组织培养实验报告
植物组织培养实验报告
一、实验目的
1．掌握无菌操作的植物组织培养方法；
2．通过配置ms培养基母液，掌握母液的配置和保存方法； 3．通过诱导豌豆根、茎、
叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；
4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法； 5．了解植物细胞通
过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理
解。
二、实验原理（一）植物组织培养
植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，
能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分
化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称
为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统
以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。（二）植物细胞的全能性
植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一
定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。（三）组织的分化与器官建
成
外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具
有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。有些情况下，外植体不经愈伤组
织而直接诱导出芽、根。
（四）培养基的组成
培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成
功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维
生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。
三、实验器材
高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻
璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。
四、实验材料
豌豆种子
五、实验药品
药品、70% 酒精、 0.1% 升汞、ms培养基、蒸馏水、naoh、 84消毒液、蔗糖、琼脂
等。
六、实验步骤
（一）培养基母液的配制
表1.ms培养基个成分的含量（单位：mg/l）
表2.ms培养基所需母液以及扩大倍数
名称大量元素微量元素 ca盐 mg盐 fe盐有机肌醇激素
扩大倍数 50 50 50 50 50 100 100 100 定容体积(ml)
500 500 500 500 500 200 200 50 吸取毫升数/l
20 20 20 20 20 10 10 5
（注：吸取毫升数为每升培养基所吸取的母液的体积）
表3.配制母液所需的药品及称取量
（注：根据表1与表2计算各物质的称取量）
药品名称 nh4no3 kno3 kh2po4 称取量（mg）
41250 47500 4250 药品名称 ki
na2mno4?2h2o cuso4?5h2o 称取量（mg）
20.75 6.25 0.625 cacl2?2h2o 11000 cocl2?6h2o 0.625 mgso4?7h2o 9250 肌醇 2000 feso4?4h2o 695 甘
氨酸 40 na-edta 932.5 盐酸硫胺素 8 mnso4?7h2o 557.5 盐酸吡哆醇 10 znso4?7h2o 215 烟
酸 10 h3bo3 155 （1） ms大量元素母液的配制参考表3称取一定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至
500ml存放于冰箱中备用。
名称
重量（mg）
名称
重量(mg)
nh4no3 kno3
41250 47500
kh2po4 cacl2·2h2o
4250 11000 （2） ms微量元素母液参考表3称取一定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至500ml
存放于冰箱中备用。
名称 ki h3bo3 mnso4·7h2o znso4·7h2o 重量(mg) 20.75 155 557.5 215 名称 na2moo4·2h2o cuso4·5h2o cocl2·6h2o 重量(mg) 6.25 0.625 0.625 （3） ms有机母液参考表3称取一定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至200ml存放
于冰箱中备用。
名称肌醇烟酸盐酸吡哆醇
重量(mg)
名称盐酸硫胺素甘氨酸
重量(mg)
2000 10 10
8 40
（4） ms铁盐母液的配制参考表3称取一定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至500ml
存放于冰箱中备用。
名称 edta二钠
重量(mg)
932.5
名称 feso4·4h2o
重量(mg)
695 （5） ms钙盐母液的配制
参考表3称取11000mg的cacl2?2h2o用蒸馏水溶解定容至500ml，保存于冰箱备用。
（6） ms镁盐母液的配制参考表3称取9250mg的mgso4?7h2o用蒸馏水溶解定容至500ml，保存于冰箱备用。
（7） ms肌醇母液的配制参考表3称取2000mg的肌醇用蒸馏水溶解定容至200ml，保存于冰箱备用。
（8） ms激素母液的配制各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的naoh溶解，细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解，然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。
（二）培养基的配制
以配制1l的ms培养基为例进行如下操作：
（1）取1l的大烧杯，加入适量的蒸馏水在电磁炉上加热至沸腾；
（2）分别取（一）中配制的8种母液放入小烧杯中，然后加入，边加边搅拌；
（3）称取30g蔗糖加入，边加边搅拌；
（4）称取8g琼脂加入，边加边搅拌，知之琼脂粉溶解；（5）定容至1l，加入激素母液，用naoh调ph6.0左右；
（6）将培养基分别分装于洗好的三角瓶中，塞上棉塞包上牛皮纸用绳子扎紧；
（7）放入消毒灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右；
（8）灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平放在实验台上令其冷却凝固。
（三）高压蒸汽灭菌锅的使用方法
具体操作步骤：
（1）高压锅放水至平把架；
（2）把包扎好的培养基装入高压锅；
（3）盖上热压锅盖,上紧螺帽(注意对角拧紧螺帽)关上气阀和安全阀；（4）然后接通电源；
（5）压力计升至0.05mpa时，打开放气阀,排除冷空气(此步很重要)；
（6）排除冷空气后,关闭放气阀，待压力升到0.11mpa位置时，开始计算灭菌时间，具体方法：当压力锅指针升至0.12mpa时，关闭电源，待指针下降至0.11mpa时接通电源，不断重复此操作过程，维持20分钟；
（7）灭菌时间达到20分钟后，除去电源，打开放气阀(注意要逐渐放气)待篇二：组培实验报告
植物组织培实验报告学院：生命科学技术学院班级：10级生物技术植物班学号：2010193042 姓名：高学深
养
植物组织培养实验报告
实验一母液的配制与保存
一、实验目的
1.学习母夜的配制方法和母液的保存方式。
2.熟悉掌握制备母液的操作。二、实验原理
培养基中提供植物生长所需的营养成分，才能满足植物正常的生长发育的需求。主要包括水分、有机物质、盐类，而配制母液时将其分为大量、微量、钙盐、镁盐、铁盐、有机和肌醇分别配制。配置培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配置，即按培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配置即可。
三、实验材料、试剂和仪器设备 1．试剂
nh4no3 ,kno3 ,kh2po4 ,cacl2·2h2o ,mgso4·7h2o,feso4·7h2o
na2-edta,mnso4·4h2o,znso4·7h2o,h3bo3,ki,na2moo4·2h2o cuso4·5h2o,cocl2·6h2o,肌醇，甘氨酸，盐酸硫胺素，盐酸吡哆醇，烟酸，蒸馏水。
2.仪器设备
电子天平，烧杯（50ml、100ml、500ml）量筒（1000ml、100ml、25ml），容量瓶(1000ml、
500ml、100ml)，移液管（10ml，5ml，
1ml）试剂瓶，玻璃棒数支，药芍，称量纸等。四、实验步骤
1 、计算：计算各化学成分所需要的量。大量、微量和盐类按扩大50倍，定容500ml
的配制计算。有机和肌醇按扩大100倍，定容200ml的配制计算。计算后制成配方表。
2、制定标签：裁取7张适当大小的牛皮纸，用铅笔写上ms，种类，并标明此类母液所
含物质，质量，定容体积，扩大倍数吸取量，制备人，制备日
期。。以大量为例如图：
3、大量元素母液的配制：先用量筒量取300ml蒸馏水放入 500ml 烧杯中，按照配方表
中用量依次分别称取： nh4no3 ,kno3 , kh2po4 , 待第一种化合物完全溶解后再加入第二
种化合物，溶解过程用玻璃棒搅拌，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液转移至 500ml 容
量瓶中，并用蒸馏水将烧杯和玻璃棒洗涤3次，每次约50ml，而后用蒸馏水定容至 500ml，
然后转移至细口试剂瓶中，贴上标签，并置于冰
箱中低温保存备用。
4、微量元素母液的配制按照配方表中用量用电子天平依次称取mnso4·4h2o,
znso4·7h2o， h3bo3, ki, na2moo4·2h2o。cuso4·5h2o和 cocl2·6h2o先稀释后用移液
管吸取,按制备母液 i 的方法逐个溶解，转移至容量瓶中，洗涤烧杯，然后定容至 500ml，
转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期，配制人，并置于冰箱
中保存备用。
5、铁盐母液的制备把 feso4·7h2o 和 na2-edta 分别置于适量蒸馏水中，加热搅拌
使之完全溶解，保持加热，把 feso4 倒入 na2-edta 溶液中并搅拌，接近沸腾时停止加热，
冷却后调 ph 到 5.5，将溶液转移至 500ml 容量瓶中，洗涤后用蒸馏水定容至 500ml，转入
细口试剂瓶中，用力振荡 1～2min，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期，配
制人，并置于冰箱中保存备用。
6、有机化合物母液的制备按配方表中用量依次称取：盐酸硫胺素,盐酸吡哆醇，烟酸, 甘
氨酸，用蒸馏水溶解后，定容200ml转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称，放大倍
数，配制日期，配制人，并置于冰箱中保存备用。
7、植物生长物质母液制备 naa 母液:准确称取 10mg,用少量 1mol/l naoh 溶解后加蒸
馏水定容至 100ml,即配制成 0.1mg/ml 的 naa 母液，转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明
母液名称，放大倍数，配制日期，配制人，并置于冰箱中保存备用。 6–ba 母液配制方法
相似，浓度为 2mg/ml
五、试验结果分析及注意事项
1、kh2po4是吸热溶解，可以把烧杯浸在温水中溶解。
2、制作标签时只能能用铅笔写。
实验二、培养基的制备与灭菌
一、实验目的
1、学习母液法配制培养基。
2、学习用牛皮纸包三角瓶口的防污染方法。
3、学习灭菌锅的使用。二、实验原理
为防止组织培养各物质发生反应所以把微量和铁盐混在一起，为了避免物质的反应，所
以要迅速倒入沸腾的蒸馏水中，琼脂应慢慢倒入，并边搅拌边倒入。组织培养所用的培养基
含有植物生长所必需的各类营养物质，同时也是微生物繁殖的极好场所，因此必须对培养基
灭菌处理，以确保无菌操作的顺利进行。三、实验材料、试剂和仪器设备
1.试剂：琼脂，蔗糖，蒸馏水，1mol/l naoh,各类母液
2.仪器设备：电子天平，烧杯，
量筒，移液管，玻璃棒，药芍，称量纸，ph 试纸，锥形瓶，牛皮纸，棉塞等。四、实验步
骤
1.准备将所需的各种母液按顺序放好，将洁净的各种玻璃器皿放在指定置。
2 .大量的量取取 50ml量筒一个，将大量、有机、肌醇、镁盐，篇三：植物组织培养
实验报告
植
组织培养验报告
班级：学号： 2011192017 姓名：李
鹏
物
实
植物组织培养实验报告
实验一植物组织培养母液的配制
一、实验目的
1.了解植物组织培养基本培养基的组分及其作用。
2.学习掌握植物组织培养ms培养基
的配制方法。二、实验原理
培养基是植物组织培养中离体组织赖以生存和发育的条件。大多数培养基的成分是有无
机盐、有机化合物（碳源、维生素、肌醇、氨基酸等）、生长调节物质、水分和其他附加物等
五大类物质组成。
无机盐类由大量元素和微量元素组成。大量元素中，氮类化合物主要以硝酸类和铵类化
合物的形式存在，但在培养基中多用硝酸类，也可以将硝酸类和铵类混合使用；磷和硫常用
磷酸盐和硫酸盐来提供；钾是培养基中主要的阳离子；钙、钠、镁的需要量较少。微量元素
包括碘、锰、铜、锌、钴、铁。培养基中的铁离子，大多数以螯合物的形式存在，即硫酸亚
铁与乙二胺四乙酸二钠的混合。
有机化合物包括碳源、维生素、肌醇、氨基酸等。培养中的植物组织和细胞的光合作用
较弱，因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物物来提供营养需要。培养基中的碳水化合
物通常为蔗糖。蔗糖除了作为培养基的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起着重要的
作用。在培养基中加入维生素有助于细胞的分裂和增长。一般包括vb1、b6、烟酸、生物素、
叶酸、泛酸钙、vc。肌醇在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的催进作
用。
常用的植物生长调节物质包括以下三类：①生长素类：吲哚乙酸（iaa）、萘乙酸（naa）、
二氯苯氧乙酸（2,4-d）②细胞分裂素：玉米素（zt）6-苄基嘌呤（6-ba）和激动素（kt）。
③赤霉素：组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸（ga3）。
培养基中的其他附加物包括人工合成和天然的有机物附加物。其中最为常见的为酵母提
取物。琼脂作为培养基的支持物，也是最常用的邮寄附加物，他可以是培养基呈固体状态，
以利于组织和细胞的培养。
植物组织培养是否成功，在很大的程度上取决于培养基的选择之上。目前普遍使用的是
ms培养基。ms固体培养基可用于诱导遇上组织，或用于胚胎、茎段、茎尖及花药的培养等。
ms培养基的硝酸盐、钾和铵的含量略高于其他的培养基，也是它被普遍使用的原因之一。三、
实验材料、试剂、配方和仪器设备 1．试剂
nh4no3 ,kno3 ,kh2po4 ,cacl2·2h2o ,mgso4·7h2o,feso4·7h2o
na2-edta,mnso4·4h2o,znso4·7h2o,h3bo3,ki,na2moo4·2h2o
cuso4·5h2o,cocl2·6h2o,肌醇，甘氨酸，盐酸硫胺素，盐酸吡哆醇，烟酸，蒸馏水。
2.仪器设备
电子天平，烧杯（50ml、100ml、500ml）量筒（1000ml、100ml、25ml），容量瓶(1000ml、
500ml、100ml)，移液管（10ml，5ml，1ml）试剂瓶，玻璃棒数支，药匙，称量纸等。
3、培养基配方
化合物名称 nh4no3 kno3 kh2po4 化合物名称 mnso4·4h2o znso4·7h2o h3bo3 ki na2moo4·2h2o cuso4·5h2o cocl2·6h2o 化合物名称 feso4·7h2o na2-edta 化合物名称肌醇甘氨酸
烟酸硫胺素盐酸吡哆醇烟酸 ms培养基有机物质母液的配制
培养基浓度(mg/l) 称取质量(g) 100 2 2 0.2 0.4 8 0.5 10 0.5 10 ms培养基大量元
素母液配制培养基浓度(mg/l) 称取质量(g) 1650 41.25 1900 47.50 170 4.25 ms培养基
微量元素母液配制培养基浓度(mg/l) 称取质量(g) 22.3 55.7 8.6 21.5 6.2 11.5 0.83 20.75
0.25 6.25 0.0025 0.625 0.0025 0.625 ms培养基铁盐母液配制培养基浓度(mg/l) 称取质
量(g)
27.8 6.95 37.3 9.32
四、实验步骤
1 、计算：计算各化学成分所需要的量。大量、微量和盐类按扩大50倍，定容500ml
的配制计算。有机和肌醇按扩大100倍，定容200ml的配制计算。计算后制成配方表。
2、制定标签：裁取适当大小的牛皮纸，用铅笔写上ms，种类，并标明此类母液所含物
质，质量，定容体积，扩大倍数吸取量，制备人，制备日期以大量为例如图：
3、大量元素母液的配制：先用量筒量取300ml蒸馏水放入 500ml 烧杯中，按照配方表
中用量依次分别称取： nh4no3 ,kno3 , kh2po4 , 待第一种化合物完全溶解后再加入第二
种化合物，溶解过程用玻璃棒搅拌，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液转移至 500ml 容
量瓶中，并用蒸馏水将烧杯和玻璃棒洗涤3次，每次约50ml，而后用蒸馏水定容至 500ml，
然后转移至细口试剂瓶中，贴上标签，并置于冰箱中低温保存备用。
4、微量元素母液的配制按照配方表中用量用电子天平依次称取mnso4·4h2o,
znso4·7h2o， h3bo3, ki, na2moo4·2h2o。cuso4·5h2o和 cocl2·6h2o先稀释后用移液
管吸取,按制备母液 i 的方法逐个溶解，转移至容量瓶中，洗涤烧杯，然后定容至 500ml，
转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期，配制人，并置于冰箱
中保存备用。
5、铁盐母液的制备把 feso4·7h2o 和 na2-edta 分别置于适量蒸馏水中，加热搅拌
使之完全溶解，保持加热，把 feso4 倒入 na2-edta 溶液中并搅拌，接近沸腾时停止加热，
冷却后调 ph 到 5.5，将溶液转移至 500ml 容量瓶中，洗涤后用蒸馏水定容至 500ml，转入
细口试剂瓶中，用力振荡 1～2min，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期，配
制人，并置于冰箱中保存备用。
6、有机化合物母液的制备按配方表中用量依次称取：盐酸硫胺素,盐酸吡哆醇，烟酸, 甘
氨酸，用蒸馏水溶解后，定容200ml转入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称，放大倍
数，配制日期，配制人，并置于冰箱中保存备用。
7、植物生长物质母液制备 naa 母液:准确称取 10mg,用少量 1mol/l naoh 溶解后加蒸
馏水定容至 100ml,即配制成 0.1mg/ml 的 naa 母液，转入细口试
剂瓶中，贴上标签，注明母液名称，放大倍数，配制日期，配制人，并置于冰箱中保存
备用。 6–ba 母液配制方法相似，浓度为 2mg/ml 五、试验结果分析及注意事项
1、配制母液时注意药品只能出不能进。
2、制作标签时只能能用铅笔写，防止油性笔字迹在高压灭菌后模糊不清。
实验二、培养基的制备与灭菌
一、实验目的
1、学习母液法配制培养基。
2、学习用牛皮纸包三角瓶口的防污染方法。
3、学习并熟悉自动化灭菌锅的操作和保护。
二、实验原理
为防止组织培养各物质发生反应所以把微量和铁盐混在一起，为了避免物质的反应，所
以要迅速倒入沸腾的蒸馏水中，琼脂应慢慢倒入，并边搅拌边倒入。组织培养所用的培养基
含有植物生长所必需的各类营养物质，同时也是微生物繁殖的极好场所，因此必须对培养基
灭菌处理，以确保无菌操作的顺利进行。三、实验材料、试剂和仪器设备
1.试剂：琼脂，蔗糖，蒸馏水，1mol/l naoh,各类母液
2.仪器设备：电子天平，烧杯，量筒，移液管，玻璃棒，药芍，称量纸，ph 试纸，锥形
瓶，牛皮纸，棉塞等。四、实验步骤
1.准备将所需的各种母液按顺序放好，将洁净的各种玻璃器皿放在指定置。 2 .大量的
量取取 50ml量筒一个，将大量、有机、肌醇、镁盐，钙盐、按配方表中的用量依次称取并
倒入500ml烧杯中。
3 .微量铁盐的量取取 50ml 量筒一个，将微量和铁盐按配方表中的用量称取并倒入
100ml烧杯中。
4.培养基配制取瓷盆一个，加入 1.5l 蒸馏水，置于电磁炉上加热，将称量好的所有母
液倒入瓷盆中，用玻璃棒不断搅拌。再称量琼脂 16 克，白砂糖 60 克，依次倒入瓷盆中，
边倒入边搅拌，待琼脂和白砂糖完全溶解后，，并定容至 2l。 5、调ph 用 1mol/l naoh 和
1mol／l hcl调 ph 至 6.0。
6、分装把培养基分装到三角瓶中，每瓶约50ml，用棉塞塞好再用牛皮纸，细绳包扎
好，待灭菌。
7、灭菌将所有的三角瓶整齐的放在灭菌锅的铁丝篮中，将温度调为121℃灭菌20min。
灭完后摆放在水平的实验桌上勿动。五、试验结果分析及注意事项
1、配制培养基前先大致估计一下药品数量，不够时提前配制。
2、三角瓶灭菌时注意
要放干净冷空气。 3、加的药品种类较多，切忌加错。
4、注意把三角瓶用棉塞塞好和用牛皮纸包好。
5、灭完菌的三角瓶勿动，等待培养基冷
却凝固。 6、琼脂不可加太快，以防加太快琼脂结块。实验三无菌植株
的建立一、实验目的
1、通过实验，初步掌握外植体材料的消毒。
2、学习超净工作台灭菌方法和操作要求。
篇四：植物组织培养综合实验报告模块(2012年3月) 《植物组织培养大实验》综合报告书写说明
植物组织培养这一个综合性很强的大实验，《植物组织培养大实验》课程实验由7个分实
验组成：①实验用具的洗涤和灭菌，② ms培养基母液的配制，③ ms培养基的配制和灭菌，
④植物外植体消毒和接种，⑤愈伤组织的诱导（又称原代培养或初代培养），⑥愈伤组织
的继代培养，⑦愈伤组织的生根培养（植株再生）。
实验报告是对实验观察、比较所得结果的真实记载，是科学的记录。实验报告的形式可
以根据实验风容的不同而分文字描述、绘图和列表3种形式。为了减少实验报告写作过程中
的重复性和减轻学生完成实验报告的负担，《植物组织培养大实验》课程实验报告由5次综合
实验报告组成，即：
1、《植物组织培养大实验》综合报告（一）（必做）：实验用具的洗涤和灭菌、ms培养基
母液及ms培养基的配制和灭菌；
2、《植物组织培养大实验》综合报告（二）（必做）：植物外植体消毒和接种；
3、《植物组织培养大实验》综合报告（三）（必做）：愈伤组织的诱导（又称原代培养或初代培养）；
4、《植物组织培养大实验》综合报告（四）（必做）：愈伤组织的继代培养；
5、《植物组织培养大实验》综合报告（五）（选做）：愈伤组织的生根培养（植株再生）。
学生在写《植物组织培养大实验》综合报告时，实验报告中的实验内容、实验目的、实验原理、仪器设备和试剂等4部分可按照教师拟定的《植物组织培养大实验》综合报告（一）至（五）中的内容写。实验方法部分可参照教师编写的实验指导。实验结果与分析是学生对自已实验结果的真实记载和分析，思考题是教师为了让学生加深对植物组织培养的原理与技术的理解和掌握而设计的。因此，综合报告中的实验结果与分析、思考题2部分内容，要求学生必需独立完成。
《植物组织培养大实验》综合报告（一）（必做）
【实验内容】实验用具的洗涤和灭菌、ms培养基母液及ms培养基的配制和灭菌
【实验目的】
1、掌握植物组织培养中常用实验用具的洗涤、灭菌方法及注意事项；
2、掌握ms培养基母液的配制方法和注意事项；
3、掌握ms培养基的配制、灭菌方法和注意事项。
【实验原理】
对植物外植体进行离体培养时，培养基提供生长所需的营养成分等。培养基的主要成分包括无机营养物、碳源、维生素、植物生长物质和有机附加物等。
配制培养基通常都按配方浓度的若干倍称量，配制成一系列的母液置于冰箱保存，使用时按比例稀释。一般要配下列母液：大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机化合物母液、植物生长物质母液。
凡是暴露在(未经处理的)空气中的物体，曾经接触过自然水源的物体都是有菌的。培养基中含有大量的有机物，特别是含糖量较高，是微生物滋生、繁殖的极好场所。而接种材料需要在无菌得件下培养很长的时间，如果培养基被微生物所污染，便达不到培养的预期结果。
因此，培养基的灭菌，是植物组织培养中十分重要的环节。培养基灭菌的方法有多种，本实验田采用高压蒸气灭菌法（即湿热灭菌法，其原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.10mpa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
【仪器设备和试剂】
1、仪器设备
高压蒸气灭菌锅，电子天平，冰箱，烧杯（100ml，500ml，1000ml），量筒（50ml，100ml，1000ml），试剂瓶（100ml，500ml，1000ml），三角瓶（50ml，100ml，250ml），培养瓶（100ml，150ml）或培养皿（d90mm，d1 20mm），洗耳球、刻度吸管，ph试纸，漏斗，玻璃棒，记号笔，线绳，牛皮纸或报纸，石棉网。
2．试剂
重铬酸钾(k2cr2o7)、硫酸(h2so4)、硝酸钾（kno3）、硝酸铵（nh4n03）、硫酸镁（mgs04·7h20）、磷酸二氢钾（kh2po4）、氯化钠（cacl2·2h20）、硫酸锰（mn04·4h20）、硫酸锌（zns04·7h20）、硼酸（h3bo3）、碘化钾（ki）、钼酸钠（namo04·2h20）、硫酸铜（cus04·5h2o）、氯化钴（cocl2·6h20）、乙二胺四乙酸二钠（ na2-edta）、硫酸亚铁（fes04·7h20）、甘氨酸、盐酸硫胺素（vit·b1）、盐酸吡哆素（vit·b6）、肌醇、2,4-d、6-ba、 1 mol／l盐酸、1 mol ／l氢氧化钠、蔗糖、琼脂。
【实验方法】
1、简述玻璃器皿的洗涤和灭菌方法；
2、简述ms培养基母液（包括大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机化合物母
液、植物生长物质母液等5种母液）的配制方法；
3、简述ms培养基配制（按照配制1l培养基的量进行描述）和灭菌方法。
【思考题】
1、什么是植物组织培养概念？
在含有营养物质及植物生长物质的培养液中，培养离体植物组织（器官或细胞）并诱导
使其长成完整植株的技术植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来
发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出
符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获
得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指组培指用植物各部分组
织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器
官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
2、什么是外植体的含义？根据外植体的不同，植物组织培养可以分为几种类型？
外植体用于离体培养的初始材料称为外植体，如在植物快速繁殖中从母株上切取的、用
于消毒培养的茎芽、茎段、叶片或分生组织等。通常外植体的选择与植物组织培养快速繁殖
成功与否有着密切联系，在建立植物组织培养快速繁殖体系应首先考虑采用何种外植体来开
始培养。决定外植体选择的因素主要是来源、数量、消毒难易程度、以往经验等。在兰花组
培中最为常用的
外植体是茎尖和种子。
3、植物组织培养有哪些特点？
形态类似，结构相同，功能相同
通过组织培养得到的植物体的特点：组织培养得到的植物体的遗传物质与原植物体的遗
传物质完全相同，表现出的性状完全一样（排除基因突变等情况）。需要注意的是如果用亲本
的花粉进行组织培养，那么得到的植株会是单倍体，单倍体的遗传物质自然也就比用体细胞
培养的植株的遗传物质减少一半。植物组织培养的实质是：基因的选择性表达
4、ms培养基包括哪些成分？各有什么作用？
5、采用高压蒸汽锅高压灭菌时，应注意哪些事项？
(4)注意事项。在灭菌过程中，应注意排净锅内冷空气，锅内冷空气如排放不净，会影响
灭菌效果，达不到彻底灭菌的目的。由于高压蒸汽灭菌时，要使用温度高达120 ℃、两
6、简述植物组织培养与农业生产的关系？
7、灭菌和消毒有无差别？为什么？
消毒是指用物理或化学方法消灭某种范围内的有害微生物，保留目的菌。例如，进行食
用菌组织分离时，子实体表面必须进行消毒，消灭体表杂菌，以便获得分离物的纯培养。
灭菌是指用物理或化学方法，完全杀死培养基或器物内外的一切微生物，使灭菌对象上
的蛋白质完全变性。
灭菌：用理化方法杀死一定物质中的微生物的微生物学基本技术。灭菌的彻底程度受灭
菌时间与灭菌剂强度的制约。微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或
环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的
技术。
消毒：（disinfection)是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。通常用
化学的方法来达到消毒的作用。用于消毒的化学药物叫做消毒剂。
《植物组织培养大实验》综合报告（二）（必做）
【实验内容】
植物外植体消毒和接种
【实验目的】
学习和掌握植物外植体表面消毒的常规方法。
【实验原理】
用于进行组织培养的组织、器管和细胞称为外植体。在植物组织培养中，外植体如果是带菌的，在接种前都必须进行表面消毒，这是取得培养成功的最基本的和重要的前提。常用消毒剂对外植体进行消毒。接种是将经严格的表面灭菌处理好的外植体，再经无菌操作手续接到培养基上，这一过程叫做接种。
【实验材料】水稻成熟胚
【仪器设备和试剂】
1、仪器设备超净工作台，酒精灯，烧杯，镊子，剪刀，手术刀，无菌吸水纸，一次性手套，标签纸，记号笔等。
2、试剂 ms培养基，0.1％氯化汞，75％乙醇，无菌水。
【实验方法】
1、试述外植体（水稻成熟胚）的消毒方法。
1、试述外植体（水稻成熟胚）的接种方法（包括接种前、接种、接种后等3个操作环节）。
【实验结果与分析】篇五：植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告
一实验目的
让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。
二实验原理
植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸（ iaa ）和 6 –苄基氨基腺嘌呤（ 6 – ba ）的比例，决定了根和芽的分化。
三实验器材
（一）试剂
乙醇、iaa 或 2 ， 4 – d 、hgcl 2 （或次氯酸钠）、6- 苄基氨基腺嘌呤（ 6-ba ） ms 培养基
（二）仪器设备
培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（ 100ml ），烧杯，量筒，培养皿，超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等
三实验步骤
1. 配制培养基
（ 1 ）愈伤组织诱导培养基： ms 培养基（蔗糖含量为 10 g/l ， 2,4 – d 含量为 2 mg/l ，琼脂 10 g/l ）。
（ 2 ）试验培养基：在 ms 培养基中按表 33 – 1 加入 iaa 和 6–ba 。
吲哚乙酸先用少量 0.1 mol/l naoh 溶解， 6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/l hcl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。
2. 培养基灭菌
将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至 ph 5.8 ，趁热分装于 100 ml 三角烧瓶中，
每瓶约 20 ml 。待培养基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中 121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下灭菌 20 min 。取出三角烧瓶放在台子上，冷却后备用。接种操作所需的一切用具（如长镊子、解剖刀、剪刀等）及灭菌水，需同时灭菌。
3. 诱导产生愈伤组织
（ 1 ）取健壮的玫瑰、菊花茎数段，每段约 5 cm 长，于烧杯中用 0.1% 氯化汞（升汞）浸泡 20 min ，取出用无菌水洗 3 ～ 4 次，置于无菌培养皿中，在接种箱中按无菌操作要求剥去外皮（接种箱事先用紫外灯灭菌 30 min ），用解剖刀切成 5 mm 厚的圆片（弃去开始一片和最后一片），用长镊子将它接种在诱导培养基上，注意圆片的切口朝向培养基，每瓶接种 4 片，接种后扎好瓶口。
（ 2 ）将已接入植物组织（外植体）的三角烧瓶，培养在 25 ℃温室中，每星期检查 l ～
2 次，剔除材料已被杂菌污染的三角烧瓶，
3 ～
4 周后产生愈伤组织。
（ 3 ）选取愈伤组织生长良好的三角烧瓶，用解剖刀将愈伤组织切下，转移到含有不同激素的试验培养基中（也可以连同原来的外植体一起转移），每瓶放 1 ～ 2 块，仍培养在 25 ℃温室中，每周 1 ～ 2 次观察不同处理的三角烧瓶中，愈伤组织分化情况，直至长出根和芽。长成的幼小植株即为“试管苗”，可移栽于花盆中。
四实验结果
因为时间有限及实验严密性等问题，大部分都失败了，但是仍然有小部分分化发育了出来。已经证明了植物组织能够经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。
电子对抗沙盘模拟实验报告
组织行为学实验报告 姓名:鲁婷 学号: 200917020133 班级：信管09101 实验地点：E3-A501 指导老师：刘国兵
一、实验名称：企业运营电子对抗模拟 二、实验学时：8学时 三、实验目的： 1、了解企业组织运营基本流程，强化学生运用理论知识解决企业运营实际问题 的能力，培养学生创业能力与理论实践能力。 2、使学生学会运用组织行学理论知识对个体及群体行为、态度进行系统分析， 预测和控制及应用的能力。 四、实验要求及步骤： （一）熟悉商业环境，报表和商业新闻的分析 根据老师给出的的商业环境信息了解自己所处的经营环境，选择自己公司所要进入的市场，做好初步决策。 （二）公司战略制定 生产规模的确定：生产线数量与生产线性能的确定。选择自己公司的主要产品，做好资金的预算。 （三）销售订单预测 根据自己所选择的市场进行订单预算，做好原材料购买准备 （四）产量制定和调整 对产品性能做好调整修改 （五）产品质量确定 考虑产品质量认证和新产品研发周期对产品订单量的影响 （六）销售渠道管理 参考网点销售能力数据考虑市场开发与网点设置的影响以及网点对订单量的影响 （七）财务分析与管理 计算好公司该季度的应付账款，检查流动资金是否充足 五、实验结果： 1、本团队及个人在此次实验中表现的一个总体描述和反思 从这个学期第九周开始，我们进行了为期四周共八个课时的经营之道模拟实训。实训老师将我们分为十组，每组大约三人，主要有总经理、市场总监、
生产总监三个职位。 在本次模拟实训中，本人担当了第一组小组的生产总监的职位，主要负责以下工作： （1）制定改善生产环境（购买或租赁厂房）的计划，并负责实施。必要时做出清偿生产能力（出售厂房和生产线）的计划。 （2）制定设备更新与生产线改良的计划，并负责实施。 （3）制定全盘生产调度计划，制定匹配市场需求、交货期和数量及设备产能的生产进度计划。 （4）负责生产、产品加工制造、产品入库的各项具体任务。同时，作为生产总监，还要及时与物流总监、财务总监（或助理）市场营销总监等各部门密切联系，做好沟通，保证按计划进行。 各季度的相关决策及感受： 第一季度：开始我们小组的主要战略目标是抢占华南和华北市场，生产青少年、中老年、商务人士三种产品。我们租用了两个中型厂房，购买了手工、柔性、中老年三条生产线。我们斗志昂扬，满怀信心的运营着公司。 第二季度：在第二个季度时，由于粗心出现操作失误没有成功设置网点，导致产品价格不能制定，产品不能出售，在季末支付费用时，由于资金不足，系统自动申请了紧急贷款。在这时我们并没有因为这一失误而灰心，我们认为只要接下来的季度细心点，我们的成功的几率还是很大的。 第三季度：在第三季度时，在操作过程中由于资金断流都次申请紧急贷款，以致负债累累，产品价格制定时我们以为产品价格是由市场总监制定的，导致产品价格没有制定成功，不能出售产品，没有收入，资金继续断流。 第四季度：在第四季度时，我们吸取教训，认真执行每一步决策，并改变总策略，准备以“稳”为宗旨，变卖了一条中老年生产线，和退租了一个中型厂房，得到了一定的现金。我们利用这些现金投资广告和增加网点的设置，以增加销售能力，这一策略得到了一定效果，而且也没有出现操作失误，成功的卖出了产品，是主营业务收入也从零到有，可以说，在收到订单的那一刻，我们这一小组每个人的内心都是非常激动的，也增加了我们反败为胜的信心是我们更加有激情将这个公司运营下去。 第五季度：在第五季度时，很无语我们又出现了操作的失误，没有追加投资认证，导致接下来的五、六、七季度都不能出售产品，因此，我们向老师提交了破产申请。 团队及个人的表现： 团队表现：本次实验中我们这一组的成员分别是刘婷、鲁婷、唐治利，刘婷是总经理，我担任的生产总监，唐治利是市场总监。我们这一组的决策都是通过群体决策来决定的。我们这一组应该是表现得最差的一组，而且前三个季度由于频频
组织培养实验报告
植物组织培养实验报告 一、实验目的 1．掌握无菌操作的植物组织培养方法； 2．通过配置ms培养基母液，掌握母液的配置和保存方法； 3．通过诱导豌豆根、茎、 叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法； 4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法； 5．了解植物细胞通 过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理 解。 二、实验原理（一）植物组织培养 植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下， 能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分 化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称 为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统 以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。（二）植物细胞的全能性 植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一 定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。（三）组织的分化与器官建 成 外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具 有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。有些情况下，外植体不经愈伤组 织而直接诱导出芽、根。 （四）培养基的组成 培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成 功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维 生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。 三、实验器材 高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻 璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。 四、实验材料 豌豆种子 五、实验药品 药品、70% 酒精、 0.1% 升汞、ms培养基、蒸馏水、naoh、 84消毒液、蔗糖、琼脂 等。 六、实验步骤 （一）培养基母液的配制 表1.ms培养基个成分的含量（单位：mg/l） 表2.ms培养基所需母液以及扩大倍数 名称大量元素微量元素 ca盐 mg盐 fe盐有机肌醇激素 扩大倍数 50 50 50 50 50 100 100 100 定容体积(ml) 500 500 500 500 500 200 200 50 吸取毫升数/l 20 20 20 20 20 10 10 5 （注：吸取毫升数为每升培养基所吸取的母液的体积） 表3.配制母液所需的药品及称取量
原代细胞培养与分离
原代细胞的培养与建系 凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。细胞的纯化或细胞克隆技术是细胞培养工作的基础。 原代细胞的取材 人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。 一、取材的基本要求 .1．取材要注意新鲜和保鲜 .2．应严格无菌 .3．防止机械损伤 .4．去除无用组织和避免干燥 .5．应注意组织类型、分化程度、年龄等 .6．作好记录 二、各类组织的取材技术 皮肤和粘膜的取材 内脏和实体瘤的取材 血液细胞的取材 骨髓、羊水、胸/腹水细胞取材 动物组织取材 人胚体组织取材 鸡（鸭）鸟类胚胎组织取材鸡（鸭）鸟类胚胎组织取材 皮肤和粘膜的取材 主要取自于手术过程中的皮片，方法似外科取断层皮片手术操作，但面积一般2~4平方厘
米。 内脏和实体瘤的取材 内脏除消化道外基本是无菌的，但取材时要明确和熟悉所需组织的类型和部位，实体瘤取材时要取肿瘤细胞丰富的区域，要避开破溃、坏死液化部分，以防污染，尽量去除混杂的结缔组织。 血液细胞的取材 血细胞、淋巴细胞的取材，一般多抽取静脉外周血，或从淋巴组织中（如脾、扁桃体、胸腺、淋巴结等）分离细胞，取材时应注意抗凝。 骨髓、羊水、胸/腹水细胞取材 严格无菌，注意抗凝，还要尽快分离培养，离心后，用无钙、镁PBS洗两次，再用培养液洗一次后即可培养，不宜低温存放。 动物组织取材 1、鼠胚组织取材 首先用引颈或气管窒息致死法处死孕期合适的动物，然后将其整个浸泡在含有75%酒精的烧杯中，5分钟后（注意时间不能太长，以避免酒精从口或其他通道进入体内，影响组织活力），取出动物，在消毒过的木板上可用无菌的图钉或大头针固定四肢，切开皮肤，用无菌操作法解剖取胚或用无菌止血钳挟起皮肤、用无菌眼科剪沿躯干中部环形剪开皮肤，用止血钳分别挟住两侧皮肤拉向头尾，把动物反包，暴露躯干，然后再固定，更换无菌解剖器材，采用无菌操作法解剖取出胚胎。 2、幼鼠胚肾（或肺）取材 幼鼠采用上述方法处死消毒后，腹部朝上固定在木板上，先切开游离毛皮并拉开至两侧：然后采用无菌法打开胸腔取肺，或背部朝上固定在木板上，先将背部毛皮切开游离并拉向两侧，
植物组织培养报告
植物组织培养报告内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）
大蒜茎尖的组织培养 谢婷婷江宋青万嫣文吕凌宇一、实验目的 掌握植物组织培养的相关理论知识及操作方法； 通过自行设计并完成实验，提高动手能力和思维能力； 利用植物细胞的全能性，使大蒜茎尖经过脱分化作用形成愈伤组织，再分化为有结构的组织和器官，最终增殖培育出大量品质优良的大蒜试管苗。二、实验原理 植物组织培养是利用植物细胞的全能性原理。植物组织培养是在无菌环境下，将离体的植物器官、组织以至单个细胞，在人工配置的培养基上培养，使其能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化”。已经脱分化的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化”。 三、实验材料、试剂和器材 1 供试材料 以购于府前菜场的大蒜为实验材料，实验在丽水学院生态学院组培实验室进行。 2 仪器与设备 超净工作台、培养事、电子天平、烧杯、容量瓶、玻璃棒、量筒、移液
管。 3 试剂 70%酒精、95%酒精、0.1%升汞、蔗糖、琼脂条、6-BA（1.5 mg/L；2.0 mg/L）、2,4-D（2.0 mg/L）、NAA（1.0 mg/L；）、IBA（2.0 mg/L）、10倍的大量元素、100倍的微量元素、100倍的铁盐、100倍的有机物。 四、实验步骤 1.培养基的配制及灭菌 诱导培养基：MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L 出芽培养基：MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L 生根培养基：MS+IBA 2.0 mg/L （1）将MS母液（10倍的大量元素、100倍的微量元素、100倍的铁盐、100倍的有机物）按顺序排列、检查是否失效。 （2）在装有3/4蒸馏水的容器中加入0.7%琼脂和3%蔗糖，加热溶化。（3）依次吸取适量各种母液移到容器中。 （4）用蒸馏水定容到相应体积。 （5）调节pH值(用0.1M的NaOH或HCl调节)至5.8-6.0。 （6）向培养基中加入适量激素。 （7）将配制好的培养基进行分装（20-30ml/瓶）。 （8）用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121 ℃下灭菌 20 min 。取出三角烧瓶放在台子上，冷却后备用。接种操作所需的一切用具（烧杯、培养皿、灭菌水等），需同时灭菌。 （9）将灭菌后的培养基于常温下放置一星期，观察有无污染。
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告 学院：生命科学技术学院 班级：11生物技术(制品) 学号：2011192017 姓名：李鹏
植物组织培养实验报告 实验一植物组织培养母液的配制 一、实验目的 1.了解植物组织培养基本培养基的组分及其作用。 2.学习掌握植物组织培养MS培养基的配制方法。 二、实验原理 培养基是植物组织培养中离体组织赖以生存和发育的条件。大多数培养基的成分是有无机盐、有机化合物（碳源、维生素、肌醇、氨基酸等）、生长调节物质、水分和其他附加物等五大类物质组成。 无机盐类由大量元素和微量元素组成。大量元素中，氮类化合物主要以硝酸类和铵类化合物的形式存在，但在培养基中多用硝酸类，也可以将硝酸类和铵类混合使用；磷和硫常用磷酸盐和硫酸盐来提供；钾是培养基中主要的阳离子；钙、钠、镁的需要量较少。微量元素包括碘、锰、铜、锌、钴、铁。培养基中的铁离子，大多数以螯合物的形式存在，即硫酸亚铁与乙二胺四乙酸二钠的混合。 有机化合物包括碳源、维生素、肌醇、氨基酸等。培养中的植物组织和细胞的光合作用较弱，因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物物来提供营养需要。培养基中的碳水化合物通常为蔗糖。蔗糖除了作为培养基的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起着重要的作用。在培养基中加入维生素有助于细胞的分裂和增长。一般包括VB1、B6、烟酸、生物素、叶酸、泛酸钙、VC。肌醇在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的催进作用。 常用的植物生长调节物质包括以下三类：①生长素类：吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、二氯苯氧乙酸（2,4-D）②细胞分裂素：玉米素（ZT）6-苄基嘌呤（6-BA）和激动素（KT）。③赤霉素：组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸（GA3）。 培养基中的其他附加物包括人工合成和天然的有机物附加物。其中最为常见的为酵母提取物。琼脂作为培养基的支持物，也是最常用的邮寄附加物，他可以是培养基呈固体状态，以利于组织和细胞的培养。 植物组织培养是否成功，在很大的程度上取决于培养基的选择之上。目前普遍使用的是MS培养基。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织，或用于胚胎、茎段、茎尖及花药的培养等。MS培养基的硝酸盐、钾和铵的含量略高于其他的培养基，也是它被普遍使用的原因之一。 三、实验材料、试剂、配方和仪器设备 1．试剂 NH 4NO 3 ,KNO 3 ,KH 2 PO 4 ,CaCl 2 ·2H 2 O ,MgSO 4 ·7H 2 O,FeSO 4 ·7H 2 O Na 2-EDTA,MnSO 4 ·4H 2 O,ZnSO 4 ·7H 2 O,H 3 BO 3 ,KI,Na 2 MoO 4 ·2H 2 O CuSO 4 ·5H 2 O,CoCl 2 ·6H 2 O,肌醇，甘氨酸，盐酸硫胺素，盐酸吡哆醇，烟酸， 蒸馏水。 2.仪器设备 电子天平，烧杯（50ml、100ml、500ml）量筒（1000ml、100ml、25ml），容量瓶(1000ml、500ml、100ml)，移液管（10ml，5ml，1ml）试剂瓶，玻璃棒数支，药匙，称量纸等。
原代细胞培养实验(药理)
一.细胞培养的基本原理 细胞培养是用酶消化法将组织碎块分离成单个细胞，用培养基制成细胞悬液，在体外适宜条件下，使细胞生长繁殖，并保留其一定的结构和功能特性。细胞培养与组织培养、器官培养主要不同点在于原始培养的对象不同。细胞培养使用的是单个细胞悬液，组织培养使用的是组织块(0.5～1立方毫米)或薄片(厚0.2毫米)，而器官培养使用的是器官原基或器官的一部分或整个器官。在组织培养中，细胞自组织块周围移出并生长，细胞在生长过程中总有移动(运动)或其它变动，这样就使被培养的组织难以长期维持其原有的结构和功能。培养时间越长，发生变化的可能性越大，结果常使单一类型的细胞保存下来，最终成了细胞培养。在细胞培养中，细胞生命活动和体内细胞一样，仍然是相互依存的，呈现一定的组织特异性，所以组织培养和细胞培养实际上无严格区别。 细胞培养技术是生命科学中常用的研究手段，该方法能排除神经体液因素的影响及肝、肾解毒功能的干扰，观察某些因素或药物对培养细胞的直接作用。通过实验可获得某一类型细胞的纯培养。如心肌组织中心肌细胞约占50%，非心肌细胞占50%;而经纯化分离的心肌细胞悬液中，心肌细胞可达95%以上，这样，心肌细胞原代培养实验基本不受其它细胞的干扰。在细胞培养实验中能直接观察到培养细胞生命活动的动态过程;用定时显微摄影记录可发现一些肉眼观察不到的生命现象;还可利用电镜手段、同位素标记、放免法和免疫组化法等来研究细胞形态结构及细胞内化学物质的分布。此外，还能节约研究费用。如在某些研究中，用100只动物做实验所获得结论与用100张盖玻片或几十个培养瓶而获得结论具有相同的统计学意义，而细胞培养较之大批量的动物饲养花费要小。 但细胞培养方法也存在不足之处：培养细胞失去体内细胞的制约和整体的调节作用，细胞形态和功能会发生一定程度的改变。培养方法、实验试剂对细胞形态和功能有一定的影响，如胰蛋白酶可破坏细胞表面受体、酶、抗原等。长期体外培养的细胞，由于反复传代、冻存和操作等因素的影响，可能发生染色体非整倍体改变，呈永生化或癌变的特征。 二.细胞培养的基本设备与用品 (1)细胞培养的基本设备 细胞培养的基本设备有：CO2培养箱，倒置显微镜，净化台，压力蒸汽消毒器，自动双重纯水蒸馏器，液氮罐，冰箱，电热干燥箱，电热恒温培养箱，电动吸引器，抽气泵等。 (2)常用的实验用品 1.玻璃器皿 细胞培养所用的玻璃器皿应由透明度好、无毒的中性硬质玻璃制成。常用的有以下几种：国产螺旋口培养瓶[有12.5毫升，25毫升，100毫升等规格，国外培养瓶常以底面积(平方厘米)表示];培养皿(直径有3.5厘米，6厘米，9厘米，10厘米等规格);离心管(5毫升，10毫升);注射器(1毫升，5毫升等);用生理盐水瓶代替的贮存瓶(100毫升，250毫升，500 毫升);青霉素瓶(5毫升);西力辛瓶(10毫升);其它还有尖吸管和移液管，载玻片(厚度0.8～1.2毫米)，盖玻片(厚度0.12毫米)，贮存尖吸筒用的玻璃筒或金属筒，漏斗，烧杯，量筒，贮蒸馏水瓶，冷冻管(1.5毫升，2毫升)等。
实验报告-细胞原代培养实验
细胞生物学实验报告 实验三细胞原代培养 1引言 1.1 实验目的 1. 理解细胞原代培养原理。 2. 了解细胞原代培养的应用。 3. 独立进行鼠胚和鸡胚细胞原代培养操作。 4. 巩固无菌操作技术。 1.2 实验原理 细胞原代培养：原代培养组织直接从机体获取后，通过组织块长出单层细胞或者用酶消化或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养，严格意义上的原代培养指在首次传代前的培养，但通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。 2实验仪器、试剂及操作步骤 2.1 实验仪器 超净工作台、倒置相差显微镜、CO2培养箱、酒精灯、酒精棉球、酒精喷壶、试管架、滴管筒 （头）、废液缸、手术小直剪刀、眼科直镊子、眼科弯镊子、玻璃平皿、培养瓶等 2.2 实验试剂 DMEM培养基、D-Hanks缓冲液、血清、抗生素、胰蛋白酶消化液等 2.3 实验材料 动物：9至12日龄的鸡胚、15日龄的鼠胚 2.4 实验步骤 A.鸡胚成纤维细胞的原代培养 1.实验室和超净工作台消毒，紫外照射20Min左右。 2.穿好实验服，进无菌室前穿鞋套、洗手。 3.关闭紫外灯，开日光灯和开风机，超净工作台台面应整洁，用75%酒精擦双手消毒，擦拭台面。 4.在D-Hanks缓冲液中按1：100的比例加入双抗。 5.取9-12日龄鸡胚，用照蛋器照检，画出气室边界和胎位。将鸡胚置于鸡卵架上，用酒精棉球擦拭蛋 壳。 6.用镊子在鸡蛋气室位置敲一道划痕，然后用镊子小心去除气室部位的蛋壳。 7.换用洁净的无菌镊子揭开膜，取出鸡胚至灭菌的培养皿中，用D-Hanks缓冲液冲洗鸡胚。 8.用眼科剪去除鸡胚的头部、四肢以及内脏，然后用D-Hanks缓冲液充分洗涤躯干。 9.将躯干置于小平皿盖中，用D-Hanks缓冲液至少洗涤3次，充分弃除红细胞。 10.用无菌眼科小剪刀将鸡胚躯干剪成1mm3的碎块。在胚胎组织块中加入1mL的胎牛血清，用滴管吸取组 织块接种到培养瓶内。在培养瓶中放置10-15个组织块。 11.在培养瓶的另一侧面加入完全培养基，注意不要冲到组织块。将接种组织块的培养瓶面朝上在
《组织行为学》教学大纲
《组织行为学》教学大纲 （适用于工程管理专业（房地产经营、物业管理方向）） 一、基本部分 （一）讲授内容 本课程分别从个体心理、群体心理、非正式组织、群体动力、领导者等角度论述了心理与行为、组织与行为的内在联系及相应规律，论述了与组织行为有效性相关的信息沟通、组织变革和组织发展等问题，并将组织价值观、组织风气等文化因素引入对组织行为的分析。 （二）习题和习题课（内容） 每章之后都附有习题，学生应在课堂或课后进行思考或分析。一般在讲授新课内容前对上次作业的难点和共性问题做扼要讲解。 （三）实验（内容） 本课程特别强调实验环节的教学，授课过程中尽量创造让学生身体力行、亲自感受的氛围，提供和虚拟各种灵活多样的实验环境并要求学生完成2-3个具体系统的实验。 （四）课程设计 本课程的设计分专门设计和综合设计两类，在授课过程中要求学生完成2个专门设计和1个综合设计。 二、选修或专题 结合学生的学习兴趣安排若干次专题讲座或分组辅导，主要题目有： 1、知识经济时代组织文化的培育 2、激励性薪酬体制的研究与探讨 3、团队授权：创造高绩效的项目团队 4、人力资源的柔性管理 5、企业国际化经营的文化风险识别 三、教学大纲说明书 （一）本课程在培养计划中所处的地位，课程教学目的和任务 《组织行为学》为是工商管理专业和工程管理专业的学生开设的学科基础课，是其它专业管理课的先导课。通过本课程的讲授，使学生了解现代组织行为学的基本理论和实用方法，掌握组织中人的心理和行为的规律以及如何开发人的潜力的技巧，以更好地胜任将来的管理工作。 （二）课程内容的基本要求、重点、难点、深度和广度 第一章导论 1、基本内容 组织与组织行为 组织行为的发展阶段 组织行为的研究方法 2、基本要求： 了解组织的涵义，组织的演变，组织与环境、管理的关系，组织行为学的产生与发展；理解组织行为学的定义；掌握组织行为学的研究方法。 3、重点和难点 重点是组织行为学研究的道德问题；难点的组织行为学的研究方法。 4、深度和广度： 广泛介绍组织行为学的定义、组织行为学研究的类型；深入探讨在组织行为学研究中如何正视道德问题。
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验 李永吉 12101705 12青年农场主班 第一部分：培养基母液的配制 通过配制母液过程了解植物外植体立体培养所需各种营养成分及激素种类，掌握培养基母液配制的方法。之所以要配制培养基母液，是因为考虑到在配制培养基时使用更方便、操作更简化、用量更准确，减少每次配药称量各种化学成分所花费的时间和误差，所以我们在配制培养基之前将配制培养基所需无机大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素成分分别配制成比需要量大若干倍的浓缩母液，置于冰箱保存。当配制培养基时，按预先计算好的量分别量取各种母液即可。 实验所需用具器材有：电子天平（检测灵敏度0.0001g ）、pH 计、托盘电子秤（检测灵敏度0.01g ）、冰箱、烧杯（1000mL 、500mL 、250mL 、50mL ）、量筒（2000mL 、1000mL 、100mL 、50mL ）、试剂瓶（1000mL 、250mL 、150mL ）、药匙、玻璃棒 实验所需药品试剂有：蒸馏水、1N HCl 、1N NaOH 、95%酒精、各种所需化学药品（分析纯） 实验内容： 1、无机大量元素母液的配制（20倍） 按培养基配方所需量，将各种化合物称量扩大20倍，用托盘电子秤称取，并用200mL 蒸馏水溶解于250mL 烧杯中，如溶解缓慢，可稍加热。CaCl2单独用100mL 纯水溶解。溶解后将以上溶液倒入容量瓶中定容至1000mL 。倒入试剂瓶中并贴好标签，保存于冰箱冷藏。 MS 无机大量元素母液配制 2、无机微量元素母液配制 按培养基配方所需量，将各种化合物称量扩大200倍，用托盘电子秤称取，并用200mL 蒸馏水溶解于250mL 烧杯中，。溶解后将以上溶液倒入容量瓶中定容至500mL 。倒入试剂瓶贴好标签，保存于冰箱。 母液 名称 化合物名称 配方规定量（g/L ） 贮备液的倍数 配制母液称取量/g 母液体积/mL 配一升培养基时取母液量/mL 大 量 元 素 NH 4NO 3 1.65 20 33 1000 50 KNO 3 1.9 38 CaCl 2 0.332 6.64 MgSO 4.7H 2O 0.37 7.4 KH 2PO 4 0.17 3.4
细胞原代培养细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告 细胞原代培养 姓名： 学号： 班级： 专业： 同组成员： 一、实验原理
细胞培养是生物学和医学研究中最常用的手段之一，可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养。由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来，故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段。同时也为以后传代培养创造条件。 原代培养的方法： 1、组织块法在平皿中用弯头剪把组织尽量剪碎，每个组织块小于1mm3大小。用Hanks 液洗涤2—3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。将组织块贴于培养瓶进行培养。 2、酶消化法将1mm3大小的组织块放入1个三角瓶内加入10—30ml的%的胰蛋白酶。370C磁棒搅拌消化20－30分钟。然后终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，离心800rpm 5—10分钟收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶培养。 取材注意事项： 取材要注意新鲜和保鲜。取材应严格无菌。取材和原代细胞制作时，要用锋利的器械，如手术刀或剃须刀片切碎组织，尽可能减少对细胞的机械损伤。要仔细去除所取材料上的血液（血块）、脂肪、坏死组织及结缔组织，切碎组织时应避免组织干燥，可在含少量培养液的器皿中进行。取材应注意组织类型、分化程度、年龄等，一般来讲，胚胎组织较成熟个体组织容易培养，分化低的较分化高的组织容易生长，肿瘤组织较正常组织容易培养。 二、实验目的 1、理解细胞原代培养原理 2、熟悉细胞原代培养方法与过程 3、了解细胞原代培养的应用 4、独立进行细胞原代培养操作 三、实验材料 手术小直剪刀、眼科直镊子、眼科弯镊子、玻璃平皿、培养瓶、试管、移液管、巴斯德吸管、废液缸、75%酒精棉球、酒精灯。 动物：9-12日龄的鸡胚蛋 四、实验步骤
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告 摘要：以大豆子叶为外植体，在MS培养基上附加不同浓度、不同种类的植物激素，以研究不同激素组合和不同浓度对大豆子叶愈伤诱导率的影响，并练习无菌操作。实验结果显示第2组即MS+6-BA（2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)和第 3 组即MS+KT（0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L) 培养基中愈伤组织诱导率较高，为较佳的愈伤组织诱导组合。 关键词：大豆；植物组织培养；无菌操作；愈伤组织 1.材料与方法 1.1实验材料：大豆子叶 1.2实验试剂与仪器 （1）试剂：75%酒精、MS干粉、蔗糖、琼脂、植物生长调节剂（NAA、2，4-D、KT、6-BA）、无菌水、升汞、NaOH溶液 （2）仪器：超菌净工作台、圆纸片、培养皿、封口膜、称量纸、千分之一天平、不锈钢杯子、移液枪、试管、高压灭菌锅、注射器、酒精灯、镊子、手术刀、搁置架、烧杯、电炉。 1.3实验方法 1.3.1培养基的配制与灭菌 1.3.1.1 配制培养基的准备阶段 （1）准备80个培养试管及封口膜，2个小培养皿、1个大培养皿，用洗衣粉、自来水洗净，再用蒸馏水把每个培养试管、润洗一下。带晾干后将试管编号1-80；（2）在称量纸上用百分之一天平分别称取1.5g 琼脂4份，7.5g 蔗糖4份，在烧杯里用千分之一天平上称取1.185g MS干粉4份（烧杯不要清洗）；
（3）剪小圆纸片40，均分在两个小培养皿小能从中自由取出为宜；剪大圆纸片10，均分在两个大培养皿中。然后分别用报纸包好。 （4）把接种工具手术刀、镊子、剪刀等用报纸包好。 1.3.1.2 配制培养基 （1）在装有MS干粉的烧杯中按下表加入植物生长调节剂 实验所用的所有激素浓度均为0.5mg/mL 激素的加样量(ml) 编号培养基配置 6-BA NAA KT 2,4-D 1 MS+6-BA（1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L) 0.5 0.25 2 MS+6-BA（2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L) 1.0 0.5 3 MS+KT（0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L) 0.25 0.5 4 MS+KT（1.0mg/L)+2,4-D(2.0mg/L) 0. 5 1.0 （2）用量筒量取250ml（稍多）蒸馏水，取一个不锈钢杯子加入150ml蒸馏水和称量好的琼脂，在电炉子加热沸腾2min，再加入混合好的MS培养基1号和蔗糖，混合沸腾2min，用剩余的蒸馏水定容至250ml； （3）当温度降到60℃左右时，将溶液pH 调至5.8，一般加4滴NaOH溶液即可；（4）取编号1-20的培养试管，用大量注射器以每瓶12.5ml 左右培养基分装在培养试管中，用封口膜封口，4支一捆捆扎好。 （5）用相同的方法配置2-4号培养基，并分装、捆扎。 1.3.1.3高压湿热灭菌 （1）将包好的接种工具，包好的培养皿，以及分装好的试管一起放到高温灭菌
组织行为学标准实验报告
实验报告一 学生姓名：学号：指导教师： 实验地点：上课教室实验时间： 一、实验室名称：工商管理实验室 二、实验项目名称：管理视频案例——团队法则“项目团队创新” （innovative project reams） 三、实验学时：2学时 四、实验原理： 团队是由员工和管理层组成的一个共同体，该共同体合理利用每一个成员的知识和技能协同工作，解决问题，达到共同的目标。 从群体发展到真正的团队需要一个过程，需要一定的时间磨练。这个过程分为以下几个阶段：第一阶段，由群体发展到所谓的伪团队，也就是我们所说的假团队。第二阶段，由假团队发展到潜在的团队，这时已经具备了团队的雏形。第三阶段，由潜在的团队发展为一个真正的团队，它具备了团队的一些基本特征。 五、实验目的： 通过本实验，使学生对团队及团队建设有感性认识，提高学生的合作精神和团队意识。 六、实验内容： 纸质资料见资料一 音像资料见管理视频案例 资料一：大约七月中旬上午十点钟。你乘坐的飞机坠落在美国西南部索纳拉大沙漠中，除了一些灌木丛外一无所有。当时气温将达摄氏45度，所以地表温度会接近摄氏50度。飞行员和副飞行员都死了，其他人都活着。 飞行员在飞机坠落前没有告诉任何人飞机所在的位置，只有一些人在出事前向外观看，根据地上的标记，估计偏离航线有105公里。在出事前几分钟，飞行员曾告诉你：在东北方向距离113公里的煤矿上，有人居住。你穿着单薄的衣服，短袖衬衫、短袜和皮鞋，每个人都带有手帕。你们小组总共有25英镑、一盒烟和一支圆珠笔。 问题：请将下列15件物品根据重要性排列为1至15，以便在飞机着火前（20分钟后）尽可能多的取得必需品。你们小组的成员决心呆在一起。相信共同努力能使你们成为幸存者！
决策天地实验报告
决策天地实验报告 篇一：决策天地工商管理模拟实验报告 工商管理培训模拟实验 学校 班级 学生姓名 指导教师河南科技大学工商管理091赵洋洋田广通实验报告 工商管理培训模拟实验报告 一、实验目的 1．在模拟过程中学习制定各种经营战略和销售策略。 2．根据不同的经济形势和销售预测报告改变经营战略。 3．连续模拟七个周期，使模拟者在短期内找出规律，做出成功的企业决策。 二、实验内容及步骤 系统可连续运行七个周期。所有七个周期模拟完成之后，各企业可获得评价总表和综合评分。依此作出相应的图表可帮助（学员）模拟参加者从整体上对已实施的经营战略和决策进行剖析，从中找出规律，领会企业成功的秘诀。 第一周期的竞争结果数据、评价总表数据及企业报告报表分析、打印完后，即可转入到第二周期的决策模拟（以后各周期过程相同）。
重复上述过程，直至所有七个周期模拟过程全部完成。最后一个周期完成后，在主菜单中选择“显示评价总表”，并在下一屏中选择“报表打印评价总表数据”后，即可打印出所有企业、七个周期的主要决策数据、竞争结果数据和综合评价数据。 总结性发言主要内容可围绕： 1. 本企业在模拟过程开始时制订是何种经营战略和销售策略？ 答：这次模拟试验中在经营中我采取是成本领先战略，通过 降低成本来获得高的收益，我一般产品的成本稳定在750——850之间。在销售上我采取的是适当增加广告的投入来扩大产品的宣传，从而增大产品的销量。 2. 七个周期过程结束后，实施情况和原打算有无偏差？ 答：有偏差。到最后一期原材料和附件的库存还有结余，造成了资源的浪费、企业最后的盈利没有达到原先预期的标准、在原材料的使用和人员的安排上也没有做到成本的最小化，使人员和机器数不协调。 3. 若有偏差的话，造成的主要原因是什么？是本企业决策失误， 还是受其他企业决策影响？
植物组织培养实验报告
实验一植物组织培养实验报告 一实验目的 让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。 二实验原理 植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸（IAA ）和 6 –苄基氨基腺嘌呤（6 – BA ）的比例，决定了根和芽的分化。 三实验器材 （一）试剂 乙醇、IAA 或 2 ，4 – D 、HgCl 2 （或次氯酸钠）、6- 苄基氨基腺嘌呤（6-BA ） MS 培养基 （二）仪器设备 培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL ），烧杯，量筒，培养皿，超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等 三实验步骤 1. 配制培养基 （1 ）愈伤组织诱导培养基：MS 培养基（蔗糖含量为10 g/L ，2,4 – D 含量为2 mg/L ，琼脂10 g/L ）。 （2 ）试验培养基：在MS 培养基中按表33 – 1 加入IAA 和6–BA 。 吲哚乙酸先用少量0.1 mol/L NaOH 溶解，6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。 2. 培养基灭菌 将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至pH 5.8 ，趁热分装于100 mL 三角烧瓶中，每瓶约20 mL 。待培养基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后
《细胞实验》02 原代细胞培养和传代培养的方法
原代细胞培养和传代培养的方法 原代培养 原理 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器：培养箱（调整至37℃），培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、离心机、水浴箱（37℃） 材料：动物组织块 试剂：1640培养基（含20%小牛血清），0.25%胰酶，Hank′s液，碘酒 初代消化培养法 1. 准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2. 布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。 3. 处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。 4. 剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。 5. 消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。 6. 分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织
已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。 7. 计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。 8. 培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。 初代组织块培养法 1. 剪切：把组织小块置于小烧杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂洗二三次以去掉表面血污，吸静Hanks液，用眼科剪反复剪切1mm3块为止。 2. 摆布：用弯头吸管吸取若干小块，置于培养瓶中，用吸管弯头把组织小块摆布在培养瓶底部，小块相互距离以0.5cm为宜，每一25ml培养瓶底可摆布20~30块。 3. 轻轻翻转培养瓶，另瓶底向上，注意翻瓶时勿另组织小块流动，塞好瓶塞，置36.5℃温箱培养2小时左右（勿超过4小时），使小块微干涸。 4. 培养：从微箱中取出培养瓶，开塞，46度斜持培养瓶，箱瓶底脚部轻轻注入培养液少许，然后缓缓再把培养瓶翻转过来，让培养液慢慢覆盖附于瓶地上的组织小块。置温箱中静止培养。待细胞从组织块游出数量增多后。再补加培养液。 传代培养法 原理 细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时 也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。传代培养也是一种将细胞种保存下去
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告 一实验目的 让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。 二实验原理 植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸（IAA ）和 6 –苄基氨基腺嘌呤（6 – BA ）的比例，决定了根和芽的分化。 三实验器材 （一）试剂 乙醇、IAA 或 2 ，4 – D 、HgCl 2 （或次氯酸钠）、6- 苄基氨基腺嘌呤（6-BA ） MS 培养基 （二）仪器设备 培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL ），烧杯，量筒，培养皿，超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等 三实验步骤 1. 配制培养基 （1 ）愈伤组织诱导培养基：MS 培养基（蔗糖含量为10 g/L ，2,4 – D 含量为 2 mg/L ，琼脂10 g/L ）。 （2 ）试验培养基：在MS 培养基中按表33 – 1 加入IAA 和6–BA 。 吲哚乙酸先用少量0.1 mol/L NaOH 溶解，6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。 2. 培养基灭菌 将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至pH 5.8 ，趁热分装于100 mL 三角烧瓶中，每瓶约20 mL 。待培养基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下灭菌20 min 。取出三角烧瓶放在台子上，
组织行为学实验报告
“组织行为学”试验报告谈谈对卡特尔16PF实验的体会 学院管理学院 专业人力资源管理 年级班别 2011级（2）班 学号 3111004607 学生姓名罗志赢 指导教师惠青山 2013年12月8日
在这次的组织行为学的实验中，我做了卡特尔16PF实验。在这个实验中，主要测试了我“与他人的关系方面”、“决策能力方面”、“做事风格方面”、“心理健康方面”四个方面，通过这些方面来进一步认识自我。 在与他人的关系方面，我与人交往以及合作能力处于中等水平。活泼，健谈，经常主动与他人交谈。在社交场合中较为轻松，与人交往表现得不卑不亢，但又不会过分突显。对多数人能较为公开展示自我，比较直率。独立性不是很强，但也不经常依赖他人；在决策能力方面，思维敏捷，反应迅速，学习能力强。比较遵循常规，又能保持一定的开放性。即关注事情的细节，又能从广阔的思路去考虑问题。做判断和决策的时候，能够在权衡感性和理性两个方面的需求；在做事风格方面，做事时候，独立性不是很强，但也不经常依赖他人。对新事物和新观念并不排斥，同时能够考虑到传统的行为标准。有恒负责，做事尽职。比较能够克制自己，对事情能够进行事先计划和组织，有时候也会较为放任；而在心理健康方面，情绪稳定，能够冷静应付现实，能振作勇气，维持团体的精神。对刚认识的人较警觉，但完全了解他人以后，会乐于接受他们。对自己的长处或缺陷有比较现实的认识，能为自己的失误承担责任。心平气和，很少紧张，对他人也很少感到不满或者厌烦。 通过这次的卡特尔16PF实验，我对自己有了更加全面深入的了解。一直以来，对自己的认识都是一种比较模糊的状态，对自己的认识不深入。通过这一次的卡特尔16PF实验，我清楚的知道了自己是一个比较中肯的人，能在大众中适当的保持自己的性格，温和待人。做事有自己的一套，比较的实际化。细心而又有些淡定。这些都是我的优点。相同的，凡事都有两面性。我的独立性不是很强，有时候处事偏于感性，较为放任，还带有些强势。这些方面都是需要我对自己进一步的认清自己的不足，有待于我去努力和完善自我。正所谓人无完人，我很多的方面虽然无法达到尽善尽美的境界，也还有很多的不足，但是我知道，只要我坚持努力不懈，凡事尽自己的最大的努力去做到最好，就已经是一种很可贵的东西了。我会不时的通过测试来监督自己，鞭策自己去做得更好，一步一步的向着自己的目标靠近。
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告 Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020
院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号 姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。 植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件
把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加