分子生物学电子教案第九章

?第九章分子生物学研究方法

1．课程教学内容

(1)核酸技术1—基本操作

(2)核酸技术2—克隆技术

(3)核酸技术3—测序

(4)基因表达和表达分析基因定点诱变

(5)蛋白质与核酸的相互作用

(6)其他（热点）技术

2．课程重点、难点

基因克隆技术、杂交技术、测序技术、蛋白质与核酸的相互作用检测技术

3．课程教学要求

掌握基因克隆技术、杂交技术、测序技术、蛋白质与核酸的相互作用检测等各种技术的原理。

本章内容

?核酸的凝胶电泳

?DNA分子的酶切割

?核酸的分子杂交

?基因扩增

?基因的克隆和表达

?细菌的转化

?DNA核苷酸序列分析

?蛋白质的分离与纯化

?研究DNA与蛋白质相互作用的方法

一、核酸的凝胶电泳

基本原理：当一种分子被放置在电场当中时，它们会以一定的速度移向适当的电极。电泳的迁移率：电泳分子在电场作用下的迁移速度，它同电场的强度和电泳分子本身所携带的净电荷成正比。

由于在电泳中使用了一种无反应活性的稳定的支持介质，如琼脂糖和丙烯酰胺，从而降低了对流运动，故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比。

在生理条件下，核酸分子的糖-磷酸骨架中的磷酸基团，是呈离子化状态的。从这个意义上讲，DNA和RNA的多核苷酸链可叫做多聚阴离子，因此，当核酸分子放置在电场中时，它就会向正极移动。

在一定的电场强度下，DNA分子的这种迁移率，取决于核酸分子本身大小和构型。分子量较小的DNA 分子，比分子量较大的分子，具有较紧密的构型，所以其电泳迁移率也就比同等分子量的松散型的开环DNA分子或线性DNA分子要快些。

Gel matrix (胶支持物) is an inserted, jello-like porous material that supports and allows macromolecules to move through.

Agarose (琼脂糖):

(1) a much less resolving power than polyacrylamide,

(2)but can separate DNA molecules of up to tens of kb

DNA can be visualized by staining the gel with fluorescent dyes, such as ethidium bromide (EB 溴化乙锭)

Polyacrylamide (聚丙稀酰胺):

(1)has high resolving capability, and can resolve DNA that differ from each

other as little as a single base pair/nucleotide.

(2)but can only separate DNA over a narrow size range (1 to a few hundred

bp).

Pulsed-field gel electrophoresis (脉冲电泳)

(1)The electric field is applied in pulses that are oriented orthogonally

(直角地) to each other.

(2)Separate DNA molecules according to their molecule weight, as well as to

their shape and topological properties.

(3)Can effectively separate DNA molecules over 30-50 kb and up to several

Mb in length.

二、DNA分子的酶切割

Restriction endonucleases (限制性内切酶) cleave DNA molecules at particular sites

Restriction endonucleases (RE) are the nucleases that cleave DNA at particular sites by the recognition of specific sequences.

RE used in molecular biology typically recognize (识别) short (4-8bp) target sequences that are usually palindromic (回文结构), and cut (切割) at a defined sequence within those sequences. e.g. EcoRI

The random occurrence of the hexameric (六核苷酸的) sequence: 1/4096 (4-6=1/46) (1) Restriction enzymes differ in the recognition specificity: target sites are different.

(2) Restriction enzymes differ in the length they recognized, and thus the frequencies differ.

(3) Restriction enzymes differ in the nature of the DNA ends they generate: blunt/flush ends (平末端), sticky/staggered ends (粘性末端).

(4) Restriction enzymes differ in the cleavage activity.

三、核酸的分子杂交

原理：带有互补的特定核苷酸序列的单链DNA或RNA，当它们混合在一起时，其相应的同源区段将会退火形成双链的结构。如果彼此退火的核酸来自不同的生物有机体，那么如

此形成的双链分子就叫做杂种核酸分子。

在大多数的核酸杂交反应中，经过凝胶电泳分离的DNA或RNA分子，都是在杂交之前，

通过毛细血管作用或电导作用被转移到滤膜上，而且是按其在凝胶中的位置原封不动地

吸印上去。

常用的滤膜有尼龙膜、硝酸纤维素滤膜，叠氮苯氧甲基纤维素滤纸和二乙氨基乙基纤维

素滤膜

核酸杂交通常包括两个步骤：

第一，将核酸样品转移到固体支持物滤膜上，这个过程称为核酸印迹转移

第二，将具有核酸印迹的滤膜同带有放射性标记或其它标记的DNA或RNA探针进行杂交。Southern Blotting：

根据毛细管作用的原理，使在电泳凝胶中分离的 DNA片段转移并结合在适当的滤膜上，然后通过同标记的单链DNA 或RNA探针的杂交作用检测这些被转移的DNA片段，这种实验方法叫做DNA 印迹杂交技术。是由E.Southern于1975年首先设计出来的，故又叫做Southern DNA印迹技术。

Northern Blotting

1979年，J.C.Alwine 等人发展出的一种用于RNA杂交的新方法。将电泳凝胶中的RNA转移到叠氮化的或其它化学修饰的活性滤纸上，通过共价交联作用而使它们永久地结合在一起。称为Northern Blotting

将蛋白质从电泳凝胶中转移并结合到硝酸纤维素滤膜上，然后同放射同位素标记的

特定蛋白的抗体反应，这种技术叫做Western Blotting.

定义：将RNA分子从电泳凝胶转移到硝酸纤维素滤膜或其他化学修饰的活性滤纸上，进行核酸杂交的一种实验方法。

斑点印迹杂交（dot Blotting）：基本原理和操作步骤是通过抽真空的方式将加在多孔过滤进样器上的核酸样品，直接转移到适当的杂交滤膜上，然后同Southern 印迹一样的方式同核酸探针分子杂交。

菌落（噬菌斑）杂交：

1975 年，Mgrunstein和D Hogness根据检测重组体DNA分子的核酸杂交技术原理，对Southern 吸引技术做了一些修改，发展出了一种杂交技术。

在1977年，W.D.Benton和R.W.Davis又发展出了与此类似的筛选含有克隆DNA噬菌体的杂交技术。

菌落杂交或噬菌斑杂交有时也叫做原位杂交，因为生长在培养基平板上的菌落或噬菌斑，按其原来的位置不变地转移到滤膜上，并在原位发生溶菌、DNA变性和杂交。

四、基因扩增

基因扩增的五个方面的内容：

第一，在体外应用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）技术和合成的寡核苷酸引物，导致特定基因的拷贝数发生快速大量的扩增。

第二，通过体外 DNA重组，将目的基因插入到高拷贝数的质粒载体分子上，并转化到适当的寄主细胞，于是在体内随着载体分子的大量复制，目的基因的拷贝数也得到了有效的扩增。

第三，在有些外界环境因子的胁迫下，真核生物的有关细胞被诱发产生适应性反应，从而导致相应的保卫基因的产生和明显的扩增。

第四，程序基因扩增

第五，在生物的进化过程中发生的基因加倍与扩增，结果使相关基因在基因组上聚集成簇。

聚合酶链式反应：是美国Cetus公司人类遗传研究室的科学家K B Mullis于1983年发明的一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法。

PCR技术的基本原理：首先使双链的DNA分子变性为单链DNA分子

然后DNA聚合酶以单链DNA为模板并利用反应混合物中的四种脱氧核苷三磷酸合成新生 DNA 互补链。

DNA聚合酶需要有一小段双链DNA来启动新链的合成。因此新合成的DNA链的起点，是由加入在反应混合物中的一对寡核苷酸引物在模板DNA链两端的退火决定的。

在为每一条链均提供一段寡核苷酸引物的情况下，两条单链都可以作为合成新生互补链的模板。

在每一条新合成的DNA链上都具有新的引物结合位点，然后反应混合物经再次加热使新旧链分开，并加入下轮的反应循环，即引物杂交、 DNA合成和链的分离。

PCR反应的最后结果是，经过几次循环之后，反应混合物中所含有的双链DNA分子数，即两条引物结合位点之间的DNA区段的拷贝数，理论上的拷贝数2n .

PCR技术的两个特点：第一，能够知道特定DNA序列的合成；第二，特定的DNA区段得到了迅速大量的扩增。例如，经过30次循环，便可使靶DNA得到109 倍的扩增。

PCR反应及多次重复进行的温度周期，而每一个温度循环周期均是由高温变性、低温退火及适温延伸等三个步骤：首先是将含有待扩增DNA样品的反应混合物放置在高温环境加热1分钟，使双链 DNA发生变性，分离出单链的模板DNA；然后降低反应温度使专门设计的一对寡核苷酸引物与两条单链模板DNA发生退火作用，结合在靶DNA区段两端的互补序列位置上；最后，将反应混合物的温度上升到72度左右保温1.5分钟,这时在DNA 聚合酶的作用下，链得到延伸。

寡核苷酸引物：

引物长度：通常在15-30mers

简并引物：是一类由寡核苷酸组成的混合物，彼此仅有一个或几个核苷酸的差

异。

嵌套引物

Taq DNA聚合酶：Klenow片段热敏感，易失活；反应温度低，出现错配碱基；1986年，从75度的热泉中的细菌中分离纯化出Taq酶。与大肠杆菌DNA聚合酶相比， Taq酶使PCR的特异性和敏感性高

PCR 技术的应用：基因组克隆、反向PCR和染色体步移、不对称 PCR 与DNA序列测定、RT-PCR 与RNA分析、基因的体外诱变、基因组的比较研究

五、基因的克隆和表达

Processes (过程) of DNA cloning：

1）Form the recombinant DNA molecules (重组DNA) by inserting your interested DNA fragments into a proper vector (载体). (Require restriction enzymes and ligase)

2）Transform (转化) the recombinant DNA molecules into competent cells (感受态细胞).

3）Propagation of the cells containing the recombinant DNA to form a clone (克隆), a set of identical cells containing the same recombinant DNA.

4）Select the desired clones using the selective marker.

5）Host organisms/cells（宿主） : where the plasmids get multiplied and propagated faithfully, which is crucial for DNA cloning.

---Prokaryotic host(原核宿主): E. coli ( most cases)

---Eukaryotic host（真核宿主）: Yeast Saccharomyces cerevisiae (large fragments of human genome)

General features of a Vector（作为载体的一般特征）：1）They contain an origin of replication and can autonomously replicating DNA independent of host’s genome. 2）Easily to be isolated from the host cell. Most are circular, some are linear (e.g. YAC vector). 3）Contains at least one selective marker, which allows host cells containing the vector to be selected amongst those which do not. 4）Contains a multiple cloning site (MCS) to be cut by restriction enzymes for DNA manipulation.

Cloning vectors (克隆载体): allowing the exogenous DNA to be inserted, stored, and manipulated at DNA level.

E. coli cloning vector (circular): plasmids (质粒)、bacteriophages (l and M13) (噬菌体)、 plasmid-bacteriophage l hybrids (cosmids) (考斯质粒－质粒和噬菌体

杂和体)。

Yeast cloning vector: yeast artificial chromosomes (YACs，酵母人工染色体) (Linear)。

Plasmids: small, extrachromosomal circular molecules, from 2 to ~200 kb in size, which exist in multiple copies within the host cells.

Contain an origin of replication（复制起点）, at least one selective marker （选择标记） and multiple cloning site（多克隆位点）.

Example of selective marker: ampr gene encoding the enzyme b-lactamse which degrades penicillin antibiotics such as ampicillin.（抗氨苄）

The commonly used plasmid are small in size (~ 3 kb)

Libraries of DNA molecules can be created by cloning (Genomic library and cDNA library)：

A DNA library (DNA文库) is a population of identical vectors that each contains a different DNA insert.

Genomic Library (基因组文库) : the DNA inserts in a DNA library is derived from restriction digestion or physical shearing of the genomic DNA.

cDNA library (cDNA文库) : the DNA inserts in a DNA library is converted from the mRNAs of a tissue, a cell type or an organism. cDNA stands for the DNA copied from mRNA.

cDNA library generation：The mRNAs are firstly reverse transcript into cDNA, and these cDNA, both full length and partial, are cloned to make the cDNA library. Colony screening ：

1）Antibiotic screening (抗生素选择)： only the recombinant plasmids grow on the antibiotic-containing plate. 2）Blue-white screening (蓝白斑选择): DNA insertion in the vector shuts down the LacZ gene expression, and turns the colony（菌落）to white. 3）Colony hybridization screening (菌落杂交筛选) from a library. Analysis of a clone ：1）Restriction mapping: digestion of the plasmid prepared from a clone with restriction enzymes to investigate if the interested DNA is inserted the recombinant plasmid. 2）Sequencing the cloned DNA to see if the inserted DNA maintains the correct sequence.

六、细菌的转化

转化：指一种细菌菌株由于捕获了来自另一种细菌菌株的DNA，而导致性状特征发生遗传性改变的生命过程。

感受态：处于感受态的细胞，某种蛋白能够同核酸作用的复合形式。

大肠杆菌的转化：1）用CaCl2处理大肠杆菌细胞，制备感受态细胞；2）将正在生

长的大肠杆菌在0度下加入到低渗的氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀（形成原生质球）；3）同加入在转化混合物中的质粒DNA形成一种粘着在细胞表面上的对Dnase抗性的复合物。4）转移到42 度下作短暂的热应激，这种复合物便会被细菌吸收；5）在富裕培养基中生长一段时间，再涂布在选择性的培养基中分离转化子。

细菌转化效率

影响细菌转化效率的因素：DNA浓度、纯度和构型，转化细胞的生理状态及其在 CaCl2处理和贮藏之后的成活率，以及转化的环境条件（温度、PH值、离子浓度）。

环型的质粒DNA分子进入细胞，能够抗御细胞中固有的核酸酶的作用，而线性的DNA 分子，则对自由末端的降解作用是极其敏感的，环型DNA比线性的高出10-100倍。

对于同样的转化DNA而言，大分子量的转化效率要比小分子量的低一些。以每微克

质粒DNA 出现的转化子菌落数表示的转化频率。

应用与大肠杆菌转化程序相类似的方法，也可以成功地转化各种真核细胞，将酵母

用酶处理消化细胞壁之后，就会变成原生质体

在具有PEG和CaCl2的转化反应体系中，让酵母原生质体同转化DNA接触，那么由

于原生质体在生理上得到恢复并再生出细胞壁后，将其涂布在选择性培养基上便可以鉴

定出转座子。

七、DNA核苷酸序列分析

1、Sanger 双脱氧链终止法：

利用DNA聚合酶和双脱氧链终止物测定DNA核苷酸顺序的方法，是由英国科学家Sanger 等1977年发明的。

其基本原理是利用了DNA聚合酶所具有的两种酶催化反应的特性：第一，DNA聚合酶能够利用单链的DNA作模板，合成出其互补链；第二，DNA聚合酶能够利用2 ’,3’- 双脱氧核苷三磷酸作底物，使之参入到寡核苷酸链的3’末端，从而终止链的生长。

2）Maxam-Gilbert化学修饰法：

原理：用化学试剂处理具末端放射性标记的DNA片段，造成碱基的特异性切割，由此产生不同长度的链的反应混合物，经凝胶电泳按大小分离和放射自显影后，便可根据x 光片底版上所显现的相应谱带，直接读出待测DNA片段的核苷酸序列。

3）DNA杂交测序：

步骤：将待测定的靶 DNA分子同一组已知其核苷酸顺序的寡核苷酸探针进行杂交；对能够同靶 DNA分子形成完全双链体分子之间的碱基重叠关系比较分析，并据此推算靶DNA 的核苷酸序列结构。

八、蛋白质相关技术

Protein purification (蛋白质纯化) 、Affinity chromatography can facilitate more rapid protein purification (亲和层析纯化)、Protein separation by PAGE gel electrophoresis (蛋白质分离) and identification by Western analysis、Protein sequencing (蛋白质测序)、Proteomics (蛋白质组学)。

九、研究DNA与蛋白质相互作用的方法

凝胶阻滞试验

DNaseI足迹实验

甲基化干扰实验

凝胶阻滞试验：又叫 DNA迁移率变动实验（DNA mobility shift assay）,是1980年代初出现的用于体外研究与蛋白质相互作用的一种特殊的电泳技术。

当DNA 分子结合上一种蛋白质,由于分子量加大在凝胶中的迁移作用便会受到阻滞，朝正极移动的距离相应的缩短了。所以当特定的 DNA片段同细胞提取物混合之后，如果其在凝胶中的距离缩小了说明它同细胞提取物中的某种特殊的蛋白质分子发生了结合作用。

DNaseI足迹实验

是一类用于检测与特定的蛋白质结合的DNA序列及特性的专门技术

足迹实验的一个明显的优点是可以形象地展示出一种特殊的蛋白因子同特定 DNA 片段之间的结合区域。

甲基化干扰实验（methylation interference assay）

根据DMS能够使G残基甲基化，而六氢吡啶又能够特异切割甲基化的G残基这一原理还设计出另一种研究DNA与蛋白质相互作用的实验方法。

甲基化干扰试验的具体操作：先用DMS处理靶DNA，并控制反应条件，使之达到平均每条DNA分子只有一个G残基被甲基化；而后将这些局部甲基化的DNA群体同含有DNA 结合蛋白的适当的细胞提取物一道温育，并做凝胶阻滞试验。

分子生物学课程教学大纲(精)

分子生物学课程教学大纲 课程简介 一、课程简介 分子生物学主要研究核酸蛋白质等所有生物大分子的结构、功能及基因结构、基因表达，以及生物大分子互相作用以及生理功能，以此了解不同生命形式特殊规律的化学和物理的基础。分子生物化学是在分子水平上研究生命奥秘的学科，代表当前生命科学的主流和发展的趋势。医学分子生物学是分子生物学的重要分支，本课程包括三方面的内容：一是介绍分子生物学基本原理；二是阐述某些疾病发生和发展的分子机制；三是介绍分子生物学技术在临床上的应用。 本大纲适用于夜大专升本等专业学生。 二、总体要求 通过本课程学习，要求学生做到： 1. 掌握、熟悉分子生物学的基本原理以及与相关临床知识的联系。 2. 学会应用基本分子生物学技术进行生物大分子的检测，并能应用于临床。 3. 树立良好的学习态度，培养创新能力与实践能力，注重知识、能力、素质的协调发展。 三、时数分配

绪论 学习目的和要求 通过本章学习，掌握医学分子生物学的定义、内容。 课程内容 一、介绍医学分子生物学的定义。 二、介绍医学分子生物学的发展历史。 三、医学分子生物学的现状与未来。 考核知识点 一、医学分子生物学的定义。 二、医学分子生物学的内容。 三、医学分子生物学发展过程中的一些重要历史事件。 四、医学分子生物学的现状与未来。 考核要求 一、掌握 医学分子生物学的定义。 二、熟悉 医学分子生物学主要解决的问题。 三、了解 1. 医学分子生物学发展过程中的一些重要历史事件。 2. 医学分子生物学的未来发展方向。 第一章基因 学习目的和要求 通过本章学习，掌握基因的基本概念、基因的结构特点及基因的遗传功能，了解基因突变的机制及其与疾病的关系。 课程内容 一、基因的基本概念及基因的结构特点 1．核酸是遗传信息的载体 大部分生物中构成基因的核酸物质是DNA, 少数生物（如RNA病毒）中是RNA。 2．基因的基本概念 基因的现代分子生物学概念。 3．基因的结构特点 基因的基本结构包括结构基因和转录调控序列。原核生物的结构基因是连续的，而真核生物的结构基因是不连续的，由内含子和外显子组成。原核生物基因的转录调控序列包括启动子、终止子、操纵元件、正调控蛋白结合位点等。真核生物基因的转录调控序列称为顺式调控元件或顺式作用元件，包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 二、结构基因中贮存的遗传信息

政治学原理整理分析

政治学原理整理 第一章 1,马克思主义的政治观是什么？ 政治是经济的最集中的表现：政治就是各阶级之间的斗争：政治就是参与国家事务，给国家定方向，确定国家活动的形式·任务和内容：政治是一门科学，是一种艺术。总的来说，马克思主义的政治观是认识世界和改造世界的重要理论，为人类认识政治现象作出革命性贡献。 2，如何从系统论的角度认识政治 政治系统论（Systems Approach）的代表人物是戴维·伊斯顿。在．“什么是政治”部分，我们已涉及过系统理论。任何系统都有一些要素，政治系统的要素是输入、输出及反馈，这些也是政治系统理论的主要概念。从输入――输出来分析政治系统，给人们提供了一种宏观的政治思维方法。系统论主要关心的是系统内输入与输出的关系。但系统与环境的关系如何处理？这是结构一功能分析所关心的问题。 政治系统论运用了系统论和控制论的一般原理，不注重实用国家这种模糊的概念，而以政

治系统为自己的基本研究对象，从宏观角度对政治过程，特别是公共政策制定与执行中的价值分配进行研究。它首先把政治看成是一个既有层次分工而又有完整系统地有机整体，即政治系统，政治现象是这个系统整体的组成部分，政治系统内部的各个部门、各个环节和各个要素以及系统内部和外部环境之间都是相互联系、相互影响和相互制约的。由此，政治系统论把政治的互动行为当作政治分析的基本要素，主张以政治系统的平衡和稳定为目标，着重分析系统的平衡和自我维持。其主要代表人物有戴维·伊斯顿、莫顿·卡普兰等。 3，什么是政治哲学和政治科学？ 政治哲学：指对政治现实进行价值的判断、评价和说明所形成的思想体系，其研究重点在于力图阐明政治的价值、政治的实质和政治分析的概念和逻辑，其方法主要是思辨式。 政治科学：政治科学是以人类社会的政治现象为研究对象的学科，属于社会人文科学，有广义、狭义两种不同的内涵。广义政治科学即政治学，它以国家政权为中心研究政治制度、政治过程、政治行为、政治活动、政治关系及其一般发展规

小分子肽在高血压中的作用

小分子肽在高血压中的作用 摘要：心血管生物活性多肽是维持人体生命活动最重要的物质基础，它们在调节和整合心血管系统的生长发育及疾病的发生发展等方面均起到了重要的作用。小分子活性多肽是心血管活性多肽的一大类，具有分子量小（相对分子质量一般小于10000）、结构简单、组织分布广泛、生物效应多样、合成与代谢迅速和免疫原性低等特点，是心血管自稳态调节的最重要成分，其功能紊乱具有重要的发病学意义。高血压是最常见的心血管疾病之一，神经、体液因素网络调节异常和平衡失调以及心血管局部旁/自分泌功能紊乱是高血压病的发病基础，高血压发病过程中多种小分子活性肽参与其中，如肾素-血管紧张素系统（renin angiotensin system, RAS）、钠尿肽（natriuretic peptides，NPs）、内皮素等，以及新发现的Apelin、偶联因子6（Coupling Factor 6）等，形成复杂的网络调节系统，共同参与高血压的发生和发展。对小分子活性肽在高血压中作用的研究，可进一步认识高血压的发病机制，以小分子活性肽为靶点防治高血压可能具有广阔的临床应用前景。 近年心血管分子生物学、反向生理学、反向药理学和反向药物学以及孤儿G蛋白偶联受体策略的应用极大促进了心血管活性多肽的发现及其功能的研究，开拓了生物活性分子研究的新领。这些活性多肽大多都是小分子物质，称作小分子肽，是心血管自稳态调节的最重要成分，其功能紊乱具有重要的发病学意义。近年来，心血管活性多肽对高血压调节作用及在高血压发生机制及诊断、治疗和早期干预措施中的作用正被大家重视，其基础和临床研究不断取得新的进展，已成为当前生命科学研究中最活跃、发展最迅速的领域之一。本文将主要从最近几年在小分子活性肽的生物学效应、参与高血压发病的机理以及其在高血压中可能具有的临床应用等方面的研究作一论述。 一、肾素-血管紧张素体系（renin angiotensin system, RAS） 肾素-血管紧张素系统（renin angiotensin system, RAS）)是人体经典的循环调节系统，通过对心脏、血管、肾脏的调节维持机体水、电解质及血压的平衡，是人类生理功能的一个重要调节机制。它的过度激活是高血压和其他心血管疾病发展的重要决定因素，并因此成为高血压治疗的重要靶点。近年来发现组织中包括血管壁、心脏、中枢神经、肾皮质髓质中亦有肾素一血管紧张素系统，这又引申出新的RAAS的作用机制：局部组织性RAS，它在细胞中通过自分泌、旁分泌和胞分泌各自在其组织细胞发挥作用。随着近年来研究的深入，又发现了血管紧张素转换酶(ACE)的同族物——ACE2以及ACE的各种旁代谢产物如血管紧张素1-9(Angl-9)、血管紧张素1-7(Ang 1-7)以及Ang 1-7的受体Mas等，其中ACE2、Ang 1-7成为研究的热点，它们在血压调节中发挥着与ACE、AngⅡ相抗衡的作用，目前被看成是心血管系统保护因子。 Ang1-7是近年发现的Ang新成员，在ACE2、脯氨基内肽酶、中性肽酶等酶的作用下水解水解Ang II、Ang I产生，与G蛋白偶联Mas受体结合，从而形成ACE2-Ang(1-7)-Mas轴，拮抗传统RAS中关键轴ACE-Ang lI-AT1的生物学活性，在体内发挥广泛的生物学效应，如强大的利钠利尿作用，具有强大的舒张血管、抗细胞增殖等作用，以及增强缓激肽效应发挥降低血压的作用。新的RAS体系参与血压调控主要依赖于ACE与AngⅡ，ACE2与Ang(1-7)两条途径，一条起升压效应；另一条对抗前一路径，引起血压下降。ACE与ACE2一旦失衡，将使体内血压改变。在ACE2相对缺乏状态，AngⅡ作用占优势，导致血管收缩增强，引发高血压。 大量研究已表明，肾素-血管紧张素系统在高血压的发病以及高血压所引起的心脏和血管重塑等病理生理过程中发挥了重要的作用。心肌重塑是高血压最常见、最重要的并发症，它是导致多种心血管疾病独立的危险因子。最近发现，ACE2-Ang（1-7）-AT1轴在抑制心肌重塑方面发挥重要的作用。用慢病毒携带ACE2基因体内转染自发性高血压大鼠（SHR），ACE2基因

分子生物学考试复习资料 山东大学

1.复制和转录的异同：共同点：反应都是核苷酸的聚合过程，模版是DNA，酶依赖DNA的聚合酶，化学键3，5磷酸二酯键，方向5-3延伸，配对是碱基配对规律。不同点：底物不同分别是dNTP和NTP ；酶不同分别是DNA聚合酶和RNA 聚合酶；模版不同，分别是整个染色体双链DNA和部分基因模板链转录；产物不同，分别是子代双链DNA和mtrRNA ；引物分别是需要和不需要；碱基配对分别是A=T，GC和A=UT=AGC 2.转录的过程：模板DNA原料：NTP（ATP,GTP,CTP,UTP）酶：RNA聚合酶（RNA-pol）其它蛋白质因子：如ρ因子，转录因子(TF)等. A转录起始过程，RNA聚合酶全酶结合，DNA双链解开，在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物b转录延长，伽马o亚基脱落，核心酶变构，与，模版结合松弛，沿着DNA模板前移在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长，合成方向沿5-3进行c终止转录RNA聚合酶在DNA模板上停止前进，转录产物RNA链在转录复合物上脱落下来。 3.基因克隆的步骤：目的基因的获取；目的基因与载体的拼接，将重组体导入受体细胞，重组体筛选和鉴定，扩增和表达a获取，从基因组文库中制备，从CDNA 文库中制备，PCR扩增目的基因，人工合成目的基因b目的基因片段与适当的载体经限制性内切酶剪切后，再在DNA连接酶的催化下即可相互连接形成人工重组体，粘性末端连接，平端连接，同聚物加尾连接，人工头连接c氯化钙法，电穿孔法，脂质体转染法，显微注射法d遗传学法，分子杂交法，免疫化学筛选法，PCR筛选法e重组体的扩增与表达。 4.寡核苷酸定点诱变技术所依据的原理是:首先制备单链核酸,即按体外DNA重组技术，将待诱变的目的基因插入到M13噬菌体上，制备此种含有目的基因的M13单链DNA，即正链DNA。再使用化学合成的含有突变碱基的寡核苷酸短片段作引物，启动M13单链DNA分子进行复制，随后这段寡核苷酸引物便成为新合成的DNA子链的一个组成部分。因此所产生的新链便具有已发生突变的碱基序列,将其转入细胞后,经过不断复制,即可获得突变的DNA分子,再经表达即可获得改造后蛋白质.为了使目的基因的特定位点发生突变，所设计的寡核苷酸引物的序列除了所需的突变碱基外，其余的则与目的基因编码链的特定区段完全互补。B 诱变过程1)合成含有目的基因的正链DNA；2)合成含有特殊突变碱基的引物；3）

分子生物学课程教学大纲

《分子生物学》课程教学大纲 课程编号：233201 课程名称：《分子生物学》 总学时数：64 实验学时：0 先修课及后续课：先修课为《生物化学》，《遗传学》；后续课为《基因工程》 一、说明部分 1. 课程性质：生物技术专业课，必修 2. 教学目标及意义 本课程是高等院校生物专业的专业课。旨在使学生掌握分子生物学的基本知识、基本概念，并了解分子生物学的发展趋势及应用前景。 3. 教学内容和要求 本课程安排在学生完成《生物化学》、《遗传学》等有关基础和专业基础课程之后的第六学期。内容上注意与以上课程的衔接，并避免不必要的重复。同时注意与后续课程《基因工程》等课程的衔接。课堂教学应力求使学生掌握基本概念，了解分子生物学的发展历史以及最新研究成果；熟练掌握DNA的结构与功能、DNA的复制、RNA的转录、蛋白质的合成、RNA在蛋白质合成中的功能、遗传密码、基因表达与调控的本质、基因组与比较基因组学；由于该课程内容繁多，发展迅速，故授课教师在吃透教材基础上，应广泛阅读相关参考资料，紧跟本学科发展，随时补充新内容，使学生及时了解本学科的重要进展及发展动态。分子生物学的发展依赖于现代分析和研究技术，因此，配合分子生物学实验课程，讲解一些分子生物学的重要研究方法。 4. 教学重点，难点 重点：DNA的结构与功能；DNA的转座；基因的表达与调控 难点：基因表达的调控 5. 教学方法与手段 在教学方法上采取课堂讲授为主，辅以多媒体课件、提问、综述、实验、作业、教学辅助材料等，以加强学生对理论知识的消化和理解，在教学过程应注意积极启发学生的思维，培养学生发现问题和解决问题的能力。 6. 教材及主要参考书 教材：朱玉贤，李毅.《现代分子生物学》，第三版；北京：高等教育出版社.2007. 主要参考书： （1）杨岐生.《分子生物学基础》，杭州：浙江大学出版社.1998. （2）郜金荣等.《分子生物学》，武汉：武汉大学出版社.1999. （3）阎隆飞，张玉麟.《分子生物学》，北京：中国农业大学出版社.1997. （4）魏群，分子生物学实验指导.北京：高等教育出版社，2003. （5）李振刚.《分子遗传学》，北京：科学出版社，2000. （6）Weaver R. Molecular Biology. 2nd Edition.北京：科学出版社，2001.

政治学基础课后习题参考答案

政治学基础课后习题参考答案 第一篇政治与政治学 第一讲政治 一．名词解释 1.政治： 是人们在特定社会经济关系及其所表现的利益关系基础上，社会成员通过社会公共权力确认和保障其权利并实现其利益的一种社会关系。 2.部落联盟： 若干胞族结合而形成了部落，部落有自己的生活区域和方言。有亲属关系和仅在方言上有差异的共同语言的若干部落，出于共同的需要而形成的社会组织，则构成了部落联盟。 3.管理政治观分析： 政治是公共事务的管理活动，把握了政治的公众性和管理性特征。但并没有说明公众性的含义，忽视了统治性的一面。 4.氏族民主制 为了维护和协调氏族社会中的这些共同利益与利益差异和矛盾，规约氏族成员的社会活动，氏族社会的公共权力及其机关应运而生。 5.国家政权 是指掌握国家主权的政治组织及其所掌握的政治权力，以维护对社会的统治和管理。国家政权是国家的具体化身，通常都是通过国家政权来理解国家的。 二．简答 1.政治的起源和发展是如何进行的？ 政治起源于人类原始社会的氏族公社阶段。在原始氏族社会中，存在着氏族、胞族、部落和部落联盟四级组织。在这四组织内部，存在着利益的差别和共同的利益。为了维护和协调氏族社会活动，氏族社会的公共权力及其机关应运而生。氏族组织内的权力带着道德强制性，在特定情况下也具有暴力强制性。原始社会中的这种政治，被称为氏族民主制。 在奴隶社会、封建社会和资本主义社会，阶级利益的对立和政治统治是这些社会政治关系的基本特征，同时社会公共权力也有协调和管理的另一面。 社会主义社会公有制的建立，消除了阶级利益对立的基础，但社会利益差别仍然存在。社会政治以非阶级性的利益差别的协调和公共利益的维护及实现为主要特征，但社会公共权力仍然有统治的性质。 到共产主义社会，旧式分工和三大差别消灭，人类社会的政治关系不复存在，人类再回到无政治社会。 2.怎样理解政治的涵义及其本质？ 确定政治的内涵应满足三个必要条件：一是政治这一范畴的周延性：二是政治这一范畴的确定性；三是政治这一范畴的本质性。 根据马克思主义对于政治含义的理解。把政治定义为：政治是人们在特定社会经济关系及其所表现的利益关系基础上，社会成员通过社会公共权力确认和保障其权利并实现其利益的一种社会关系。 这一定义有三基本点：其一，强调社会政治关系是围绕着一切特定利益，借助于一切社会公共权力形成的；其二，强调一切借助于社会公共权力来实现和形成的利益要求和社会关系才具有政治性；其三，指出了政治的本质内容是政治关系。一方面它是一定经济基础之上

基因生物学的研究现状

基因生物学的研究现状 摘要：本文介绍了自人类基因计划实施以来，基因技术在生物医药等领域的主要应用途径及对其发展方向与开发应用前景作了展望。 关键词：基因解剖学；基因生理学；基因病理学；基因信息学；基因药物学与治疗学。 The current research status of biology of genes Abstract：This paper introduced the human gene plan since the implementation of genetic technology biological medicine is mainly used in the field of ways and the developing direction and development prospect are discussed. Key words:Gene anatomy; Gene physiology; Gene pathology; Gene informatics; Gene pharmacology and therapeutic. 前言： 近20年来，分子生物学取得了飞速的发展，人类基因组计划、人体14万个基因，30万个核苷酸的序列即将在2003年提前完成。医学生物学正面临着一次更深刻的革命。研究基因拼接、转录、表达、损伤、修复和稳定性的调节机制，阐明基因转录和表达不同蛋白质的规律性，研究蛋白质及其降解产物的功能及其多样性，分析蛋白质结构与功能的关系以及蛋白质不同片段之间相互调节的规律，具有极其专业的生理、病理意义。 正文： 1.基因“解剖学”： 研究基因的结构、组成、分布和变异。估计人体有3×109个核苷酸，但仅2%～3%可以编码蛋白质。那么剩余的90%以上的核苷酸的功能是什么呢？目前在GenBank注册的人类EST已逾300万条，而且每天以1 500条EST的速度增加。现在应用定位克隆所获得的基因，90%以上都可在EST库中寻找到同源序列，但是在108万条EST中只有3.5万条在染色体上定位；人体内估计有5～15万个基因，现在已克隆基因约近2万个，但明确有功能的不足2 000个，即使已知功能的基因，其确切的作用还需进一步验证。现在了解，从单一克隆中筛选出的基因有很大的局限性和变异性，有人推测每100～1 000个核苷酸序列中就有一个核苷酸的变异，人类约有300万个有差异的序列，这些有差异的不同基因可以遗传，表现为不同基因型和多态型，决定人类的种族和个体的差异，决定不同人群的疾病易感性和药物治疗的敏感性，它是我们进行疾病诊断、预防和药物选择的分子基础，即所谓单核苷酸序列多态性（SNP）。现在人们热衷于克隆cDNA和编码蛋白的核苷酸序列，这是必要的，但非编码的核苷酸序列，包括卫星DNA（小和微小卫星序列）、多拷贝重复序列、和众多调控序列，亦具有十分重要的意义。此外，核苷酸序列在染色体上的排列亦不是无序的，一定有着内在规律和自身的特点，还可能存在着新的多联密码。只有深刻揭示核苷酸排列的规律和意义，才能真正了解生命的奥秘。 2.基因“生理学”：

模电第九章

第9章 功率放大电路 自测题 一、选择合适的答案填入括号内。 (1)功率放大电路的最大输出功率是在输入电压为正弦波时，输出基本不失真情况下，负载上可获得的最大( A )。 A.交流功率 B.直流功率 C.平均功率 (2)功率放大电路的转换效率是指( B )。 A.输出功率与晶体管所消耗的功率之比； B.最大输出功率与电源提供的平均功率之比； C.晶体管所消耗的功率与电源提供的平均功率之比。 (3) 在选择功放电路中的晶体管时，应当特别注意的参数有( BDE )。 A ．β B ．I CM C ．I CBO D ．U CEO E ．P CM F ．f T (4) 若图T9.1所示电路中晶体管饱和管压降的数值为CES U ，则最大输出功率P OM =( C )。 A.2 ()2CC CES L V U R - B.21()2CC CES L V U R - C.2 1()22CC CES L V U R - 图T9.1 图T9.2 二、电路如图T9.2 所示，已知T l 和T 2的饱和管压降2CES U V =，直流功耗可忽略不计。 回答下列问题： (1)R 3、R 4 和T 3的作用是什么？ (2)负载上可能获得的最大输出功率P om 和电路的转换效率η各为多少？ (3)设最大输入电压的有效值为1V 。为了使电路的最大不失真输出电压的峰值达到16V ，电阻R 6至少应取多少千欧？ 解：(1)消除交越失真。 (2)最大输出功率和效率分别为：

2 ()162CC CES om L V U P W R -==, 69.8%4CC CES CC V U V πη-=?≈ (3)由题意知，电压放大倍数为： 61111.3u R A R =+ ≥== ∴61(11.31)10.3R R k ≥-=Ω

山东大学分子生物学相关资料

Section A - Cells and macromolecules 1．The glycosylation of secreted proteins takes place in the . . . A mitochondria. B peroxisomes. C endoplasmic reticulum. D nucleus. 2．Which of the following is an example of a nucleoprotein? A keratin. B chromatin. C histone. D proteoglycan. 3．Which of the following is not a polysaccharide? A chitin. B amylopectin. C glycosaminoglycan. D glycerol. 4. Transmembrane proteins A join two lipid bilayers together. B have intra- and extracellular domains. C are contained completely within the membrane. D are easily removed from the membrane. Section B - Protein structure 1. Which of the following is an imino acid? A proline. B hydroxy lysine. C tryptophan. D histidine. 2．Protein family members in different species that carry out the same biochemical role are described as . . . A paralogs. B structural analogs. C heterologs. D orthologs. 3. Which of the following is not a protein secondary structure? A α-helix. B triple helix. C double helix. D ?-pleated sheet. 4．In isoelectric focusing, proteins are separated . A in a pH gradient. B in a salt gradient. C in a density gradient. D in a temperature gradient. 5．Edman degradation sequences peptides . . .

分子生物学课程(现代生物学精要速览中文版)

《分子生物学课程》教案 2007～2008学年第 1 学期 授课专业：生物技术 课程名称：分子生物学 主讲教师：何宁佳 查幸福 赵爱春

课程说明 一、课程名称：分子生物学 二、总课时数：45 三、先修课程：基因工程原理 四、使用教材： PC Turner, AG McLennan, AD Bates&MRH White, 《Instant notes in Molecular Biology》, 科学出版社，2004年1月第八次印刷 五、教学参考书： 1 PC特纳、AG麦克伦南、AD贝茨、MRH怀特，《分子生物学-现代生物学精要速览中文版》，科学出版社，2004年8月第七次印刷。 2 朱玉贤，李毅编著《现代分子生物学》，第二版，高等教育出版社，2004年1月第3次印刷。 六、考核方式：理论课采用闭卷考试的方法，总成绩，平时成绩30%，中期考试10%，期末考试60% 七、教案编写说明： 教案又称课时授课计划,是任课教师的教学实施方案。任课教师应遵循专业教学计划制订的培养目标， 以教学大纲为依据，在熟悉教材、了解学生的基础上，结合教学实践经验，提前编写设计好每门课程每个 章、节或主题的全部教学活动。教案可以按每堂课（指同一主题连续1~2节课）设计编写。教案编写说明 如下： 1、编号：按施教的顺序标明序号。 2、教学课型表示所授课程的类型，请在相应课型栏内选择打“√”。 3、题目：标明章、节或主题。 4、教学内容：是授课的核心。将授课的内容按逻辑层次，有序设计编排，必要时标以“*”、“#”“？” 符号分别表示重点、难点或疑点。 5、教学方式既教学方法，如讲授、讨论、示教、指导等。教学手段指教科书、板书、多媒体、模型、 标本、挂图、音像等教学工具。 6、讨论、思考题和作业：提出若干问题以供讨论，或作为课后复习时思考，亦可要求学生作为作业 来完成，以供考核之用。 7、参考书目：列出参考书籍、有关资料。 8、日期的填写系指本堂课授课的时间。

政治学原理判断题复习

《政治学原理》判断题复习提要 判断题： 导论： 1、政治是人类生存的一个无可避免的事实，每个人都在某一时期以某种方式卷入某种政治体系。（对） 2、政治是人类过一种有组织的社会生活不可缺少的要素，是人们组织安排集体生活的核心机制。（对） ３、古希腊的亚里士多德专门著有《政治学》，他认为政治学是人类最高的学问，因为它研究的是个人之善的问题。（错） 4、从理论上讲，一个秩序良好的社会，必须是一个合理划分“公共领域”和“私人领域”界限的社会。（对） 第一章 判断题 1、16世纪意大利政治学者马基雅维利认为，政治学主要研究君主如何获得和运用、保持权力。（对） 2、16世纪意大利政治学家马基雅维利在西方思想史上率先把道德与政治权力分开来，认为政治本质上就是获取并保持权力，政治的手段则是玩弄权术。（对） 3、作为一种特定的社会关系，政治是经济的集中体现。（对） 4、20世纪80年代，随着新制度主义的兴起，制度被认为是政治现象产生和变化的基本原因和内在变量，因此成为在西方政治学研究的重要角度。（对） 第二章 判断题 1、道家的政治学说以“兼爱”、“非攻”为思想核心，主张以缓和社会矛盾来维持统治。（错） 2、墨子的政治学说以“法自然”为中心，在统治手法上强调“无为而治”。（错） 3、公元前140年汉武帝时，董仲舒改造孔孟创立的儒家学说，提出“罢黜百家独尊儒术”的主张，开始使得儒家的政治学说具有独一无二的地位。（对） 4、从学科的发展角度来看，作为一门独立的学科，政治学在中国古代社会就已经形成。（错）５、亚里士多德创立了“理念论”，并由此出发，阐述了社会各等级各安其位、各守其序、各司其职的“理想国”和实现智慧、理性相统一的“哲学王”统治理论。（错） 6、使神学与政治理论分家的是托马斯·阿奎那，他被视为近代西方政治科学的奠基人。（错） 7、行为主义就是坚信社会科学可以建立在可观察的人类行为基础之上、并只能就可量化的数据展开研究的观点。（对） 第三章 判断题： 1、公共权力指的是公共行为主体对公共行为客体的制约能力和力量。（对） 2、英国政治学家密尔（John Mill）将整个社会事务划分为“公共领域”和“私人领域” 两个部分，认为国家权力能够干预的只能是公共领域范围内的事。（对） 3、法国思想家孟德斯鸠在“社会契约论”的基础上，进一步引出“人民主权学说”，认为 政治权力最终数于人民，这成为现代民主共和制的理论基础。（错） 4、权利观念起源于１７世纪和１８世纪，最早来自自然权利或天赋权利的思想。（对）

心肌梗死心脏康复的循证医学证据

8 ● 专题笔谈 ● 《中国医学前沿杂志（电子版）》2013年第5卷第9期 心肌梗死心脏康复的循证医学证据 白瑾，张永珍 （北京大学第三医院　心内科　卫生部心血管分子生物学与调节肽重点实验室及分子心血管学教育部重点实验室，北京　100191） 基金项目：国家“十二五”科技支撑计划(2011BAI11B08)；北京市自然科学基金(7122200) 通讯作者：张永珍E-mail ：zhangy_zhen@https://www.sodocs.net/doc/8810565389.html, 冠心病是目前人类死亡的首要原因之一，其中急性心肌梗死（AMI ）是其最严重的临床类型。急性ST 段抬高心肌梗死诊疗指南推荐的标准化治疗[再灌注治疗（静脉溶栓或经皮冠状动脉介入治疗）、抗凝及抗血小板、血管紧张素转换酶抑制剂或血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂、?-受体阻滞剂和他汀类等]可显著降低AMI 患者的病死率，改善临床结果，但AMI 患者主要心脏不良事件的发生率仍较高。循证证据表明以运动训练为基础的心脏康复可显著改善心肌梗死（MI ）患者的临床结果[1-4]，目前的AMI 诊疗指南推荐为I/B 级[5,6]，建议对稳定的AMI （无再发心肌缺血、心力衰竭或严重心律失常）患者卧床不应超过12～24小时，及早对其进行心脏康复，将其作为治疗AMI 患者的一颗魔弹提升到新的高度。本文仅对AMI 患者进行心脏康复的循证医学依据作一介绍。1　降低病死率 系统综述和荟萃分析发现，与对照（常规药物治疗）相比，心脏康复（在常规治疗基础上）可显著降低冠心病患者的病死率（全因病死率或心性病死率）21%～34%，各亚组降低程度相似，而现代再灌注和心脏保护药物治疗可弱化心脏康复对病死率的益处[1,2]。 新近Lawler 等针对AMI 患者心脏康复的系统综述及荟萃分析表明，全因病死率降低26%，心性病死率降低36%，与上述冠心病心脏康复的结果一致[3]。这些研究多为单中心、中小样本，人们 对其证据力度提出了质疑。事实上，这些研究中有两项为中等样本量（180例和147例），随访时间超过10年，有足够强的证据力度[4]。 RAMIT （AMI 心脏康复试验）是迄今为止，多中心、样本量最大（1813例）的AMI 心脏康复研究，发现心脏康复并不显著降低AMI 患者病死率，随访2年和7～9年死亡的相对风险分别为0.99和0.98，与上述结果明显不一致[7]，也有学者对心脏康复能够降低病死率提出了疑问[8]。然而，新近Cochrane 系统综述发现，即使纳入RAMIT 的资料，心脏康复仍能够降低全因病死率（由原来的13%降至11%），但对心性病死率没有分析[9]。2　降低住院率 早期对AMI 患者进行运动康复的研究证明，康复锻炼能够降低AMI 患者心血管事件引起的总死亡率、减慢动脉硬化进程、减少心血管病事件、缩短AMI 患者住院天数[10]。 最近的Cochrane 综述和荟萃分析发现，随访＜12月，冠心病进行心脏康复组患者住院率降低31%[2]，但也有不一致的结果[9]。3　对心功能的影响不一致 3.1　收缩功能　一项荟萃分析表明对AMI 患者进行心脏康复可改善患者左心室射血分数，显著降低收缩末容积和舒张末容积，改善左心室重构。对AMI 患者越早进行心脏康复（发病1周以内）、持续时间越长（大于3个月），对患者心脏收缩功能、心脏重构改善越明显[11]。 但也有不一致的结果[12]。

模拟电子技术基础第四版(童诗白)课后答案第九章

第九章自测题 一、选择合适的答案填入括号内。 (1)功率放大电路的最大输出功率是在输入电压为正弦波时，输出基本不失真情况下，负载上可获得的最大( A )。 A.交流功率 B.直流功率 C.平均功率 (2)功率放大电路的转换效率是指( B )。 A.输出功率与晶体管所消耗的功率之比； B.最大输出功率与电源提供的平均功率之比； C.晶体管所消耗的功率与电源提供的平均功率之比。 (3) 在选择功放电路中的晶体管时，应当特别注意的参数有( BDE )。 A．βB．I CM C．I CBO D．U CEO E．P CM F．f T (4) 若图T9.1所示电路中晶体管饱和管压降的数值为 CES U，则最大输出功率 P OM=( C )。 A. 2 () 2 CC CES L V U R - B. 2 1 () 2CC CES L V U R - C. 2 1 () 2 2 CC CES L V U R - 图T9.1 图T9.2 二、电路如图T9.2所示，已知T l和T2的饱和管压降2 CES U V =，直流功耗可忽略不计。 回答下列问题： (1)R3、R4和T3的作用是什么？ (2)负载上可能获得的最大输出功率P om和电路的转换效率η各为多少？ (3)设最大输入电压的有效值为1V。为了使电路的最大不失真输出电压的峰值达到16V，电阻R6至少应取多少千欧？ 解：(1)消除交越失真。 (2)最大输出功率和效率分别为： 2 () 16 2 CC CES om L V U P W R - ==, 69.8% 4 CC CES CC V U V π η - =?≈

(3)由题意知，电压放大倍数为： 6max 116111.3221 o u i R U A R U =+ ≥==? ∴61(11.31)10.3R R k ≥-=Ω

微生物学[第十三章微生物物种的多样性]山东大学期末考试知识点复习

第十三章微生物物种的多样性 一、要点提示 1．生物的多样性系指遗传多样性、物种多样性和生态系统多样性。由于微生物具有与高等动植物迥然不同的特点，使微生物在营养类型、呼吸类型、代谢类型3方面也呈现出丰富的多样性。 2．长期以来人们对细菌的认识仅从形态结构、生理生化、免疫学特性、生态分布进行区分。由于分子生物学方法的建立和发展，特别是16S rRNA寡核苷酸的序列分析，改变或修正了对细菌人为地传统分类的概念，进入了细菌系统发育和自然进化的研究阶段。按照Woese的观点，真细菌占据自然界生物三大域中的一个域，即：细菌域。在确认了16S rRNA中标志性的寡核苷酸保守序列后，真细菌被划分为12个独特的类群。每个类群可以看成是独立的门，它包括了《伯杰系统细菌学手册》中所描述的23个门的细菌。腐生型的细菌在自然界中碳、氮、硫、磷4种元素的循环和能量流动中起着不可替代的作用；一些种是动、植物和人的致病菌，与动、植物的生长和人体健康密切相关；一些具有特殊形态，如具附属物或鞘的细菌，产子实体的黏细菌等，它们的存在丰富了微生物物种的多样性。 3．古生菌是极端环境微生物，它们在形态结构、营养代谢、生理特性、遗传物质及生态分布等方面与真细菌具有十分明显的差异。16S rRNA寡核苷酸序列分析表明它们是生物总系统发育中一个重要的域，包括：产甲烷古生菌、极端嗜热S0代谢菌、极端嗜盐古生菌、无细胞壁的热原体和还原硫酸盐古生菌5个类群。古生菌的发现为人们利用古生菌中的嗜热酶(例如：Taq、Pfu DNA聚合酶)、产甲烷辅酶及其他参与碳、氮物质代谢的酶类，进行分子生物学研究和进行酶法水解、酶法转化制取有用产品提供了丰富的微生物资源。另外，对古生菌嗜热、嗜酸、厌氧、耐高盐、产甲烷、还原硫酸盐及光介导ATP合成的研究，为探索地球上早期原始生命的起源，提供了有力的佐证。 4．生物的共同祖先沿着真细菌、古生菌、真核生物3条路线进化。目前认

分子生物学电子教案

操纵子：原核生物中由一个或多个相关基因以及转录、翻译、调控原件组成的基因表达单元。内含子：一个基因中非编码DNA片段，它分开相邻的外显子，内含子是阻断基因线性表达的序列。 外显子：是真核生物基因的一部分，它在剪接后仍会被保存下来，并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质。 弱化子：原核生物操纵子中能显著减弱甚至终止转录作用的一段核苷酸序列，该区域能形成不同的二级结构，利用原核微生物转录与翻译的偶联机制对转录进行调节。 顺式作用元件：是指与结构基因串联的特定DNA序列，是转录因子的结合位点，它们通过与转录因子结合而调控基因转录的精确起始和转录效率，顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，它们的作用是参与基因表达的调控。 顺式作用：顺式作用元件对基因表达起调控作用的过程。 增强子：增加同它连锁的基因转录频率的DNA序列，因为它能强化转录的起始，又称强化子。 反义RNA:为大肠杆菌编码许多小分子mRNA，它们能也不同的mRNA结合，从而在翻译水平上正调控和负调控，可能关闭SD序列和释放SD序列，由于这些小分子通过与反义RNA 进行碱基配对结合来行使功能。 重叠基因：是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列，或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分；重叠基因有多种重叠方式。常见于细菌和噬菌体的基因组中。核糖开关：mRNA一些非编码区的序列折叠成一定的构象，这些构象的改变应答于体内的一些代谢分子，从而通过这些构象的改变达到调节mRNA转录的目的 回文序列：双链DNA中的一段倒置重复序列；两条链从5 ‘到3 ‘方向阅读序列一致，从3 ‘到5 ‘方向的序列一致 转座子：插入序列，复合型转座子。效应：引起突变，产生新的基因，产生染色体畸变，引起生物进化 魔斑核苷酸：细菌生长过程中在缺乏氨基酸供应时产生的一个应急产物。主要是三磷酸鸟苷合成的四磷酸鸟苷和五磷酸鸟苷。主要功能是干扰RNA聚合酶与启动子结合的专一性，诱发细菌的应急反应，帮助细菌在不良环境条件下得以存活。 反式作用因子：是指能结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控基因转录效率的蛋白质或RNA。RNA聚合酶是催化基因转录最主要的酶。 基因沉默：真核生物中由双链RNA诱导的识别和清除细胞中非正常RNA的一种机制；分为转录水平基因沉默和转录后基因沉默。 RNA干扰：是指双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解技术，而使相应基因表达沉默。 单顺反子mRNA:只编码一种蛋白质的mRNA。 原核生物染色体的特征：结构简单，存在转录单元，有重叠基因。 DNA的修复：错配修复，切除修复，重组修复，DNA的直接修复，SOS反应。 玉米中的转座子：自主性，具有自主剪接和转座的功能；非自主性，单独存在时是稳定的，当基因组中存在与非自主性转座子同家族的自主性转座子时，才具备转座功能。 RNA的转录：是按5＇→3'方向合成的，以DNA双链中的反义链为模板，根据碱基配对原则，合成的RNA带有与DNA编码链相同的序列。包括模板识别、转录起始、转录延伸、转录终止。真核生物mRNA的特征：1.5'端存在帽子结构，常常被甲基化，使mRNA免遭核酸酶的破坏2.具有多（A）尾巴。 蛋白质的生物学合成：氨基酸活化、肽链的起始、伸长、终止，新合成多肽链的折叠和加工。

景跃进《政治学原理》笔记和课后习题详解(政治沟通与政治参与)【圣才出品】

第十一章政治沟通与政治参与 11.1复习笔记 【知识框架】 【重点难点归纳】 一、政治沟通 1．政治沟通及其意义 （1）政治沟通 ①沟通五要素 一个有效的沟通必须具备五个基本要素：信息发送者——信息源；信息——发送者表达的内容；信道——表达信息的多种符号和方式；信息接受者；反馈。 ②政治沟通含义 政治沟通是指在政治领域中发生的沟通行为。政治沟通即“赋予政治过程结构和意义之信息和情报的流动。政治沟通包含两层含义：

a．第一种含义与系统理论相关，是指政治系统进行输入——输出的工具，“政治沟通分析”也就是运用控制论和信息论原理对政治系统输送、获取、存储和处理信息的过程进行解释的研究方法。 第一，阿尔蒙德将政治系统的功能区分为系统功能、过程功能和政策功能三个部分。政治沟通仅指政治系统内政治消息的传播过程，是系统内部正常运作和持续的基本功能。 第二，系统理论中的政治沟通分析只提供了一个研究政治过程的抽象框架，无法解释政治生活的具体运作。 b．它将政治沟通理解为通过一定的政治传播媒介，参与政治的各主体间（涵盖政府与社会、各类组织机构、个人三个层次）有效传递、交流政治信息的过程，包括由上而下、由下而上和彼此交流三个层面。 这种“政治沟通分析”主要研究政治态度的形成与变迁、民意构成、政治演说、竞选言行、意识形态、政治心理、大众媒介对公共舆论以及竞选投票的影响，以及统治者对传媒的控制等，具有多层次、多向度、全方位的特点，并形成广泛复杂的网状结构。 （2）政治沟通的过程 政治沟通涉及信息表达和信息接受两个基本方面，其完整过程包括一般沟通的五个基本要素（它们同时也是影响沟通效能的五个环节）。 ①政治信息 政治沟通的基本内容是政治信息的传递。依据特定的标准，可以对政治信息进行不同的分类。表11-1反映的是政治信息的不同形态。

模电第九章习题参考答案

第九章习题参考答案 注：习题9.1、9.3、9.4、9.8和9.9都略有改动。 9.1分别判断图9.42所示各电路是否可能产生正弦波振荡，并简述理由。 解：注：该题各图改为 C O u ()a () b 2 O u () c （a ）不能振荡。在1T 的栅极断开反馈回路，加极性为正的信号，则由2T 射极反馈得到的信号极性为负，不满足振荡的相位平衡条件。 （b ）不能振荡。虽然电路能够满足相位平衡条件，但是电路中放大电路的放大系数等于1，故不能同时满足幅度平衡条件。 （c ）可能振荡。在1T 的栅极断开反馈回路，加极性为正的信号，则由2T 集电极反馈得到的信号极性为正，满足振荡的相位平衡条件。 9.2解： （a ）原边线圈上端和副边线圈上端为同名端； （b ）原边线圈下端和副边线圈下端为同名端； （c ）原边线圈上端和副边线圈下端为同名端； （d ）原边线圈左端和副边线圈右端为同名端。 9.3分别判断图9.44所示各电路是否可能产生正弦波振荡，并简述理由。 注：该题各图改为

0.01 V +3 C CC V +()a () b () c () d CC V +1 C 3 （a ）可能振荡。在晶体管射极断开反馈回路，加极性为正的信号，则由1C 反馈得到的信号极性为正，满足振荡的相位平衡条件。 （b ）不能振荡。在晶体管基极断开反馈回路，加极性为正的信号，则由1C 反馈得到的信号极性为负，不满足振荡的相位平衡条件。 （c ）可能振荡。在晶体管射极断开反馈回路，加极性为正的信号，则由2N 反馈得到的信号极性为正，满足振荡的相位平衡条件。 （d ）不能振荡。在晶体管基极断开反馈回路，加极性为正的信号，则由2N 反馈得到的信号极性为负，不满足振荡的相位平衡条件。 9.4已知RC 振荡器如图9.45所示，已知215k ΩR =，3410k ΩR R ==，1215pF C C ==。求： （1）振荡频率0f ； （2）1R 的取值范围。 解： （1）频率03142 11 1kHz 22f R C R C ππ= =≈ （2）由放大倍数21 13R A R =+> ，得到1 7.5k R <Ω。 9.5解： 由题01 1kHz 2f RC π= =，其中0.03μF C =，得 5.3k ΩR ≈。设计电路如图9.1所示，其中2R 为负温度系