数量不包括阳性对照试验的供试品用量。一般情况下，供试品无菌检查若采用薄

膜过滤法，应增加1/2的最小检验数量作阳性对照用；若采用直接接种法，应增加供

试品1支（或瓶）作阳性对照用。

检验量：使指一次试验所用的供试品总量（g或m l）。除另有规定外，每份培养基接种供试品的量按表2、表3规定。采用直接接种法时，若每支（瓶）供试品的装量按规定足够接种两份培养基，则应分别接种硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基。

采用薄膜过滤法时，检验量应不少于直接接种法的供试品总接种量，只要供试品特性

允许，应将所有容器内的全部内容物过滤。

阳性对照：应根据供试品特性选择阳性对照菌：无抑菌作用及抗革兰阴性菌为主的供试品以大肠埃希菌为对照菌；抗厌氧菌的供试品，以生孢梭菌为对照菌；抗真菌的

供试品，以白色念株菌为对照菌。阳性对照试验的菌液制备同培养基灵敏度检查（大

肠埃希菌的菌液制备同培养基的灵敏度检查中的金黄色葡萄球菌），加菌量小于100c f u，供试品用量同供试品无菌检查每份培养基接种的样品量。阳性对照管培养48～72小时应生长良好。

阴性对照：供试品无菌检查时，应取相应溶剂和稀释液同法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。

无菌试验过程中，若需使用表面活性剂、灭活剂、中和剂等试剂，应证明其有效性，且对微生物生长及存活无影响。

无菌检查法包括薄膜过滤法和直接接种法。只要供试品性状允许，应采用薄膜过滤法。进行供试品无菌检查时，所采用的检查方法和检验条件应与验证的方法相同。

操作时，用适宜的消毒液对供试品容器表面进行彻底消毒。如果容器内有一定的真空度，可用适宜的无菌器材（如带有除菌过滤器的针头），向供试品容器内导入无菌

空气，再按无菌操作开启容器取出内容物。

供试品处理及接种培养基

除另有规定外，按下列方法进行。

1.薄膜过滤法

薄膜过滤法应优先采用封闭式薄膜过滤器，也可使用一般薄膜过滤器。无菌检查用的滤膜孔径应不大于0.45u m，直径约为50m m。根据供试品及其溶剂的特性选择滤膜材质。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完

整性。

水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤膜。油类供试品，其滤膜和过滤器在使用前应充分干燥。为发挥滤膜的最大过滤效率，应注意保持供试品溶液及冲

洗液覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后，若需要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜

每次冲洗量为100m l，且总冲洗量不宜过大，以避免滤膜上的微生物受损伤。

水溶液供试品：取规定量，直接过滤，或混合至含适量稀释液的无菌容器内，混匀，立即过滤。如供试品具有抑菌作用或含防腐剂，须用适量的冲洗液冲洗滤膜，冲洗次

数不得少于三次。冲洗后，如用封闭式薄膜过滤器，分别将100m l硫乙醇酸盐流体培

养基及改良马丁培养基加入相应的滤筒内。如采用一般薄膜过滤器，取出滤膜，将其

剪成3等份，分别置于含50m l硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基的容器中，其中一份做阳性对照用。

可溶于水的固体制剂供试品：取规定量，加适宜的稀释液溶解或按标签说明复溶，然后照水溶液供试品项下的方法操作。

β-内酰胺类抗生素供试品：取规定量，按水溶液或固体制剂供试品的处理法处理，立即过滤，用适宜的冲洗液冲洗滤膜。再用含适量的β-内酰胺酶的冲洗液清除残留在滤筒、滤膜上的抗生素后接种培养基，必要时培养基中可加少量的β-内酰胺酶；或将滤膜直接接种至含适量β-内酰胺酶的培养基中。接种培养基的方法照水溶液供试品项下的方法操作。

非水溶性制剂供试品：取规定量，直接过滤；或混合溶于含聚山梨酯80或其他适宜乳化剂的稀释液中，充分混合，立即过滤。用含0.1%～1%聚山梨酯80的冲洗液冲洗滤膜至少三次。滤膜于含或不含聚山梨酯80的培养基中培养。培养基接种照水溶液供试品项下的方法操作。

可溶于十四烷酸异丙酯的膏剂和黏性油剂供试品取规定量，混合至适量的无菌十四烷酸异丙酯中，剧烈振摇，使供试品充分溶解，如果需要可适当加热，但温度不得超

过44℃，趁热迅速过滤。若无法过滤，应加入不少于1000m l的稀释液，充分振摇萃取，静置，取下层水相作为供试液过滤。过滤后滤膜冲洗及培养基接种照非水溶性制剂供

试品项下的方法操作。

无菌气（喷）雾剂供试品：取规定量，将各容器置冰室冷冻约1小时。以无菌操作迅速在容器上端钻一小孔，释放抛射剂后再无菌开启容器，然后照水溶液或非水溶性

制剂供试品项下的方法操作。

装有药物的注射器供试品：取规定量，装上无菌针头（非包装中所佩带的），若需要可吸入稀释液或用标签所示的溶剂溶解，然后照水溶液或非水溶性制剂供试品项下

的方法操作。同时应采用直接接种法进行包装中所配带的无菌针头的无菌检查。

具有导管的医疗器具（输血、输液袋等）供试品：取规定量，每个最小包装用50～100m l冲洗液分别冲洗内壁，收集冲洗液于无菌容器中，然后照水溶液供试品项下的方法操作。同时应采用直接接种法进行包装中所配带的针头的无菌检查。

2.直接接种法

直接接种法即每支（或瓶）供试品按规定量分别接种至各含硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基的容器中。除另有规定外，每个容器中的培养基的用量应符合接种

的供试品体积不得大于培养基体积的10%，同时，硫乙醇酸盐流体培养基每管装量不少于15m l，改良马丁培养基每管装量不少于10m l。培养基的用量和高度同方法验证试验；每种培养基接种的管数同供试品的检验数量。

混悬液等非澄清水溶液供试品：取规定量接种至各管培养基中。

固体制剂供试品：取规定量直接接种至各管培养基中，或加入适宜的稀释液溶解，或按标签说明复溶后，取规定量接种至各管培养基中。

β-内酰胺类或磺胺类供试品：取规定量，混合，加入适量的无菌β-内酰胺酶溶液或对氨基苯甲酸溶液使中和，接种至各管培养基中。或直接接入含β-内酰胺酶或对氨基苯甲酸的各管培养基中。

非水溶性制剂供试品：取规定量，混合，加入适量的聚山梨酯80或其他适宜的乳化剂及稀释剂使其乳化，接种至各管培养基中。或直接接种至含聚山梨酯80或其他适宜乳化剂的各管培养基中。

敷料供试品：取规定数量，每个包装以无菌操作拆开，于不同部位剪取约100m g或1c m*3c m的供试品，接种于各管足以浸没供试品的适量培养基中。

肠线、缝合线等供试品：肠线、缝合线及其他一次性使用的医用材料按规定量取最小包装，无菌拆开包装，接种于各管足以浸没供试品的适量培养基中。

灭菌医用器具供试品：取规定量，必要时应将其拆散或切成小碎段，接种于各管足以浸没供试品的适量培养基中。

放射性药品：取供试品1瓶（支），接种于装量为7.5m l的硫乙醇酸盐流体培养基和改良培养基中。每管接种量为0.2m l。

培养及观察

上述含培养基的容器按规定的温度培养14天。培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。如在加入供试品后、或在培养过程中，培养基出现浑浊，培养14天后，不能从外观上判断有无微生物生长，可取该培养基液适量转种至同种新鲜培养基中或划线

接种于斜面培养基上，细菌培养2天、真菌培养3天，观察接种的同种新鲜培养基是

否再出现浑浊或斜面是否有菌生长；或取培养液涂片，染色，镜检，判断是否有菌。

结果判断

若供试品均澄清，或虽显浑浊但经确证无菌生长，判供试品符合规定；若供试品管中任何一管显浑浊并确证有菌生长，判供试品不符合规定，除非能充分证明试验结果

无效，即生长的微生物非供试品所含。当符合下列至少一个条件时，方可判试验结果

无效：

（1）无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求；

（2）回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素。

（3）阴性对照管有菌生长；

（4）供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所使用的物品和（或）无菌操作技术不当引起的。

试验若经确认无效，应重试。重试时，重新取同量供试品，依法重试，若无菌生长，判供试品符合规定；若有菌生长，判供试品不符合规定。

表1 批出厂产品最少检验数量

供试品批产量N（个）每种培养基最少检验数量

注射剂

大体积注射剂（＞100ml）≤100

100＜N≤500

＞500

10%或4个（取较多者）

10个

2%或20个（取较少者）

2%或10个（取较少者）

眼用及其他非注射产品

≤200 ＞200 5%或2个（取较多者）10个

桶装固体原料

≤4

4＜N≤50 每个容器

20%或4个容器（取较大者）

抗生素原料药（≥5g）＞50 2%或10个（取较大者）

6个容器

医疗器具

≤100

100＜N≤500 ＞500 10%或4件（取较大者）10件

2%或20件（取较小者）

注：若每个容器中的装量不足接种两种培养基，那么表中的检验数量应加倍。

表2 上市抽验样品（液体制剂）的最少检验量

供试品装量V（ml）每支样品接入每管培养基的

最少样品量

最少检验数量（瓶或支）

≤1 全量20 ①1＜V＜5 半量10

5≤V＜20 2ml 10

20≤V＜50 5ml 10

50≤V＜100 10ml 10 50≤V＜100（静脉给药）半量10 100≤V≤500 半量 6 V＞500 500 ml 6 ①每种培养基各接种10支供试品。

表3 上市抽验样品（固体制剂）的最少检验量

供试品装量M/支、瓶或个每支样品接入每管培养基的

最少样品量

最少检验数量（瓶或支）

M＜50mg 全量20 ①50mg≤V＜300mg 半量10

300mg≤V＜5g 150mg 10

M≥5g 500mg 10②外科用敷料棉花及纱布取100mg或1cm×3cm 10

缝合线、一次性医用材料整个材料③20①

带导管的一次性医疗器具

（如输液袋）

10

其他医疗器具整个器具③（切碎拆散开）20①

①每种培养基各接种10支供试品。

②抗生素粉针剂（≥5g）及抗生素原料药（≥5g）的最少检验数量为6瓶（或支），

桶装固体原料的最少检验数量为4个包装。

③如果医用器械体积过大，培养基用量可在2000ml以上，将其完全浸没

六项无菌技术操作法

六项无菌技术操作法 【学习目标】 严格按无菌技术操作要求，熟练进行六项无菌技术操作的综合应用，具体为：1无菌持物钳使用法；2无菌容器使用法；3打开无菌包法；4；取用无菌溶液法；5铺无菌治疗盘法；6戴脱无菌手套法 【操作目的】 取用、保存和传递无菌物品，进行各项无菌操作。 【物品准备】 洗手液或速干手消毒剂、擦手小毛巾、清洁治疗盘1个、无菌持物钳（镊）1套、无菌容器（内放纱布或棉球）、无菌治疗碗1个、无菌包（内置无菌治疗巾2块），无菌溶液，无菌手套（大小合适）、消毒液、棉签、、笔、纸、弯盘、抹布、治疗车下层备生活垃圾桶、医疗垃圾桶。

取 钳 打开镊筒盖，无菌持物钳（镊）钳端闭合垂直取出 铺盘铺治疗巾双折于治疗盘上，手持治疗巾上层外侧面，将治疗巾上层呈扇形三折，无菌面向外 揭开无菌治疗碗的3M指示胶带，将包布托在手中按无菌原则打内 取无菌物品左手打开无菌罐罐盖，无菌面朝上拿在手中，正确使用无菌持物镊夹取无菌物品放在无菌区域内，盖好罐盖

右手握着溶液瓶，瓶签向手心，旋转倒出少量溶液于弯盘内，以冲洗瓶口 治疗巾上下层边缘对齐，开口处向上翻两折,两侧边缘向下翻一折 盖 盘 在纸上注明无菌盘内物品、铺盘时间、签名 标 注 正确使用速干手消毒剂按7步洗手法洗手，时间≥15秒

盘内 退后两步，对准五指戴上一只手套，戴手套的手指插入另一手套 反折的内面，同法戴上另一只手套 将手套的翻边扣套在工作服衣袖外面，双手交叉检查是否漏气， 并调整手套位置，双手置于胸前 操作的关键点 1无菌包的使用：十字包扎送消毒，时间物品注明了。有效时间为7天，过期受潮重灭菌。

铺无菌盘操作评分标准

大家下午好，今天所学习的护理操作是无菌技术的之《铺无菌盘》，此项操作目 的：将无菌巾铺在干燥的治疗盘内，形成无菌区，来放置无菌物品，以供实施护理治疗时使用。 一操作前的准备； 1. 包括了护士自身着装的准备衣帽整洁； 2. 其次是操作环境清洁、干燥、定期消毒，操作台清洁、干燥、物品布局合理 无菌操作前半小时停止清扫工作、减少走动、避免尘埃飞扬， 3. 再则是物品准备要求无菌物品在有效期内。 治疗盘2个，无菌持物钳，无菌物品，无菌包（内有无菌巾数块，灭菌指示卡，包外贴化学指示胶带），记录卡2张，弯盘，清洁抹布。 二下面我讲具体讲解此项操作的实施要点 1、操作开始举手示意，操作环境符合要求 2、用抹布擦拭治疗盘顺序：内一一外侧一一底；抹布换面擦拭桌面三横三横，放置治疗盘于治疗台，在三横一竖 3、清洗抹布，七步洗手法洗手，（内外夹弓大立腕），戴口罩。4?将基础盘放置于治疗台，依次检查无菌物品均在有效期内，无菌物品均在有 效期内可以使用 5. 拿取无菌包反转查看，提袋是否松散，无菌包在有效期内符合要求，可以使用

6. 松解化学指示胶带，解开无菌包系带，挽活结，一字缠绕 7. 离台面一定距离，左手背后捏衣服，避免污染，用手依次打开无菌包外层包布的外、左、右角。取无菌钳，钳夹闭，用手打开外层包布的内角，用无菌钳依次打开内层包布的外、右、左，内角。 8. 灭菌指示卡已变色。用无菌钳取无菌巾一块，放于治疗盘内。 9. 灭菌指示卡放回原处，用无菌持物钳依次还原内层包布的内、右、左、外角，用手打开外层包布的内角，无菌持物钳放回无菌容器内。 10. 用手还原无菌包外层包布的右、左、外角，按“一”字型包好无菌包。并记录开包时间、剩余物品及责任人。将无菌包放于基础盘内，同类物品的最前面，以便优先使用，有效期为24小时。 11. 退后一步，双手捏住无菌巾上层两角的外面，轻轻抖开，铺于治疗盘内。 12. 用镊子夹取无菌缸里的无菌纱块，投放时避免跨越无菌区域，双手捏住无菌巾上半层两角外面，上下边缘对齐盖好无菌物品。 11. 折叠无菌巾边缘（将开口处向上翻折两次，两侧向下翻折一次）。 12. 记录备盘时间，内容物及责任人。无菌盘有效期4小时。 13. 处理用物。洗手，取口罩。 14. 操作完毕 三注意事项： 1. 铺无菌巾的区域必须清洁干燥。 2. 避免无菌巾潮湿，污染。

50项护理基础操作评分标准[1]

护理技术操作考核评分标准目录 第一项一般洗手操作考核评分标准 (1) 第二项无菌技术操作考核评分标准 (2) 第三项生命体征监测技术操作考核评分标准 (3) 第四项口腔护理技术操作考核评分标准 (4) 第五项鼻饲技术操作考核评分标准 (5) 第六项女病人导尿技术操作考核评分标准 (6) 第七项胃肠减压技术操作考核评分标准 (7) 第八项大量不保留灌肠技术操作考核评分标准 (8) 第九项鼻塞（鼻导管）吸氧技术操作考核评分标准 (9) 第十项换药技术操作考核评分标准 (10) 第十一项雾化吸入技术操作考核评分标准 (11) 第十二项血糖监测技术操作考核评分标准 (12) 第十三项口服给药技术操作考核评分标准 (13) 第十四项密闭式输液技术操作评分标准 (14) 第十五项密闭式静脉输血技术操作考核评分标准 (15) 第十六项静脉留置针技术考核评分标准 (16) 第十七项静脉采集血标本技术操作考核评分标准 (17) 第十八项静脉注射技术操作考核评分标准 (18) 第十九项经外周插管的中心静脉导管（PICC）护理技术操作考核评分标准 19 第二十项动脉血标本的采集技术操作考核评分标准 (20) 第二十一项肌内注射技术操作考核评分标准 (21) 第二十二项皮内注射技术操作考核评分标准 (22) 第二十三项皮下注射技术操作考核评分标准 (23) 第二十四项酒精拭浴降温技术操作考核评分标准 (24) 第二十五项心肺复苏技术操作考核评分标准 (25) 第二十六项经鼻/口腔吸痰法技术操作考核评分标准 (26) 第二十七项气管切开（呼吸机）病人吸痰技术操作考核评分标准 (27) 第二十八项心电监测技术操作考核评分标准 (28) 第二十九项血氧饱和度监测技术操作考核评分标准 (29) 第三十项输液泵／微量输注泵的使用技术考核评分标准 (30) 第三十一项除颤技术操作考核评分标准 (31)

无菌技术操作考试标准

无菌技术操作考试标准

铺无菌盘法之无菌巾一铺一盖法操作考核评分标准 项目考核内容 分 值 扣分及标准 操作准备护士准备：衣帽整洁、修剪指甲、洗手、戴口罩。 2 操作准备： [用物] 治疗盘2个、无菌持物钳、无菌物品、无菌包（内有无菌治疗巾 数块，灭菌指示卡；包外贴化学指示胶带）记录卡2张、弯盘、清洁抹布。 [环境] 1.无菌操作的环境：清洁干燥、通风，操作台面宽敞、高度适宜， 操作前30分钟内不进行环境卫生的打扫，无人员走动； 2.无菌操作用物齐全，台面整洁。 5 用物缺一项或不符合要求扣1 分 操作要点1.操作步骤：88 （1）备齐用物（2分）。 2 （2）备清洁干燥的治疗盘和治疗台（2分），放治疗盘于适当处（1分）。 3 （3）洗手（1分），戴口罩（1分）。 2 （4）检查无菌包灭菌指示胶带有无变色（2分），并核对其名称（2分）、灭菌 日期（2分），有无松散、潮湿、破损等（2分）。 8 （5）开无菌包，解开无菌包系带，挽活结（2分）。 2 （6）用手依次打开无菌包外层包布的外、左、右角（3分）。取无菌钳（2分）， 用手打开外层包布内角（2分），用无菌钳依次打开内层包布的外、左、右、内 角（4分）。 11 （7）检查灭菌指示卡有无变色（2分）。 2 （8）用无菌钳取一块无菌巾置于内层包布左侧缘（2分），以一手一钳将无菌 巾轻轻打开（3分），由远至近铺于治疗盘上（2分）。 7 （9）初步还原无菌包，用无菌钳依次还原内层包布的内、右、左、外角（4 分）。用手还原无菌包外层包布内角（2分）。 6 （10）备无菌盘内物品（投递无菌物品）（3分）。 3 （11）开无菌包。用手打开无菌包外层包布内角（2分）。用无菌钳依次打开内 层包布的外、左、右及内角（4分）。 6 （12）用无菌钳取一块无菌巾依法由近至远盖于无菌物品上（5分），并注意上 下无菌巾对齐（错位不超过2cm）（2分）。7 （13）还原无菌包。用无菌钳依次还原内层包布的内、右、左、外角（4分）， 将无菌持物钳放回容器内（2分） 6 （14）用手还原外层包布内、右、左、外角（4分）。按“一”字形包好无菌包 （2分）。 6

护理无菌操作

护士岗位技能训练和竞赛活动护理技术项目考核要点 目录 一、手卫生 (4) 二、无菌技术 (6) 三、生命体征监测技术 (10) 四、口腔护理技术 (15) 五、鼻饲技术 (16) 六、导尿技术及护理 (17) 七、胃肠减压技术 (19) 八、灌肠技术 (21) 九、氧气吸入技术 (22) 十、换药技术 (23) 十一、雾化吸入疗法 (25) 十二、血糖监测 (26) 十三、口服给药法 (27) 十四、密闭式输液技术 (28) 十五、密闭式静脉输血技术 (29) 十六、静脉留置针技术 (31) 十七、静脉采血技术 (32) 十八、静脉注射法 (33) 十九、经外周插管的中心静脉导管（PICC）护理技术 (35) 二十、动脉血标本的采集技术 (38) 二十一、肌内注射技术 (40) 二十二、皮内注射技术 (41) 二十三、皮下注射技术 (42) 二十四、物理降温法 (43) 二十五、心肺复苏基本生命支持术 (45) 二十六、经鼻/口腔吸痰法 (47) 二十七、经气管插管/气管切开吸痰法 (49) 二十八、心电监测技术 (51) 二十九、血氧饱和度监测技术 (52) 三十、输液泵／微量输注泵的使用技术 (53) 三十一、除颤技术 (55) 三十二、轴线翻身法 (56) 三十三、患者搬运法 (57) 三十四、患者约束法 (61) 三十五、痰标本采集法 (63) 三十六、咽拭子标本采集法 (64) 三十七、洗胃技术 (65) 三十八、"T"管引流护理 (67) 三十九、造口护理技术 (68) 四十、膀胱冲洗的护理 (70) 四十一、脑室引流的护理 (72) 四十二、胸腔闭式引流的护理 (73)

铺无菌盘法评分标准

铺无菌盘法（无菌巾半铺半盖法（双手法）考评标准 序号：______ 姓名：________成绩：______ 监考人：_______项目操作程序分值得分 准备质量10 分1.护士准备：衣帽整洁、洗手、戴口罩 2.用物准备：治疗盘、盛无菌持物钳的无菌罐、无菌物品（大 纱垫）、盛放无菌治疗巾的无菌包（内灭菌指示卡，包外贴 化学指示胶带）、 10 操作流程质量75 分1.备齐用物。 5 2.备清洁干燥的治疗盘和治疗台，放治疗盘于适当处。 3 3.检查无菌包灭菌指示胶带有无变色。 3 4核对无菌包名称、灭菌日期、有无松散、潮湿、破损等。 5 6.开无菌包 （1）解开无菌包系带，挽活结。 （2）用手依次打开无菌包外层包布的外、左、右角。 （3）取无菌钳，用手打开外层包布内角，用无菌钳依次打 开内层包布的外、左、右、内角。 （4）检查灭菌指示卡有无变色。 3 3 5 3 7.用无菌钳取无菌巾一块、另一手在下方接无菌巾。 3 8.用无菌钳依次还原内层包布的内、右、左、外角，无菌钳 放回无菌容器内。 10 9.用两手法铺无菌巾（半铺半盖）。 3 10.用手还原无菌包外层包布的内、右、左、外角，包好无菌 包。 10 11.将无菌巾上半层呈扇形折叠打开，开口边向外，无菌面向 上，备无菌盘内物品。 10 12.双手捏住无菌巾上半层两角外面，边缘对齐盖好。 3 13.折叠无菌巾边缘（将开口处向上反折两次，左、右两侧向 下反折一次）。铺 8 14.记录备盘时间、内容物及责任人，并记录开包时间、剩余 物品及责任人。 4 15.将无菌包放于同类物品的最前面，以便优先使用，有效期 为24小时。 3 16.处理用物。 3 17.洗手，取口罩。 3 综合评分 1.用物缺1项或不符合要求扣1分。

无菌检查法-2015版中国药典

无菌检查法-2015版中国药典 无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料、及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定,仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。 无菌检查应在环境洁净度B 级背景下的局部A 级洁净度的单向流空气区域内或隔离系统中进行，其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度确认。隔离系统应定期按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环境进行监控。 无菌检查人员必须具备微生物专业知识，并经过无菌技术的培训。 培养基 硫乙醇酸盐流体培养基主要用于厌氧菌的培养，也可用于需气菌培养；胰酪大豆胨液体培养基适用于真菌和需气菌的培养。培养基的制备及培养条件培养基可按以下处方制备，亦可使用按该处方生产的符合规定的脱水培养基。配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。制备好的培养基应保存在2～25℃、避光的环境，若保存于非密闭容器中，一般在3周内使用；若保存于密闭容器中，一般可在一年内使用。 1. 硫乙醇酸盐流体培养基 酪胨(胰酶水解) 15.0g 酵母浸出粉 5.0g 葡萄糖 5.0g 氯化钠 2.5g L-胱氨酸0.5g 新配制的0.1% 刃天青溶液1.0ml 硫乙醇酸钠0.5g 琼脂0.75g (或硫乙醇酸) （0.3 ml) 纯化水1000ml 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH 为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节pH 值使灭菌后为7.1±0.2。分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培2养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则，须经100℃水浴加热至粉红色消失（不超过20 分钟），迅速冷却，只限加热一次，并防止被污染。除另有规定外，硫乙醇酸盐流体培养基置30～35℃培养。 2. 胰酪大豆胨液体培养基 胰酪胨17.0g 氯化钠 5.0g 大豆木瓜蛋白酶消化物 3.0g 磷酸氢二钾2.5g 葡萄糖（一水合/无水）2.5g （2.3g）纯化水1000mL 除葡萄糖外，取上述成分，混合，微温溶解，滤过，调节pH 值使灭菌后在25℃的pH 值为7.3±0.2，加入葡萄

无菌技术操作流程及评分标准

无菌技术操作流程 开始：各位老师下午好，我操作的项目是无菌技术操作。 1.无菌技术操作的目的：保持无菌物品无菌区域不被污染，防止一切微生物侵入机体，避免给患者带来不应有的损失和危害 2.环境评估：操作前30分钟停止清扫，操作中减少人员走动，开窗、通风、换气，操作台宽敞、平坦、整洁、干燥。 3.用物准备：治疗盘无菌包：包内置无菌巾若干无菌容器内置无菌持物钳棉签无菌包：内置治疗碗一个，镊子两把，弯盘一个无菌纱布罐无菌棉球罐无菌生理盐水一次性无菌手套 铺无菌盘 1.洗手戴口罩。 2.治疗盘清洁，干燥。铺无菌换药盘。 3.开无菌包：化学指示胶带有变色，在有效期内，无潮湿、无破损。斜角打开（打开无菌包内角时，手不可触及包布内面，不得跨越无菌区域）看化学指示卡，有变色。用无菌持物钳夹取一块无菌巾放入治疗盘内，将无菌包按原折痕“一字”包好后，看时间：记录日期、时间、并签名、24小时内有效。 4.铺无菌巾：双手捏住无菌巾一侧两角外面轻轻抖开，由近及远的将治疗巾一半铺于治疗盘上，将上下对齐后上层扇形折三次，开口外边向外，使治疗巾内面构成一无菌区。 5.开无菌包，前述指示胶带变色，在有效期内，侧孔、底孔闭合 1）打开无菌包，看化学指示卡变色 2）用无菌钳分别取治疗碗（内含两把镊子）、弯盘入无菌盘内。 3）打开无菌纱布罐夹取纱布置无菌盘内；同法夹取无菌棉球置治疗碗内（手不可触及容器边缘或内侧），无菌容器盖内面朝下直接盖上。 6.倒无菌溶液：（拿起溶液瓶，看瓶签）述：瓶身干净，标签完整、字迹清楚，0.9%Nacl500ml，在有效使用期内，瓶盖无松动，瓶身瓶底无无裂缝，对光检查：溶液澄清、无杂质。除盖：查棉签（无漏气，在有效试用期内）写好开包日期，消毒瓶盖、手指，开瓶盖。倒溶液于治疗碗内，再次消毒瓶口，盖回瓶盖看时间：记录日期、时间、签名，24小时有效。 7.铺完盘，看时间口述：记录名称、时间并签名（小标签贴于盘缘）、4小时内有效。述：已铺好换药盘，可以给病人进行换药护理。一份无菌物品只供一位病人使用，以防交叉感染。 8.注意事项：在操作中应注意：无菌容器盖放于稳妥处时，应内面朝上。到远处夹取无菌物品，应同时搬移无菌持物钳和容器。无菌持物钳和浸泡容器每周灭菌2次，同时更换消毒液，干燥保存4小时更换一次 带无菌手套 1．目的：用于进行无菌操作，防止患者受到感染，用于接触某些无菌物品或区域，保持无菌物

六项无菌技术操作法

六项无菌技术操作法 Prepared on 22 November 2020

六项无菌技术操作法【学习目标】 严格按无菌技术操作要求，熟练进行六项无菌技术操作的综合应用，具体为：1无菌持物钳使用法；2无菌容器使用法；3打开无菌包法；4；取用无菌溶液法；5铺无菌治疗盘法；6戴脱无菌手套法 【操作目的】 取用、保存和传递无菌物品，进行各项无菌操作。 【物品准备】 洗手液或速干手消毒剂、擦手小毛巾、清洁治疗盘1个、无菌持物钳（镊）1套、无菌容器（内放纱布或棉球）、无菌治疗碗1个、无菌包（内置无菌治疗巾2块），无菌溶液，无菌手套（大小合适）、消毒液、棉签、、笔、纸、弯盘、抹布、治疗车下层备生活垃圾桶、医疗垃圾桶。 【护理过程及评分标准】

盘面，将治疗巾上层呈扇形三折，无菌面向外对扣2分 取碗揭开无菌治疗碗的3M指示胶带，将包布托在手中按 无菌原则打开包布四角，将包布四角抓住，使包内 物品稳妥置于无菌治疗巾内 5 违反无菌原 则扣2分/ 次 取 无菌物品左手打开无菌罐罐盖，无菌面朝上拿在手中，正确 使用无菌持物镊夹取无菌物品放在无菌区域内，盖 好罐盖 4 未检查扣2 分，罐盖内 面被污染扣 2分 倒液检查无菌溶液名称、浓度、有效期、瓶口有无松 动、瓶身有无裂缝、溶液有无浑浊、沉淀、变色、 絮状物 3 未检查扣2 分，检查不 全扣分/项 撬开铝瓶盖，取碘伏棉签消毒2次（1根从瓶口处螺 旋消毒至瓶盖中心，另1根从瓶口处向下消毒至瓶 颈处），按无菌操作从无菌罐中取无菌纱布一块放 于左手掌心，用纱布包裹打开瓶塞 5 污染瓶盖内 面或瓶口扣 2分取棉签 或消毒方法 不对扣2分 实施 右手握着溶液瓶，瓶签向手心，旋转倒出少量溶液 于弯盘内，以冲洗瓶口 2 瓶签未对手 心扣1分， 冲洗方法不 对1分，瓶 口距离弯盘 太低扣2分倒适量无菌溶液于无菌治疗碗内，塞紧瓶塞3 液体外漏扣 2-3分，倒 溶液方法不 对扣2分 记 录 记录开瓶日期、时间及签名3 未记录打开 无菌溶液时 间或记录错 误扣2分 盖 盘 治疗巾上下层边缘对齐，开口处向上翻两折,两侧边 缘向下翻一折 3 铺无菌盘折 叠方法不对 扣1分/ 边，不平整

六项无菌技术操作法

六项无菌技术操作法 Company Document number：WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT

六项无菌技术操作法【学习目标】 严格按无菌技术操作要求，熟练进行六项无菌技术操作的综合应用，具体为：1无菌持物钳使用法；2无菌容器使用法；3打开无菌包法；4；取用无菌溶液法；5铺无菌治疗盘法；6戴脱无菌手套法 【操作目的】 取用、保存和传递无菌物品，进行各项无菌操作。 【物品准备】 洗手液或速干手消毒剂、擦手小毛巾、清洁治疗盘1个、无菌持物钳（镊）1套、无菌容器（内放纱布或棉球）、无菌治疗碗1个、无菌包（内置无菌治疗巾2块），无菌溶液，无菌手套（大小合适）、消毒液、棉签、、笔、纸、弯盘、抹布、治疗车下层备生活垃圾桶、医疗垃圾桶。 【护理过程及评分标准】

盘面，将治疗巾上层呈扇形三折，无菌面向外对扣2分 取碗揭开无菌治疗碗的3M指示胶带，将包布托在手中按 无菌原则打开包布四角，将包布四角抓住，使包内 物品稳妥置于无菌治疗巾内 5 违反无菌原 则扣2分/ 次 取 无菌物品左手打开无菌罐罐盖，无菌面朝上拿在手中，正确 使用无菌持物镊夹取无菌物品放在无菌区域内，盖 好罐盖 4 未检查扣2 分，罐盖内 面被污染扣 2分 倒液检查无菌溶液名称、浓度、有效期、瓶口有无松 动、瓶身有无裂缝、溶液有无浑浊、沉淀、变色、 絮状物 3 未检查扣2 分，检查不 全扣分/项 撬开铝瓶盖，取碘伏棉签消毒2次（1根从瓶口处螺 旋消毒至瓶盖中心，另1根从瓶口处向下消毒至瓶 颈处），按无菌操作从无菌罐中取无菌纱布一块放 于左手掌心，用纱布包裹打开瓶塞 5 污染瓶盖内 面或瓶口扣 2分取棉签 或消毒方法 不对扣2分 实施 右手握着溶液瓶，瓶签向手心，旋转倒出少量溶液 于弯盘内，以冲洗瓶口 2 瓶签未对手 心扣1分， 冲洗方法不 对1分，瓶 口距离弯盘 太低扣2分倒适量无菌溶液于无菌治疗碗内，塞紧瓶塞3 液体外漏扣 2-3分，倒 溶液方法不 对扣2分 记 录 记录开瓶日期、时间及签名3 未记录打开 无菌溶液时 间或记录错 误扣2分 盖 盘 治疗巾上下层边缘对齐，开口处向上翻两折,两侧边 缘向下翻一折 3 铺无菌盘折 叠方法不对 扣1分/ 边，不平整

铺无菌盘法精编版

铺无菌盘法 无菌盘是指将无菌巾铺在洁净，干燥的治疗盘内。形成一片无菌区域，放置无菌物品，供治疗时使用。无菌巾应放置在无菌容器或无菌包内，其折叠方法有纵折法，（治疗巾纵折两次，再横折两次，开口边向外。）和横折法（治疗巾横折后纵折，再重复一次） 操作目的 放置无菌物品，供治疗，护理使用。 操作评估 操作环境是否清洁，宽敞，安全 操作前准备 1）环境准备：清洁宽敞，明亮。操作前三十分钟停止清扫工作。 2）护士准备：衣帽整洁，修剪指甲，洗手，戴口罩。 3）用物准备：治疗盘，无菌持物钳及罐，无菌物品，无菌包，内有无菌巾数条，灭菌指示卡。包布外贴化学指示胶带。记录卡，签字笔，弯盘，清洁抹布。 操作程序 1.无菌巾半铺半盖法 1）评估环境，备齐用物。 2）备清洁干燥的治疗盘和治疗台，放治疗盘于适当处。 3）洗手，戴口罩。 4）检查无菌包外指示卡有无变色，无菌包有无松散，潮湿，破损，是否在有效期内。

5）打开无菌包，用无菌持物钳取出一块治疗巾。放于治疗盘内。 6）如无菌包内治疗巾未用完，按原折痕包好。记录打开无菌包的日期，时间，剩余物品及责任人。 7）将无菌包放于同类物品的最前面，以便优先使用，有效期为24小时。 8）铺盘。 单层底铺盘法 1.双手捏住无菌巾折叠（横折法）中线两端外面，轻轻抖开，使之呈双层，由内向外铺于清洁干燥治疗盘上，将上层治疗巾由内向外扇形折叠，边缘向外，无菌面向上，治疗巾内构成无菌区。 2.放入无菌物品。 3.将上层无菌巾盖于无菌物品上，上下层边缘对齐，开口处向上折两次，两侧边缘分别向内折一次，露出治疗盘边缘。 双层底铺盘法 1.双手捏住无菌巾一边两角外面，轻轻的抖开，先从远到近，三折成双层底，铺于清洁干燥治疗盘上，上层呈扇形折叠，开口边缘向外，无菌面向上。 2.放入无菌物品。 3.拉平扇形折叠层，盖于无菌物品上，边缘对齐。 9）记录铺好盘的日期，时间，内容及责任人。

无菌检查法验证方案

XXX无菌检验方法学验证方案 编号：VP.SV.039.00

目录 验证方案的审批 验证小组名单 验证实施进度 技术性文件 引言 1．概述 2．验证目的 3．职责 无菌检查方法学的确认 再验证周期

验证方案审批

验证小组名单 验证实施进度 技术性文件

引言 1.概述 1.1根据2010版《中华人民共和国药典》二部附录ⅪH规定，当建立药品的无菌检查方 法时，需进行方法学的验证，以确认所采用的方法适合于该药品的检测。当药品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时，检测方法应重新验证。 2.验证目的： 2.1根据2010版《中华人民共和国药典》二部附录ⅪH无菌检查方法要求，通过试验， 寻找合适的材料、条件和方法，最终确定氧氟沙星滴眼液的检验方法，并将其定为日常检测的正式方法。 3.职责 3.1验证办 3.1.1负责验证方案的审批。 3.1.2负责验证的协调工作，以保证验证方案规定项目的顺利实施。 3.1.3负责验证数据及结果的审核。 3.1.4负责验证报告的审核。 3.1.5负责再验证周期的确认。 3.2质量监控部 3.2.1负责验证所需的标准品、样品、试剂、试液等的准备。 3.2.2负责仪器、仪表、量具的校正。 3.2.3负责取样及样品检验。 3.2.4负责收集各项验证、试验记录，对结果进行分析，起草验证报告，报验证办。 3.2.5负责拟订验证方案。 3.2.6负责组织试验所需设备。 3.2.7负责按照验证方案里各项操作步骤进行操作。 3.2.8负责保证设备的正常运转。

无菌检查方法学的确认 1.验证环境、设备及实验前准备： 1.1无菌室内（无菌检查应在环境洁净度B级下的局部洁净度A级的单向流空气区域或 隔离操作器内完成。由QA人员定期按国家相关要求进行环境监控。 1.2仪器和设备：①GSP-9080MBE型隔水式电热恒温培养箱（上海博迅实业有限公司医疗 设备厂）；②生化培养箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）；③AL204型电子天（梅 特勒—托利多仪器有限公司）；④GZX-9070MBE型电热恒温鼓风干燥箱（上海博迅实 业有限公司医疗设备厂）；⑤YXQ-LS-50SI型高压蒸汽灭菌器（上海博迅实业有限公 司医疗设备厂）；⑥HTY-2000A集菌仪、全封闭集菌培养器可重复使用集菌培养器（杭 州高得·泰林医疗器械有限公司）；⑦超净工作台(上海博迅实业有限公司医疗设备 厂)；。⑧微孔滤膜（孔径0.45μm直径50mm）… 1.3供试品： 1.4所需培养基： 1.4.1硫乙醇酸盐流体培养基（细菌培养）；批号：050104；灵敏度：应符合定 厂家：北京三药科技开发公司； 改良马丁培养基（真菌培养）；批号：050106 ；灵敏度：应符合规定 厂家：北京三药科技开发公司； 营养琼脂培养基（分离单个菌落及传菌种）；厂家：北京三药科技开发公司； 改良马丁琼脂培养基（培养真菌及传菌种）；厂家：北京三药科技开发公司； 1.5稀释液、缓冲液： 0.9%氯化钠溶液；PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液 (配制方法参照chp2005附录—90页) 1.6验证用菌种：金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26 003]；大肠埃希菌[CMCC（B）44 102] 生孢梭菌[CMCC（B）64 941]；枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63 501]；黑曲霉[CMCC（F） 98 003]；白色念珠菌[CMCC（F）98 001]。（以上菌种均由湖北省药品检验所提供）1.7培养基的无菌检查：培养基配制好并采取验证合格的灭菌程序灭菌后随机取 5瓶 (管)，培养 14 天，结果应无菌生长。 2.方法学验证: 2.1简要方法说明：本品为喹诺酮类抗生素，通过抑制细菌的DNA旋转酶和DNA复制而发

无菌技术操作流程

无菌技术操作流程 评估环境 环境清洁宽敞，定期消毒，在操作前30分钟停止一切清扫活动，减少人员走动，避免尘埃飞扬，操作台面清洁干燥，操作前用消毒毛巾擦拭操作台面。 操作前准备 1、操作前检查指甲清洁，按七步洗手法洗手，戴口罩 2、用物准备：（1）检查无菌手套密封包装，型号合适，在有效期内。 （2）无菌治疗碗包无破损、无潮湿、消毒条码变色，在有效期内。 （3）无菌治疗巾无破损、无潮湿、消毒条码变色，在有效期内。 （4）无菌持物钳包无破损、无潮湿、消毒条码变色，在有效期内。 （5）无菌敷料容器消毒条码变色，在有效期内。 （6）无菌溶液瓶口无松动，瓶身无裂缝，对光检查溶液透明，澄洁、无混浊、无沉淀、无絮状物，在有效期内。 （7）棉签在有效期内，消毒液在有效期内。 （8）弯盘清洁干燥，治疗盘清洁干燥。 操作过程 一、无菌持物钳的使用法 目的：取用或者传递无菌的敷料、器械等。 流程： 1、打开无菌包，将无菌持物钳置于操作台面上，标明打开日期及时间，有效期为4小时。 2、取放无菌钳时，钳端闭合向下，不可触及容器口边缘，用后立即放回容器内， 3、取远处物品时应当连同容器一起搬移到物品旁使用，从贮槽中取物时应将盖子完全打开，避免物品触碰边缘而污染。 注意事项：无菌持物钳不能夹取油纱布和未灭菌的物品，也不能用来换药或消毒皮肤。使用无菌持物钳时不能低于腰部。 二、无菌包使用法无菌容器使用法铺无菌盘法取用无菌溶液法 1、无菌包使用法： 打开无菌包，手不可触及无菌包内面，无菌治疗巾包消毒指示条码变色，用无菌持物钳夹取无菌治疗巾放治疗盘内，无菌包内物品未用完时，按原折痕包好，系带横向结扎，有效期为24小时。 2、铺无菌盘法：上层向远端呈扇形折叠，开口边向外，治疗巾内面构成无菌区，铺无菌盘区域必须清洁干燥，无菌巾避免潮湿。 打开无菌换药碗，无菌包内物品一次用完时，一手抓住无菌巾四角，包裹另一手拿住无菌物品放于无菌巾内。 无菌容器使用法：手持无菌容器时，应托住底部，从无菌容器内夹取物品时

无菌技术操作规程及评分标准

无菌技术操作规程 【评估】 无菌技术操作条件（环境、物品） 【准备】 护士：着装整洁，剪短指甲、取手表、卷袖过肘、洗手并擦手，戴口罩。 物品：治疗车、治疗盘2个，无菌持物钳包、手消液、无菌注射器、无菌巾包，无菌溶液、安尔碘、无菌棉签、无菌有盖缸内盛纱布、无菌治疗碗包、号码合适的无菌手套一副、橡皮筋、标签纸、书写笔、污物缸、抹布、锐器盒。 环境：清洁、干燥。 【方法】 擦桌面→治疗盘→手消。 无菌持物钳的使用： 检查无菌包→开无菌持物钳容器包→取出无菌持物缸→取下包外3M消毒条书写开启时间及责任者贴于无菌缸外壁。 铺无菌盘法（单层铺巾法）： 检查无菌包→打开无菌包→用无菌持物钳夹取一块治疗盘内→未污染的剩余治疗巾按原折痕包好→捏住治疗巾上层两角外面打开→双折铺于盘上→扇形折叠打开→放无菌物品→双手捏翻折治疗巾两个角的外面向下覆盖，覆盖时将各边缘对整齐→将开口处向上折两次→两侧边缘分别向下折一次→露处治疗盘边缘→治疗盘即备好待用→注明开包→铺盘时间及责任者。 无菌碗的使用法： 检查无菌包→打开包（外层用手，内层用手或无菌持物钳均可，原则不污染）→扭转放无菌碗于治疗盘内→整理包布。 取用无菌溶液法： 核对瓶签，检查溶液→拉开输液瓶拉环盖→注射器抽取溶液→将溶液推入无菌碗内→消毒瓶口并贴瓶口贴或用无菌纱布盖好→注明开瓶时间及责任者（已打开的溶液24小时内有效）。无菌容器使用法：检查无菌容器→打开容器，盖的内面朝上→持无菌容器时手指不可触及容器的边缘及内面→用无菌持物钳取出无菌物品→将容器盖严。 戴无菌手套法： 戴手套：检查手套的号码、有效使用期及包装袋有无潮湿、破损→打开手套袋→两手同时掀开手套开口处，分别捏住两只手套翻折部分，取出手套→将两手套五指对准→先戴一只手，再以戴好的手指插入另一只手套的翻折面内，同法戴好→调整手套位置。 脱手套：一手捏住另一手的手套口外面翻转脱下→已脱手套的手伸入另一只手套内将其脱下→将手套的里面翻套在外面→将用过的手套放医用垃圾袋内备处理。 【评价】 1、操作准确、轻巧、熟练，物品放置合理，不影响操作。 2、注明开包、开瓶、铺盘日期及时间。 3、无菌观念强，手臂未跨越无菌区，操作过程无污染。 【注意事项】 1、开包后的无菌包和开封后的无菌溶液有效期均为24小时，无菌盘有效期限不超过4小 时。 2、无菌持物钳取时不可触及容器口边缘及溶液以上的容器内壁。使用时应保持钳端向下， 不可倒转向上，用后立即放回容器中。如到远处夹取物品时，无菌持物钳应连同容器一

无菌技术基本操作方法

无菌技术基本操作方法 无菌技术：是指在医疗、护理操作过程中，防止一切微生物侵入人体和防止无菌物品、无菌区域被污染的技术。 无菌技术基本操作方法：①无菌持物钳的使用②无菌包的使用③铺无菌盘④无菌容器的使用⑤取用无菌溶液⑥戴、脱无菌手套 操作中的无菌观念：1、进行无菌操作时，操作者身体与无菌区保持一定距离。 2、取放无菌物品时应面向无菌区 3、取用无菌物品时应使用无菌持物钳。 4、手部应保持在腰部或治疗台面以上，不可跨越无菌区， 手不可接触无菌物品。 5、非无菌物品应远离无菌区；无菌物品一经取出，即使未 用，也不可放回无菌容器内。 6、避免面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏。 7、如无菌物品疑有污染或已被污染，应予更换并重新灭菌。操作前的准备：1、护士自身准备衣帽整洁、修剪指甲、洗手、戴口罩 2、用物准备 3、环境准备①操作环境应清洁、宽敞、定期消毒。 ②操作台清洁、干燥、平坦、物品布局合理。 ③无菌操作前半小时应停止清扫工作、减少走动、避免尘埃飞扬。 1、无菌持物钳的使用 目的：用于取放和传递无菌物品

步骤：①检查检查有效期 ②开盖将容器盖打开 ③取钳手持无菌持物钳上1/3，闭合钳端，将钳移至容器中央，垂 直取出，关闭容器盖 ④使用保持钳端向下，在腰部以上视线范围活动，不可倒转向上 ⑤放钳用后闭合钳端，打开容器盖，快速垂直放回容器，松开关节， 关闭容器盖 注意事项：①严格遵循无菌操作原则 ②取放无菌持物钳时钳端闭合，不可触及液面以上部分或罐口边 缘；使用过程中始终保持钳端向下，不可触及非无菌区。 ③到远距离取物时，应将持物钳和容器一起移至操作处，就地取出 ④不可用持物钳夹取油纱布，不可用持物钳换药或消毒皮肤 ⑤干燥法保存应每4小时更换1次 ⑥无菌持物钳一经污染或可疑污染应重新灭菌 2、无菌包的使用 目的：用无菌包布包裹无菌物品用以保持物品的无菌状态，供无菌操作用步骤: ①检查检查无菌包的名称、灭菌日期、灭菌指示胶带，检查有无潮湿或破损 ②解开封口胶带（系带）将无菌包平放在清洁、干燥、平坦的操作台上，解开系带 ▲取出包内部分物品 ⅰ、开包：将系带卷放于包布下，按顺序逐层打开无菌包 ⅱ、取物：用无菌钳夹取所需物品，放在准备好的无菌区内

无菌技术基本操作评分标准

无菌技术基本操作评分标准 科室操作者考核日期操作时间得分 项目考核标准及内容要求分值扣分得分 素质要求衣帽整齐、洗手、戴口罩；头发不过肩，不穿硬底鞋，指甲规范；稳重大方， 精神面貌好 6分 操作前准备物品 治疗盘，清洁纱布，棉签缸，碘伏瓶，无菌持物钳及缸，弯盘2个，无菌包（内 有2块治疗巾），1瓶生理盐水，贮槽内盛治疗碗2个，无菌手套包（内有无菌 手套1付） 3分环境清洁，干燥，宽敞2分 操作过程 操作时间为4分钟 超时扣1分，以后每超时5秒扣1分铺无 菌治 疗盘 及无 菌包 的使 用 1、检查治疗盘是否清洁干燥（检查并口述），用纱布清洁治疗盘2分 2、检查无菌包的名称、有效期、有无潮湿、破损、松散（检查并口述）4分 3、将无菌包放置在清洁干燥平坦处，按包折顺序小心打开，无污染4分 4、用无菌持物钳取出无菌治疗巾放于治疗盘内4分 5、如包内物品一次未用完则按原折包好，一字形包扎，并注明开包日期、时间。 24小时未用完应重新消毒（口述） 4分 6、双手捏住治疗巾上层两角外面双折铺于治疗盘中，无菌巾上层向远端呈扇形 折叠，开口边向外。 6分 取无 菌物 品、 取无 菌溶 液及 无菌 持物 钳的 使用 7、擦液体表面灰尘，检查溶液名称、剂量、浓度、有效期、瓶盖有无松动、瓶 子有无裂缝、有无变色、混浊、沉淀等（检查并口述） 5分 8、启铝盖、消毒4分 9、用无菌持物钳在贮槽内取一个换药碗，放于铺好的治疗盘内2分 10、无菌换药碗无污染，取放无菌持物钳时应将钳端闭合，不可触及容器壁， 使用时应保持钳端向下 6分 11、贮槽盖随即盖严，不可暴露过久。2分 12、开瓶塞方法正确，倒液时，瓶签向手心倒少许溶液于弯盘中冲洗瓶口5分 13、从已经冲洗的瓶口处倒出溶液至无菌治疗碗中，倒后立即将胶塞塞好4分 14、记录开瓶日期、时间。已打开过的溶液内溶液可保存24小时（口述）3分 15、放入无菌物品后的治疗盘，拉平扇形折叠层盖于物品上，上下边缘对齐， 将开口处向上翻折两次，两侧边缘向下翻折一次。已铺好的治疗盘有效期4小 时（口述）。记录铺无菌盘时间 5分 戴 无 菌 手 套 16、检查手套包的名称、有效期、有无潮湿、破损及型号（检查并口述）4分 17、整理衣袖，打开手套包2分 18、取、戴无菌手套方法正确6分 19、未戴手套的手只能接触手套内面，已戴手套的手只能接触手套外面，如不 慎将手套污染或发现有破损时应立即更换（口述） 2分 20、脱手套前，将手套上污物洗去，然后由手套口往下翻转脱下，不可强拉手 指部分，以免损坏手套（口述） 2分 操作后整理用物，有菌、无菌物品分开放置3分理论提问略10分合计100分注：同等分数者，以操作时间先后排序

无菌检查方法的验证

无菌检查方法的验证 无菌检查方法是为了检查药典要求无菌的制剂及其他制品是否无菌而建立的试验方法，是作为无菌产品批放行的重要依据及药监部门对无菌产品质量监管的一个重要项目。因此如何确保无菌检查方法的准确可靠至关重要，而检查方法的验证是保证检查结果的公正、科学和准确的基础，因此各个主要国家的GMP或药典都对无菌检查方法的验证提出了严格的要求，2010版中国药典对分析方法验证和检查的要求也有大幅度的提高，同时也是GMP检查中检查的重点和容易发现问题的区域。 验证要求与方法 无菌检查方法验证一般分为前验证和再验证两种。 前验证，也称预验证，指在无菌分析方法正式使用前，按照预定验证方案进行的验证。如果没有充分的理由，任何检查方法必须进行前验证。 再验证，指某一检查方法经过验证并在使用一段时间后进行的，旨在证实已验证状态没有发生飘移而进行的重新验证及对检查方法进行修订、改变时进行的验证。 通常一个无菌产品的检查流程为：首先基于产品的剂型、溶解度等性质，按照药典的要求确定是否需要进行前处理;然后根据产品的特性是否有抑菌性，确定是否需要增加去除产品抑菌性的方法;最后验证整个检查方法中用到的一切及试验过程中的每一个环节包括样品的预处理方式、检查过程、培养条件等均不影响样品中微生物的生长。 这里，验证的重点环节包括： 前处理方法直接影响后续步骤的效果和重现性，应是验证的重点。 供试品中抑菌活性的去除是当前验证工作的重点，尤其强调应充分验证供试品本身对微生物生长的影响。 具体的验证方法如下： 菌种的选择 无菌检查方法验证中通常选择以下6种试验中常用的控制菌的标准菌株，它们分别代表不同类型的菌种：枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63 501]代表药品中常见的污染菌——芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003]代表革兰阳性菌、生孢梭菌[CMCC(B)64 941]代表厌氧菌、大肠埃希菌[CMCC(B)44 102]代表革兰阴性菌、白色念珠菌[CMCC(F)98 001]代表酵母菌、黑曲霉菌[CMCC(F)98 003]代表霉菌。 菌液的制备 接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30~35 ℃培养18~24h;接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中或改良马丁琼脂培养基上，

无菌技术操作流程

无菌技术操作流程

无菌技术法操作评分标准 氧气吸入法（氧气筒供氧）操作流程 考核时间：5分钟之内完成操作，超时1min，扣1分 治疗车：①上层：（1）注射盘：湿化瓶、一次性吸氧管、棉签、治疗碗（内装生理盐水）、纱布、别针和橡皮筋（装在一次性培养盒内）、记录卡，（2）蒸馏水 或冷开水、扳手，②供氧装置一套（氧气筒、氧气表）、签字笔。 1、服装、鞋帽整洁 2、仪表大方，举止端庄 3、微笑服务，语言柔和恰当，态度和蔼可亲 1、环境：整洁、安静、安全（四防） 2、物品：（1）备齐用物，放置合理 3、病人：（1）理解目的，愿意合作，又安全感 （2）体位舒适，情绪稳定

4、护士：（1）核对，确认病人 （2）自我介绍，评估病人（观察病人呼吸、面色、唇甲的颜色、肢端的温度、检查鼻腔通畅情况、有无鼻部手术等、心理合作程度） （3）向病人解释吸氧的目的，稳定病人情绪 （4）洗手（六步洗手法），戴口罩（计时开始） 检查“四防”及“满空”标志 → 开大开关冲气门 → 安装流量表 → 接湿 （与地面垂直）内盛灭菌用水至1/3-1/2满 → 注明上氧日期及时间 → 再次核对、解释、安慰 → 取舒适体位 → （检查鼻腔有无分泌物堵塞或异常） → 清洁鼻腔 → 连接氧气管 → 调节流 → 将氧气管鼻塞端放入盛有生理盐水的治疗碗内以检查氧气流出是否通畅并湿润氧气 → 插氧气管 → 用别针固定氧气管于床单上 → 询问病人感受并告知上氧过 → 整理床单位 → 收拾用物 → 洗手、脱口罩 → 记录用氧时间、 → 观察缺氧症状的改善情况并记录 → 准备用物，洗手，戴口罩 → 取下别针 → → 关小开关 → 取下氧气管 → 关大开关 → 开小 → 关小开关 → 取下湿化瓶及流量表 → 整理床单位 → 收拾用物 洗手，脱口罩 → 记录停氧时间，签名 （计时结束） 1、病人：擦净病人的面部，协助病人取舒适体位，整理病床单位 2、用物：清洁，分类消毒，物归原处 3、洗手 （六步洗手法） 操作中是否体现以人为本 氧气吸入法（氧气筒、中心吸氧）操作评分标准 日期： 科室： 姓名： 得分：

最新铺无菌盘操作流程教学文稿

铺无菌盘操作流程 科室姓名得分日期 考核人签名：

《农业》主要知识点 考点一：农业区位因素 １、农业区位因素 （1）自然因素包括：（因地制宜） ①气候：光照、热量、降水。决定农作物的种类(如水稻喜高温喜湿，因此主要分布在能满足水稻生长期高温多雨的热带、亚热带和温带季风气候区；甜菜喜温凉，分布在我国东北、西北)、产量、熟制。 ②地形：平原地势平坦,土层深厚,适宜发展种植业；坡度大于25°的山地地区耕作不便, 且水土保持不易,适宜发展林业或牧业；坡度小于25°的地区可以发展种植业（梯田）。因山地自然条件的垂直分异，宜发展立体农业。 ③土壤：种植业多要求土壤深厚肥沃,若土壤呈酸性或碱性,则宜加以改良或种植耐酸、碱植物。 ④水源：是否充足是农业稳产的保证和干旱、半干旱地区农业发展的决定性因素。 （2）社会经济条件：（因时制宜） ①市场：对商品农业而言，市场的需求量最终决定了农业生产的类型和规模。 ②交通运输：商品农业选择必须充分考虑当地的交通运输条件。 ③政策：世界各国的农业,都受到国家政策以及政府干预手段的影响。 ④农业生产技术：①机械──提高农业生产率，②化肥、良种──提高单位面积产量，③冷藏、保鲜技术──扩大农产品销售范围 ⑤劳动力：多、少，如地广人稀，生产规模大，机械化程度高。 （3）农业区位选择 总的来说，就是要因地制宜，实现对土地的合理利用。 ①综合分析自然因素：自然因素决定农业类型及农作物种类。自然因素相对稳定，但某些因素可以人为地改造利用。如温室农业。 ②综合分析社会经济因素:尤其是市场和交通。 （4）农业区位选择举例：如城郊农业的区位选择应考虑以下因素。 ①地价的高低（一般来说，距城镇越近，地价越高，农业生产成本较高，只能选择单位面积产值高的农业类型，例如花卉、乳牛。） ②农业类型的单位面积产量大小（从单位面积产量看，由高到低依次是花卉、乳牛、塘鱼、果园、粮棉等。） ③各种类型农业需水量多少（需水量大的花卉等应选择接近河流、湖泊等水资源丰富的地方。） ④产品对运输的迫切性（鲜花需保鲜，鲜奶易变质，乳牛、花卉等生产应分布在近城镇及交通方便的地方。）

无菌技术一手一钳铺盘法

护理技术操作考核评分标准 操作者姓名科室总分 操作名称一手一钳铺无菌盘法 总 分 实得分 操作项目操作内容 标 准 分 扣原 分因 一、操作 目的将无菌巾铺在干燥的治疗盘内，形成无菌区，放置无菌物品，以供实施治疗 使用 2 二、实施 要点1、仪表：（1）着装整洁、规范（2）指甲清洁平短、不佩戴耳钉、手镯、戒 指等饰物（3）佩戴圆帽，头发不得露于帽外，口罩佩戴规范 5 2、操作用物：治疗盘2个，无菌持物钳，无菌物品（纱布），无菌包（无菌 巾3块）灭菌指示卡，包括贴化学指示胶带），记录卡2张、弯盘、清洁抹 布2块、手表1块 3 3、操作步骤： 1) 评估环境：操作环境是否符合要求（治疗室环境及治疗台） 3 2) 备清洁干燥的治疗台和治疗盘，放治疗盘于适当处 3 3) 六步洗手，戴口罩。 2 4) 检查无菌包有无松散、潮湿、破损，消毒指示胶带有无变色及是否在有 效期内 3 打开无菌包：（1）解开无菌包系带，挽活结 （2）用手依次打开无菌包外层包布的外、左、右角 （3）取无菌钳，用手打开外层包布的内角，用无菌钳依次打 开内层包布的外、左、右内角 （4）检查灭菌指示卡有无变色 12 6) 用无菌钳拖取无菌巾一块，置于内层包布左侧边缘，以一手一钳夹取治 疗巾轻轻打开，由远至近平铺与治疗盘上 8 7) 初步还原包布：用无菌持物钳依次还原内层包布的内、右、左、外角， 用手还原外包布内角 8 8) 备无菌物品置于治疗盘内 6 打开无菌包：（1）用手打开外包布内角 （2）用无菌钳依次打开内包布外、左、右及内角 10 10) 用无菌钳拖取无菌巾一块，置于内层包布左侧边缘，以一手一钳夹取治 疗巾轻轻打开，由近至远盖于无菌物品之上，并注意上下无菌治疗巾对齐（错 位2CM以内） 10 还原无菌包： 用无菌钳依次还原内包布的内、右、左、外角 用手还原外包布的内角，将无菌钳子放回无菌持物罐内 用手还原无菌包外包布的右、左、外角，按“一”字型包好无菌包 10 12) 由近、左、远、右向上折叠治疗巾多余部分 3 13) 记录备盘时间，内容物，并记录开包时间、剩余物品及负责人 2 14) 将无菌包放于同类物品的最前面，以便优先使用，有效期为24小时 2