烟草植物组织培养实验报告2223
烟草叶片的组织培养
一、实验目的
本实验通过配制3种不同的培养基来实现烟草种子苗叶片诱导、分化及植株再生从而深刻理解植物细胞的全能性、学习和掌握植物组织培养技术，
二、实验原理
植物组织培养是从20世纪30年代初期发展起来的一项生物技术。由于其拥有占地少、繁殖系数大等特点，现以在全世界的园林植物尤其是花卉的种苗繁育上得到广泛应用。本文着重介绍组织培养技术的理论原理、操作过程、生产技术以及经济核算等方面的内容，使大家对组织培养在园林植物尤其是花卉的种苗繁育的应用有所了解，为以后的实际操作提供依据。
在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。
培养基配方设计是组培法育苗中的关键步骤。根据理论与实际经验，对不同种类的花卉及不同的取材部位，需设计出相适应的配方，并从中筛选出最佳者。
继代芽增殖培养：很多花卉植物经过2-6 周的培养即可分化出大量的不定芽。根据情况可以将这些增殖了大量新芽的外植体重新分割进行几代培养，以扩大繁殖规模直至满足繁殖需要为止。
三、实验材料
植物材料：烟草植株
药品：激素（2,4-D、NAA、6-BA浓度均可）、1N NaOH、1N HCl 蒸馏水、 70%酒精、 0.01%升汞
仪器：1 玻璃杯、1玻璃棒、1pH试纸(5.5-9.0) 1瓶无菌水、1个无菌烧杯、1
包无菌滤纸、 1个无菌白瓷板、培养瓶若干移液器、微波炉、灭菌器、超净工作台、酒精灯、解剖刀、镊子
四、实验方法与步骤
4.1 MS培养基母液的配制
注意：
1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O 单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。2．微量元素母液的配制
按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。
3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴
4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。
5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。
1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。
2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。
．生长调节剂母液配制：
为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。
不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。激动素（KT）和6-苄基嘌呤（BA）可溶于少量1mol/L的盐酸中，叶酸需用少量稀氨水溶解。
称取50mg生长调节物质，溶解后，在100ml的容量瓶中定容，配制的母液每毫升则含有生长调节物质0.5mg，配制后一般要求在低温（0~4℃）保存，配制培养基时如每升（1000ml）需添加的生长调节剂物质为0.5mg时，则取1ml母液即可。
4.2 培养基配制和灭菌
4.2.1培养培养基配制程序
本次实验使用
（1）愈伤组织诱导及其幼芽分化培养基:MS+2,4-D 0.5 mg/L +6-BA 1.0 mg/L；（2）幼芽增殖培养基：MS+6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L；
（3）生根培养基：MS+NAA 0.2 mg/L。
注意事项：上述培养基均在MS固体培养基溶化后降低到50左右后，加入相应激素所得， MS固体培养基的配置过程在此不作过多赘述
上述培养基均附加3%蔗糖，0.8%琼脂，pH5.8，培养温度25±2℃，光照强2000lx。
(一).母液吸取量的计算
配制培养基的升数
公式1：母液吸取量= 母液体积（CC）×——————————
母液浓缩倍数
培养基要求的含量
公式2：母液吸取量= ———————————（各种生长调节剂）
母液每CC的含量
（二）各种母液按顺序编号排列
A.大量元素；
B.CaCl2.2H2O；
C.微量元素；
D.铁盐；
E.有机物；F．生长素萘乙酸（NAA）：配制0.5mg/ml的NAA称取50mg ， NAA用少量95% 酒精溶解后加蒸馏水定容至1000ml；G..细胞分裂素、激动素（KT）配制0.5mg/ml的KT 称50mgKT用少量1N HCL溶解后,加蒸馏水定容至100ml。
(三)配制培养基（1000ml）
1.琼脂: 称取5~7g琼脂，加入300ml蒸馏水，加热溶解直至完全溶解为止.
2.蔗糖3%用质量较好的白糖代替，称取30g白糖，溶于溶有琼脂的300ml蒸馏水
中。
3.各种母液的吸取（培养基1L）
（1）用50ml量筒量取大量元素母液（A）和CaCl2·2H2O母液（B）各100ml
（2）分别用10ml移液管或吸管吸取微量元素（C），铁盐（D）母液各10ml
（3）用10ml移液管或吸管吸取有机物（H）10ml
（4）移取激素
将上述溶液全部混合于琼脂与蔗糖溶液中，混合均匀后，加热至80℃左右，用酸度计或精密PH试纸测定培养基的PH一般要求5.8~6.0，过酸过碱则用1N NaoH和1N HCL调整。
二．分装：用一个接有胶管的分装器趁热装培养基，1000ml培养基分装到25-30个三角瓶中，每个三角瓶约30ml左右（一般占试管、三角瓶容量1/4~1/3左右）注：培养基勿碰瓶壁。
三.包装：分装好的三角瓶用封口膜包扎好，标明培养基代号即可进行灭菌。
用具清理和洗涤：各种母液按原位置摆整齐，用过的量筒，移液管、烧杯、铝锅等用水洗涤干净，然后按次序放回原处。
4.2.2 培养基的灭菌——高压蒸汽灭菌（高压蒸汽灭菌锅的使用方法）
具体操作步骤：
1. 高压锅放水至平把架；
2. 把包扎好的培养基装入高压锅;
3. 盖上热压锅盖,上紧螺帽(注意对角拧紧螺帽)关上气阀和安全阀.
4. 然后接通电源.
5. 压力计升至0.05MPa时，打开放气阀,排除冷空气(此步很重要)。
6. 排除冷空气后,关闭放气阀，待压力升到0.11MPa位置时，开始计算灭菌时间，具体方法：当压力锅指针升至0.12MPa时，关闭电源，待指针下降至0.11MPa时接通电源，不断重复此操作过程，维持20分钟。
7. 灭菌时间达到20分钟后，除去电源，打开放气阀(注意要逐渐放气)待高压锅内的空气完全排除后，打开热压灭菌锅盖(注意对角扭松螺帽)稍待冷后再把培养基取出。
8.经过灭菌的营养培养基不宜放置太长，应尽早使用，但为了在使用前能检查培养基有无微生物污染，可将培养基置于25℃下保存4天，如果培养基需要贮存较长时间，可在4℃低温下保存。
灭菌高压锅有大型卧式、中型立式、小型手提式等多种型号和规格，无论哪种型号，操作的步骤都很相近。
进水→放进培养基→盖紧锅盖→关上放汽阀→检查安全阀→接上加热源→待压力升至0.05MPa时排锅内冷空气，关上放气阀→0.11MPa(121℃)下灭菌20~25分钟，保持稳定压力→除热源→逐渐打开放气阀→锅内空气排除完后→开放锅盖→稍冷后取出培养基。
4.3植物材料表面灭菌——消毒剂灭菌
从外界或室内选取的植物材料，都不同程度地带有各种微生物。这些污染源一旦带入培养基，便会造成培养基污染。因此，植物材料必须经严格的表面灭菌处理，再经无菌操作手续接到培养基上，这一过程叫做接种。
1.接种步骤：
第一步：清理材料→→流水冲洗→→加入吐温（或洗衣粉）清洗→→自来水冲洗
第二步：对材料的表面浸润灭菌： 70%酒精浸10-30秒→→无菌水
第三步：灭菌剂处理→→ 0.1-1%升汞5-8 min（或其他灭菌剂）
第四步：无菌水进行冲洗
注意事项：
１.灭菌剂一般要临时配制，现配现用．升汞可以短期储存．
２.对去除较容易的灭菌剂灭菌后无菌水冲洗３-４次，升汞一般５-８次，每次不少于３min ３.灭菌时要轻轻的搅拌，消除气泡，使消毒更彻底．
４.灭菌时间是从倒入消毒液开始，至倒入无菌水时为止。
５.灭菌液要充分浸没材料
2.无菌操作可按以下步骤进行：
（1）在接种3天前用甲醛熏蒸接种室，并于接种前3小时打开其内紫外线灯进行杀菌；（2）在接种前20分钟，打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯；
（3）接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换穿拖鞋等；
（4）上工作台后，用酒精棉球搽拭双手，特别是指甲处。然后搽拭工作台面；
（5）先用酒精棉球搽拭接种工具，再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍，然后反复过火尖端处，对培养皿要过火烤干；
（6）接种时，接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽等；
材料吸干后，一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀，对材料进行适当的切割。（如叶片切成0.5cm2的小块；茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含1-2片叶原基）在接种过程中要经常灼烧接种器械，防止交叉污染。
（7）接种完毕后要清理干净工作台，可用紫外线灯灭菌30分钟，若连续接种，每5天要大强度灭菌一次。
4.4烟草叶片愈伤组织的诱导和不定芽的分化
●于超净台中彻底冲洗外植体；70%酒精消毒3min；无菌水冲洗3遍，每
遍3mini；将烟草叶片残留的水分用灭过菌的滤纸吸干；白瓷板上用消毒的解剖刀分割为1-1.5cm2的小块；接入相应的MS培养基上，每瓶接种4-5块。接入（1）中培养。
●约2～3d后，叶片外植体卷曲、增厚、膨胀；
● 15d后外植体脱分化形成疏松絮状浅黄绿色的愈伤组织，愈伤组织诱导率
为100%；
● 30d后，从叶片外植体产生的疏松愈伤组织上分化出许多浅黄绿色芽点；
● 60d后，不仅从愈伤组织上分化出越来越多幼芽，芽诱导频率(芽数/块愈
伤组织)为25～35，而且还可观察到，该愈伤组织较早分化产生的幼芽叶片呈现不同程度白化（或缺绿）。但此时若将此缺绿幼芽切下，转接至不加2,4-D的幼芽增殖培养基（2）上，
3～5d后即可恢复正常，缺绿症状消失，并可不断增殖，发育成绿色健壮的小苗。
4.诱导生根及移栽
取约3～4cm长的无根小苗接种于生根培养基（3）中，约7～8d后，几乎所有外植体均从其基部产生白色幼根，根诱导频率为3～5，部分在培养基表面的根具大量白色根毛。当试管苗长至5～6cm高时，打开瓶口，在散射光下放置2d后取出，洗去根部残留培养基，种植于经过消毒的珍珠岩、泥炭土和菜园土等量混合的基质中，成活率可达95%以上。
5．数据记录
烟草叶片愈伤组织诱导情况
编号每瓶接种数愈伤组织诱导率愈伤组织状态染菌率
烟草叶片愈伤组织诱导情况
烟草叶片愈伤组织再生植株情况
烟草叶片诱导生根情况
五、实验结果与分析
1、将观察结果加以描述和统计；对出现诱导失败和污染的情况要加以认真分析，找到原因。
2、绘图或照片
六、思考题
1、外植体脱分化形成愈伤组织的过程中，哪些激素起作用？
2、如果时间允许，请设计下游诱导愈伤组织分化和再生植株的实验
附录1常用植物激素
附录2.常用药品的配置方法
1. 1mol/L HCl的配制：根据盐酸的密度37%盐酸溶液的密度为1.19克/毫升，假设要配制1000ml 1mol/L HCl，则需要盐酸的物质的量为1mol，所以需要量取37%的盐酸为
1*36.5/37%/1.19=82ml
2. 1mol/L的NaOH的配制：称40gNaOH，然后融于1000ml的蒸馏水中。（定容到
100ml）
3. 95%的酒精配制成75%的酒精：用量筒量取750ml的95%酒精加入200ml的蒸馏水即可得到75%的酒精。
如果用无水酒精配制75%的酒精，则量取750ml的无水酒精，再加水250ml。
4. 0.1%的升汞配制：先称取1克升汞粉末，然后用蒸馏水溶解最后定容到1000ml。
5. 1mg/ml的2.4-D的配制：称取0.1g2.4-D，用少量1mol/LnaOH或酒精助溶，然后定容到100ml。
6. 1 mg/ml的6-BA的配制：称取0.1g6-BA，用少量1mol/L HCl或1mol/LNaOH助溶，然后定容到100ml。
7. 0.5mg/ml的NAA的配制：称取0.05gNAA，用少量95%酒精助溶，然后定容到100ml。
烟草栽培学复习
名词解释生物产量：烟草在整个生长季节中所积累的干物质重量。 经济产量：单位土地面积上所收获可用干物质的重量，对烟草来说就是烟叶的产量。 烟叶品质：消费者对烟叶燃吸过程中所产生的香气、劲头、吃味、刺激性等几个主要因素的综合感受和吸烟安全性的综合评价。 成熟度：烟叶在田间发育过程中形成质量水平的反映。 身分：烟叶的组织构造密度，即叶肉细胞的大小及其排列的疏密程度。 物理特性：叶片的厚度、叶面密度、单叶重、平衡水含量、填充值、含梗率等。评吸：通过烟叶燃吸后的烟气在经过人的口腔、鼻腔和喉部等感官时所产生的感觉评定烟叶质量的方法。 劲头：烟气中的烟碱对人体器官作用时，能够引起兴奋反应的程度。 刺激性：口腔、鼻腔和喉部对烟气产生的刺激感强烈冲击的接受程度。 香气：烟叶燃烧后进入烟气中所表现出来的一种令人愉快的特殊芳香。 吃味：烟气反映在口腔内包括酸、甜、苦等味道感觉的总称，是烟气被口腔反映的味感。 种植制度：一个地区或生产单位的作物组成、配置、熟制与种植方式的总称，包括因地种植、轮作倒茬、间作套种、混作和复种等内容。 轮作：在同一块土地上于一定年限内有计划、有顺序地轮换种植不同类型作物的种植方式。 套种：在前一季作物生长后期，在其预留的行间或带间套种其他作物的种植方式。壮苗：生长发育良好，新陈代谢正常，有机物质合成积累较多，内含物丰富，碳氮比协调，抗逆性强，移栽成活率高的烟苗。 格盘育苗：使用由若干苗穴组成的育苗盘培育作物秧苗的方法。 漂浮育苗：在温室或塑料薄膜覆盖条件下，利用成型的膨化聚苯乙烯格盘为载体，装填上人工配置的培养基质，将格盘漂浮于含有完全矿质营养的苗池中，完成烟草种子的萌发、生长和成苗过程。 烟草需水量：每生产单位重量干物质由烟株蒸腾所消耗水分的数量。水分利用效率：烟株消耗单位重量水分所生产的同化物的量。 圆顶：烟株打顶10-15d后，上部叶完全展开，与中部叶大小接近，烟株呈筒形的时
植物组织培养报告
植物组织培养报告内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）
大蒜茎尖的组织培养 谢婷婷江宋青万嫣文吕凌宇一、实验目的 掌握植物组织培养的相关理论知识及操作方法； 通过自行设计并完成实验，提高动手能力和思维能力； 利用植物细胞的全能性，使大蒜茎尖经过脱分化作用形成愈伤组织，再分化为有结构的组织和器官，最终增殖培育出大量品质优良的大蒜试管苗。二、实验原理 植物组织培养是利用植物细胞的全能性原理。植物组织培养是在无菌环境下，将离体的植物器官、组织以至单个细胞，在人工配置的培养基上培养，使其能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化”。已经脱分化的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化”。 三、实验材料、试剂和器材 1 供试材料 以购于府前菜场的大蒜为实验材料，实验在丽水学院生态学院组培实验室进行。 2 仪器与设备 超净工作台、培养事、电子天平、烧杯、容量瓶、玻璃棒、量筒、移液
管。 3 试剂 70%酒精、95%酒精、0.1%升汞、蔗糖、琼脂条、6-BA（1.5 mg/L；2.0 mg/L）、2,4-D（2.0 mg/L）、NAA（1.0 mg/L；）、IBA（2.0 mg/L）、10倍的大量元素、100倍的微量元素、100倍的铁盐、100倍的有机物。 四、实验步骤 1.培养基的配制及灭菌 诱导培养基：MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L 出芽培养基：MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L 生根培养基：MS+IBA 2.0 mg/L （1）将MS母液（10倍的大量元素、100倍的微量元素、100倍的铁盐、100倍的有机物）按顺序排列、检查是否失效。 （2）在装有3/4蒸馏水的容器中加入0.7%琼脂和3%蔗糖，加热溶化。（3）依次吸取适量各种母液移到容器中。 （4）用蒸馏水定容到相应体积。 （5）调节pH值(用0.1M的NaOH或HCl调节)至5.8-6.0。 （6）向培养基中加入适量激素。 （7）将配制好的培养基进行分装（20-30ml/瓶）。 （8）用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121 ℃下灭菌 20 min 。取出三角烧瓶放在台子上，冷却后备用。接种操作所需的一切用具（烧杯、培养皿、灭菌水等），需同时灭菌。 （9）将灭菌后的培养基于常温下放置一星期，观察有无污染。
烟草植物组织培养
烟草植物组织培养实验实验目的一学习和掌握植物组织培养技术，理解植 物细胞的全能性。实验原理二年代初期发展起来的一项生物技术。由于其拥有占地世纪30植物组织培养是从20少、繁殖系数大等特点，现以在全世界的园林植物尤其是花卉的种苗繁育上得到广泛应用。本文着重介绍组织培养技术的理论原理、操作过程、生产技术以及经济核算等方面的内容，使大家对组织培养在园林植物尤其是花卉的种苗繁育的应用有所了解，为以后的实际操作提供依据。在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。①起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细胞，通常都是成熟细胞，处在静止状态。起动期是通过一些刺激因素（如机械损伤、改变光照强度、增加氧等）和激素的诱导作用，使外植体细胞的合成代谢活动加强，迅速进行蛋白质和核酸的合成。机械损伤能诱导植物体细胞开始分裂，如伤口上会出现愈伤组织。在植物组织培养中沿用了愈伤组织这一名词，但是植物组织培养中诱导外植体细胞分裂形成的愈伤组织，大都不是损伤的结果。外源的生长素类物质对诱导细胞开始分裂效果很好，因此生长素类物、萘乙4-D4-二氯苯氧乙酸2，，质在植物组织培养中得到广泛应用，常用的有生长素（2）细胞分裂素IBA、吲哚丙酸IPA和吲哚丁酸NAA酸、萘乙酰胺NAD和吲哚乙酸IAA））等。分裂期是，KT-30CPPU糠氨基嘌呤（KT）氯吡苯脲（6-（苄氨基嘌呤6-BA、6-指外植体细胞经过诱导以后脱分化，不断分裂、增生子细胞的过程。处于分裂期的愈伤组织的特点是：细胞分裂快，结构疏松，颜色浅而透明。外植体的脱分化因植物种类、器官来源及其生理状况的不同而有很大差别。例如，烟草、胡萝卜等植物的脱分化比较容易，禾本科植物的脱分化比较难；花的脱分化比较容易，茎、叶的脱分化比较难；幼嫩组织的脱分化比较容易，成熟的老组织脱分化比较难。分化期是指在分裂期的末期，细胞内开始出现一系列形态和生理上的变化，从而使愈伤组织内产生不同形态和功能的细胞。这些细胞类型有薄壁细胞、分生细胞、色素细胞、纤维细胞，等等。外植体的细胞经过起动、分裂和分化等一系列变化，形成了无序结构的愈伤组织。如果在原来的培养基上继续培养愈伤组织，会由于培养基中营养不足或有毒代谢物的积累，导致愈伤组织停止生长，甚至老化变黑、死亡。如果要让愈伤组织继续生长增殖，必须定期地（如2～4周）将它们分成小块，接种到新鲜的培养基上，这样愈伤组织就可以长期保持旺盛的生长。愈伤组织的形态发生方式经过起动、分裂和分化期产生的愈伤组织，其中虽然发生了细胞分化，但是并没有器官发生。只有满足某些条件，愈伤组织的细胞才会发生再分化，产生芽和根，进而发育成完整植株。愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式（器官发生型）和胚状体方式两种。不定芽方式是在某些条件下，愈伤组织中的分生细胞发生分化，形成不同的器官原基，再逐渐形成芽和根。胚状体方式是由愈伤组织细胞诱导分化出具有胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株。这种由愈伤组织中的薄壁细胞不经过有性生殖过程，直接产生类似于胚的结构，叫做胚状体。在植物组织培养中，不定芽方式和胚状体方式是愈伤组织形态发生的两种最常见和最重要的方式。胚状体方式比不定芽方式有更多的优点，如胚状体产生的数量比不定芽多，胚状体可以制成人工种子，等等。 培养基的主要指标为营养的组分，植物生长物质的浓度，特别是后者对外植体的分化1 / 5 矿质营养。矿质营养又叫无机营起着极其重要的作用。培养基的组织成分主要包括： 1. 、养，是指植物在生长发育的过程中所需要的各种化学元素，其中包括大量的元素如N、P 2. Mn、Zn、Cu等，其对植物的生长发育中有着重要的生理作用。FeK和微量元素如、B、维生素。维生素能够以辅酶的形式参与多种酶系的反映，直接影响到蛋白质、糖、脂肪等植物生长物质。其
《作物栽培学》作业试题及答案
单项选择题 1、作物产量中常说的经济系数是指 1.生物产量与经济产量之比 2.经济产量与生物产量之比 3.生物产量与经济产量的百分比 4.经济产量与生物产量的百分比 2、作物品质的评价指标中，下述属于形态指标的是 1.蛋白质 2.氨基酸 3.脂肪 4.颜色 3、作物生长的“营养三要素”是指 1. C、H、O 2. N、P、K 3. S、N、P 4. N、P、S 4、下列哪种根属于产品器官 1.气生根 2.须根 3.块根
4.不定根 5、下列属于喜钾作物的是 1.水稻 2.玉米 3.马铃薯 4.小麦 多项选择题 6、影响复种的条件包括 1.热量 2.水分 3.地力与肥料 4.劳畜力与机械化等 7、下列哪些作物需经过一定时期的低温诱导才能正常开花结实。 1.大麦 2.小麦 3.黑麦 4.油菜 8、作物的播种方式包括 1.插播
2.条播 3.点播 4.重播 9、下面哪些材料可用于繁殖下一代 1.颖果 2.块茎 3.块根 4.鳞茎 10、按照土壤质地进行分类，一般可以把土壤区分为下列几大类 1.砂土类 2.黑土类 3.壤土类 4.黏土类 11、根据作物对二氧化碳同化途径的特点，下列哪些作物属于C3作物 1.小麦 2.大豆 3.玉米 4.棉花 12、间作与套作不相同点在于 1.共生期长短不一样 2.熟制不一样 3.复种指数不一样
4.前者是成行种植，后者是成带种植 13、关于土壤质地下列表述正确的是 1.沙质土壤结构良好，保水保肥。 2.壤质土耐旱耐涝，适耕期长。 3.黏质土吸附作用强，保肥性好。 4.沙质土壤保水不保肥。 14、下列属于长日照作物的是 1.小麦 2.烟草 3.大麦 4.油菜 15、种子萌发必不可少的因素包括 1.光照 2.温度 3.水分 4.氧气 16、从引种角度看，短日照作物由北方向南方引种，下列表述正确的是 1.生育期缩短 2.生育期延长 3.生育期不变 4.营养生长期缩短 17、按照作物“S”生长进程，下列说法正确的是
烟草栽培学烟草生物学特性
第二章烟草生物学特性 我国的烤烟、晒烟和晾烟，绝大多数属于普通烟草，只有花色呈黄色的烟草属于黄花种。还有少数种如异香烟草（N. alatalioketotto）、美花烟草（N. sylverstris spegetcomes）和香花烟草（N. suaveolens Lehn）等，因其花色美丽作为观赏植物栽培。对红花烟草较全面的分类方法是Wilson和Loomis提出的以下分类，界：植物界；亚界：有胚植物亚界；门：维管植物门；亚门：羽叶亚门；纲：被子植物纲；亚纲：双子叶亚纲；目：茄目；科：茄科；属：烟草属；种：红花烟草种。 第一节烟草的植物学特征特性 烟草是多年生植物，在120~130天的大田生育期中，生长成为比种子大3000万倍的庞大植株，平均每小时增长约为种子的万倍。烟草株高叶大，需水肥很多。因此，根系在烟草一生中就显得更重要。 一．根 （一）根的形态 1．根的分布烟草的根属圆锥根系，由主根、侧根和不定根三部分组成(见图)。 烟草种子萌发时，胚根突破种皮后直接生长而成主根，主根产生的各级大小分支都叫侧根，由茎上发生的根都叫不定根。根系的密集范围比分布范围小得多，根系密集深度约在地表以下40cm，密集宽度在距茎周40cm范围，打顶以后有根系伸长到40cm以下或40cm以外。烟草的发根能力很强，采用培土的方法可使茎秆上长出很多不定根，起到充分吸收表土营养的作用。 2．烟根的初生构造 根尖由根冠、生长点、伸长区和根毛区组成， 从横切面看，烤烟根的初生结构由表皮、皮层和中柱三部分组成。 3．烟根的次生构造 主根和侧根在完成了初生生长后，还会进一步进行次生生长，使根的直径增粗，并形成次生维管组织和周皮等次生结构。次生构造是由维管形成层和木栓形成层分化而成，在根毛区上方开始出现。维管形成层向内产生次生木质部，向外产生次生韧皮部，形成根的次生维管组织；木栓形成层向外产生木栓层，向内产生栓内层，形成根的周皮。 （二）根的发生 烟草种子由种皮、胚和胚乳三部分组成。胚根正对着种孔。在适宜的温、湿度和气体交换条件下，种子吸收水分开始萌动，胚根突破种皮伸长出来，胚根突出种皮后即向地弯曲并垂直向下生长，就形成了主根。主根入土之后可以不断地形成侧根，侧根起源于中柱鞘，在根毛区的上部开始出现。 不定根是由移栽时埋于土层下方的茎上产生的，数量充足但分布较浅。 在幼苗生长的中后期，根系水平生长速度大于垂直生长，7叶期比5叶期根深增长了1.5倍，水平生长增长了1.8倍，9叶期比5叶期根深增长了1.6倍，而水平生长增长了2.6倍。 烟苗移栽到大田后，由于主根被切断，主根停止伸长，侧根大量发生，活力很强。在适
植物组织培养基础理论与基本知识
第一章植物组织培养的基础理论与基本知识 第一节植物组织培养的基本概念及类型 一、教学目标： 通过对植物组织培养的概念和植物组织培养的类型的学习,使同学们对植物组织培养技术有大概的了解和认识,让同学们建立起对该学科学习兴趣。 二、教学效果目标： 1、理解、掌握植物组织培养的概念； 2、掌握植物组织培养的类型。 三、教学重点： 1、理解、掌握植物组织培养的概念； 2、掌握植物组织培养的类型。 四、教学难点： 1、理解、掌握植物组织培养的概念； 2、掌握植物组织培养的类型。 五、教学效果评价： 1、为了激发学生的学习积极性和主动性，不宜采用百分制的方法进行评价，而是采用A、B、C、D四个评价等级进行评价。 2、评价标准： A、能用自己的语言对植物组织培养的概念和类型等几个基本概念进行正确的描述，能熟练的判断植物组织培养的类型。能按时按量甚至超量完成
作业，并且无误。 B、能基本用自己的语言植物组织培养的概念和类型等几个基本概念进行正确的描述，能基本会判断植物组织培养的类型。能按时按量完成作业，基本无误。 C、在老师的指引下或参照课本基本用自己的语言对植物组织培养的概念和类型等几个基本概念进行正确的描述，能基本判断植物组织培养的类型。能按时按量完成作业，但错误较多。 D、基本不认真听课，课堂很随意，基本不听老师教导，对所学内容基本不懂，很少作作业。 六、采用理论教学。 七、教学时数： 2学时 教学过程 一、新课导入：约（10分钟） 以同学们感兴趣的动物克隆技术人手，向同学讲述克隆技术基础技术，然后转到植物组织培养技术上来。 二、新课：（约80分钟） 板书： 第一章植物组织培养的基础理论与基本知识
烟草植物组织培养
烟草植物组织培养实验 一实验目的学习和掌握植物组织培养技术。深刻理解植物细胞的全能性。 二实验原理 植物组织培养是从20世纪30年代初期发展起来的一项生物技术。由于其拥有占地少、繁殖系数大等特点，现以在全世界的园林植物尤其是花卉的种苗繁育上得到广泛应用。本文着重介绍组织培养技术的理论原理、操作过程、生产技术以及经济核算等方面的内容，使大家对组织培养在园林植物尤其是花卉的种苗繁育的应用有所了解，为以后的实际操作提供依据。 在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。①起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细胞，通常都是成熟细胞，处在静止状态。起动期是通过一些刺激因素（如机械损伤、改变光照强度、增加氧等）和激素的诱导作用，使外植体细胞的合成代谢活动加强，迅速进行蛋白质和核酸的合成。机械损伤能诱导植物体细胞开始分裂，如伤口上会出现愈伤组织。在植物组织培养中沿用了愈伤组织这一名词，但是植物组织培养中诱导外植体细胞分裂形成的愈伤组织，大都不是损伤的结果。外源的生长素类物质对诱导细胞开始分裂效果很好，因此生长素类物质在植物组织培养中得到广泛应用，常用的有生长素（2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、萘乙酸NAA、萘乙酰胺NAD和吲哚乙酸IAA、吲哚丙酸IPA和吲哚丁酸IBA）细胞分裂素（6-苄氨基嘌呤6-BA、6-糠氨基嘌呤（KT）氯吡苯脲（KT-30，CPPU））等。分裂期是指外植体细胞经过诱导以后脱分化，不断分裂、增生子细胞的过程。处于分裂期的愈伤组织的特点是：细胞分裂快，结构疏松，颜色浅而透明。外植体的脱分化因植物种类、器官来源及其生理状况的不同而有很大差别。例如，烟草、胡萝卜等植物的脱分化比较容易，禾本科植物的脱分化比较难；花的脱分化比较容易，茎、叶的脱分化比较难；幼嫩组织的脱分化比较容易，成熟的老组织脱分化比较难。分化期是指在分裂期的末期，细胞内开始出现一系列形态和生理上的变化，从而使愈伤组织内产生不同形态和功能的细胞。这些细胞类型有薄壁细胞、分生细胞、色素细胞、纤维细胞，等等。外植体的细胞经过起动、分裂和分化等一系列变化，形成了无序结构的愈伤组织。如果在原来的培养基上继续培养愈伤组织，会由于培养基中营养不足或有毒代谢物的积累，导致愈伤组织停止生长，甚至老化变黑、死亡。如果要让愈伤组织继续生长增殖，必须定期地（如2～4周）将它们分成小块，接种到新鲜的培养基上，这样愈伤组织就可以长期保持旺盛的生长。愈伤组织的形态发生方式经过起动、分裂和分化期产生的愈伤组织，其中虽然发生了细胞分化，但是并没有器官发生。只有满足某些条件，愈伤组织的细胞才会发生再分化，产生芽和根，进而发育成完整植株。愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式（器官发生型）和胚状体方式两种。不定芽方式是在某些条件下，愈伤组织中的分生细胞发生分化，形成不同的器官原基，再逐渐形成芽和根。胚状体方式是由愈伤组织细胞诱导分化出具有胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株。这种由愈伤组织中的薄壁细胞不经过有性生殖过程，直接产生类似于胚的结构，叫做胚状体。在植物组织培养中，不定芽方式和胚状体方式是愈伤组织形态发生的两种最常见和最重要的方式。胚状体方式比不定芽方式有更多的优点，如胚状体产生的数量比不定芽多，胚状体可以制成人工种子，等等。 培养基的主要指标为营养的组分，植物生长物质的浓度，特别是后者对外植体的分化起着极其重要的作用。培养基的组织成分主要包括：1. 矿质营养。矿质营养又叫无机营养，
烤烟栽培学(题库)
名词解释 1、烟叶品质 2、外观质量 3、成熟度 4、种植制度： 5、轮作制度 6、壮苗： 7．烟草漂浮育苗8．早花9、烤烟产量10、外观质量： 11、身份12、油分13、弹性：14、物理特性： 15、评吸： 16、劲头： 1 7、刺激性： 1 8、苦味和辣味： 1 9、香气： 20、杂气21、吃味： 22、燃烧性： 23、阴燃性： 24、连作： 25、轮作： 26、间作： 27、套种： 28、格盘育苗： 29、托盘育苗30、需水量： 31、耗水量： 32、水分利用效率： 33、团棵： 34、旺长： 35、圆顶： 36、底烘：37．烟叶的吸湿性38．烟草的弹性39．烟草湿润育苗40．烟叶的外观质量41．晒烟42．包衣种子43．烟草优质适产44．烟草的内在质量45．烟草漂浮育苗46．早花 简答题 1.简述烟草根的初生构造和次生构造。 2.简述烟草根的生理机能。 3.简述烟草叶的构造及其生理机能。 4.简述烟草种子的萌发过程及其需要的条件。 5.简述环境条件对烟草生长发育的影响。 6.如何进行烟叶质量评价? 7.如何统一烟叶产量与质量的矛盾? 8.简述烟草产量与质量的关系。 9.烟草轮作、倒茬的意义。 10.烟草连作的危害有哪些？轮作有哪些优点？ 11.简述确定烟草移栽期的依据？ 12.简述育苗的要求及壮苗的标准。 13.如何正确决定大田期施肥量和氮、磷、钾搭配比例？ 14.简述烤烟测土配方施肥方法？ 15.简述烤烟大田需水规律和需肥规律？ 16.试述烟草大田期生长特点与管理要点。 17.烟草为什么要中耕培土，中耕培土的主要技术有哪些？ 18.试述烟田深耕的作用和技术。 19.烤烟生产时中如何划分生育期？ 20.如何确定烟草的移栽期。 21.试述打顶抹杈作用？ 22.如何决定烤烟打顶高度和留叶数？ 23.早花发生的原因及弥补措施，生产上如何避免早花的发生？ 24.如何预防烟叶底烘。 25.简述烟草地膜覆盖栽培技术。 26.分析烟田地膜覆盖栽培的优点和缺点。 27、请你根据田间烟株长势和土壤肥力情况，说明如何进行封顶打杈？（7分） 28、试论影响烟叶烟碱含量的主要因素。（5分） 29、试述烤烟进行中耕有什么作用？中耕的技术及要求有哪些？（6分） 30、请你说出硝态氮和氨态氮对烤烟生长发育的影响。（5分） 31.简述烟草的类型及其特点。 32简述烟草的生产特点。 33.简述烤烟烟区划分的依据。 34.全国烤烟种植最适宜和不适宜类型的条件？ 35.我国主栽的烤烟品种有哪些？ 36.简述烟草花的构造及其开花习性。 37.简述根、茎、叶生长的相关性。 38.简述烟草群体与个体的关系。 39.在轮作周期中确定烟草前作的原则。 40.烟稻轮作制和烟草三年五熟轮作制的优点。 41.简述烟草必需营养元素的营养作用。 42.为什么说氮素是烟草最重要的营养元素？ 43.根据烟草的需肥规律如何进行烟田施肥？ 44.如何确定烟草的施肥量？ 45.影响烟草养分吸收的因素有那些？ 46.比较烟草硝态氮和铵态氮营养的异同。 47.根据有机肥的特点，烟田应如何施用？ 48.简述烟田施用饼肥的优点及其使用方法。 49.简述优质烤烟生产的土壤条件有哪些？ 50.试述烟草对干旱胁迫的反应。 51.根据烟草的需水规律如何进行合理灌溉？ 52.简述烟田整地的方法和作用。 53.简述影响烤烟种植密度的因素。 54、试论影响烟叶烟碱含量的主要因素。（5分） 55、请你根据烤烟品种红花大金元的的品种特性谈谈其栽培和烘烤技术要点。 56、简述优质烤烟生产的土壤条件有哪些? （5分） 57、.简述烤烟大田需水规律和需肥规律。（5分） 58、优质烤烟生产所需的光照条件及云南烟区在这方面的自然优势有哪些? 59、试述优质香料烟生产的生态环境条件以及主要栽培措施（7分）。 60、概述烟叶品质评定的内容。（5分） 61、试述烟草漂浮育苗技术体系构成。（7分） 1、烟叶品质：是消费者对烟叶燃吸过程中所产生的香气、劲头、吃味、刺激性等几个主要因素的综合感受和吸烟安全性的综合评价。通常包括外观质量和内在质量两个方面， 2、外观质量：指烟叶的商品等级质量，如烟叶的成熟度、身份、结构、部位、颜色等表现出的优劣程度。 3、成熟度：是烟叶在田间发育过程中形成质量水平的反映，成熟度好的烟叶颜色均匀一致，叶片正反面颜色差异小，油份足，色度浓，香气质好量足，吃味醇和，杂气和刺激性小。 4、种植制度：是指一个地区或生产单位的作物组成、配臵、熟制与种植方式的总称，包括因地种植、轮作倒茬、间作套种、混作和复种等内容。 5、轮作制度：是指在一个轮作周期中，各种作物合理的安排顺序和田块布局。 6、壮苗：是指生长发育良好，新陈代谢正常，有机物质合成、积累较多，内含物丰富，碳氮比协调，抗逆性强，栽后成活率高的烟苗。 7．烟草漂浮育苗——所谓漂浮育苗，即采用质地很轻的泡沫塑料制成育苗盘，育苗盘的空穴中装上基质(人造土壤)，种子播种在基质内，然后将育苗盘移到育苗池中漂浮在营养液表面完成整个育苗过程。 8．早花——烟株未达到正常栽培条件下应有的叶数和高度，就提前现蕾开花，称为早花。它是营养生长受阻，生殖生长加速的结果。早花烟株矮小，叶数锐减，叶窄而薄，对产质影响很大。 2、烟制品的主要类型有卷烟，斗烟，水烟，雪茄，嚼烟，鼻烟。 3、确定烤烟移栽期的依据有气候条件、种植制度、品种特性、育苗技术、成苗因素。 4、烟草幼苗生长的最适温度是25-28℃，育苗期间低于2℃的低温和高于35℃的高温会引起冻害和灼伤幼苗。 5、优质烤烟生产所需的光照条件是和熙的光照。日照时数是500-700小时，日照百分率是40%；其中成熟期日照时数是280-300小时，日照百分率是30 %。 6、随着烟草种植密度的增加，烟田小气候中风速变小、地温降低、相对湿度增大。 7、全国烤烟适宜生态类型划分中，最适宜区的条件是1、无霜期≥120天；2、≥10°C积温＞2600°C；3、日均温≥20°C持续日数≥70天；4、0-60厘米土壤含CL量＜30mg/kg; 5、土壤PH5.5-6.5；6、地貌类型：中低山、低山、丘陵、高原；7、烟叶内在质量：香气质好，香气量足，吃味纯净。 10、影响烟草种子出苗的外界环境因素主要温度、水分和氧气（空气）。 11、烟草生产有产量与品质并重、生产工序复杂、对环境条件敏感、技术性强、烟叶的经济价值高的特点。 13、烟叶的产量是由单位面积上的株数，单株留叶数，单片叶的重量三部分所构成的。 14、烤烟的优质适产是指产量最高点与品质最高点既经济又合理地统一在一个水平上。 15、烟草适宜的前作有水稻，小麦，油菜等。 17、按调制方法分类，白肋烟属于晾烟，香料烟属于晒烟，黄花烟属于晒烟。 18、按调制方法和主要用途，烟草类型有烤烟、晾烟、晒烟、熏烟。 21、烟叶腺毛分泌物的主要成分是芳香油，树脂，蜡质。 25、烟田管理的“三一致”是指烟苗大小一致，烟株高矮一致，同部位烟叶成熟一致。 29、烟草种子萌发的三个过程是物理吸水阶段，营养物质转化的生化阶段，生理活动的生长阶段。 30、烟草根系生长的最低温度是7oC，最适温度是31oC，最高温度是43oC。 44、理想型烟株的特征为下部叶阳光充足，上部叶叶片开展，整株叶厚薄适中。 47、红花烟草属于植物界维管植物门被子植物纲双子叶亚纲茄科，烟草属。人工栽培的是红花烟草和黄花烟草。 48、烟草的根由主根、侧根、不定根三部分组成。 52、烟草的苗床期指从出苗到成苗。可分为小十字期、大十字期、猫耳期、成苗期四个生育时期。 53、烟草育苗中锻苗的方式主要有断水炼苗、揭膜锻苗和剪叶锻苗。 54、烟叶育苗的要求是苗壮、适时、量足、整齐和大小适宜。 55、生产中主要采用的育苗方式有漂浮育苗、水旱两段育苗和常规育苗等。 56、烟草漂浮育苗的壮苗的标准是根系发达、茎粗壮而柔韧、有一定的叶片数，叶色正常、抗逆性强。 57、烟草大田施氮量的确定是根据理论产量、土壤速效养分和土壤养分利用率和所用肥料利用率来确定的。 58、应变施肥主要是指看天施肥、看地施肥和看烟施肥。 59、按照烤烟大田施肥的时期分为基肥、前期追肥和叶面追肥等。施肥方法分为撒施、条施、穴施、肥料溶液灌根和肥料溶液喷施等。 61、移栽期的确定要依据气候条件、种植制度、品种特性和播种期综合考虑。 62、烟草对水分的消耗包括地表蒸发和叶面蒸腾两个方面，前者指土壤水分通过地表面蒸发散失，称为生态耗水；后者指水分通过烟株表面（主要是叶片）而散失，称为生理耗水。 64、烟田灌溉方法有穴灌、沟灌、滴灌和喷灌等。 65、烟草的早花是指烟株未达到正常栽培条件下本品种应有的高度和叶数就提前现蕾、开花的异常现象。 66、早花产生的原因是生理特性、品种特性、气候条件、栽培条件等四方面的原因。 67、烟草的底烘的指烟株下部叶为达到正常成熟时期就提前发黄或枯萎的现象。 68、底烘发生的原因有光照不足、土壤水分不足和水分过多等。 69、打顶技术包括打顶的时期、打顶的高度和留叶多少等。 73、香料烟具有特殊的浓香的特点，植株上部部位烟叶品质最好。 1、评定烟叶品质包括外观质量、内在质量、烟叶的化学成分、 烟叶的物理特性、烟叶的安全性五个方面内容。 2、“两烟”是指烤烟和卷烟。
烟草栽培学复习
◆名词解释 生物产量：烟草在整个生长季节中所积累的干物质重量。 经济产量：单位土地面积上所收获可用干物质的重量，对烟草来说就是烟叶的产量。 烟叶品质：消费者对烟叶燃吸过程中所产生的香气、劲头、吃味、刺激性等几个主要因素的综合感受和吸烟安全性的综合评价。 成熟度：烟叶在田间发育过程中形成质量水平的反映。身分：烟叶的组织构造密度，即叶肉细胞的大小及其排列的疏密程度。 物理特性：叶片的厚度、叶面密度、单叶重、平衡水含量、填充值、含梗率等。评吸：通过烟叶燃吸后的烟气在经过人的口腔、鼻腔和喉部等感官时所产生的感觉评定烟叶质量的方法。劲头：烟气中的烟碱对人体器官作用时，能够引起兴奋反应的程度。 刺激性：口腔、鼻腔和喉部对烟气产生的刺激感强烈冲击的接受程度。 香气：烟叶燃烧后进入烟气中所表现出来的一种令人愉快的特殊芳香。 吃味：烟气反映在口腔内包括酸、甜、苦等味道感觉的总称，是烟气被口腔反映的味感。 种植制度：一个地区或生产单位的作物组成、配置、熟制与种植方式的总称，包括因地种植、轮作倒茬、间作套种、混作和复种等内容。轮作：在同一块土地上于一定年限内有计划、有顺序地 轮换种植不同类型作物的 种植方式。 套种：在前一季作物生长后 期，在其预留的行间或带间 套种其他作物的种植方式。 壮苗：生长发育良好，新陈 代谢正常，有机物质合成积 累较多，内含物丰富，碳氮 比协调，抗逆性强，移栽成 活率高的烟苗。 格盘育苗：使用由若干苗穴 组成的育苗盘培育作物秧 苗的方法。 漂浮育苗：在温室或塑料薄 膜覆盖条件下，利用成型的 膨化聚苯乙烯格盘为载体， 装填上人工配置的培养基 质，将格盘漂浮于含有完全 矿质营养的苗池中，完成烟 草种子的萌发、生长和成苗 过程。 烟草需水量：每生产单位重 量干物质由烟株蒸腾所消 耗水分的数量。 水分利用效率：烟株消耗单 位重量水分所生产的同化 物的量。 圆顶：烟株打顶10-15d后， 上部叶完全展开，与中部叶 大小接近，烟株呈筒形的时 期。 底烘：烟株下部叶未达到正 常成熟时期就提前发黄或 枯萎的现象。 早花：烟株未达到正常栽培 条件下本品种应有的高度 和叶数就提前现蕾、开花的 异常现象。 有效积温：作物某个发育时 期或全部生育期内有效温 度的总和。 ◆简答题 1.简述苗床期烟草的生长 发育特点和管理要点。 烟草苗床期可划分为4个阶 段，根据各阶段烟苗的生长 特点进行管理。 出苗期：主要是种子萌发和 幼苗出土过程，烟苗由异养 向自养过渡。应密封薄膜保 温保湿。 十字期：烟苗生长缓慢，要 求较高的温度和湿度条件， 应密封薄膜保温保湿，当膜 内温度超过30℃时应及时 通风降温，防止烧苗。 生根期：烟苗根系生长活 跃，茎叶生长速度较慢，应 控水促根，及时间苗、定苗， 加强通风，揭膜晒苗。 成苗期：烟苗地上部分生长 速度较快，应加强练苗，及 时修剪，锻苗健壮。 2.简述以烟为主耕作制度 建立的原则。 （1）为烟草选择一个好前 作：前作氮素的残留量不能 过多；前作与烟草不能有同 源病虫害。 （2）烟田生态条件要良性 循环：秸秆还田改良土壤； 种植豆科等调节矿质营养 的作物；陪伴绿肥种植改良 土壤。 （3）优化布局，相对集中： 以村民组为单位安排轮作 布局；交通、水利建设配套； 烤房群落布局合理。 （4）轮作周期时间3年以 上：缓解消除病害的需要； 作物间营养调节的需要。 3.简述烟草中耕培土的作 用和方法。 （1）破除土壤板结，疏松 土壤，增大土壤通透性。 （2）提高地温，促进土壤 养分释放。
植物组织培养的基本步骤
植物组织培养的基本步骤 成熟细胞离体——（脱分化）——分生细胞——（分裂）——愈伤组织——（再分化）——形态建成————完整植株。 培养基的主要成分 【水分】 【无机盐】1.大量元素：N，P，K，Ca，Mg，S（由相关的无机盐提供） 2.微量元素：Fe，B，Cu，Mn，Mn，Zn，Co 【有机营养成分】1.糖类 2.维生素 3.氨基酸 4.肌醇 5.天然有机物【植物生长调节剂】1.生长素 2.细胞分裂素 3.其他生长调节剂 【凝固剂】琼脂 【其他物质】1.活性炭 2.抗生素 3.抗氧化物质 4.硝酸银 培养基和组织培养用具的灭菌方式 【培养基，无菌水】高压蒸汽灭菌，0.105MPa灭菌15~30分钟 【移栽基质】曝晒，甲醛熏蒸或高压蒸汽灭菌0.14MMPa灭菌1~2h 【接种室，缓冲室】紫外线灯照射30min，或气雾消毒剂 【超净工作台】紫外线灯30min，之后打开风机过滤除菌 【外植体】不同的化学消毒剂浸泡消毒 【接种工具】70%乙醇浸泡或擦拭，之后用火焰灼烧灭菌 【培养室】3%来苏尔喷雾，或甲醛，气雾消毒熏蒸 【皮肤】先用肥皂洗手，接种前用70%乙醇擦拭 【瓶口，管口】70%乙醇擦拭，用火焰封口
【培养瓶表面】70%乙醇擦拭 【台面，桌面】70%乙醇擦拭或喷雾消毒 植物外植体的灭菌方式 【茎尖，茎段，叶片】1. 用70%乙醇浸泡30秒，再用无菌水冲洗1次。 2.用2%次氯酸钠浸泡15min或0.1%升汞浸泡5~10min。 3.若材料有绒毛，最好在消毒液中加入几滴吐温。 4.消毒时要不断震荡，使植物材料与消毒剂充分接触。 5.最后用无菌水冲洗3~5次。 【果实】1.用乙醇迅速漂洗一下，再用无菌水冲。 2.用2%次氯酸钠浸泡10min，用无菌水冲洗2~3次。 【种子】用10%次氯酸钠浸泡20~30min，或0.1%升汞消毒5~10min，然后再用无菌水冲洗3~5次。 【花蕾】1.用70%乙醇浸泡10~15秒，无菌水冲洗一次。 2.在漂白粉中浸泡10min，用无菌水冲洗2~3次。 【根及地下部器官】用0.1%升汞浸泡5~10min 或用次氯酸钠浸泡10~15min，再用无菌水冲洗3~5次。 【消毒后的外植体应及时按照无菌操作技术接种在适宜的培养基上】
烟草组培苗实验步骤
烟草叶片的组织培养 一、实验原理与实验步骤 在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。 植物材料：烟草植株 药品：（2,4-D、NAA、6-BA浓度均可）、1mol/L NaOH、1mol/L HCL 蒸馏水、70%酒精0.01%升汞 仪器：玻璃杯、玻璃棒、pH试纸(5.5-9.0) 、1瓶无菌水、1个无菌烧杯、1包无菌滤纸、 1个无菌白瓷板、培养瓶若干移液器、微波炉、灭菌器、超净工作台、酒精灯、解剖刀、镊子 二、实验方法与步骤
注意： 1、大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。 2、微量元素母液的配制 按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O 和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签 3、铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。 4、有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。（1）制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。 （2）称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。 生长调节剂母液配制： 为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。 不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。激动素（KT）和6-苄基嘌呤（BA）可溶于少量1mol/L的盐酸中，叶酸需用少量稀氨水溶解。 称取50mg生长调节物质，溶解后，在100ml的容量瓶中定容，配制的母液每毫升则含有生长调节物质0.5mg，配制后一般要求在低温（0~4℃）保存，配制培养基时如每升（1000ml）需添加的生长调节剂物质为0.5mg时，则取1ml母液即可。 三、培养基配制和灭菌 本次实验使用 （1）愈伤组织诱导及其幼芽分化培养基:MS+2,4-D 0.5 mg/L +6-BA 1.0 mg/L；（2）幼芽增殖培养基：MS+6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L； （3）生根培养基：MS+NAA 0.2 mg/L。 注意事项：上述培养基均在MS固体培养基溶化后降低到50左右后，加入相应激素所得， MS固体培养基的配置过程在此不作过多赘述
最新云南农业大学 —2007烟草栽培学试题b
云南农业大学2006 —2007学年第一学期期末考试 烟草栽培学试卷（B卷） （课程代码 4051001 ） 本试题满分100分，考试时间120分钟。 一、名词解释：（10分） 1、包衣种子—— 2、烟草的优质适产—— 3、烟叶的内在质量—— 4、烟草漂浮育苗—— 5、早花—— 二、填空题：（35分，每空0.5分） 1、烟制品的主要类型有，，，，， 。 2、烟草的大田期指从到 ，可划分为，，和 四个生育时期。 3、烟草幼苗生长的最适温度是，育苗期间低于℃的低温和高于℃的高温会引起和。如果育苗期间经常处于最适温度下，那么，
云南烟区的经验是育苗期间的温度 。 4、全国烤烟适宜生态类型划分中，最适类型的条件是、 、. 5、影响烟草种子出苗的外界环境因素主要有、和。 6、优质烤烟化学成分中，总糖是；还原糖是；淀粉是；蛋白 质是；烟碱是；总氮是；Cl-是为最适宜范围。7、烟草包衣种子的质量标准规定：种子直径为；千粒重； 单粒率；有粒率；含水量；裂解度； 单粒抗压强度；均匀度；发芽率；pH 。 8、烤烟产量由，和三方面因素构成。 9、烟草育苗要求做到、、、。 10、1985年我国烟草种植区划，把我国划分为七大烟区，他们是、 、、、、、。 11、烟草的商业分类是按和来分的。 12、低温能促进烟株的，会导致烤烟生产上的 。 13、烤烟播种期主要依据、和而定。 14、烟草的底烘是指 。 15、在烟草商业分类中马里兰烟属；黄花烟属 。 三、判断与改错题（每题1分判断正确0.5分，改错0.5分，共5分） 1、烤烟需肥是前期多、中期少、后期也少。（） 2、香料烟是晒烟，所以，整个调制过程，都需在阳光直晒的条件下进行。（）
2010-2014植物组织培养高考题汇编(含详解)汇总
1.（2014广东卷）（16分）铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下： 在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图17所示，请回答下列问题： ⑴选用新生营养芽为外植体的原因是，诱导外植体形成PLBs的过程称。 ⑵与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在，，。 ⑶脱落酸（ABA）能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题： ①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基后按比例加入。②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为。 ③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
【答案】（1）细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs（2分）；细胞的脱分化（2分）（2）生长起始快（2分），快速生长时间较长（2分）；PLBs产量较高（2分）；（3）①灭菌、冷却（2分）；②75（2分）；③PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大（3分） 【解析】（1）新生营养芽分裂能力强，全能性容易表达；根据题干可知，PLBs类似愈伤组织，外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。（2）据图分析，光照下PLBs的重量高于黑暗条件下，原因可能是光照有利于细胞增殖、叶绿体的形成和进行光合作用制造有机物。（3）①由于ABA受热易分解，所以各种液体培养基灭菌后，冷却，再加入不同浓度的ABA ②根据题干可知，实验50天完成，每10天取样，需要取样5次，4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复，因此每次取样需要记录15个样品中的数据，共需要测定样品数75 ③适量的ABA可提高生物碱产量，当样品的平均值最大时，所对应的ABA浓度和时间为最适。 2.（2014江苏卷）（9分）为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题： （1）外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为。 （2）在愈伤组织悬浮培养时，细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如右图所示。细胞干重在12d后下降的原因有；培养液中蔗糖的作用是、。 （3）多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经处理，会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目，压片前常采用纤维素酶和酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞（2n）经诱导处理后，观察到染色体数为8n的细胞，合理的解释是、。 （4）为了更好地获得次生代谢产物，生产中采用植物细胞的固定化技术，其原理与酵母细胞固定化类似。下列说法正确的有（填序号）。 ①选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋②必须在光照条件下培养
烟草栽培学实验指导书
目录 实验一烟草形态与类型的观察与识别 (2) 实验二育苗技术观察 (5) 实验三烤烟烟苗素质考察 (10) 实验四主要栽培技术与烤烟生长分析 (11) 实验五打顶时期与留叶数对叶片生长的影响观察 (12) 实验六烤烟叶片经济性状考察 (13)
实验一烟草形态与类型的观察与识别 一、目的 通过观察烤烟根、茎、叶等器官构造与形态，建立对烟草初步的感性认识；观察掌握不同类型烟草的形态特征并能识别。 二、内容 观察烤烟植株形态及根、茎、叶等器官特征，观察烤烟、白肋烟、香料烟、晒烟、晾烟、黄花烟六种类型的外观特征，并能描述。 1、烤烟 烤烟亦称火管烤烟，源于美国的弗吉尼亚州，具有特殊的形态特征，因而也被称为弗吉尼亚型。烤烟的主要特征是植株高大，叶片分布较疏而均匀。一般株高120-150cm，单株着叶20-30片，叶片厚苤适中，中部的质量最佳。栽培上不宜施用过多的氮素肥料。叶片自下而上成熟，分次采收最初的调制方法也是晾晒。后来（1869）年改用火管烘烤。目前是在烤房内调制，烤后呈金黄色。其化学成分的特点是含糖量较高，蛋白质含量较低，烟碱含量中等。烤烟是我国也是世界上栽培面积最大的烟草类型，是卷烟工业的主要原料，也被供作斗烟。世界上生产烤烟的国家主要有中国、美国、印度，其次是巴西、津巴布韦、泰国、加拿大、日本等。我国烤烟种植面积和总产量都居世界第一位。重点产区有河南、山东、云南、贵州、黑龙江、湖南、湖北、陕西、安徽等省，四川、广东、福建、辽宁、江西、广西、吉林等省（区）也有较大面积的栽培。 2、晒烟 晒烟的烟叶利用阳光调制，主要有晒红烟与晒黄烟。一般晒黄烟外观特征和所含化学成分与烤烟相近，而晒红烟则同烤烟差别较大。晒红烟的叶片一般较少，叶肉较厚，分次采收或一次采收，晒制后多呈深褐色或褐色，以上部叶片质量最好。烟叶一般含糖量较低，蛋白质和烟碱含量较高，烟味浓，劲头大。晒烟主要用于斗烟、水烟和卷烟，也作为雪茄芯叶、束叶和鼻烟、嚼烟的原料。此外，有些晒烟还可以加工成杀虫剂。世界上生产晒烟的主要国家是中国和印度。我国各省都有晒烟种植，但分布零散，比较集中的有四川、广东、贵州、湖南、湖北、云南、吉林、山东、陕西等省。 3、晾烟 晾烟有浅色晾烟（白肋、马里兰）和深色晾烟之别，都是在阴凉通风场所晾制而成。而其中的白肋烟、马里兰烟和雪茄包叶烟因别具一格，均已自成一类。但在我国，除将白肋烟单独作为一个烟草类型外，其余所有的晾制烟草，包括雪茄包叶烟、马里兰烟和其他传统晾烟，均归属于晾烟类型。 4、白肋烟 白肋烟是马里兰深色晒烟品种的一个突变种。1864年美国俄亥俄州布朗县的一个农场在马里兰阔叶烟苗床里初次发现了奶黄色的突变烟株，后经专门种植