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离心超滤管的使用方法

离心超滤管的使用方法
离心超滤管的使用方法

超滤管使用方法和注意事项

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。

1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。

2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。

3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。

4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Buffer,直到蛋白不发生沉淀为止。

5、前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer 的目的。

6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作,用黄枪头(200ul)取,轻轻顺着边缘插入枪头,轻轻吹打、混匀蛋白液,注意不要碰到超滤膜,然后吸取浓缩液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取,否则难度太大,有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中,没过超滤膜,防止膜失水变干。

7、以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤。

8、倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,【若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用枪头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗,内壁再用MilliQ水洗干净。

9、取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用。一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。

离心机使用守则及使用注意事项通用版

管理制度编号:YTO-FS-PD978 离心机使用守则及使用注意事项通用 版 In Order T o Standardize The Management Of Daily Behavior, The Activities And T asks Are Controlled By The Determined Terms, So As T o Achieve The Effect Of Safe Production And Reduce Hidden Dangers. 标准/ 权威/ 规范/ 实用 Authoritative And Practical Standards

离心机使用守则及使用注意事项通 用版 使用提示:本管理制度文件可用于工作中为规范日常行为与作业运行过程的管理,通过对确定的条款对活动和任务实施控制,使活动和任务在受控状态,从而达到安全生产和减少隐患的效果。文件下载后可定制修改,请根据实际需要进行调整和使用。 离心机使用守则 一.离心机在预冷状态时,离心机盖必须关闭,离心结束后取出转头要倒置于实验台上,擦干腔内余水,离心机盖处于打开状态。 二.转头在预冷时转头盖可摆放在离心机的平台上,或摆放在实验台上,千万不可不拧紧浮放在转头上,因为一旦误启动,转头盖就会飞出,造成事故! 三.转头盖在拧紧后一定要用手指触摸转头与转盖之间有无缝隙,如有缝隙要拧开重新拧紧,直至确认无缝隙方可启动离心机。 四.在离心过程中,操作人员不得离开离心机室,一旦发生异常情况操作人员不能关电源(POWER),要按

STOP。在预冷前要填写好离心机使用记录。 五.不得使用伪劣的离心管,不得使用老化、变形、有裂纹的离心管。 六.在节假日和晚间最后一个使用离心机例行安全检查后方能离去。 七.在仪器使用过程中发生机器故障,部件损坏情况时要及时与我们联系 离心机使用注意事项 目前,实验室常用的是电动离心机电动离心机转动速度快,要注意安全,特别要防止在离心机运转期间,因不平衡或试管垫老化,而使离心机边工作边移动,一致从实验台上掉下来,或因盖子未盖,离心管因振动而破裂后,玻璃碎片旋转飞出,造成事故。因此使用离心机时,必须注意以下操作。 (1)离心机套管底部要垫棉花或试管垫。

蛋白质浓缩问题——超滤浓缩管的使用及保存

二、离心超滤管浓缩样品 2.1 浓缩样品 1、要浓缩的样品含盐量必须0.3M以上,含盐量低的样品须补加到0.3MNaCl。 2、在内管(附有3KD膜)中加入500μl样品,将内管套入外管。 3、对称放置离心管,14520rpm(即14000g)离心。(离心5min约浓缩2倍,10min约4倍,15min约6倍,20min约8倍,30min约10倍)。 4、离心结束后,将内管倒置套在另一个干净的离心管呢,3880rpm离心min收集浓缩后的样品。或者用移液器直接吸出内管中的样品。 2.2 浓缩管使用后的处理和保存 1、使用完的浓缩管,立即加入500μl含1MNaCl的缓冲液(此缓冲液与浓缩样品的缓冲液一致),8000rpm离心20min。 2、甩净内管中的盐溶液,将内管放入超纯水中浸泡1h。 3、内管加入超纯水500μl,8000rpm离心5min。 4、甩净内管中的水,加入500μl0.2MNaOH,8000rpm离心20min。 5、甩净内管中的NaOH溶液,用超纯水再8000rpm离心5min。 6、甩净内管中的水,放入含0.2-0.5‰NaN3的生理盐水中。 7、外管用自来水洗净后,用超纯水冲洗干净,晾干。 超滤管使用注意事项 2012-06-06 18:12:28| 分类:默认分类| 标签:|字号大中小订阅 蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用,使用一次就扔掉太浪费。以下是个人总结的使用方法和注意事项。 1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。 2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。 3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。具体可参阅附件里的说明书。离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。 4、当浓缩到剩下1ml时,取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管

超滤工作原理

超滤的工作原理 超滤(Ultrafiltration)技术是一种膜滤法,也有错流过滤(Cross Filtration)之称。它能 从周围含有微粒的介质中分离出10~100A的微粒,这个尺寸范围内的微粒,通常是指液体内的溶质。其基本原理是在常温下以一定压力和流量,利用不对称微孔结构和半透膜介质,依靠膜两侧 的压力差作为推动力,以错流方式进行过滤,使溶剂及小分子物质通过,大分子物质和微粒子如 蛋白质、水溶性高聚物、细菌等被滤膜阻留,从而达到分离、分级、纯化、浓缩目的的一种新型膜分离技术。 超滤技术的优缺点 与传统分离方法相比,超滤技术具有以下特点: 1. 滤过程是在常温下进行,条件温和无成分破坏,因而特别适宜对热敏感的物质,如药物、酶 、果汁等的分离、分级、浓缩与富集。 2. 滤过程不发生相变化,无需加热,能耗低,无需添加化学试剂,无污染,是一种节能环保的 分离技术。 3. 超滤技术分离效率高,对稀溶液中的微量成分的回收、低浓度溶液的浓缩均非常有效。 4. 超滤过程仅采用压力作为膜分离的动力,因此分离装置简单、流程短、操作简便、易于控制 和维护。 5. 超滤法也有一定的局限性,它不能直接得到干粉制剂。对于蛋白质溶液,一般只能得到10~50%的浓度。 超滤装置是在一个密闭的容器中进行,以压缩空气为动力,推动容器内的活塞前进,使样液形成 内压,容器底部设有坚固的膜板。小于膜板孔径直径的小分子,受压力的作用被挤出膜板外,大 分子被截留在膜板之上。超滤开始时,由于溶质分子均匀地分布在溶液中,超滤的速度比较快。 但是,随着小分子的不断排出,大分子被截留堆积在膜表面,浓度越来越高,自下而上形成浓 度梯度,这日才超滤速度就会逐渐减慢,这种现象称为浓度极化现象。为了克服浓度极化现象, 增加流速,设计了几种超滤装置: 1. 无搅拌式超滤 这种装置比较简单,只是在密闭的容器中施加一定压力,使小分子和溶剂分子挤压出膜外, 无搅拌装置浓度极化较为严重,只适合于浓度较稀的小量超滤。 2. 搅拌式超滤 搅拌式超滤是将超滤装置位于电磁搅拌器之上,超滤容器内放人一支磁棒。在超滤时向容器 内施加压力的同时开动磁力搅拌器,小分子溶质和溶剂分子被排出膜外,大分子向滤膜表面堆积时,被电磁搅拌器分散到溶液中。这种方法不容易产生浓度极化现象,提高了超滤的速度。 4. 中空纤维超滤 由于膜板式超滤装置,截留面积有限,中空纤维超滤是在一支空心柱内装有许多的,中空纤维毛 细管,两端相通,管的内径一般在0.2mm左右,有效面积可以达到1平方厘米每一根纤维毛细管 像一个微型透析袋,极大地增大了渗透的表面积,提高了超滤的速度。

超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项 蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用,使用一次就扔掉太浪费。以下是个人总结的使用方法和注意事项。 1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10k D)。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。 2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。 3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm 换算成g之后,有所不同。具体可参阅附件里的说明书。离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。 4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buf fer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Buffer,直到蛋白不发生沉淀为止。 5、前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。 6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作,用黄枪头(200ul)取,轻轻顺着边缘插入枪头,轻轻吹打、混匀蛋白液,注意不要碰到超滤膜,然后吸取浓缩液,

超滤+反渗透技术说明

一、总则 1.1本技术规范书适用于工业园区取供水工程超滤、反渗透及离子交换除盐水系统及其配套设备,它提出了该设备本体及辅助设备的功能设计、结构、性能、安装和试验等方面的技术要求。 1.2 需方在本招标文件中提出了最低限度的技术要求,并未规定所有的技术要求和适用的标准,供方应提供满足本招标文件和所列标准要求的高质量产品及其相应服务。 1.3 如果供方没有以书面对本招标书的条文提出异议,那么需方可以认为供方提出的产品应完全符合本招标书的要求。如有异议,不管是多么微小,都应在差异表中提出。 1.4 从签订合同之后至供方开始制造之日的这段时期内,需方有权提出因规程、规范和标准发生变化而产生的一些补充修改要求,供方应遵守这些要求。 1.5 本技术规范书所引用的标准若与供方所执行的标准发生矛盾时,按较高的标准执行。 1.6 供方对成套系统设备(含辅助系统与设备)负有全责,即包括分包(或采购)的产品。分包(或采购)的产品制造商应事先征得需方的认可。 1.7设备采用的专利涉及到的全部费用均已包含在设备报价中,供方保证需方不承担有关设备专利的一切责任。 1.8 本招标文件为订货合同的附件,与合同正文具有同等效力。 1.9 本工程采用KKS标识系统。供方提供的技术资料(包括图纸)和设备标识有KKS编码。具体标识要求由设计院提出,在设计联络会上讨论确定。

二、工程概况 2.1工业园区取供水工程,主要为园区内焦化锅炉等提供水源。 2.2 厂址条件 本期取供水工程,厂址设在临涣工业园内,所在区域地形系平原,地势平坦。设备通过公路和铁路运抵现场。 2.3气象特征值 2.3.1厂址: 2.3.2年平均大气温度13.0℃ 2.3.3年平均相对湿度64% 2.3.4极端最高气温41.1℃ 2.3.5极端最低气温-26.8℃ 2.3.6多年平均降水量608.2mm 2.3.7多年平均大气压力1008.6hPa 2.3.8最大积雪深度23cm 2.3.9多年平均风速 2.9m/s 2.3.10多年最大瞬时风速22.7m/s 2.3.11 10分钟平均最大风速22.3 m/s 2.3.12 地震基本烈度7度 2.4 厂区工程地质 厂址工程地质条件及稳定性良好,不易发生地质灾害,不压覆矿产,不压文物,适合工程建设。

milipure超滤管说明书

English Introduction Amicon? Ultra-15 10K centrifugal filter devices provide fast ultrafiltration, with the capability for high concentration factors and easy concentrate recovery from dilute and complex sample matrices. The vertical design and available membrane surface area provide fast sample processing, high sample recovery (typically greater than 90% of dilute starting solution), and the capability for 80-fold concentration. Typical processing time is 15 to 40 minutes. Solute polarization and subsequent fouling of the membrane are minimized by the vertical design, and a physical deadstop in the filter device prevents spinning to dryness and potential sample loss. The concentrate is collected from the filter device sample reservoir using a pipettor, while the ultrafiltrate is collected in the provided centrifuge tube. The device can be spun in a swinging-bucket or fixed-angle rotor. Amicon? Ultra-15 10K devices are supplied non-sterile and are for single use only. Intended Use The Amicon? Ultra-15 product line includes 5 different cutoffs (Molecular Weight Cutoff, MWCO), however, the Amicon? Ultra-15 10K device (10,000 MWCO) is the only device intended for in vitro diagnostic use. It can be used to concentrate serum, urine, cerebrospinal fluid, and other body fluids prior to analysis. For information on other Amicon? Ultra-15 cutoffs, go to https://www.sodocs.net/doc/b416872421.html, and enter Amicon Ultra-15 in the search box. User Guide Amicon ? Ultra-15 10K Centrifugal Filter Devices for volumes up to 15 mL UFC901008UFC901024UFC901096 C V

离心机的使用及注意事项

离心机的使用及注意事项 离心机是利用离心力,分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械。 离心机主要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开;或将乳浊液中两种密度不同, 又互不相溶的液体分开(例如从牛奶中分离出奶油);它也可用于排除湿固体中的液体,例如用洗衣机甩干湿衣服;特殊的超速管式分离机还可分离不同密度的气体混合物;利用不同密度或粒度的固体颗粒在液体中沉降速度不同的特点,有的沉降离心机还可对固体颗粒按密度或粒度进行分级。 离心机大量应用于化工、石油、食品、制药、选矿、煤炭、水处理和船舶等部门。 中国古代,人们用绳索的一端系住陶罐,手握绳索的另一端,旋转甩动陶罐,产生 离心力挤压出陶罐中蜂蜜,这就是离心分离原理的早期应用。 工业离心机诞生于欧洲,比如19世纪中叶,先后出现纺织品脱水用的三足式离心机,和制糖厂分离结晶砂糖用的上悬式离心机。这些最早的离心机都是间歇操作和人工排渣的。 由于卸渣机构的改进,20世纪30年代出现了连续操作的离心机,间歇操作离心机也因实现了自动控制而得到发展。 工业用离心机按结构和分离要求,可分为过滤离心机、沉降离心机和分离机三类。 离心机有一个绕本身轴线高速旋转的圆筒,称为转鼓,通常由电动机驱动。悬浮液 (或乳浊液)加入转鼓后,被迅速带动与转鼓同速旋转,在离心力作用下各组分分离,并分别排出。通常,转鼓转速越高,分离效果也越好。 离心分离机的作用原理有离心过滤和离心沉降两种。离心过滤是使悬浮液在离心力 场下产生的离心压力,作用在过滤介质上,使液体通过过滤介质成为滤液,而固体颗粒被截留在过滤介质表面,从而实现液-固分离;离心沉降是利用悬浮液(或乳浊液)密度不同的各组分在离心力场中迅速沉降分层的原理,实现液-固(或液-液)分离。 还有一类实验分析用的分离机,可进行液体澄清和固体颗粒富集,或液-液分离, 这类分离机有常压、真空、冷冻条件下操作的不同结构型式。 衡量离心分离机分离性能的重要指标是分离因数。它表示被分离物料在转鼓内所受 的离心力与其重力的比值,分离因数越大,通常分离也越迅速,分离效果越好。工业用离心分离机的分离因数一般为100?20000,超速管式分离机的分离因数可高达62000, 分析用超速分离机的分离因数最高达610000。决定离心分离机处理能力的另一因素是

超滤管使用注意事项

超滤管使用注意事项 1、选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD 左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。 2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。 3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。 4、当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Buffer,直到蛋白不发生沉淀为止。 5、前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer 的目的。 自来水过滤器家用超滤机:

超滤管保养方法

超滤管保养和使用方法 超滤管的作用: 1)浓缩;2)脱盐;3)换Buffer;4)具有部分纯化的效果。 1、新的超滤管可以直接使用,不需要其他处理; 2、超滤管不能高温灭菌; 3、换浓缩蛋白时超滤管的处理 超滤管可以重复使用,用0.1M的NaOH浸泡1-2h,用水清洗,再在离心机上用相关溶液(灭菌水或PBS)清洗3次,即可用于浓缩新的蛋白; 4、平常放臵超滤管的处理 经常使用的超滤管,在用0.1M的NaOH浸泡1-2h,用水清洗,用灭菌水浸泡,务必保持滤膜润湿,不能长菌; 5、长时间放臵超滤管的处理 较长时间不使用的超滤管,在用0.1M的NaOH浸泡1-2h,用水清洗,用20%的乙醇浸泡保存,务必保持滤膜润湿,不能长菌; 6、超滤管使用的离心转速 离心转速一般采用4000rpm(一般建议为3000g,最大不能超过4000g)离心5-8分钟,即可将4ml样品浓缩至1ml以下至几十微升;速度过高,目的蛋白会离下,导致目的蛋白丢失;速度过低,耗时,工效低; 7、枪头伸入超滤管中时注意事项 加蛋白液或Buffer到超滤管时,可以用蓝枪头;但从超滤管底吸取浓缩好的目的蛋白时,必须用黄枪头;用枪头伸入超滤管中时,必须防止碰到滤膜,以免戳破滤膜; 8、减少超滤管对蛋白的吸附损失 超滤管的滤膜能吸附蛋白,会导致目的蛋白减少可达30%左右;为减少蛋白损失,在吸尽目的蛋白液后,再用蛋白Buffer吹洗超滤管的管底,可以将滤膜吸附的蛋白洗下大部分而减少目的蛋白的损失;如纯化的蛋白较浓时,注意浓缩的体积不可过小;一般无论如何离心,底部会保留有200 μl左右的蛋白液; 9、如何界定超滤管失效 在正常使用下,滤膜没有被戳破时,浓缩蛋白液中不含有蛋白或量很低(包括目的蛋白),而第一次的滤下液中含有目的蛋白,则说明滤膜失效,需要换新的超滤管。 不同MWCO的离心转速要求不同。当然转速越大,时间越长,透过就越多。 而且速度也和料液性质有关,一般只能根据你的蛋白溶液进行试验,看flux是多少,而且随着透过体积增加,flux会逐渐降低。 以使其达到想要的浓缩倍数。sartorius的离心管保证有最小体积不会滤干,具体要看不同的厂家。 离心条件说明书上应该有推荐值,一般至少要3000g以上,注意控制过程中的温度以保证蛋白活性。 可以反复用几次,次数多了就不行了,管和膜都可能会破。不用的时候,20% EtOH保存以免长菌。 我用的是millpore的超滤离心管要求的分之量10k的,体积15ml 要求的转速低于4000g 不过这个很容易破基本上是一次性的另外注意不要让膜干了

超滤操作手册

一、超滤系统简介 1.1超滤(UF) 超滤是一种膜分离技术,其膜为多孔不对称结构。过滤过程是一抹两侧压差为驱动力,以机械筛分原理为基础的一种溶液分离过程,使用压力通常为0.03~0.6MPa,筛分孔径从0.005~0.1μm,截流分子量为1000~500000道尔顿左右。 1.2诺芮特超滤膜 我公司选用的是荷兰诺瑞芮特的外置错流管式超滤膜,型号:38CRH-XLT F5385。生化池的渗滤液通过外置管式超滤膜实现泥水分离,直接得到高质量的超滤产水,浓水回流至生化池。 该管式膜以其优异的强度、PVDF裁量的耐污染性和运行维护简便性得到认可,设计通量高达70~100L/(m2?h),过滤精度可达30nm,8mm的大通道可以将污泥有效截留并且不会造成膜管堵塞。膜的高效截留作用使得生化池内的污泥浓度可高达25g/L,微生物菌群活性及微生物降解效率大大提高,因此废水中的绝大多数难降解有机物得以有效去除,特别适合于垃圾渗滤液等高浓度污水的深度处理。 外置式管式膜生物反应器(简称TMBR)是一种主要针对垃圾渗滤液等高浓度浓水处理的MBR工艺,主要由生化系统和外置式管式超滤膜系统组成。在外置式膜生物反应器中生物反应器与膜单元相对独立,通过混合液循环泵使得处理水通过膜组件后外排,其中的生物反应器与膜分离装置之间的相互干扰较小。 目前垃圾渗沥液处理中采用的外置式膜生化反应器,超滤膜一般均选用错流式管式超滤膜。即循环泵为混合液(污泥)提供一定的流速(3.5-5m/s),使混合液在管式膜中形成紊流状态,避免污泥在膜表面沉积。错流过滤与传统全流过滤不同,传统过滤是将溶液垂直通过过滤介质来除去其中的悬浮固体,所有的液体在通过滤媒后由同一出口流出。此类过滤装置包括袋式过滤器,砂滤等,粗过滤法只能去除超过1um的不溶性颗粒。传统过滤中被截留的物质积累在过滤介质上,必须定期清洗更换介质。薄膜分离系统可以去除小颗粒及溶盐其原理是:加压的原液平行通过薄膜表面,部分的水流通过薄膜,被截留的颗粒在剩余的水流中浓度越来越高。由于溶液是连续性地

离心机使用守则及使用注意事项(最新版)

离心机使用守则及使用注意事 项(最新版) Security technology is an industry that uses security technology to provide security services to society. Systematic design, service and management. ( 安全管理 ) 单位:______________________ 姓名:______________________ 日期:______________________ 编号:AQ-SN-0331

离心机使用守则及使用注意事项(最新版) 离心机使用守则 一.离心机在预冷状态时,离心机盖必须关闭,离心结束后取出转头要倒置于实验台上,擦干腔内余水,离心机盖处于打开状态。 二.转头在预冷时转头盖可摆放在离心机的平台上,或摆放在实验台上,千万不可不拧紧浮放在转头上,因为一旦误启动,转头盖就会飞出,造成事故! 三.转头盖在拧紧后一定要用手指触摸转头与转盖之间有无缝隙,如有缝隙要拧开重新拧紧,直至确认无缝隙方可启动离心机。 四.在离心过程中,操作人员不得离开离心机室,一旦发生异常情况操作人员不能关电源(POWER),要按STOP。在预冷前要填写好离心机使用记录。 五.不得使用伪劣的离心管,不得使用老化、变形、有裂纹的离

心管。 六.在节假日和晚间最后一个使用离心机例行安全检查后方能 离去。 七.在仪器使用过程中发生机器故障,部件损坏情况时要及时与我们联系 离心机使用注意事项 目前,实验室常用的是电动离心机电动离心机转动速度快,要注意安全,特别要防止在离心机运转期间,因不平衡或试管垫老化,而使离心机边工作边移动,一致从实验台上掉下来,或因盖子未盖,离心管因振动而破裂后,玻璃碎片旋转飞出,造成事故。因此使用离心机时,必须注意以下操作。 (1)离心机套管底部要垫棉花或试管垫。 (2)电动离心机如有噪音或机身振动时,应立即切断电源,即时排除故障。 (3)离心管必须对称放入套管中,防止机身振动,若只有一支样品管另外一支要用等质量的水代替。

离心机操作规则及注意事项

离心机操作规则及注意事项 离心机是实验室极常见的分离仪器,按转速可分为低速离心机、高速离心机、超速离心机等;按温度可分为冷冻离心机、常温离心机;按容量可分为微量离心机、大容量离心机、超大容量离心机;按外型可分为台式离心机、落地式离心机。使用离心机首重安全,离心力失控可能造成很大的破坏。因此要注意离心管是否平衡,转速是否超过设置,转子是否有腐蚀等。 操作项目: 1.平衡离心管。 2.离心机操作方法。 3.离心机及转子的保养方法。 使用步骤: 1.如使用低温离心机,设定使用温度( 通常为4℃ ) 后;关上舱门,使离心舱的温度下降,预冷时间要充足。 2.把样本装入适当的离心管,平衡重量,盖上离心管盖子并旋紧。 ◆注意离心管只装七成满,虽然加有盖子,但也可能因离心力太强而外泄。 ◆放在碎冰上的离心管,注意平衡时,要把碎冰的液体擦拭干净。 ◆单个的离心管要用另一只装有清水的离心管平衡。 3.把平衡好的离心管对称地放入转子中,盖上转子的盖子,注意有无旋紧。 ◆若转子的盖子没旋紧,离心时会掉出来,造成很大的伤害! ◆低温离心机转子的盖子旋紧前,要注意是否放正,否则离心时机器会损坏,离心后盖子难以旋开。 4.关上离心机舱门,在仪表板上调好所要的转速与时间 例如12 , 000rpm 1min 。 ◆注意所用转速绝对不能超过转子的限定,最高转速通常写在转子上面,例如TGL-20M的最高转速为20, 000rpm,但若离心机太老旧,必须往下调降。 ◆转速与时间设定尽量不要太高,例如能使用7, 000rpm者就不要用8, 000rpm。一般实验12 , 000rpm就可以了。 5.确定所有步骤无误后,按Start钮开动,离心机渐渐加速,此时要密切监控。 ◆按Start的按钮时,按住时间不能太短,请持续按约一秒钟后才松开。 ◆开始加速的时候最危险,若发现声音不对,或产生大震动,请立刻按Stop。 6.等到离心达到所要的转速后,确定一切正常才可离去。 7.完成离心时,要等转子完全静止后,才能打开舱门;请尽快取出离心管,先观察离心管是否完全,以及沉淀的位置,尽速把上清倒出,小心不要把沉淀弄混浊。 ◆倾倒上清要很小心,以免把沉淀一起倒出来;若不慎混在一起,就要重来一次。 ◆若离心管有漏,要找出原因,并且立刻清理转子或离心舱。 8.低温离心时,在两次离心之间的空档,盖上舱门,勿让热空气流入离心舱。9.全部使用完毕后,清理转子,离心机内壁,及桌面。 注意事项: 1.离心管一定要平衡好,放入转子时也要注意位置平衡。绝对不要超过离心机

超滤说明书

超滤系统操作维护手册

一、超滤技术介绍 1、超滤是什么 在膜分离领域,按照分离精度划分有微滤(MF)、超滤(UF)、纳滤(NF)、反渗透(RO)四种分离过程。 其中,超滤(Ultrafiltration):介于微滤和纳滤之间的一种膜过程,使用压力通常为0.02~0.3MPa,膜孔径在0.002~0.1μm,截留分子量约为1000~500,000道尔顿左右,超滤是一种能够将溶液进行净化、分离、浓缩的膜分离技术,超滤过程通常可以理解成与膜孔径大小相关的筛分过程,以膜两侧的压力差为驱动力,以超滤膜为过滤介质。超滤膜可有效去除水中的悬浮物、胶体微粒、细菌和大部分病毒等,对有机物的去除率为20~60%,对小分子有机物和无机离子几乎不截留。目前在饮用水、工业用水处理、饮料、环保、化工、冶金、食品等已得到广泛应用。尤其在海水淡化、纯水、超纯水等生产中作为反渗透的预处理,确保反渗透及后续设备运行稳定。 2、超滤膜组件的结构形成 目前市场上超滤膜有平板式、卷式、管式和中空纤维式四种结构型式,特点如下:平板式,其比表面积小,处理能力偏低,不适合工程放大。 卷式,不可反洗,且预处理要求高。 管式,装填密度低、单位体积内膜面积小,且能耗大。 中空纤维式,装填密度高,能耗低,通量大,寿命长,且可以反洗,在工程实际中用得比较多。 表 1 各种结构形式膜组件之间 卷式中空管式平板式 的比较比较项目 填充密度(m2.m-3)200-800 1200 60 30-500 组件结构复杂复杂简单很复杂 膜更换方式组件组件膜或组件膜 膜更换成本较高较高中低 料液预处理高较高低低 抗污染性中等一般非常好中等 清洗效果一般至难易优良 工程放大难易中中易难

离心机使用守则及使用注意事项(正式)

编订:__________________ 单位:__________________ 时间:__________________ 离心机使用守则及使用注意事项(正式) Standardize The Management Mechanism To Make The Personnel In The Organization Operate According To The Established Standards And Reach The Expected Level. Word格式 / 完整 / 可编辑

文件编号:KG-AO-9892-25 离心机使用守则及使用注意事项(正 式) 使用备注:本文档可用在日常工作场景,通过对管理机制、管理原则、管理方法以及管理机构进行设置固定的规范,从而使得组织内人员按照既定标准、规范的要求进行操作,使日常工作或活动达到预期的水平。下载后就可自由编辑。 离心机使用守则 一.离心机在预冷状态时,离心机盖必须关闭,离心结束后取出转头要倒置于实验台上,擦干腔内余水,离心机盖处于打开状态。 二.转头在预冷时转头盖可摆放在离心机的平台上,或摆放在实验台上,千万不可不拧紧浮放在转头上,因为一旦误启动,转头盖就会飞出,造成事故! 三.转头盖在拧紧后一定要用手指触摸转头与转盖之间有无缝隙,如有缝隙要拧开重新拧紧,直至确认无缝隙方可启动离心机。

四.在离心过程中,操作人员不得离开离心机室,一旦发生异常情况操作人员不能关电源(POWER),要按STOP。在预冷前要填写好离心机使用记录。 五.不得使用伪劣的离心管,不得使用老化、变形、有裂纹的离心管。 六.在节假日和晚间最后一个使用离心机例行安全检查后方能离去。 七.在仪器使用过程中发生机器故障,部件损坏情况时要及时与我们联系 离心机使用注意事项 目前,实验室常用的是电动离心机电动离心机转动速度快,要注意安全,特别要防止在离心机运转期

超滤机操作说明

超滤机操作说明 1 .第一步:本超滤机使用380V交流电,接通电源后必须看电机是否为箭头所指方向转动,电机空转时间不宜过长。 2 .第二步:将超滤管两头共三个密封圈取开,以保持管道和超滤管接口处畅通(本机已取开密封圈试过机)。 3 . 第三步:超滤时请先关闭反冲冼阀门3和阀门4,向进口软管内灌槽液,边灌边开泵,使过滤器和泵内都进槽液将空气挤出,灌满槽液后打开阀门1、2、5、6,观察真空表的指针是否上升,如上升到0.1至0.15之间,电机运转声音正常,超滤液就会流出,如真空表指数在0.1以下超滤液排不出或排出量很小,请检查阀门是否在正常开关状态,按一下过滤器出气阀,或将阀门5再调整一下,使槽液出口流量变小,超滤液排出量则会变大。如真空表的指针在0.1或者小于0.1时,将阀门1关小,使管内压力增加至0.15左右才能正常超滤。管内压力不能超过0.15(真空表指针不能大于0.15),如指针指示大于0.15时,则应将阀门1调整大,以免压力过大将膜管损坏。 4 .第四步:当超滤液出口无超滤液或甚微时,便无需继续超滤。停止超滤后必须先进行正冲洗,进行正冲洗时将阀门1、2、5、6打开,关闭反冲洗阀门3、4,启动开关进行正冲洗,当正冲洗进行至5分钟左右后关闭正冲洗。再进行反冲洗,进行反冲洗时,应先打开反冲洗阀门3和阀门4,关闭阀门1、2、5、6,将进口管插入自来水容器中,启动本机开关进行反冲洗,当出水管流出全部是清水时即可停止反冲洗。每次超滤后必须及时进行正冲洗和反冲洗以确保超滤管内无滞留的电泳漆,否则超滤膜会被干枯的漆粘堵,超滤机须置换昂贵的超滤管后才能正常工作。每次冲洗完后,膜管内的水不能放掉,以保持膜管内的湿润。 注:如有不清楚的地方请随时与我公司联系;联系电话0519--83052882

实验室常规离心机使用的几点注意事项

实验室常规离心机使用的几点注意事项 尽管我们的实验室离心机的使用的技术越来越先进,质量越来越可靠,但是严格的遵守实验章程是必不可少的。 听很多出去维修的师傅回来说不明白现在有些个实验室里都是怎么做实验的,离心腔壁上液迹斑驳,个别转子孔里面留着残纸或者试管胶垫,甚至有的离心机转子轴都严重扭曲。其实很多一起的损坏时因为我们怕麻烦、马虎或者想事——也许当时没有出现问题,但是损害却在一点点地积累。这些“麻烦的章程”却是我们顺利进行实验,减少无谓的损坏和事故的保障。 比如样品的装载平衡。我们都知道当转子所带的样品不平衡时会产生很大的力矩,轻者引起机器噪音大和震动,重者就容易引发扭断转轴、“炸头”的事故。因此,离心样品的装载平衡是特别要注意,离心转速越高,对平衡的要求越高;一般而言,我们要求用天平平衡样品,小型离心机允许目测平衡。随着离心机技术水平的提高,自动平衡技术的应用,我们的一些客户对自动平衡的功能理解不够,对配平越来越不重视,实际上我们行业内的自动平衡是指在一定误差范围了转子的调节功能,不等同于不需配平,首先我们要有这样正确的观念。严格按照我们的实验规程以及离心机使用说明书配平是非常有必要的。 另外转子的保管也要适当,根据转子的材质,正确的保存。 根据离心机的不同,离心管的选择也要注意,选择不当容易产生离心管破裂,损失样品甚至污染转子和离心机。超速离心时,为了减小阻力,通常在真空状态下运行,故选用离心管时样品必须装满(不锈钢和PC管除外);常规高速或低速离心则不要装满,所有带盖的转子、水平吊兰、试管盖都要盖紧,防止样品外泄而失去平衡。使用角转子时要盖转头盖。 常见国产离心机大全》》》》 TDL-6M台式低速冷冻离心机

管式超滤说明书

1.0引言 1.1超滤 超滤就是让水和低分子量物质通过特别的半透膜,而聚合物和其他高分子的物质不透过膜的一种物理分离过程,它是通过加压,并根据分子的大小及形状来分离溶液的。 1.2超滤的特点及用途 a.由于分离过程中没有相当变化,则不需要加热,能耗小; b.在常温下操作,不易破坏热敏感之物质; c.不需要加化学药物处理。 由于上述特点,因此在视频,医药、生物、化工、环保等方面都能应用,作为对溶液进行分离、浓缩、提纯处理的手段。 1.3 NG型管束式超滤器和膜管的描述 NG系列内压膜管式超滤器具有占地少,膜面积打,结构紧凑,操作方便等优点。其运行性能与美国考希—阿贝科(koch—abcor)公司的同类产品接近。 其先进性表现在以下几个方面: 1.运行过程中的流体状态得到了改善膜面不再受到横向冲击力,元件使用寿命延长。 2.备有自动清洗系统,提高了工作效率。 3.各组件管独立,可单独调换。 4.安装操作方便,占地面积小,能量利用率高。

NG 膜组件,膜被刮在一个圆形的具有保护作用的多孔支撑管的内表面上,支撑体被密封在一个塑料外壳内。塑料管内含有七根膜管,在塑料外壳两端刻有螺纹的接头,便于与系统相连。并且对膜管有撑和定位作用。膜及支撑体用特定物质被密封在塑料外壳内,这样就达到了把透过液与主流体隔开的目的。开机时,透过液穿过膜,汇集在塑料外壳与保护密封圈的环形空间内,最后从透过口流出。 定位花板 外壳 管接头 透过夜出口 膜管 1.4电泳涂装超滤的应用 超滤器应用于电泳涂装,就是允许水、溶液,小分子量树脂和盐类通过,但颜料和胶体质点通不过。透过水作为后冲洗用水或排放控制漆槽稳定,在绝大多数电泳沉淀应用中,管式超滤器最适合。 阴极漆用超滤膜,其基材为一种亲水性高分子物质,通过电解质

Millipore的超滤管使用经验

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,可重复使用,使用一次就扔掉太浪费。常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。以下是个人总结的使用方法和注意事项。 1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。 2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。 3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm 换算成g之后,有所不同。具体可参阅附件里的说明书。离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。 4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入

试管及离心管使用方法和注意事项

告诉你试管及离心管的使用方法及注意事项。刻度离心管为量入式量器,适用于微量及半微量的定性分析。对悬浮在液体中的物质做离心、分层时,刻度离心管是必不可少的器具,接下来就为大家详细的讲解一下,希望对大家有所帮助。 一、离心管的使用方法 1. 因刻度离心管是量入式量器,使用前必须清洗干净并作干燥处理。 2. 读数时,一定要正确观察弯液面,否则将引进一定的误差。 3. 使用时,离心管的数量要根据离心机的型号决定,如用双只套管的离心机做单只试验,必须在另一只离心管中装入同体积的液体,以保持平衡。 4. 离心管与离心机套管应相配合。管子不宜太长,否则转动时易发生破碎。但也不易太短,太短的管子在空中转动时不稳定,并易引起破碎。太粗套不进,太细转动时不稳,圆口应大于套管内径为准。 5. 离心管套入离心机的套管中进行分层分离后,停止旋转时要让其自然停止,决不能用外力强制停止。

二、离心管的注意事项 我们在使用离心管时,不要一根管多次使用,要注意样品挥发及一些有放射性或腐蚀性强的样品外泄;在存放过程中,更是要密封好;要防止离心管在使用过程中有变形的情况发生。 三、试管使用方法及注意事项: 1.普通试管可以直接加热,加热前先将试管外壁水擦干.

2.装溶液时不超过试管容量的1/2,加热时不超过试管的1/ 3. 3.加热时须用试管夹,试管夹从试管底部向试管口套进,取的时候也从试管下部取出,夹在试管口中上部(接近试管口1/3). 4.加热时先使试管均匀受热,然后在试管底部集中加热,并不断移动试管.试管应倾斜约45°,管口不要对着自己或他人. 5.向试管中倾倒液体,每次只能拿一个试管,但几个试管对比时,可以几个同时拿在手里(用大拇指和手掌). 6.振荡试管时,拇食中三个手指拿住试管,手腕使劲而不是摆臂,用力振荡.试管里的液体受离心力,不会飞溅出来. 7.加热完的试管不能马上放入试管架,防止烫坏试管架. 8.清洗试管可以直接用清水振荡,也可以用试管刷.如果有必要须沾洗衣粉来刷.根据实验所用的药品,也可以选用酸、碱、酸性重铬酸钾洗液来清洗.清洗后的试管,内壁不应挂有水珠. 贝兰伯生物技术(杭州)有限公司是由教授级高工带队,博硕士及十几年生命科学领域的研发、销售团队构成,致力于研发、生产高品质实验室耗材、科研产品,为科研事业贡献力量。主要包括:如PCR管、离心管、无酶无热源诊断包装瓶,无酶无热源吸头、细胞培养类、酶标板、检测板、深孔板、磁套,用于疫苗、抗体药物、基因治疗药物、细胞治疗药物、蛋白质药物、核酸药物、药物研发与核酸提取(DNA和RNA)、基因测序、分子诊断、疫苗研究开发。细胞学,遗传学,免疫学,实验医学,生物分子学等学科研究。

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