罗汉果提取物来源以及提取工艺

罗汉果提取物的来源以及提取工艺

导读：罗汉果提取物主要来源于天然葫芦科植物罗汉果，经过“原药材→前处理→提取→浓缩→微滤→超滤→纳滤→喷雾→干燥→灭菌→包装”经过一些列的提取工艺加工而成，全新的工艺提取取代了以往水煮、乙醇溶液浸泡的方式，充分的保证罗汉果药用价值成分与营养。闪式提取技术保证提取工作效率的提升，能够利用较短时间完成工作要求，能在大规模生产中广泛应用。

来源植物

罗汉果是我国特有的珍贵葫芦科植物，素有良药佳果之称。果实中含罗汉果甜苷，较蔗糖甜300倍；另含果糖、氨基酸、黄酮等。

主要来源为葫芦科植物罗汉果Momordica grosvenori Swingle的果实。主产于广西永福、临桂。秋季果实由嫩绿变深绿色时采收，晾数天后，

低温干燥。

提取工艺

1.工艺流程

罗汉果提取物的工艺流程为原药材→前处理→提取→浓缩→微滤→超滤→纳滤→喷雾→干燥→灭菌→包装。

2.提取工艺发展

传统的罗汉果提取主要采用水煮或者是乙醇溶液浸泡的方式，在实践工作中会造成有效成分的遗失，浪费自然资源，同时效果较差等各种问题。现代技术的应用为创新罗汉果有效成分提取工艺奠定了基础。能够充分的保证罗汉果药用价值成分与营养。微波辅助提取技术的应用是罗汉果有效成分提取工艺现代化发展的重要表现，这种技术的应用能够降低时间的投入使用，提升有效成分提取率。探索罗汉果有效成分提取新工艺需要对罗汉果中的因子进行优化处理，在微波技术的影响下提升提取工艺。这是充分利用罗汉果资源，使罗汉果发挥药用价值的关键措施。3.最新提取工艺

采用闪式提取技术能够充分的保证罗汉果有效成分的纯度，其中甜苷的纯度最高，说明采取闪式提取技术对罗汉果中甜苷的获取效果最为明显。罗汉果甜甙的提取率随提取溶剂体积的增加呈上升趋势。闪式提取工艺的应用能够提升罗汉果中动态分子的运行速度，使罗汉果中有效成分能够达到内外平衡发展，这种工艺技术保证提取工作效率的提升，能够利用较短时间完成工作要求，能在大规模生产中广泛应用。

罗汉果甜苷的提取与药理作用研究概况

罗汉果[Siraitia g r osv enorii (Sw in g le) C.Jeffre y]为我国传统保健药材,是一种极具开发潜力的天然产物资源,罗汉果甜苷是罗汉果中主要有效成分,具有广泛的生物特性,其中罗汉果苷Ⅴ为罗汉果果实中含量和甜度均较高的成分,其含量约为1%,甜度相当于蔗糖的350倍,是主要的甜味成分[1]。罗汉果甜苷属于葫芦烷三萜甙类(cucurbitane g l y cosides)型化合物,具有安全,味质好,没有异味;甜度高;热稳定性好;颜色浅;使用简便;使用时不受p H值影响(p H值介于2～10间)等特性。FDA(美国食品药物管理局)于1995年批准罗汉果甜苷应用于食品上,我国也于1996年7月的全国食品添加剂委员会第十七次会议上批准该产品作为食品添加剂,目前,允许罗汉果甜苷作为食品添加剂的国家和地区有:日本、韩国、台湾、香港、泰国、新加坡和英国等[2]。本文对1993年以来在罗汉果甜苷提取分离纯化、测定及生物活性等方面的研究进行综述。 1罗汉果甜苷提取分离与测定1.1提取分离如何将有效成分高效率地提取是中药开发和中药现代化研究的关键技术之一。罗汉果甜苷是罗汉果主要活性成分,随着罗汉果甜苷在食品药品等领域的广泛应用,如何最大限度利用罗汉果资源,提高罗汉果甜苷品质特别引起人们的重视。 李雁群等[3]采用国产材料和 较为简单的方法来提取和纯化罗 汉果甜苷,以水为溶剂的甜苷得率 比乙醇水溶液的得率高,溶剂量以 原料重6倍为宜;Ca(OH)2作澄清 剂比明矾、AlC l3效果好,而且不会 带来很大的甜苷损失,澄清宜在室 温下进行;强碱树脂D290和D280 比酸性树脂的脱色效果好,脱色宜 在25℃下慢速操作;A B-8吸附树 脂吸附罗汉果甜苷的操作宜在 20℃左右的室温下以SV2的流速 操作;用50%乙醇水溶液可以使罗 汉果甜苷从A B-8吸附树脂上解 吸。李俊等[4]采用正交试验设计对 干罗汉果中罗汉果甜苷的乙醇提 取工艺进行了系统研究,优选了工 艺参数,为规模化生产提供理论依 据,采用最佳工艺:用30倍原料重 的30%乙醇,在75～80℃微沸状态 下提取3h,得提取物中罗汉果甜苷 含量为60%。朱晓韵等[5]采用了正 交试验法考察了微波技术对水提 罗汉果甜苷收率的影响,优选出最 佳工艺为:鲜罗汉果投料物液比 为1∶8、微波输出功率为750W、提 取时间15m in,微波提取罗汉果甜 苷的效率明显优于常规水煮法,罗 汉果甜苷得率达7.346m g/g,比常 规水煮法提高21.87%,是一种省 时、省能、操作简便的新提取方 法。马少妹等[6]采用超声提取,探 索乙醇提取罗汉果甜苷的新工艺, 采用超声波辅助提取这一新型提 取技术,提高了罗汉果甜苷的提取 率,为罗汉果甜苷的工业化提取提 供参考依据和方法。最佳工艺分3 次提取。李军生等[7]认为超声波处 理能明显提高罗汉果甜苷的提取 率,高频率的超声波对罗汉果甜苷 提取的影响要比低频率的明显。在 同一频率下,罗汉果甜苷的提取率 随着输出功率的提高而提高,另外 值得注意的是使用频率为50kH z 的超声波,其输出功率虽然只有 80w,但是其提取效果比频率为 28kH z输出功率为200W或400W 的超声波都好。说明罗汉果甜苷提 取与超声波的频率相关。 1.2分离纯化为获得高纯度的 罗汉果甜苷,从20世纪70年代开 始,不少学者对罗汉果甜苷纯化工 艺进行研究,但所用的分离纯化方 法多是采用无机吸附剂和无机脱 色剂,如活性炭、氧化镁、硅酸镁 等,操作工艺复杂,难以工业化生 产。随着仪器设备技术的发展,不 少研究者对罗汉果甜苷精制工艺 进行优化研究,李雁群等[8,9]初步 研究了大孔吸附树脂A B-8对罗 汉果皂甙的吸附性能,比较了15℃ 和65℃下的吸附速度,获得了在 SV2、SV5、SV8三种空速下的穿漏 吸附量;并提出用正丁醇-冰乙酸 -水(4∶1∶1)的混合溶剂做流动 相,硅胶做固定相的层析柱用来分 离罗汉果甜苷,效果明显。刘钟栋[10] 提出采用大孔吸附树脂与离子交 换树脂联用对罗汉果甜苷Ⅴ的精 制工艺,交换树脂对经过吸附处理 的罗汉果洗脱液的处理条件为: p H5.0,洗脱液浓度1%,罗汉果甜 罗汉果甜苷的提取与药理作用研究概况 农毅清广西壮族自治区南宁食品药品检验所530001南宁市明秀东路228号 蒋林广西中医学院制药厂530023 关键词罗汉果甜苷;提取;药理作用;综述 中图分类号:R284.2;R285.5文献标识码:A文章编号:1003-0719(2008)01-0006-03 6 ?6?(总)广西中医药2008年2月第31卷第1期

罗汉果提取物来源以及提取工艺

罗汉果提取物的来源以及提取工艺 导读：罗汉果提取物主要来源于天然葫芦科植物罗汉果，经过“原药材→前处理→提取→浓缩→微滤→超滤→纳滤→喷雾→干燥→灭菌→包装”经过一些列的提取工艺加工而成，全新的工艺提取取代了以往水煮、乙醇溶液浸泡的方式，充分的保证罗汉果药用价值成分与营养。闪式提取技术保证提取工作效率的提升，能够利用较短时间完成工作要求，能在大规模生产中广泛应用。 来源植物 罗汉果是我国特有的珍贵葫芦科植物，素有良药佳果之称。果实中含罗汉果甜苷，较蔗糖甜300倍；另含果糖、氨基酸、黄酮等。 主要来源为葫芦科植物罗汉果Momordica grosvenori Swingle的果实。主产于广西永福、临桂。秋季果实由嫩绿变深绿色时采收，晾数天后，

低温干燥。 提取工艺 1.工艺流程 罗汉果提取物的工艺流程为原药材→前处理→提取→浓缩→微滤→超滤→纳滤→喷雾→干燥→灭菌→包装。 2.提取工艺发展 传统的罗汉果提取主要采用水煮或者是乙醇溶液浸泡的方式，在实践工作中会造成有效成分的遗失，浪费自然资源，同时效果较差等各种问题。现代技术的应用为创新罗汉果有效成分提取工艺奠定了基础。能够充分的保证罗汉果药用价值成分与营养。微波辅助提取技术的应用是罗汉果有效成分提取工艺现代化发展的重要表现，这种技术的应用能够降低时间的投入使用，提升有效成分提取率。探索罗汉果有效成分提取新工艺需要对罗汉果中的因子进行优化处理，在微波技术的影响下提升提取工艺。这是充分利用罗汉果资源，使罗汉果发挥药用价值的关键措施。3.最新提取工艺 采用闪式提取技术能够充分的保证罗汉果有效成分的纯度，其中甜苷的纯度最高，说明采取闪式提取技术对罗汉果中甜苷的获取效果最为明显。罗汉果甜甙的提取率随提取溶剂体积的增加呈上升趋势。闪式提取工艺的应用能够提升罗汉果中动态分子的运行速度，使罗汉果中有效成分能够达到内外平衡发展，这种工艺技术保证提取工作效率的提升，能够利用较短时间完成工作要求，能在大规模生产中广泛应用。

植物组织蛋白提取方法

植物蛋白质提取方法总汇 一、植物组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。 2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）。 3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃ 4、提取上清液，样品制备完成。 蛋白质提取液：300ml 1、1Mtris-HCl（PH8） 45ml 2、甘油（Glycerol）75ml 3、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinylpolypyrrordone）6g 这种方法针对SDS-PAGE，垂直板电泳！ 二、植物组织蛋白质提取方法 氯醋酸—丙酮沉淀法 1、在液氮中研磨叶片 2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜，然后离心（4℃8000rpm以上1小时）弃上清。 3、加入等体积的冰浴丙酮（含0.07%的β-巯基乙醇），摇匀后离心（4℃8000rpm 以上1小时），然后真空干燥沉淀，备用。 4、上样前加入裂解液，室温放置30分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离心（15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准），可临时保存在4℃待用。 5、用Brandford法定量蛋白，然后可分装放入-80℃备用。 药品：提取液：含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮。裂解液：2.7g尿素0.2gCHAPS 溶于3ml灭菌的去离子水中（终体积为5ml），使用前再加入1M的DTT65ul/ml。 这种方法针对双向电泳，杂质少，离子浓度小的特点！当然单向电泳也同样适用，只是电泳的条带会减少！

三、组织：肠黏膜 目的：WESTERN BLOT检测凋亡相关蛋白的表达 应用TRIPURE提取蛋白质步骤： 含蛋白质上清液中加入异丙醇：（1.5ml每1mlTRIPURE用量） 倒转混匀，置室温10min 离心：12000 g，10min，4度，弃上清 加入0.3M盐酸胍/95％乙醇：（2ml每1mlTRIPURE用量） 振荡，置室温20min 离心： 7500g，5 min，4度，弃上清 重复0.3M盐酸胍/95％乙醇步2次 沉淀中加入100％乙醇 2ml 充分振荡混匀，置室温20 min 离心： 7500g，5min，4度，弃上清吹干沉淀 1％SDS溶解沉淀 离心：10000g，10min，4度 取上清-20度保存（或可直接用于WESTERN BLOT） 存在的问题：加入1％SDS后沉淀不溶解，还是很大的一块，4度离心后又多了白色沉定，SDS结晶？测浓度，含量才1mg/ml左右。 解决：提蛋白试剂盒，另外组织大小适中，要碎，立即加2X BUFFER，然后煮5－10分钟，效果很好的。 四、植物材料：水稻苗，叶鞘，根 1、200毫克样品置于冰上磨碎 2、加lysis buffer，离心，10000rpm，4度，5min取上清 3、重复离心5min

罗汉果提取物

罗汉果提取物 罗汉果苷V具有较强的抗氧化活性，能有效清除人体内活性氧自由基，其对肠管的调节改善作用，有效提高了人体排毒能力，增强人体免疫力。此外，罗汉果苷V内含丰富维生素C，具有抗衰老、抗癌、益肝健脾及养肤美容的作用。同时，因为其甜度高但不产生热量的特性，广泛作为肥胖者和糖尿病人的代用糖。 【学名】中文学名：罗汉果提取物， 第二学名：Luo Han Guo P.E 【植物来源】罗汉果为多年生蔓生植物，主要栽培在中国的广西北部。其干燥果实为椭圆或圆形，外壳棕褐色或烟熏色并有大量细小黑色细毛。 【提取来源】果实 【性状及颜色】浅黄色粉剂 【功效】有效清除人体内活性氧自由基，提高人体排毒能力，增强人体免疫力。富维生素C，抗衰老、抗癌、益肝健脾、养肤美容，广泛应用于肥胖者盒糖尿病人的代用糖。

【检测方法】HPLC 【果实形状】本品呈卵形、椭圆形或球形，长4.5～8.5cm，直径3.5～6cm。表面褐色、黄褐色或绿褐色，有深色斑块及黄色柔毛，有的有6～11 条纵纹。顶端有花柱残痕，基部有果梗痕。体轻，质脆，果皮薄，易破。果瓤（中、内果皮）海绵状，浅棕色。种子扁圆形，多数，长约1.5cm，宽约1.2cm；浅红色至棕红色，两面中间微凹陷，四周有放射状沟纹，边缘有槽。气微，味甜。显微鉴别果皮横切面；外果皮为1列扁小表皮细胞，外果皮为1列扁小表皮细胞，外被角质层，厚4-12μm，气孔微向外突；有时可见多细胞非腺毛或基残基。中果皮外侧为4-6列圆形或切向延长的确良薄壁细胞；向内为6-9列石细胞层，细胞呈圆形、长圆形、类方形或不规则多角形。紧贴石细胞层内侧，为数列大形不规则的多角形细胞，壁略厚、具壁孔。其内数列七壁细胞常皱缩或颓废；维管束双韧型，常两个内外相连稀疏散布。内果皮为1列扁小的落地壁细胞。 种子横切面：表皮在种子扁平向的上下部位，为1列棚状细胞，长205-280μm，宽12-30μm，左右两侧表皮细胞粘液化，其内为数层切向延长的薄壁组织。在栅状细胞下层为数层厚壁纤维和大型石细胞层，近种仁处排列成环。内表皮为1列扁小细胞。胚乳细胞1-2列。子叶细胞含脂肪油滴。 【分布范围】罗汉果对生长环境要求十分特殊，只有在中国广西北部才能生长。中国广西龙胜县、永福县、融安县、临桂县是罗汉果的四大产地，产量占全球90%，其中龙胜县、永福县是原产地。目前，全球罗汉果的年均产量仅为1亿枚左右。 【活性成分】果中含非糖甜味的成分，主要是三萜甙类：罗汉果甜苷（mogroside)Ⅴ及Ⅳ，苷Ⅴ的甜度是蔗糖（srcrose)的256-344倍，苷Ⅳ的甜度为蔗糖的126倍。还含大量葡萄糖（glucose)[6],果糖（fructose)占14%。又含锰、铁、镍、硒、锡、碘、钼等26种无机元素、蛋白质、维生素（vitamin C)等。

罗汉果质量标准

标准依据：《中华人民共和国药典》（2010年版一部）。 原药材 1【来源】 本品为葫芦科植物罗汉果Momordica grosvenori Swingle的干燥果实。秋季果实由嫩绿变深绿色时采收，晾数天后，低温干燥。 2【性状】 本品呈卵形、椭圆形或球形，长4.5~8.5cm，直径3.5~6cm。表面褐色、黄褐色或绿褐色，有深色斑块及黄色柔毛，有的具6~11条纵纹。顶端有花柱残痕，基部有果梗痕。体轻，质脆，果皮薄，易破。果瓤（中、内果皮）海绵状，浅棕色。种子扁圆形，多数，长约1.5cm，宽约1.2cm；浅红色至棕红色，两面中间微凹陷，四周有放射状沟纹，边缘有槽。气微，味甜。 3【鉴别】 3.1显微鉴别 本品粉末棕褐色。果皮石细胞大多成群，黄色、方形或卵圆形，直径7~38μm，壁厚，孔沟明显。种皮石细胞类长方形或不规则形，壁薄，具纹孔。纤维长梭形，直径16~42μm，胞腔较大，壁孔明显。可见梯纹和螺纹导管。薄壁细胞不规则形，具纹孔。 3.2理化鉴别 取本品粉末1g，加水50ml，超声提取30分钟,滤过。取滤液20ml，加正丁醇萃取两次，每次20ml，合并正丁醇液，减压蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取罗汉果对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取罗汉果皂苷Ⅴ对照品，加甲醇制成每1ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照ZT-TS-02-004-1《薄层色谱法》试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-乙醇-水（8:2:3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛-10%硫酸乙醇溶液显色，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱、对照药材色谱相应的位置上，显相

罗汉果甜苷提取工艺的研究

罗汉果甜苷提取工艺的研究 【摘要】目的建立适合工业化生产的罗汉果甜苷提取工艺。方法用ZTC1+1澄清剂除去罗汉果水提液中的杂质，以D101大孔吸附树脂分离罗汉果甜苷，D301R弱碱性离子交换树脂脱色。结果ZTC1+1澄清剂是一种很好的澄清剂，D301R弱碱性树脂具有很好的脱色能力，D101大孔吸附树脂能有效地分离罗汉果甜苷。结论生产工艺简单易行，产品收 率高，质量好，适合大工业生产。 【关键词】罗汉果甜苷提取工艺澄清剂D101大孔吸附树脂 罗汉果为葫芦科植物罗汉果Momordica grosvenori Swingler 的果实，是我国特有的传统保健药材，它味甘、性凉、具有清热润肺、滑肠通便、促进肠胃功能的作用，用于治疗急慢性支气管炎、急慢性扁桃体炎、大便秘结等［1］。罗汉果甜苷是罗汉果中主要成分，它是一种三萜烯葡萄糖苷，其配糖苷元是三萜烯醇［2］，具有非发酵性、低热量、甜度是蔗糖的300倍的特点，具有广泛的应用价值。广西是罗汉果的主产地，占全国产量的80%以上，因此研制开发出一种先进的罗汉果甜苷提取工艺，对于提高罗汉果商品价值、推动广西罗汉果产业化发展具有重要意义。对罗汉果甜苷提取方法的研究，国外大都采用无机吸附剂和无机脱色剂，操作工艺复杂，无法工业化生产。特别是工业生产中不能很好的解决罗汉果甜苷的脱色、除杂问题［3］。现代中药提取的新趋势是以合适的澄清剂来除杂，以大孔树脂来吸附中药有效成分及脱色，本研究正是应用这两项技术进行提取工艺的研究。现将结果报道如下。 1 仪器与试药 高效液相色谱仪（日本岛津），SPD-10A 检测器系统控制器，威玛龙色谱工作站，Shodex Asahipak NH2色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm），试剂乙腈为色谱纯，水为去离子重蒸水；其余试剂均为分析纯。 罗汉果甜苷对照品由广西百年乐倩倩公司提供，纯度96.5%；鲜罗汉果购自广西永福龙江乡，经广西中医学院药用植物教研室韦松基副教授鉴定为葫芦科植物罗汉果Momordica grosvenori Swingler的果实，ZTC1+1澄清剂为天津正天成澄清有限公司产品，D101大孔吸附树脂为天津农药总厂产品，D301R弱碱性离子交换树脂为南开大学化工厂产品。 2 方法与结果 2.1 罗汉果甜苷的制备［4］鲜罗汉果→绞碎→溶剂提取→澄清剂处理→粗提液→大孔树脂→交换树脂脱色→干燥→超微粉碎→罗汉果甜苷成品。影响工艺的因素主要有澄清剂、大孔树脂及用于脱色的树脂种类，用于树脂洗脱的溶液浓度。经工艺优化后，选用ZTC-101澄清剂脱去溶液中的鞣质和蛋白质，D101大孔树脂富集罗汉果甜苷，D301R大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂脱色，50%乙醇液为树脂洗脱液，收集罗汉果甜苷。 2.2 薄层展开及罗汉果甜苷的含量测定

罗汉果的提取分享

罗汉果的提取及作用分享 罗汉果Momordica grosvenori是葫芦科罗汉果属植物,其叶呈卵形或长卵形,夏季开淡黄色花,微带红色;单性,雌雄异株,苞片极少。罗汉果叶除可治疗癣症外,还对致病金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、卡他双球菌有较强的抑制作用。对罗汉果叶的研究证实其含有黄酮类化合物。 罗汉果提取物的最佳提取工艺。方法单因素考察提取溶剂、提取次数和膜截留相对分子质量对罗汉果甜苷的收率、含量和提取率的影响。巴科医药结果最佳提取工艺条件为用水提取2次,每次用3倍量水,过截留相对分子质量为40000的超滤膜,然后再经过纳滤,干燥。结论采用最佳提取工艺条件,可较好地提取纯化罗汉果中的罗汉果甜苷。 茶叶抗HIV活性组(成)分的研究为了从中草药中寻找并发现 具有抗HIV活性的天然有效成分,在前期的工作中,采用HIV的5′端LTR序列转染的BF-24细胞为活性筛选模型,以牙龈卟啉单胞菌为激 活子,以报告基因—氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)的表达为评价指标, 有针对性的对上百种中草药进行了抗HIV活性的筛选,结果表明,茶 叶75%乙醇粗提物具有较强的下调控HIV-1 LTR作用,并进一步证实了茶叶乙醇提取物的乙酸乙酯部分活性最好。本研究的目的是寻找并确定茶叶中具有下调控HIV-1 LTR作用的活性组(成)分,即在活性

测试指导下,对茶叶乙酸乙酯部分的化学成分进行系统的分离纯化, 得到了乙酸乙酯部分中活性最好的部位,分别是石油醚/乙酸乙酯 =5:1,3:1,1:2,1:3,1:5,并得到了相关的数据。从中分离得到5个化合物,目前完全鉴定了其中2个化合物,分别为:咖啡因、β-谷甾醇。 罗汉果叶和茎乙醇提取物抑菌作用的初步研究罗汉果是葫芦 科属植物,具有润肺、去痰、止咳的功效,广泛用于医药、饮料和调味品中。前人主要是研究罗汉果果实,很少有人对罗汉果叶子和茎进行研究,巴科采用二分法测定罗汉果叶和茎乙醇提取物对大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、白色念珠球菌的抑菌作用。结果表明,叶和茎乙醇提取物对绿脓杆菌的抑菌活性最好,当提取物 浓度为50mg/mL时抑菌率分别达到90.9%和76.8%;茎提取物对大肠杆菌的抑菌活性较好,抑菌率达到70.3%。 为探讨罗汉果Momordica grosvenori叶和茎乙醇提取物对大 肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、白色念珠球菌的抑菌作用,样品用50%乙醇浸提,采用二分法测定样品对不同供试菌种的抑菌率。结果表明,罗汉果叶和茎乙醇提取物的浓度越大,其抑菌率越大。叶和茎乙醇提取物对绿脓杆菌的抑菌活性最好,提取物浓度达到50.00mg/mL时抑菌率分别为90.9%和76.7%;茎提取物对大肠杆菌

植物提取物白芸豆提取物

T 中国医药保健品进出口商会团体标准 T/CCCMHPIE 1.26—2018 ICS 11.120C 25 植物提取物白芸豆提取物 Plant extract ——White Kidney Bean Extract 中国医药保健品进出口商会 发布 2018-07-01发布 2018-07-15实施

前言 本标准按照GB/T1.1—2009和GB/T20004.1—2016给出的规则起草。 本标准由中国医药保健品进出口商会提出。 本标准由中华人民共和国商务部归口。 本标准由中国医药保健品进出口商会国际商务标准化技术委员会负责解释。 本标准负责起草单位：云南天保桦生物资源开发有限公司。 本标准主要起草人：钟毓、薛佳、孙艳、迟永楠、李丽波、何绍凯、张武松、任英。

植物提取物白芸豆提取物 1范围 本标准规定了白芸豆提取物的技术要求、检验方法、检验规则、包装、运输和贮存要求。 本标准适用于白芸豆的种子经粉碎、水提取、分离、干燥等工序得到的提取物。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定 GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验 GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数 GB4789.3食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数 GB4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验 GB4806.1食品安全国家标准食品接触材料及制品通用安全要求 GB5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定 GB5009.4食品安全国家标准食品中灰分的测定 GB5009.5食品安全国家标准食品中蛋白质的测定 GB5009.11食品安全国家标准食品中总砷的测定 GB5009.12食品安全国家标准食品中铅的测定 GB5009.17食品安全国家标准食品中总汞的测定 GB5009.19食品中有机氯农药多组分残留量的测定 GB5749生活饮用水卫生标准 《中华人民共和国药典（2015版）》第四部通则2351黄曲霉毒素测定法 3技术要求 3.1工艺要求 3.1.1植物原料 本品以豆科植物菜豆属多花菜豆种Phaseolus coccineus Linn.白芸豆种子为原料。 3.1.2工艺过程 原料→粉碎→水提取→分离→干燥→产品

罗汉果提取物标准

罗汉果提取物（50%） Luohanguo Tiquwu（50%） Monk Fruit Extract（50%） 本品为葫芦科植物罗汉果Siraitia grosvenorii(Swingle)C.Jeffrey exA.M.Lu et Z.Y.Zhang的成熟果实经水煮提取、纯化、干燥、包装等工艺精制而成的提取物。 【性状】本品为浅黄色至类白色粉末；有罗汉果特征气味，味极甜，稍有后味。 本品在水、乙醇中易溶，在氯仿、石油醚中不溶。 【鉴别】 显色反应 取本品5mg~10mg，置试管中，加入2mL乙酸酐，温热2min，沿试管壁缓慢加入硫酸0.5 mL，两层分界面呈现红棕色。 TLC鉴别照薄层色谱法（通则Y03）测定 对照品溶液取罗汉果皂苷V对照品2.0mg，溶解于2mL甲醇中。 供试品溶液取本品粉末50mg，置25mL量瓶中，加入约20mL甲醇超声处理（功率350W，频率53kHz)30min，用甲醇定容至刻度，滤过。 色谱系统 薄层板TLC Silica gel 60 F254或硅胶G薄层板。 展开剂制备正丁醇-乙醇-水（8:2:3，v/v/v)的混合溶液。 显色剂制备2%香草醛的10%硫酸乙醇溶液。 色谱操作分吸取对照品溶液和供试品溶液各5μL，分别点于同一TLC Silica gel 60 F254板上，以正丁醇-乙醇-水（8:2:3，v/v/v）为展开剂，展开约10cm后，取出，晾干，喷以2%香草醛的10%硫酸乙醇溶液，在105℃的温度下加热2-5分钟至斑点显色清晰。 测定供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显示相同的深蓝色斑点。 【含量测定】照高效液相色谱法（通则Y04）测定 对照品溶液的制备取罗汉果皂苷V对照品适量，加50%甲醇制成每1mL含1.0mg的

对罗汉果中多糖活性成分的分离提取及纯化研究

广西轻工业 ＧＵＡＮＧＸＩＪＯＵＲＮＡＬＯＦＬＩＧＨＴＩＮＤＵＳＴＲＹ ２００７年７月第７期（总第１０４期） 食品与生物 【作者简介】 黄飞（１９７５－），男，应用化学工程师，南宁新技术创业者中心主任科员，从事生物工程及制药行业管理工作。【摘 要】多糖是生物体内重要的大分子物质，是所有有生命的有机体中必不可少的成分，具有特殊活性。通过对罗汉果中 的多糖活性成分进行提取分离，并对其功能特性进行研究。 【关键词】多糖；罗汉果；提取；分离【中图分类号】０６５８ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１００３－２６７３（２００７）０７－００１０－０２ 中药罗汉果（Ｓｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉ）是葫芦科罗汉果属植物（Ｓｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉ（Ｓｗｉｎｇｌｅ）ＣＪｅｆｆｅｒｙ）的成熟果实，是我区特产，主要产于永福、临桂、龙胜等县。性凉味甘，原先主要用于“治痨咳”，清热解渴，润肺止咳等用途。进入２０世纪７０年代以后，人们对它研究后发现它的药用价值更广，并可用于饮料和食品，用于治喉痛、慢性支气管炎、慢性咽喉炎、咽喉失音、哮喘、百日咳、高血压、便秘、口干舌燥等。日本人还发现它能补血，促进肠胃功能。 由于它的甜味成分（罗汉果甙）有别于蔗糖，故可做糖尿病人、高血压病人、龋齿患者的补助药物，还可作为饮料［１￣４］。市售入药的罗汉果是经烤制的干果，其中含有的三萜皂甙和蛋白质氨基酸等成分早有报道，但相关的多糖活性成分还未见报道。 本文通过对罗汉果中多糖成分的提取研究，更深入地研究罗汉果的性质，提高其利用价值。同时也更进一步的熟悉、掌握及研究多糖的相关研究方法。 １罗汉果多糖的提取 １．１材料与方法１．１．１材料１．１．１．１仪器 真空抽提仪器一套，电子继电器，贝克曼温度计， 水银温度计，上海产电热恒温水浴锅，ＳＨＢ－ＩＩＩ型循环水式真空泵，上海ＲＥ－５２旋转蒸发仪，美国ＢＥＣＫＭＥＮＪ２－２１型冷冻超速离心机，国产ＬＸＪ－ＩＩ型离心沉淀机，组织捣碎机，索氏抽提器 （又称为脂肪抽提器），重庆ＣＳ１０１型电热鼓风干燥机，１０００ｍＬ容量瓶，摇床，离心机，分液漏斗，７５６ＭＣ紫外分光计， 磁力搅拌器，美国ＬＡＢＣＯＮＣＯ冻干机，美国ＲＥＶＣＤＳＣＩＥＮ－ ＴＩＦＩＣ．ＩＮＣ超低温冰箱。１．１．１．２化学试剂 所有化学试剂均为分析纯或色谱纯试剂。 １．１．１．３标准液及其配比０．１ｇ蒽酮与５０ｍＬ浓硫酸混合成的 蒽酮－硫酸液，０．１ｇ／Ｌ葡萄糖液。 １．１．１．４其它材料 范围为３０００￣７０００分子量的透析袋、透析 袋夹。 １．１．２实验方法 这里，罗汉果粗品多糖的提取由以下流程图来表示： 预处理→溶剂提取→初步纯化（去除杂质→初步提纯）→粗品多糖 下面就介绍各个步骤的具体内容： １．１．２．１预处理首先，用组织捣碎机将罗汉果原料粉碎，用索 氏抽提器、甲醇回流将原料中的脂质抽提出来。抽提结束后，将纸杯中已脱脂的原料晾干或烘干。 １．１．２．２溶剂提取 具体操作如下： 将晾干或烘干后的罗汉果原料样放入真空抽提器中，通过控温抽提装置进行水提取，共三次。然后取上清液，去掉残渣备用。再将上清液通过减压浓缩至三到四倍，此时，可用三倍量的无水乙醇加入浓缩后的上清液中，沉淀完全，之后，将上清液去掉，此时所得的沉淀再进一步干燥即为粗品罗汉果多糖。 １．１．２．３去除杂质 （１）Ｓｅｖｅｇｅ法除蛋白 将罗汉果粗品多糖溶于一定体积的水溶液，随后加入相当于该水溶液１／４体积的氯仿，再加入相当于氯仿的１／４体积的正丁醇，将混合物剧烈振荡，离心，通过分液漏斗除去水层和溶剂层之间的变性蛋白质。 （２）透析除去小分子物质 将去掉蛋白后的多糖溶液放入透析袋中，置自来水中平衡，再放入大烧杯中，用磁力搅拌器搅拌杯中水，再换入纯净的去离子水继续搅拌８ｈ，之后加入３倍量的无水乙醇沉淀，再依次加入乙醚、甲醇洗涤沉淀，将沉淀冻干则得到粗品多糖样ＫＬ。 １．２结果与分析 １．２．１罗汉果粗品多糖 （ＫＬ）的得率及性质１．２．１．１得率经称量及计算，罗汉果粗品多糖ＫＬ的得率为：３．０２％。１．２．１．２性质 这里，我们讨论的主要为理化性质： （１）物理性质 罗汉果多糖粗品（ＫＬ）：为黄褐色固形物。在冷水中膨胀，热水中可溶，水溶液有较高的粘性。 （２）化学性质 在粗品溶液中加入Ｉ－ＫＩ，反应为阴性；对菲林试剂的反应也为阴性；这表明该多糖不含淀粉和游离的葡萄糖； 双缩脲反应呈阴性也表明无蛋白质存在； 将少量样液滴于滤纸上，用甲苯胺兰染色，呈兰色色斑，表 对罗汉果中多糖活性成分的分离提取及纯化研究 黄飞１，梁智群２ （１．南宁新技术创业者中心，广西南宁５３０００７；２．广西大学，广西南宁５３００２３） １０

植物提取物分离流程

植物提取物分离流程 一、浸膏： 1．植物样品粉碎, 留样200-500g，将样品直接用氯仿浸提3次，每次7天，抽滤后将溶剂减压回收，得到氯仿部分浸膏； 2．氯仿浸提后的残渣用甲醇浸泡3次，每次7天，然后抽滤回收溶剂得到甲醇部分浸膏； 3．在浸提中，浸提次数至少3次，根据滤液的颜色判断是否需要增加浸提次数，最多浸提4次。 二、粗分离： 1．氯仿部分的分离：氯仿部分视全部浸膏数量决定留取多少，一般留样5g左右，以备活性筛选，如果浸膏大于100g，留样10g左右。 2．留样后，将浸膏用丙酮溶解，以硅胶60-100目拌样，样品与硅胶的比例一般为1：1，但也不绝对，要以样品完全被硅胶吸附，但又不浪费为原则； 3．第一次柱层析使用200-300目的硅胶，硅胶用量与样品比例为30：1，如果样品量很大，则选择10：1左右，采用干法装填柱子 4．装填好硅胶柱后，采用石油醚洗脱，一般洗脱3-5个柱体积（100g硅胶就洗脱300-500ml），但有时因为样品超载也需要经验判断是否加极性。 5．当需要增加极性时，首先选用100：1的石油醚丙酮，依照4中的操作进行，依次改变极性为80：1；60：1；40：1；20：1：10：1；8：2：7：3当溶剂比例达到8：2的时候，就需要TLC检测判断是否再进行7：3的比例了。一般到达10：1的时 候，氯仿部分基本上就可以结束洗脱； 6．甲醇部分也同氯仿部分，需要在拌样前留取样品，然后拌样上200-300目的硅胶柱（干法装填）作同氯仿部分，当完成3-5个柱子体积的洗脱后，根据回收溶剂后回 收瓶中提取物的多少判断改变极性，以100：1氯仿甲醇开始，逐步过度到80：1； 60：1；40：1；20：1；10：1；8：2；7：3；当达到7：3时，需要TLC检测是否 还有样品点； 三、精分离 1．氯仿部分各个回收段用TLC检测判断是否合并，并将合并部分用不同系统的溶剂进行TLC检测选择柱子洗脱所需要的比例，一般是石油醚+乙酸乙酯系统；石油醚 +丙酮系统；系统选择好以后，用60-100目硅胶拌样（比例依旧是1：1，尽可能少 用拌样硅胶），将拌样样品用湿法上硅胶H常压柱子，装填时，硅胶H溶解在石油 醚中，并至少静置12小时。 2．用选择的系统洗脱，每次收集一个柱体积馏分，回收后转移至试管中，经验上，一般洗脱5个柱体积后就需要改变溶剂的极性，极性的改变也是逐步加大。 3．2中柱子洗脱结束后，将回收在试管中的各个样品TLC检测，以荧光、碘显色、硫酸显色判断是否合并为同一馏分，一般荧光和碘显色是辅助检测，以硫酸显色为根 本判断。 4．合并后的馏分TLC检测选择继续分离。此次分离需要用减压柱子，填料依旧是硅胶H，填料与样品比例一般是50：1，样品在TLC中以展开3-4次，rf大小在0.2-0.3 之间最合适，一般只需要洗脱30柱子体积就可以结束分离。 5．减压柱层析中已经接近为单体化合物，有时也可以得到纯品。将减压的各个馏分TLC检测是否可以进行合并，并将合并的部分上Saphdex-LH20，一般用乙酸乙酯、丙酮进行装填凝胶柱，并以装填溶剂进行洗脱，凝胶柱都是以湿法上样。 6．此时，已经在得到纯品化合物。

植物提取物工艺及检测技术

植物提取物技术工艺 编著：魏少东第一部分主要的工业提取技术 一、常规提取物方法 1、煎煮法： 简介--水做溶剂，适用于有效成分能溶于水，但又对有效成分不清楚的，且对热较稳定的药材；缺点—用水煎煮， 浸提液中除有效成分外，往往杂质较多，尚有少量脂溶性成 分，给精制带来不利。 2、浸渍法： 分类--按照提取温度和浸渍次数分为冷浸渍法、热浸渍 法和重浸渍法。缺点—静止状态，不宜用水做溶剂，通常用 不同浓度的乙醇密闭浸渍，此法不能制得高浓度的制剂。 3、渗沥法 4、回流法： 简介—用乙醇等易挥发的有机溶剂提取药材成分，将浸提液 加热蒸馏，其中挥发性溶剂馏出后又被冷凝，重新流回进出器 中浸提药材，这样周而复始，直至有效成分回流提取完全。 二、超声波提取 三、微波提取（非电离的电磁辐射）

四、酶解细胞壁提取 主要的工业分离技术 1、树脂分离技术 2、工业萃取技术：①有机溶剂萃取技术；②二氧化碳超临界流体萃取技术；③微波萃取；④新型氯氟碳溶剂萃取—例如英国最近发明的Klea惰性溶剂，可以在低压室温下萃取，节省能源，又避免热破坏。 二、功效成分的含量检测方法（2种） 1、分光光度法（例如紫外分光光度法—UV法）：此法在国内普及较早，对于某类物质的检测都有一些经典的方法，如总黄酮的芦丁比色法、总多酚的盐酸-香草醛法、多糖的硫酸苯酚法等等；但是由于分光光度法自身的缺陷，如不能检测出总含量中各具体成分的含量比例，也不能检测出是否添加了化工合成产品，而且易受提取物中其他杂质含量影响等，其应用受到越来越多的限制。 2、高效液相色谱法—HPLC法：是一种正在普及的检测技术，在植物提取物行业的应用已逐渐成为主流手段，特别是近年来指纹图谱概念的兴起，使得更多的厂家把高效液相法作为含量测定手段，并制定HPLC指纹图谱。。

罗汉果甜苷怎么生产的

作为蔗糖替代品，罗汉果提取物口感接近于砂糖，且甜度是其200-300倍，在天然产品中的应用不断增加。但是罗汉果的种植条件苛刻，要求气候温暖、潮湿，且不耐高温，怕霜冻，主要分布于我国广西、湖南等地区，难以保证货源稳定，其次罗汉果果实中甜苷含量低，制成甜苷产品后价格高昂。那么这种罗汉果甜苷是如何生产出来的呢？ 罗汉果甜苷又称罗汉果甜甙(或罗汉果甜)，是从罗汉果中提取到的一种甜味剂，熔点为197～201℃，热稳定性强，易溶于水和乙醇溶液，其甜度为蔗糖的300倍，有清热润肺镇咳、润肠通便的功效，对肥胖、便秘、糖尿病等具有防治作用。 提取罗汉果甜苷的原料一般选用无破皮、无霉变的质量较好的干罗汉果或鲜罗汉果，但干罗汉果提取罗汉果甜苷的提取率低，所以常用鲜罗汉果来提取。鲜罗汉果皮薄、中空，在日常储运过程中会有很多破碎，而这些破皮或霉变的破损罗汉果不能被较好的利用而常被丢弃，造成大量资源浪费，同时后期处理费工费时，增大企业的生产成本。

罗汉果甜苷的提取工艺中常会在罗汉果汁和洗液混合后加入氢氧化钙乳浊液等絮凝剂进行絮凝，以便于将混合液体中的固体杂质聚集沉降下来，再通过离心将固体杂质除去，以便后续更易于纯化。但是，絮凝剂的加入会引起液体颜色变深，增加了后期脱色的难度，导致罗汉果甜苷成品的色泽变差。而且絮凝剂添加量过少不能将固体杂质沉降完全，使罗汉果甜苷成品纯度降低；添加量过多导致絮凝剂残留太多，后期不能较好的去除，直至影响罗汉果甜苷的质量。 现有的罗汉果甜苷提取工艺中还存在灭菌不充分的问题，提取工艺中有的还加入了氧化铝或者一些酶类等，而后期操作不能完全除去，导致得到的罗汉果甜苷成品安全性差、纯度低。此外，现有的罗汉果提取工艺是先将罗汉果破碎，然后用大量的水进行萃取，造成水资源的浪费，也增大了废水处理压力。 宏通生物是一家专业从事精细化工研发，食品原料生产销售为一体的高新技术企业,公司自2012年成立以来,本着“诚信、专业、开拓、创新”的宗旨，“互惠互利、共同发展”的原则，始终如一为客户提供更优产品、更低价格、更好服务而不懈努力!我们的理念是：以科技为先导，以质量求生存，以服务创效益。我们将一如既往继续加强同全国朋友的合作，携手共创美好未来! 一、食用方法 1、添加到咖啡或茶里。有提神醒脑、缓解压力的作用。 2、添加到中药里，没有任何异味或苦涩味，甜味特征曲线几乎与蔗糖重叠，这是其它任何甜味剂无法比拟的。 3、添加到烹饪食品内，甘甜爽滑、不会引起血糖波动，糖尿病人也可食用。

罗汉果利用情况和发展前景的调查研究)

大学生社会调查报告 题目：罗汉果利用和发展前景的调查研究 系（部）：化学与生物工程学院 专业：生物工程 班级： 09生物工程 姓名： XXX 学号： XXXXXXXXXX 指导老师： XXX/XXX

罗汉果利用和发展前景的调查研究 摘要：罗汉果作为我们广西桂林特有的生物资源，素有“神仙果”之称。其果实的营养价值很高，含有丰富的葡萄糖、果糖及多种维生素等，用途广泛，逐渐被人们所关注和利用，具有良好的发展前景。本文根据对30位来自广西各个地区的人们的问卷调查资料和对市场上罗汉果销售的形式的调查资料，考察了人们对罗汉果的认知程度、利用情况、发展前景的展望和罗汉果的销售形式等情况。调查结果表明，虽然人们对罗汉果的认知度不高，但利用程度高，且人们对罗汉果的发展前景抱有乐观的态度。通过这次调查我们可以为人们对罗汉果的认识和利用起到很大的帮助，从而更好的拓展罗汉果的销售市场。 关键词：罗汉果；认知度；利用；发展前景 一、背景及其研究意义 1. 项目背景 1.1罗汉果的基本信息 罗汉果又名拉汗果、假苦瓜、罗晃子或光果木鳖等，是一年种多年收的葫芦科植物罗汉果的果实。罗汉果为中国特有经济药用植物，有300多年的应用历史，分布于广西、广东、海南、贵州等热带、亚热带山区，由于对生长环境条件的特殊要求，其主产区分布在广西桂林永福县、临桂县和融安县。自1977年版《中国药典》起作为常用中药收载，具有清热润肺，滑肠通便的功效，主治肺热或肺燥咳嗽，百日咳，痰火咳嗽，血燥便秘等症；此外罗汉果还是一种极好的清凉饮料，既可提神生津，又可预防呼吸道感染，常年服用，能延年益寿，被誉为“东方神果”和“长寿之果”；1987年罗汉果被国家卫生部列为药食同源品种。自20世纪70年代起罗汉果的研究引起了国内外学者的重视，近年来不断有对罗汉果新的研究报道。 1.2罗汉果的化学成分