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——细胞中大分子(蛋白质和核酸)

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第二章第二节、细胞中的生物大分子

二、蛋白质和核酸

教学目标:

1、知识目标:

①概述糖类的种类和功能,简述鉴定还原糖的实验原理,尝试组织中还原糖的检测方法;

②举例说出脂质的种类和功能,简述鉴定脂肪的实验原理,尝试生物组织中脂肪的检测方法;

③概述蛋白质的结构和功能,简述鉴定蛋白质的实验原理,尝试检测组织中的蛋白质的一般方法;

④简述核酸的结构和功能.。

2、能力目标:

培养学生的自学与实验能力。

3、德育目标:

通过氨基酸通过脱水缩合形成蛋白质的过程,蛋白质的结构和功能的关系,理解生物界结构与功能的统一性。

教学重点和难点:蛋白质、糖类的结构和功能。

课时安排:5课时

教学过程(内容):

(四)蛋白质的结构和功能

蛋白质是生命活动的体现物质。在细胞的各种结构中都是非常重要的成分。

约占细胞干重的50%以上,是一种高分子化合物,或叫生物大分子。

[引导自学]

自学P20 “蛋白质的结构和功能”部分,完成下列知识目标:

1、蛋白质的含量:

活细胞中含量最多化合物是;

含量最多的有机化合物是,占细胞干重%。2、蛋白质的组成元素:

蛋白质都含有,大多数蛋白质还含有,

有些还含有一些特殊元素,如血红蛋白含;叶绿素含。

2、蛋白质种类:

目前发现氨基酸有种,组成蛋白质的氨基酸大约有种。

3、蛋白质基本单位:

(1)蛋白质的基本组成单位是;

(2)这些氨基酸的共同特点是

。(3)通式:氨基:

羧基:

(4)氨基酸的判断:

①同时有和

②至少有一个氨基和一个羧基连在碳原子上。

(5)各种氨基酸的区别:的不同

4、蛋白质形成:

(1)反应:

氨基酸通过反应形成而相互连接。

写出两个氨基酸分子脱水缩合形成二肽的过程式:

肽键的简式有和。

(2)二肽和多肽

二肽:由个氨基酸分子脱水缩合形成,含肽键个。

多肽(n肽):由个氨基酸分子脱水缩合形成,含肽键个。(3)总结:

①一条肽链(含n个氨基酸分子):

至少有氨基个,至少有羧基个,

有肽键个,脱去水分子个。

②一个蛋白质分子若有a条肽链、n个氨基酸组成:

至少有氨基个,至少有羧基个,

有肽键个,脱去水分子个。

②蛋白质分子量的计算:

一个蛋白质分子若有a条肽链、n个氨基酸组成,若每个氨基酸的平均分子量为128,则该蛋白质分子的分子量是多少?

6、蛋白质的结构特点:

蛋白质的结构点具有性,

蛋白质结构的多样性的原因:

组成蛋白质多肽链的:氨基酸

...的、、的不同;

构成蛋白质的多肽链

...的、不同。

7、蛋白质的功能:

蛋白质是生命活动的体现者

蛋白质结构的多样性功能的多样性,

填写下列蛋白质的部分功能

功能举例

人体运输氧气,将血流中的脂质从肝脏运出,

细胞膜上的能运输离子和小分子。

肌蛋白

结构

生长素、胰岛素等蛋白质类激素

[例题]

例题1:由下列三个氨基酸分子脱水缩合所形成的化合物中有氨基、羧基和肽键数依次是()

A. 1,2,2

B. 1,1,2

C. 3,3,2

D. 3,4,2

例题2、在下列物质中,有的属于构成人体蛋白质的氨基酸,有的不是。若将其中构成人体蛋白质的氨基酸缩合成化合物,则其中含有的氨基、羧基、肽键的数目依次是( C )

①NH

2—CH

2

—COOH ②NH

2

—CH

2

—CH

2

OH

COOH

③NH

2—CH—CH

2

—COOH

NH

2

④NH

2—CH—CH

2

—COOH

COOH

⑤ NH

2—CH—(CH

2

3

—NH

2

A.3、3、2

B.4、3、3

C.2、2、2

D.3、4、2

例3、据下图所示的化合物结构简式,请回答问题:

(1)该化合物中有个氨基和个羧基。

(2)该化合物中有种氨基酸构成,形成这种化合物的不同氨基酸的R基编号是。

(3)该化合物是由个氨基酸失去分子的水形成的,这种反应叫做。

(4)该化合物中有个肽键,编号是,该化合物属于。(5)该化合物水解时被破坏的是键,使该键断裂的酶是。(6)若氨基酸的平均相对分子质量为90,则该化合物的相对分子质量约为。

答案(1)2 2 (2)3 bdg (3)3 2 脱水缩合反应(4)2 ce 三肽(5)肽肽酶(6)234

8.实验: [引学边做]蛋白质的鉴定

原理:蛋白质与 试剂 产生 的颜色反应 材料用具:

(1)实验材料:豆浆、蛋清稀释液

要求:最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官),颜色宜浅 (2)仪器:试管、试管架、小量筒、滴管 (3)双缩脲试剂:

配制:A 液: 溶液(2mL ),B 液: 液(3-4滴) 使用要求: 使用,先加NaOH 溶液,再加CuSO4溶液。 (注意:不需要隔水加热)

操作流程

实验结果分析:

如果待测样品中含有蛋白质,则出现 色,反之,则 。

注意事项

1.取材:若用黄豆,必须提前浸泡1-2d 。若用蛋清作实验材料,必须稀释,以免实验后粘住试管,不易洗刷。

2.双缩脲试剂的A 液和B 液要先后加入,造成碱性环境,使蛋白质与形成紫色络合物,否则Cu 2+会先生成Cu (OH )2沉淀,把紫色遮蔽。 3.B 液不可过量,否则的蓝色会遮盖反应生成的紫色。 4.鉴定前应预留部分样液做对照。

[校本作业]

1、下列叙述能对蛋白质的功能进行高度概括的是 ( C ) A.细胞和生物体的重要结构物质 B.收缩、运输、免疫等生理活动的物质基础 C.生命活动的主要承担者

D.调节细胞和生物体新陈代谢的重要物质

2、组成蛋白质的氨基酸之间的肽键结构式是

A .NH —CO

B .—NH —CO —

C .—NH 2—COOH —

D .NH 2—COOH 3、已知氨基酸的平均分子量为128,有100个氨基酸形成3条肽链的蛋白质,分子

组织样液2mL+双缩脲试剂A 2mL 振荡 无颜色变化 双缩脲试剂B 3~4紫色

量约为( D )

A.12800 B.11018 C.11054 D.11638

4、通常情况下,分子式为C63H103O65N17S2的蛋白质分子,最多含有肽腱的个数

为( D )

A.63 B.62 C.17 D.16

5、血红蛋白分子中含574个氨基酸,共有4条肽链。在形成此蛋白质分子时,脱下的水分子数、形成肽键数、至少含有的氨基数和羧基数分别是(D)A.573、573、573、573 B.570、573、571、571

C.570、573、4、4 D.570、570、4、4

6、有一种二肽,化学式是C8H14N2O5,水解后得到丙氨酸和另一种氨基酸M,则M 的R基的化学式是( D )

A.—C5H9NO4B.—C3H5NO2C.—C5H7O2D.—C3H5O2

7、某蛋白质由n条肽链组成,氨基酸的平均分子量为a,蛋白质所含氨基酸b/3 个,则该蛋白质的分子量最多(D )

A.B.

C.D.

8、有一种“十五肽”的化学式为C x H y N z O d S e(z>15,d>16)。已知其彻底水解后得到下列几种氨基酸。下列有关说法中不正确的是( D )

A.水解可得e个半胱氨酸B.水解可得(d-16)/2个天门冬氨酸

C.水解可得z-15个赖氨酸D.水解时消耗15个水分子

(五)核酸的结构和功能:

[引导自学]自学P22 “核酸的结构和功能”部分,完成下列知识目标:核酸最初是从细胞核中提取出来的酸性物质;为生物大分子。

1、核酸的功能:

一是:二是。

2、核酸的分类:

核酸可分为(代号:)和(代号:)两种。

3、核酸的组成元素:是。

4、核酸的基本组成单位是,可降解

为。

大多数生物的遗传物质是,少数只有RNA,它们的遗传信息储存在RNA中。

[例题]

例1 下列关于核酸的叙述中,正确的是()

A.核酸由C、H、O、N元素组成 B.除病毒外,一切生物都有核酸存在C.核酸是生物的遗传物质 D.组成核酸的基本单位是脱氧核苷酸

例2、在生物体的生命活动中,由DNA分子蕴藏的信息所支配合成的RNA在完全水解后,得到的化学物质是()

A.氨基酸、核苷酸、葡萄糖

B.氨基酸、葡萄糖、碱基

C.脱氧核糖、碱基、磷酸

D.核糖、碱基、磷酸

例3、杨树叶肉细胞中的核酸,含有的碱基和核苷酸的种类分别是()

A.1种、2种

B.8种、8种

C.4种、4种

D.5种、8种

[校本作业]

1、对下表中所列待测物质的检测,所选用的试剂及预期结果都正确的是()

待测物质检测试剂预期显色结果

①DNA 甲基绿红色

②脂肪苏丹Ⅲ橘黄色

③淀粉斐林试剂蓝色

④蛋白质双缩脲试剂紫色

A.①③B.②③C.①④D.②④

2、生物体内某些重要化合物的元素组成如下图所示,请回答:

(1)图中X、Y分别代表何种元素?

X ,Y 。

(2)a的分子式可表示为:

(3)A可分为A1,…,A5,…,其原因从

a分析是因为:

①,

②,

3、下图表示细胞内四种有机物的组成及其主要功能,请分析回答下面的问题。

(1)A是指;E在动物中是指,在植物中主要指。

(2)F是指;它是由B脂肪酸和甘油形成的,除此之外,脂质还包括和。

(3)D是指,D形成H,H是。

高三一轮复习课练2 细胞中的蛋白质和核酸

课练2细胞中的蛋白质和核酸 小题狂练②小题是基础练小题提分快 1.[2018·全国卷Ⅰ]生物体内的DNA常与蛋白质结合,以DNA—蛋白质复合物的形式存在。下列相关叙述错误的是() A.真核细胞染色体和染色质中都存在DNA—蛋白质复合物 B.真核细胞的核中有DNA—蛋白质复合物,而原核细胞的拟核中没有 C.若复合物中的某蛋白参与DNA复制,则该蛋白可能是DNA聚合酶 D.若复合物中正在进行RNA的合成,则该复合物中含有RNA聚合酶 答案:B 解析:真核细胞内的染色体和染色质都主要是由DNA和蛋白质组成,都存在DNA—蛋白质复合物,A正确;原核细胞无成形的细胞核,DNA裸露存在,不含染色体(质),但是其DNA会在相关酶的催化下发生复制,DNA分子复制时会出现DNA—蛋白质复合物,B错误;DNA复制需要DNA聚合酶,若复合物中的某蛋白参与DNA复制,则该蛋白可能为DNA聚合酶,C正确;在DNA转录合成RNA时,需要有RNA聚合酶的参与,故该DNA—蛋白质复合物中含有RNA聚合酶,D正确。 2.[2019·湖南联考]如图所示为某细胞中某多肽的结构简式,R1、R2和R3是3个不同的化学基团。下列有关分析,不正确的是() A.该多肽中的肽键数是2 B.该多肽是由3个氨基酸脱去3分子水缩合形成的 C.该多肽至少含有一个氨基和一个羧基 D.该化合物能与双缩脲试剂发生紫色反应 答案:B 解析:图中所示的化合物为三肽,含有2个肽键,是由3个氨基酸脱去2分子水形成的,A正确,B错误;该多肽为链状,至少含有一个氨基和一个羧基(R基中也可能含有氨基和羧基),C正确;含有两个或两个以上肽键的化合物均能与双缩脲试剂发生紫色反应,D正确。 3.[2019·西安月考]下图表示生物体内某种化合物的形成和在细胞中分布的情况。下列有关分析,错误的是() A.化学元素A包括五种大量元素 B.物质C中的D能被吡罗红染成红色

高中生物细胞中的生物大分子同步练习题

高中生物细胞中的生物大分子同步练习题 高中生物细胞中的生物大分子同步练习题 1.组成核酸的必要物质是() A.蔗糖和麦芽糖 B.葡萄糖和乳糖 C.核糖和脱氧核糖 D.淀粉和纤维素 解析:核酸是生物体的遗传物质,分为DNA和RNA。由核糖、脱氧核糖、磷酸和碱基构成。 答案:C 2.糖元、磷脂、胰岛素和DNA共有的化学元素为() A.C、H、O B.C、H、O、N C.C、H、O、N、P D.C、H、O、N、P、S 解析:糖类、脂类、蛋白质、核酸都有着本质的不同,但也有相同之处。它们共有C、H、O三种化学元素。 答案:A 3.由一分子含N碱基、一分子五碳糖和一分子磷酸构成的'化合物是() A.氨基酸 B.核苷酸 C.淀粉 D.糖元 解析:核苷酸的组成与核酸的组成是不同的概念,核苷酸是核酸的基本单位。核苷酸是由一分子含N碱基、一分子五碳糖和一分子磷酸构成的。 答案:B

4.动物细胞中以储存能量的形式存在的糖类是() A.葡萄糖 B.乳糖 C.淀粉 D.糖元 答案:D 5.所有的核苷酸分子中都含有() A.核糖 B.含N碱基 C.脱氧核糖 D.葡萄糖 解析:核苷酸可以组成DNA,也可以组成RNA,两种核酸不同在 于核苷酸的不同。DNA的基本组成单位是脱氧核苷酸,RNA是核糖核苷酸。 答案:B 6.下列各组糖中既存在于植物体内,又存在于动物体内的是() A.淀粉、核糖、糖元 B.葡萄糖、乳糖、麦芽糖 C.脱氧核糖、葡萄糖、核糖 D.糖元、乳糖、蔗糖 解析:动植物体内共同含有的单糖有葡萄糖、核糖和脱氧核糖。 答案:C 7.下列物质中属于固醇类的物质是() A.维生素D B.磷脂 C.菜油 D.猪油 解析:脂类包含脂肪、类脂、固醇三大类物质,每一种有着不同的结构和功能,其中性激素、维生素D、胆固醇属于固醇类,磷脂 属于类脂,猪油、菜油属于脂肪。

实验二细胞内糖原蛋白质及核酸的显示

实验二细胞内糖原、蛋白质及核酸的显示 [实验目的] 1.熟悉糖原、蛋白质、核酸在细胞内的主要存在部位。 2.了解细胞内糖原、蛋白质、核酸显示的原理和方法。 3.进一步掌握显微镜的使用方法。 [实验用品] 1.材料:土豆、洋葱、肝糖原切片、蟾蜍。 2.器材:显微镜、载(盖)玻片、刀片、小镊子、解剖剪刀、染色缸、染色架。 3.试剂:革兰氏碘液、5%三氯醋酸、固绿染液、甲基绿·派洛宁染液、carnoy固定液、 酒精、丙酮。 [实验内容与方法] 一、糖原淀粉的显示 (一)原理 糖原和淀粉是生物有机体生命活动能量的主要来源。淀粉是一种植物多糖,贮藏于植物的种子、块茎、块根中。淀粉遇碘呈蓝色,这是由于碘被吸附在淀粉上,形成一复合物—碘化淀粉。碘化淀粉是不稳定的,极易被醇、氢氧化钠和热分解,因而使颜色褪去。其它多糖大多能与碘呈特异的颜色反应,这些呈色物质不稳定。糖原又称动物淀粉,是动物细胞内贮藏能量的多糖类物质。在肝脏中尤为丰富。可用过碘酸雪夫试剂反应(periodic acid schiff reaction),简称pas反应检测。含乙二醇基的多糖在高碘酸的作用下氧化而产生双醛基,醛基进而与schiff氏液反应,使其中的无色品红变成紫红染料而附于含糖的组织上,着色的部分即为肝糖原。 (二)试剂配制 革兰氏碘液:称碘化钾1g,溶于50ml蒸馏水中,再加0.5g碘使之溶解。最后用蒸馏水稀释至150 ml,盛于棕色瓶内,保存暗冷处。

(三)方法 1. 淀粉 (1)马铃薯徒手切片。 (2)取一薄片放在载玻片上,用吸管吸取革兰氏碘液一滴于马铃薯薄片上,盖上盖玻片。 (3)置光学显微镜低倍镜下观察。可见在多角形的薄壁细胞中,有许多椭圆形蓝色的颗粒,即为淀粉粒。 2. 糖原:在光镜下观察肝糖原切片(schiff氏反应肝组织切片),可见肝细胞略呈多角形,中央有1~2个染成蓝色圆形的细胞核。在细胞质中可见许多紫红色的小颗粒,即为肝糖原,如图2-1。 图 2-1 肝细胞的糖原 1.糖原颗粒 2.细胞核 二. 细胞内酸性蛋白质和碱性蛋白质的显示 (一)原理

遗传信息的携带者—核酸知识点总结

<第三节遗传信息的携带者——核酸> 一、核酸的种类及功能 1. 脱氧核糖核酸(简称DNA) 核酸种类mRNA-信使RNA (根据五碳糖不同)核糖核酸(简称RNA)tRNA-转运RNA rRNA-核糖体RNA 2.核酸的功能:1)核酸是细胞内携带遗传信息的物质。 2)在生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成中具有极其重要的作用。 二、核酸在细胞中的分布(实验:观察DNA和RNA在细胞中的分布) 1.实验原理:甲基绿+DNA→绿色吡罗红+RNA→红色 2.实验材料:人的口腔上皮细胞或其他动、植物细胞(选用植物细胞为实验材料时一定要选择无色或颜色较浅的植物组织,防止实验材料本身的颜色掩盖了实验现象) 3.实验试剂: ①%的生理盐水(NaCl溶液):保持口腔上皮细胞的正常形态或者维持细胞的渗透压。 ②8%的盐酸:1)杀死细胞从而改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞; 2)使染色质中的DNA与蛋白质分离有利于染色。 ③吡罗红甲基绿混合染色剂:现配现用切忌分开使用 原因:若甲基绿和吡罗红单独使用,则细胞内的DNA和RNA均可以与之结合,结果DNA和RNA 均 被染成绿色或红色,而不能辨别。 ④蒸馏水:配制试剂和冲洗涂片 4.实验过程:制片(需烘干,固定标本)→水解(需30℃水浴加热)→冲洗涂片→染色→观察 △实验中的注意事项: ①取人口腔上皮细胞时必须漱口,防止食物碎屑的干扰 ②烘烤载玻片时要在酒精灯火焰上来回移动,防止载玻片受热不匀而破裂 ③载玻片烘干后应冷却后再放入8%的盐酸中,防止载玻片破裂 ④水解时要在30℃条件下保温5分钟,便于蛋白质与DNA的分离;改变细胞膜的通透性;使细胞分散成单个 ⑤冲洗涂片时要用蒸馏水的缓水流冲洗(防止细胞被水流冲走;洗去残留的盐酸) 5.现象:绿色部分主要集中在细胞核内,红色部分主要集中在细胞质中。 6. 真核细胞DNA →主要分布在细胞核中,少量分布在线粒体和叶绿体中虽然同时具有 RNA →主要分布在细胞质中,少量分布在细胞核中两种核酸,但 核酸分布原核细胞DNA →分布在拟核中DNA才是细胞 RNA →分布在细胞质中的遗传物质 病毒——一种核酸,DNA或RNA(病毒具有哪种核酸,哪种就是它的遗传物质) 三、核酸的分子结构 1.构成核酸的元素:C、H、O、N、P 2.构成核酸的基本单位:核苷酸

高三生物总复习教案第3讲细胞中的蛋白质和核酸

2012高三生物总复习教案第3讲细胞中的蛋白质和核酸 教学案 【考纲要求】 【考点分析】 【考点预测】 本节是生物学习的一个基础知识,对与本节单独考察的可能性比较小,但是对于氨基 酸的结构特点及蛋白质的结构特点以及有关氨基酸数目的计算仍然是考察的主要对象,主要以选择题的形式出现。

【知识梳理】 一、氨基酸的结构通式及特点 二、蛋白质的结构层次 1.元素组成 2. 基本单位 3. 肽链 三、蛋白质的结构和功能 四、核酸的结构和功能 五、试验探究:观察DNA和RNA在细胞中的分布 【重点解析】 一、氨基酸的结构通式 1.氨基酸的结构通式中,必须确定中心碳原子,然后确定与中心碳原子相连的四部分:氨 基、羧基、R基、H原子。不同的氨基酸就是由它的R基确定的。在书写相关的化学基团时,其一端总是保留半个化学键,如--COOH —NH2、一R、一H= 2.在构成蛋白质的氨基酸中,至少都有一个氨基和一个羧基,并且都以一个氨基和一个羧基连接在同一个碳原子上,这是判断构成蛋白质氨基酸的一个重要特点。由于R基的不确定 性,因此在一个氨基酸中氨基和羧基的总数也就不确定。如天门冬氨酸有两个羧基,赖氨酸有两个氨基。 例1.某氨基酸分子含有 2 个氨基,其中一个氨基和羧基连在同一个碳原子上,则另一个氨基的部位就是() A. 和羧基连在同一个碳原子上 B. 一定连在羧基上 C .在R基上 D ?与氨基端相连 解析:考察的是氨基酸的结构,氨基酸的结构是一个氨基和一个羧基共同连在同一个C原子 上,还有一个R 基和一个H。 答案:C 二、蛋白质的结构层 1.元素组成 一定含有 C H、O N,由于R基中组成元素的不同,多数含有P、S,有的还含有Fe、Zn、Cu、B、Mn、I 等元素。

细胞中的生物大分子蛋白质的结构和功能

第二节细胞中的生物大分子(蛋白质的结构和功能) 第二节细胞中的生物大分子(蛋白质的结构和功能) (第一课时)【学习目标】知识目标:1、说出蛋白质的组成元素及基本组成单位(A) 2、说明氨基酸的种类(A) 3、简述氨基酸通过脱水缩合形成蛋白质的过程(A)能力目标:培养学生分析推理能力。情感目标:关注蛋白质研究的新进展。【学习重点】氨基酸的结构特点,以及氨基酸形成蛋白质的过程。【学习难点】氨基酸形成蛋白质的过程。【方法指导】合作探究、自主归纳【知识链接】回顾初中学过的有关蛋白质的相关知识。【自主探究】知识点一:蛋白质的组成元素、基本单位【阅读】P20第一、二段内容完成下列填空。 A级1、蛋白质的含量、组成元素蛋白质是细胞中含量最多的化合物,除含等元素外,大多数蛋白质还含有。有的还有P、Fe、Zn、Cu、B、Mn、I等。 2、蛋白质的基本组成单位无论蛋白质的分子质量多大,结构多复杂,但各种蛋白质的基本组成单位都是,自然界中已经发现的氨基酸有100多种,而组成蛋白质的氨基酸约有种。 3、氨基酸的结构特点组成蛋白质的氨基酸在结构上有共同的特点,每个氨基酸分子至少都含有一个氨基( )和一个羧基( ),并连在碳原子上。可用结构通式来表示:。20种氨基酸的区别就在于的不同。【思考与交流】 A级1、观察以下几种氨基酸的结构,写出它们的R基。 B级2、如何判断一种氨基酸是不是组成生物体内蛋白质的氨基酸?知识点二:蛋白质分子的结构【阅读】P20~21相关内容完成下列填空。蛋白质是生物大分子,由许多氨基酸分子通过形成相连而成。 A级1、氨基酸的结合方式是,(是指一个氨基酸分子的(-COOH)和另一个氨基酸分子的(-NH2)相连接,同时脱去分子的的结合方式。) 2、蛋白质的形成过程(见课本图2-12) 3、肽键的结构式: 4、结果最简单的肽由两个氨基酸分子脱水缩合而成,称为,二肽含有个肽键。由n个氨基酸分子以肽键相连形成的肽链,称为,也可以称为(n?R3)。一条多肽链的一端含有个氨基,另一端含有个羧基(一条多肽链至少含有一个氨基和一个羧

蛋白质和核酸、蛋白质和蛋白质相互作用的方法介绍

蛋白质和核酸、蛋白质和蛋白质相互作用的方法介绍蛋白质和核酸是组成生命的主要生物大分子,研究蛋白质和核酸的相互作用、蛋白质和蛋白质的相互作用是后基因组时代重要的研究领域之一。目前,研究蛋白质和核酸、蛋白质和蛋白质相互作用的方法很多,今天,小编帮您来梳理下。 一、 凝胶迁移或电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,可用于定性和定量分析。目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用,是转录因子研究的经典方法。EMSA可检测DNA结合蛋白、RNA结合蛋白、特定的蛋白质,并可进行未知蛋白的鉴定。 二、 染色质免疫沉淀技术(Chromatin immunoprecipitation assay, ChIP)是将样品中同抗体靶蛋白相互作用的DNA随免疫复合物沉淀,是研究体内蛋白质与DNA相互作用的有力工具,利用该技术不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰以及转录因子与基因表达的关系。 三、 / DNA Pull Down 蛋白质与RNA的相互作用是许多细胞功能的核心,如蛋白质合成、mRNA组装、病毒复制、细胞发育调控等。使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过western blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA 相互作用。 四、RIP RIP 技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation Assay,RNA 结合蛋白免疫沉淀)主要是运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA 进行q-PCR验证或者测序分析。RIP 是研究细胞内RNA 与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,可以帮助我们发现miRNA 的调节靶点。 五、双 双报告基因用于实验系统中作相关的或成比例的检测,通常一个报告基因作为内对照,使另一个报告基因的检测均一化。理想的双报告基因方法应该使用户能够以萤火虫荧光素酶所具有的速度,灵敏和线性范围对同一样品中的两个报告基因同时测定。 六、酵母单杂交 酵母单最由技术发展而来的,通过对的表型检测,分析DNA与蛋白之间的相互作用,以研究真核细胞内的。由于酵母单杂交方法检测特定与专一性相互作用的敏感性和可靠性,现已被广泛用于克隆细胞中含量微弱的、用生化手段难以纯化的特定转录因子。 蛋白-蛋白互作研究 一、酵母双杂交

细胞和分子生物学实验重点知识点汇总

细胞和分子生物学实验重点知识点汇总 Experiment1细胞有丝分裂 间期:有明显的细胞核,染色质分布较均均,由于染色质易与碱性染料结合,故细胞核的染色比细胞质深。核中可见1~3个染色较浅的呈球状的核仁 前期:细胞核膨大,染色质逐渐螺旋化为丝状的染色丝,其后染色丝进一步缩短变粗,形成一定形态和书目的染色体(这时候的每条染色体由两条染色单体组成,但在光镜下一般不易看清),核膜、核仁逐渐消失 中期:每条染色体中的成对染色单体逐渐分开(但着丝粒仍未分离)全部染色体(2n=16)移向细胞中央的赤道面上,形成赤道板。在赤道板到两面有许多纺锤丝连接细胞两极和染色体的着丝点,成为纺锤体,但不易观察到,此时染色体形态最典型 后期:着丝粒纵裂为二。这是,每条染色体的两条染色单体已完全分开,由于纺锤丝的牵引,分别向细胞的两极移动,形成了数目相等的两组染色体(这是所观察到的染色体数目比原来增加1倍,是由于S期内DNA含量倍增的结果) 末期:染色体移到两极并解旋为染色质,细胞中部出现细胞板,并逐渐向边缘发展。当染色质构成核网时,核膜、核仁重新出现。细胞板达到两边,分裂结束,形成两个子细胞,细胞又进入间期状态。 Experiment2动物染色体的制备 原理:染色体只有在分裂期的细胞,特别是中期细胞中表现出典型形态便于观察和计数,所以必须采取特殊的技术方法,从发生有丝分裂的组织和细胞悬液中得到。最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞和组织培养的细胞中制备。骨髓细胞数量多、分裂旺盛,不需体外培养和无菌操作,便于取材。 秋水仙素的作用:抑制纺锤体的形成,使细胞停留在分裂中期 KCl低渗溶液:使细胞膨胀,促使中期染色体散开 固定液:有固定作用,对染色体还有一定的分散作用 Giemsa染色液:染色 结果:低倍镜下,可见到许多大笑不等被染成紫红色呈圆形的间期细胞核以及分散在它们之间的中期分裂象。小鼠染色体一般呈“U”形,染色体2n=40

苏教版必修一细胞中的生物大分子第1课时作业

苏教版必修一细胞中的生物大分子 第1课时生物大分子的基本骨架糖类、脂质的种类和功能 课时作业 1?原子的质量数是指() A ?原子核中的质子数和中子数之和 B ?质子数和电子数之和 C.中子数和电子数之和 D ?质子数和电子数、中子数之和 解析:选A。原子的质量数是指原子核中的质子数和中子数之和。 2?生物大分子在生物体生命活动中具有重要的作用。碳原子本身的化学性质使它能够通过化学键连接成链状或环状,从而形成 生物大分子。以上事实可以说明() ①碳元素参与生物体内所有化合物的组成 ②地球上的生命是在碳兀素的基础上建立起来的 ③碳元素是各种化合物中含量最多的元素 ④碳元素是组成生物体内有机化合物的最基本元素 A ?②③④ B ?③④ C.②④ D ?①③④ 解析:选C。由题意可知,在生命活动中具有重要作用的生物大分子是在碳元素的基础上建立起来的,这与碳原子本身的化学性质有关,因此可以得出②④的结论。作为生物体重要组成物质的水中无碳元素,有些化合物如糖和水中含量最多的元素是氧,故①③无法从上述事实中得出。 3?医生给低血糖休克病人注射50%的葡萄糖溶液,其主要目的是() A ?供给全面营养 B ?供给能源 C.维持细胞渗透压 D ?供给水分

解析:选B。糖类是生物体进行生命活动的主要能源物质。葡萄糖氧化分解时释放出大量的能量,可供给生物体生命活动的需要 血糖过低时,会出现头昏、心慌、四肢无力甚至休克等低血糖症状。注射葡萄糖的目的是升高血糖浓度,给病人提供营养,增加 能量。 4.如图表示一个反应过程,图中的黑球表示两个相同的单糖,则图中的A、B分别表示() e ? A B A .淀粉、葡萄糖 B .麦芽糖、葡萄糖 C.蔗糖、果糖 D .乳糖、葡萄糖 解析:选B。题目中黑球表示两个相同的单糖,判断A为二糖,而淀粉为多糖。麦芽糖由两分子葡萄糖脱水缩合而成,符合题目 中的条件;蔗糖则是由1分子葡萄糖和1分子果糖脱水缩合形成,乳糖则是由1分子葡萄糖和1分子半乳糖脱水缩合形成,都不 符合两个相同的单糖的条件。 5?关于生物体内糖类物质的叙述中,正确的是() A .麦芽糖在动、植物细胞中都能检测到 B ?糖类物质在细胞内不能贮存 C.糖类物质都是细胞内的能源物质 D .单糖、二糖和多糖在细胞内可以相互转化 解析:选D。麦芽糖只存在于植物细胞中,A错误;单糖类物质较多时可以转化为多糖,在细胞内贮存,B错误;植物细胞的纤维素构成细胞壁,不能提供能量,C错误;单糖、二糖和多糖在细胞内可以相互转化,D正确。 6.用苏丹川染液检测脂肪时,脂肪颗粒被染成橘黄色,但要立即观察,否则脂肪颗粒将被溶解。能够溶解脂肪的是() A ?染液中的苏丹川粉 B ?染液中的酒精 C.颜色反应产生的热量 D .颜色反应中的生成物 解析:选B。脂肪不溶于水,易溶于酒精等有机溶剂。染液中的苏丹川粉是染色剂,不是用来溶解脂肪的。 7.某生物体内能发生如下反应:淀粉 -麦芽糖-葡萄糖-糖原,则下面的说法不正确的是() A ?此生物一定是动物,因为能合成糖原

实验二-核酸及蛋白质序列的比对

实验二核酸及蛋白质序列的比对 姓名:班级:序号:指导老师: 一、实验内容 利用检索出的蛋白质和核酸序列进行序列比对并进行分子进化树分析。 二、实验步骤 键入上次实验获得的phyA的核酸序列编号(NM_100828),获得核酸及蛋白质序列。利用blastx程序寻找与phyA蛋白质序列相似性的序列→选择下列序列:sorghum propinquum(高粱);zea mays(玉米);水稻;大豆;arabidopsis thaliana (拟南芥);cyrtosia septentrionalis(血红肉果兰)→点击get select sequence按钮显示序列为纯文本格式文件→分别命名为各自的文件名保存在本地电脑上备用。 在数字基因网https://www.sodocs.net/doc/a612958977.html,/找到dnaman及clustalx软件安装并进行多序列比对及分子进化树分析。 利用ebi上提供多序列比对工具再作一次比对https://www.sodocs.net/doc/a612958977.html,/clustalw/。 选作核酸序列的比对 5、打开ncbi主页点击BLAST→学习网页左侧的BLAST FAQS及program guide 三、作业 1、绘制分子进化树,并标明各个物种phyA蛋白之间的序列相

似性。 2、根据你所学生物分类的知识,试解释该分子进化树的合理性 ①拟南芥:植物界种子植物门被子植物门双子叶植物纲十字花目十字花科鼠耳芥属(拟南芥属) ②大豆:植物界种子植物门被子植物亚门双子叶植物纲豆目蝶形花科大豆属 ③血红肉果兰:植物界种子植物门被子植物亚门百合纲百合目兰科树兰亚科肉果兰属 ④水稻:植物界种子植物门被子植物亚门单子叶植物纲禾本目禾本科稻属 ⑤玉米:植物界种子植物门被子植物亚门单子叶植物纲禾本目禾本科玉米属 ⑥高粱:植物界种子植物门被子植物亚门单子叶植物纲禾本目禾本科高粱属 经过对比可得下列同源性关系 高粱 玉米

2019版高考生物一轮复习第二单元细胞的自我保障第4讲细胞中的核酸教案中图版2

第4讲 细胞中的核酸 [最新考纲] 1.核酸的结构和功能(Ⅱ)。2.细胞核的结构与功能(Ⅱ)。3.生物大分子以碳链为骨架(Ⅱ)。4.实验:观察DNA 、RNA 在细胞中的分布。 考点一 核酸的结构与功能(5年3考) 1.核酸的组成 (1)组成元素:C 、H 、O 、N 、P 。 (2)基本单位——核苷酸 核苷酸的组成成分:a.磷酸、b.五碳糖、c.含氮碱基,其相关种类:b 是2种,c 是5种。 (3)基本单位的种类?????脱氧核糖核苷酸(4种)――→组成DNA 核糖核苷酸(4种)― ―→组成RNA ■助学巧记 巧记DNA 组成结构的“五、四、三、二、一” 2.核酸的种类和功能 (1)分类:脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。 (2)“三看”法快速确认DNA 、RNA 3.DNA 和RNA 的比较

1.真题重组 判断正误 (1)细胞中RNA 合成过程不会在细胞核外发生(2017·全国卷Ⅲ,1C)(×) (2)在细胞中,核外没有参与DNA 合成的酶(2017·全国卷Ⅱ,3A )(×) (3)酵母菌的细胞核内含有DNA 和RNA 两类核酸(2016·全国卷Ⅰ,1B)(√) (4)DNA 与ATP 中所含元素的种类相同(2015·全国卷Ⅰ,1A)(√) (5)原核生物拟核区中含有环状的DNA 分子(2017·海南卷,2C)(√) 以上内容考查了DNA 和RNA 分子的化学组成及空间结构、功能及鉴定,其主要源 自教材必修一P37~38关于核酸的相关知识,大多属识记内容。 2.如图为某核苷酸链的示意图,下列相关叙述中,正确的是( )

A.图示化合物的元素组成只有C、H、O、N B.图示化合物为DNA的一条链 C.图中的T、C、G可参与合成6种核苷酸 D.图示化合物只能在细胞核中找到 解析核苷酸链的组成元素有C、H、O、N、P,A错误;图中含有碱基T,为DNA的一条链,B正确;T、C、G可参与合成5种核苷酸,C错误;DNA主要分布在细胞核中,此外在细胞质中也有少量DNA,D错误。 答案 B 甲图表示某些重要化合物的元素组成和功能关系,乙图是甲图中某种物质的分子结构图。试分析: (1)乙图所示物质的名称是什么?你的判断依据是什么?它对应甲图a、b、c或A、B、C中的哪类分子?乙图中“碱基”有哪几类? (2)请写出A、B、C所代表的物质名称。 (3)人体细胞中①~④发生的场所分别是什么? 提示(1)核糖核苷酸,其2号碳位上连有—OH而不是—H;它对应甲图中的b分子,其“碱基”种类为A、U、C、G。 (2)A—DNA B—RNA C—蛋白质 (3)①、②主要发生于细胞核,其次发生于线粒体,③、④只发生于核糖体。 核酸的组成、分类及功能 1.(2017·全国卷Ⅰ,29) 根据遗传物质的化学组成,可将病毒分为RNA病毒和DNA病毒两种类型,有些病毒对人类健康会造成很大危害,通常,一种新病毒出现后需要确定该病毒的类型。

1.3细胞中的蛋白质和核酸(新苏教)

【 导入新课】 通过PPT展示我们每天摄取的牛奶、鸡蛋、鱼和肉等食物,让学生思考每种食物中主要提供哪些营养物质,引出本节课的学习内容--细胞中蛋白质。引导学生思考:人体从食物中摄取的蛋白质能否直接被吸收?为什么?引出本节课的学习内容。 【新课研学】 一、细胞的功能主要由蛋白质完成 1.氨基酸的结构通式 教师提问:蛋白质的基本组成单位是什么?大约有多少种?每种基本单位具有哪些共性,每位同学尝试在卡片上构建氨基酸的结构通式后,学生在黑板上写下氨基酸的结构通式,教师引导学生标注出氨基酸的中心碳原子上连接的4个化学基团的名称,并分析后概括出氨基酸结构通式的特征。 教师引导学生判断学案上列举的氨基酸是否是组成蛋白质的氨基酸,并阐述原因。 通过对氨基酸的结构通式的分析,学生能够正确判断出符合组成蛋白质的氨基酸必须满足的条件有:每个氨基酸都至少有一个氨基和一个羧基,且氨基和羧基连在同一个碳原子上;连有一个H和一个侧链基团(R基)。

2.氨基酸的脱水缩合过程 1965年由我国科学家人工合成的世界上第一个有生物活性的结晶牛胰岛素,其分子量相对较小,是由51个氨基酸组成。那么,在蛋白质中,氨基酸是 如何组成蛋白质的呢?阅读课本P22图1-3-4,尝试写出两个氨基酸形成二肽的过程。引导学生分析:脱水缩合过程中形成的水中的H、O的来源? 什么是二肽、三肽以及多肽。完成互动探究:观察下图,尝试总结肽键数与氨基酸数、肽链数之间的关系;肽链中至少游离的氨基和羧基如何计算。 多肽就是蛋白质吗?如果不是,那么两者之间有何区别?蛋白质又具有哪些功能呢? 提示:多肽并不等于蛋白质,氨基酸通过脱水缩合形成多肽,多肽并不具

细胞分子生物学名词解释最全版

, 内膜系统的膜结构破裂后自己重新封闭起来的小囊泡(主要 是内质网和高尔基体), 是异质性的集合体, 形态、大小及功能常因生物种类和细胞类型不同而异。据微体内含有的酶的不同可分为过氧化物酶体、糖酵解酶体和乙醛酸循环体。在蛋白质合成过程中,同一条mRNA分子能够同多个核糖体结合,同时合成若干条蛋白质多肽链,结合在同一条mRNA上的核糖 叠的多肽链相互作用的蛋白质,能够加速正确折叠的进行或提供折叠发生所需要的微环境。动物体细胞在体外可传代的次数,与物种的寿命有关,它们的增殖能力不是无限的, DNA在核小体连接处断裂成核小体片 色体末端的特殊结构,即染色体末端DNA 序列的多个重复,其作用是保护和稳定染色 RNA 依赖性DNA 聚合酶,为一种核糖核蛋白酶,是合成端粒必需的酶。在双线期中,交叉数目逐渐减少,在着丝粒两侧的交叉向两端移动.这个现象称为 成染色体联会的两条同源染色体互相紧靠,进而缠绕在一起,基质开始附着到染色丝上,成为一条短而粗的染色体。据染色体被拉向两极所受到的力的不同,后期可分为后期A 和后期B,此时的染色体 启动DNA复制的关键因子,是真核细胞DNA M期促进因子。

能够促使染色体凝集,使细胞由G2期进入M 物质多肽的形式合成,其N末端含有作为通过膜时之信号的氨基酸序列。引导前体多肽 是指具有摄取、处理及提呈抗原能力的细胞,能摄取病原体蛋白并将其加工将成短肽段,呈递给T细胞。 ,从中 于高等真核细胞中,是内层核被膜下纤维蛋白片层,纤维纵横排列整齐呈纤维网络状。 成串排列在一起,主要集中在染色体的着丝 DNA和组蛋白构成,是染色质的基本结构 在一定时期的特种细胞的细胞核内, 它由不表达的DNA序列组成, 分裂过程中,核仁出现周期性变化。一般在分裂前期逐渐消失,其纤丝和颗粒成分散失于核质之中;在分裂末期又重新出现。核仁的形成常与特定染色体的一定区域密切相关。 色体片段, 通过次缢痕与染色体主要部分相连。 指染色体组在有丝分裂中期的表型, 是染色体数目、大小、 是卵母细胞进行第一次减数分裂时, 停留在双线期的染色体。含4条染色单体,形似灯刷。 由核内有丝分裂产生的多股染色单体平行排列而成。

最经典总结-观察DNA和RNA在细胞中的分布练习

观察DNA和RNA在细胞中的分布练习 课后·分层训练 (时间:10分钟满分:50分) 1.下列关于淀粉、脂肪、蛋白质和核酸4种生物分子的叙述,正确的是() A.都能被相应的酶水解 B.都是水溶性物质 C.都含C、H、O、N这4种元素 D.都是人体细胞中的能源物质 解析四种生物分子分别都能被相应的酶水解,A正确;脂肪为脂溶性物质,不溶于水,B错误;淀粉和脂肪都只含有C、H、O三种元素,C错误;核酸是与遗传有关的物质,不能作为能源物质,D错误。 答案 A 2.关于蛋白质与核酸的叙述,错误的是() A.细胞核中含有蛋白质和多种RNA B.蛋白质多样性的体现与核酸有关 C.DNA分子的复制不需要蛋白质的参与 D.基因表达过程中可产生核酸和蛋白质 解析DNA分子复制需许多酶参与,而这些酶的化学本质为蛋白质。 答案 C 3.(2016·山东潍坊检测)下列关于糖类和脂质的叙述,错误的是() A.肝糖原和磷脂共有的元素是C、H、O B.相同质量的脂肪和多糖彻底氧化分解,脂肪放能多 C.某些糖类和脂质能参与细胞间的信息传递 D.脂质和糖类的最终水解产物都是CO2和H2O 解析脂肪(而不是脂质)和糖类的最终氧化分解产物(而不是水解产物)是CO2和H2O。 答案 D

4.(2016·河北保定模拟,2)有关下列生物体或其部分结构的物质组成分析正确的是() A.核糖体——磷脂和蛋白质 B.细胞膜——脂肪、糖类和蛋白质 C.T2噬菌体——RNA和蛋白质 D.细胞骨架——蛋白质 解析核糖体由rRNA和蛋白质构成,A错误;细胞膜主要含有蛋白质、脂质(磷脂和固醇)和多糖,B错误;T2噬菌体中含有的是DNA和蛋白质,C错误;细胞的骨架是蛋白质,D正确。 答案 D 5.(2016·海南七校联考)下列有关核酸的叙述中,与事实不相符的是() A.碱基组成相同的核苷酸不一定相同 B.若核酸中含有碱基T或脱氧核糖,则为DNA C.原核生物的遗传物质是DNA或RNA D.大肠杆菌和酵母菌的DNA不同 解析核苷酸包括脱氧核苷酸和核糖核苷酸,含有相同碱基的脱氧核苷酸和核糖核苷酸是不同物质;碱基T和脱氧核糖是DNA分子所特有的;原核生物的遗传物质是DNA;大肠杆菌和酵母菌是不同的生物,它们含有的DNA不同。 答案 C 6.埃博拉病毒是一种RNA病毒,将该病毒彻底水解,关于得到产物的说法正确的是() A.一定得到20种氨基酸 B.能得到四种核糖核苷酸 C.碱基种类和噬菌体相同 D.产物中一定含有H、O元素 解析该病毒蛋白质中未必含全部种类的氨基酸;RNA彻底水解得到的产物为四种核糖核苷酸继续水解的产物——核糖、磷酸及四种含N碱基;噬菌体的碱基有T无U,埃博拉病毒的碱基有U无T,水解产物中一定都有H、O元素。答案 D

细胞中的核酸、糖类和脂质

分层提能限时练(三) 细胞中的核酸、糖类和脂质 (限时:45分钟) [基础练] 扣教材练双基 1.下列关于细胞内化合物的叙述,正确的是() A.ATP含有三个磷酸基团和三个高能磷酸键 B.糖原代谢的最终产物是葡萄糖 C.蔗糖和乳糖水解产物中都有葡萄糖 D.脂肪和生长激素是生物体内的能源物质 【答案】 C 2.人乳头状瘤病毒(HPV)和甲型H1N1流感病毒的遗传物质分别是DNA和RNA。下列有关DNA和RNA的比较正确的是() A.分布上,真核细胞中的DNA全部存在于细胞核中,RNA全部存在于细胞质中 B.化学组成上,DNA与RNA的碱基完全不同 C.结构上,DNA多为双链结构,RNA通常为单链结构 D.鉴定DNA用吡罗红染色剂,鉴定RNA用甲基绿染色剂 【答案】 C 3.生物含有的核酸的种类不同。原核生物和真核生物同时含有DNA和RNA,病毒体内含有DNA或RNA。下列各种生物中关于碱基、核苷酸、五碳糖种类的描述,正确的是() 4.实验“观察DNA和RNA在细胞中的分布”中使用盐酸的目的包括()

①改变细胞膜的流动性②改变细胞膜的通透性③改变细胞膜的活性④将DNA与蛋白质分离⑤将RNA与蛋白质分离⑥利于RNA与染色剂结合⑦利于蛋白质与染色剂结合⑧利于DNA与染色剂结合 A.①④⑥B.②④⑧ C.③⑤⑦D.②⑤⑥ 【答案】 B 5.在人体中既是细胞膜的成分,又可参与血液中脂质运输的物质是() A.维生素D B.磷脂 C.脂肪D.胆固醇 【解析】4种成分中,磷脂是细胞膜的主要成分,但不参与血液中脂质运输;胆固醇是细胞膜的重要成分,在人体内还参与血液中脂质运输。 【答案】 D 6.下列关于细胞内化合物的分类和比较,正确的是() A B C D 【解析】脂质包括脂肪、磷脂和固醇,脂肪不包括固醇和性激素,A项错误。B图左半圆内应都是动物细胞含有的糖类,右半圆内应都是植物细胞含有的糖类,两圆交叉部分为动植物细胞共有的糖类,而麦芽糖只存在于植物细胞,B 项错误。蔗糖为非还原糖,属于二糖,C项错误。激素有的属于脂质(如性激素),有的属于蛋白质(如胰岛素);多数酶属于蛋白质,极少数酶为RNA,D项正确。 【答案】 D 7.在自然界中,许多天然生物大分子或生物结构为螺旋状。下列与生物螺旋结构相关的叙述,正确的是() A.DNA的螺旋结构由核糖和磷酸交替排列构成基本骨架

分子生物学名词解释

RFLP:个体之间DNA的核苷酸序列存在差异,称为DNA多态性。由于碱基组成的变化而改变了限制性内切酶的酶切位点,从而导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化,称为RFLP。 翻译:是指在多种因子辅助下,由tRNA携带并转运相应氨基酸,识别mRNA上的三联体密码子,在核糖体上合成具有特定序列多肽链的过程,称为翻译。突变:DNA的结构发生永久性改变,即突变. 转化:通过自动获取或人为地供给外源DNA,使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型。 转导:当病毒从被感染的(供体)细胞释放出来、再次感染另一(受体)细胞时,发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因重组即为转导作用。受体:是细胞膜上或细胞内能识别外源化学信号并与之结合的成分,其化学本质是蛋白质,个别糖脂。 粘粒:又称柯斯质粒,是一类由人工构建的含有λDNA 粘性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。它是为克隆和增殖真核基因组DNA的大区段而设计的,是组建真核生物基因文库及从多种生物中分离基因的有效手段。质粒:是存在于细菌染色体外的、具有自主复制能力的环状双链DNA分子。端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在。端粒DNA由重复序列组成,人类端粒一端是TTAGGG另一端是AATCCC. 克隆:通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。 探针:用放射性核素、生物素或荧光染料标记其末端或全链的已知序列的多聚核苷酸链被称为“探针”。 转录:以DNA为模版,由DNA依赖的RNA聚合酶(RNApol)催化4中NTP聚合,生成RNA 的过程。 增强子:其含有多个作用原件,可以特异性地与转录因子结合,增强基因的转录活性的段短DNA序列。 启动子:能被RNA聚合酶特异性识别并与其结合,启动转录的DNA序列。 操纵子:由功能相关的一组基因在染色体上串联,共同构成的一个转录单位。沉默子:某些基因的负性调节元件,当其结合特异蛋白因子时,对基因转录起阻遏作用。 反转录:在反转录酶的作用下以RNA为模板合成DNA的过程。 点突变:DNA序列上单个碱基的改变称为点突变,可分为转换与颠换两种。 信号肽:是分泌蛋白新生肽链N端的一段能被细胞转运系统识别的保守性的氨基酸序列。 领头链:顺着解链方向生成的子链,复制是连续进行的,这股链称为领头链。G蛋白:鸟苷酸结合蛋白(G protein)简称G蛋白,亦称GTP结合蛋白。是一类含乌苷酸的蛋白质,存在于细胞外膜内表面,为生物信息转导过程中关键的中介体,可以决定信号传输通路何时打开和关闭。 SD序列:mRNA起始密码子AUG上游8~13个碱基处存在的一段特定的核苷酸序列,该序列称为SD序列,是mRNA的起始密码子之所以能与小亚基定位结合的关键。SD序列与小亚基中16SrRNA3’端的互补序列配对结合,使起始密码子定位于翻译起始部位。 RNA编辑:可在改变转录后RNA的序列,而使翻译得到的蛋白质的序列与推导的不同。其机制有两种即位点特异性脱氨基作用和指导RNA(gRNA)介导的尿嘧啶插入和删除。 RNA复制:以RNA作为基因组的病毒称为RNA病毒,这类病毒除反转录病毒外,在宿主细胞都是以病毒的单链RNA为模板合成RNA,这种RNA依赖的RNA 合成又称为RNA复制。 RNA干扰,RNAi:是由双链RNA引发的转录后基因静默机制。在此过程中,与双链RNA有同源序列的mRNA被降解,从而抑制该基因的表达。是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制。RNA干涉:是指由短双链RNA诱导的同源mRNA的降解过程,可使基因表达受到抑制。 反义RNA:指与mRNA互补的RNA分子,也包括与其它RNA互补的RNA分子。 根据反义RNA的作用机制可将其分为3类:Ⅰ类反义RNA直接作用于靶mRNA 的S D序列和(或)部分编码区,直接抑制翻译,或与靶mRNA结合形成双链RNA,从而易被RNA酶Ⅲ降解;Ⅱ类反义RNA与mRNA的非编码区结合,引起mRNA构象变化,抑制翻译;Ⅲ类反义RNA则直接抑制靶mRNA的转录。RNA聚合酶:以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。 是催化以DNA为模板(template)、三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶。 RNA印迹:利用与DNA印记相类似的技术来分析RNA,成为RNA印记。 DNA的变性:在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。DNA复性:在适当条件下,变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这一过程称为退火。 DNA损伤:各种体内外因素所导致的DNA组成与结构的变化称为DNA损伤。DNA印迹:DNA样品经限制性内切酶消化后行琼脂糖凝胶电泳,将含有DNA区带的凝胶在变性溶液中处理后,再将胶中的DNA分子转移到NC膜上。DNA克隆:应用酶学的方法, 在体外将各种来源的遗传物质与载体DNA接合成一具有自我复制能力的DNA分子,继而通过转化或转染宿主细胞,筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增提取获得大量同一DNA分子。也称基因克隆或重组DNA DNA载体:为携带目的基因,实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。 DNA芯片技术:基因芯片,将许多特定的DNA片段有规律地紧密排列于单位面积的支持物上,然后与待测的荧光标记样品进行杂交,杂交后用荧光检测系统等对芯片进行扫描,通过计算机系统对每一位点的荧光信号做出检测、比较和分析,从而迅速得出定性和定量的结果。 cDNA文库:cDNA文库是包含某一组织细胞在一定条件下所表达的全部mRNA 经逆转录而合成的cDNA序列的克隆群体,它以cDNA片段的形式贮存着该组织细胞的基因表达信息。 基因组DNA文库:基因组DNA文库是指生物的基因组DNA的信息(包括所有的编码区和非编码区)以DNA片段形式贮存的克隆群体。 PCR技术:利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内的大量合成,可将微量目的DNA片段大量扩增。可用于已知序列或部分已知序列的检测;或扩增出已知片段,再利用其他方法作进一步分析。灵敏度高、产率高、重复性好、快速简便,已成为基因诊断的主要和首选技术。但易出现假阳性,应注意优化实验条件。 逆转录PCR:将RNA的逆转录反应和PCR反应联合应用的一种技术,先以RNA 为模板,在逆转录酶的作用下的作用下合成cDNA,再以cDNAcDNA为模板通过PCR反应来扩增目的基因。基因:合成有功能的蛋白质,多肽或RNA所必需的全部DNA序列,是基因组的一个功能单位。 基因组:细胞或生物体中,一套完整单倍体的遗传物质的总和。 癌基因:细胞内控制细胞生长和分化的基因,它的结构异常或表达异常,可以引起细胞癌变。 原癌基因:是细胞中的必需基因,进化过程中序列高度保守,对维持细胞正常生理功能、调节细胞生长与增殖起重要作用。但如受到致癌因素作用下可发生变化,表达产物的质或量改变或表达的时空方式改变,而导致细胞恶性转化。 抑癌基因:又名抗癌基因(TSGs ) 、隐性癌基因。是一种抑制细胞生长和肿瘤形成的基因。在生物体内与癌基因功能相抵抗,共同保持生物体内正负信号相互作用的稳定。 管家基因:执行重要生物功能,在生物体几乎全体细胞中持续表达的基因。如rRNA、通用转录因子、代谢酶系、细胞骨架蛋白等。 奢侈基因:仅在特定细胞内选择表达的基因,决定分化细胞的独特性状。 结构基因:基因中编码RNA或蛋白质的DNA序列称为结构基因。 目的基因:我们感兴趣的基因或是DNA序列 病毒癌基因:指致癌病毒存在的某些核苷酸序列,能引起细胞转化。 基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 基因敲除:指通过DNA同源重组定向地将外源基因替换宿主细胞染色体DNA中特定的基因,从而使特定的基因在细胞内或生物体内失活的过程。 基因诊断:利用分子生物学技术方法,直接检测体内DNA或RNA的结构或水平的变化以及是否存在异常的外源核酸,从而对疾病作出诊断的方法。 基因治疗:基因治疗是指通过一定方式将目的基因或有治疗作用的DNA片段导入人体的靶细胞,使其发挥生物学效应,从而达到治疗疾病目的技术疗方法。基因增补:不删除突变的致病基因,而在基因组的某一位点额外插入正常基因,在体内表达出功能正常的蛋白质,达到治疗疾病的目的。 基因置换:用正常基因通过重组原位替换致病基因 基因失活:有些疾病是由于基因的过度表达引起的,向患者体内导入有抑制基因表达作用的核酸,如干扰小RNA等,可降解相应的mRNA或抑制其翻译,阻断致病基因的异常表达,达到治疗疾病的目的。 基因工程:实现基因克隆所采用的方法及相关的工作,称基因工程, 又称重组DNA。 基因组文库:基因组DNA文库是指生物的基因组DNA的信息(包括所有的编码区和非编码区)以DNA片段形式贮存的克隆群体 基因表达的时间特异性:按功能需要,某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生,称之为基因表达的时间特异性 基因表达的空间特异性:在个体生长全过程,某种基因产物在个体按不同组织空间顺序出现,称之为基因表达的空间特异性。 组成性基因表达:无论表达水平高低,管家基因较少受环境因素影响,而是在个体各个生长阶段的大多数或几乎全部组织中持续表达,或变化很小。区别于其他基因,这类基因表达被视为组成性基因表达。 第二信使:环腺苷酸(cAMP)、环鸟苷酸(cGMP)、甘油二酯(DAG)、三磷酸肌醇(IP3)、磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸(PIP3)、Ca2+等可以作为外源信息在细胞内的信号转导分子,称为细胞内小分子信使,或称为第二信使。 生长因子:通过质膜上特异的受体,将信息传递至细胞内部,调节细胞生长与增殖的多肽类物质。 解链温度:解链过程中,紫外吸光度的变化达到最大变化值的一半时所对应的温度。 转录模板;即以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为转录模板. 转录因子:真核基因的转录调节蛋白又称转录调节因子或转录因子。 转录空泡:是由DNA双链,RNA聚合酶与新合成的RNA局部形成的结构,它贯穿于延长过程的始终。 遗传密码:DNA编码链或mRNA上的核苷酸,以三个为一组(三连体)决定一个氨基酸的种类,称为三联体密码。转录和翻译是连续的,因此遗传密码决定蛋白质的一级结构。 原位杂交:利用核酸分子单链之间互补的碱基系列,将有放射性或非放射性的外源核酸与组织、细胞或染色体上待测的DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。 Southern blot杂交:是研究DNA图谱的基本技术,在遗传诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。Southern印迹杂交的方法是将标本DNA用限制性内切酶消化后,经琼脂糖电泳分离各酶切片段,接着,使酶切片段DNA发生变性并转印到一固相支持物 (通常是硝酸纤维素薄膜或尼龙膜)上,经固定后和标记探针进行杂交。这种方法不仅可以检测DNA样品中是否存在某一特定的基因,而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息。 Northern 印迹(Northern blot):是通过检测RNA的表达水平来检测基因表达,将RNA从凝胶中转印到硝酸纤维素膜上,定性分析mRNA的常用方法. Western blot (蛋白免疫印迹)技术:是将蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶中转印到化学合成膜的支撑物上,利用特异性抗体进行反应,定性分析蛋白质。诱导/阻遏表达:在特定环境信号的刺激下,基因的表达开放或增强 / 关闭或下降的现象。 阻遏蛋白:可识别、结合细菌基因的操纵序列,在转录水平抑制基因表达的蛋白质。 蛋白激酶:能够将γ-磷酸基团从磷酸供体分子上转移至底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。 克隆载体:为使插入的外源DNA序列被扩增而特意设计的载体。 表达载体:为使插入的外源DNA序列可转录翻译成多肽链而特意设计的载体。生物芯片:又称DNA芯片或基因芯片,它们是DNA杂交探针技术与半导体工业技术相结合的结晶。该技术系指将大量探针分子固定于支持物上后与带荧光标记的DNA样品分子进行杂交,通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。 核酸探针:指能识别特异碱基顺序的带有标记的一段单链DNA或RNA分子。 印迹技术:利用各种物理方法使电泳胶中的生物大分子转移到NC等各种膜上,使之成为固相化分子。“blotting”,译为印迹技术。 接合作用:当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,质粒DNA从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(细菌)的DNA转移称为接合作用。 回文结构:在DNA链上,两个拷贝反向串联在一起,中间没有间隔序列。 转基因动物:应用转基因技术培育的携带外源基因并能稳定遗传的动物。 冈崎片段、后随链:在DNA复制过程中,以亲代链(5’→3’)为模板时,子代链的合成不能以3’→5’方向进行,而是按5’→3’方向合成出许多小片段,因为是冈崎等人研究发现,因此称冈崎片段。由许多冈崎片段连接而成的子代链称为后随链。

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